Name: מניפולציה של Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) ולישון חולדות ועכברים ידי דיקור (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-12-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 6 s
Description: חקור את השפעות הדיקור על אפילפסיה ושינה במודלים של מכרסמים באמצעות רישום ECoG ו-EMG. שיטה זו מאפשרת ניתוח מדויק של פעילות מוחית ודפוסי שינה בחולדות ובעכברים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי מענקי משרד המדע והטכנולוגיה (MOST) MOST104-2410-H-002-053 ו-NSC99-2320-B-002-026-MY3. כתב היד הזה נערך והגהה על ידי מר בריאן צ'אנג, שיש לו ניסיון בתיקון מסמכים מקצועיים.

כל פרוטוקולי הניסוי אושרו על ידי ועדת הטיפול בבעלי החיים המוסדית השתמש (IACUC) של האוניברסיטה הלאומית טייוואן. 1. ניתוח Stereotaxic עבור אלקטרודות ECOG להשתיל, אלקטרודות EMG, המוח Thermistor, צינורית מדריך הזרקה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור חולדות (250 - 350 גר &#39;, 6 עד 8 שבועות בן ספראג-Dawley חולדות) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את החולדות על ידי הזרקת ה- IP עם 50 מ&quot;ג / ק&quot;ג zoletil. אשר את העומק הנאות של הרדמה על ידי התבוננות חוסר התגובה לאחר צובט את הכף האחורית. החל משחת עין, לגלח את הפרווה, לעקר את העור עם פתרון povidone- יוד 75% אתנול. להזריק (G פניצילין) אנטיביוטיקה כדי למנוע זיהום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כן אזמלים, מספריים, hemostats, gauzes, ומכונת כווייה לניתוח. לעקר הילוך gauzes כירורגית ידי חיטוי ואת הכווייה ידי אתנול 75%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף אוזן בר לתוך תעלת האוזן ואת הר חולדה אל stereotaxis. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימושאזמל, עושה חתך קו אמצע משוער 2 סנטימטר על הגולגולת לאורך קו בין שתי האוזניים, נע caudally. קליפ את שולי העור עם hemostats כדי לחשוף את הגולגולת להסיר את הרקמה על הגולגולת באמצעות אזמל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקדוח חורים שמונה (F1, F2, P1, P2, O1, O2, R1, R2 ו), כל כ 0.7 מ&quot;מ קוטר, על הגולגולת עם כלי רוטרי. בורג שמונה אלקטרודות ECOG על חזיתית, הקודקודית, ואת האונות העורפיות ואת המוח הקטן בשני שמאל ההמיספרות הימנית. אלקטרודות אלה משמשות לגילוי אפילפסיה מוקד. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש הקואורדינטות הבאות עבור אלקטרודות הקלטה: חזיתית (F1 ו- F2): הקדמי 2.0 מ&quot;מ עד גבחת ו 2.5 מ&quot;מ מן קו האמצע, הקודקודית (P1 ו- P2): הקדמי -2.0 מ&quot;מ עד גבחת ו +3.0 מ&quot;מ מן קו האמצע , ו עורפי (O1 ו- O2): -5.5 מ&quot;מ קדמי גבחת ו +3.0 מ&quot;מ מן הקו האמצע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים שתי אלקטרודות התייחסות (R1 ו- R2) מעל המוחון (קדמית -11.0 מ&quot;מ עד גבחת ו 4.0 מ&quot;מ מן midline). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעוד קבוצות נפרדות של חולדות, מקדחה שלושה חורים ומניחים שתי אלקטרודות EEG בורג מעל הקדמית הימנית (F2) או האונה הקודקודית (P2) של הקורטקס עם אותן נקודות הציון כמתואר בשלב 1.1.5.1. מניחים אלקטרודה EEG השלישי מעל המוחון שמאל (R1), אשר משמש כדי לבצע הארקה של בעלי חיים ולהפחית חפצים האות. אלקטרודות אלה משמשות המאשרים אפילפסיה כללית וניתוח בשלבי ערנות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרד את עור הצוואר ושריר והכנס שתי אלקטרודות EMG לתוך שריר הצוואר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקדוח חור נוסף על הגולגולת ומקום צינורית מדריך microinjection לתוך CEA (AP, 2.8 מ&quot;מ מן גבחת; ML, 4.2 מ&quot;מ; DV, 7.8 מ&quot;מ ביחס גבחת) שמאל בחולדות. הקואורדינטות מותאמות מאטלס עכברוש Paxinos ווטסון 10. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקדוח חור גדול (בקוטר של 1.6 מ&quot;מ) על הגולגולת והכניס thermistor 30 kV מכויל על פני השטח של קליפת המוח הקודקודית, אשר יהיה בצר מאוחר יותר, כדי מוניםTOR טמפרטורת קליפת המוח אצל חולדות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש גזה כויה כדי לעצור את הדימום כאשר היא מתרחשת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כביש המוביל המבודד מן האלקטרודות ECOG ואלקטרודות EMG כדי דום ולחבר את thermistor אל הגבול. מלט הכן ולהדריך צינורית אל הגולגולת עם אקריליק שיניים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פנקו את החתך מקומי עם polysporin (אבץ Bacitracin / polymyxin סולפט B) כדי למנוע זיהום. תן החיות הן איבופרופן פניצילין G במים למשך שבוע לאחר הניתוח. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור עכברים (20 - 30 גרם, 6 עד 8 שבועות בן C57BL / C עכברים) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את העכברים בזריקת IP עם 50 מ&quot;ג / קילו zoletil ולאשר את העומק הנאות של הרדמה על ידי התבוננות חוסר התגובה לאחר צובט את הכף האחורית. החל משח עין. אחרי גילוח הפרווה, לעקר את העור עם פתרון povidone יוד ואתנול 75%. להזריק (G פניצילין) אנטיביוטיקה כדי למנוע זיהום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף אוזן בר לתוך תעלת האוזןהר את העכבר על stereotaxis. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות אזמל, עושים חתך קו האמצע 1.5 ס&quot;מ בקירוב על הגולגולת לאורך קו בין שתי האוזניים, נע caudally. קליפ את שולי העור עם hemostats כדי לחשוף את הגולגולת להסיר את הרקמה על הגולגולת עם אזמל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקבו שני חורים בגולגולת עם מספריים כירורגיות ומניחים שתי אלקטרודות ECOG חוט על באונה הקדמית הימנית (F2: 2.0 מ&quot;מ עד גבחת ו 1.5 אל קו האמצע) ואת האונה הקודקודית השמאלית (P1: -3.0 מ&quot;מ עד גבחת ו -2.5 מ&quot;מ עד קו האמצע). