Name: הכנת חלון גולגולת כרוני לרוחב מאפשרת In vivo תצפית בעקבות העורקים התיכון ספיגה מוחין דיסטלי של עכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-12-29T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 41 s
Description: למד הכנת חלון גולגולת צדדי לצורך חסימת עורק מוח תיכון קבועה בעכברים. שיטה זו מאפשרת מיקרוסקופיה אינטראוויטלית לאורך זמן ומעקב אחר שינויים איסכמיים חריפים וכרוניים לאחר שבץ.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

VP הוא משתתף בתוכנית Charité Clinical Scientist Program, הממומנת על ידי Charité - Universitätsmedizin Berlin ומכון הבריאות של ברלין. TB הוא עמית SNSF PostDoc Mobility. המחברים מקבלים תמיכה במענק מקרן איינשטיין/A-2012-153 ל-PV.

המסר אתיקה: ניסויים מעורבים בנושאים בעלי חיים בוצעו בהתאם להנחיות והתקנות שנקבעו על ידי Landesamt fuer Gesundheit und Soziales, ברלין, גרמניה (G0298 / 13) ואת הקריטריונים מגיעים, לפי העניין. לצורך המחקר, 10 עד 12 שבועות בן זכר C57Bl / 6J שימשו. 1. הכנת חלון גולגולתי כרוני Lateral <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע הרדמה עם זריקה תת עורית של קטמין (90 מ&quot;ג / ק&quot;ג) ו xylazine (10 מ&quot;ג / ק&quot;ג). מבחן להרגעה נאותה עם גירוי כאב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעקר את מכשירי ניתוח שדה הניתוח עם 70% אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסרת שיער הקרקפת מהצוואר אל העיניים בעזרת מכונת גילוח מכרסמת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תקן את הראש בתוך מסגרת stereotactic. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש dexpanthenol משחה על שתי העיניים כדי למנוע התייבשות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקה את אזור הניתוח כדי להסיר את כל השערות לעקר אותו עם 3 שכבות של אתנול 74.1% ו -10%-propanolol 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע קו אמצעחתך מהצוואר אל העיניים בעזרת אזמל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> SPAN דש העור עם 4 תפרים האהלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את periosteum בזהירות על האונה השמאלית על ידי גירוד אותו עם אזמל עד לנקודה שבה השריר הזמני מתחיל. הערה: הכנה זו משמשת גם כדי ליצור אזור הידבקות טוב עבור דבק השיניים, אשר פותר את מכסה הזכוכית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע craniotomy fronto-הקודקודית בקוטר של 4 מ&quot;מ על ידי דליל הגולגולת בשולי דש העצם באמצעות microdrill. החל תמיסת מלח תוך כדי קידוח כדי למנוע פגיעה חומה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגבהה של דש העצם עם קנולה ולהסירו באמצעות microforceps. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשקות בזהירות בהרחבה עם תמיסת מלח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערבב את דבק השיניים עד שהוא בעל הצמיגות הראויה שאינו נוזל (כלומר, הדבק לא צריך לייצר אשכולות יותר). מניחים אותו על העצם סביב פתיחת הגולגולת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים כוס כיסוי בקוטר 6 מ&quot;מ על הדבק מוכן לתקן את זה עם השאר הדואר של דבק שיניים. הקפד שזה אטום למים. מתן עד הדבק הוא מיובש וקשה ידי בדיקתו באמצעות מלקחיים. הערה: השקיה נוספת מאיצה את תהליך הריפוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את תפרי ההאהלה ולסגור את הפצע עם תפרי עור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משוך את העור של האגף של העכבר. כנס מתחת לעור מחט בעדינות להחליף 0.5 מיליליטר של תת-עורית מלח סטרילית עבור מאזן נוזלים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר ניתוח, לשמור על בעלי החיים בכלוב ההתאוששות המחומם במשך 90 דקות. מתן עד החיות הן ערות לחלוטין לפני שעזבת אותם ללא השגחה. חכה עד החיות הם התאוששו לחלוטין לפני החזרה אותם לכלוב עם בעלי חיים אחרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על החלפת הנפח מלוח תת עורית לאחר כ 12 שעות, כפי שמתוארת בשלב 1.16. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תמיד להחיל שיכוך כאבים באמצעות gavage או ישירות לחלל הפה לאחר ניתוח (למשל, אקמול (10 מ&quot;ג / מ&quot;ל) או תרופות נוגדות דלקת לא סטרואידיות אחרות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את ה<html> מצבו של חיות בכל יום לאחר הניתוח, ותמיד מספק מחית מזון מן החי על הרצפה פטרי צלחת כדי לאכול פשוט כדי למנוע אובדן משקל קריטי לאחר ניתוח. הערה: מיקרוסקופיה Intravital יכולה להתבצע ביום הראשון לאחר הכנת חלון גולגולתי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל הרדמת isoflurane ולתקן את החיה בעל ראש. פתח תפר העור ולנקות את החלון עם ניצני כותנת מלח סטרילית. לאחר 24 שעות, חלון גולגולתי צריך להיות מלא עם הנוזל השדרתי ידי כי נקודת זמן, המאפשרת הדמיה. בצע הדמיה באמצעות פרוטוקולי מיקרוסקופיה הוקמו 18. </li></ol> 2. דיסטלי MCAo הערה: הליך MCAo צריכה להתבצע כ -5 ד לאחר הכנת CW. זה ממזער הפרעה מן התגובה החיסונית הנגרמת על ידי הכנה CW עם התגובה החיסונית כתוצאה משבץ מוחי. &quot;Src =&quot; / files / ftp_upload / 54,701 / 54701fig1.jpg &quot;/&gt; באיור 1. סקירה כללית של דיסטלי MCAo. א זהו סקירה יפה על הכלי לפני op. .