Name: מדידת הפצת החלקיקים גודל פתרונות דלוחים ידי Dynamic Light פיזור מיקרוסקופי (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-01-09T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 16 s
Description: למדו כיצד למדוד את התפלגות גודל החלקיקים בתמיסות עכורות ללא דילול באמצעות מיקרוסקופיית פיזור אור דינמי. שיטה זו מאפשרת ניתוח מדויק של תמיסות מרוכזות תוך שמירה על הריכוז המקורי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה כספית על ידי מענקים למחקר מדעי ממשרד החינוך, התרבות, הספורט, המדע והטכנולוגיה (מס' 25248027 ל-M.S.).

לדוגמא הכנה 1. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טיהור של מונומרים הטמפרטורה המגיבים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממיסים 20 גרם של N -isopropylacrylamide (ניפה) ב 100 מ"ל של טולואן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סנן את הפתרון תחת יניקה לחסל אבק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערבבים את תסנין עם 500 מ"ל של האתר נפט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את כלי התגובה באמבט קרח-מים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערבב את הפתרון עד מונומרים הם זרזו (בדרך כלל 30 דקות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סנן את הפתרון תחת יניקה להשיג את מונומרים זרז. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ייבש את מונומרים בלחץ מופחת (100 אבא) הלילה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנת תמיסת פולימר הטמפרטורה המגיבים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגה 20 מ"ל של מים ללא יונים עבור 1.0 דקות באמצעות משאבת דיאפרגמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממיסים 780.8 מ"ג של ניפה מטוהרים ב 9.5 מ"ל של מים degassed ו deionized. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את כלי התגובה באמבט קרח-מים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגן על התגובהאור על ידי כיסוי המנגנון ברדיד אלומיניום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערבבים בעדינות את הפתרון במשך 10 דקות תוך כדי החדרת הזרימה מתונה של גז Ar בעדינות באמצעות קצה פיפטה מצורף בלון גז עם צינור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוסיף 11.9 μL של N, N, N ', N' -tetramethylethylenediamine לפתרון באמצעות micropipette. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערבב את הפתרון עבור 1.0 דקות תוך החדרת גז Ar, כאמור בשלב 1.2.5. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תוך ערבוב המדגם, לפזר 4.0 מ"ג של persulfate אמוניום ב 0.5 מ"ל של מים degassed ו deionized. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערבב את הפתרון המדגם (משלב 1.2.7) ופתרון persulfate אמוניום (משלב 1.2.8). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערבב את הפתרון עבור 30 שניות תוך החדרת גז Ar, כאמור בשלב 1.2.5. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכסה את הפתרון עם רדיד אלומיניום ולשמור אותו במקרר (4 ° C) הלילה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנת mounts מדגם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים 60 μL של פתרון המדגם (מצעד 1.2.11) ב שקופית חלל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכסה את הפתרון עם מכסה זכוכית עגולה. היזהר שלא בועות אוויר מלכודת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר פתרון עודף באמצעות מגבונים micropipette ומעבדה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותם את המדגם עם דבק. תנו יבש דבק בטמפרטורת החדר (בדרך כלל 6 שעות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כן אחר שקופית מלאה 0.1% WT פוליסטירן לטקס (קוטר חלקיקים 100 ננומטר) השעיה על ידי ביצוע שלבי 1.3.1-1.3.4. שקופית זו משמשת כסטנדרט. </li></ol></li></ol> 2. מדידת גודל חלקיקים עם מיקרוסקופ פיזור אור דינאמי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אופטימיזציה של המכשיר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את שקף השעיה לטכס קלקר (משלב 1.3.5) על הבמה של מיקרוסקופ ההפוכה. צד זכוכית המכסה צריך פנים למטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח מנחת קורה מול הגלאי (photodiode מפולת וכן autocorrelator). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל קרן לייזר (לייזר מצב מוצק, λ = 488 ננומטר, 30 mW, רציפהגל) המדגם דרך עדשה אובייקטיבית (10 ×). חלק מן האור המוחזר עובר דרך מראה ההשקה של המיקרוסקופ היא נצפתה על ידי מצלמת CCD רכוב בנמל בצד של המיקרוסקופ (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם את גובה של העדשה אובייקטיבי להגדיר את מוקד ב ההשעיה מדגם ידי הסטה את גובה העדשה אובייקטיבי מעמדת נמוכה עד גבוהה. במהלך הליך זה, הבבואה מתמקדת שלוש פעמים: על פני השטח של הזכוכית המכסה, על קו התפר בין הזכוכית המכסה ואת המדגם, על קו התפר בין המדגם לבין זכוכית שקופית חור. הגדר את המוקד בין הנקודות השניות ושלישיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להחליש את עוצמת האור הפזורה על ידי שינוי כוח הליזר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הצג את האור המפוזר לתוך הגלאי על ידי הסרה מנחת הקורה מול הגלאי. יחידה זו מודדת את מתאם הזמן של עוצמת האור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדרה (מיקרומטר φ = 50) חריר between המיקרוסקופ הגלאי כדי להשיג את האפקט confocal. התאם את המיקום של החריר כדי למקסם את עוצמת האור על הגלאי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדוד את פונקצית קורלציה הזמן של עוצמת אור פזורה למשך 30 שניות על ידי ייזום המבצע של קורלטור באמצעות מחשב. פונקציית המתאם הנמדדת מתבטאת לעתים קרובות ככל g (2) (t) - 1, כאשר t הוא מתאם הזמן 4 ו <img alt="משוואה 1" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq1.jpg"> . הנה, אני (t) היא עוצמת האור המפוזרת בזמן t ו (•••) T הוא מיצוע זמן. שעת הריקבון תעמוד על כ 0.1 ms. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם את המוקד להשיג מגוון רחב של משרעת הראשונית של פונקצית קורלציה הזמן (g (2) (t = 0) - 1). הערה: משרעת הראשונית מושפעת במידה רבה על ידי כמות האור המוחזר. באמצעות הזזת גרירת המוקדARD הממשק בין הזכוכית מכסה את המדגם, בסך של עליות אור מוחזרות. עבור מפזרי אור חזקים, כגון לטקס קלקר, משרעת הראשונית ניתן לשנות מ -0 עד 1. עם זאת, קשה להגדיר את משרעת הראשונית קרובה ל -1 לפתרונות פולימר נפוצים יותר בגלל עוצמת האור המוחזר היא גבוהה בהרבה זה של האור המפוזר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל את ההופכי של טרנספורמציית Laplace (באמצעות התכנית להסדרה המוגבלת Contin 13,14) לפונקצית קורלציה זמן המתקבלת לרכוש את פונקציית התפלגות גודל. במקרים בהם משרעת הראשונית מוגדר פחות מ 0.2, פונקצית ההתפלגות של רדיוס הידרודינמית יראה פסגה חדה סביב 100 ננומטר, שהוא כפול רדיוס בפועל (ראה דיון לפרטים נוספים). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדידת מדגם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את הטמפרטורה הבמה כדי 25 מעלות צלזיוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקום שקופיות מוכנות עם פולי-ניפיתי (PNIPA) solutיון (שלב 1.3.4) על הבמה של המיקרוסקופ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדוד את פונקצית קורלציה הזמן של עוצמת האור מפוזרים על ידי ביצוע השלבים 2.1.4-2.1.8. אם משרעת הראשונית גדולה מ 0.2, להתאים את המוקד להפוך את משרעת הראשונית של פונקצית קורלציה הזמן פחות מ -0.2 ידי ביצוע צעד 2.1.9. משרעת ראשונית קטנה מפשטת את הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את הטמפרטורה הבמה כדי 35 מעלות צלזיוס ולחכות עד הפתרון הופך עכור. טמפרטורת הפתרון הקריטית הנמוך (LCST) של פתרון PNIPA היא 32 ° C 15. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדוד את פונקצית קורלציה העת על ידי השלבים הבאים 2.1.4-2.1.8. אם הדבר אפשרי, להתאים את המיקום של נקודת המוקד על מנת להפוך את משרעת הראשונית של פונקצית קורלציה זמן פחות מ -0.2. לקבלת פתרונות עכורים, אמפליטודות הראשונית שלהם נוטה להגדיל, מאז עוצמת עליות האור המפוזרות ואילו זה של האור המוחזר נשאר קבוע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל ההופכי Laplace transformatiאל פונקציות קורלציה הזמן להשיג כדי להשיג את פונקציות התפלגות גודל. ראוי לציין, כי הגודל האמיתי הוא מחצית הערך המתקבל במקרים בהם משרעת הראשונית היא פחות מ -0.2. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Hiroi, T., Shibayama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+Light+Scattering+Microscope%3A+Accessing+Opaque+Samples+with+High+Spatial+Resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Opt.+Express%22%5BJournal%5D)">Dynamic Light Scattering Microscope: Accessing Opaque Samples with High Spatial Resolution.</a> Opt. Express. 21, 20260-20267 (2013).</li>
