Name: שיטה להערכת יעילות הדברה נגד פשפש מיטה, Cimex lectularius, ביצים ראשית Instars (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-03-15T12:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 4 s
Description: למדו שיטה להערכת יעילות חומרי הדברה נגד ביצים ונימפות ראשוניות של פשפש המיטה Cimex lectularius. הפרוטוקול מסייע לחוקרים לשפר אסטרטגיות שליטה במזיקים על ידי מיקוד בשלבי חיים קריטיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנו מודים מולי Stedfast לסיוע ניסוח דילול הדברה. אנו מודים גם טרוי אנדרסון להדרכה ניתוח probit ואת זכריה אדלמן לקבלת סיוע בתכנון הניסוי. מחקר זה מומן בחלקו על ידי פרס קרן האנטומולוגי ועל ידי קרנות מלגת ממשק הדברת וירג&#39;יניה.

הערה: פרוטוקול זה כולל שני מבחני הדברה בנפרד בטיפול ביצים באג המיטה instars הראשון. פרוטוקולי שניהם נערכו באמצעות אותו הדברה, לעומת זאת, הפרוטוקולים היו צריך להיות מותאמים על מנת להבטיח חשיפת חרקים כדי לתפעל את הדגימות בקלות. 1. Assay הדברה לטבול ביצה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משוך הזדווגו וניזון-היטב פשפשים נקבה בוגר ממושבה ומניח נקבות (5-10) לתוך צלחת פטרי עם נייר סינון. יש לפחות עשרה משכפל כדי להבטיח שלא יהיו ביצים מספיק עבור assay הדברה. בדקו אם הנקבות הטילו ביצים כל יום. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהם מטילים ביצים, לקחת הנקבות מתוך צלחת פטרי (6 ס&quot;מ × 5 ס&quot;מ) ולשים אותם לתוך מנות חדשות פטרי עם נייר סינון חדשים מדי יום ולהקליט את התאריך על צלחות פטרי ישנים וחדשים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר את הביצים גיל 4 עד 5 ימים לפני תחילת assay. רגישות לשינויי דברה במהלך התפתחות עוברית, so חשוב לשלוט לגיל ביצה. עכב את כל שלבי החיים בשעה 12:12 L: photoperiod D, 60% לחות יחסית, ו -27 מעלות צלזיוס. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הביצים הזדקנו כראוי, להסיר את ביצי פשפש המיטה בעדינות ניירות לסנן באמצעות מלקחיים רך-קצה. בעדינות לגרד את תחתית הביצה המצורפת נייר הסינון באמצעות המלקחיים ואז בעדינות לתפוס ללא הפעלת לחץ רב על הביצה להגביל ביצי פשפש מיטה לזרוק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את ביצי פשפש מיטת סיר לקבוצות שלהם בתוך צלחות פטרי פלסטיק. הגבל את החשמל הסטטי משליך ביצים פשפש מיטה ידי שפשוף בתחתית כל צלחת פטרי בצד החיצוני בסדין מרכך כביסה. התייחסו לקבוצות של ביצי פשפש מיטה (5-10 ביצים לכל קבוצה) בבת אחת. קחו קבוצה אחת לשכפל ולהשתמש לפחות חמש (או יותר) משכפל עבור assay זה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן דילולים סדרתי של חומרי הדברה כדי לקבל מגוון של 5 ריכוזים שונים (0.21-21 μL / מ&quot;ל ​​עבור imidacloprid (0.1%) / β-Cyfluthrin (0.5%) ו שליטהפתרון עם (מי ברז) ממס בלבד. הפוך 20 מ&quot;ל של כל ריכוז שיהיה מספיק נפח עבור assay טבילה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צינורות צנטריפוגה Cut (50 מיליליטר) ב -35 לקו המ&quot;ל מדיאלית באמצעות כלי סיבובי עם אבזר גלגל חתוך ולאחר מכן לחתוך חור לתוך הכובע של צינור צנטריפוגה (קוטר = 2.54 סנטימטרים) באמצעות אותו הכלי סיבובי עם אלומיניום תחמוצת שחיקה אבן אביזר. השאיר 5 סנטימטרים על קצה הכובע בעת החיתוך, כך הכובע ידפוק מאובטח לתוך הצינור (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים רשת בסדר לריבועים גדולים מספיק כדי להתאים לתוך כובע (~ 5 ס&quot;מ 2). הבריגו את רשת בחוזקה, ביטול כל בליטות, לתוך צינורות צנטריפוגה באמצעות כובע צינור צנטריפוגות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח קבוצת ביצי פשפש מיטה (לשכפל אחד) בעזרת מברשת צבע על הרשת הפנימית של צינור