Name: Chondrogenic בידול האינדוקציה של תאי גזע שמקורם שומן על ידי הכביד צנטריפוגלי (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-02-24T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 30 s
Description: למדו אינדוקציה של הכבידה הצנטריפוגלית לבידול כונדרוגני בתאי גזע ממקור שומני ללא ציטוקינים. שיטה זו מעלה את SOX9 ומקדמת תיקון סחוס ביולוגי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר זה נתמך על ידי מענק של פרויקט המו"פ של טכנולוגיית הבריאות של קוריאה באמצעות המכון לפיתוח תעשיית הבריאות של קוריאה (KHIDI), במימון משרד הבריאות והרווחה, הרפובליקה של קוריאה (מספר מענק: HI14C2116) ועל ידי קרן המחקר של בית החולים סנט מרי בסיאול, האוניברסיטה הקתולית של קוריאה.

פרוטוקול מחקר אושר על ידי דירקטוריון הסקירה המוסדי של האוניברסיטה הקתולית של קוריאה (KC16EAME0162) ובצע בהתאם להנחיות NIH. כל הרקמות התקבלו עם הסכמה מדעת בכתב. 1. טוען Gravity צנטריפוגלי ו גלולה תרבות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תרבות קציר ניידים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ASCs תרבות (P2-P3; לראות רשימה של חומרים) ברמת הגלוקוז הבינוני-הנמוך של הנשר השונה של Dulbecco (DMEM-LG) בתוספת 10% בסרום שור עוברי (FBS) ו -1% פניצילין / סטרפטומיצין (P / S) בשעה 37 ° C חממה humidified המכיל 5% CO 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר התאים מגיעים 80 מפגש%, לבטל את בינוני לשטוף את התאים עם 5 מ&quot;ל של תמיסת מלח שנאגרו פוספט 1x (PBS). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 1 מ&quot;ל של המכיל 1 PBS mM EDTA דגירה במשך 2 דקות ב 37 מעלות צלזיוס חממה humidified המכיל 5% CO 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקש על צלחת תרבות בעדינות, להוסיף 4 מ&quot;ל של מדיום חדש, ולהעביר את התאיםצינור חרוטי 15 מ&quot;ל, ו צנטריפוגות התאים ב g 250 × 2 דקות בטמפרטורת החדר (RT). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טעינה הכביד צנטריפוגלי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר צנטריפוגה (שלב 1.1.4), להסיר את supernatant מבלי להפריע גלולה ו resuspend גלולה ב 10 מ&quot;ל של DMEM-LG עם 10% FBS. ספירת התאים באמצעות hemocytometer. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטעינת CG, להעביר 2.5 × 10 5 תאים לצינור צנטריפוגות 15 מיליליטר חרוטים חדשים g 2,400 × במשך 15 דקות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תרבות הגלולה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מיד לאחר צנטריפוגה, לשאוב supernatant ולהוסיף 500 μL של מדיום בידול chondrogenic מוגדר (CDM, גבוהה גלוקוז DMEM בתוספת 1% FBS, 1% Premix + ITS, 100 dexamethasone ננומטר, 1x MEM שאינם חיוניים פתרון חומצה אמינו, 50 מיקרוגרם / מ&quot;ל ​​L-פרולין, ו -1% פניצילין / סטרפטומיצין). הוסף 50 מיקרוגרם / מיליליטר של פוספט 2 המוכן טרי L-החומצה אסקורבית בכל החלפה בינונית. כביקורת חיובית, לגרום differentiati chondrogenicעל בתאים uncentrifuged ידי הוספת CDM המכיל 10 ng / mL TGF-β1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את צינורות כתרים רופפים המכילים את הכדורים בעמידה לדגור על 37 מעלות צלזיוס חממת humidified המכילה 5% CO 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שינוי המדיום פעם ביומיים למשך 3 שבועות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תרבות Micromass <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מיד לאחר צנטריפוגה (שלב 1.2.2; 2,400 גרם × במשך 15 דקות), לשאוב supernatant ו resuspend גלולה ב 10 μL של CDM. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי ליצור micromass, למקם את התאים resuspended במרכז באר צלחת 24 באר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר 2 שעות, בזהירות להוסיף 1 מ&quot;ל של CDM אל הבאר, pipetting אל הקיר של הצלחת כדי למנוע שיבוש micromass. כביקורת חיובית, לבצע תרבות micromass עם תאים uncentrifuged ידי הוספת CDM המכיל 10 ng / mL TGF-β1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירה micromass על 37 מעלות צלזיוס חממה humidified המכיל 2 5% CO. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שנה את ev הבינוניery ימים למשך 3 שבועות. </li></ol></li></ol> 2. תגובת שרשרת הפוך transcriptase-פולימראז (RT-PCR) כדי לאתר upregulation תעתיק של סמנים בידול Chondrogenic <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביום 14, השתמש פיפטה להעביר את כדורי אליפטית לצינור 1.5 מיליליטר חדש ולשטוף אותם 1x PBS. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חלץ את RNA הכולל את הכדורים בשיטת חילוץ פנול, כלורופורם thiocyanate guanidinium 9. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לסנתז cDNA מ 2 מיקרוגרם של רנ&quot;א סך באמצעות transcriptase הפוכה על פי הפרוטוקול של היצרן (לדגור על 42 מעלות צלזיוס למשך 1 שעות ולאחר מכן לנטרל את האנזים ב 70 מעלות צלזיוס למשך 5 דקות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע PCR עם פריימרים ספציפיים עבור סמני בידול chondrogenic 10. </li></ol> 3. מכתים לזהות את התבטאות יתר של חלבונים מרקר בידול Chondrogenic <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פרפין הטבעת כדורי תא <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביום 21,להשתמש פיפטה לקצור את כדורי אליפטית ולשטוף אותם עם PBS 1x. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תקן את כדורי אליפטית על ידי טבילה paraformaldehyde 4% במשך 24 שעות. זהירות: Paraformaldehyde היא רעילה ביותר. יש להימנע ממגע עם עיניים, עור, או ריריות. מזעור החשיפה ולהימנע משאיפת במהלך ההכנה. ללבוש ציוד מגן אישי מתאים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחק את מקבע ולשטוף את כדורי תא עם מים ללא יונים (DW). