Name: מדידת פעילות פרץ גרנולוציט ו מונוציטים Phagocytosis חמצוני בדם אנושי (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-09-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 29 s
Description: למד למדוד פעילות פגוציטוזה ופרץ חמצוני בגרנולוציטים ומונוציטים בדם אנושי. שיטה זו פשוטה וניתנת להתאמה למחקר בתחום האימונולוגיה ופיזיולוגיית המאמץ.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מבקשים להודות זאק שו, קייסי ג&#39;ון, ולין Cialdella-קם על סיועם במהלך אופטימיזציה של הליך זה.

<ol><li>Nieman, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+pistachios+on+performance+and+exercise-induced+inflammation%2C+oxidative+stress%2C+immune+dysfunction%2C+and+metabolite+shifts+in+cyclists%3A+a+randomized%2C+crossover+trial%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Influence of pistachios on performance and exercise-induced inflammation, oxidative stress, immune dysfunction, and metabolite shifts in cyclists: a randomized, crossover trial.</a> PLoS One. 9, e113725(2014).</li>
<li>Knab, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+a+freeze-dried+juice+blend+powder+on+exercise-induced+inflammation%2C+oxidative+stress%2C+and+immune+function+in+cyclists%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Physiol+Nutr+Metab%22%5BJournal%5D)">Effects of a freeze-dried juice blend powder on exercise-induced inflammation, oxidative stress, and immune function in cyclists.</a> Appl Physiol Nutr Metab. 39, 381-385 (2014).</li>
<li>Konrad, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+acute+effect+of+ingesting+a+quercetin-based+supplement+on+exercise-induced+inflammation+and+immune+changes+in+runners%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Sport+Nutr+Exerc+Metab%22%5BJournal%5D)">The acute effect of ingesting a quercetin-based supplement on exercise-induced inflammation and immune changes in runners.</a> Int J Sport Nutr Exerc Metab. 21, 338-346 (2011).</li>
<li>Nieman, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+and+inflammation+responses+to+a+3-day+period+of+intensified+running+versus+cycling%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Behav+Immun%22%5BJournal%5D)">Immune and inflammation responses to a 3-day period of intensified running versus cycling.</a> Brain Behav Immun. 39, 180-185 (2014).</li>
<li>Nieman, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbohydrate+supplementation+affects+blood+granulocyte+and+monocyte+trafficking+but+not+function+after+2.5+h+of+running%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Clin+Nutr%22%5BJournal%5D)">Carbohydrate supplementation affects blood granulocyte and monocyte trafficking but not function after 2.5 h of running.</a> Am J Clin Nutr. 66, 153-159 (1997).</li>
<li>Tidball, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+cell+response+to+acute+muscle+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Sci+Sports+Exerc%22%5BJournal%5D)">Inflammatory cell response to acute muscle injury.</a> Med Sci Sports Exerc. 27, 1022-1032 (1995).</li>
<li>McFarlin, B. K., Williams, R. R., Venable, A. S., Dwyer, K. C., Haviland, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Image-based+cytometry+reveals+three+distinct+subsets+of+activated+granulocytes+based+on+phagocytosis+and+oxidative+burst%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+A%22%5BJournal%5D)">Image-based cytometry reveals three distinct subsets of activated granulocytes based on phagocytosis and oxidative burst.</a> Cytometry A. 83, 745-751 (2013).</li>
<li>Liao, Y., Liu, P., Guo, F., Zhang, Z. Y., Zhang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxidative+burst+of+circulating+neutrophils+following+traumatic+brain+injury+in+human%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Oxidative burst of circulating neutrophils following traumatic brain injury in human.</a> PLoS One. 8, e68963(2013).</li>
<li>McFarlin, B. K., Venable, A. S., Prado, E. A., Henning, A. L., Williams, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Image-based+flow+cytometry+technique+to+evaluate+changes+in+granulocyte+function+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Image-based flow cytometry technique to evaluate changes in granulocyte function in vitro.</a> J Vis Exp. , (2014).</li>
<li>Nieman, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+response+to+obesity+and+moderate+weight+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Obes+Relat+Metab+Disord%22%5BJournal%5D)">Immune response to obesity and moderate weight loss.</a> Int J Obes Relat Metab Disord. 20, 353-360 (1996).</li>
<li>Nieman, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+function+in+female+elite+rowers+and+non-athletes%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Sports+Med%22%5BJournal%5D)">Immune function in female elite rowers and non-athletes.</a> Br J Sports Med. 34, 181-187 (2000).</li>
<li>Ichii, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Iron+sucrose+impairs+phagocytic+function+and+promotes+apoptosis+in+polymorphonuclear+leukocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Iron sucrose impairs phagocytic function and promotes apoptosis in polymorphonuclear leukocytes.</a> Am J Nephrol. 36, 50-57 (2012).</li>
<li>Gomes, A., Fernandes, E., Lima, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+probes+used+for+detection+of+reactive+oxygen+species%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biochem+Biophys+Methods%22%5BJournal%5D)">Fluorescence probes used for detection of reactive oxygen species.</a> J Biochem Biophys Methods. 65, 45-80 (2005).</li>
<li>Gruger, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Negative+impact+of+linezolid+on+human+neutrophil+functions+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">Negative impact of linezolid on human neutrophil functions in vitro.</a> Chemotherapy. 58, 206-211 (2012).</li>
<li>Dementhon, K., El-Kirat-Chatel, S., Noel, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+in+vitro+model+for+the+multi-parametric+quantification+of+the+cellular+interactions+between+Candida+yeasts+and+phagocytes%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Development of an in vitro model for the multi-parametric quantification of the cellular interactions between Candida yeasts and phagocytes.</a> PLoS One. 7, e32621(2012).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