<li>Barth, H. G., Flippen, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Particle+Size+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Particle Size Analysis.</a> Anal. Chem. 67, 257-272 (1995).</li>
<li>Liu, Y., Wang, Z., Zhang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+supramolecular+polymers%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Soc.+Rev%22%5BJournal%5D)">Characterization of supramolecular polymers.</a> Chem. Soc. Rev. 41, 5922-5932 (2012).</li>
<li>Berne, B. J., Pecora, R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBerne%2C+BJ+%22Dynamic+Light+Scattering+with+Applications+to+Chemistry%2C+Biology+and+Physics%22">Dynamic Light Scattering with Applications to Chemistry, Biology and Physics</a>. , Dover Publications, Inc. (2000).</li>
<li>Phillies, G. D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+demonstration+of+ruultiple-scattering+suppression+in+quasielastic-light-scattering+spectroscopy+by+homodyne+coincidence+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Rev.+A%22%5BJournal%5D)">Experimental demonstration of ruultiple-scattering suppression in quasielastic-light-scattering spectroscopy by homodyne coincidence techniques.</a> Phys. Rev. A. 24, 1939-1943 (1981).</li>
<li>Phillies, G. D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+multiple+scattering+effects+in+quasielastic+light+scattering+by+homodyne+crosscorrelation+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Chem.+Phys%22%5BJournal%5D)">Suppression of multiple scattering effects in quasielastic light scattering by homodyne crosscorrelation techniques.</a> J. Chem. Phys. 74, 260-262 (1981).</li>
<li>Ishii, K., Yoshida, R., Iwai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-scattering+spectroscopy+for+extremely+dense+colloidal+suspensions+by+use+of+a+low-coherence+interferometer%5BTitle%5D)+AND+%22Opt.+Lett%22%5BJournal%5D)">Single-scattering spectroscopy for extremely dense colloidal suspensions by use of a low-coherence interferometer.</a> Opt. Lett. 30, 555-557 (2005).</li>
<li>Xia, H., Ishi, K., Iwai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrodynamic+Radius+Sizing+of+Nanoparticles+in+Dense+Polydisperse+Media+by+Low-Coherence+Dynamic+Light+Scattering%5BTitle%5D)+AND+%22Jpn.+J.+Appl.+Phys%22%5BJournal%5D)">Hydrodynamic Radius Sizing of Nanoparticles in Dense Polydisperse Media by Low-Coherence Dynamic Light Scattering.</a> Jpn. J. Appl. Phys. 44, 6261-6264 (2005).</li>
<li>Maret, G., Wolf, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+light+scattering+from+disordered+media.+The+effect+of+brownian+motion+of+scatterers%5BTitle%5D)+AND+%22Z.+Phys.+B%22%5BJournal%5D)">Multiple light scattering from disordered media. The effect of brownian motion of scatterers.</a> Z. Phys. B. 65, 409-413 (1987).</li>
<li>Pine, D. J., Weitz, D. A., Chaikin, P. M., Herbolzheimer, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diffusing+wave+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Rev.+Lett%22%5BJournal%5D)">Diffusing wave spectroscopy.</a> Phys. Rev. Lett. 60, 1134-1137 (1988).</li>
<li>Cerbino, R., Trappe, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+Dynamic+Microscopy%3A+ProbingWave+Vector+Dependent+Dynamics+with+a+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Rev.+Lett%22%5BJournal%5D)">Differential Dynamic Microscopy: ProbingWave Vector Dependent Dynamics with a Microscope.</a> Phys. Rev. Lett. 108, 188102(2012).</li>
<li>Lu, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterizing+Concentrated%2C+Multiply+Scattering%2C+and+Actively+Driven+Fluorescent+Systems+with+Confocal+Differential+Dynamic+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Rev.+Lett%22%5BJournal%5D)">Characterizing Concentrated, Multiply Scattering, and Actively Driven Fluorescent Systems with Confocal Differential Dynamic Microscopy.</a> Phys. Rev. Lett. 108, 218103(2012).</li>
<li>Provencher, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+constrained+regularization+method+for+investing+data+represented+by+linear+algebraic+or+integral+equations%5BTitle%5D)+AND+%22Comp.+Phys.+Comm%22%5BJournal%5D)">A constrained regularization method for investing data represented by linear algebraic or integral equations.</a> Comp. Phys. Comm. 27, 213-227 (1982).</li>
<li>Provencher, S. W., Stepanek, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+analysis+of+dynamic+light+scattering+autocorrelation+functions%5BTitle%5D)+AND+%22Part.+Part.+Syst.+Charact%22%5BJournal%5D)">Global analysis of dynamic light scattering autocorrelation functions.</a> Part. Part. Syst. Charact. 13, 291(1996).</li>
<li>Takata, S., Norisuye, T., Shibayama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small-angle+Neutron+Scattering+Study+on+Preparation+Temperature+Dependence+of+Thermosensitive+Gels%5BTitle%5D)+AND+%22Macromolecules%22%5BJournal%5D)">Small-angle Neutron Scattering Study on Preparation Temperature Dependence of Thermosensitive Gels.</a> Macromolecules. 35, 4779-4784 (2002).</li>
<li>Pusey, P. N., van Megen, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+Light+Scattering+by+Non-Ergodic+Media%5BTitle%5D)+AND+%22Physica+A%22%5BJournal%5D)">Dynamic Light Scattering by Non-Ergodic Media.</a> Physica A. 157, 705-741 (1989).</li>
<li>Chu, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aChu%2C+B+%22Laser+Light+Scattering.+2nd+Ed%22">Laser Light Scattering. 2nd Ed</a>. , Academic Press. (1991).</li>
<li>Shibayama, M., Tanaka, T., Han, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small-Angle+Neutron-Scattering+Study+on+Poly%28N-Isopropyl+Acrylamide%29+Gels+near+Their+Volume-Phase+Transition-Temperature%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Chem.+Phys%22%5BJournal%5D)">Small-Angle Neutron-Scattering Study on Poly(N-Isopropyl Acrylamide) Gels near Their Volume-Phase Transition-Temperature.</a> J. Chem. Phys. 97, 6829-6841 (1992).</li>
<li>Tanaka, T., Sato, E., Hirokawa, Y., Hirotsu, S., Peetermans, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+Kinetics+of+Volume+Phase+Transition+of+Gels%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Rev.+Lett%22%5BJournal%5D)">Critical Kinetics of Volume Phase Transition of Gels.</a> Phys. Rev. Lett. 55, 2455-2458 (1985).</li>
<li>Hiroi, T., Ata, S., Shibayama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transitions+of+Aggregation+States+for+Concentrated+Carbon+Nanotube+Dispersion%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Phys.+Chem.+C%22%5BJournal%5D)">Transitions of Aggregation States for Concentrated Carbon Nanotube Dispersion.</a> J. Phys. Chem. C. 120, 5776-5782 (2016).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