צנטריפוגות. טובלים את קבוצת פשפשים הפנימי של צינור צנטריפוגות לחתוך לתוך ריכוז הדברה למשך 5 שניות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את צינור צנטריפוגות מתוך הפתרון הדברת דואר. לייבש את הרשת עם הביצים בתוך ידי נחת צינור צנטריפוגות ישירות על גבי רקמה במעבדה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הקבוצה של ביצים מתוך הצינור צנטריפוגות בעזרת מברשת צבע קטנה, בסדר-זיפים ולהכניס אותם לתוך צלחת נקייה פטרי עם נייר סינון נקי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שיא תמותת ביצה (כישלון לבקוע) למשך 14 יום על מנת להבטיח את כל הביצים הייתה מספיק זמן כדי לבקוע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נכון לתמותה בטיפול השליטה באמצעות הנוסחא של אבוט (תמותת בדיקת% -% שליטת תמותה / 100 - תמותה מלאה x 100). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כנס תמותה קליט עם הריכוזים המקביל לתוך תוכנת ניתוח 15 לחשב LC 50 ערכים. </li></ol> 2. Assay הדברה ראשית Instar <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרד קבוצת פשפשים שניזון היטב (5 זכרים בוגרים ו -5 נשים בוגרות), רצוי נמאס 1 יום לפני, ולהכניס אותם לתוך צלחת פטרי (6 ס&quot;מ × 5 ס&quot;מ) עם נייר סינון מסופקים mating ו- הטלה. אפשר הפשפשים המבוגרים כדי להזדווג ולהטיל ביצים עבור כ 7-9 ימים. האכלה, להשתמש במערכת האכלה מלאכותית כי מפיצת מים חמים צינורות זכוכית סביב דם 16. לצורך המחקר, להשתמש בדם ארנב defibronated. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את המבוגרים מן צלחות פטרי (6 ס&quot;מ × 5 ס&quot;מ) ולאפשר את הביצים בוקעות והופכות instars הראשון בתוך צלחות פטרי. זה לוקח בערך 7-9 ימים לביצי פשפש המיטה לבקוע בטמפרטורת חדר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אסוף את instars הראשון יאכיל אותם באותו הגיל באמצעות מברשת צבע. גיל יכול להיקבע על ידי הסרת instars הראשון יומי והקלטה היום הם בקעו. מניחים אותם מנות חדשות, נקיות פטרי עד assay הדברה. נימפות instar ראשית הם לא מאוד יבושו עמידים, ולכן assay הדברה אמור להסתיים בהקדם האפשרי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור assay, להכין דילולים סידוריים של imidacloprid / β-Cyfluthrin כדי לקבל מגוון של 5 ריכוזים שונים וכן solu מלאtion עם ממס בלבד. מוצרים בנוסחאות שכותרתו לבקרה פשפש מיטה בארצות הברית שימשו במחקרים אלה, ולכן הממס היה מים (על פי התווית). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פיפטה 150 aliquots μL של כל ריכוז הדברה ומים עבור קבוצת הביקורת על ניירות מסנן הפרט (# 1; 4.2 ס&quot;מ קוטר). הפץ את החרקים על נייר הסינון כולו באמצעות pipetter ידי החלת טיפות מסביב לקצה ומרכז שלם של נייר הסינון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את הניירות לסנן מטופל באופן אישי על גבי לוחות עץ כבדים פרט (7 סנטימטר 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קבוצות שחרור instars הראשון (5 עד 10 בכל קבוצה) על ניירות לסנן פרט ועדיין רטובים עם קוטל חרקים ולכסות את instars הראשון עם התחתון הפוך של צלחת פטרי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחי משקל על גבי צלחת פטרי למנוע פשפשי instar הראשונים לברוח פני שטח המטופל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תמותת שיא של פשפשי instar הראשונים לאחר חשיפה של 24 שעות לכלריכוזי דברה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נכון לתמותה בטיפול השליטה באמצעות הנוסחא של אבוט (תמותת בדיקת% -% שליטת תמותה / 100 - תמותה מלאה x 100). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כנס נרשמה תמותה וריכוזית לתוך תוכנת ניתוח 15 לחשב LC 50 ערכים. </li></ol>