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרד את עור הצוואר ושריר והכנס שתי אלקטרודות EMG לתוך שריר הצוואר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר המוביל המבודד מן האלקטרודות ECOG תיל אלקטרודות EMG למסופי הנקבה למחבר 2.54 מ&quot;מ, ולאחר מכן מלט לגולגולת עם אקריליק שיניים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פנקו את החתך מקומי עם polysporin (אבץ Bacitracin / polymyxin סולפט B) כדי למנוע זיהום. תן החיות הוא איבופרופן פניצילין G במי פיפי אחדk לאחר הניתוח. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר את כל החיות להתאושש במשך שבעה ימים לפני תחילת הניסויים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חולדות או עכברי בית בנפרד, בכלובי הקלטת פרט, בחדר המבודד שבו הטמפרטורה נשמרה 23 ± 1 ° C והאור: כהה (L: D) קצב נשלט בתוך 12: מחזור 12 שעות (40 W x 4 צינורות תאורה). ספק כרצונך מזון ומים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את ECOG, EMG, ו thermistor דרך לקשור אל מגברים שבוע לאחר הניתוח כדי להתחיל את ההקלטות. </li></ol> 2. הקמת אפילפסיה ייתכנו מיקוד, SE, ובספונטניות אפילפסיה חוזרות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחולדות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נהל 0.5 μL של pilocarpine (2.4 מ&quot;ג / μL) לתוך CEA השמאלי דרך צינורית הזרקת מדריך באמצעות משאבת microinjection. שיעור ההזרקה צריך להיות מוגדר ב 0.2 μL / דקה כדי לגרום מוקדי ייתכנו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> IP להזריק 300 מ&quot;ג / ק&quot;ג של pilocarpine לגרום EPI כלליתlepsy עם חוזרות SE. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור עכברים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> IP לנהל PTZ (0.035 מ&quot;ג / g משקל גוף עכבר) בנקודת ZT מסוימת בכל יום אחר. חמש זריקות רצופות תגרום להתפתחות של אפילפסיה כללית ספונטני recurrently. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור שתי חולדות ועכברים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להגביר את אותות ECOG ידי 5,000 ולסנן את bandpass האנלוגי בין 0.1 ו 40 רץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש A / D המרת לוח כדי להמיר את אותות ECoGs האנלוגיים לאותות דיגיטליים עם קצב דגימה של 128 רץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש תוכנה עבור בקיע חזותי ולנתח את ההופעה ומשך אפילפסיה. מדוד את ציר הזמן על מנת לייצג את משך הזמן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גדר אפילפסיה ECOG ידי הופעתו של קוצים אפילפטי עם אמפליטודות יותר מ -2 mV ועם משכים של יותר מ -30 s 13. </li></ol></li></ol> סיווג 3. ערנות הברית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחולדות<ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקבוע את מצבי הערנות באמצעות הפרמטרים רכשו ECoGs, EMG, טמפרטורות מוח, תנועה בתוך פרק 12-s של הקלטה. חבר את ECOG, EMG, ו thermistor דרך לקשור אל מגברים שבוע לאחר הניתוח כדי להתחיל את ההקלטה. ציון המדינות עם תוכנת מחוייט פי שלבי 3.1.5 - 3.1.7. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדוד פעילויות של תנועה באמצעות גלאי תנועה אינפרא אדומים, לשלב את האותות כל 1 s, ולאחסן את האותות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למדידת טמפרטורה קליפת המוח ולאחסן את האותות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לסווג מדינות ערנות פי הקריטריונים שהוגדרו בעבר שלנו 14. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ציון ער באמצעות המאפיינים הבאים: ECoGs-משרעת קטנה עם ספקטרום בתדירות גבוהה, כוח דלתא גבוה (0.5 - 4.0 הרץ), וכוח תטא נמוך (6.0 - 9.0 הרץ); פעילות של תנועה דומיננטית; פעילות EMG גבוהה; ובהדרגה הגדלת הטמפרטורה קליפת המוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ציון שנת NREM באמצעות followinמאפייני g: ECoGs הדומיננטי-גל דלתא עם אמפליטודות גדול, ירד פעילות EMG, טמפרטורת קליפת מוח מופחתת, ולא פעילות של תנועה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ציון שנת REM באמצעות המאפיינים הבאים: ירידה משרעת של ECoGs עם תדר תטא הדומיננטי, טמפרטורת קליפת המוח גדלה פתאום, פעילות EMG מינימאלית, פעילות של תנועה נמוכה עם עוויתות גוף. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור עכברים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על הסיווג של מדינות ערנות בעכברים כפי שנערך בחולדות, למעט אין טמפרטורת קליפת מוח שנרשמה בגין thermistor. </li></ol></li></ol> 4. ביצוע דיקור ידני EA בחולדות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העכברוש הוא מורדם לפרוטוקול EA. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אתר את נקודות הדיקור על ידי האנטומיה ולאשר עכבת עור נמוכה על נקודות הדיקור. הנורית מהבהבת כאשר לזהות עכבת העור הנמוכה. הערה: נקודות דיקור Fengchi ממוקמים 3 מ&quot;מ מן הקו החציוני האחורי להיותtween שתי האוזניים, על הצוואר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס מחטי נירוסטה אל נקודות הדיקור בעומק של 2 מ&quot;מ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עווית המחטים המוכנסות 10 פעמים כל 5 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות חשמלי פונקציונלי, לספק רכבת של פולסים biphasic (משך 150-מיקרו-שניות כל אחד) בעוצמה של 1 מילי-אמפר אל נקודות דיקור באמצעות מחט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע דיקור דמה או דמה EA כביקורת. </li></ol>