משרעת הראשונית של פונקצית קורלציה הזמן תלוי בכבדות על מוקד, כפי שמוצג באיור 2 (א). זה לכאורה סותר את העובדה שהפתרון הוא הומוגני (למעט שכבה דקה על הממשק) 8. וריאציה זו משרעת הראשונית מיוחסת וריאציה בסך של אור מוחזר. התיאוריה heterodyne חלקית 16 צופה כי משרעת הראשונית, A, עוצמת אור מפוזר, אני s, ואת עוצמת האור המוחזר, I r, יקיימו את הנוסחה 1 <img alt="משוואה 2" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq2.jpg"> משוואה זו מראה כי גדול I r הופך, א הקטן הופך. לכן, הוא מופחת על ידי הגדרת מוקדי העמדה הקרובה לממשק. רשות האישורים הקבוע D דיפוזיה לכאורהn להיות מושגת על ידי התאמת פונקצית קורלציה זמן במקרה של פתרונות monodisperse: <img alt="משוואה 3" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq3.jpg"> איפה <img alt="משוואה 4" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq4.jpg"> . במקרה זה, n היא מקדמת השבירה של הממס (מים, 1.33), θ היא הזווית המפוזרת (180 °), ו λ הוא אורך הגל של אור (514.5 nm). מאז אנחנו מוחלים גיאומטרית backscattering, הערך של q הוא קבוע. עם זאת, בשלב זה נפתר באמצעות אורכי גל שונים של אור. יש לציין כי כל סוג של מקור לייזר גל רציף זמין לבנות מיקרוסקופ DLS. הודות נפח המוקרן הקטן, גורם קוהרנטיות 17 מוערך יותר 0.99 והוא זניח. לקבלת פתרונות polydisperse, פונקצית ההתפלגות של D של מתקבלת על ידי טרנספורמציה Laplace ההפוכה. ה heterodyne חלקיתEory גם צופה כי D A אינו זהה D הדיפוזיה בפועל. קבועי דיפוזיה שני אלה יקיימו את המשוואה הבאה: <img alt="משוואה 5" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq5.jpg"> הדי דיפוזיה המתמידים מומר h הידרודינמית רדיוס R באמצעות משוואת איינשטיין-סטוקס 4. כאשר A = 1, מערכת היחסים הזאת הולכת D A = D. במקרה זה, תהליך המרת נתונים הוא זהה לזה של פיזור אור דינאמי המשותף. הקו האדום שמוצג באיור 2 (ב) מתאים במקרה זה. לעומת זאת, מערכת היחסים הזאת הולכת D A = 0.5 D על גבול A → 0. לכן, הגודל מוערך פעמים גדולות כמו הגודל האמיתי כאשר A הוא קטן (למעשה, פחות מ 0.2), כפי שמוצג על ידי הקו הכחול של איור 2 (ב) אנו יודעים כי הוא קטן משמעותי, הציר האופקי יכול להיות מוזז, כפי שמוצג באיור 2 (ג). באופן עקרוני, אנו יכולים להמיר D לתוך D עבור כל ערך של A. בפועל, עם זאת, עדיף להגדיר את משרעת הראשונית קטן מ -0.2, מאז פשוט קירוב D של ~ 0.5 D נכון. המאפיינים הבולטים של טכניקת מיקרוסקופ פיזור אור דינאמי הודגמו באמצעות פתרון PNIPA. הקונפורמציה של PNIPA מעל ומתחת LCST נחקרה בהרחבה באמצעות נויטרונים קטן זווית פיזור 15,18. לעומת זאת, פיזור אור דינאמי לא נוצל לניתוח PNIPA מעל LCST בגלל העכירות שלה 19. בעיה זו נפתרה על ידי המיקרוסקופ פיזור אור דינאמי, כפי שמוצג איורים 3 (א) ו- (ב). גודלו של אגרגטים אלה הוא מספר &amp;# 181; מ ', אשר לא ניתן להשיג גם על ידי פיזור קרני רנטגן / ניטרוני זווית קטנה או טכניקות פיזור אור קונבנציונליות. מדידות זמן נפתר באמצעות מערכת זו לתת מידע על תהליך הצבירה במהלך שינוי הטמפרטורה. החיסרון של המיקרוסקופ פיזור אור דינאמי מודגם גם באיור 3. לקבלת תוצאה מתחת LCST, פונקציית המתאם זמן מושפעת במידה רבה על ידי כמות קטנה מאוד של הנוכחי אבק (הקווים השחורים באיור 3). לדוגמה, פונקציית המתאם הזמן אינו להירקב לגמרי, אפילו עם זמני מתאם בסדר גודל של 1.0 s. הסיבה לכך היא כי הנפח מוקרן עם המנגנון הזה (כ 1.0 מיקרומטר) קטן באופן משמעותי מזה מוקרן עם מנגנון פיזור אור דינאמי הרגיל (כ 100 מיקרומטר). במקרים בהם עוצמת אור מפוזר חלש, האות מוסתר על ידי רעש, כגון לנזקים שנגרמו עקב sכמויות בקניון אבק הפתרון. לכן, שלוש פסגות שמוצגות באיור 3 (ב) לא יכולות להיות חשיבות כמותית למרות הסדר הכללי של הגודל הוא משמעותי. שים לב scatterer כזה חלש יכול להימדד על ידי מנגנון פיזור אור דינאמי קונבנציונאלי. אנחנו הוכחנו כי מיקרוסקופ פיזור אור דינאמי מאפשר לנו למדוד הן דגימות שקופות עכורות עם אותו ההתקנה. מאז המרחק האופטי בדגימות הוא קצר, טכניקה זו יכולה להיות מיושמת על דגימות אור קליטות חזקות, כגון השעיות-צינורות פחמן 20. בנוסף, בשל ברזולוציה מרחבית גבוהה, טכניקה זו יכולה להיות מיושמת על תאים ביולוגיים. עבור היישום שלה לביולוגיה, שיטה זו יכולה גם להיות משולבת עם שיטות הדמיה אחרות, כגון קרינת הדמית ראמאן. לפיכך, אנו סבורים כי מיקרוסקופ פיזור אור דינאמי הוא כלי רב עוצמה עבור מגוון רחב של תחומי מחקר.