כתב יד זה מספק פרוטוקול צעד אחר צעד עבור קביעת שני אינדיקטורים של גרנולוציט ותפקוד מונוציטים. זיהינו כמה צעדים חיוניים להצלחת assay זה. צעד אחד כזה הוא הדגירה-באמבט קרח המתרחשת באופן מיידי לפני תוספת של חיידקים. קירור יסודי של כל הדגימות יהיה למזער את השפעת הטמפרטורה על פעילות phagocytosis ו OB. עוד צעד קריטי הוא התוספת של חיידקי מדגם זה. A 8: 1 חיידקים: יחס תָא בַּלעָן מייצר תוצאות אופטימליות; אולם חוקרים אחרים עשויים למצוא כי היחס הזה יצטרך להיות שונה כדי להפיק תוצאות מתאימות. ש...

Phagocytosis גרנולוציט ו מונוציטים / פרץ חמצוני (OB) assay פעילות היא טכניקה פשוטה, ישר קדימה אשר משמש לעתים קרובות כדי לאסוף מידע על תפקוד מערכת החיסון המולדת לאחר פעילות גופנית ממושכת ואינטנסיבית. 1-4 כאשר לומדים את התגובה של המערכת החיסונית גירוי, גרנולוציטים ומונוציטים הם בעלי העניין מיוחד משום שהם ממלאים תפקיד מרכזי בהגנת מארח הם תאי החיסון הראשונים לצבור באתר של זיהום. 5 נויטרופילים, סוג של גרנולוציט, הם התאים הראשונים כדי translocate לתוך שריר ניזוק רקמות לאחר פעילות גופנית אינטנסיבית. 6 Phagocytosis ופעילות OB הם האמצעים הנפוצים ביותר של פונקצית גרנולוציט ו מונוציטים, 7 והם העדיפו כאינדיקטורים תפקוד תא חיסון מולד בגלל תפקידם המרכזי בשניית תהליך ההדבקה ואת תהליך התיקון. Assay המתואר ב utili כתב היד הזהzes זרימה בסיסית cytometer לספק קביעה כמותית של גרנולוציט ו phagocytosis מונוציטים ופעילות OB בדם כולו. השימוש של דם מלא בטכניקה זו יש יתרון משום שהוא מאפשר assay להתנהל ללא הליך טיהור גוזל זמן. assay זה יכול בקלות להיות שונה כדי להתאים מגוון של עיצובי מחקר ויכולות מעבדה. לדוגמה, ליאו et al. מנוצל בטכניקה דומה כדי להראות פעילות OB נויטרופילים הוא גדל phagocytosis נויטרופילים הוא ירד בעקבות פגיעה מוחית טראומטית. 8 בדוגמה נוספת, McFarlin et al. תיאר שינוי אלגנטי של טכניקה זו המשתמשת allophycocyanin (APC ), מצומדות CD66b וסימון CD45 APC מצומדות טנדם בעל ביצועים גבוהים עם cytometry זרימה מבוסס תמונה לסווג גרנולוציטים מבחינת פעילויות phagocytosis ו OB שלהם. 7,9 קבוצת המחקר שלנו השתמשה עיבודים שונים של טה זוchnique כאינדיקטור תפקוד מערכת החיסון המולדת באוכלוסיות משקל יתר, ואתלטי במשך כמעט 20 שנה. 10,11 הטקסט להלן יספק את הקורא עם הוראות צעד-אחר-צעד לביצוע assay זה ולהאיר אזורים שהקורא עשוי להתאים כדי לענות על הצרכים של המחקר שלהם.

