הערכת ההשפעה של כימיקלים סביבתיים על התפתחות דבורת דבש מן הפרט אל רמת קולוני

המטרה הכוללת של ניסוי זה היא להעריך כיצד שאריות חומרי הדברה בסביבה משפיעות על דבורי דבש בודדות במצב הטבעי של מושבות כוורות. היתרון העיקרי של שיטה זו הוא שהיא סוקרת את ההשפעות של חומרי הדברה או מזהמים אחרים מעניינים הן על דבורי דבש בודדות והן על המושבות כולן. הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית מכיוון שהמניפולציה של גלמים קשה מכיוון שהם שבירים.

מי שידגים את ההליך יהיה קו צ'ונג-יו, סטודנט לדוקטורט מהמעבדה שלי. לפני הניסוי יש להאכיל כל מושבה בליטר של סירופ סוכר 50%. מלאו את מאגר המזון מדי שבוע, במושבה בריאה יהיו תשע מסגרות של מסרקי דבורים ומלכה אחת המטילה ביצים.

כדי להתחיל, אתר את המלכה במושבה והחלף לפחות מסגרת אחת בצד שלה של המושבה במסגרת ריקה. לאחר מכן הכנס את מחריגי המלכה כדי לבודד את המלכה לקטע של ארבע מסגרות המכיל לפחות מסגרת ריקה אחת. למחרת, בדקו אם יש ביצים טריות במסגרות והפרידו את הביצים מהמלכה למשך 72 שעות.

לאחר מכן הסירו את המסגרות הללו, הברישו את הדבורים הפועלות והתכוננו לטפל בזחלים בתאי הגידול. לכל טיפול יש לכסות 50 זחלים בני יום אחד שנבחרו באקראי במסגרת עם שקופיות שקופות. אבטח את השקופיות באמצעות נעצים ממוזערים, ולאחר מכן צור מידע מזהה על השקופיות עם סמן קבוע.

כעת באמצעות BLD מחומם ל -35 מעלות צלזיוס, הפוך ריכוזים שונים של טיפול PPN הנעים בין 0.1 ל -100 חלקים למיליון בנפחים של 100 מ"ל. במשך שלושת הימים הבאים, טפל בקבוצות תאי הדגירה. כדי לטפל בזחלים, חשפו אותם והוסיפו 10 מיקרוליטר מתמיסת PPN BLD לכל תא דגירה.

חזור על הטיפול למחרת באמצעות 10 מיקרוליטר של תמיסת טיפול, וחזור על הטיפול ביום השלישי באמצעות 20 מיקרוליטר של תמיסת טיפול. לאחר הטיפול השלישי, תנו להם להתפתח במושבה בתכנון הניסוי, שכפל כל קבוצת טיפול ארבע פעמים באמצעות מושבות שונות. ביום השביעי, בדוק את הזחלים שטופלו ב-PPN, רשום את שיעורי התמותה והמכסה בקבוצות הטיפול.

ביום ה-13, רשום את קצב האקלוזיה של כל קבוצת טיפול. ראשית, הסר את שעוות הדבורים מתאי הגידול המכוסים. לאחר מכן הסירו את הגלמים בעזרת פינצטה כדי לאחוז בהם קלות מאוד, ומשכו אותם בעדינות החוצה.

בעת הסרת הגלמים, השתמשו באחיזה בין הראש לבית החזה והוציאו את הגלמים בעדינות רבה. יהיה צורך להתאמן פעמים רבות כדי להשיג שיעור הישרדות של לפחות 90% לפני הפעלת הניסוי. העבירו את הגלמים ל-24 צלחות תרבית רקמה מרופדות בשתי שכבות של רקמת מעבדה.

הקפד לציין כל נזק בתמותה המתרחש במהלך ההעברה. שמור את צלחות התרבות על 34 מעלות צלזיוס עם לחות יחסית של 70% עד להופעתן. במהלך שמונת הימים הבאים, רשום את קצב האקלוזיה.

