Name: אישור של שריר לב איסכמיה ופציעת reperfusion בעכברים באמצעות אלקטרוקרדיוגרפיה Pad Surface (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-11-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 23 s
Description: למדו אישור של איסכמיה ופציעת reperfusion בשריר הלב בעכברים באמצעות אלקטרוקרדיוגרפיה בזמן אמת. שיטה זו משפרת עקביות ודיוק ניתוחי ומפחיתה את הצורך בהערכות לאחר הניתוח.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי פרסי Merit Review (BX002332 ו-BX000640) משירות המחקר והפיתוח של המעבדה הביו-רפואית של המשרד למחקר ופיתוח לענייני חיילים משוחררים, המכונים הלאומיים לבריאות (R15HL129140), וכספים מחשבון המחקר והשיפור המוסדי. הפרויקט נתמך בחלקו על ידי C06RR0306551 המענקים של המכונים הלאומיים לבריאות.

כל הליכי כירורגיים המבוצעים על בעלי חיים צריכים להתבצע בהתאם מדריך לטיפול ושימוש בחי מעבדת 13 או קווים מנחים אתיים מתאימים אחרים. פרוטוקולים צריכים להיות מאושרים על ידי ועדת רווחת בעלי החיים במוסד המתאים לפני שתמשיך. 1. הכנות לקראת א.ק.ג. הערה: לפני תחילת, דון ציוד אישי מגן כולל כפפות, משקפי שמש ומעיל מעבדה נקי או שמלת הפנויה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקה את משטח א.ק.ג. באמצעות פתרון טיהור שאינה מבוסס אלכוהול ולא אקונומיקה. בעדינות להשתמש משימה עדינה לנגב למחוק את הפתרון עודף על מנת להבטיח כי כרית אלקטרודה לא להינזק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם משטח א.ק.ג. יש תכונת חימום, להשתמש בו. בעכברים מורדמים נוטים לאבד חום גוף במהירות. מחמם את הכרית ל- C 40-42 מעלות כדי לשמור על טמפרטורת גוף normothermic של 37 מעלות צלזיוס לאורך כל הניתוח 14. צג קור הגוףature באמצעות מדחום רקטלי. ניתן לשנות את טמפרטורת משטח ככל שיידרש כדי לשמור על טמפרטורת הגוף ~ 37 מעלות צלזיוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כמו רוב thoracotomies מבוצעות עם העכבר שוכב על גבו (שכיבה), להבטיח כי Toggle הוא התהפך להגדרה &quot;פרקדן&quot;. יש רפידות א.ק.ג. רבות פונקציה כדי לעבור בין עמדות מועדים שכיבה. אי כדי לבחור את הכיוון הנכון יכול לגרום עיוות של אירועים באק&quot;ג. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים העכבר באמצעות isoflurane 5% שנשאף 1 L / min חמצן. לאחר העכבר הוא הרדים, עכבר העברת לרפד א.ק.ג. מצויד הרדמה האף-קונוס ולהפחית isoflurane עד 2% לבין 1 L / min חמצן. אשר הרדמה תקין על ידי הבטחת עכבר לא מגיב כשכף רגלו של העכבר הוא צבט עם מלקחיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למרוח שכבה דקה של משחת סיכת עין על העיניים של העכבר כדי למנוע יובש ניזק קרני ואילו בהרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקה את הכפות של העכבר עם מגבון להסיר את כל המצעים הגלוייםשעשוי להיות תקוע על הכפות או עלולים להפריע העברת דחפים חשמליים מן הכפות לרפד ECG. כפות יבש עם לנגב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למרוח כמות קטנה (מעט קטן יותר אגורה USD) של ג&#39;ל אלקטרוליט מוליך מאוד לכל אחת מארבע אלקטרודות מתכת על כרית אק&quot;ג. הערה: הקפד להחיל רק כמות קטנה של ג&#39;ל כמו יותר מדי ג&#39;ל מקשה לרסן את הכפות לרפד באמצעות קלטת. בנוסף, הכפות צפוי לחמוק האיפוק במהלך ניתוח אם הם היו רטובים לפני יישום קלטת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עם העכבר במצב שכיבה, השתמש קלטת רפואית ברורה לרסן כל כפת האלקטרודה המתאימה לו (איור 1). לחיצה ראשונה כל כפת חתיכת הסרט שלה ולאחר מכן לדבוק את הקלטת לרפד ECG. ודא שכל כפה מאופקת נמצאת בקשר עם הג&#39;ל אלקטרוליט האלקטרודה. </li></ol> 2. רכישת א.ק.ג. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בהתאם לציוד המשמש לרכישת א.ק.ג., configure המכונה כך צורת גל א.ק.ג. ניתן מדמיין בזמן אמת. עבור קלטות א.ק.ג. באמצעות הגדרות ניטור הפיזיולוגיות על מכונת אקוקרדיוגרפיה, תמונה B-במצב חי תהיה צורת הגל א.ק.ג. רץ לאורך החלק התחתון של המסך. הערה: ראה מדריכים למשתמש מכונית שונים כדי לקבוע מהי הדרך הטובה ביותר להגדיר ציוד זה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר ויזואליזציה בזמן אמת של צורת גל א.ק.ג. ידי לחיצה על מקש B-mode על מכונת אקוקרדיוגרפיה או שווה ערך על מכשירי הקלטה א.ק.ג. אחרים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להתאים את הרזולוציה כדי להסביר את ההבדלים משרעת. אם הפסגה של גל R או השוקת (העמק) של Q-הגל נמצאת מחוץ למסגרת החזותית, להתאים את הרזולוציה עד למלוא גובהה של צורת הגל ניתן לצפות. הערה: ניתן לעשות זאת תחת לשונית הגדרות הפיזיולוגיות על מכונת אקו. לחץ על להגדיל או להקטין חצים עד הגל כולו גלוי. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בכל פעם שתמונה היא להיות OBTained, נקה את המשטח של כלי ECG. לגעת בעכבר במהלך ההקלטה א.ק.ג. עם מלקחיים או אצבעות יפריע צורת הגל. ודא כי העכבר הוא עדיין זכה וטהורה על כרית א.ק.ג. לפני ההקלטה כל ECGs. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בתכונת &quot;שיא&quot; או &quot;חנות&quot; של המכשיר לפני ביצוע כל חתכים כירורגיים על העכבר. תמונה זו תשמש כבסיס להשוואה מאוחר יותר. </li></ol> 3. הליך כירורגי א.ק.ג. הקלטה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזריק עכבר הרדים עם משכך כאבים (עצירות, 1.5 מיקרוגרם, intraperitoneal) לפני תחילת. הפרטים של איסכמיה / reperfusion הליך כירורגי ניתן למצוא גם במקומות אחרים 5. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסרת שיער סביב האתר כירורגית כימית או מכנית ולחטא את האזור עם פתרון בבטאדין. השתמש אזמל לעשות במקביל חתך אנכי אל הוושט ואת קנה הנשימה. בעדינות להזיז את הבלוטות הלימפה לכל צד של החתך עד הרקמה הדקה המכסה את קנה הנשימה היאחָשׂוּף. בעזרת מלקחיים, להפריד את הרקמה בעדינות עד טבעות הסחוס הלבנות של קנה הנשימה גלויות. הערה: אנו משתמשים בדרך כלל קרם להסרת שיער תאייר. הקרם מוחל באתר כירורגית דקות ~ 1. תאיר הוא אז ביסודיות לשטוף באמצעות מי מלח או מים. זוהי שיטה מועדפת, במעבדה שלנו כי אקו ברזולוציה גבוהה (אשר יכול לזהות זקיקי שיער) מתבצע לפני ואחרי הניתוח. עם זאת, יש לנקוט זהירות כדי למנוע אזורים רגישים כגון איברי מין, ולאחר מכן באופן יסודי שטיפה תאייר את כדי למנוע כוויות בעור פוטנציאליות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להסיר במהירות את האף של העכבר מן-חרטומו וכנס צינורות אוורור לתוך הפה של העכבר לכיוון הגרון. כאשר הקצה של צינור האוורור גלוי דרך אזור הצוואר החשוף, ליישר את הצינור