<table><tbody><tr><td>צינורות 12 x 75 מ"מ, עם מכסה</td><td>VWR</td><td>20170-579</td><td>תזדקק ל-2 צינורות לכל דגימה ("H" ו-"F") בתוספת 3 צינורות לכל אצווה (לבקרות בדיקה; "F", "H" ו-"דם בלבד").</td></tr><tr><td>PBS (פי 10), pH 7.4</td><td>Life Technologies</td><td>70011-044</td><td></td></tr><tr><td>בקבוק עליון 0.2 ומיקרו; מסנן אצטט תאית M (קיבולת 500 מ"ל)</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>09-741-07&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>גלוקוז, אבקה</td><td>Life Technologies</td><td>15023-021</td><td></td></tr><tr><td>חומצת לימון (נטולת מים, נבדקה בתרבית תאים, נבדקה בתרבית תאי צמחים)</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>C2404-100G</td><td></td></tr><tr><td>נתרן ציטראט טריביסיק דיהידראט</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>S4641-25G</td><td></td></tr><tr><td>דיהידרואתידיום (הידרואתידין) (HE)</td><td>Life Technologies</td><td>D11347</td><td></td></tr><tr><td>דימתיל סולפוקסיד (DMSO)</td><td>טכנולוגיות חיים</td> נטולות מים <td>D12345</td><td></td></tr><tr><td>סטפילוקוקוס זהוב&nbsp;( זן עץ ללא חלבון A) BioParticles, fluorescein conjugate (FITC)</td><td>Life Technologies</td><td>S2851</td><td></td></tr><tr><td>Staphylococcus aureus&nbsp;( זן עץ ללא חלבון A) BioParticles, ללא תווית</td><td>Life Technologies</td><td>S-2859</td><td></td></tr><tr><td>Trypan Blue Solution, 0.4%</td> <td>Life Technologies</td><td>15250-061</td><td></td></tr><tr><td>שואב אבק 4.0 מ"ל המכיל 7.2 מ"ג K2EDTA, VWR מיובש בריסוס</td><td></td><td>BD367861</td><td>תזדקק לצינור איסוף דם 1 K2EDTA לכל דגימה.</td></tr><tr><td>שואב אבק 4.0 מ"ל המכיל 68 יחידות USP ליתיום הפרין, VWR מצופה בריסוס</td><td></td><td>BD367884</td><td>תזדקק לצינור איסוף דם ליתיום הפרין אחד לכל דגימה.</td></tr><tr><td>קולטר Ac&middot; T 5diff CP</td><td>בקמן קולטר</td><td>6605705</td><td>כלומר, מנתח המטולוגיה</td></tr><tr><td>COULTER Ac&middot; T 5diff שטיפה</td><td>בקמן קולטר</td><td>8547167</td><td></td></tr><tr><td>קולטר Ac&middot; T 5diff פיקס</td><td>בקמן קולטר</td><td>8547171</td><td></td></tr><tr><td>קולטר Ac&middot; T 5diff WBC ליז</td><td>בקמן קולטר</td><td>8547170</td><td></td></tr><tr><td>קולטר Ac&middot; T 5diff Hgb Lyse</td><td>Beckman Coulter</td><td>8547168</td><td></td></tr><tr><td>COULTER Ac&middot; כיול T 5diff Cal</td><td>בקמן קולטר</td><td>7547175</td><td></td></tr><tr><td>קולטר Ac&middot; T 5diff קונטרול פלוס</td><td>בקמן קולטר</td><td>7547198</td><td></td></tr><tr><td>AcT 5diff מדלל</td><td>בקמן קולטר</td><td>8547169</td><td></td></tr><tr><td>200 ומיקרו; l קצות פיפטה באורך מורחב</td><td>VWR</td><td>37001-526</td><td></td></tr><tr><td>מחבת קרח מבודדת</td><td>VWR</td><td>89198-980</td><td>לאמבטיית מי קרח.</td></tr><tr><td>מתלה צינור מתכת פתוח</td><td>VWR</td><td>60916-702</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Bovine</td><td>Serum Life Technologies</td><td>26140-111</td><td></td></tr><tr><td>TQ-Prep תחנת עבודה</td><td>בקמן קולטר</td><td>6605429</td><td>כלומר, תחנת עבודה אוטומטית להכנת ליז תאים</td></tr><tr><td>מערכת ריאגנטים ImmunoPrep</td><td>בקמן קולטר</td><td>7546999</td><td>כלומר, מערכת ריאגנטים לתיקון RBC lyse/WBC</td></tr><tr><td>Cytomics FC500 MCL מערכת ציטומטריית זרימה עם תוכנת CXP</td><td>בקמן קולטר</td><td>626553</td><td></td></tr><tr><td>נוזל נדן IsoFlow</td><td>בקמן קולטר</td><td>8547008</td><td></td></tr><tr><td>קולטר קלנץ</td><td>בקמן קולטר</td><td>8546929</td><td></td></tr><tr><td>פלואורוספירות בדיקת זרימה&nbsp;</td><td>בקמן קולטר</td><td>6605359</td><td>i.e., יישור ואימות נוזלים פלואורוספירות</td></tr><tr><td>FlowJo Software</td><td>FlowJo</td><td></td><td>כלומר, תוכנת ניתוח ציטומטריית זרימה</td></tr><tr><td>Excel Software</td><td>Microsoft</td><td>Excel</td><td>i.e., תוכנת גיליון אלקטרוני</td></tr></tbody></table> אלקטרוני