<ol><li>Sabou, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bed+bugs+reproductive+life+cycle+in+the+clothes+of+a+patient+suffering+from+Alzheimer%27s+disease+results+in+iron+deficiency+anemia%5BTitle%5D)+AND+%22Parasite%22%5BJournal%5D)">Bed bugs reproductive life cycle in the clothes of a patient suffering from Alzheimer's disease results in iron deficiency anemia.</a> Parasite. 20, (2013).</li>
<li>Reinhardt, K., Kempke, D., Naylor, R. A., Siva-Jothy, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitivity+to+bites+by+the+bedbug%2C+Cimex+lectularius%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Vet.+Entomol%22%5BJournal%5D)">Sensitivity to bites by the bedbug, Cimex lectularius.</a> Med. Vet. Entomol. 23, 163-166 (2009).</li>
<li>Leverkus, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bullous+allergic+hypersensitivity+to+bed+bug+bites+mediated+by+IgE+against+salivary+nitrophorin%5BTitle%5D)+AND+%22J.+invest.+entomol%22%5BJournal%5D)">Bullous allergic hypersensitivity to bed bug bites mediated by IgE against salivary nitrophorin.</a> J. invest. entomol. 126, 91-96 (2006).</li>
<li>Fletcher, C. L., Ardern-Jones, M. R., Hay, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Widespread+bullous+eruption+due+to+multiple+bed+bug+bites%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Widespread bullous eruption due to multiple bed bug bites.</a> Clin. Exp. Dermatol. 27, 74-75 (2002).</li>
<li>Pritchard, M. J., Hwang, S. W. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2734207/">Severe anemia from bedbugs.</a> Can. Med. Assoc. J. 181, 287-288 (2009).</li>
<li>Goddard, J., de Shazo, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychological+effects+of+bed+bug+attacks+%28Cimex+lectularius+L%29%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Med%22%5BJournal%5D)">Psychological effects of bed bug attacks (Cimex lectularius L).</a> Am. J. Med. 125, 101-103 (2012).</li>
<li>Harlan, H. J. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/263133743_Bed_Bugs_101_the_Basics_of_Cimex_lectularius">Bed bugs 101: the basics of Cimex lectularius.</a> Am. Entomol. 52, 99-101 (2006).</li>
<li>Pinto, L. J., Cooper, R., Kraft, S. K. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPinto%2C+LJ+%22Bed+Bug+Handbook%3A+The+Complete+Guide+to+Bed+Bugs+and+Their+Control%22">Bed Bug Handbook: The Complete Guide to Bed Bugs and Their Control</a>. , Pinto & Associates, Inc.. Mechanicsville, MD, USA. (2007).</li>
<li>Toloza, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+patterns+of+insecticide+resistance+in+eggs+and+first+instars+of+Triatoma+infestans+%28Hemiptera%3A+Reduviidae%29+from+Argentina+and+Bolivia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Med.+Entomol%22%5BJournal%5D)">Differential patterns of insecticide resistance in eggs and first instars of Triatoma infestans (Hemiptera: Reduviidae) from Argentina and Bolivia.</a> J. Med. Entomol. 45, 421-426 (2008).</li>
<li>Cueto, G. M., Zerba, E. N., Picollo, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+of+pyrethroid+resistance+in+eggs+of+Pediculus+humanus+capitis+%28Phthiraptera%3A+Pediculidae%29+from+Argentina%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Med.+Entomol%22%5BJournal%5D)">Evidence of pyrethroid resistance in eggs of Pediculus humanus capitis (Phthiraptera: Pediculidae) from Argentina.</a> J. Med. Entomol. 45, 693-697 (2008).</li>
<li>Ho, S. H., Goh, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deltamethrin+as+a+potential+ovicidal+pyrethroid+against+Plutella+xylostella+L%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+let%22%5BJournal%5D)">Deltamethrin as a potential ovicidal pyrethroid against Plutella xylostella L.</a> Toxicol. let. 22, 161-164 (1984).</li>
<li>Bell, C. H., Hole, B. D., Evans, P. H. The occurrence of resistance to phosphine in adult and egg stages of strains of Rhyzopertha dominica (F.)(Coleoptera: Bostrichidae). J. Stored Prod. Res. 13, 91-94 (1977).</li>
<li>Campbell, B. E., Miller, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insecticide+Resistance+in+Eggs+and+First+Instars+of+the+Bed+Bug%2C+Cimex+lectularius+%28Hemiptera%3A+Cimicidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Insects%22%5BJournal%5D)">Insecticide Resistance in Eggs and First Instars of the Bed Bug, Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae).</a> Insects. 6, 122-132 (2015).</li>
<li>Price, L. A., Mills, K. A. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/0022474X88900082">The toxicity of phosphine to the immature stages of resistant and susceptible strains of some common stored product beetles, and implications for their control.</a> J. Stored Prod. Res. 24, 51-59 (1988).</li>
<li>Robertson, J. L., Preisler, H. K., Russel, R. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRobertson%2C+JL+%22PoloPlus%3A+Probit+and+Logit+Analysis+User%27s+Guide%22">PoloPlus: Probit and Logit Analysis User's Guide</a>. , LeOra Software. Petaluna, CA, USA. (2003).</li>
<li>Montes, C., Cuadrillero, C., Vilella, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maintenance+of+a+laboratory+colony+of+Cimex+lectularius+%28Hemiptera%3A+Cimicidae%29+using+an+artificial+feeding+technique%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Med.+Entomol%22%5BJournal%5D)">Maintenance of a laboratory colony of Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae) using an artificial feeding technique.</a> J. Med. Entomol. 39, 675-679 (2002).</li>
<li>Brogdon, W. G., McAllister, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplification+of+adult+mosquito+bioassays+through+use+of+time-mortality+determinations+in+glass+bottles%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Mosq.+Control.+Assoc%22%5BJournal%5D)">Simplification of adult mosquito bioassays through use of time-mortality determinations in glass bottles.</a> J. Am. Mosq. Control. Assoc. 14, 159-164 (1998).</li>
<li>Katarzyna, K., Saddler, A., Koella, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+age+and+larval+nutrition+on+phenotypic+expression+of+insecticide-resistance+in+Anopheles+mosquitoes%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Effects of age and larval nutrition on phenotypic expression of insecticide-resistance in Anopheles mosquitoes.</a> PLoS One. 8 (3), (2013).</li>
<li>Outram, I. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/248283593_Factors_affecting_the_resistance_of_insect_eggs_to_sulphuryl_fluoride-I_The_uptake_of_sulphuryl-35S_fluoride_by_insect_eggs">Factors affecting the resistance of insect eggs to sulphuryl fluoride-II: the distribution of sulphuryl-35 S fluoride in insect eggs after fumigation.</a> J. Stored. Prod. Res. 3, 353-358 (1967).</li>
</ol>