<ol><li>Regesta, G., Tanganelli, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+aspects+and+biological+bases+of+drug-resistant+epilepsies%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsy+Res%22%5BJournal%5D)">Clinical aspects and biological bases of drug-resistant epilepsies.</a> Epilepsy Res. 34 (2-3), 109-122 (1999).</li>
<li>Malow, B. A., Bowes, R. J., Lin, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictors+of+sleepiness+in+epilepsy+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep%22%5BJournal%5D)">Predictors of sleepiness in epilepsy patients.</a> Sleep. 20 (12), 1105-1110 (1997).</li>
<li>Stores, G., Wiggs, L., Campling, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep+disorders+and+their+relationship+to+psychological+disturbances+in+children+with+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Child+Care+Health+Dev%22%5BJournal%5D)">Sleep disorders and their relationship to psychological disturbances in children with epilepsy.</a> Child Care Health Dev. 24 (1), 5-19 (1998).</li>
<li>Yi, P. L., Tsai, C. H., Lin, J. G., Lee, C. C., Chang, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kindling+stimuli+delivered+at+different+times+in+the+sleep-wake+cycle%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep%22%5BJournal%5D)">Kindling stimuli delivered at different times in the sleep-wake cycle.</a> Sleep. 27 (2), 203-212 (2004).</li>
<li>Yi, P. L., Chen, Y. J., Lin, C. T., Chang, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Occurrence+of+epilepsy+at+different+zeitgeber+times+alters+sleep+homeostasis+differently+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep%22%5BJournal%5D)">Occurrence of epilepsy at different zeitgeber times alters sleep homeostasis differently in rats.</a> Sleep. 35 (12), 1651-1665 (2012).</li>
<li>Bazil, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep+and+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Neurol%22%5BJournal%5D)">Sleep and epilepsy.</a> Semin Neurol. 22, 321-327 (2002).</li>
<li>Yi, P. L., Lu, C. Y., Jou, S. B., Chang, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+frequency+electroacupuncture+suppress+focal+epilepsy+and+improves+epilepsy-induced+sleep+disruptions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Sci%22%5BJournal%5D)">Low frequency electroacupuncture suppress focal epilepsy and improves epilepsy-induced sleep disruptions.</a> J Biomed Sci. 22, 49(2015).</li>
<li>Yi, P. L., Lu, C. Y., Cheng, C. H., Tsai, Y. F., Lin, C. T., Chang, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+amygdala+opioid+receptors+by+electroacupuncture+of+Feng-Chi+%28GB20%29+acupoints+exacerbates+focal+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Complement+Altern+Med%22%5BJournal%5D)">Activation of amygdala opioid receptors by electroacupuncture of Feng-Chi (GB20) acupoints exacerbates focal epilepsy.</a> BMC Complement Altern Med. 13, 290(2013).</li>
<li>Yi, P. L., Lu, C. Y., Cheng, C. H., Tsai, Y. F., Lin, C. T., Chang, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amygdala+opioid+receptors+mediate+the+electroacupuncture-induced+deteriortation+of+sleep+disruptions+in+epilepsy+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Sci%22%5BJournal%5D)">Amygdala opioid receptors mediate the electroacupuncture-induced deteriortation of sleep disruptions in epilepsy rats.</a> J Biomed Sci. 20, 85(2013).</li>
<li>Paxinos, G., Watson, W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPaxinos%2C+G+%22The+Rat+Brain+in+Stereotaxic+Coordinates+%284th+edition%29%22">The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates (4th edition)</a>. , Academic Press. San Diego. (1998).</li>
<li>Siu, F. K. W., Lo, S. C. L., Leung, M. C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electro-acupuncture+potentiates+the+disulphide-reducing+activities+of+thioredoxin+system+by+increasing+thioredoxin+expression+in+ischemia-reperfused+rat+brains%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Electro-acupuncture potentiates the disulphide-reducing activities of thioredoxin system by increasing thioredoxin expression in ischemia-reperfused rat brains.</a> Life Sci. 77 (4), 386-399 (2005).</li>
<li>Yi, P. L., Tsai, C. H., Lin, J. G., Liu, H. J., Chang, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+electroacupuncture+at+%27Anmian%27+%28extra%29+acupoints+on+sleep+activities+in+rats%3A+the+implication+of+the+caudal+nucleus+tractus+solitaries%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Sci%22%5BJournal%5D)">Effects of electroacupuncture at 'Anmian' (extra) acupoints on sleep activities in rats: the implication of the caudal nucleus tractus solitaries.</a> J Biomed Sci. 11 (5), 579-590 (2004).</li>
<li>Jou, S. B., Kao, I. F., Yi, P. L., Chang, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrical+stimulation+of+left+anterior+thalamic+nucleus+with+high-frequency+and+low-intensity+currents+reduces+the+rate+of+pilocarpine-induced+epilepsy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Seizure%22%5BJournal%5D)">Electrical stimulation of left anterior thalamic nucleus with high-frequency and low-intensity currents reduces the rate of pilocarpine-induced epilepsy in rats.</a> Seizure. 22 (3), 221-229 (2012).</li>
<li>Chang, F. C., Opp, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blockade+of+corticotropin-releasing+hormone+receptors+reduces+spontaneous+waking+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Blockade of corticotropin-releasing hormone receptors reduces spontaneous waking in the rat.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 275 (3), Pt 2 793-802 (1998).</li>
<li>Cheng, C. H., Yi, P. L., Lin, J. G., Chang, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endogenous+opiates+in+the+nucleus+tractus+solitaries+mediate+electroacupuncture-induced+sleep+activities+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Evid+Based+Complement+Alternat+Med%22%5BJournal%5D)">Endogenous opiates in the nucleus tractus solitaries mediate electroacupuncture-induced sleep activities in rats.</a> Evid Based Complement Alternat Med. 2011, 159209(2011).</li>
<li>Tsui, P., Leung, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+effectiveness+between+manual+acupuncture+and+electro-acupuncture+on+patients+with+tennis+elbow%5BTitle%5D)+AND+%22Acupunct+Electrother+Res%22%5BJournal%5D)">Comparison of the effectiveness between manual acupuncture and electro-acupuncture on patients with tennis elbow.</a> Acupunct Electrother Res. 27 (2), 107-117 (2002).</li>
<li>Napadow, V., Makris, N., Liu, J., Kettner, N. W., Kwong, K. K., Hui, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+electroacupuncture+versus+manual+acupuncture+on+the+human+brain+as+measured+by+fMRI%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Brain+Mapp%22%5BJournal%5D)">Effects of electroacupuncture versus manual acupuncture on the human brain as measured by fMRI.</a> Hum Brain Mapp. 24 (3), 193-205 (2005).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