עם תחילת קנה הנשימה. בעדינות לכשכש בצד הצינור אל הצד תוך הפעלת לחץ כלפי מעלה עד שקופיות הצינור לתוך קנה הנשימה אשר ניתן לאשר באופן חזותי tדרך עינית קנה הנשימה השקופה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא העכבר נשאר בהרדמה במהלך הליך אינטובציה. השהה מ אינטובציה ולהחזיר את העכבר אל-חרטומו אם הוא מתחיל לעורר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות לולאה של חוט, קרס השיניים הקדמיות של העכבר דרך הלולאה ואת קלטת את המחרוזת מסתיימת לרפד ECG כדי לייצב את הראש של העכבר על מנת להבטיח את צינורות אוורור לא זז במהלך הניתוח. במהירות לצרף צינורות אוורור כדי הנשמה מכרסמת ולהתאים הגדרות אוורור לפי משקל העכבר. צינורות אוורור סרט במקום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכסים את קנה הנשימה החשוף של העכבר עם גזה טבול מלח חמים כדי לשמור רקמות מהתייבשות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביצוע חתך אנכי באמצעות אזמל לאורך הצד השמאלי של החזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מלקחיים, להפריד את שכבת fascia בעדינות משכבת ​​שרירים. בזהירות לחתוך את שכבות שריר הבסיסיות בלי לחתוך כלי דם גלויים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מלקחיים, לתפוס את הצלע השלישית ולמשוךכלפי מעלה בעדינות. לשמור על אחיזה על צלע ביד אחת ולהשתמש מספריים כירורגיות כדי לחתוך את הרקמה צלעי בזהירות בין הצלע השלישית והרביעית. ודא כי הריאות אינן פגומות. הערה: ריאות תהיינה לסגת עמוק לתוך חלל החזה כמעט מייד לאחר חלל החזה הוא נקב ידי החתך הניתוחי עקב האובדן של הפרש לחצים. מתן עד הריאות יש חזרו בו לפני שתמשיך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במלקחיים כדי לתפוס בעדינות להפריד בין שכבה דקה של קרום הלב העוטף את הלב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס כתיבה או ידני להשתמש במלקחיים כמו כתיבת צלעות כדי להזיז את הצלעות למצב שבו הלב גלוי בין הצלעות. הערה: נהוג להעביר את הכף השמאלית התחתונה של העכבר, כך שהוא חופף את כפה הימנית התחתונה במהלך המיקום של ליגטורה. זה עוזר למקם את הלב, כך תוספת פרוזדורי השמאל, או האפרכסת, גלויה בקלות במהלך ההשמה של המייתר. עליך להיות מודע לכך בתוקף א.ק.ג. waveforms לא יושג בעוד הכפה השמאלית התחתונה כבויה של האלקטרודה. מסיבה זו רצוי להחזיר את כפת אלקטרודה שלה לאחר ליגטורה התפירה עוברת דרך רקמת שריר הלב אבל לפני פקעת מתהדקת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אתר את LAD חזותית, מתחת אפרכסת שמאל. במהירות להכניס מחט תפירה קוני משי 7-0 לתוך שריר הלב עמוק מספיק כדי לעבור תחת LAD אבל לא כל כך עמוק כמו לחדור חלל LV. משוך את ליגטורה תפירת הדרך עד שלא יהיה כ -4 סנטימטרים של משי התפירה עזב בצד (לא מחט) חינם של ליגטורה התפירה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בגין לקשור קשר תפר פשוט. לאחר הקצה החופשי של משי התפירה כבר משך דרך הלולאות כדי ליצור את הקשר, להשהות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחזיק בשני הקצוות בחינם מחט של משי התפירה עם מלקחיים, הכנס קטע סנטימטר ~ 1 של צינורות PE-10 מתחת הקשר להרכיב על גבי משטח epicardial. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם כפיתי השמאלי של העכבר הוא חצה, להחזיר את הכפה פרו שלהלכל אלקטרודה. הדק קשר כך צינורות PE-10 הוא sutured אל הלב. שחרר את כל המגע הפיזי עם העכבר כדי לאפשר א.ק.ג. שיירשם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר waveform ECG כדי לעבור עבור ~ 10 שניות. בדוק א.ק.ג. waveform חזותית ולהקליט waveform כמו &quot;זמן של ספיגה&quot;. אם T-גל אינו מעלה משרעת בתוך דקות 1, להעריך מחדש את המיקום של ליגטורה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם משרעת T-הגל אינה מעלה, או להשליך את החיה מן המחקר או לנסות לתקן את בעית המיקום ליגטורה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ראייה לבדוק את הצבע של שריר הלב כדי לאשר מחוויר איסכמי של LV. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם שינויים א.ק.ג. ושינויים בצבע שריר לב עולים איסכמיה, קשר כפול התפר סביב צינור PE-10. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכסה את חלל החזה הפתוח עם גזת מלח חמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שיא א.ק.ג. כל 5-10 דקות למשך תקופת איסכמי. </li></ol> 4. אישור של reperfusion באמצעות א.ק.ג. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סור מפרצון גזה מלוחהלצלצל חלל החזה לדמיין את הלב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש סכין כדי לחתוך את משי התפירה גבי צינורות PE-10. לאחר ליגטורה נחתכה, להסיר את החלק של צינורות PE-10 ובעדינויות להסיר את ליגטורה התפירה מן שריר הלב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שחרר את כל המגע הפיזי עם העכבר ולאפשר צורת גל א.ק.ג. ~ 10 שניות כדי לעבור. צורת גל רשומה בשם &quot;זמן של רה-פרפוזיה.&quot; המשך להקליט גל א.ק.ג. כל 5-10 דקות עד לנקודת זמן מסוימת ניסוי הרצוי הוא הגיע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כוונו את הרזולוציה עבור שינויים באמפליטודה לפי הצורך. אם T-גל לא משנה עם הסרת צינורות PE-10 ו ליגטורה, רה-פרפוזיה לא אישר. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם T-הגל לא משנה עם הסרת צינורות, או להשליך את החיה מן המחקר או לנסות לתקן את בעית המיקום ליגטורה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ראייה לבדוק שריר הלב בנוסף לאשר reperfusion ידי חזרה באדום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חלל חזה בקרבת תפירת שטח צלע עם 5-0תפר משי תוך הפעלת לחץ עדין על החזה של העכבר לגרש אוויר עודף כי חתמה במהלך הניתוח. ואז תפר את שכבות שריר ולבסוף, עור. הערה: הפעלת לחץ על בית החזה עלולה שלא להספיק כדי לפנות את חלל החזה של אוויר בכל העכברים. לכן, השיטה מזרק ומחט של פינוי צריך להיות מועסק על מנת להבטיח כי כל האוויר כבר גורשו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשום את א.ק.ג. האחרון לפני שפנה הרדמה בשאיפה את והסרה הכפות של העכבר מן האלקטרודות. גדל חמצן 2 ליטר / דקה ולתחזק אוורור עד שהעכבר להכרתו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר עכבר כדי להתאושש בסביבת מבוקרת טמפרטורה קבועה, כרית חימום למשל או חממה חמה, כדי למנוע השתנות אוטמת. פנק את העכבר עם עצירות 24 שעות לאחר הניתוח ולאחר מכן לפי צורך כפי שצוין על ידי סולם עווית עכבר. הערה: נוהל reperfusion נדון גם בפירוט על ידי שו ואח &#39;5. </li></ol>