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח שכבה אחת של גזה על הקלטת ולהעביר את הכדורים הקבועים בעזרת פיפטה. מכסה את הכדור על ידי קיפול הגזה ולסגור את מכסת הקלטת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מייבש את הכדורים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול את הכדורים ב 70% אתנול (EtOH) במשך 5 דקות ב RT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול את הכדורים ב 80% EtOH במשך 5 דקות ב RT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול את הכדורים ב 95% EtOH במשך 5 דקות ב RT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול את הכדורים ב 100% EtOH במשך 5 דקות ב RT. חזור פעמיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול את כדורי קסילן 100% במשך 15 דקות ב RT. טווי חזורלִספִירַת הַנוֹצרִים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הטמע את כדורי תא הקבועים פרפין ב 56 מעלות צלזיוס בתוך תבנית; ניתן להטביע את הכדורים לתוך פרפין באמצעות מערכות עיבוד רקמות מיוחדות אוטומטיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים 5 חלקים מיקרומטר בעובי מן התא גלולה מוטבע פרפין באמצעות microtome סיבובית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Float את הסעיפים 50% EtOH ולאחר מכן להעביר אותם באמבט מים 50 ° C באמצעות שקופיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את הסעיפים צף על גבי שקופיות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Safranin O ו כתמים כחולים Alcian <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רעננותם חלקי פרפין. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול את השקופיות קסילן במשך 15 דקות. חזור פעמיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול את השקופיות EtOH 100% במשך 5 דקות. חזור פעמיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול את השקופיות 90% EtOH למשך 5 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול את השקופיות EtOH 80% במשך 5 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול את השקופיות EtOH 70% במשך 5 דקות, ולאחר מכן לשטוף אותם 1x PBS. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כתם בסעיפי rehydrated עם 1% Safranin O פתרון ו -3% הכחולים Alcian עבור30 דק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחק את הפתרון מכתים ולשטוף את החלקים עם DW. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכתם בסעיפים עם פתרון Hematoxylin / Eosin (counterstain) 1 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחק את הפתרון מכתים ולשטוף את החלקים עם DW. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים ירידה של המדיום גובר על coverslip לאחר הסרת כל שאריות מים. בזהירות במקום להחליק (תא בצד למטה) על coverslip המכיל את המדיום גובר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר השקופיות להתייבש במשך 2-3 שעות ב RT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צלם תמונות באמצעות מיקרוסקופ שדה בהיר (מיקרוסקופ זקוף אוטומטי, 50X ו 200X). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> assay immunofluorescence <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רעננותם סעיפים כמפורט בסעיף 3.2.1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול את שקופיות חיץ נתרן ציטרט (נתרן ציטרט 10 מ&quot;מימ, 0.05% Tween 20, pH 6.0), ולאחר מכן לשמור אותם בטמפרטורה רותחת משנה עבור 10 דקות באמצעות מיקרוגל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מצננים את השקופיות עבור 20 דקות ב RT ולאחר מכן לשטוף אותם עם מי ברז. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירת השקופיות ב 3%H 2 O 2 (ב 1x PBS) במשך 15 דקות, ולאחר מכן לשטוף אותם עם מי ברז במשך 15 דקות 11. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חסום את השקופיות עם חסימת חיץ (10% נסיוב עז נורמלי ב PBS) במשך שעה 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשאוב את הפתרון החוסם, ולאחר מכן להחיל נוגדן ראשוני מדולל 5% נסיוב עז נורמלי על השקופיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירת שקופיות הלילה ב 4 ° C.. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שטפו את השקופיות שלוש פעמים 1x PBS במשך 5 דקות כל אחד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירה השקופיות ב נוגדנים משני מצומדות fluorochrome מדולל 5% נסיוב עז נורמלי במשך שעה 1 ב RT בחושך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שטפו את השקופיות שלוש פעמים 1x PBS במשך 5 דקות כל אחד בחושך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירה השקופיות עם DAPI (1 מיקרוגרם / מ&quot;ל) במשך 10 דקות, ולאחר מכן לשטוף אותם פעמיים ב 1x PBS במשך 5 דקות כל אחד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים ירידה של המדיום גובר על coverslip לאחר הסרת כל שאריות מים. בזהירות במקום להחליק (תא בצד למטה) על הרכבה בינונית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר השקופיות להתייבש במשך 2-3h בחושך ב RT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דמיינו את השקופיות באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי (Rhod: 594 ננומטר, DAPI: 340 ננומטר; 60X והגדלה 200X) 12. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Awad, H. A., Halvorsen, Y. D., Gimble, J. M., Guilak, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+transforming+growth+factor+beta1+and+dexamethasone+on+the+growth+and+chondrogenic+differentiation+of+adipose-derived+stromal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng%22%5BJournal%5D)">Effects of transforming growth factor beta1 and dexamethasone on the growth and chondrogenic differentiation of adipose-derived stromal cells.</a> Tissue Eng. 9 (6), 1301-1312 (2003).</li>
<li>Erickson, G. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chondrogenic+potential+of+adipose+tissue-derived+stromal+cells+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Chondrogenic potential of adipose tissue-derived stromal cells in vitro and in vivo.</a> Biochem Biophys Res Commun. 290 (2), 763-769 (2002).</li>
<li>Sah, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biosynthetic+response+of+cartilage+explants+to+dynamic+compression%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Biosynthetic response of cartilage explants to dynamic compression.</a> J Orthop Res. 7 (5), 619-636 (1989).</li>
<li>Sakao, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+chondrogenic+phenotype+in+synovium-derived+progenitor+cells+by+intermittent+hydrostatic+pressure%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Induction of chondrogenic phenotype in synovium-derived progenitor cells by intermittent hydrostatic pressure.</a> Osteoarthritis Cartilage. 16 (7), 805-814 (2008).</li>
<li>Li, Z., Yao, S. J., Alini, M., Stoddart, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chondrogenesis+of+human+bone+marrow+mesenchymal+stem+cells+in+fibrin-polyurethane+composites+is+modulated+by+frequency+and+amplitude+of+dynamic+compression+and+shear+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+A%22%5BJournal%5D)">Chondrogenesis of human bone marrow mesenchymal stem cells in fibrin-polyurethane composites is modulated by frequency and amplitude of dynamic compression and shear stress.</a> Tissue Eng Part A. 16 (2), 575-584 (2010).</li>