גודל החלקיקים הוא אחד המאפיינים הבסיסיים ביותר של תמיסות קולואידיות ופולימריות. טכניקות רבות משמשות למדידת גודל החלקיקים. ניתן למדוד גדלי חלקיקים של 1.0 מיקרומטר ומעלה ישירות באמצעות מיקרוסקופ אופטי. עבור חלקיקים קטנים יותר, נעשה שימוש בטכניקות חלופיות, כגון עקיפה בלייזר, מיקרוסקופ אלקטרונים או מיקרוסקופ כוח אטומי2,3. פיזור אור דינמי הוא טכניקה נפוצה למדידת התפלגות גודל החלקיקים בתמיסות4. התוצאות המתקבלות בטכניקה זו אינן נגזרות מתמונות של החלקיקים אלא מהזמן האופייני של התנודות בעוצמת האור המפוזר. תנודות אלו מקורן בתנועה בראונית, המאופיינת בקבוע דיפוזיה. התפלגות הגודל מתקבלת מהתפלגות קבועי הדיפוזיה באמצעות משוואת איינשטיין-סטוקס. בשל פשטותו, פיזור אור דינמי נמצא בשימוש נרחב להערכה שגרתית של תמיסות, כגון צבעים וקולואידים למזון.
טיפול מקדים נדרש עבור רוב הטכניקות המשמשות למדידת גודל החלקיקים של דגימות תמיסה. במקרה של מיקרוסקופ אלקטרונים ומיקרוסקופ כוח אטומי, יש לנתח את הדגימה בתנאי ואקום. לכן, קשה לצפות בדגימות בצורתן המקורית. יתר על כן, עבור עקיפה של לייזר ופיזור אור דינמי, ניתן למדוד רק דגימות מדוללות ללא פיזור וספיגת אור מרובים. כדי להתגבר על קושי זה, הוצעו מספר טכניקות חדשות למדידת פיזור אור דינמי מתמיסות לא מדוללות ומרוכזות, כגון ספקטרוסקופיה צולבת5,6, פיזור אור דינמי בקוהרנטיות נמוכה7,8, ספקטרוסקופיה של גל דיפוזיה9,10 ומיקרוסקופיה דינמית דיפרנציאלית11,12.
פיתחנו מכשיר חדש שנקרא מיקרוסקופ פיזור אורדינמי 1. מכשיר זה מאפשר לנו למדוד דגימות עכורות ללא דילול באמצעות מערכת אופטית קונפוקלית שבה פיזור מרובה מתבטל באמצעות חור סיכה. עם זאת, הליך המדידה וניתוח הנתונים מעט מסובכים יותר מאלה של מכשירים זמינים מסחרית. סרטון זה מסביר את הליך המדידה וניתוח הנתונים בפירוט באמצעות ניתוח הפולימר המגיב לטמפרטורה, פולי (N-isopropylacrylamide), כדוגמה.