ב כלי לאחר מגע דו קוטבי הראשון. ג כלי לאחר מגע דו קוטבי שני. ד הסקירה על הכלי, אשר סגורים לחלוטין עכשיו. א סוף סקירה עם בהגדלה נמוכה. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54701/54701fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטשטש את העכברים באמצעות מסיכת הרדמה משטר הרדמה המתאים, בהתייעצות עם צוות וטרינרי (למשל, אינדוקציה עם 1.5 - isoflurane ותחזוקה 2% עם 1.0 - isoflurane 1.5% ב 2/3 N 2 O ו 1/3 O 2 דרך מאדה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח ולהסיר את השיער ולחטא את העור ופרווה שמסביב עם סוכן מתאים (למשל, 70% כוהל אתילי), ולייבש אותו לאחר מכן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמירה על טמפרטורת הגוף של עכברים ב 36.5 ° C ± 0.5 מעלות צלזיוס במהלך הניתוח. כרית חימום מבוקר משוב, מחומם על פי טמפרטורה רקטלית של העכבר, מומלץ מאוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את החיה במצב לרוחב. תקן את האף במסכת הרדמה ולהתאים את ריכוז isoflurane ל -1.0 - 1.5%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל משחה רטובה (dexpanthenol) לשתי העיניים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש החתך בעור עשה לעריכת CW. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות להפריד את העור ולזהות את השריר הזמני מתחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם את האנרגיה של הגנרטור תדירות גבוהה (5 - 7 W) ולהשתמש במצב דו קוטבית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש מלקחי electrocoagulation ובזהירות להסיר את השריר הזמני מהגולגולת, יצירת דש שרירים, בלי לחלוטין הסרת השריר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהה את MCA מתחת הגולגולת השקופה בחלק המקורי של האזור הזמני, גב אל-Orbita רטרוסינוס l. אם הסתעפות MCA לא ניתן לזהות, לנסות לזהות את הכלי המקורי ביותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגולגולת דק מעל הסניף MCA עם microdrill תוך להשקיית ברציפות, כדי למנוע נזק חום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרם את העצם עם קנולה ולהסיר אותו עם microforceps. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקטין את האנרגיה של הגנרטור בתדירות גבוהה 3 - 5 W. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מתקרב העורק מלמעלה בעדינות לגעת בו עם המלקחיים דו קוטביים משני הצדדים מבלי להרים את כלי השיט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקריש העורק proximally ו distally אל הסתעפות כלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המתן 30 שניות, ולאחר מכן גע העורק בעדינות על מנת להבטיח כי זרימת הדם מופרעת לצמיתות. חזור על electrocoagulation אם recanalization הוא ציין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תקן את השריר הזמני עם 1 או 2 תפרים בבית הכנסת השריר לכיסוי פגם העצם, אם אפשר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לתפור את הפצע והמקום חי לתוך תיבת ההתאוששות המחוממת. באופן כללי, התאוששות חיות במהירות לאחר anest נדיפיםhesia. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להחלפת נפח, להחיל 0.5 מ&quot;ל של תמיסת מלח סטרילית מתחת לעור, כמתואר בשלב 1.16. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר ניתוח, לאפשר החיות להישאר בכלוב ההתאוששות המחומם במשך 90 דקות. חכה עד החיות מודעות לפני שעזבת אותם ללא השגחה. רק להחזיר אותם בכלוב עם בעלי חיים אחרים כאשר הם התאוששו לחלוטין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על החלפת הנפח, כמוסבר בשלב 1.16, לאחר 12 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל שיכוך כאבים לאחר הניתוח באמצעות מי השתייה (למשל, אקמול (10 מ&quot;ג / מ&quot;ל) או תרופות נוגדות דלקת לא סטרואידיות אחרות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את מצבו הרפואי של חיות בכל יום לאחר הניתוח. לספק מזון מן החי מחית בתוך צלחת פטרי על הרצפה כדי לפשט אכילה כדי להקטין את איבוד משקל לאחר ניתוח. </li></ol> 3. טיפול Sham <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע את כל הנהלים באופן זהה שלבים 1 ו -2, כמתואר לעיל, כולל CW הכנה-רק שאין להקריש את ar המוח האמצעי חשוףמצבר. </li></ol>