בחירת מודל חית אפילפסיה ריאלית חיונית לכל מטרה ניסיון. אחת המטרות שלנו היא להבהיר את ההשפעות של EA על דיכוי אפילפסיה. EA היא רפואה אלטרנטיבית עשוי להפגין האפקט הטיפולי ב אפילפסיה תועד בספרות הסינית העתיקה. עם זאת, קיים מחסור של ראיות מדעיות כדי להוכיח את זה. כדי לקבוע את ההשפעות של EA על אפילפסיה, התמקדנו בעיקר על ההשפעות של EA על אפילפסיה מוקד קלה, ולא על תפיסה חמורה כללית או SE. במחקר הקודם שלנו השתמשו במודל ייתכנו מוקדי בחולדות כדי להדגים את ההשפעות של בתדירות נמוכה (10 הרץ) בת...

אפילפסיה היא הפרעה נוירולוגית נפוצה אשר התקפים חוזרים להתרחש בכל אורך חיים של המטופל. רוב הישנויות אפילפטי יכול להיות נשלט היטב על ידי תרופות אנטי-אפילפטיות (AEDs). עם זאת, כ -30% מכלל חולי אפילפסיה לפתח עקשן אפילפסיה 1. הגורמים לאפילפסיה לישון הפרעות, אשר יכול להחמיר הישנות נוספת. ראיות מוכיחות כי אפילפסיה עלולה לשבש את השינה בלילה או עלול לגרום 2,3 ישנוניים בשעות יום מוגזמים. המחקרים הקודמים שלנו עוד מצביעי אפילפסיה המתרחשים בשלב צייטגבר (ZT) 0, כלומר, בתחילת תקופת אור האור: המחזור כהה, פוחתת שינה; זו מתווכת על ידי שחרור הורמון קורטיקוטרופין (CRH), גורם ההומיאוסטטית. אפילפסיה בבית ZT13 (תחילת התקופה האפלה) משפרת את הביטוי של גורם נוסף ההומיאוסטטית, interleukin-1 (IL-1), אשר מגביר שינה. מקצבי היממה שינה משתנים כאשר אפילפסיה מתרחשת ZT6, באמצע4,5 תקופת האור. מצד השני, בעיות השינה להחמיר עוד יותר את ההתקדמות והישנות של אפילפסיה 6. בהתבסס על הראיות הנ&quot;ל, אנו מנסים לחשוף שיטת טיפול אופטימלית זמנית לשלוט אפילפסיה למנוע הפרעות שינה בחולי אפילפסיה. אנחנו בעבר מצאנו electroacupuncture כי (EA) עם תדר גירוי של 10 הרץ, שבו כמות מסוימת של זרם מועברת לתוך נקודת הדיקור באמצעות מחט נירוסטה, בהצלחה מדכאת electrocorticogram (ECOG) פעילויות אפילפסיה והפרעות שינה הנגרמת אפילפסיה 7 . EA עם תדר גירוי 100 הרץ נוסף מידרדר פעילויות אפילפסיה והפרעות שינה בחולדות 8,9. ניסוי מוצלח זה תלוי בשלושה גורמים: ראשית, במודל חיה אפילפטי ריאלי; ושנית, שיטת הקלטה וניתוח שינה במכרסמים; שלישית, ביצועים מדויקים של דיקור וטיפול הדיוק של נקודות הדיקור locatiלפיירפוקס. אפילפסיה כבר מסווג לשני סוגים עיקריים: מוקדי אפילפסיה אפילפסיה כללית. אנחנו מעוניינים אפילפסיה של האונה הטמפורלית מוקדי (ייתכנו), אפילפסיה כללית, סטטוס אפילפטיקוס (SE), ואת הישנות של אפילפסיה כללית ספונטנית. לכן, מניפולציות שונות מוחלות ליצור מודלי אפילפסיה מתאימים לניסוי שלנו. כדי להקים מוקדי ייתכנו, מינון נמוך של pilocarpine מנוהל לתוך הגרעין המרכזי הותיר של האמיגדלה (CEA). כדי לאמת את המודל הזה, שש אלקטרודות ECOG מושתלים על חזיתית (F1 &amp; F2), הקודקודית (P1 &amp; P2), ו העורפית (O1 &amp; O2) האונות ומשמאל ההמיספרות ימינה, ושוב שתי אלקטרודות הפניה (R1 &amp; R2) מונחות על המוח הקטן בשתי מחציות המוח. צינורית מדריך microinjection נוסף מושתל בניתוח לתוך שמאל CEA (AP, 2.8 מ&quot;מ מן גבחת; ML, 4.2 מ&quot;מ; DV, 7.8 מ&quot;מ ביחס גבחת). הקואורדינטות מותאמות מן Paxinos ו- Wעכברוש atson אטלס 10. אם מוקדי ייתכנו מושרה בהצלחה, רק ההקלטה מן האלקטרודה על קליפת הקודקודית השמאלית (P1), שנמצא ליד שמאל CEA, צריך לרכוש את ECoGs epileptiform דומיננטי, ללא ECoGs epileptiform משמעותי שנרשם בגין אלקטרודות ECOG אחרים. הזרקה (IP) זריקות של pilocarpine לעכברי לגרום להכליל אפילפסיה SE, אבל זה יכול להיות קטלני. חמש זריקות IP של pentylenetetrazol (PTZ) עם מרווח של יום אחד בין כל הזרקה בהצלחה לגרום לאפילפסיה כללית ספונטנית בעכברים וגם להבטיח את המשך קיומו של עכברים. שתי אלקטרודות חוט ECOG מושתלים לתוך הקורטקסים הקודקודית בעכברים לקבל אותות ECOG וכדי לאמת אפילפסיה חוזרים באופן ספונטני. Polysomnography (PSG) היא שיטה מקיפה להקליט שינויים פיזיולוגיים המתרחשים בזמן השינה, וזה יכול לסווג שינה באופן אובייקטיבי לשלבים שונים של תנועות עיניים בלתי מהירה (NREM) ו rתנועות עיניים apid שינה (REM). PSG רושמת פרמטרים של תפקודי הגוף, כולל גלי המוח (אלקטרואנצפלוגרם, EEG), תנועות עיניים (electrooculogram, EOG), צלילים שרירי השלד (electromyogram, EMG), קצב לב (רל, ECG), ורמות החמצן בדם ופרמטרים הנשימה. בחולדות, אנחנו מתעדים ECoGs, EMGs, טמפרטורת קליפת מוח, פעילות של תנועה לסווג מדינות ערנות למצב של ערות, שנת NREM, ולישון REM. ניתוח שינה בעכברים מתנהל באמצעות ECoGs, EMGs, ותוצאות הפעילות של תנועה. חולדות בניתוח מושתלים עם שלושה ECOG בורג אלקטרודות ליד חזיתית, הקודקודית, ואת הקורטקס של המוח הקטן הנגדי באמצעות ניתוח stereotaxic. נחישות שלאחר רכישה של מדינות הערנות (ערות, שנת NREM, ולישון REM) מתנהלת על פי הפרמטרים רכשו מן ECoGs, EMG, טמפרטורת מוח, פעילות של תנועה. קריטריונים מפורטים לסיווג התנהגות בעלי החיים בשתי חולדות ועכברים מתוארים tהוא פרוטוקול. חולדות ועכברים שניהם צריכים להיות מורדם עם מינון נמוך של zoletil (25 מ&quot;ג / ק&quot;ג), המהווה מחצית המינון של הרדמה מנוהל בדרך כלל במהלך ניתוח stereotaxic, לפני ביצוע דיקור ידנית או EA. מינון זה מאפשר חיות להתעורר 30 עד 35 דקות לאחר ההזרקה. כך או דיקור ידני או EA מתבצע בתחילת התקופה החשוכה, עם פרק זמן קבוע של 30 דקות, ולאחר כל חית מטופל ברציפות במשך שבועות עד שלושה ימים. EA זרמי גירוי מועברים לתוך נקודות דיקור בפרט באמצעות מחט מפלדת אלחלד מוכנסת לתוך נקודות הדיקור. זרם גירוי רכבת של פולסים מרובעים biphasic, שבו משך הדופק הוא 150 ms ואת עוצמת הגירוי היא 1 mA. אם מחט יבש משמש דיקור ידני, המחט מוכנסת לתוך נקודות הדיקור היא התעוות 10 פעמים כל 5 דקות. החלק הקשה של דיקור ידני או EA הוא למקם את נקודות הדיקור במכרסמים. location של נקודות דיקור ב חולדות או עכברים דומה המיקום האנטומי שלהם בבני אדם. לדוגמה, נקודות דיקור Fengchi הבילטרליים ממוקמים במרחק של כ -3 מ&quot;מ מקו החציוני האחורי על הצוואר, בין שתי האוזניים, הדומה המיקום האנטומי שלה בבני אדם 11. יתר על כן, נקודות הדיקור עם עכבה נמוכה על העור ניתן אישור נוסף. מניפולציה EA דיקור או אחיזת עיניים אחיזת עיניים הוא הכרחי עבור דיקור או ניסויים EA. דיקור דמה או EA דמה צריך להתבצע בכל נקודת דיקור אי הממוקם סמוך דיקור, כגון בסמוך לבית השחי 12. כדי בהצלחה לחקור את ההשפעות של דיקור או EA על אפילפסיה והפרעות שינה בעזרת אפילפסיה, מהגורמים הבאים חייבים להיות במקום: במודל חית אפילפטי ריאלי, הניתוח המדויק של ECoGs epileptiform ואת ההישנות של אפילפסיה, שיטה לסווג מדינות ערנות , ואת הביצועים של דיקור או EA המדויקים במכרסמים.