<table><tbody><tr><td>N-isopropylacrylamide, 98%</td> <td>Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.</td><td>I0401</td><td></td></tr><tr><td>טולואן, 99%</td> <td>Wako Pure Chemical Industries, Ltd.</td><td>201-01876</td><td></td></tr><tr><td>אתר נפט, טמפרטורת זיקוק 30 ~ 60 & deg; סי</td><td>וואקו תעשיות כימיות טהורות בע"מ</td><td>169-22565</td><td></td></tr><tr><td>N,N,N',N'-tetramethylethylenediamine, 99%</td> <td>Sigma</td><td>T9281</td><td></td></tr><tr><td>אמוניום פרסולפט, 98%</td> <td>Sigma</td><td>248614</td><td></td></tr><tr><td>תרחיף לטקס פוליסטירן, 1 wt%</td> <td>Duke Scientific Corporation</td><td>3500A</td><td></td></tr><tr><td>argon</td><td>Koike Sanso Kogyo Co., Ltd.</td><td></td><td>טוהר > 99.999 נפח%</td></tr><tr><td>שקופית חלל</td><td>Matsunami Glass Ind., Ltd.</td><td>83-0336</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ הפוך</td><td>Nikon Instech Co., Ltd.</td><td>ECLIPSE Ti-U</td><td></td></tr><tr><td>תרמו צלחת</td><td>Tokai להיט ושות', בע"מ</td><td>TP-108R-C</td><td></td></tr><tr><td>לייזר במצב מוצק</td><td>קוהרנטי</td><td>OBIS 488LX</td><td></td></tr><tr><td>מפולת פוטודיודה</td><td>ALV-GmbH</td><td>ALV-High Q.E. מפולת צילום דיודה</td><td></td></tr><tr><td>מתאם</td><td>ALV-GmbH</td><td>ALV-5000 / EPP</td><td></td></tr></tbody></table>

מדידת הפצת החלקיקים גודל פתרונות דלוחים ידי dynamic light פיזור מיקרוסקופי

Measurement of Particle Size Distribution in Turbid Solutions by Dynamic Light Scattering Microscopy

מתואר פרוטוקול למדידת פוליפיזוריות של תמיסות פולימר מרוכזות באמצעות פיזור אור דינמי. פיזור אור דינמי הוא טכניקה המשמשת למדידת התפלגות הגודל של תמיסות פולימריות או חלקיקים קולואידים. למרות שטכניקה זו נמצאת בשימוש נרחב להערכת תמיסות פולימריות, קשה למדוד את גודל החלקיקים בתמיסות מרוכזות בשל אפקט הפיזור המרובה או ספיגת האור החזקה. לכן יש לדלל את התמיסות המרוכזות לפני המדידה. יישום הרכיב האופטי הקונפוקלי במיקרוסקופ פיזור אורדינמי 1 עוזר להתגבר על מחסום זה. באמצעות מערכת מיקרוסקופית כזו, ניתן לנתח מערכות שקופות ועכורות תחת אותו מערך ניסוי ללא דילול. כדוגמה מייצגת, בוצעה מדידת התפלגות גודל של תמיסת פולימר מגיבה לטמפרטורה. הגדלים של שרשראות הפולימר בתמיסה מימית היו כמה עשרות ננומטרים בטמפרטורה מתחת לטמפרטורת התמיסה הקריטית הנמוכה יותר (LCST). לעומת זאת, הגדלים גדלו ליותר מ-1.0 מיקרומטר כאשר הם מעל ה-LCST. תוצאה זו עולה בקנה אחד עם התצפית שהתמיסה הפכה עכורה מעל ה-LCST.