<ol><li>Mukherjee, D., Patil, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+and+the+global+burden+of+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22World+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Epidemiology and the global burden of stroke.</a> World Neurosurg. 76 (6), Suppl 85-90 (2011).</li>
<li>Ebinger, M., Prüss, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+the+use+of+ambulance-based+thrombolysis+on+time+to+thrombolysis+in+acute+ischemic+stroke%3A+a+randomized+clinical+trial%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Effect of the use of ambulance-based thrombolysis on time to thrombolysis in acute ischemic stroke: a randomized clinical trial.</a> JAMA. 311 (16), 1622-1631 (2014).</li>
<li>Ebinger, M., Lindenlaub, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prehospital+thrombolysis%3A+a+manual+from+Berlin%5BTitle%5D)+AND+%22J+vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Prehospital thrombolysis: a manual from Berlin.</a> J vis Exp. (81), e50534(2013).</li>
<li>Bogousslavsky, J., Van Melle, G., Regli, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Lausanne+Stroke+Registry%3A+analysis+of+1%2C000+consecutive+patients+with+first+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">The Lausanne Stroke Registry: analysis of 1,000 consecutive patients with first stroke.</a> Stroke. 19 (9), 1083-1092 (1988).</li>
<li>Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+stroke+in+mice+-+middle+cerebral+artery+occlusion+with+the+filament+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Modeling stroke in mice - middle cerebral artery occlusion with the filament model.</a> J Vis Exp. (47), (2011).</li>
<li>Donnan, G. A., Fisher, M., Macleod, M., Davis, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Stroke.</a> Lancet. 371 (9624), 1612-1623 (2008).</li>
<li>Meairs, S., Wahlgren, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stroke+research+priorities+for+the+next+decade--A+representative+view+of+the+European+scientific+community%5BTitle%5D)+AND+%22Cerebrovasc+Dis%22%5BJournal%5D)">Stroke research priorities for the next decade--A representative view of the European scientific community.</a> Cerebrovasc Dis. 22 (2-3), 75-82 (2006).</li>
<li>Rosamond, W., Flegal, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics--2007+update%3A+a+report+from+the+American+Heart+Association+Statistics+Committee+and+Stroke+Statistics+Subcommittee%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics--2007 update: a report from the American Heart Association Statistics Committee and Stroke Statistics Subcommittee.</a> Circulation. 115 (5), 69-171 (2007).</li>
<li>Moskowitz, M. A., Lo, E. H., Iadecola, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+science+of+stroke%3A+mechanisms+in+search+of+treatments%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">The science of stroke: mechanisms in search of treatments.</a> Neuron. 67 (2), 181-198 (2010).</li>
<li>Dirnagl, U., Iadecola, C., Moskowitz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathobiology+of+ischaemic+stroke%3A+an+integrated+view%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Pathobiology of ischaemic stroke: an integrated view.</a> Trends Neurosci. 22 (9), 391-397 (1999).</li>
<li>Dirnagl, U., Endres, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Found+in+Translation%3A+Preclinical+Stroke+Research+Predicts+Human+Pathophysiology%2C+Clinical+Phenotypes%2C+and+Therapeutic+Outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Found in Translation: Preclinical Stroke Research Predicts Human Pathophysiology, Clinical Phenotypes, and Therapeutic Outcomes.</a> Stroke. , (2014).</li>
<li>Prinz, V., Hetzer, A. -M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MRI+heralds+secondary+nigral+lesion+after+brain+ischemia+in+mice%3A+a+secondary+time+window+for+neuroprotection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">MRI heralds secondary nigral lesion after brain ischemia in mice: a secondary time window for neuroprotection.</a> J Cereb Blood Flow Metab. , (2015).</li>
<li>Shih, A. Y., Mateo, C., Drew, P. J., Tsai, P. S., Kleinfeld, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+polished+and+reinforced+thinned-skull+window+for+long-term+imaging+of+the+mouse+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A polished and reinforced thinned-skull window for long-term imaging of the mouse brain.</a> J Vis Exp. (61), (2012).</li>
<li>Holtmaat, A., Bonhoeffer, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term%2C+high-resolution+imaging+in+the+mouse+neocortex+through+a+chronic+cranial+window%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Long-term, high-resolution imaging in the mouse neocortex through a chronic cranial window.</a> Nat Protoc. 4 (8), 1128-1144 (2009).</li>
<li>Iadecola, C., Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+microcircualtion--fantastic+voyage%3A+introduction%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">The microcircualtion--fantastic voyage: introduction.</a> Stroke. 44 (6), Suppl 1 83(2013).</li>
<li>Blinder, P., Tsai, P. S., Kaufhold, J. P., Knutsen, P. M., Suhl, H., Kleinfeld, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cortical+angiome%3A+an+interconnected+vascular+network+with+noncolumnar+patterns+of+blood+flow%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosc%22%5BJournal%5D)">The cortical angiome: an interconnected vascular network with noncolumnar patterns of blood flow.</a> Nat Neurosc. 16 (7), 889-897 (2013).</li>