<li>Alves da Silva, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chondrogenic+differentiation+of+human+bone+marrow+mesenchymal+stem+cells+in+chitosan-based+scaffolds+using+a+flow-perfusion+bioreactor%5BTitle%5D)+AND+%22J+Tissue+Eng+Regen+Med%22%5BJournal%5D)">Chondrogenic differentiation of human bone marrow mesenchymal stem cells in chitosan-based scaffolds using a flow-perfusion bioreactor.</a> J Tissue Eng Regen Med. 5 (9), 722-732 (2011).</li>
<li>Maeda, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+microstructure+and+gene+expression+of+articular+chondrocytes+cultured+in+a+tube+under+mechanical+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Changes in microstructure and gene expression of articular chondrocytes cultured in a tube under mechanical stress.</a> Osteoarthritis Cartilage. 13 (2), 154-161 (2005).</li>
<li>Yang, J., Hooper, W. C., Phillips, D. J., Tondella, M. L., Talkington, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Centrifugation+of+human+lung+epithelial+carcinoma+a549+cells+up-regulates+interleukin-1beta+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Diagn+Lab+Immunol%22%5BJournal%5D)">Centrifugation of human lung epithelial carcinoma a549 cells up-regulates interleukin-1beta gene expression.</a> Clin Diagn Lab Immunol. 9 (5), 1142-1143 (2002).</li>
<li>Rio, D. C., Ares, M., Hannon, G. J., Nilsen, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification+of+RNA+using+TRIzol+%28TRI+reagent%29%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb+Protoc%22%5BJournal%5D)">Purification of RNA using TRIzol (TRI reagent).</a> Cold Spring Harb Protoc. (6), (2010).</li>
<li>Lorenz, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polymerase+chain+reaction%3A+basic+protocol+plus+troubleshooting+and+optimization+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Polymerase chain reaction: basic protocol plus troubleshooting and optimization strategies.</a> J Vis Exp. (63), e3998(2012).</li>
<li>Jang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((UVB+induces+HIF-1alpha-dependent+TSLP+expression+via+the+JNK+and+ERK+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22J+Invest+Dermatol%22%5BJournal%5D)">UVB induces HIF-1alpha-dependent TSLP expression via the JNK and ERK pathways.</a> J Invest Dermatol. 133 (11), 2601-2608 (2013).</li>
<li>Wu, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunodetection+of+human+telomerase+reverse-transcriptase+%28hTERT%29+re-appraised%3A+nucleolin+and+telomerase+cross+paths%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Immunodetection of human telomerase reverse-transcriptase (hTERT) re-appraised: nucleolin and telomerase cross paths.</a> J Cell Sci. 119, Pt 13 2797-2806 (2006).</li>
<li>Bobick, B. E., Chen, F. H., Le, A. M., Tuan, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+the+chondrogenic+phenotype+in+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Birth+Defects+Res+C+Embryo+Today%22%5BJournal%5D)">Regulation of the chondrogenic phenotype in culture.</a> Birth Defects Res C Embryo Today. 87 (4), 351-371 (2009).</li>
<li>Akiyama, H., Chaboissier, M. C., Martin, J. F., Schedl, A., de Crombrugghe, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+transcription+factor+Sox9+has+essential+roles+in+successive+steps+of+the+chondrocyte+differentiation+pathway+and+is+required+for+expression+of+Sox5+and+Sox6%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">The transcription factor Sox9 has essential roles in successive steps of the chondrocyte differentiation pathway and is required for expression of Sox5 and Sox6.</a> Genes Dev. 16 (21), 2813-2828 (2002).</li>
<li>Lefebvre, V., Huang, W., Harley, V. R., Goodfellow, P. N., de Crombrugghe, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SOX9+is+a+potent+activator+of+the+chondrocyte-specific+enhancer+of+the+pro+alpha1%28II%29+collagen+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">SOX9 is a potent activator of the chondrocyte-specific enhancer of the pro alpha1(II) collagen gene.</a> Mol Cell Biol. 17 (4), 2336-2346 (1997).</li>
<li>Jang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+adipose+tissue-derived+stromal+vascular+fraction+for+clinical+application+to+cartilage+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vitro+Cell+Dev+Biol+Anim%22%5BJournal%5D)">Characterization of adipose tissue-derived stromal vascular fraction for clinical application to cartilage regeneration.</a> In Vitro Cell Dev Biol Anim. 51 (2), 142-150 (2015).</li>
<li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+regeneration+of+articular+cartilage+and+subchondral+bone+in+vivo+using+MSCs+induced+by+a+spatially+controlled+gene+delivery+system+in+bilayered+integrated+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Simultaneous regeneration of articular cartilage and subchondral bone in vivo using MSCs induced by a spatially controlled gene delivery system in bilayered integrated scaffolds.</a> Biomaterials. 32 (21), 4793-4805 (2011).</li>
<li>Janzen, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem-cell+ageing+modified+by+the+cyclin-dependent+kinase+inhibitor+p16INK4a%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Stem-cell ageing modified by the cyclin-dependent kinase inhibitor p16INK4a.</a> Nature. 443 (7110), 421-426 (2006).</li>
<li>Muraglia, A., Cancedda, R., Quarto, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clonal+mesenchymal+progenitors+from+human+bone+marrow+differentiate+in+vitro+according+to+a+hierarchical+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Clonal mesenchymal progenitors from human bone marrow differentiate in vitro according to a hierarchical model.</a> J Cell Sci. 113, Pt 7 1161-1166 (2000).</li>
</ol>