<ol><li>Kochanek, K. D., Murphy, S. L., Xu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deaths%3A+Final+Data+for+2011%5BTitle%5D)+AND+%22Natl+Vital+Stat+Rep%22%5BJournal%5D)">Deaths: Final Data for 2011.</a> Natl Vital Stat Rep. 63 (3), 1-120 (2015).</li>
<li>World Health Organization. The 10 leading causes of death in the world. , Available from:
 http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs310/en/ (2012).</li>
<li>Klabunde, R. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKlabunde%2C+RE+%22Cardiovascular+Physiology+Concepts+2edn%22">Cardiovascular Physiology Concepts 2edn</a>. , Wolters Kluwer Health Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia. 243(2012).</li>
<li>Bhardwaj, R., Kandoria, A., Sharma, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarction+in+young+adults-risk+factors+and+pattern+of+coronary+artery+involvement%5BTitle%5D)+AND+%22Niger+Med+J%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarction in young adults-risk factors and pattern of coronary artery involvement.</a> Niger Med J. 55 (1), 44-47 (2014).</li>
<li>Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+model+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+through+ligation+of+the+left+anterior+descending+artery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury through ligation of the left anterior descending artery.</a> J Vis Exp. (86), (2014).</li>
<li>Fernández, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+coronary+arteries+of+the+C57BL%2F6+mouse+strains%3A+implications+for+comparison+with+mutant+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anat%22%5BJournal%5D)">The coronary arteries of the C57BL/6 mouse strains: implications for comparison with mutant models.</a> J Anat. 212 (1), 12-18 (2008).</li>
<li>Thaler, M. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aThaler%2C+MS+%22The+Only+EKG+Book+You%27ll+Ever+Need%22">The Only EKG Book You'll Ever Need</a>. , Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia. 4 edn (2003).</li>
<li>Poirier, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise%2C+heart+rate+variability%2C+and+longevity%3A+the+cocoon+mystery%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Exercise, heart rate variability, and longevity: the cocoon mystery?</a> Circulation. 129 (21), 2085-2087 (2014).</li>
<li>Boudoulas, K. D., Borer, J. S., Boudoulas, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+Rate%2C+Life+Expectancy+and+the+Cardiovascular+System%3A+Therapeutic+Considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiology%22%5BJournal%5D)">Heart Rate, Life Expectancy and the Cardiovascular System: Therapeutic Considerations.</a> Cardiology. 132 (4), 199-212 (2015).</li>
<li>Wehrens, X. H., Kirchhoff, S., Doevendans, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+electrocardiography%3A+an+interval+of+thirty+years%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Mouse electrocardiography: an interval of thirty years.</a> Cardiovasc Res. 45 (1), 231-237 (2000).</li>
<li>Boukens, B. J., Rivaud, M. R., Rentschler, S., Coronel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Misinterpretation+of+the+mouse+ECG%3A+%27musing+the+waves+of+Mus+musculus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Misinterpretation of the mouse ECG: 'musing the waves of Mus musculus.</a> J Physiol. 592 (21), 4613-4626 (2014).</li>
<li>O'Gara, P. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ACCF%2FAHA+guideline+for+the+management+of+ST-elevation+myocardial+infarction%3A+executive+summary%3A+a+report+of+the+American+College+of+Cardiology+Foundation%2FAmerican+Heart+Association+Task+Force+on+Practice+Guidelines%3A+developed+in+collaboration+with+the+American+College+of+Emergency+Physicians+and+Society+for+Cardiovascular+Angiography+and+Interventions%5BTitle%5D)+AND+%22Catheter+Cardiovasc+Interv%22%5BJournal%5D)">ACCF/AHA guideline for the management of ST-elevation myocardial infarction: executive summary: a report of the American College of Cardiology Foundation/American Heart Association Task Force on Practice Guidelines: developed in collaboration with the American College of Emergency Physicians and Society for Cardiovascular Angiography and Interventions.</a> Catheter Cardiovasc Interv. 82 (1), E1-E27 (2013).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+for+the+Care+and+Use+of+Laboratory+Animals%22">Guide for the Care and Use of Laboratory Animals</a>. , National Academies Press. Washington DC. 8 edn (2011).</li>
<li>Gao, S., Ho, D., Vatner, D. E., Vatner, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiography+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Mouse+Biol%22%5BJournal%5D)">Echocardiography in Mice.</a> Curr Protoc Mouse Biol. 1, 71-83 (2011).</li>
<li>Jong, W. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+acute+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+in+IL-6-deficient+mice+employing+a+closed-chest+model%5BTitle%5D)+AND+%22Inflamm+Res%22%5BJournal%5D)">Reduced acute myocardial ischemia-reperfusion injury in IL-6-deficient mice employing a closed-chest model.</a> Inflamm Res. 65 (6), 489-499 (2016).</li>
<li>Nadtochiy, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+cardioprotection+by+S-nitroso-2-mercaptopropionyl+glycine%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Cell+Cardiol%22%5BJournal%5D)">In vivo cardioprotection by S-nitroso-2-mercaptopropionyl glycine.</a> J Mol Cell Cardiol. 46 (6), 960-968 (2009).</li>
<li>Preda, M. B., Burlacu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrocardiography+as+a+tool+for+validating+myocardial+ischemia-reperfusion+procedures+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Med%22%5BJournal%5D)">Electrocardiography as a tool for validating myocardial ischemia-reperfusion procedures in mice.</a> Comp Med. 60 (6), 443-447 (2010).</li>
<li>Speerschneider, T., Thomsen, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiology+and+analysis+of+the+electrocardiographic+T+wave+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiol+%28Oxf%22%5BJournal%5D)">Physiology and analysis of the electrocardiographic T wave in mice.</a> Acta Physiol (Oxf. 209 (4), 262-271 (2013).</li>
<li>Kersten, J. R., Schmeling, T. J., Pagel, P. S., Gross, G. J., Warltier, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isoflurane+mimics+ischemic+preconditioning+via+activation+of+K%28ATP%29+channels%3A+reduction+of+myocardial+infarct+size+with+an+acute+memory+phase%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Isoflurane mimics ischemic preconditioning via activation of K(ATP) channels: reduction of myocardial infarct size with an acute memory phase.</a> Anesthesiology. 87 (2), 361-370 (1997).</li>
<li>Gargiulo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+anesthesia%2C+analgesia%2C+and+care%2C+Part+I%3A+anesthetic+considerations+in+preclinical+research%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+J%22%5BJournal%5D)">Mice anesthesia, analgesia, and care, Part I: anesthetic considerations in preclinical research.</a> ILAR J. 53 (1), E55-E69 (2012).</li>
<li>Curtis, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Lambeth+Conventions+%28II%29%3A+guidelines+for+the+study+of+animal+and+human+ventricular+and+supraventricular+arrhythmias%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">The Lambeth Conventions (II): guidelines for the study of animal and human ventricular and supraventricular arrhythmias.</a> Pharmacol Ther. 139 (2), 213-248 (2013).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