<li>Shih, A. Y., Driscoll, J. D., Drew, P. J., Nishimura, N., Schaffer, C. B., Kleinfeld, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-photon+microscopy+as+a+tool+to+study+blood+flow+and+neurovascular+coupling+in+the+rodent+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Two-photon microscopy as a tool to study blood flow and neurovascular coupling in the rodent brain.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 32 (7), 1277-1309 (2012).</li>
<li>Cabrales, P., Carvalho, L. J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravital+microscopy+of+the+mouse+brain+microcirculation+using+a+closed+cranial+window%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Intravital microscopy of the mouse brain microcirculation using a closed cranial window.</a> J Vis Exp. (45), (2010).</li>
<li>Rosell, A., Agin, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distal+occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+mice%3A+are+we+ready+to+assess+long-term+functional+outcome%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Stroke+Res%22%5BJournal%5D)">Distal occlusion of the middle cerebral artery in mice: are we ready to assess long-term functional outcome.</a> Transl Stroke Res. 4 (3), 297-307 (2013).</li>
<li>Dorand, R. D., Barkauskas, D. S., Evans, T. A., Petrosiute, A., Huang, A. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+intravital+thinned+skull+and+cranial+window+approaches+to+study+CNS+immunobiology+in+the+mouse+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Intravital%22%5BJournal%5D)">Comparison of intravital thinned skull and cranial window approaches to study CNS immunobiology in the mouse cortex.</a> Intravital. 3 (2), (2014).</li>
<li>Balkaya, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+post-stroke+behavior+in+mouse+models+of+focal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Assessing post-stroke behavior in mouse models of focal ischemia.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 33 (3), 330-338 (2013).</li>
<li>Balkaya, M., Kröber, J., Gertz, K., Peruzzaro, S., Endres, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+long-term+functional+outcome+in+a+murine+model+of+mild+brain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Characterization of long-term functional outcome in a murine model of mild brain ischemia.</a> J Neurosci Methods. 213 (2), 179-187 (2013).</li>
<li>Freret, T., Bouet, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+deficits+after+distal+focal+cerebral+ischemia+in+mice%3A+Usefulness+of+adhesive+removal+test%5BTitle%5D)+AND+%22Beh+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Behavioral deficits after distal focal cerebral ischemia in mice: Usefulness of adhesive removal test.</a> Beh Neurosci. 123 (1), 224-230 (2009).</li>
<li>Liu, S., Zhen, G., Meloni, B. P., Campbell, K., Winn, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RODENT+STROKE+MODEL+GUIDELINES+FOR+PRECLINICAL+STROKE+TRIALS+%281ST+EDITION%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Stroke+Trans+Med%22%5BJournal%5D)">RODENT STROKE MODEL GUIDELINES FOR PRECLINICAL STROKE TRIALS (1ST EDITION).</a> J Exp Stroke Trans Med. 2 (2), 2-27 (2009).</li>
<li>Florian, B., Vintilescu, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+hypothermia+reduces+infarct+volume+in+aged+rats+after+focal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Long-term hypothermia reduces infarct volume in aged rats after focal ischemia.</a> Neurosci Lett. 438 (2), 180-185 (2008).</li>
<li>Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+hyperthermia+on+infarct+volume+in+focal+embolic+model+of+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Effects of hyperthermia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats.</a> Neurosci Lett. 349 (2), 130-132 (2003).</li>
<li>Barber, P. A., Hoyte, L., Colbourne, F., Buchan, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature-regulated+model+of+focal+ischemia+in+the+mouse%3A+a+study+with+histopathological+and+behavioral+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Temperature-regulated model of focal ischemia in the mouse: a study with histopathological and behavioral outcomes.</a> Stroke. 35 (7), 1720-1725 (2004).</li>
<li>Shin, H. K., Nishimura, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mild+induced+hypertension+improves+blood+flow+and+oxygen+metabolism+in+transient+focal+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Mild induced hypertension improves blood flow and oxygen metabolism in transient focal cerebral ischemia.</a> Stroke. 39 (5), 1548-1555 (2008).</li>
<li>Kapinya, K. J., Prass, K., Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isoflurane+induced+prolonged+protection+against+cerebral+ischemia+in+mice%3A+a+redox+sensitive+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Isoflurane induced prolonged protection against cerebral ischemia in mice: a redox sensitive mechanism.</a> Neuroreport. 13 (11), 1431-1435 (2002).</li>
<li>Gertz, K., Priller, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physical+activity+improves+long-term+stroke+outcome+via+endothelial+nitric+oxide+synthase-dependent+augmentation+of+neovascularization+and+cerebral+blood+flow%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Physical activity improves long-term stroke outcome via endothelial nitric oxide synthase-dependent augmentation of neovascularization and cerebral blood flow.</a> Circ Res. 99 (10), 1132-1140 (2006).</li>
<li>Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bench+to+bedside%3A+the+quest+for+quality+in+experimental+stroke+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Bench to bedside: the quest for quality in experimental stroke research.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 26 (12), 1465-1478 (2006).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