מדידת פעילות פרץ גרנולוציט ו מונוציטים phagocytosis חמצוני בדם אנושי

Measuring Granulocyte and Monocyte Phagocytosis and Oxidative Burst Activity in Human Blood

ניתן להשתמש בבדיקת הגרנולוציטים והמונוציטים פגוציטוזיס ופעילות פרץ חמצוני (OB) כדי לחקור את מערכת החיסון המולדת. כתב יד זה מספק את המתודולוגיה הדרושה כדי להוסיף בדיקה זו לארסנל אימונולוגיה של פעילות גופנית. השלב הראשון בבדיקה זו הוא הכנת שני אליקוטים ("H" ו-"F") של דם מלא (הפרין). לאחר מכן, דיהידרואתידיום מתווסף ל-H aliquot, ושני האליקוטים מודגרים באמבט מים חמים ואחריו אמבט מים קרים. לאחר מכן, Staphylococcus aureus (S. aureus) מתווסף ל-H aliquot ו-S. aureus שכותרתו פלואורסצאין איזותיוציאנט מתווסף ל-F aliquot (חיידקים: פגוציטים = 8:1), ושני האליקוטים מודגרים באמבט מים חמים ואחריו אמבט מים קרים. לאחר מכן, טריפן כחול מתווסף לכל אליקוט כדי להרוות את הקרינה החוץ-תאית, והתאים נשטפים במי מלח עם פוספט. לאחר מכן, תאי הדם האדומים עוברים ליזה, ותאי הדם הלבנים מקובעים. לבסוף, ציטומטר זרימה ותוכנת ניתוח מתאימה משמשים למדידת פגוציטוזיס גרנולוציטים ומונוציטים ופעילות OB. בדיקה זו נמצאת בשימוש כבר למעלה מ-20 שנה. לאחר מאמץ כבד וממושך, ספורטאים חווים עלייה משמעותית אך חולפת בפגוציטוזיס וירידה ממושכת בפעילות OB. העלייה בפגוציטוזיס לאחר פעילות גופנית קשורה לדלקת. בניגוד לאנשים במשקל תקין, פגוציטוזיס גרנולוציטים ומונוציטים מוגברת באופן כרוני אצל משתתפים הסובלים מעודף משקל והשמנת יתר, ונמצאת בקורלציה צנועה עם חלבון מגיב C. לסיכום, בדיקה זו המבוססת על ציטומטריית זרימה מודדת את פעילות הפגוציטוזיס וה-OB של פגוציטים ויכולה לשמש כמדד נוסף לדלקת הנגרמת על ידי פעילות גופנית והשמנת יתר.