זמן פונקציות קורלציה של עוצמת האור התפזרו לבתיהם השעיה לטקס קלקר (רדיוס החלקיק: 50 ננומטר) נמדדו בנקודות מוקד שונים, כפי שמוצג באיור 2 (א). פונקציות קורלציה אלה הוסבו פונקציות ההתפלגות של רדיוס הידרודינמית ידי טרנספורמציה Laplace ההופכי (עיין איור 2 (ב) ו- (ג)). שימוש באותו הליך, פונקציות קורלציה זמן פונקציות ההפצה של רדיוס הידרודינמית של הפתרון PNIPA התקבלו במהירות של 25 ° C ו -35 ° C, בהתאמה. איורים 3 (א) ו- (ב) להראות את פונקציות קורלציה הזמן של עוצמת האור המפוזרת פונקציות התפלגות גודל מקביל פתרון PNIPA להלן (25 ° C) ומעלה (35 ° C) את LCST. תפקידי התפלגות הגודל התקבלו על ידי הפיכת Laplace הפוך ואחריותיקון של heterodyne חלקית. רדיוס הידרודינמית הממוצע מתחת LCST הוא כמה עשרות ננומטרים, אשר אופיינית עבור פתרונות פולימר. לעומת זאת, רדיוס הידרודינמית מעל LCST הוא כ 1.0 מיקרומטר. תוצאה זו עולה בקנה אחד עם העובדה כי הפתרון הוא עכור מעל LCST. הקווים האדומים וכחולים באיור 3 מייצגים את התפלגות הגודל של פתרונות PNIPA מתקבלים מייד לאחר ו -20 דקות לאחר הפתרון הפכו עכורות, בהתאמה. איור 3 (ב) מצביע בבירור על הגידול של הצבירה. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/54885/54885fig1.jpg"> באיור 1. שרטוטים של המיקרוסקופ פיזור אור דינאמי. חריר (PH), קרן splitter (BS), מקטב (Pol), ו photodiode מפולת (APD). <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54885/54885fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה</a>גרסה גדולה יותר של דמות זו. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/54885/54885fig2.jpg"> איור 2. תוצאות עבור נציג השעית לטקס קלקר. (א) פונקציות קורלציה זמן של עוצמת אור הפזורה השעייתו לטקס קלקר. הרדיוס הנקוב הוא 50 ננומטר ואת הריכוז הוא 0.1% WT. שני מערכי נתונים התקבלו נקודות פיזור שונות. (ב), (ג) פונקציות התפלגות הגודל מתאימות עבור ההשעיה לטכס קלקר שהשיגו שינוי Laplace ההופכי של (א). הקו האדום תואם את פונקצית קורלציה שזמנה משרעת ראשוני הוא כ 1.0, ואת הקו הכחול שקולה לזו עם משרעת ראשונית כי הוא כ 0.2. הציר האופקי חושב ללא (ב) ועם (ג) בהתחשב השפעת אִבּוּך חלקית (PHD) כאשר &lt;&lt; ; 1. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54885/54885fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/54885/54885fig3.jpg"> איור 3. תוצאות עבור נציג פתרון PNIPA. (א) פונקציות קורלציה זמן של עוצמת אור הפזורה לפתרון PNIPA. (ב) תפקידי התפלגות הגודל מתאימים פתרון PNIPA שהשיג שינוי Laplace ההופכי של (א). הציר האופקי חושב בהתחשב השפעת אִבּוּך חלקית עבור כל קבוצת נתונים. הקו השחור מייצג את הנתונים שהתקבלו על 25 מעלות צלזיוס. הקו האדום מייצג את הנתונים שהתקבלו רק לאחר הפתרון פנה עכור (35 מעלות צלזיוס). הקו הכחול מייצג את הנתונים המתקבלים לאחר מדידה של 20 דק 'של הקו האדום./54885/54885fig3large.jpg "Target =" _ blank "&gt; לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

פרוטוקול עבור המדידה הישירה של התפלגות גודל חלקיקי תמיסות מרוכזות באמצעות מיקרוסקופ פיזור אור דינאמי מוצג.

מדידת הפצת החלקיקים גודל פתרונות דלוחים ידי Dynamic Light פיזור מיקרוסקופי

A protocol for measuring polydispersity of concentrated polymer solutions using dynamic light scattering is described. Dynamic light scattering is a ...

