הקלטה EEG בחופשיות העברת חולדות neonatal בשיטת רומן

כאן, אנו מציגים טכניקה חדשנית שנועדה להקליט electroencephalography (EEG) בחופשיות נעורים אפילפטיים נעורים באופן חופשי ולתאר את הנהלים שלה, תכונות, ויישומים. שיטה זו מאפשרת אחד להקליט EEG במשך יותר מ 1 בשבוע.

המטרה הכוללת של שיטה זו היא לתעד EEG מגורי חולדות יילודים הנעים בחופשיות, באמצעות אלקטרודה חדשה היציבה למשך שבוע או יותר. שיטה זו תענה על שאלות מפתח בתחום מדעי המוח ותועיל בחקר אפילפסיה של יילודים. על ידי שימוש בטכניקה זו, ניתן להקליט אותות EEG איכותיים ויציבים למסגרות זמן ארוכות יותר.

מה שיעזור באבחון הפרעות נוירו-פתולוגיות שונות. בדרך כלל, אנשים חדשים בשיטה זו יתקשו מכיוון שחולדות יילודים ב-p8 עד p15 קשות מאוד לטיפול ודורשות טיפול רב. האלקטרודה דורשת מגע שיניים כדי לתפקד כממשק האות עם התקני התקשורת.

סיכת מחשב לו סאי ממלאת את התפקיד הזה. הפרד בזהירות את סיכות הזכר והנקבה מסיכת מחשב באמצעות צבת. לאחר מכן, חבר את הפינים הזכריים והנקביים יחד ליצירת אלקטרודה, ואבטח את החיבור עם ציאנואקרילט.

הכינו כמה אלקטרודות כאלה. לאחר שהקשרים התקשו, הכניסו את האלקטרודות לכוס מלאה במים מזוקקים למשך עשר דקות. לאחר מכן, הנח אותם בחומר ניקוי קולי כדי לנקות את האלקטרודות.

לאחר מכן, מעבירים את הכוס לתנור המכוון ל -45 מעלות צלזיוס, ומחממים אותם במשך חצי שעה. לבסוף, עקר את האלקטרודות עם חשיפה של 30 דקות ל-UV. במכסה מנוע ביולוגי, הגדר תחילה את כלי הניתוח המעוקרים, ומנגנון סטריאוטקסי מעוקר לניתוח.

לאחר מכן, הרדמו את גור החולדה היילוד באמצעות 2.5 אחוז איזופלורן. כאשר הגור מורדם עמוק, הפחיתו את האיזופלורן לאחוז אחד. לפני שתמשיך, השתמש בצביטה בבוהן כדי לוודא שהעכבר מורדם מספיק.

לאחר מכן, תקן את ראש הגור במנגנון הסטריאוטקסי. מקם את מוטות האוזניים בתעלות האוזן והדק בעדינות את הסורגים. היזהר:גולגולת היילוד רכה מאוד.

כעת, בצע חתך של חמישה עשר מילימטר בקו האמצע לתוך הגולגולת. לאחר מכן, בעזרת מלקחיים, משוך בעדינות את הקרקפת כדי להרחיב את החתך. כדי לשמור על החתך פתוח, השתמש בחתיכת כותנה ספוגה במי מלח.

כעת, אתר את הברגמה והלמבדה, וסמן אותם בעיפרון. שלבי השתלת האלקטרודות הבאים הם קריטיים ויש לבצע אותם במדויק. ראשית, בעזרת מחט בקוטר 26, צרו חור בקליפת המוח הקדם-מצחית, שני מילימטרים קדמיים לברגמה ובתוך נקודת האפס חמישה מילימטרים מקו האמצע.

לאחר מכן, צרו חור בור בהיפוקמפוס בנקודה אחת שמונה מילימטרים אחוריים לברגמה ונקודת אפס חמישה מילימטרים לרוחב קו האמצע. המחט לא צריכה לחדור יותר משני מילימטרים מתחת לפני השטח של קליפת המוח כדי למזער נזק מוחי. כעת, באמצעות מלקחיים, הכניסו את אלקטרודת הייחוס לחור בקליפת המוח, והכניסו את אלקטרודות ההקלטה לחור ההיפוקמפוס.

לאחר מכן, מרחו משחת אריתרומיצין סביב האלקטרודות, וקבעו את האלקטרודות במקומן בעזרת ציאנואקרילט. בזמן שהדבק נקשר, הכינו מלט דנטלי בעקביות דביקה וצמיגה. הצמיגות של המלט הדנטלי היא קריטית.

אם המלט הדנטלי דק מדי, זה עלול לגרום לבניית שכבת בידוד לא רצויה מתחת לאלקטרודה. אם המלט צפוף מדי, האלקטרודות ינותקו ביתר קלות בגלל המסה העודפת. לפני מריחת המלט, יש לייבש היטב את הגולגולת ואת האלקטרודות.

לאחר מכן, אבטח את האלקטרודות לגולגולת בעזרת מלט דנטלי. לאחר מכן, מרחו מעט חומצה פיקרית על האלקטרודות כדי להוסיף להן שכבת הגנה נוספת. כעת, הסר את החיה מהמסגרת הסטריאוטקסית, והזריק 300 מיקרוליטר של תמיסת גלוקוז של עשרה אחוז תת עורית.

לאחר מכן, העבירו את החיה לשמיכה מחוממת כדי לשמור אותה על 37 מעלות צלזיוס עד שהיא אמבולטורית. לאחר האמבולטוריה, יש לתת בופרנורפין כדי לתווך כאבים לאחר הניתוח, ולהעביר את הגור לכלוב הביתי שלו עם הסכר שלו. לפני השימוש בשתל, המתן לפחות יומיים עד שהגור יתאושש.

לאחר תקופת ההחלמה, יש לשכן את הגור לבד כדי להקליט במשך כעשר דקות כדי שהגור יוכל להכיר את הסביבה. חבר את האלקטרודות למגבר, וחבר את המגבר לממיר AD המחובר למחשב. היזהר לא לסבך את החיבורים הללו.

לאחר מכן, ביחידת רכישת הנתונים, בחר קצב דגימה של לפחות 10,000 הרץ להקלטה, ובדוק אם יש העברת נתונים תקינה. אסוף הקלטה בסיסית. לאחר ביצוע הקלטה בסיסית, הזריק לגור חומצה קאינית תוך צפקית כדי לגרום להתקפים אפילפטיים.

רבע שעה לאחר ההזרקה, התבונן ורשום את ההפרשות האפילפטיות. שמור את הנתונים הדיגיטליים, ונתח אותם באמצעות תוכנת עיבוד אותות. לחשוף את רמת ההספק של רכיבי תדר שונים ב-EEG של ילודים באמצעות ניתוח ספקטרום הספק.

חשב את ההספק ממסגרות זמן של דקה אחת על ידי מציאת משרעת ריבועית ממוצעת שורש מ-1 עד 100 הרץ, שהיא רצועת ה-EEG. עשר דקות לאחר הזרקת החומצה הקינית, נרשמו דפוסי שחרור חוזרים של EEG אינטריקטל ואיקטלי. ההתקפים השכיחים ביותר שתועדו היו מסוג קלוני טוניק.

משך הטוניק האיקטלי נמשך כחמש עשרה שניות. כמו כן נצפה כי הפרשות טוניק מלוות בהתפרצויות קלוניות. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד להשתיל אלקטרודות ולהשיג הקלטות EEG באיכות גבוהה מגורי חולדות יילודים p8 עד p15.

לאחר הגיוס, ניתן לבצע את השתלת צוואר הרחם תוך פחות מעשר דקות בהתאם למורכבות הניתוח.