בעזרת שינויי ECG כשיטה משלימה לצורך וידוא איסכמיה לבבית ו reperfusion מבטיח מיקום מדויק של ליגטורה הגורם לחסימה. דיוק של מיקום ליגטורה הוא קריטי לצמצום השתנות נתונים בקרב בעלי חיים. הנער בתוך לב עכבר הוא עורק קשה לדמיין. לכן, השלמת חיוורון ויזואלי עם שינויים באק&quot;ג יעזור להבטיח את המיקום הנכון של נזק לרקמות ליגטורה וכתוצאה מכך. מאז כרית א.ק.ג. מציעה נוף בלתי פולשני של הלב, ECGs המרובה ניתן להשיג במהלך המחקר. ...

שמחלות לב הן סיבת המוות המובילה בעולם 1,2. לא רק החדר השמאלי (LV) החדר שהרירי ביותר, אחראי שאיבת דם מן הלב אל הגוף כולו 3, הוא אוטם משותף לב פגיע באתר שלאחר לבבי 4. מוות חדרית רקמות שמאל לעתים קרובות תוצאות אי ספיקת לב סיסטולית. במודלים של בעלי חיים של מחלות לב הן הכרח לקידום מחקר לב וכלי דם ביו. זן C57Bl / 6 של עכברים היה בחירה פופולרית עבור במודלים של בעלי חיים עקב זמן רבייה המהיר שלהם, עלות הנמוכה וקל ב שינויים גנטיים. רוב הדגמים כירורגית בעכברים לחקר מחלות לב לערב חסימה של הסניף LAD של העורק הכלילי השמאלי. הנער הוא המכונה לעתים 5,6 השולי הקהה השמאל. הנער המספק דם הקדמי של החדר השמאלי וקירות לרוחב אנטרו. מחקרי חסימת LAD מכוונים גרימת אוטם קדמי, לפעמים הארכת into אזורי הקיר הנחותים לרוחב 7. שני מודלים המשמשים לעתים קרובות ללימודים אוטם שריר הלב כוללים אוטם שריר הלב חסימה כרונית שריר הלב איסכמיה / פציעה reperfusion. החסימה הכרונית נוצרה בניתוח ידי תפירה סביב ולצמיתות חסימת זרימת דם דרך LAD. פציעת איסכמיה / reperfusion נוצרה הרבה באותה הדרך יחידה עם חולף, בדרך כלל 30-60 דקות, תקופה איסכמי. כדי להשיג איסכמיה חולפת, קשרי תפר occluding ברחבי LAD ושפופרת PE-10 קטנה אשר ממוקם במקביל LAD על פני שטח epicardial של הלב, ואחריה תקופת reperfusion שבו צינורות תפר occluding מוסר ודם הוא מותר שוב לזרום דרך העורק אל שריר הלב. ניתוח איסכמיה / reperfusion כבר ייחשב להיות רלוונטי קליני בשל האופי של פגיעת reperfusion במקביל לטיפול אוטם אדם הכולל לנשףאנגיופלסטיקה ו סטנט כלילי pt של העורק, או מעקפים. בדרך כלל, במהלך ניתוחים אלה, איסכמיה של LV בתוך לב עכבר היא אושר על ידי חיוורון גלוי של קיר שריר הלב. עם זאת, פשוט על ידי ביצוע הניתוחים על כרית רל (א.ק.ג.) בתנאי ניטור מתמיד, שינויים נראים לעין ניתן להבחין בצורת גל א.ק.ג., ובכך המאשרים איסכמיה ו reperfusion של שריר לב העכבר. למרות הלב בעכברים דומה ללב האדם במובנים רבים, כולל מבנה ארבעה חדרים שלה, את ליבם גם יש הבדלים. הבדל ברור הראשון הוא קצב לב במנוחה הממוצע של עכברים בוגרים הוא 600 - 700 פעימות לדקה (BPM) ואילו לזו של בני אדם מבוגרים ~ 60-100 8,9 BPM. בנוסף, בעכברים הגלים repolarization, J ו- T, לעתים קרובות להתמזג עם QRS קומפלקס שלילת קוטביות ביצוע קשה במקטע ST ברור להבחין 10. כדי לסבך את התהליך של electrocardiographically המאשר איסכמיה לבבית, זה לעילוי T-גל ואת מקטע ST אשר משמשים כסמנים לאבחון איסכמיה ופציעה אוטם שריר הלב אצל בני אדם, קלינית המכונה ST דואר levation מ yocardial אני nfarction או STEMI. אחד ההבדלים העיקריים בין אדם וצורות גל בעכברים היא כי S-גל מיד אחריו להיות גל J-המעביר ישירות לתוך T-גל שלילי. במהלך איסכמיה לבבית חריפה בעכברים משרעת של ירידות S-גל והוא בעקבות ישירות על ידי J-גל נורמלי ו 11 T-גל הפוך. ה- T-גל לא נראה להוות חלק משמעותי של repolarization בעכברים 11. למרות מינוח ועכבר מול הבדלים אנושיים, אישור א.ק.ג. של איסכמיה לבבית murine ו reperfusion הוא עדיין ריאלי יחסית פשוט. למען פישוט פרשנות צורת גל, בקטע שבין SJT המכונה ST-segmeNT בזאת. הנחיות STEMI שפורסמו בשנת 2013 ממליצות זמן מדלת בלון חולה של פחות מ -90 דקות 12 .