הגדר כמו קודם עם מושבה בריאה של תשע פריימים שבה המלכה מוגבלת לקטע של ארבע מסגרות המכיל לפחות מסגרת ריקה אחת. קרא לחלק ארבעת המסגרת חלק A ולחלק חמשת המסגרת B.Be לוודא שמוציאי המלכה מחלקים את המושבה לחלוטין כך שהמלכה לא יכולה לעבור בין החלקים. חלוקה זו חיונית לאיסוף קבוצות של זחלים בני יום אחד.

למחרת, סמנו קבוצה של 100 תאי דגירה עם ביצים טריות שהוטלו כמו קודם. זו קבוצה ראשונה, החזירו אותה לחלק א' למשך שלושה ימים. יומיים לאחר מכן, העבירו את המלכה לחלק ב' להטלת ביצים.

למחרת, סמנו 100 ביצים טריות בחלק ב' כקבוצה שנייה והחזירו את החלק לחלק ב' במושבה. לאחר יומיים נוספים, החזירו את המלכה לחלק A.כעת חזרו על התהליך כדי ליצור קבוצה נוספת והמשיכו להחליף את המלכה בין חלק A לחלק B כל שלושה ימים עד שהוקצו תשע קבוצות של ביצים בנות יום אחד במרווחים של שלושה ימים. במהלך חמשת הימים הראשונים להתפתחות, ציינו את קצב הבקיעה של כל קבוצה מסומנת של תאי דגירה.

לאחר 11 ימי התפתחות, התחל לרשום את מספר תאי הדגירה המכוסים בכל קבוצה. ביום ה-13 של הניסוי, טפלו במושבה בסירופ סוכר 50% המכיל PPN ב-10 או 100 חלקים למיליון. טען קופסת הזנה עם ליטר טיפול אחד וחבר אותה למושבה.

קבוצה ראשונה היא ביקורת לא מטופלת מכיוון שהתאים הללו צריכים להיות מכוסים כעת. החל מהיום ה-17 יש לרשום את קצב האקלוזיה של כל קבוצה. לשם כך, העבירו את הזחלים כפי שהודגם קודם לכן לצלחת של 24 בארות, ואז דגרו על הצלחת ומאוחר יותר רשמו את קצב האקלוזיה.

לאחר 49 ימים, יש לדעת את נתוני האקלוזיה מכל תשע הקבוצות. תאי דגירה בודדים טופלו כמתואר ב-PPN BLD. ההשפעה השלילית של חומר ההדברה על שלב הזחל של דבורי הדבש נצפתה בקלות והייתה תלויה במינון.

השפעות אלה כללו מלניזציה ועיוות כנפיים. כדי לדמות מושבות דבורי דבש הסובלות משאריות PPN סביבתיות, מושבות שלמות הוזנו בסירופ PPN. קבוצה ראשונה היא קבוצת ביקורת, שכן דבורים אלה התפתחו לבוגרים לפני הטיפול.

קבוצות 2 ו-3 הושפעו בתחילה בשלב הזחל, וקבוצות 4 עד 9 הושפעו בתחילה כביצים. שינויים בבקיעה, מכסה, אקלוזיה ועיוותים התרחשו עם טיפולי PPN. 100 חלקים למיליון PPN היו יעילים יותר מ-10 חלקים למיליון, למעט בקצב הבקיעה.

יתר על כן, לאחר הטיפולים, גלמים רבים מתו עם ציפורניים שחורות או מאי יציאה. בטיפול ב-100 ppm PPN, תאים מכוסים הושמדו והגלמים הפגועים הוצאו מהמושבה. לאחר השליטה, ניתן לבצע את הליך הטיפול במושבה תוך כחודש, וניתן לסיים את המניפולציה היומית של הגולם תוך כשעתיים.

בזמן שאתם מנסים הליך זה, חשוב לזכור לבדוק באופן קבוע את מצב המושבה שלכם ולהיות מיומנים היטב בטיפול בגלמים לפני שאתם מבצעים ניסוי. אל תשכח שעבודה עם דבורי דבש עלולה להיות מסוכנת בגלל אלרגיות לארס דבורים. תמיד יש לנקוט באמצעי זהירות כגון לבישת בגדי מגן בעת ביצוע הליך זה.