<table><tbody><tr><td><חזק>תרופות</חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>זולטיל</td><td>וירבאק</td><td></td><td>50 מ"ג/ק"ג i.p.</td></tr><tr><td>פילוקרפין</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>P6503</td><td>300 מ"ג/ק"ג i.p.; 1.2 מ"ג מיקרו הזרקה</td></tr><tr><td>PTZ</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>P6500</td><td>0.035 מ"ג/פוליספורין עכבר</td></tr><tr><td></td><td>פייזר</td><td></td><td></td></tr><tr><td><חזק>ניתוח</חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ECoG אלקטרודה</td><td>פלסטיק אחד</td><td>E363/20</td><td>אלקטרודה בורג לחולדות</td></tr><tr><td>הדום</td><td>פלסטיק אחד</td><td>MS363</td><td></td></tr><tr><td>צינורית</td><td>פלסטיק אחד</td><td>C315G/spc</td><td></td></tr><tr><td>תרמיסטור</td><td>אומגה הנדסה</td><td>44008</td><td></td></tr><tr><td>אקריליק שיניים</td><td>טמפרון</td><td></td><td></td></tr><tr><td>סטריאוטקסי מכשיר</td><td>סטולינג</td><td></td><td>זרועות דוראליות</td></tr> <tr><td><חזק>ציוד הקלטה</חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ECoG מגבר</td><td>Colbourn Instruments</td><td>V75-01</td><td></td></tr><tr><td>A/D Board</td><td>National Instruments</td><td>NI PCI-6033E</td><td></td></tr><tr><td>גלאי תנועה מבוססי אינפרא אדום</td><td>Biobserve GmbH</td><td>ICELUS</td> G-System AxoScope 10 Software Devices <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr> <<tr><td></td><td></td>strong>Acupuncture Needs<td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מחטי אל חלד</td><td>שנחאי Yanglong מאמרים רפואיים ושות'</td><td>32 מד x 1 אינץ'</td><td></td></tr><tr><td>פונקציות ממריץ חשמלי</td><td>I.T.O., יפן</td><td>Trio 300</td><td></td></tr><tr><td>AcuPen</td><td>Lhasa OMS</td><td>מצביע Excel II</td><td></td></tr></tbody></table>

מניפולציה של epileptiform electrocorticograms (ecogs) ולישון חולדות ועכברים ידי דיקור

Manipulation of Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) and Sleep in Rats and Mice by Acupuncture