זה אומר כי מסגרת הזמן מזיהוי של החסימה של העורקים הכליליים של המטופל עד העורק נפתחת מחדש צריך להיות פחות מ 90 דקות. הלב הפועם פועל באופן מתמיד ולכן, יש מטבוליזם חמצונים גבוה ורמה גבוהה של צריכת חמצן 3. כדי לספק לכך, רשת של נימים זמינה לכל myocyte 3. זה לוקח רק לב כמה פעימות למצות החמצן שלה ואספקה ​​של חומר מזין. בחלון 90 דקות, אזור לב איסכמית אדם יהיה נחסם מלקבל בין 5,400 ל -9,000 לב פועם שווה של דם עשיר בחמצן. באותה חלון 90 דק &#39;, עכבר יצטרך 54,000 עד 63,000 פעימות הלב. נקודות זמן הניסוי בגין נזקי איסכמיה / reperfusion בעכברים הם בדרך כלל בין 30 ל -60 דקות. חשיבותה של לפתחing שיטה משלימה של מאשר איסכמיה ו reperfusion שריר לב במודל בעכברים יש השלכות מרחיקות לכת על עקביות השחזור של נתונים במחקרי איסכמיה / reperfusion שריר לב. הנוהג הקיים של ראיית התבוננות בלב לשם שינוי בצבע רקמה אינו מספיק בתור עצמאי אבחון. בנוסף, reperfusion לאחר הסרת צינורות תפר אינו מובטח. למרות שעורק כבר לא נקשר, העורק יכול להיות נזק שנגרם במהלך ההליך ושעשויים אפשר reperfuse. זה יהיה מועיל יש תיעוד של שינוי באק&quot;ג כדי לאשר reperfusion ולא להסתמך על תצפיות של חיוורון שריר הלב rubor (צבע אדום). לבבות שאינם להראות סמנים של פציעה איסכמיה / reperfusion אז יכול להיות מסומן במהירות החלטה כיצד להמשיך יכול להתבצע על ידי החוקרים. לבסוף, הקמת תיעוד של א.ק.ג. משנת מתחילת המחקר ברחבי הדואר תקופות איסכמי ו reperfusion מאפשר לחוקרים להמשיך לפקח על הלב לאחר הניתוח הראשוני. חוקר כעת לאבד את הלב ברגע הניתוח הושלם. אק&quot;ג היא דרך פשוטה כדי לקבל תובנה שינויים המתרחשים בשעות שריר הלב כדי ימים לאחר הניתוח. א.ק.ג. רשם בנקודות זמן לאחר הניתוח יכול לחשוף מאחרים להתפתח Q-גלים המצביעים על המשך או חמרה למוות של רקמות. עם זאת, כדי להעריך ביעילות סמנים באק&quot;ג חדשים או החמרה, א.ק.ג. הבסיס חייב להיות זמין להשוואה. פרוטוקול זה יהיה להדגים כיצד להכין, להשיג, ולפרש את א.ק.ג. לאשר איסכמיה ו reperfusion של הלב העכבר באמצעות 8 - 12 בשבוע עכברים C57Bl / 6 גבר בן.

<table><tbody><tr><td>Vevo 1100</td><td>Fujifilm Visual Sonics</td><td></td><td>מכונת אקו לב</td></tr><tr><td>צלחת טיפול בעכבר</td><td>Fujifilm Visual Sonics</td><td></td><td>צלחת א.ק.ג מחוממת</td></tr><tr><td>Signa-Gel&nbsp;</td><td></td><td></td><td>מוליך מאוד רב</td></tr> <tr><td>אלקטרודות ג'ל</td><td>פרקר</td><td>15-25</td><td>מטרת אלקטרוליט</td></tr><tr><td>טרנספור קלטת רפואית</td><td>3M</td><td>1527-0</td><td></td></tr><tr><td>PI-Spray II</td><td>חידושים פרמצבטיים</td><td>NDC 36-2013-25</td><td>חומר ניקוי לצלחת א.ק.ג</td></tr><tr><td>C57Bl6 עכברים</td><td>מעבדת ג'קסון</td><td>000664</td><td>זכר, 8 - 12 שבועות</td></tr><tr><td>IsoThesia-Isoflurane</td><td>הנרי שיין</td><td>NDC 1169-0500-1</td><td></td></tr><tr><td>אקסל</td><td>מיקרוסופט</td><td></td><td></td></tr><tr><td>סיסטן משחת עיניים לסיכה לילית</td><td>אלקון</td><td>65050935</td><td></td></tr><tr><td>7-0 תפרי משי פרמה יד</td><td>אתיקון</td><td>640.O32</td><td></td></tr><tr><td>5-0 תפרי משי פרמה יד</td><td>אתיקון</td><td>K809. מספריים</td> כירורגיים O32 <td></td></tr><tr><td></td><td>ROBOZ</td><td>RS-5881</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>11052-10</td><td></td></tr><tr><td>גזה</td><td>ביו גרעין דיאגנוסטיקה בע"מ</td><td>DIS-022B</td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מחט</td> כלי <td>מדע עדינים</td><td>12565-14</td><td></td></tr><tr><td>בופרנקס CIII&nbsp;</td><td>פטרסון וטרינרי</td><td>0-891-9756</td><td>בופרנורפין הידרוכלוריד משכך כאבים&nbsp;</td></tr><tr><td>מוצרי Betadine</td><td>Purdue</td><td>67618-150-08</td><td></td></tr><tr><td>כנסיית נאיר</td><td>ודווייט ושות'</td><td>NRSL-22339-05</td><td></td></tr></tbody></table>