החוקרים אין לי מה לחשוף.

שלב קריטי בבדיקה זו הוא להבטיח שאף ביצית שמוסרת ממשטח לא ייפגעו לפני הבדיקה. חרקים רבים מצמידים את ביציהם למצע, ולכן ייתכן שיהיה צורך בבדיקה מקדימה כדי להבטיח שההסרה לא תגרום לתמותה. ניתן לבצע בדיקה זו עם מספר שכפולים של קבוצה מטופלת (פשפשי מיטה הוסרו מנייר סינון) בהשוואה לקבוצת ביקורת (פשפשי מיטה לא הוסרו). שיעורי תמותה נמוכים דומים (או אי תמותה) בין קבוצת הטיפול לקבוצת הביקורת יבטיחו שההסרה לא גרמה לתמותת ביציות. לפיכך, כל תמותה שנרשמה לבדיקת קוטל החרקים צריכה לנבוע מהטיפול בקוטלי חרקים. ניתן לערוך את אותו ניסוי ראשונ...

באגים מיטה הם מזיקים אורבאניים משמעותיים שיכול לגרום לאובדן דם, גירויים בעור, נדודי שינה, דיכאון, וחרדת מארחי האדם שלהם 1, 2, 3, 4, 5, 6. העלויות של ביטול ושליטת פשפשים הן גבוהות ולעתים קרובות פעמים מצריכות ביקורים מרובים לבית על ידי חברת דברת 7. ביקורים מרובים בדרך כלל נדרשים בגלל ההתנהגות הנסתרת של פשפשים ואת הקשיים הקשורים להרוג אותם. בפרט, ביצי פשפש מיטה קשות לשלוט בגלל גודלם הקטן ואת ההגנה על העובר על ידי קליפת הביצה. נכון לעכשיו, מנהג נפוץ עבור חברות הדברה רבות ברחבי ארצות הברית הוא לטפל בית פשפשים באמצעות הדברה כימית. זה ידועכי הביצים קשות לשלוט, כל כך הרבה חברות יישמו מסגרת הזמן של שבועות מחדש טיפולים 8. זה מאפשר ביצי פשפש מיטה מספיק זמן כדי לבקוע, כך instar הראשונה תצא ו כביכול להיות קל להרוג עם חומרי הדברה. עם זאת, יש מחסור במחקרים להערכת היעילות של חומרי הדברה נוזלי נגד ביצים באג המיטה instars הראשון. ביצי חרקים תועדו אמור להיות שלב החיים הכי קשה לשלוט ב חרקים מזיקים עירוני, למעט פשפשים, בנוסף מזיקי חקלאות רבים. רוב הקשיים הללו יוחסו קליפת הביצה, בעוד כמה מחקרים דיווחו התנגדות חרקים. ההתנגדות בשלב הביצה תועד Triatoma infestans 9, Pediculus humanus capitis 10, Plutella xylostella 11, Rhyzopertha דומיניקה 12, <em&gt; Cimex lectularius 13, וחיפושיות מוצר מרובים מאוחסנים (כלומר Oryzaephilus surinamensis, Tribolium castaneum, Cryptolestes ferrugineus ו Rhyzopertha דומיניקה). 14 פיתוח העמידות בשלב הביצה בשלבים בשלים, כמו גם סיבוכים הקשורים חדיר דברה דרך קליפת הביצה, מחייב את הצורך bioassays היעיל דברה נגד שלבי החיים האלה. פרוטוקול זה מספק הליך צעד-אחר-צעד לקביעת היעילות של חומרי הדברה בשלב הביצה instar הראשון של פשפשים משותפים, Cimex lectularius. שני פרוטוקולים אלה הם מבחני ריכוז בתגובה לאפשר כימות של ערכים 50 LC. מבחני ריכוז תגובה משמשים ללימודי טוקסיקולוגית, אולם פרוטוקול זה הותאם לטיפול בקבוצות בקלות ביצים באג מיטת instars הראשון. מבחנים אלה יכולים להיות מותאמיםביצים &#39;מינים שונים של חרקים ונמצאים בשלבים שונים בחיים לא בשלה.

