שיטה לבדיקת יעילות שטיפת הידיים להסרת הפתוגנים המזהמים

המטרה הכוללת של ניסוי זה היא לבחון את היעילות ההשוואתית של אפשרויות שטיפת ידיים על ידיים שחוסנו בניסוי באורגניזם מעניין. שיטה זו יכולה לספק מידע על שאלות מפתח כדי לסייע במניעת מחלות זיהומיות. על ידי מתן אפשרות לחוקרים לחקור את היעילות של שטיפת ידיים עבור אורגניזמים מסוימים בעלי עניין.

היתרון העיקרי של הטכניקה הזו הוא שהיא גמישה וניתנת להתאמה כדי לאפשר חקירה של אורגניזמים רבים ושונים. הרעיון לשיטה זו עלה לנו לראשונה כאשר הבנו שתמיסות כלור משמשות לשטיפת ידיים בהקשרים של אבולה ולא היו ראיות ליעילות של זה באותה תקופה. לאחר גיוס נבדקים מתאימים והכנת פתרונות לשטיפת ידיים על פי פרוטוקול הטקסט, הכינו חיידקים על ידי פס גדיל לא פתוגני של E.Coli על צלחות אגר LB ודגרו על התרביות ב-37 מעלות צלזיוס למשך 24 שעות כדי להשיג מושבות בודדות.

יום לפני תחילת הניסוי, השתמשו בחומר סיכה סטרילי כדי לתפוס מושבה בודדת מהצלחת ולחסן 10 מיליליטר מרק LB. דגרו על התרביות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס, עם טלטול, למשך הלילה. בבוקר הניסוי, הוסיפו מיליליטר אחד מתרבית הלילה ל -20 מיליליטר מרק LB טרי.

דגרו על התרביות במשך כשעתיים וחצי כדי להשיג צפיפות מלח גדולה מ-10 עד ה-CFU השמיני למיליליטר. לאחר מכן, השתמש בספקטרופוטומטר כדי להעריך את ריכוז התרבית. מיד לפני הבדיקה, הכינו חיסון המורכב מ-68% חיידקים או תרחיף ויראלי ו-32% נתרן כלורי או עומס אדמה.

יש לערבב או לערבב בעדינות כדי לערבב. לאחר הכנת המתנדבים על פי פרוטוקול הטקסט, בדקו את ה-pH של עורו של כל מתנדב על ידי הנחת בדיקת pH של עור עם קצה שטוח בחלל הרשת בין המצביע לאצבעות האמצעיות. ודא שהאלקטרודה שטוחה על העור ורשום את קריאת ה-pH.

לאחר מכן, בקשו מהמתנדב לחבר את שתי הידיים יחד. לאחר מכן, פיפטה בזהירות 750 מיקרוליטר מהחיסון לכל כף יד כדי להגביר את הידיים. בעת זינוק ידיהם של המתנדבים, חשוב שאף אחד מהחיסון לא יישפך.

הזכירו למתנדבים שזה חשוב ותנו להם את ההזדמנות להתאמן עם מים לפני תחילת ההליך. בקשו מהמתנדבים לשפשף בעדינות את ידיהם זו בזו עד שכל משטחי היד מקודדים בחיסון, תוך שהם חושפים את הידיים לחיכוך מועט ככל האפשר. הנחו את המתנדבים להחזיק את ידיהם בשקט והרחק מגופם למשך 30 שניות נוספות כדי לאפשר לחיסון להתייבש.

לאחר מכן שטפו את הידיים באחת מהשיטות המתוארות בפרוטוקול הטקסט. לשטיפת ידיים עם סבון, השתמש ב-10 מיליליטר מים טהורים במיוחד כדי להרטיב את הידיים. בקשו מהמתנדבים להקציף את ידיהם בסבון ולאחר מכן לשפשף את ידיהם זו בזו למשך 20 שניות נוספות.

שטפו את ידיו של המתנדב על ידי שפיכת 500 מיליליטר מים טהורים בטמפרטורת החדר דרך משפך בקצב זרימה של 1.5 ליטר לדקה לשקית איסוף דגימות גדולה ועיבדו את הדגימה תוך שעתיים. עבור כל תמיסות הכלור, שפכו 200 מיליליטר תמיסת כלור על ידיו של המתנדב דרך משפך בקצב זרימה של 1.5 ליטר לדקה ובקשו מהמתנדבים לשפשף את ידיהם ביסודיות. כשיטה נוספת לשטיפת ידיים, בקשו מהמתנדבים להשתמש בחומר חיטוי ידיים כדי לשטוף ידיים.