הספרות הסינית העתיקה תיעדה כי לדיקור יש השפעות טיפוליות יעילות על אפילפסיה ונדודי שינה. עם זאת, יש מעט מחקר שחושף את המנגנונים האפשריים מאחורי השפעות אלה. כדי לחקור את השפעת הדיקור על אפילפסיה ושינה, יש לטפל במספר נושאים. הראשון הוא לזהות את נקודות הדיקור, המתאימות בין בני אדם, חולדות ועכברים. יתר על כן, יש לקבוע את עומק החדרת מחט הדיקור, מידת פיתול המחט בדיקור ידני ופרמטרי הגירוי לדיקור אלקטרו-אקופונקטורה (EA). כדי להעריך את השפעות הדיקור על אפילפסיה ושינה, נדרש מודל אפשרי של אפילפסיה במכרסמים. אנו נותנים פילוקרפין לתוך הגרעין המרכזי השמאלי של האמיגדלה (CeA) כדי לדמות אפילפסיה של האונה הרקתית המוקדית (TLE) בחולדות. הזרקה תוך-צפקית (IP) של פילוקרפין גורמת לאפילפסיה כללית וסטטוס אפילפטיקוס (SE) בחולדות. חמש זריקות IP של פנטילנטרזול (PTZ) עם מרווח של יום אחד בין כל זריקה גורמות בהצלחה לאפילפסיה כללית ספונטנית בעכברים. הקלטות של אלקטרוקורטיקוגרמות (ECoGs), אלקטרומיוגרמות (EMGs), טמפרטורת המוח ופעילות תנועתית משמשות לניתוח שינה בחולדות, בעוד ECoGs, EMG ופעילות תנועתית משמשות לניתוח שינה בעכברים. אלקטרודות ECoG מושתלות בקליפת המוח העורפית הקדמית, הקודקודית והנגדית, ותרמיסטור מושתל מעל קליפת המוח על ידי ניתוח סטריאוטקטי. אלקטרודות EMG מושתלות בשרירי הצוואר, וגלאי אינפרא אדום קובע את הפעילות התנועית. הקריטריונים לסיווג שלבי ערנות, כולל ערות, שנת תנועת עיניים מהירה (REM) ושינה שאינה REM (NREM) מבוססים על מידע מ-ECoGs, EMGs, טמפרטורת המוח ופעילות תנועתית. קריטריוני סיווג מפורטים מצוינים בטקסט.

ישנם דגמי חולדה ועכבר שונים כדי לספק את הצרכים של סוגי אפילפסיה שונים. כדי לגרום מוקדי ייתכנו, 0.5 μL של pilocarpine (2.4 מ&quot;ג / μL) מנוהל לתוך שמאל CEA. ECoGs epileptiform השולט נרכשים מן האלקטרודה ECOG על האונה הקודקודית של האונה השמאלית (איור 1 א: ב), ופעילויות אפילפטיים נדירים נאספות משאר האלקטרודות ECOG (איור 1 א: א, ג, ד, ה , ו-ו<...

מאמר זה מדגים את הביצועים של דיקור סיני, מודלים של אפילפסיה וניתוח שינה במכרסמים. מתוארים הליך הדיקור וזיהוי נקודות הדיקור. פילוקרפין או פנטילנטרזול (PTZ) משמשים לגרימת אפילפסיה. אלקטרוקורטיקוגרמה (ECoG), אלקטרומיוגרמה (EMG), טמפרטורת המוח ורישומי פעילות תנועתית משמשים לניתוח שינה.

מניפולציה של Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) ולישון חולדות ועכברים ידי דיקור