אנו מצהירים כי אין לנו ניגודי אינטרסים הקשורים לעבודה זו.

מדינת stemness של תאים חשובה מאוד עבור ביטוי יתר נגרמת CG של SOX9. במחקר שלנו, ביטוי SOX9 יכול להיגרם על ידי CG ב ASCs מוקדם-חלוף (2-3), אך לא ASCs-מעבר מאוחר יותר. זה כבר דווח כי, במהלך טיפוח, ASCs מכיל CD34 + תאים עד 3 קטעים 16. ASCs נוטה לאבד את הביטוי של CD34 כמו התאים passaged, וכתוצאה מכך תגובה נמוכה כדי CG. עם כוח הכבידה צנטריפוגלי, הלחץ ההידרוסטטי ניתן הועמסו על התאים במהלך הגירוי ...

פגמי סחוס במפרק לא לרפא באופן טבעי. כתוצאה מכך, השתלת תא גזע הוצעה גישה מבטיחה לתיקון סחוס לקוי. עם זאת, שיטה זו דורשת היא רכישת מספר מספיק של תאי גזע ואת האינדוקציה של תאים אלה כדי לעבור התמיינות chondrogenic. מח עצם (בע&quot;מ) כבר בשימוש נרחב כמקור לתאי גזע, אבל בידוד תא מ- BM יש שני חסרונות עיקריים: הפולשנות ואת התשואה מספיק. בגלל הקלות של רכישתה, רקמת שומן היא מקור עדיף של תאי גזע. מחקרים קודמים הדגימו את ההיתכנות של בידוד תאי גזע מרקמות שומן התרמת בידול chondrogenic בתאים אלה באמצעות ציטוקינים, כגון TGF-β1 1, 2. שיטות אלו יעילות אבל יקרות. כחלופה עלות נמוכה יותר כדי ציטוקינים, לחץ מכני יכול לשמשלהשרות התמיינות chondrogenic. העמסה מכאנית משחקת תפקיד קריטי בשמירה על הבריאות של סחוס במפרק 3, וזה יכול לגרום פנוטיפים chondrogenic בתאים שונים. לדוגמא, לחץ ההידרוסטטי גורם פנוטיפים chondrogenic ב ובתאים נגזרים synovium דרך מסלול קינאז / JNK MAP 4, ודחיסה מכאנית גורם chondrogenesis בתאי גזע mesenchymal אדם (MSCs) על ידי upregulating גני chondrocytic 5. בנוסף, מאמץ הגזירה תורם הביטוי של מטריקס הקשורות chondrogenesis (ECM) ב MSCs אדם 6. הכביד צנטריפוגלי (CG), מתח מכאני שיושם לשלוט בקלות שנוצר על ידי צנטריפוגה, יכול לגרום ביטוי גני הפרש בתאי 7. לדוגמה, בתאי קרצינומה אפיתל ריאות, הביטוי של אינטרלוקין (IL) -1b הוא upregulated ידי צנטריפוגה 8. Therefore, כמו לחץ מכאני מושרה באופן ניסיוני, CG יכול לשמש כדי לגרום ביטוי גני chondrocytic בתאי גזע. עם זאת, עדיין לא ברור האם CG יכול לגרום בידול chondrogenic של תאי גזע. במחקר זה, מצאנו כי CG המושרה הגברת הביטוי של SOX9, רגולטור אדון chondrogenesis, ב ASCs האדם, וכתוצאה מכך ביטוי יתר של גנים chondrocytic. בנוסף, השווינו את ההשפעות של CG על chondrogenesis לאלה של β1 TGF, גורם הגדילה הנפוץ ביותר כדי לגרום במבחנה chondrogenesis בתאי גזע.