המטרה הכוללת של ניסוי זה היא להדגים שניתן להשתמש בפיזור אור דינמי ובמיקרוסקופיה קונפוקלית כדי למדוד את התפלגות גודל החלקיקים בתמיסות עכורות ללא דילול. זוהי ההגדרה למיקרוסקופ פיזור האור הדינמי. יש לו לייזר מצב מוצק המסוגל לפעולת גל רציפה של 30 מיליוואט ב-488 ננומטר.יש גם פוטו-דיודה מפולת, מתאם אוטומטי המחובר למחשב למדידות. למיקרוסקופ ההפוך בהתקנה יש שלב עם ווסת טמפרטורה. הקופסה מכילה את שאר האלמנטים האופטיים הנדרשים לניסוי.סכימה זו מספקת תצוגה מלאה יותר של הפריסה עבור ההתקנה. לאחר עיצוב פרופיל האלומה, הקרן מוכנסת למיקרוסקופ. פיזור האור מתקבל עם גיאומטריית פיזור אחורית ומונחה לגלאי.מראת שיגור מאפשרת לצפות בחלק מהאור המוחזר באמצעות מצלמת CCD. יש להכין את הדגימות לניסוי יום מראש. הכנת הדגימה דורשת 20 מיליליטר של מים נטולי גז, נטולי יונים וכן NIPA מטוהרים.בנוסף, הוא דורש כמויות קטנות של TMEDA ואמוניום פרסולפט. שלבי ההכנה עושים שימוש גם באמבט מי קרח על בוחש, שני כלי תגובה, רדיד אלומיניום ומקור לזרימת גז ארגון. התחל במדידת 9.5 מיליליטר של מים נטולי גזים ונטולי יונים לתוך כלי תגובה.מוסיפים את ה-NIPA למים. לאחר מכן, העבירו את כלי התגובה לאמבט מי הקרח על המערבל, והוסיפו את מוט הערבוב. השתמש בנייר אלומיניום כדי לכסות את האמבטיה ואת הכלי כדי להגן על התגובה מפני אור.השתמש בקצה פיפט המחובר למקור הארגון כדי לארגן זרימת ארגון מתונה לתמיסה. הפעל את המערבל כדי לערבב בעדינות את התמיסה למשך 10 דקות. לאחר מכן, השתמש במיקרופיפט כדי למדוד 11.9 מיקרוליטר של TMEDA.בקצרה, משוך את נייר הכסף לאחור כדי להוסיף את ה-TMEDA לתמיסה ולאחר מכן המשך לערבב תחת גז ארגון למשך דקה נוספת. בזמן ערבוב הדגימה, עבדו עם כלי התגובה השני. הכניסו 4 מיליגרם אמוניום פרסולפט לכלי.לאחר מכן, הוסף 0.5 מיליליטר מים נטולי גז ונטולי יונים. כאשר האמוניום פרסולפט התמוסס, הוסף את התמיסה לתמיסת הדגימה והמשיך לערבב במשך 30 שניות תחת זרימת ארגון. לאחר 30 שניות, הסר את כלי התגובה מאמבט הקרח והמערבל.לקראת האחסון מכסים את הכלי בנייר אלומיניום, מעבירים את התמיסה למקרר לאחסון בארבע מעלות צלזיוס למשך הלילה לפני השימוש בו. לאחר אחזור תמיסת הדגימה, הכינו אותה לשימוש עם המיקרוסקופ. הכינו שתי שקופיות חלל, שני כיסויי זכוכית עגולים ודבק מתאים, על מנת ליצור דגימה ושקופית התייחסות סטנדרטית.עבור שקופית הדגימה, מדוד 60 מיקרוליטר מתמיסת הדגימה. הניחו את התמיסה באחת ממגלשות החלל. מכסים את התמיסה בכיסוי עגול, נזהרים לא ללכוד בועות אוויר.הסר עודפי תמיסה בעזרת מיקרופיט ומגבוני מעבדה. לאחר מכן, מרחו דבק על היקף הכיסוי על מנת לאטום את שקופית הפתרון. לאחר מכן, צור הפניה סטנדרטית.לשם כך, השתמש בתמיסת לטקס פוליסטירן 0.1 אחוז משקל. בשקופית החלל השנייה, הוסיפו 60 מיקרוליטר מתמיסת הלטקס מפוליסטירן, כסו אותה בכיסוי זכוכית וודאו שלא נלכדו בועות. לאחר הסרת כל תמיסה עודפת, יש למרוח דבק כדי לאטום את התמיסה בשקופית.עבור שתי השקופיות, הניחו לדבק להתייבש בטמפרטורת החדר. בשלב זה, קח את שקופית הייחוס למיקרוסקופ ההפוך המצויד בעדשה אובייקטיבית פי 10, והנח אותה על במת המיקרוסקופ. זכוכית הכיסוי צריכה להיות פונה כלפי מטה.המשך על ידי הנחת קרן דampמול הגלאי. לאחר מכן, החל את קרן הלייזר על הדגימה דרך עדשת האובייקטיב. עברו לעבודה עם עדשת האובייקטיב.התאם את גובה העדשה כדי להגדיר את נקודת המוקד. במבט עם ה-CCD, כאשר המטרה עולה ממיקומה הנמוך ביותר, התמונה המשתקפת תתמקד תחילה במשטח זכוכית הכיסוי. לאחר מכן הוא יתמקד בממשק בין זכוכית הכיסוי לדגימה.הוא יתמקד בפעם השלישית בממשק בין המדגם לזכוכית השקופיות. הגדר את נקודת המוקד בין ממשק דוגמת הכיסוי לממשק השקופיות לדוגמה. להחליש את האור המפוזר על ידי הפחתת עוצמת הלייזר.לאחר מכן, הסר את בלוק האלומה כדי להכניס אור מפוזר לגלאי. כשהוא מוכן, התחל מדידת מתאם זמן של 30 שניות באמצעות מחשב הבקרה. לאחר מכן, כוונן את נקודת המוקד של המיקרוסקופ לפני שתחזור על המדידה.השתמש במספר מוקדים כדי להשיג טווח רחב עבור המשרעת הראשונית של פונקציית מתאם הזמן. לאחר שנאספו מספיק נתונים, הנח בולם קרן מול הגלאי. במיקרוסקופ, הסר את שקופית הייחוס הסטנדרטית.התחל את תהליך מדידת הדגימה עם שלב מיקרוסקופ ריק והגדר את הטמפרטורה ל-25 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, הנח את שקופית הדגימה המוכנה על הבמה כשצד הכיסוי כלפי מטה. התאם את גובה עדשת המטרה כדי לזהות ממשק מדגם כיסוי.התאם אותו עוד יותר כדי למצוא את ממשק השקופיות לדוגמה. לצורך המדידה, הגדר את נקודת המוקד בין שני המיקומים הללו. הסר את הקורה דampמלפני הגלאי.במחשב, בצע מדידת מתאם זמן של 30 שניות. לאחר מכן, הגדר את טמפרטורת הבמה ל -35 מעלות צלזיוס. מכיוון שממוזג זה נמצא מעל טמפרטורת התמיסה הקריטית הנמוכה יותר, התמיסה תעבור משקוף לעכור.בצע מדידה נוספת של פונקציית מתאם הזמן. להלן פונקציות מתאם הזמן עבור תקן מתלי לטקס פוליסטירן בשני מוקדים שונים. העקומה האדומה תואמת לפונקציית מתאם זמן שהמשרעת ההתחלתית שלה היא בערך אחת.העקומה הכחולה מתאימה למשרעת התחלתית של כ-0.2. זוהי התפלגות הגודל המתקבלת על ידי התמרת לפלס הפוכה של הנתונים עם משרעת התחלתית של 0.2. החישוב לוקח בחשבון את ההשפעה של הטרודיניזציה חלקית.רדיוס החלקיקים הנומינלי הוא 50 ננומטר. פונקציות מתאם זמן אלו מיועדות לפולי (NIPA) מתחת ומעל לטמפרטורת תמיסה קריטית נמוכה יותר. העקומה השחורה תואמת למדידה ב-25 מעלות צלזיוס.העקומה האדומה מתאימה למדידה ב-35 מעלות צלזיוס, ומיד לאחר שהתמיסה הפכה לעכורה. העקומה הכחולה מיועדת למדידה ב-35 מעלות צלזיוס, 20 דקות לאחר שהתמיסה הפכה עכורה. להלן התפלגות הגודל המשויכת לכל אחד מתנאי המדידה.מתחת לטמפרטורת התמיסה הקריטית הנמוכה יותר, הרדיוס ההידרודינמי הממוצע הוא כמה עשיריות ננומטר. מעל הטמפרטורה הקריטית, הגודל הוא כמיקרומטר אחד. השינוי בעקומות עם ממוזג וזמן מרמז על צמיחת הצבירה.

measurement-particle-size-distribution-turbid-solutions-dynamic-light

Research

JoVE Journal

Chemistry

כימיה

פרוטוקול זה מתאר שיטה שחול להכנת שלפוחית ​​השומנים של מיקרון משנה גדלים עם רמה גבוהה של הומוגניות. שיטה זו משתמשת במערכת לחץ מבוקר עם מבוקרים זרימת שיעורי חנקן להכנת liposome. הכנה שומנים...