אישור של שריר לב איסכמיה ופציעת reperfusion בעכברים באמצעות אלקטרוקרדיוגרפיה pad surface

Confirmation of Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury in Mice Using Surface Pad Electrocardiography

מודלים רבים של בעלי חיים הוקמו לחקר שיפוץ שריר הלב ואי ספיקת לב בשל מעמדו כגורם התמותה מספר אחת ברחבי העולם. בבני אדם, נוצרת חסימה פתולוגית בעורק כלילי ורפרפוזיה של אותו עורק חסום נחשבת חיונית לשמירה על כדאיות שריר הלב בסיכון. למרות שהוא חיוני להתאוששות שריר הלב, זלוף מחדש של שריר הלב האיסכמי יוצר פגיעה ברקמות משלו. התגובה הפיזיולוגית והריפוי של פגיעת איסכמיה/רפרפוזיה שונה מפגיעת חסימה כרונית. פגיעה באיסכמיה של שריר הלב / רפרפוזיה זוכה להכרה כמודל רלוונטי מבחינה קלינית למחקרי אוטם שריר הלב. מסיבה זו, מודלים מקבילים של בעלי חיים של איסכמיה/רפרפוזיה חיוניים לקידום בסיס הידע לגבי פגיעה בשריר הלב. בדרך כלל, איסכמיה של לב העכבר לאחר חסימת עורק כלילי קדמי שמאלי (LAD) מאושרת על ידי חיוורון גלוי של שריר הלב מתחת לסתימה (קשירה). עם זאת, זה מציע רק דרך סובייקטיבית לאשר מיקום נכון או עקבי של קשירה, מכיוון שישנם מספר עורקים ראשיים שעלולים לגרום לחיוורון באזורים שונים של שריר הלב. שיטה לרישום שינויים אלקטרוקרדיוגרפיים כדי להעריך מיקום נכון של קשירה ואיסכמיה כתוצאה מכך, כמו גם רפרפוזיה, כדי להשלים את חיוורון שריר הלב שנצפה, תעזור להניב גדלי אוטם עקביים במודלים של עכברים. בתורו, זה יעזור להפחית את מספר העכברים בשימוש. בנוסף, ניתן להמשיך לרשום שינויים אלקטרוקרדיוגרפיים באופן לא פולשני באופן תלוי זמן לאחר הניתוח. מאמר זה ידגים שיטה לאישור אלקטרוקרדיוגרפי של איסכמיה של שריר הלב ורפרפוזיה בזמן אמת.

א.ק.ג. בעכברים נורמליים מוצג באיור 2 עם סמנים האלפביתי לאירועים חשמל P, Q, R, S, J וט P הוא שלילת קוטביות פרוזדורים הראשונית. QRS הוא גל שלילת קוטביות על החדרים. J הוא repolarization מוקדם T מייצג repolarization הטרוגנית הידוע גם בשם התאוששות 11. יצוין כי מעבדות רבות לא להשתמש המינוח J-גל ובמקום להתייחס קטע SJT כמו מקטע ST 10,15-17. התוצאות כאן וניתוחים יציגים ונוגעים מבוסס על הנחה של תצפיות במעבדה של 40 עכברי...

במהלך ניתוח איסכמיה/רפרפוזיה של שריר הלב בעכברים, מיקום נכון של הקשירה החוסמת מאושר בדרך כלל על ידי תצפית גלויה של חיוורון שריר הלב. כאן, שיטה לאישור אלקטרוקרדיוגרפי של איסכמיה ורפרפוזיה, להשלמת חיוורון שריר הלב שנצפה, מודגמת בעכברי C57Bl/6 זכרים.

אישור של שריר לב איסכמיה ופציעת reperfusion בעכברים באמצעות אלקטרוקרדיוגרפיה Pad Surface

Many animal models have been established for the study of myocardial remodeling and heart failure due to its status as the number one cause of mortality ...