<table><tbody><tr><td colspan="4" ><חזק>כלי פלסטיק</חזק></td></tr><tr><td>100 מ"מ צלחת</td><td>TPP</td><td>93100</td><td></td></tr><tr><td>60 מ"מ צלחת</td><td>TPP</td><td>93060</td><td></td></tr><tr><td>50 מ"ל צינור קורניקל</td><td>SPL</td><td>50050</td><td></td></tr><tr><td>15 מ"ל צינור קורניקל</td><td>SPL</td><td>50015</td><td></td></tr><tr><td>10 מ"ל פיפטה חד פעמית</td><td>בז</td><td>7551</td><td></td></tr><tr><td>5 מ"ל פיפטה חד פעמית</td><td>Falcon</td><td>7543</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">ASC Culture Media Materials</td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Life Technologies</td><td>14190-144</td><td></td></tr><tr><td>DMEM Low glucose</td><td>Life Technologies</td><td>11885-084</td><td>Growth Base</td></tr><tr><td>Media Penicilin Streptomycin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P4333</td><td>1%</td></tr> <tr><td>Fetal Bovine</td><td>Serum Life Technologies</td><td>16000-044</td><td>10%</td></tr> <tr><td>PBS/1 mM EDTA</td><td>Life Technologies</td><td>12604-039</td><td></td></tr><tr><td colspan="4"><חזק>חומרי מדיה התמיינות כונדרוגנית</חזקים></td></tr><tr><td>DMEM טכנולוגיות חיים של גלוקוז גבוה</td><td></td><td>11995</td><td>מדיה בסיסית התמיינות כונדרוגנית</td></tr><tr><td>MEM תמיסת חומצות אמינו לא חיוניות (100x)</td><td>Life Technologies</td><td>11140-050</td><td></td></tr><tr><td>דקסמתזון</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>D2915</td><td>100 ננומטר</td></tr><tr><td>פניצילין סטרפטומיצין</td><td>טכנולוגיות חיים</td><td>P4333</td><td>1%</td></tr> <tr><td>סרום בקר עוברי</td><td>טכנולוגיות חיים</td><td>16000-044</td><td>1%</td></tr> <tr><td>אסקורבט-2-פוספט</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>A8960</td><td>50 & #956; גרם/מ"ל</td></tr><tr><td>L-פרולין</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>P5607</td><td>50 & #956; גרם/מ"ל</td></tr><tr><td>ה-BD</td><td></td><td>שלו</td><td>354352-1%</td></tr> <tr><td>TGF&בטא אנושי; 1</td><td>Peprotech</td><td>100-21</td><td>10 ננוגרם/מ"ל</td></tr><tr><td colspan="4" ><חזק>חומרים</חזקים></td></tr><tr><td>18 מ"מ כיסוי זכוכית</td><td>מעולה</td><td>HSU-0111580</td><td></td></tr><tr><td>4% Paraformaldyhyde</td><td>Tech & חדשנות</td><td>BPP-9004</td><td></td></tr><tr><td>Tween 20</td><td>BIOSESANG</td><td>T1027</td><td></td></tr><tr><td>בקר סרום אלבומין</td><td>וקטור מעבדה</td><td>SP-5050</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן אנטי-קולגן II</td><td>abcam&nbsp;</td><td>ab34712</td><td>1:100</td></tr><tr><td>נוגדן משני נגד ארנב עיזים IgG (H+L), Alexa Fluor 594</td><td>מצומד בדיקה מולקולרית</td><td>A-11037</td><td>1:200</td></tr><tr><td>בדיקה מולקולרית</td><td>DAPI</td><td>D1306</td><td></td></tr><tr><td>מגיב אנטי-דהייה זהב Prolong</td><td>Invitrogen</td><td>P36934</td><td></td></tr><tr><td>זכוכית שקופיות, מצופה</td><td>Hyun Il Lab-Mate</td><td>HMA-S9914</td><td></td></tr><tr><td>Trizol</td><td>Invitrogen</td><td>15596-018</td><td></td></tr><tr><td>כלורופורם</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>366919</td><td></td></tr><tr><td>איזופריפילאלכוהול</td><td>Millipore</td><td>109634</td><td></td></tr><tr><td>אתנול</td><td>דוקסן</td><td>64-17-5</td><td></td></tr><tr><td>RevertAid ערכת סינתזה cDNA גדיל ראשון</td><td>Thermo Scientfic</td><td>K1622</td><td></td></tr><tr><td>Taq DNA פולימראז</td><td>iNtRON BIOTECH</td><td>25021</td><td></td></tr><tr><td>UltraPure 10x TBE Buffer</td><td>Life Technologies</td><td>15581-044</td><td></td></tr><tr><td>כוכב טעינה</td><td>Dyne Bio</td><td>A750</td><td></td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>9012-36-6</td><td></td></tr><tr><td>1 kb (+) סמן סולם DNA</td><td>Enzynomics</td><td>DM003</td><td></td></tr><tr><td>תאי גזע שמקורם בשומן אנושי (ASCs)</td><td>תאי</td><td></td><td></td> מאסטר קתוליים</tr></tbody></table>

chondrogenic בידול האינדוקציה של תאי גזע שמקורם שומן על ידי הכביד צנטריפוגלי

Chondrogenic Differentiation Induction of Adipose-derived Stem Cells by Centrifugal Gravity