שחול קבוע לחץ שבשליטת שיטה להכנת בגודל ננו שלפוחית ​​שומנים

Source: Moore, M. D., et al. Alternative In Vitro Methods for the Determination of Viral Capsid Structural Integrity. J. Vis. Exp. (2017)The video demonstrates a protocol for monitoring the heat-induced aggregation of virus-like particles using dynamic light scattering (DLS). It begins with preparing a monodisperse suspension of purified particles. The sample is then loaded into a preheated DLS instrument. As the capsid proteins denature with heat, exposed hydrophobic regions cause particle...

Tracking Aggregation of Virus-Like Particles Using Dynamic Light Scattering

שיטה לבידוד אקסוזומים מדם מלא וניתוח נוסף על ידי מעקב אחר ננו-חלקיקים באמצעות מכשיר חצי אוטומטי מוצגת במאמר זה. הטכנולוגיה המוצגת מספקת שיטה רגישה ביותר להדמיה וניתוח חלקיקים בתרחיף נוזלי.

שיטה חדשנית לExosome כימות ומדידה גודל

פילמור ממטרים ללא עוררה מספק גישה אבי טיפוס ודגמים, לשחזור לסינתזה של פולי גירויים רגיש (-isopropylacrylamide N) microgels של התפלגות גודל הצרה. בסינתזה בפרוטוקול זה, אפיון פיזור אור ומעקב קרינת חלקיק בודד של microgels אלה או בהתקנה של מיקרוסקופיה רחב בתחום הם הפגינו.

סינתזה מבוקרת מעקב הקרינה של פולי אחיד מאוד (<em&gt; N</em&gt; -isopropylacrylamide) Microgels

כאן, אנו מציגים עבור הפיזור של ננו פרוטוקול הדרגתיים בתקשורת מימית עם אפיון בזמן אמת כדי לזהות את התנאים sonication אופטימלית, עוצמת ומשך עבור יציבות משופרת ואחידות של ננו-חלקיק דיספרסיות סטירול מבלי להשפיע על שלמות הדגימה.

פיזור של ננו בתקשורת מימית: לקראת פרוטוקול אופטימיזציה

פרוטוקול זה מתאר את הסינתזה של חלקיקים מגנטיים והערכה של תכונותיהם מחייב הדנ א באמצעות פיזור אור דינאמי ו electrophoretic. שיטה זו מתמקדת ניטור שינויים גודל החלקיקים, polydispersity שלהם, פוטנציאל זטה משטח החלקיקים אשר משחק מייג'ור תפקיד הכריכה של חומרים כגון ה-DNA.

חלקיקים מגנטיים-DNA מחייב ניתוח לפי פיזור אור דינאמי, Electrophoretic

כאן, פרוטוקול להחיל מתח על פתרון במהלך פיזור אור דינמי מדידות גודל החלקיקים עם כוונה לחקור את ההשפעה של מתח שינויי טמפרטורה על צבירת פולימר מוצג.

יישום מתח בניתוח מידת החלקיקים של פיזור אור דינמי

אנו מספקים פרוטוקולים ונתונים מייצגים עבור עיצוב, הרכבה, ואפיון מיקרו מורכבות מורכבים, חלקיקים ליבה פגז שנוצרו על ידי פוליאלקטרוליטים וטעונה הידרופילי מחויב לחסום הסופולימרים.

הרכבה ואפיון של מטלות מורכבות פוליאלקטרוליט

אנו מדגימים כיצד להשתמש במכשיר ניתוח ננו-חלקיקים חדשני כדי להעריך את התפלגות הגודל ואת ריכוז החלקיקים הכולל של שלל חוץ תאי מבודד רקמת שומן perigonadal עכבר ופלזמה אנושית.

ניתוח מעקב חלקיקים לכימות וקביעת גודל של שלל חוץ-תאי

פיזור אור דינמי (DLS) התגלה כבדיקה מתאימה להערכת גודל החלקיקים והתפלגותם של קומפלקסים של ברזל-פחמימות הניתנות תוך ורידי. עם זאת, הפרוטוקולים חסרים סטנדרטיזציה ויש לשנות אותם עבור כל קומפלקס ברזל-פחמימות שנותחו. הפרוטוקול הנוכחי מתאר את היישום ואת השיקולים המיוחדים לניתוח סוכרוז ברזל.

ניתוח פיזור אור דינמי לקביעת גודל החלקיקים של קומפלקסים ברזל-פחמימות

מיקרוסקופיה דינמית דיפרנציאלית (DDM) משלבת תכונות של פיזור אור דינמי ומיקרוסקופיה. כאן מוצג התהליך של שימוש ב- DDM כדי לאפיין רשתות שלד ציטוסקטון משוחזרות על ידי כימות הדינמיקה התת-מפוזרת והכלוב של חלקיקים ברשתות וימנטין והתנועה הבליסטית של מרוכבים פעילים המונעים על ידי מיוזין אקטין-מיקרוטובול.

כימות דינמיקת שלד ציטוסקלטון באמצעות מיקרוסקופיה דינמית דיפרנציאלית

למדו כיצד למדוד את התפלגות גודל החלקיקים בתמיסות עכורות ללא דילול באמצעות מיקרוסקופיית פיזור אור דינמי. שיטה זו מאפשרת ניתוח מדויק של תמיסות מרוכזות תוך שמירה על הריכוז המקורי.

מדידת הפצת החלקיקים גודל פתרונות דלוחים ידי Dynamic Light פיזור מיקרוסקופי

גלה סרטונים נוספים