שבץ מוחי הוא בין הגורמים העיקריים נכות לטווח ארוך ומוות ברחבי העולם 1. מעבר לטיפול אקוטי, חוקרת גישות מנגנונים חדשים כדי להאיץ ולשפר את ההתאוששות לאחר שבץ נשאר מטרה 7 רפואי הממשלה. חוקרי שבץ ניסיוני להעסיק מכרסמי מודלים בתדירות של איסכמיה המוחית מוקדים. למעשה, מודלי התרמה חולפת או קבועה MCAo לחקות אחד הסוגים הנפוצים ביותר של איסכמיה המוחית מוקדים בחולי 4. מלבד חסימה הפרוקסימלי של MCA, מודל הנימה עבור חסימה כירורגית של MCAo דיסטלי הוא כנראה המודל הש...

שבץ מוחי הוא בין הגורמים העיקריים לנכות ארוכת טווח ומוות ברחבי העולם1, ומגיע למקום השני אחרי מחלת לב כלילית. בנוסף, שבץ מוחי הוא הגורם העיקרי לנכות ארוכת טווח, מה שמדגיש את ההשפעה הסוציו-אקונומית העצומה שלו6-8. מעבר לטיפול אקוטי, חקירת גישות ומנגנונים חדשים להאצת ושיפור ההחלמה לאחר שבץ מוחי נותרה מטרה רפואית ראשונה במעלה7. 
בעשורים האחרונים, נתונים ממחקר שבץ ניסיוני תרמו באופן משמעותי להבנת המפלים הפתופיזיולוגיים המורכבים המופעלים על ידי איסכמיה9,10. אקסיטוטוקסיות, אפופטוזיס, דה-פולריזציה סביב האוטם ודלקת זוהו כמתווכים הרלוונטיים ביותר למוות תאים בעקבות איסכמיה מוחית מוקדית. יתר על כן, באמצעות מודלים של בעלי חיים של איסכמיה מוחית, פותחו ותוקפו מושגים חשובים, שיטות אבחון וגישות טיפוליות (למשל, "פנומברה" וטרומבוליזה)11.
הזמינות של מודלים ניסיוניים של שבץ מוחי, בשילוב עם שיטות הדמיה לא פולשניות (למשל, הדמיית תהודה מגנטית (MRI), טומוגרפיה ממוחשבת או ניתוח ניגודיות כתמי לייזר), מאפשרת לחוקר לחקור שינויים פתופיזיולוגיים היפר-חריפים וכרוניים הנגרמים על ידי העלבון האיסכמי בצורה אורכית12. יחד עם חקר הפרופיל המרחבי-זמני של הנגע המתפתח, ניתן לחקור שינויים הדומים לפלסטיות עצבית ולתאם אותם לתוצאות תפקודיות ולממצאים היסטולוגיים. במהלך השנים האחרונות, התקדמות מתודולוגית נוספת נעשתה באמצעות שילוב של מודלים של איסכמיה מוחית ומיקרוסקופיה in vivo באמצעות חלונות גולגולת13. טכניקות חדשות אלה מאפשרות לחוקרים לנתח את היחידה הנוירו-וסקולרית ברמה התאית והמולקולרית, עם כוח אנליטי רב בשלבים האקוטיים, התת-חריפים והכרוניים לאחר איסכמיה מוחית מוקדית14. יתר על כן, הדמיית מיקרוסקופיה in vivo של דינמיקה מיקרו-סירקולטורית חשפה היבטים חדשים של תפקוד מיקרו-כלי דם במוח ואנגיו-ארכיטקטורה, עם רלוונטיות פתופיזיולוגית משמעותית15-17. 
בפרוטוקול זה, אנו מציגים כיצד לבצע תכשיר CW כרוני לרוחב הסינוס הסגיטלי וכיצד לגרום בניתוח לשבץ דיסטלי מתחת לחלון. ניתן ליישם מודל עכבר זה להדמיה רציפה של שינויים חריפים, תת-חריפים וכרוניים בעקבות איסכמיה מוחית מוקדית באמצעות סריקת לייזר אפי-מאירה, קונפוקלית ומיקרוסקופיה תוך-חיונית דו-פוטונית.

<table><tbody><tr><td>מיקרוסקופ כירורגי דו-עיני</td><td>Zeiss</td><td>Stemi 2000 C</td><td></td></tr><tr><td>מקור אור למיקרוסקופ</td><td>Zeiss</td><td>CL 6000 כרית חימום LED</td><td></td></tr><tr><td>עם בדיקה רקטלית</td><td>FST</td><td>21061-10</td><td></td></tr><tr><td>מסגרת סטריאוטקטית</td><td>Kopf</td><td>דגם 930</td><td></td></tr><tr><td>מערכת אנאתזיה לאיזופלורן</td><td>Draeger</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>מלקחיים של Abott</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5</td><td>FST</td><td>11251-10</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים של דומונט #7</td><td>FST</td><td>11271-30</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים דו קוטביים</td><td></td><td>Erbe 20195-501</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים דו קוטביים&nbsp;</td><td>ארבה&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 20195-022</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מיקרו-מקדחה</td><td>FST&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 18000-17&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מחט</td><td>FST</td><td>12010-14</td><td></td></tr><tr><td>5-0 תפר משי</td><td>Feuerstein, Suprama</td><td></td><td></td></tr><tr><td>7-0 תפר משי</td><td>Feuerstein, Suprama</td><td></td><td></td></tr><tr><td>8-0 תפר משי</td><td>Feuerstein,</td> תא התאוששות וטרינרי Suprama <td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>Peco Services</td><td>V1200</td><td></td></tr></tbody></table>

הכנת חלון גולגולת כרוני לרוחב מאפשרת in vivo תצפית בעקבות העורקים התיכון ספיגה מוחין דיסטלי של עכברים