סחוס לקוי אינו יכול להחלים באופן טבעי. נכון לעכשיו, הטיפול המתקדם ביותר לפגמים בסחוס הוא השתלת כונדרוציטים מובחנים מתאי גזע באמצעות ציטוקינים. למרבה הצער, התמיינות כונדרוגנית הנגרמת על ידי ציטוקינים היא יקרה, גוזלת זמן וקשורה לסיכון גבוה לזיהום במהלך התמיינות במבחנה. עם זאת, גירויים ביומכניים משמשים גם כגורמים מווסתים מכריעים לכונדרוגנזה. לדוגמה, לחץ מכני יכול לגרום להתמיינות כונדרוגנית של תאי גזע, מה שמרמז על גישה טיפולית פוטנציאלית לתיקון סחוס פגום. במחקר זה, הראינו כי כבידה צנטריפוגלית (CG, 2,400 × גרם), מתח מכני המופעל בקלות על ידי צנטריפוגה, גרם לוויסות מוגבר של אזור קובע המין Y (SRY)-box 9 (SOX9) בתאי גזע שמקורם בשומן (ASCs), וגרם להם לבטא פנוטיפים כונדרוגניים. ה-ASCs הצנטריפוגים ביטאו רמות גבוהות יותר של סמני התמיינות כונדרוגניים, כגון אגרקן (ACAN), קולגן מסוג 2 אלפא 1 (COL2A1) וקולגן מסוג 1 (COL1), אך רמות נמוכות יותר של קולגן מסוג 10 (COL10), סמן של כונדרוציטים היפרטרופיים. בנוסף, היווצרות אגרגטים כונדרוגניים, תנאי מוקדם לכונדרוגנזה, נצפתה ב-ASCs צנטריפוגים.

הכביד צנטריפוגלי ומשרה את ביטוי היתר של סמני בידול chondrogenic בתאי גזע שמקורם שומן. כדי לקבוע את מידת כוח הכבידה צנטריפוגלי שרלוונטי להשרות התמיינות chondrogenic, ASCs היו מגורה עם דרגות שונות של CG (0, 300, 600, 1,200, ו -2,400 XG) במשך 15 דקות. לאחר גירוי, את ASCs היו מחדש זורעים לצלחות תרבות בתרבית למשך 24 שעות. כפי שניתן לראות בתרשים ...

לחץ מכני יכול לגרום להתמיינות כונדרוגנית של תאי גזע, ולספק גישה טיפולית פוטנציאלית לתיקון סחוס פגום. אנו מציגים פרוטוקול לגרימת התמיינות כונדרוגנית של תאי גזע שמקורם בשומן (ASCs) באמצעות כבידה צנטריפוגלית (CG). ויסות מוגבר המושרה על ידי CG של SOX9 מביא להתפתחות פנוטיפים כונדרוגניים.