<table><tbody><tr><td>מנות פטרי</td><td>פישר סיינטיפיק בע"מ</td><td>08-757-105</td><td></td></tr><tr><td>נייר סינון</td> פלסטיק <td>Whatman</td><td>1001-042</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים במשקל נוצה</td><td>פישר סיינטיפיק בע"מ.</td><td>4750</td><td></td></tr><tr><td>Temprid SC (אימידקלופריד/ביפנתרין)</td><td>Bayer CropScience</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Transport GHP (אצטמיפריד / ביפנתרין)</td> <td>FMC Corp.</td><td></td><td></td></tr><tr>צינור <td></td><td>צנטריפוגה</td><td>06-443-18</td><td>50 מ"ל; הברגה עליונה שטוחה</td></tr><tr><td>רשת</td><td></td> עדינה <td>7250C</td><td></td></tr><tr><td>KimWipe</td><td></td><td>06-666A</td><td>11 ס"מ x 21 ס"מ</td></tr><tr><td>מברשת</td><td></td><td></td> צבע קטנה <td>כל מברשת צבע קטנה</td></tr><tr><td>לוחות</td><td></td><td></td> לוח קשיח עץ <td>מרוכב או אריח יספיקו מחנות לשיפור הבית</td></tr><tr><td>מתכת משקולות</td><td></td><td></td><td>כל סוג של בורג מתכת שיחזיק את משקל צלחת הפטרי על משטח</td></tr></tbody></table>

שיטה להערכת יעילות הדברה נגד פשפש מיטה,<em&gt; cimex lectularius</em&gt;, ביצים ראשית instars

A Method for Evaluating Insecticide Efficacy against Bed Bug, Cimex lectularius, Eggs and First Instars

הערכות רעילות תקן של חומרי הדברה נגד חרקים מזיקים נערכות בעיקר מחרקים מבוגרים. הערכות מבוססות על מנה-תגובה או עקום ריכוז תגובה, שבו עליות תמותת המינון או הריכוז של חרקים הוא גדלה. ריכוז קטלני רגיל (LC 50) מנה קטלנית (LD 50) בדיקות שתוצאתן תמותת 50% מהון מניות של אוכלוסיית בדיקה יכולים להיות אתגר עבור הערכה רעילה של חומרי הדברה נגד שלבי חי חרק לא למבוגרים, כגון ביצי instar מוקדם או בשלבי nymphal . עם זאת, מידע זה חיוני להבנת יעילות דברה בכל שלבי חייהם פשפש המיטה, אשר משפיעה המאמצים לבקרה וטיפול. פרוטוקול זה השתמש מבדק טבילת תקן שונה ביצי באג המיטה assay חרקי קשר לטיפול instars הראשון nymphal. מבחנים אלו לייצר עקומת ריכוז תגובת לכמת נוסף LC 50 ערכים עבור הערכות דברה.