Ancient Chinese literature has documented that acupuncture possesses efficient therapeutic effects on epilepsy and insomnia. There is, however, little ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא להעריך אפילפסיה, שינה ואת ההשפעות של דיקור במודל חייים. שיטה זו יכולה לסייע במתן מענה לשאלות מפתח בתחום מדעי המוח לגבי האופן שבו ניתן להשריץ אפילפסיה, לנתח שינה ולבצע דיקור במודל של בעל חיים קטן. היתרונות העיקריים של טכניקה זו הם שניתן להשתיל במהירות ובקלות אלקטרודות קורטיקליות לטרליות ואלקטרודות מיוגרמה לטרליות באמצעות ניתוח סטריאוטקסי.את הפרוצדורה תדגים Yi-Jou Wu, סטודנטית לתואר שני מהמעבדות שלי. לאחר אישור עומק הסדציה המתאים על ידי היעדר תגובה לצביטה באצבע, יש למרוח פומדת עיניים לחולדה מסוג Spregg Dolly בת גיל ששה עד שמונה שבועות, שמשקלה 250 עד 350 גרם, מהקבוצה הראשונה. השתמשו במכונת גילוח כדי להסיר את הפרווה מחלקו העליון של הגולגולת.חטאו את העור באמצעות יישומים רצופים של תמיסת פובידון יוד ו-75% אתנול, ולאחר מכן מזריקו אנטיביוטיקה כדי למנוע זיהום. לאחר מכן, קבעו את בעל החיים למכשיר סטריאוטקסיס והכניסו מוט אוזן לתעלת האוזן. בעזרת סכין מנתחים, בצעו חתך גבי כך (caudal) של כ-2 סנטימטר בקו האמצע לאורך הגולגולת בין האוזניים.לאחר מכן, השתמשו בפינצטות המוסטטיות כדי לקבע את מקלטי העור, ובכך לחשוף את הגולגולת, והשתמשו בסכין ניתוח להסרת הרקמה. כאשר הגולגולת נקייה, השתמשו בכלי קידוח סיבובי כדי לקדוח שמונה חורים בקוטר של כ-0.7 מילימטר באונות הפרונטלית, הפריאטלית והאוקסיפיטלית ובמוח הקטן, הן בהמיספירה השמאלית והן בימנית של העצם החשופה. לאחר מכן, הברגו שמונה אלקטרודות של אלקטרוקורטיכוגרם לתוך החורים לצורך זיהוי אפילפסיה מוקדית.בקבוצה נפרדת של חולדות, קדחו שלושה חורים והניחו שתי אלקטרודות EEG מסוג בורג מעל האונות הפרונטלית והפריאטלית הימניות של קליפת המוח, באותן קואורדינטות כפי שנעשה בקבוצה הראשונה. לאחר מכן, הניחו אלקטרודת EEG שלישית מעל cerebellum שמאלי כדי להביא את בעל החיים להארקה ולהפחית ארטיפקטים של האות. הפרידו את עור הצוואר ואת השריר, והחדירו שתי אלקטרודות EMG אל תוך שרירי הצוואר.קדחו חור נוסף בגולגולת והניחו קנולה להנחיית מיקרו-הזרקה לתוך הגרעין המרכזי השמאלי של האמיגדלה. לאחר מכן, קדחו חור בקוטר 1.6 millimeter בגולגולת והחדירו תרמוסטור מכויל של 30 kilovolt אל פני השטח של קליפת המוח הפריאטלית (parietal cortex) כדי לנטר את טמפרטורת הקליפה. נתבו את מובילי האלקטרודות המבודדים של האלקטרוקורטיקוגרם והאלקטרומיוגרם אל פדסטל.השתמש באקריליק דנטלי כדי להדביק את הבסיס (pedestal), הנחה את הקנולה אל הגולגולת ולאחר מכן חבר את הטרמוסטר (thermoster) אל הכבל (tether). לאחר מכן, טפל בחתך באופן מקומי באמצעות פוליספורין למניעת זיהום, וספק לבעלי החיים מים המועשרים באיבופרופן ופניצילין G למשך שבוע לאחר הניתוח. כדי להשרות אפילפסיה מוקדית של האונה הרקתית, השתמש במשאבת מיקרו-הזרקה כדי להחדיר 0.5 µL של פילוקרפין לתוך הגרעין המרכזי השמאלי של האמיגדלה דרך קנולת ההזרקה, בקצב של 0.2 µL לדקה.כדי להשרות אפילפסיה כללית עם סטטוס אפילפטי חוזר, הזרק 300 milligrams per kilogram של pilocarpine IP. עבור דיקור סיני, ראשית אתר ידנית את נקודות הדיקור. לדוגמה, נקודות ה-feng chi ממוקמות במרחק של שלושה millimeters מהקו החציוני האחורי בין האוזניים בצוואר. לאחר אישור של עכבה נמוכה של העור בנקודות הדיקור הרלוונטיות, החדר מחטים מפלדת אל-חלד לתוך נקודות הדיקור לעומק של שני millimeter.לאחר מכן, באמצעות מעורר חשמלי תפקודי, העבירו רצף של 10 hertz המורכב מפולסים דו-פאזיים של 150 millisecond בעוצמה של one milliamp לנקודות הדיקור דרך המחט. כאן מוצג אלקטרוקורטיגרם אפילפטוגני דומיננטי שנרכש מאלקטרודת האלקטרוקורטיגרם באונה הפריאטלית של ההמיספרה השמאלית. לאחר מתן פילוקרפין, נרשמה פעילות אפילפטית נדירה בשאר אלקטרודות האלקטרוקורטיגרם, מה שמעיד על השראה מוצלחת של אפילפסיה מוקדית של האונה הטמפורלית.בתוך חמש דקות, מופיעות השפעות כולנרגיות חמורות על ההתנהגות, שחומרתן עולה בהדרגה עד להתרחשות פרכוס כללי באלקטרוקורטיגרם, שאחריו אירוע של סטטוס אפילפטיקוס. לא נצפו אלקטרוקורטיגרמים אפילפטיפורמיים במהלך תקופת החשכה שלאחר ההזרקה הראשונה של פנטילן טטרסול, או במהלך תקופת החשכה השנייה ביום שאינו יום הזרקה, ועד להזרקה החמישית של פנטילן טטרסול, יחד עם אפילפסיה כללית ספונטנית וחוזרת. מצב עירות מאופיין באלקטרומיוגרם בעוצמה גבוהה ובשפע של פעילות מוטורית, עם עלייה הדרגתית בטמפרטורה הקורטיקלית כאשר המצב הערני עובר משינה מסוג non-REM או REM לעירות.שינה מסוג Non-REM מאופיינת באלקטרוקורטיגרמים מסונכרנים בעלי אמפליטודה גבוהה ותדר נמוך, עם ירידה הדרגתית באמפליטודת האלקטרומיוגרם והיעדר פעילות מוטורית, וכן ירידה בטמפרטורה הקורטיקלית בעוד המצב הערני עובר מערנות לשינת NREM. במהלך שינת REM, גל האלקטרוקורטיגרם אינו מסונכרן ואמפליטודתו מופחתת. צפיפות ההספק הדומיננטית של האלקטרואנצפאלוגרם מופיעה בתדר הת'טא.פעילות האלקטרומיוגרמה היא הנמוכה ביותר, נצפה רעד גוף פאזי, וטמפרטורת הקורטקס עולה במהירות. מתן דיגוף חשמלי (electroacupuncture) בתדר של 100 הרץ בנקודות האקופונקטורה הפנג צ'י (feng chi) באופן דו-צדדי מחמיר את האלקטרוקורטיקוגרמות האפילפטופורמיות המושרות על ידי פילוקרפין, בעוד שדיגוף חשמלי בתדר של 10 הרץ מדכא את האלקטרוקורטיקוגרמות האפילפטופורמיות. יתרה מכך, מתן פילוקרפין לתוך הגרעין המרכזי השמאלי של האמיגדלה מדכא גם שינה שאינה REM במהלך תקופת האור במחזור של 12 שעות אור/חושך.אלקטרו-דיקור בתדר של 100 הרץ מחמיר עוד יותר את הדיכוי של שינה שאינה REM המושרה על ידי פילוקרפין. לעומת זאת, אלקטרו-דיקור בתדר של 10 הרץ בנקודות הדיקור בילטרליות feng chi מגביר את השינה שאינה REM כשלעצמה במהלך התקופה החשוכה, וחוסם את ההפחתה של שינה שאינה REM המושרית על ידי פילוקרפין במהלך התקופה המוארת. לאחר השליטה בטכניקה, ניתן להשלימה בתוך שעה וחצי אם היא מבוצעת כראוי.לפני ניסוי של פרוצדורה זו, חשוב לתרגל את מיומנות הניתוח הסטריאוטקסי עד להגעה לשליטה מלאה. לאחר פיתוחה, טכניקה זו סוללת את הדרך עבור חוקרים בתחום מדעי המוח לבחון את השפעות הדיקור באפילפסיה ובהפרעות שינה. לאחר צפייה בסרטון זה, תהיו בעלי הבנה טובה לגבי השתלה כירורגית של אלקטרודות לאלקטרואנצפלוגרם ואלקטרומיוגרם, קנולה מנחה וסמיסטר להערכת דפוסי שינה והשפעות אחרות של דיקור על פעילות המוח.