Chondrogenic בידול האינדוקציה של תאי גזע שמקורם שומן על ידי הכביד צנטריפוגלי

Impaired cartilage cannot heal naturally. Currently, the most advanced therapy for defects in cartilage is the transplantation of chondrocytes ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא לגרום להתמיינות כונדרוגנית של ASC לתיקון סחוס פגום. שיטה זו היא לגרום להתמיינות פרכונדרוגנית של ASC באמצעות כוח כבידה צנטריפוגלי. למרות ששיטה זו יכולה לספק תובנה לגבי התמיינות כונדרוגנית של ASC, ניתן ליישם אותה גם על מערכות אחרות, כגון התמיינות אוסטאוגנית ופיברוגנית.היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שניתן לגרום בקלות להתמיינות כונדרוגנית מתאי גזע מבלי לטפל בציטוקינים. המדגימים את ההליך יהיו ירי אליס רים ויוג'ון נאם מהמעבדה שלי. התחל בקצירת 80% תאי גזע שמקורם בשומן מצלחת תרבית של 100 מיליליטר על ידי השלכת המדיום ושטיפה עם חמישה מיליליטר PBS.לאחר מכן, הוסיפו מיליליטר אחד של PBS המכיל מילי-מולרי EDTA, ודגרו במשך שתי דקות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס באינקובטור לח המכיל 5% פחמן דו חמצני. לאחר שתי דקות, הקש בעדינות על צלחת התרבית ואז הוסף ארבעה מיליליטר של מדיום טרי והעביר את התאים לצינור חרוטי של 15 מיליליטר. צנטריפוגה של התאים ב -250 פעמים גרם למשך שתי דקות בטמפרטורת החדר.לאחר צנטריפוגה, הסר את הסופרנטנט מבלי להפריע לגלולה. לאחר מכן, השעו מחדש את הגלולה ב -10 מיליליטר בינוני. ספרו את התאים באמצעות המוציטומטר.להעמסת כבידה צנטריפוגלית, העבירו 2.5 פעמים עשר עד התאים החמישיים לצינור חרוטי חדש של 15 מיליליטר, וצנטריפוגה ב-2400 פעמים גרם למשך 15 דקות. לאחר הצנטריפוגה, המשך לתרבית גלולה או מיקרומסה. מיד לאחר הצנטריפוגה, יש לשאוב את הסופרנטנט וב -500 מיקרוליטר של מדיום התמיינות כונדרוגני, או CDM, ו -50 מיקרוגרם למיליליטר של חומצה L-אסקורבית 2-פוספט שהוכנה טרי לגלולה.בקרה חיובית, לגרום להתמיינות כונדרוגנית ולאסוף את התאים שלה על ידי הוספת CDM המכיל 10 ננוגרם למיליליטר TGF-beta-1. יש לכסות את הצינורות באופן רופף ולדגור בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס באינקובטור לח המכיל 5% פחמן דו חמצני למשך שלושה שבועות. מיד לאחר הצנטריפוגה העומסת על כוח הכבידה, שאפו את הסופרנטנט והשעו מחדש את הגלולה ב-10 מיקרוליטר CDM.ליצירת מיקרומסה, פיפטה את התאים התלויים מחדש למרכז באר של צלחת 24 באר ואז הנח את הצלחת לתוך החממה. לאחר שעתיים, הוסיפו בזהירות 500 מיקרוליטר CDM לבאר, תוך פיפטינג על דופן הצלחת כדי למנוע שיבוש המיקרומסה. כבקרה חיובית, בצע תרבית מיקרו-מסה עם תאים לא צנטריפוגים על ידי הוספת CDM המכיל 10 ננוגרם למיליליטר TGF-beta-1.דגירה על המיקרו-מסה למשך שלושה שבועות. ביום 21 לאחר היווצרות מיקרו-מסה, השתמש בפיפטה כדי לקצור את כדורי הכדור, ולאחר מכן שטוף עם 1X PBS. תקן את כדורי הכדור על ידי טבילה ב-4% פרפורמלדהיד למשך 24 שעות.למחרת, השליכו את הקיבוע ושטפו את כדורי התאים במים נטולי יונים. הניחו שכבה אחת של גזה על קלטת הרקמות והעבירו את כדורי הכדור הקבועים באמצעות פיפטה. מכסים את הגלולה על ידי קיפול הגזה וסוגרים את מכסה הקלטת.לאחר מכן, ייבשו את כדורי הכדור על ידי טבילה באתנול 70% למשך חמש דקות בטמפרטורת החדר. לאחר מכן, המשיכו בסדרה של ריכוזי אתנול למשך חמש דקות כל אחד. לאחר מכן טבלו את הכדורים ב-100% קסילן למשך 15 דקות.טבלו את כדורי הכדור בפרפין בטמפרטורה של 56 מעלות צלזיוס להטמעה. לאחר מכן, חותכים חמישה חלקים בעובי מיקרון מכדור התא המוטבע בפרפין באמצעות מיקרוטום סיבובי. צף את החלקים באתנול של 50%, ולאחר מכן העביר אותם לאמבט מים של 50 מעלות צלזיוס.הרכיבו את החלקים הצפים על מגלשות, ולאחר מכן המשיכו לספרנין o וכחול אלציאן לצביעה חיסונית-פלואורסצנטית. כדי לקבוע כוח כבידה צנטריפוגלי מתאים, ASC סובבו בכוח משיכה צנטריפוגלי של אפס, 300, 600, 1, 200 ו-2, 400 פעמים גרם למשך חמש עשרה דקות. ביטוי ה-mRNA של SOX9 הוערך 24 שעות לאחר גירוי CG.CG של 2, 400 פעמים g גרם באופן משמעותי לביטוי SOX9 mRNA. כדי להעריך את הביטוי של גנים הקשורים לכונדרוגנזה, סך ה-RNA הופק מ-ASC לא מגורים, ASC שעברו צנטריפוגה, או טופלו ב-TGF-beta-one. כפי שניתן לראות כאן, גירוי CG גורם לביטוי קולגן מסוג 2 ואגרקן.ביטוי יתר של קולגן מסוג 2 ב-ASC שטופלו ב-CG אושר על ידי אימונופלורסנט באמצעות נוגדן נגד קולגן מסוג 2 בנוגדנים משניים מצומדים Alexa Fluor 594. כדי לקבוע את ההשפעה של CG על ביטוי יתר של ECM הקשור לכונדרוגנזה, ASC טופלו ב-TGF-beta-one כביקורת חיובית. הביקורת השלילית הייתה תרבית גלולה שאינה נתונה להעמסת CG, או טיפול TGF-beta-one.ביטוי יתר של ECM הקשור לכונדרוגנזה הוערך בכדורי ספרואידים המורכבים מ-ASC צנטריפוגה באמצעות שימוש בספרנין o וצביעה כחולה אלציאנית. גליקוזאמינוגליקן, מרכיב עיקרי בסחוס המפרקי, נצבע בכחול על ידי כחול אלציאני, או בכתום על ידי ספרנין o. לאחר 14 יום של תרבית מיקרו-מסה, עיבוי כונדרוציטים הוערך לפי גודל האגרגטים.גודלו של כל אגרגט, שנוצר על ידי CG, היה בסביבות 0.5 מילימטרים. לאחר שליטה, ניתן לבצע טכניקה זו תוך 30 דקות, אם היא מבוצעת כראוי. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לגרום להתמיינות כונדוגנית של תאי גזע באמצעות כוח כבידה צנטריפוגלי.