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

איסכמיה מוחיית מיקוד (כלומר, שבץ איסכמי) עלולה לגרום לפגיעה מוחית חמורה, מה שמוביל להפסד ניכר של תפקוד עצבי וכתוצאה מכך שורה של מנוע מוגבלויות קוגניטיביות. שכיחות גבוהה שלה מהווה נטל בריאותי חמור, כמו שבץ הוא בין הגורמים העיקריים נכות לטווח ארוך ומוות ברחבי העולם 1. שחזור של תפקוד עצבי הוא, ברוב המקרים, רק חלקית. עד כה, אפשרויות טיפול מוגבלות מאוד, בפרט בשל חלון זמן צר thrombolysis 2,3. קביעת שיטות כדי להאיץ התאוששות משבצת נשארת מטרה רפואית ממשלה; עם זאת, זה כבר הקשה על ידי תובנות מכניסטית מספיק לתהליך ההחלמה. חוקרי שבץ ניסיוני להעסיק מכרסמי מודלים בתדירות של איסכמיה המוחית מוקדים. מעבר השלב האקוטי, מחקר שבץ מתמקד יותר ויותר על השלב תת-אקוטי וכרוני הבאים איסכמיה מוחית. רוב החוקרים שבץ להחיל קבע או טראןחסימת sient של MCA בעכברים או חולדות. בחולים, חסימות של MCA הן בין הגורמים השכיחים ביותר של איסכמי 4 פעימות. מלבד חסימה הפרוקסימלי של MCA באמצעות מודל נימה, חסימה כירורגית של MCA דיסטלי הוא כנראה המודל הנפוץ ביותר במחקר שבץ ניסיוני 5. ספיגה של דיסטלי (אל הסתעפות של העורקים lenticulo-striate) סניף MCA בדרך כלל חוסך בסטריאטום ובעיקר משפיע על הניאוקורטקס. חסימת כלי יכולה להיות קבועה או חולפת. שחזור גבוה של נפח נגע ושיעורי תמותה נמוכים מאוד ביחס לתוצאה לטווח הארוך הם היתרונות העיקריים של מודל זה. כאן, אנו מדגימים כיצד לבצע חלון גולגולתי כרוני (CW) לרוחב הכנה בסינוס sagittal, ולאחר מכן כיצד כמנתח לגרום שבץ דיסטלי מתחת לחלון באמצעות גישה craniotomy. גישה זו ניתן ליישם עבור הדמיה רציפה של שינויים אקוטיים והכרוניים הבאים איסכמיה באמצעותEPI-מאירה, סריקת לייזר confocal, וכן במיקרוסקופ intravital שני הפוטונים.

ציר הזמן ואת תוצאות נציג מוצגים איורים 2 ו -3. הכנת החלון גולגולתי, עם לרוחב חלון גולגולתי קטן בסינוס sagittal המעולה (האיור 2 B, C, D) תוצאות שיעור תמותה ותחלואה נמוכה מאוד כאשר היא מבוצעת על ידי מנתח מנוסה. כל 10 החיה שרדו, וכל CW הכרוני יכול לשמש הדמיה באיכות גבוהה, אפילו 28 ימים לאחר הניתוח. לא הייתה שום בעיה עם זיהומים בפצע או סיבוכים אחרים. <p class="jove_content" fo:keep-together.within-...

חסימה כירורגי של ענף עורק דיסטלי באמצע המוח (MCAo) היא מודל משמש לעתים קרובות במחקר שבץ ניסיוני. כתב יד זה מתאר את הטכניקה הבסיסית של MCAo קבע, בשילוב עם הכניסה של חלון גולגולתי לרוחב, אשר מציעה את ההזדמנות עבור מיקרוסקופיה intravital אורך בעכברים.

הכנת חלון גולגולת כרוני לרוחב מאפשרת In vivo תצפית בעקבות העורקים התיכון ספיגה מוחין דיסטלי של עכברים