manipulation-epileptiform-electrocorticograms-ecogs-sleep-rats-mice

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

מקור: Kodani, S., et.al. מניפולציה אופטוגנטית של מעגלים עצביים במהלך ניטור מצבי שינה/ערות בעכברים. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים את המניפולציה האופטוגנטית של מעגלים עצביים המעורבים במעבר משינה לערות בעכברים. ההליך כולל השתלה כירורגית של סיב אופטי ואלקטרודות במוח ובשרירים כדי לאפשר גירוי אור ורישום אלקטרופיזיולוגי. על ידי אספקת אור להפעלת תעלות קטיון רגישות לאור בגרעין המיטה של הסטריה טרמינליס (BNST), הפעילות העצבית מווסתת, ומאפשרת לחוקרים לנתח אותות מוחיים ושרירים הקשורים לאינדוקציה של ערות.

מניפולציה אופטוגנטית של מעגלים עצביים למעבר משינה לערות בעכברים

סרטון זה מדגים פרוטוקול להשתלת הרכבת אלקטרודות אלקטרואנצפלוגרם (EEG) ואלקטרומיוגרמה (EMG) בעכבר מורדם. התהליך כולל אבטחת העכבר על מסגרת סטריאוטקסית, ביצוע חתך קו אמצע בגולגולת, קידוח חורים עבור האלקטרודות, וקיבוע יחידת האלקטרודה להקלטת אותות. לאחר ההתאוששות, התנהגות השינה-ערות של העכבר מנותחת באמצעות האותות המוקלטים.

ניתוח התנהגות שינה בעכברים באמצעות אלקטרואנצפלוגרם והקלטות אלקטרומיוגרמה

סרטון זה מדגים שיטה להקלטת EEG ברזולוציה גבוהה במודל חולדה של אפילפסיה מוקדית. הוא מתאר את השלבים הכרוכים בהכנת החולדה, חיבור מיני-כובע EEG רב-ערוצי לקרקפת של החולדה, ורישום ה-EEG כדי לזהות אירועים הקשורים להתקפים האופייניים למודל האפילפסיה.

רישום אלקטרואנצפלוגרפיה במודל חולדה של אפילפסיה מוקדית

סרטון זה מדגים רישום אלקטרואנצפלוגרפי (EEG) של התקפים אפילפטיים בחולדות המושרות על ידי אפילפסיה. חולדה עם אלקטרודות שהושתלו בהיפוקמפוס הגחוני מחוברת למערכת רישום EEG וממוקמת בתא פרספקס. החולדה מורשית לנוע בחופשיות בזמן שפעילות המוח נרשמת כדי לעקוב אחר התרחשות ההתקפים.

רישום אלקטרואנצפלוגרפי של התקפים אפילפטיים בחולדות המושרות על ידי אפילפסיה

הרישום של אלקטרואנצפלוגרמה (EEG) ואלקטרומיוגרמה (EMG) בעכברים שמתנהגים בחופשיות הוא צעד קריטי למתאם התנהגות ופיזיולוגיה עם שינה וערות. הפרוטוקול הניסיוני המתואר כאן מספק מערכת מבוססת כבלים לרכישת הקלטות EEG ו-EMG בעכברים.

נוהל הקלטת פוליגרפים למדידת שינה בעכברים

חשמל התקף (ECS) הוא מודל חיה ניסיוני של נזעי חשמל עבור דיכאון חמור. ECS מעוררת באופן גלובלי פעילות ההיפוקמפוס, המוביל synaptogenesis פלסטיות סינפטית. כאן, אנו מתארים שיטות עבור ה-ECS אינדוקציה בחולדות, fractionation subcellular של hippocampi שלהם כדי לבחון שינויים התקף-induced חלבונים סינפטיים.

חשמל התקפים חולדות ו Fractionation של Hippocampi שלהם כדי לבחון תפיסה-induced שינויים בחלבונים Postsynaptic צפיפות

כאן, אנו מתארים שיטות של מניפולציה אלקטרואופטיקה של סוגים מסוימים של נוירונים במהלך ניטור של שינה/ערנות מדינות בעכברים, הצגת העבודה האחרונה שלנו על גרעין המיטה של מסוף הניסטריה כדוגמה.

מניפולציה אלקטרואופטיקה של מעגלים עצביים בזמן ניטור שינה/ערות מדינות עכברים

מאמר זה מתאר פרוטוקול למניפולציה של מטרות מולקולריות בקליפת המוח באמצעות וירוסים הקשורים אדנו לניטור ההשפעות של מניפולציה זו במהלך ערנות ושינה באמצעות הקלטות אלקטרוקורטיקוגרפיות.

הקלטה אלקטרוקורטיקוגרפית של אזורי קליפת המוח מניפולציה באמצעות וירוס הקשור אדנו מיקוד Cofilin בעכברים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לדיקור אלקטרואקופונקטורה יעיל ומהיר (EA) בעכברים או חולדות צעירות באמצעות מחזיק מודפס תלת מימדי (3D). טכניקה זו מאפשרת הפעלה בו זמנית על בעלי חיים מרובים, חיסכון בזמן והגברת יעילות הניסוי.

פעולת אלקטרואקופונקטורה בתפזורת לעכברים או חולדות צעירות

פרוטוקול זה פותח כדי ליצור מערכת אמינה ונגישה לרישום EEG של מכרסמים הנעים בחופשיות.

פרוטוקול חסכוני וזעיר פולשני לרישום אלקטרואנצפלוגרפיה כרונית מרובת אתרים בעכברים הנעים בחופשיות

חקור את השפעות הדיקור על אפילפסיה ושינה במודלים של מכרסמים באמצעות רישום ECoG ו-EMG. שיטה זו מאפשרת ניתוח מדויק של פעילות מוחית ודפוסי שינה בחולדות ובעכברים.

מניפולציה של Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) ולישון חולדות ועכברים ידי דיקור

גלה סרטונים נוספים