chondrogenic-differentiation-induction-adipose-derived-stem-cells

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

ביולוגיה התפתחותית

פרוטוקול זה מתאר בידוד של תאי גזע שמקורם בשומן חזיר (pADSC) מרקמות שומן תת עוריות עם בחינת מולטיפוטנטיות. ה-pADSC הרב-פוטנטי משמש לתיחום תהליכים של התמיינות אדיפוציטים ולחקר טרנסדיפרנציאציה לשושלות תאים מרובות של מזנכימה מזודרמית או שושלות נוספות של אקטודרם ואנדודרם למחקרים רגנרטיביים.

בידוד ובידול של תאי גזע נגזר שומן מרקמות שומן תת עורי בשר חזירים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לנתיחה של חבל טבור האנושי (UC) ו מדגם שליה העובר לתוך חוט קרונית (CL), ג'ל וורטון (WJ), צומת חבל-שליה (CPJ), ואת השליה עוברת (FP) עבור הבידוד ואפיון של תאי סטרומה mesenchymal (MSCs) באמצעות טכניקת תרבות explant.

בידוד ואפיון של תאי סטרומה mesenchymal מן טבורי אדם העובר שליה

אנו מציגים פרוטוקול ליצירת השושלת chondrogenic מן הדם ההיקפי האנושי (PB) באמצעות תאי גזע pluripotent המושרה (iPSCs) בשיטה ללא אינטגרציה, הכוללת גבריות הגוף (EB) היווצרות, הרחבת תאים fibroblastic, אינדוקציה chondrogenic.

הבדל Chondrocytes מ היקפי דם הנגזרות האדם תאים Pluripotent Pluripotent Induced

כאן, אנו מציעים פרוטוקול לבידול chondrogenic מ דם טבורי mononuclear תאים נגזר האדם המושרה בתאי גזע pluripotent.

Chondrogenic גלולה היווצרות דם טבורי הנגזרות Pluripotent תאים גזעיים

שיטה להשיג nanopatterns לא אחידה מבוססי דנדרימר כי היתר שליטה ננו של מקומיים ארגינין-גליצין-אספרטית חומצה (RGD) משטח צפיפות תיאר, הוחל על המחקר של תאית התמיינות אדהזיה ו- chondrogenic.

דנדרימר מבוססי Nanopatterns לא אחיד כדי מקומית משטח שליטה Adhesiveness: שיטה ישירה בידול Chondrogenic

המטרה של פרוטוקול זה היא לבחון את היכולת של ובתאים נגזר רקמת שומן perivascular האדם להתמיין שושלות תאים מרובים. בידול היה לעומת גזע mesenchymal הנגזרות מח אנושי, אשר ידועה להבדיל לתוך adipocyte, osteocyte ו- chondrocyte שושלות.

בידול קיבולת של האדם-אבי העורקים Perivascular שומן ובתאים

אנו מציגים פרוטוקול עבור הבידוד, התרבות, והאינדוקציה האדיגנית של הרכס העצבי (NCADSCs) מתוך רקמת השומן של ה-Wnt-1 יצורים+/-; Rosa26Rfp/+ עכברים. NCADSCs יכול להיות מקור נגיש בקלות של ADSCs עבור מידול אדיפוגנזה או ליפוגנזה ב מבחנה.

בידוד, תרבות, והשראה של הרכס העצבי המקורי אדיפוז-תאי גזע שמקורם ברקמת אדיפוז

פרוטוקול זה מתאר מתודולוגיה לבידוד וזיהוי תאי גזע מזנכימליים (MSC) שמקורם ברקמת שומן מחולדות Sprague Dawley.

בידוד וזיהוי תאי גזע מזנכימליים שמקורם ברקמת שומן של חולדות Sprague Dawley

רקמת השומן היא מקור מצוין לתאי גזע מזנכימליים. כאן, אנו מביאים את המיצוי, הטיפוח והאפיון שלב אחר שלב של תאי גזע שמקורם ברקמת שומן (ADSCs) מרקמת שומן אפידידימלית של עכברים שוויצרים.

בידוד, הרחבה חוץ גופית ואפיון תאי גזע מזנכימליים מרקמת שומן אפידידימלית של עכבר

מחקר זה מתאר שיטה לייצור ספרואידים כונדרוציטיים על ידי צבירת תאים לספרואידים בתנאי הדבקה נמוכה באמצעות כוח הכבידה, ולאחר מכן תרבית את הספרואידים המתקבלים במיני-ביוריאקטורים.

יצירת ספרואידים מכונדרוציטים שונים בתנאי הדבקה נמוכה תחת כוח הכבידה ומיני ביוריאקטורים תוצרת בית

למדו אינדוקציה של הכבידה הצנטריפוגלית לבידול כונדרוגני בתאי גזע ממקור שומני ללא ציטוקינים. שיטה זו מעלה את SOX9 ומקדמת תיקון סחוס ביולוגי.

Chondrogenic בידול האינדוקציה של תאי גזע שמקורם שומן על ידי הכביד צנטריפוגלי

גלה סרטונים נוספים