הביצים היו טבלו 5 ריכוזים שונים של imidacloprid / β-Cyfluthrin (μL / מיליליטר). Instars הראשון הונחו על גבי משטחי מטופלים של חמישה ריכוזים שונים של imidacloprid / β-Cyfluthrin (איור 2). השתמשנו בשלוש אוכלוסיות שונות של ג lectularius: הרלן, ריצ&#39;מונד, אפי מרכז (טבלה 1). זן הרלן רגיש דברת pyr...

ערכות דברה לעתים קרובות ממוקדות נגד חרקים בוגרים, ולא בשלבים בשלים. כאן, אנו מציגים פרוטוקול להערכת הדברה נגד ביצי פשפש מיטה עם השוואה לשלב פשפש מיטת nymphal הראשון. פרוטוקולים אלה יכולים להיות מותאמים עבור וחרקים אחרים להעריך יעילות דברה בשלבי חיים לא למבוגרים.

שיטה להערכת יעילות הדברה נגד פשפש מיטה,<em&gt; Cimex lectularius</em&gt;, ביצים ראשית Instars

Standard toxicity evaluations of insecticides against insect pests are primarily conducted on adult insects. Evaluations are based on a dose-response or ...

המטרה הכללית של ניסוי זה היא להעריך את יעילותם של קוטלי חרקים בהשמדת ביצי פש bed bugs ושל ניםפות בשלב הגיל הראשון (first instars). שיטה זו יכולה לסייע במתן מענה לשאלות מפתח בתחום האנטומולוגיה, כגון השפעותיהם של בדיקות רעילות על ביצי פש ועל ניםפות קטנות. היתרון המרכזי של טכניקה זו הוא שהיא תוכננה לטיפול בשלב חיים קשה של חרק באמצעות קוטלי חרקים, ובמיוחד בשלב הביצה.כדי להתחיל בניסוי, הוציאו חמישה עד 10 פשפשי מיטה נקבות בוגרות, מוזנות היטב ומזיווגות מהמושבה, והניחו את הנקבות בתוך צלחת פטרי עם נייר סינון. הכינו 10 חזרות כדי להבטיח שיהיו מספיק ביצים עבור בדיקת קוטלי ההדברה. בדקו את הצלחות מדי יום כדי לראות אם הנקבות הטילו ביצים.לאחר שהנקבות הטילו ביצים, הוציאו את הנקבות מכלית הפטרי והעבירו אותן מדי יום לכלי פטרי חדשים עם נייר סינון חדש. רשמו את הנתונים על כלי הפטרי הישנים והחדשים. המתינו ארבעה עד חמישה ימים להבשלת הביצים לפני תחילת הבדיקה.לאחר שהביצים התבגרו כראוי, הסירו בעדינות את ביצי הפשש מניירות המסנן באמצעות פינצטה בעלת קצוות רכים. גרדו בעדינות את בסיס הביצה המחוברת לנייר המסנן באמצעות הפינצטה, ולאחר מכן אחזו בעדינות בביצה מבלי להפעיל לחץ רב מדי כדי למנוע את השלכת ביצי הפשש. העבירו את ביצי הפשש שהוסרו לקבוצותיהן המתאימות בתוך צלחות פטרי מפלסטיק.שפשפו את החלק החיצוני של תחתית כל צלחת פטרי באמצעות גיליון מרכך כביסה כדי להפחית חשמל סטטי שעלול לגרום להעתפת ביצי הפשים. לאחר מכן, הכינו דלולות סדרתיות של חומרי הדברה כדי לקבל טווח של חמישה ריכוזים שונים, וכן תמיסת ביקורת המכילה מי ברז בלבד, בנפח של 20 mL לכל אחת. קחו מבחנות צנטריפוגה של 50 mL שנגזרו מראש בקו ה-mL, ולאחר מכן גזרו רשת דקה לריבועים בגודל המספיק כדי להיכנס למכסה.הברגה את הרשת בחוזקה אל תוך מבחנות הצנטריפוגה באמצעות מכסה מבחנת הצנטריפוגה, תוך ביטול כל בליטה. לאחר מכן, בעזרת מכחול, הנח קבוצה של ביצי פש bed bug על הרשת בתוך מבחנת צנטריפוגה. טבול את קבוצת ביצי הפש בתוך מבחנת הצנטריפוגה החתוכה בריכוז של קוטל חרקים למשך חמש שניות.