חשוב לשפשף בעדינות את כל משטחי היד, להנחות את המשתתפים להתמקד בכל חלק, כפות הידיים, הציפורניים, בין האצבעות בזמן שהם משפשפים ולאחר מכן לוודא שכל היד נשטפה. לשליטה א', לאחר החיסון, אל תבצע שלב שטיפת ידיים. לבקרה ב', השתמש רק במים אולטרה-טהורים בטמפרטורת החדר כדי לבצע שטיפת ידיים דרך משפך עם קצב זרימה ידוע.

לאחר שטיפת ידיים, הכניסו מיד את ידו של כל מתנדב שנבחר לבדיקה, לתוך שקית דגימה המכילה 75 מיליליטר של ליווין עד פרק כף היד. החזק את החלק העליון של התיק בחוזקה סביב פרק כף היד. בקשו מהמתנדבים לשפשף בעדינות את ידם בתמיסה למשך 30 שניות, תוך הקפדה על הגעה בין האצבעות ומתחת לציפורניים.

עסו בעדינות את היד מחוץ לתיק למשך 30 שניות כדי להבטיח שכל היד נשטפת היטב בליווין, עד פרק כף היד. אטום את השקית ועבד אותה לפי החיבור המתאים. לפני שתחזרו על התהליך בכל שיטת שטיפת ידיים, בקשו מהמתנדבים להשתמש בסבון במים חמים כדי לשטוף היטב את ידיהם בכיור.

לבסוף, השתמשו באתנול 70% כדי לרסס את ידיו של המתנדב עד שהן מצופות משני הצדדים, והניחו להן להתייבש. כדי לנתח את הדגימות, הגדר להבה וסעפת סינון עם משפכי סינון סטריליים וחיבור ואקום. עקר מלקחיים על ידי טבילתם באתנול והבערתם.

השתמש במלקחיים כדי להניח מסנן של 0.45 מיקרון על סעפת הסינון כשהרשת פונה כלפי מעלה. לאחר מכן השתמש בכמות קטנה של PBS סטרילי כדי להרטיב את המסנן. הנח את המשפך על הבסיס והפיפטה או שפך את הדגימה ישירות על המסנן.

הפעל את הוואקום עד שהדגימה כולה עברה דרך הממברנה. לאחר מכן, השתמש ב-PBS סטרילי כדי לשטוף את דפנות המשפך ולהפעיל שוב את הוואקום. לאחר מכן, הסר את המשפך, עקר את המלקחיים והרם את המסנן מהבסיס.

לאחר מכן הניחו את המסנן בעדינות על המדיום בצלחת פטרי כשהרשת פונה כלפי מעלה, וודאו שהמסנן מונח צמוד אל פני השטח. הופכים את הצלחות ודוגרים בחום של 37 מעלות צלזיוס למשך 24 שעות. לאחר הדגירה, ספרו את מושבות ה-E.Coli ורשמו את הנתונים.

בצע ניתוח נתונים על פי פרוטוקול הטקסט. הפרוטוקול המתואר בסרטון זה הושלם עם 18 מתנדבים שנבדקו עם E.Coli ו-Phi6, עבור E.Coli ללא עומס אדמה, שטיפת ידיים עם HTH, NaDCC ו-NaOCl מיוצב, כל אלה הביאו להפחתת יומנים גדולה משמעותית מאשר שטיפת ידיים במים בלבד. עם עומס האדמה, HTH הביא להפחתת בולי עץ גדולה משמעותית של E.Coli מאשר שטיפת ידיים במים בלבד עם סבון ו-ABHS.

לא היה הבדל משמעותי בין השיטות עבור Phi6 ללא עומס אדמה. עם זאת, עבור Phi6 עם עומס אדמה, מים לבדם הביאו להפחתת בולי עץ גדולה יותר מאשר ABHS או NaOCl מיוצב, ושטיפת ידיים עם סבון בהפחתת בולי עץ גדולה יותר מ-ABHS, ייצבה את NaOCl וייצרה NaOCl. ל-HTH הייתה גם הפחתת לוג גדולה יותר מ-ABHS ו-NaOCl ו-NaDCC מיוצבים הביאו להפחתת לוג גדולה יותר מאשר NaOCl ו-ABHS מיוצבים.

כפי שמודגם בגרפים אלה, כלור הביא להפחתה גדולה משמעותית של E.Coli במי השטיפה מאשר שטיפת ידיים עם סבון. לבסוף, אותו דפוס נמצא ב-Phi6 ללא עומס אדמה עם כל תמיסות הכלור וכתוצאה מכך הפחתה משמעותית של Phi6 במי שטיפה מאשר שטיפת ידיים עם סבון. לא היו ירידות משמעותיות במי השטיפה עם Phi6 ועומס האדמה.

בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור שתוצאות היעילות עבור כל מצב מחושבות על ידי השוואת התוצאות עבור שני הבקרות. המשמעות היא שחשוב מאוד לבצע את השלבים באופן עקבי עבור כל אפשרות שטיפת ידיים.