Focal cerebral ischemia (i.e., ischemic stroke) may cause major brain injury, leading to a severe loss of neuronal function and consequently to a host of ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא הכנת חלון גולגולת לרוחב בשילוב עם חסימה קבועה של עורק המוח האמצעי. כדי להקל על מיקרוסקופיה תוך-חיונית אורכית בעכברים. שיטה זו יכולה לעזור לחקור ולענות על שאלות מפתח בתחום חקר איסכמיה מוחית.היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא בכך שהיא מציעה הדמיה in vivo של שינויים חריפים וכרוניים לאחר שבץ מוחי. התחל במתן הרדמה על פי פרוטוקול מאושר לבעלי חיים. ודא שהושג מישור כירורגי של הרדמה על ידי מתן גירוי כאב, כגון צביטה בבוהן, וציון היעדר תגובה.לאחר מכן, השתמש במכונת גילוח מכרסמים כדי להסיר את הפרווה מהצוואר לעיניים. תקן את ראש העכבר במסגרת סטריאוטקסית. לאחר מכן כסו את העיניים במשחה עיניים למניעת התייבשות.יש לנקות את האזור המגולח כדי להסיר את כל השערות, ולחטא את הקרקפת בשלוש מריחות של 74.1% אתנול ו-10% פרופרנולול. בעזרת אזמל סטרילי, בצע חתך בקו האמצע מהצוואר לעיניים. לאחר מכן פרשו את דש העור בארבעה תפרי אוהל.לאחר מכן, מגרדים בזהירות את הפריאוסטאום בצד שמאל של הגולגולת. והסר אותו עד לנקודה בה מתחיל השריר הטמפורלי. כעת השתמש במקדחה מיקרו כדי לדלל את הגולגולת בשולי דש העצם.ליצור קרניוטומיה פרונטופריאטלית בקוטר ארבעה מילימטרים. יש למרוח תמיסת מלח בזמן הקידוח כדי למנוע פגיעת חום. לאחר הקידוח, הרם את דש העצם בעזרת קנולות והסר אותו באמצעות מיקרו מלקחיים.יש להשקות את האזור בזהירות ובהרחבה בתמיסת מלח. מערבבים את הדבק הדנטלי עד לקבלת הסמיכות המתאימה. לאחר מכן מרחו אותו על העצם סביב הגולגולת.הניחו זכוכית כיסוי בקוטר שישה מילימטרים על הדבק המוכן. ולתקן את זה עם שאר הדבק הדנטלי. השקיה מאיצה את תהליך הריפוי ומבטיחה שהאטם אטום למים.בדוק את הדבק הדנטלי בעזרת מלקחיים כדי לוודא שהוא יבש וקשה. לאחר שהדבק נרפא, הסר את תפרי האוהל וסגור את הפצע בתפרי עור. יש לתת 0.5 מיליליטר של מי מלח סטריליים באופן תת עורי למאזן נוזלים.לאחר הניתוח, יש לעקוב אחר בעל החיים בכלוב התאוששות מחומם עד להתאוששות מההרדמה. ודא שהחיה התאוששה לחלוטין לפני החזרתה לכלוב עם בעלי חיים אחרים. יש לתת תמיד משככי כאבים לאחר הניתוח.כאן מוסיפים למי השתייה 10 מיליגרם למיליליטר אצטמינופן. ספקו תמיד מזון מן החי בצלחת פטרי המונחת על הרצפה כדי להפוך את האכילה לפשוטה וכדי למנוע ירידה קריטית במשקל לאחר הניתוח. ניתן לבצע מיקרוסקופיה תוך-חיונית ביום הראשון לאחר הכנת חלון הגולגולת.יש להחיל הרדמה איזופלורן על פי פרוטוקול מאושר. תקן את החיה במחזיק ראש וודא שחרוט האף מותקן כהלכה. פתח את תפר העור ונקה את החלון עם ניצני כותנה ומי מלח סטריליים.לאחר 24 שעות, יש למלא את חלון הגולגולת בנוזל מוחי שדרתי, המאפשר הדמיה. בצע את הליך חסימת עורק המוח האמצעי חמישה ימים לאחר הכנת חלון הגולגולת, כאשר התגובה החיסונית להליך נסוגה. כאן, מוצגת סקירה כללית לאחר כריתת הגולגולת לאינדוקציה MCAO.התמונה התוך-ניתוחית מציגה את הכלים לאחר מגע דו קוטבי ראשון ושני. ה-MCA הדיסטלי נראה חסום לחלוטין. תמונה זו מספקת סקירה סופית באמצעות הגדלה נמוכה יותר.לאחר השראת הרדמה כירורגית עם איזופלורן כמקודם, יש לגלח את הפרווה באזור שבין העין לאוזן, למרוח משחה עיניים על שתי העיניים ולחטא את העור והפרווה שמסביב בתמיסת אלכוהול, כמו קודם. הנח את העכבר על כרית חימום מבוקרת משוב כדי לשמור על טמפרטורת הגוף. הנח את החיה במצב רוחבי וקבע את האף במסכת ההרדמה.הפרד בעדינות את עור החתך המיועד להכנת חלון הגולגולת וזהה את השריר הטמפורלי שמתחתיו. לאחר מכן, התאם את האנרגיה של מחולל התדרים הגבוהים והשתמש במצב דו קוטבי. השתמש במלקחיים חשמליים כדי להרים בזהירות את השריר הטמפורלי מהגולגולת, וליצור דש שריר מבלי להסיר לחלוטין את השריר.לאחר מכן זהה את עורק המוח האמצעי מתחת לגולגולת השקופה בחלק הרוסטרלי של האזור הטמפורלי. גב לסינוס הרטרו-אורביטלי. דק את הגולגולת מעל ענף MCA בעזרת מקדחה מיקרו, תוך השקיה רציפה כדי למנוע נזקי חום.לאחר מכן הרם את העצם והסר אותה בעזרת מיקרו מלקחיים. הפחת את האנרגיה של הגנרטור בתדר גבוה לשלושה עד חמישה וואט. לאחר מכן, התקרב לעורק מלמעלה וגע בו בעדינות עם המלקחיים הדו-קוטביים משני הצדדים מבלי להרים את הכלי.המתן שלושים שניות, ולאחר מכן גע בעדינות בעורק עם קצה המלקחיים הדו-קוטביים כדי להבטיח שזרימת הדם תופסק לצמיתות. לאחר חסימת MCA, תקן את השריר הטמפורלי עם תפר אחד או שניים בהחדרת השריר כדי לכסות את הפגם בעצם. לאחר מכן, תפר את הפצע והכניס את החיה לכלוב המחומם עד להחלמה.MRI זה בוצע 24 שעות לאחר ניתוח דמה, ואינו מראה רקמת קליפת המוח הנגועה. ואילו MRI זה, המבוצע 24 שעות לאחר איסכמיה, מתאר בבירור את הנגע האיסכמי המסומן על ידי כוכבית, הממוקם מתחת לחלון הגולגולת הכרוני. תמונה זו מציגה הדמיה אפיפלואורסצנית תוך-חיונית והדמיה דו-פוטונית של כלי הדם בקליפת המוח כדי לנטר שינויים במיקרו-סירקולציה.נפח האוטם המוערך באמצעות MRI ב-24 ו-96 שעות לאחר איסכמיה, מראה נפח נגע ממוצע של 13.16 מילימטרים מעוקבים ב-24 שעות, ו-12.2 מילימטרים מעוקבים ב-96 שעות. לאחר השליטה, ניתן לבצע את הכנת חלון הגולגולת תוך כ -30 דקות. וה-MCAO תוך כ-15 דקות.בעקבות הליך זה, ניתן לבצע שיטות אחרות, כמו MRI, או מיקרוסקופ פוטון כפול כדי לענות על שאלות נוספות. טכניקות חדשות אלה מאפשרות לחוקרים לחקור יחידה נוירו-וסקולרית ברמה המולקולרית והתאית. ובמיוחד, במוח החי.

lateral-chronic-cranial-window-preparation-enables-vivo-observation

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

בחומר וידאו משלים זה, אנו מראים פרוטוקול עבור...