הוציאו את מבחנת הצנטריפוגה מתוך תמיסת קוטל ההדברה. הניחו את מבחנת הצנטריפוגה ישירות על נייר סופג במעבדה כדי לייבש את הרשת ובתוכה הביצים. לאחר הייבוש, הוציאו את קבוצת הביצים ממבחנת הצנטריפוגה באמצעות מברשת צבע קטנה בעלת סיבים דקים והניחו אותן בתוך צלחת פטרי נקייה עם נייר סינון נקי.יש לתעד את תמותת הביצים במשך 14 ימים כדי להבטיח שלכל הביצים היה זמן מספיק לבקוע. יש לתקן את התמותה בטיפול הביקורת באמצעות נוסחת Abbott. יש להזין את התמותה שתועדה יחד עם הריכוזים המתאימים לתוכנת הניתוח כדי לחשב ערכי LC50.הפרידו קבוצה של חמישה פשפשי מיטה זכרים בוגרים וחמישה נקבות בוגרות שהוזנו ביום הקודם, והניחו אותם בצלחת פטרי עם נייר סינון. אפשרו לפשפשי המיטה הבוגרים להזדווג ולהטיל ביצים במשך שמונה ימים. לאחר מכן, הסירו את הבוגרים מצלחות הפטרי ואפשרו לביצים לבקוע לדור הראשון (first instars) בתוך צלחות הפטרי.אספו את הדרג הראשון (first instars) שטרם הוזן ובגיל זהה באמצעות מברשת צבע, ולאחר מכן העבירו אותם לצלחות פטרי נקיות וחדשות עד לביצוע בדיקת קוטל ההדשראים. טפטפו באמצעות פיפט מנות של 150 microliter מכל אחת מחמש הדילולות של קוטל ההדשראים שהוכנו מראש, ומים עבור קבוצת הביקורת, על ניירות סינון נפרדים. פזרו את קוטל ההדשראים באופן שווה על ידי הנחת טיפות מסביב לכל שולי נייר הסינון ובמרכזו.הניחו את ניירות הסינון המטופלים באופן בודד על גבי לוחות קרטון קשיח נפרדים. שחררו קבוצות של פשפשי מיטה בשלב ה-first instar על ניירות הסינון הבודדים בעודם רטובים בחומר ההדברה, וכסו את הפשפשים באמצעות תחתית של Petri dish הפוכה. הניחו משקולת על גבי ה-Petri dish כדי למנוע מהפשפשים בשלב ה-first instar לברוח. רשמו את שיעור התמותה של פשפשי המיטה בשלב ה-first instar לאחר 24 שעות של חשיפה לכל ריכוזי חומר ההדברה.בצעו תיקון עבור תמותה בקבוצת הביקורת באמצעות נוסחת Abbott. הזינו את נתוני התמותה והריכוזים שנרשמו לתוכנת הניתוח כדי לחשב ערכי LC50. אחוז התגובה או התמותה של ביצי פש bed bug מזן Harlin לחמישה ריכוזים שונים של metocloprid beta-cyfluthrin עלה ככל שהמינון עלה.שיעור התמותה הגיע ל-100% בריכוז הגבוה ביותר שנבדק. לאחר צפייה בסרטון זה, תהיה לכם הבנה טובה יותר לגבי האופן שבו יש להעריך את יעילותם של קוטלי חרקים נגד ביצים ושלבי גיל ראשונים (first instars) של פשפשי מיטה.

a-method-for-evaluating-insecticide-efficacy-against-bed-bug-cimex

Research

JoVE Journal

Environment

סביבה

כתב יד זה מדגים ודן בשימוש בטכניקות סקר הרגישות חומרי הדברה לזהות התנגדות לפנות וחומרי הדברה מזיקים arthropod מערכתי.

Bioassays עבור ההתנגדות הדברה ניטור

C. התנהגות הטלת ביצים של elegans יכולה לספק מידע חשוב במחקרים התפתחותיים, פוריותיים ואנטומיים. סרטון זה מציג את השלבים החשובים של בדיקת הטלת ביצים ומציג ניסוי לדוגמה שבו תרופה נבדקת לרעילות רבייה.

בדיקת הטלת ביצים: שיטה לכימות התנהגות הטלת הביצים של C. elegans

ביצה בתולעת assay (EIW) הוא שיטה יעילה לכמת-הטלת התנהגות. שינויים בנחת ביצה יכולים להיות תגובה התנהגותית של האורגניזם...