יש תרגיל ממושך ואינטנסיבי השפעה עמוקה על תפקוד מערכת חיסון מולד, כולל תפקוד תא רוצח טבעי, בתגובה בתיווך ציטוקינים מקרופאג זיהום ויראלי, ו גרנולוציט ו phagocytosis מונוציטים ופעילות OB. מחקרים רבים מצביעים על כך מגביר phagocytosis גרנולוציט ו מונוציטים משמעותי שלאחר אימון, המשקף את הדלקת הנגרמת על ידי ניזק לשרירי דרישות מטבוליות. לעומת זאת, גרנולוציט ופעילות מונוציטים OB פוחתת שלאחר אימון ועלול להיות אינדיקטור אחד חיסוני של רגישות מוגברת לזיהום. לדו...

מטרת כתב היד הזה היא להציג שיטה למדידת פגוציטוזיס מונוציטים וגרנולוציטים ופעילות פרץ חמצוני בדגימות דם אנושיות.

מדידת פעילות פרץ גרנולוציט ו מונוציטים Phagocytosis חמצוני בדם אנושי

The granulocyte and monocyte phagocytosis and oxidative burst (OB) activity assay can be used to study the innate immune system. This manuscript provides ...

המטרה הכללית של בדיקה זו היא למדוד פגוציטוזה ופעילות של פרץ חמצוני (oxidative burst) של גרנולוציטים ומונוציטים בדם מלא. שיטה זו יכולה לסייע במתן תשובות לשאלות מפתח בתחום האימונולוגיה, כגון כיצד התערבות תזונתית מסוימת משפיעה על התגובה החיסונית לפעילות גופנית. היתרון המרכזי של טכניקה זו הוא שמדובר בבדיקה פשוטה וישירה שניתן להתאימה בקלות למשאבי המעבדה הזמינים ולהאינטרסים המחקריים.השתמשנו במדד זה לתפקוד החסינות המולדת במהלך שני העשורים האחרונים ברבים מהניסויים שלנו בפעילות גופנית, ונשתף חלק מהנתונים הללו בהמשך הסרטון. לפני תחילת הפרוצדורה, השתמשו במנתח המטולוגי לביצוע ספירה מלאה של תאי דם (CBC) עם ניתוח דיפרנציאלי של תאי דם לבנים בדגימות הדם, בהתאם להוראות היצרן. רשמו את ספירת תאי הדם הלבנים בתאים למילליליטר ואת אחוזי הנויטרופילים והמונוציטים עבור הדגימות.לאחר מכן, עבור כל מבחנה ניסויית ומבחנת ביקורת, השתמשו בטיפ פיפטה ארוך כדי להעביר 100 microliters מכל דגימת דם מלא ממבחנת איסוף הדם עם ליתיום הפרין לתחתית של מבחנה בנפח 12 על 75 millimeter המסומנת באופן מתאים. לאחר העברת כל הדם, הוסיפו 10 microliters של תמיסת העבודה HE למבחנות המסומנות בדיו אדום ובאות H, כולל מבחנת הביקורת של ה-HE. הסירו את הפקקים מהמבחנות.ערבבו את הדגימות קצרות במיקסר Vortex, והעבירו את המבחנות לאמבט מים בטמפרטורה של

measuring-granulocyte-monocyte-phagocytosis-oxidative-burst-activity

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

סרטון זה מדגים שיטה לכימות הפאגוציטוזה של נבגי פטריות פתוגניים המסומנים בתווית FITC על ידי לויקוציטים אנושיים. נבגים פגוציטוזים מובחנים מנבגים הנצמדים לתאים באמצעות צביעה נגדית, ולאחר מכן ניתוח ציטומטרי של זרימה.

מדידה ציטומטרית של זרימה כמותית של פגוציטוזה של נבגים פטרייתיים על ידי פגוציטים אנושיים

סרטון זה מדגים את הבדיקה כדי לאשר פעילות פגוציטית על ידי תאים בדם אנושי באמצעות ציטומטריית זרימה. הגרנולוציטים והמונוציטים מאשרים את פעילותם הפאגוציטית על ידי הצגת פלואורסצנטיות ירוקה ואדומה, המאשרת את נוכחותם של חיידקים שנבלעו ופעילות התפרצות חמצונית בהתאמה.