הדמיה כרונית של עכבר-Visual Cortex שימוש ההכנה סחוט הגולגולת

מיקרוסקופיה Intravital לעקוב אחרי האירועים hemodynamic ו דלקתיות ומרחב ב microcirculation pial.

מיקרוסקופית Intravital של microcirculation המוח עכבר באמצעות חלון גולגולתי סגור

עורק המוח האמצעי intraluminal חסימה (MCAO) מודל הוא מודל בשימוש השכיח ביותר בקרב מודלים ניסיוניים שבץ איסכמי. להלן נדגים את המודל כולו בפירוט עם מדריך של flowmetry לייזר דופלר, והתוצאות מי מטעמה.

Intraluminal העורקים התיכון מוחין ספיגה (MCAO) מודל שבץ איסכמי עם הדרכה דופלר Flowmetry לייזר עכברים

מאמר זה מתאר שיטה להמחשת עורקי חולדות מוחיים דרך חלון גולגולתי באמצעות craniectomy הזמני כדי להציג חלקים הפרוקסימלי של עורק המוח האמצעי...

ניצול חלון גולגולת לדמיין עורק המוח האמצעי במהלך ספיג אנדותלין-1 מושרה מזרח מוחות עורקים

על מנת להבין את פתופיזיולוגיה של שבץ, חשוב להשתמש במודלים אמינים. מאמר זה יתאר את אחד דגמי שבץ הנפוצים ביותר בשימוש בעכברים, כינה את חסימת עורק המוח האמצעי (MCAo) המודל (המכונה גם נימת intraluminal או מודל תפר) עם reperfusion.

גישה ניתוחית עבור העורקים התיכון ספיגה מוחין ושבץ reperfusion מושרה של עכברים

מוצג כאן פרוטוקול להשתלת חלון גולגולתי כרוני להדמיה אורכית של תאי מוח בעכברים ערים ומרוסנים ראש.

השתלת חלון גולגולת להדמיה חוזרת ונשנית In Vivo בעכברים ערים

פרוטוקול זה מדגים מודל שבץ עכבר ייחודי עם אוטם בגודל בינוני ושיעור הישרדות מצוין. מודל זה מאפשר לחוקרי שבץ פרה-קליניים להאריך את משך האיסכמיה, להשתמש בעכברים מזדקנים ולהעריך תוצאות תפקודיות ארוכות טווח.

מודל שונה של חסימת עורק מוחי אמצעי טרנס-גולגולתי לחקר תוצאות שבץ מוחי בעכברים מזדקנים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לביסוס מודל חסימת עורק מוחי אמצעי דיסטלי (dMCAO) באמצעות אלקטרוקואגולציה טרנס-גולגולתית בעכברי C57BL/6J ומעריכים את ההתנהגות הנוירולוגית והתכונות ההיסטופתולוגיות שלאחר מכן.

השראת שבץ איסכמי חריף בעכברים באמצעות טכניקת חסימת העורק האמצעי הדיסטלי

פרוטוקול זה מתאר שיטה כירורגית דו-שלבית ליצירת חלון גולגולתי גדול, ניתן לסגירה מחדש, ששומר על הדורה בעכברים. טכניקה זו מאפשרת הקלטות אלקטרופיזיולוגיות כרוניות ורב-מודליות מרשתות מוח עמוקות מפוזרות, כגון רשת מצב ברירת המחדל, במשך מספר שבועות.

פרוטוקול ניתוחי לחלון גולגולתי גדול וניתן לסגירה מחדש המאפשר הקלטות אלקטרופיזיולוגיות לאורך זמן ורב-מודליות של רשת מצב ברירת מחדל של העכבר

מטרת מחקר זה הייתה לקבוע שיטה שחוזרת לביצוע כריתת גולגולת ואחריה חסימה קבועה וסלקטיבית של עורק המוח האמצעי בחולדות, ליישום במחקרים ניסיוניים של ליקויים מוטוריים וזיכרון מרחבי.

סתימה סלקטיבית וקבועה של עורק המוח האמצעי בעכברים: גישה ניסויית לחקר ליקויים מוטוריים וזיכרון מרחבי

למד הכנת חלון גולגולת צדדי לצורך חסימת עורק מוח תיכון קבועה בעכברים. שיטה זו מאפשרת מיקרוסקופיה אינטראוויטלית לאורך זמן ומעקב אחר שינויים איסכמיים חריפים וכרוניים לאחר שבץ.

הכנת חלון גולגולת כרוני לרוחב מאפשרת In vivo תצפית בעקבות העורקים התיכון ספיגה מוחין דיסטלי של עכברים

גלה סרטונים נוספים