מדידת ההשפעות של חיידקים על<em&gt; ג Elegans</em&gt; התנהגות באמצעות Assay שימור ביצה

פשפשי מיטה מסתמכים על נוירונים של קולטני ריח השוכנים ברגישות הריח של האנטנות שלהם כדי לזהות סמיוכימיקלים בסביבה. תוך שימוש בהקלטת סנסילום יחידה, אנו מדגימים שיטה להערכת תגובת פשפש המיטה לסמיוכימיקלים ולחקור את תהליך הקידוד הכרוך בכך.

שימוש יחיד Sensillum הקלטה לזיהוי תגובות חוש הריח Neuron של באגס במיטה לSemiochemicals

לוחות תמותה לאפשר כימות של מקורות ושיעורי התמותה בקרב אוכלוסיות החרקים ולתרום להבנת, חיזוי, מניפולציה הדינמיקה באוכלוסייה של agroecosystems. שיטות ביצוע וניתוח טבלאות עוקבה מבוסס החיים בשדה של חרק עם חיים לא בוגר sessile שלבים מוצגים.

מתודולוגיית פיתוח טבלאות החיים עבור חרקים Sessile בשימוש השדה כנימת עש הטבק, כנימת עש הטבק, כותנה כמו מערכת מודל

פרוטוקולים מתוארים להערכת הרעילות של בדיקות, הביוכימיה כדי יתושים ילדותית, למבוגרים לפיתוח כמו שיעורים חדשים של larvicides, adulticides ו- endectocides. הפרוטוקולים מאפשרים תפוקה גבוהה בדיקה של מספר בדיקות, הביוכימיה ב נקודה אחת במינון והערכה עוקבות באמצעות מנה assay התגובה לקביעת רעילות במגע או באמצעות בליעה.

פרוטוקולים לבדיקת הרעילות של הרומן בדיקות, חרקים הביוכימיה על היתושים

כאן, אנו מציגים את פרוטוקול לחקור את ההעדפה להתגלמות של הזחלים בוגרים של Ectropis grisescens בתגובה בקרקע גורמים (למשל, סוג המצע ותוכן לחות) באמצעות בחירה bioassays. אנו מציגים גם פרוטוקול של bioassays לא-הבחירה כדי לקבוע את הגורמים המשפיעים על ההתנהגויות להתגלמות, שאירים של א grisescens.

הבחירה ו- Bioassays לא-הבחירה ללמוד את העדפה להתגלמות והצלחה הופעתה של Ectropis grisescens

אנו מציגים טכניקה פשוטה cytogenetic באמצעות 4 ′, 6-diamidino-2-phenylindole (דאפי) כדי לקבוע את שיעור ההפרייה יחס העיקרי של המזיק פולשני haplodiploid כנימת עש הטבק.

קביעת שיעור הפריה הביצית של כנימת עש הטבק בטכניקה Cytogenetic

שיטה המשתמשת בפירות קפה ירוקים (GFs) פותחה כדי לבחון את הרעילות של קוטלי חרקים נגד בור פירות יער הקפה (CBB). קוטלי חרקים או חומרים רעילים יושמו על GFs מחוטאים לפני או אחרי התפשטות CBB. הוערכו תמותת חרקים, דחייה ויכולת רבייה, בנוסף לפרמטרים אחרים.

מתודולוגיה לבדיקת סוכני בקרה וקוטלי חרקים כנגד היפותנאמוס של ברי ברי הקפה

פרוטוקול זה מתאר את בדיקת ההזנה המחייבת להעריך את ההשפעה הרעילה, פוטנציאלית, של פיטוכימיקל על זחלי החרקים הלפידופטרניים. זוהי בדיקה ביולוגית של חרקים בעלת יכולת הרחבה גבוהה, שקל לייעל את המינון התת-קטלני והקטלני, את פעילות ההרתעה ואת ההשפעה הפיזיולוגית. זה יכול לשמש להקרנת קוטלי חרקים ידידותיים לסביבה.

פיתוח מערכת בדיקת האכלה להערכת ההשפעה קוטלת החרקים של פיטוכימיקלים על Helicoverpa armigera

למדו שיטה להערכת יעילות חומרי הדברה נגד ביצים ונימפות ראשוניות של פשפש המיטה Cimex lectularius. הפרוטוקול מסייע לחוקרים לשפר אסטרטגיות שליטה במזיקים על ידי מיקוד בשלבי חיים קריטיים.

שיטה להערכת יעילות הדברה נגד פשפש מיטה,

גלה סרטונים נוספים