בדיקה להערכת פגוציטוזה ופעילות פרץ חמצוני בגרנולוציטים ומונוציטים

סרטון זה מציג בדיקת מונוציטים חד-שכבתית המשתמשת במונוציטים ראשוניים מדם היקפי כדי להעריך פגוציטוזה בתיווך קולטן Fcγ עם תאי דם אדומים מסוג פולי D נגד נוגדנים R2R2.

בדיקה לחקר פגוציטוזה מונעת קולטן Fcγ במונוציטים מונושכבות

מקרופאגים הנגזרות מונוציטים הם תאים חשובים של מערכת החיסון המולדת. כאן, אנו מתארים קלים...

<em&gt; במבחנה</em&gt; מודל ללמוד ההטרוגניות של בידול Macrophage אדם וקיטוב

כדוריות דם לבנות וטסיות דם יכולים לשמש כסמן לבריאות bioenergetic הכללי של אדם ולכן יש לו את הפוטנציאל לפקח על תהליכים פתולוגיים ואת ההשפעה של טיפולים. כאן אנו מתארים שיטה לבודד ולמדוד את תפקוד המיטוכונדריה ופרץ חמצוני בתאים אלה.

Bioenergetics וחמצוני פרץ: הפרוטוקולים לבידוד ולהערכה של לויקוציטים אדם וטסיות הדם

שיטה זו מדגימה טכניקה להערכת תפקוד גרנולוציטים על ידי מדידה בו-זמנית של פגוציטוזיס של חיידקים והתפרצות חמצונית. ציטומטריית זרימה מבוססת תמונה אפשרה זיהוי של שלוש תת-קבוצות נפרדות של גרנולוציטים מופעלים שכולן נבדלות ביכולתן התפקודית היחסית.

טכניקת cytometry הזרימה מבוססת תמונה כדי להעריך את השינויים בפונקצית granulocyte במבחנה

בדיקת המונוציטים החד-שכבתית (MMA) היא בדיקה במבחנה המשתמשת במונוציטים ראשוניים מבודדים המתקבלים מדם מלא היקפי של יונקים כדי להעריך פגוציטוזיס בתיווך קולטן Fcγ (FcγR).

שימוש Assay מונוציטים חד שכבתי להערכת Fcγ קולטן בתיווך Phagocytosis

כאן נתאר שיטות באמצעות דיסק מסתובב קונפוקלית לאירועים phagocytic יחיד תמונה על-ידי מקרופאגים הצפק תושב העכבר. ניתן להאריך את הפרוטוקולים לתאים אחרים phagocytic.

זמן לשגות הדמיה תלת-ממדית של Phagocytosis על ידי העכבר מקרופאגים

המופילוס אינפלואנזה משרה דלקת בדרכי הנשימה. מאמר זה יתמקד בשימוש בציטומטריה של זרימה ובמיקרוסקופיה קונפוקלית כדי להגדיר תגובות חיסוניות של פאגוציטים ולימפוציטים בתגובה לחיידק זה.

הערכת תגובות חיסוניות נשימתיות לשפעת המופילוס

פיתחנו שיפורים ושיטות מעודכנות לבדיקת מונוציטים-חד-שכבתיים (MMA) הקיימת, שבה נעשה שימוש במקרופאגים כדי לעזור לחזות טוב יותר את הרלוונטיות הקלינית של נוגדנים של כדוריות אדומות ברפואת עירוי ואימונולוגיה. בדיקה זו נקראת בדיקת מונוציטים-מקרופאגים (M-MA).

חיזוי מובהקות נוגדנים של כדוריות דם אדומות באמצעות בדיקת מונוציטים-מקרופאגים

עבודה זו מתארת פרוטוקול מתוקנן במבחנה לכימות והשוואה של שיעורי הפגוציטוזיס של תאי דם אדומים קסנוגניים (אנושיים) ואלוגניים (חולדות) על ידי מקרופאגים מבודדים של חולדות.

הערכה כמותית של פגוציטוזיס של אריתרוציטים אלוגניים וקסנוגניים על ידי מקרופאגים של חולדות במבחנה

למד למדוד פעילות פגוציטוזה ופרץ חמצוני בגרנולוציטים ומונוציטים בדם אנושי. שיטה זו פשוטה וניתנת להתאמה למחקר בתחום האימונולוגיה ופיזיולוגיית המאמץ.

מדידת פעילות פרץ גרנולוציט ו מונוציטים Phagocytosis חמצוני בדם אנושי

גלה סרטונים נוספים