המטרה הכללית של פרוצדורה זו היא להשתמש באלקטרוקרדיוגרפיה כדי לאשר הצלחה של איסכמיה וreperfusion של השריר הלבבי בעכברים. שיטה זו יכולה לסייע בהגברת העקביות והשחזור של ניתוח האיסכמיה והreperfusion. היתרון המרכזי של טכניקה זו הוא שהיא מאפשרת להעריך את הצלחת האיסכמיה והreperfusion במהלך הפרוצדורה, בניגוד לצורך בניתוח לאחר הניתוח הגוזל זמן רב.לאחר הכנת פד ה-ECG, הניחו כמות קטנה (קטנה מגודלו של מטבע דיימ) של ג'ל אלקטרוליטי בעל מוליכות גבוהה על כל אחת מארבעת האלקטרודות המתכתיות שבפד ה-ECG. לאחר מכן, הצמידו כל אחת מכפות הרגליים של עכבר מורדם השוכב על גבו באמצעות סרט דביק, והדביקו את הסרט לאלקטרודת ECG, תוך הקפדה שכל כף רגל תהיה במגע עם הג'ל והאלקטרודה. לאחר מכן, הגדירו את המכשיר כך שניתן יהיה לראות את גל ה-ECG בזמן אמת, והתאימו את הרזולוציה כדי לפצות על הבדלים באמפליטודה לפי הצורך.אם שיא גל R או השפל של גל Q נמצאים מחוץ למסגרת הנראית, התאימו את הרזולוציה עד שניתן יהיה להבחין בכל גובה גל ה-ECG. לאחר מכן, פנו את משטח ה-ECG מכלים, תוך הקפדה שהעכבר יישאר ללא תנועה וללא מגע, והשיגו גל בסיס של ECG נורמלי ובריא של בעל החיים. כדי לבצע את האיסכמיה והreperfusion, התחילו בהסרת השיער מסביב לאתר הניתוח ובחיטוי האזור עם תמיסאות בטדין ואלכוהול.בשלב הבא, השתמש בסקלפל כדי לבצע חתך אנכי במקביל לוושט ולקנה הנשימה, תוך הזזה עדינה של קשרי הלימפה לכל צד של החתך עד לחשיפת הרקמה הדקה המכסה את קנה הנשימה. בעזרת פינצטה, הפרד בעדינות את הרקמה עד שטבעות הסחוס הלבנות של קנה הנשימה נראות לעין. לאחר מכן, הכנס במהירות את צינור האוורור דרך הפה לכיוון הגרון.כאשר קצה הפחית נראה דרך אזור הצוואר החשוף, יישרו את הפחית עם תחילת הקנה. נערו בעדינות את הפחית מצד לצד תוך הפעלת לחץ כלפי מעלה עד שהפחית תחליק לתוך הקנה, כפי שניתן לאשר חזותית דרך הרקמה השקופה. לאחר שהפחית במקומה, השתמשו בלולאת חוט כדי לתפוס את שתי השיניים הקדמיות של העכבר והדביקו את קצות החוט למסדי ה-ECG כדי לייצב את ראש החיה ולהבטיח שפחית ההנשמה לא תזוז במהלך הניתוח.לאחר מכן, חברו במהירות את צינור האוורור למכשיר ההנשמה למכרסמים וכווןנו את הגדרות ההנשמה בהתאם למשקל בעל החיים. כסו את קנה הנשימה החשוף בגזה ספוגה בתמיסת סליין חמימה כדי למנוע את התייבשות הרקמה. לאחר מכן, השתמשו בסקלפל כדי לבצע חתך אנכי לאורך הצד השמאלי של עצם הסטרנום.באמצעות פינצטה, הפר gently את שכבת הפסציה משכבת השריר, ולאחר מכן גזור בזהירות את שכבות השרירים שמתחתיהן מבלי לפגוע בכלי דם גלויים. השתמש בפינצטה כדי למשוך בעדינות את הצלע השלישית כלפי מעלה. לאחר מכן, תוך כדי שמירה על האחיזה בצלע ביד אחת, השתמש במספריים כירורגיים כדי לגזור בזהירות את הרקמה הבין-צלעית שבין הצלע השלישית לרביעית.לאחר נסיגת הריאות, השתמשו בפינצטה כדי להפריד בעדינות את השכבה הדקה של הפריקרדיום (קרום הלב) המקיפה את הלב. לאחר מכן, הזיזו את הצלעות למצב שבו הלב נראה בין הצלעות. כדי למקם את הלב כך שהאוזנייה השמאלית (left atrial auricle) תהיה גלויה בקלות, הזיזו את כף הרגל השמאלית התחתונה של העכבר כך שתחפוף לכף הרגל הימנית התחתונה.אתרו את העורק הכלילי השמאלי היורד, או ה-LAD, מתחת לעליה השמאלית, והחדירו במהירות מחט תפירה מסוג silk 7-0 בעלת קצה מחודד אל תוך המיוקרדיום, בעומק מספיק כדי לעבור מתחת ל-LAD, אך לא בעומק שיחדור לחלל החדר השמאלי. החזיקו את חוט התפירה עד שנותרו כארבעה סנטימטרים של חוט משי בקצה החופשי, והתחילו לקשור קשר תפירה פשוט. לאחר שהקצה החופשי של חוט המשי נמשך דרך הלולאות ליצירת הקשר, תפסו באמצעות פינצטה הן את הקצה החופשי והן את קצה המחט של חוט התפירה, והחדירו קטע של כסנטימטר אחד של צינור PE10 תחת הקשר שנוצר על פני השטח של האיפיקרד.כאשר הפרויקה במקומה, החזירו את כף הרגל השמאלית התחתונה לאלקטרודה המקורית והדקו את הקשר כך שפרויקת ה-PE10 תהיה תפרורה ללב. הפסיקו כל מגע פיזי עם העכבר כדי לאפשר לצורת גל ה-ECG להתייצב למשך 10 שניות, בדקו חזותית את צורת הגל ורשמו זאת כזמן החסימה. לאחר מכן, אם ה-ECG ושינויים בצבע השריר הלבבי מעידים על איסכמיה, קשרו קשר כפול עם התפר סביב פרויקת ה-PE10 וכסו את חלל החזה הפתוח בגזה ספוגה בסליין חם.בסיום תקופת האיסכמיה, הסירו את הגזה המכסה את חלל בית החזה וחשפו את הלב. גזרו את חוט המשי מעל צינור ה-PE10 והסירו את הצינור, לאחר מכן הסירו בעדינות את הליגטורה מהשריר הלבבי (myocardium). הפסיקו כל מגע פיזי עם העכבר ואפשרו לגלי ה-ECG להשלים מחזורים למשך 10 שניות, תוך הקלטת גל ה-ECG כזמן הפרפוזיה החוזרת.בסיום השלב הניסויי, התאימו את הרזולוציה לכל שינוי באמפליטודה, לפי הצורך. אם גל T משתנה והמיוקרדיום חוזר לצבע אדום, דבר המעיד על reperfusion מוצלח, תפרו את המרווח הבין-צלעי באמצעות תפר משי 5-0, תוך הפעלת לחץ עדין על חזה העכבר כדי להוציא אוויר עודף שנכנס לחלל במהלך הניתוח לצורך סגירת חלל החזה. לאחר מכן, תפרו את שכבות השריר והעור, ואפשרו לעכבר להתאושש באופן מלא בסביבה בעלת טמפרטורה קבועה ומבוקרת תחת מעקב.איור זה עוקב אחר התקדמותו של עכבר אחד מדירוג בסיס ועד לשלב הרפרפוזיה, כאשר גל הרישום הראשון מציג קצב סינוס תקין בקו הבסיס שהוקלט. גל הרישום השני מציג את ה-ECG דקה אחת לאחר קשירת הליגטורה וחסימת העורק, כאשר נצפה שיאו של גל T היפר-אקוטי ומוגבה, בהשוואה לגל הרישום בקו הבסיס לפני הליגטורה. גל הרישום השלישי מראה התרוממות מלאה של מקטע ST בנקודת הזמן של חמש דקות, כאשר חלק ה-S של הקומפלקס אינו מגיע לעומק שלילי רב כפי שנראה בגל הרישום של קו הבסיס, לפני ההתקדמות לגלי J ו-T.לאחר 20 דקות של איסכמיה, מרווח ה-QT התרחב, וקטע ה-ST עדיין מוגבה, כאשר שני החלקים נותרים כך עד לדקה ה-45. לאחר חמש דקות של רפרפוזיה, מתחילים להופיע סימנים של גלי Q עמוקים ומשמעותיים, וגל T חוזר לקו האיזואלקטרי. עם זאת, לאחר 30 דקות, גלי Q השליליים עדיין נותרים, וככל הנראה הם מעידים הן על נזק קבוע והן על כך שרקמת הלב הגוועה מסיטה את הזרמים החשמליים סביב האזור הפגוע.בנוסף, איסכמיה מתמשכת וההתקדמות לפגיעה ואוטם מובילות להגברה של הש projection השלילי של גל T, שהיא בדרך כלל קבועה. בעת ביצוע הליך זה, חשוב לזכור להקליט ECG בסיסי לפני סימון החיה. ניתן להשתמש בניתוח ECG כדי לזהות שינויים חשמליים או חריגות.ניתן להמשיך בעיבוד הלב לצורך אנליזת חלבונים כדי לבחון שינויים פרוטאומיים, או לצביעת רקמה כדי לבחון שינויים פרוטאומיים או מורפומטריים. לאחר צפייה בסרטון זה, תהיה בידיכם הבנה טובה של האופן שבו ניתן להשתמש באלקטרוקרדיוגרפיה כדי לאשר איסכמיה וreperfusion מוצלחים של השריר הלבבי בעכבר.

