RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
he_IL
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/55209-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
כאן, אנו מתארים טכניקה לאספקה מקומית של ריאגנטים לבלוטת החלב של הארנב באמצעות זריקה תוך-צינורית. בנוסף, אנו מתארים פרוטוקול להדמיה ואישור מסירה על ידי הדמיית אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה של חומרי ניגוד.
המטרה הכוללת של הליך זה היא לספק תמיסות מימיות לצינור החלב של הארנב ולדמיין את המסירה התוך-צינורית על ידי הדמיית אולטרסאונד. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום הביולוגיה של השד, כגון כיצד טיפולים מתקשרים בצורה שונה עם סביבת צינור החלב בהשוואה לאתרי מתן אחרים. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שניתן לתת את מגיב הניגודיות להדמיה או כל טיפול פוטנציאלי שיש להעריך באופן מקומי לרקמה בה מתעוררים נגעים בשדיים.
תדגים את הטכניקה אמיליה קלארק, טכנאית במעבדה שלי. כדי להתחיל בהליך זה, יש לגלח בזהירות את בטן הזנב של ארנב מורדם באזור סביב הזוג השלישי והרביעי של פטמות מפשעתיות. לאחר הסרת רוב השיער, יש למרוח את הקרם להסרת שיער על האזורים המגולחים ו-10 דקות לאחר המריחה, להסיר את הקרם באמצעות מגבת נייר לחה שהורטבה במים חמים.
לאחר מכן נגב את האזור עם רפידות גזה ספוגות באלכוהול כדי לנקות את מקום ההזרקה. הניחו את הארנב על הגב שלו בשוקת בצורת V מרופדת בשמיכת מים חמים מחזורית בכרית סופגת. להכנת חומר הניגוד יש להרכיב אותו מחדש בהתאם להוראות היצרן.
לאחר מכן נדנד בעדינות את הבקבוקון כדי לערבב. חומר הניגוד המשמש כאן יציב בטמפרטורת החדר במשך ארבע עד שש שעות לאחר ההרכבה מחדש. בהליך זה אתר את הזוג השלישי והרביעי של פטמות מפשעתיות להזרקה.
לאחר מכן טען 0.2 מיליליטר של תמיסת מלח סטרילית 0.9 למזרק טוברקולין מנעול מיליליטר אחד עם מחט בגודל 22. השלך את המחט בגודל 22 ברגע שתמיסת המלח נמצאת במזרק והחלף אותה במחט סטרילית בגודל 25. לאחר מכן, נגב בעדינות את האזור עם 85% אלכוהול איזופרופיל על פד גואז.
כששיפוע המחט כלפי מעלה והמזרק מקביל לגוף החיה, הכנס את המחט לצד הפטמה והזריק לאט 0.1 עד 0.2 מיליליטר מלח כדי לאפשר הדמיה טובה יותר של פתחי הצינורות. לאחר מכן טען 0.2 מיליליטר של תמיסת הזרקה למזרק טוברקולין של מיליליטר אחד. החזיקו את הפטמה בעדינות עם אגודל ואצבע מורה והרימו אותה מעט להזרקה התוך-צינורית.
תוך שמירה על המיקום המורם של הפטמה, קנטו בזהירות את צינור העניין באמצעות מחט קצה קהה בגודל 25. לאחר הקנולציה, סובב בעדינות את מזרק נעילת הלואר על רכזת מחט העירוי הקהה עד שהוא ננעל במקומו. הרם את הפטמה והזריק את התמיסה באיטיות כדי למזער את הנזק הפוטנציאלי הנגרם על ידי נוזלים הנעים במהירות בתוך הצינור.
כעת מרחו כמות ליברלית של ג'ל אולטרסאונד צנטריפוגה על העור של אזור העניין. ודא שאין בועות בג'ל מכיוון שהן יפגעו באיכות התמונה. לאחר מכן הגדר את עומק ההדמיה לשישה מילימטרים.
הנח את המתמר של 21 מגה-הרץ במגע עם הג'ל וסרוק את אזור העניין במצב B. התבונן במדיום הניגוד באזור הסרוק, כולל פתח הצינור ולאורך הצינור כדי לאשר אספקה תוך-צינורית מוצלחת. לאחר מכן צלם ושמור את התמונה.
הסר את ג'ל האולטרסאונד מעור החיה בעזרת רפידות גזה. לאחר מכן בדקו את מקום ההזרקה וודאו שאין סימני טראומה לאזור הפטמה או לרקמה שמסביב. נפיחות באזור המקיף את הפטמה מעידה ככל הנראה על הזרקת כרית שומן חלב ולא על הזרקה תוך-צינורית מוצלחת.
מגיב הניגוד ממוקם מיד לאחר הלידה ומוצג 30 דקות לאחר הלידה ו-45 דקות לאחר הלידה. ההתמדה של המגיב בתוך צינור החלב מאפשרת הדמיה לאורך כל התהליך הזה. תמונה זו מציגה את המראה החיצוני לאחר ההזרקה התוך-צינורית של 0.2 מיליליטר של תמיסה כחולה של אוונס.
עם פתיחת העור הכחול של אוונס מאפשר הדמיה של כל עץ צינור החלב ומאשר את מבנה הצינור השלם. ותמונה זו מציגה את כל דגימת ההר של אזור של בלוטת החלב המפשעתית לאחר קיבוע וצביעה באלום קרמין. לאחר שליטה בטכניקה זו ניתן לבצע תוך כ-15 דקות, למעט הזמן הנדרש כדי לאפשר להרדמה להיכנס לתוקף.
בזמן ניסיון הליך זה, חשוב לזכור להרים את הפטמה כדי ליישר את התעלות במהלך הלידה התוך-צינורית. בכל עת פעל לפי הנחיות רווחת בעלי החיים של המוסד שלך. לאחר הליך זה, ניתן לבצע שיטות אחרות כמו הדמיה מתקדמת או ניתוחי רקמות קצה כגון ליזו או אימונוהיסטוכימיה כדי לענות על שאלות נוספות לגבי הפרמקודינמיקה או שינויים מורפולוגיים ברמת הרקמה הנגרמים על ידי מתן חומר טיפולי.
לאחר פיתוחה, טכניקה זו סוללת את הדרך לחוקרים בביולוגיה של החלב לחקור את העברת חומרי הדמיה כמו גם טיפולים בצינור החלב בעתיד. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לבצע משלוח תוך-צינורי לבלוטת החלב של הארנב.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
03:45
Related Videos
5K Views
03:44
Related Videos
2.5K Views
04:02
Related Videos
3.1K Views
06:39
Related Videos
36.2K Views
07:02
Related Videos
13.3K Views
13:00
Related Videos
4K Views
13:43
Related Videos
4.9K Views
12:57
Related Videos
2.7K Views
05:36
Related Videos
2.1K Views
08:16
Related Videos
820 Views