confirmation-myocardial-ischemia-reperfusion-injury-mice-using

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

גירוי חשמלי מתוכנת מספק את היכולת לקבוע תכונות ההולכה של הלב, ואת האפשרות להשפיע ולסיים הפרעות בקצב הלב באמצעות פרוטוקולים שונים לצעוד. באמצעות קטטר transvenous, הקלטות intracardiac electrogram ניתן להשיג אצל עכברים הבאים מתוכנת פרוטוקולים גירוי חשמלי לזהות מצעים arrhythmogenic.

גירוי חשמלי מתוכנת עכברים

תדירות גבוהה אולטרסאונד דופלר היא טכנולוגיה חדשנית להערכת תפקוד שריר הלב באזור. עבודה זו מציגה את העדות הראשונה הוכחת הישימות של פלטפורמה זו הדמיה תכליתי עבור למדוד את חוזרות ונשנות של מתח שריר הלב, dp / dt, ו regurgitation צניפי בלב אדום (IR) איסכמיה reperfused Murine.

בתדירות גבוהה ברזולוציה גבוהה אקו: העדות הראשונה על מדוד לא פולשני חוזרות ונשנות של הזנים Contractility שריר הלב, ו regurgitation צניפי בלב איסכמיה reperfused Murine

ההליך הניתוחי המשמש ללגרום לאוטם שריר לב בעכברי ניסוי מתחיל בבית חזה שמאלי בין השלישי ואת צלעות 4 כדי להמחיש את המשטח הקדמי של הלב והריאה שמאלית. העורק הכלל שמאלי גבעול, החזה סגור והעכבר מותר להתאושש באופן ספונטני.

טכניקה שונה לקשירת עורקים הכליליים בעכברים

טראומה ניתוחית גורם לתגובה דלקתית. ציטוקינים ligands אנדוגניים ידועים לווסת את גודל האוטם בשריר הלב בעקבות איסכמיה ו reperfusion. אנו מציגים שונה סגור החזה מודל של איסכמיה reperfusion Murine באמצעות משקולות תלויות כדי למזער את ההשפעות של פתיחת בית החזה.

דגם Murine סגור החזה של איסכמיה של שריר הלב reperfusion

אנחנו מציגים את שיטה כירורגית כדי לגרום לאיסכמיה / reperfusion הניסיוני (I / R) פציעה כדי לדמות אוטם שריר הלב (MI) בעכברי מודל, המאפשר ליותר בהירות במיצוב של קשירה בעורק השמאלי הקדמי יורד (LAD) כדי להגדיל את שחזור ניסויים MI בעכברים.

דגם של שריר הלב איסכמיה reperfusion הפגיעה Murine באמצעות קשירת של העורק השמאלי קדמי יורד

תחת הרדמה מספקת, לב העכבר הוחצן דרך החלל הבין-קוסטלי, ואוטם שריר הלב נגרם בהצלחה על ידי קשירת העורק היורד הקדמי השמאלי (LAD) באמצעות חומרים הזמינים ברוב המעבדות.

שיטה פשוטה שונה להשראת אוטם שריר הלב בעכברים

כאן אנו מתארים שיטה פשוטה וניתנת לשחזור שיכולה לגרום לאוטם שריר הלב או לפגיעה באיסכמיה של שריר הלב בעכברים על ידי קשירה מדויקת של העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי באמצעות מיקרומניפולציה.

השראת אוטם שריר הלב ופגיעה באיסכמיה של שריר הלב בעכברים

המחקר הנוכחי מדגים מודל בעל חיים בעל יכולת שחזור גבוהה של איסכמיה אזורית חריפה של שריר הלב ופגיעה ברפרפוזיה בארנבים באמצעות מיני בית חזה שמאלי למקרי הישרדות או עצם סטרנטומיה בקו האמצע למקרים שאינם הישרדותיים.

מודל של איסכמיה ופגיעה רפרפוזיה בארנבים

הפרוטוקול הנוכחי מתאר מבט פרסטרנלי ארוך שונה ללוקליזציה מהירה ומדויקת של העורק היורד הקדמי השמאלי. גישה זו נועדה להיות פשוטה וידידותית יותר למשתמש תוך הקלה על בחינת שינויים דינמיים במאגר הזרימה הכלילי בעקבות איסכמיה של שריר הלב בעכברים.

הערכות דינמיות של שמורת הזרימה הכלילית לאחר רפרפוזיה של איסכמיה שריר הלב בעכברים

מאמר זה מציג טכניקה ייחודית של חזה סגור לגרימת פגיעה באיסכמיה של שריר הלב (IRI) בעכברים. השיטה המוצגת מאפשרת לעכברים לנשום באופן ספונטני תוך גרימת איסכמיה מרחוק של שריר הלב. זה מספק גישה לבעל החיים לחקר התהליכים הדינמיים של איסכמיה ורפרפוזיה באתרם ובזמן אמת באמצעות הדמיה לא פולשנית.

חסימת LAD מופעלת מרחוק באמצעות קטטר בלון בעכברים נושמים באופן ספונטני

למדו אישור של איסכמיה ופציעת reperfusion בשריר הלב בעכברים באמצעות אלקטרוקרדיוגרפיה בזמן אמת. שיטה זו משפרת עקביות ודיוק ניתוחי ומפחיתה את הצורך בהערכות לאחר הניתוח.

אישור של שריר לב איסכמיה ופציעת reperfusion בעכברים באמצעות אלקטרוקרדיוגרפיה Pad Surface

גלה סרטונים נוספים