Name: אובייקט הרומן מבחן ההכרה לחקירה של למידה וזיכרון בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-08-30T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 52 s
Description: למדו את מבחן הכרת האובייקטים (ORT) לחקירת למידה וזיכרון בעכברים. שיטה זו מאפשרת הערכת זיכרון הכרה בקלות וביעילות, ומתאימה למחקרים בתחום הנוירומדעים ההתנהגותיים ולמניפולציות פרמקולוגיות וגנטיות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה המצוטטים ופורסמו בעבר על-ידי המחבר נתמך על ידי מענק מ נבחרת המכון לבריאות הנפש (MH088480). המחבר רוצה להודות המדריכה שלה לשעבר, ד ר ג'יימס אודונל התמיכה שלו ב- project. פרסום זה נתמך על ידי מענק של המכון הלאומי לבריאות (T32 DA007135).

כל ההליכים שבוצעה כאן הוגשו שאושרו על-ידי חיה על עצמך, והשימוש בהם הוועדה, שהתנהלו בעקבות הנחיות NIH.
 1-בחירת עצמים, הגדרת הניסוי <ol><li>לבחור אובייקטים שונים מספיק כדי שיפלו בקלות על ידי עכברים, אבל יש תואר דומה של מורכבות (מרקם, צורה, צבע המתבנת, בהירות, וכו) על מנת למזער את כל הפוטנציאל המושרה העדפה אובייקט זה ייתכן הטיה התוצאות (לקבלת תיאור מקיף של עצם הבחירה 7, ראה Ennaceur 2010).
	<ol><li>לבדיקת מולדת העדפה ואפליה (ראה שלבים 2 &#38; 3).</li>
		<li>חפצים בגודל של עכבר או רק מעט גדול יותר לעודד את חקר ( איור 1). כדי לצמצם את העדפה המושרה, להבטיח כי עכברים הם מסוגל לטפס על שני עצמים או אף אובייקט, למרות יכולת לטפס על חפץ עשוי להגביר את ההתעניינות חקר (זמן מבוזבז יושב עם אובייקט לא נספר לכיוון חקר זמן.)</li>
		<li>יש לפחות שני עותקים של כל אובייקט. עם זאת, כדי למזער את פוטנציאל רמזים ריח במהלך הבדיקה, יש לפחות 3 כל אובייקט, כפילויות לאימונים ואחד לבדיקת.</li>
		<li>חפצים עשוי מחומר בלתי ניתנת לשבירה, כמו אובדן עצם עקב נזק במהלך ניסויים יכול להפריע ההמשכיות של בדיקות, העלול לגרום נזק או פגיעה לחיה.</li>
		<li>ניקוי יסודי האובייקטים לפני ובין שימוש (70% vol/כרך אתנול הוא המתאים).</li>
	</ol></li> <li>כדי להקטין את הלחץ של תאורה בהירה, להשתמש תאורה ' מאטום לשקוף ', נמוך, עם מרכז המבוך מואר בסביבות 20 lux. השתמש של טמפרטורה ולחות הדומה תנאי מגורים רגיל. אם עכברים מועברות מחדר דיור אל חדר אחר לניסוי, להתאקלם עכברים לחדר החדש שלהם לפחות 1 שעה לפני השימוש בכל יום.</li>
	<li>ידית עכברים טוב לפני אימון. כי המבחן מסתמך על הנטייה הטבעית של מכרסמים לחקור את החדשנות, להפחית מתח או חרדה טיפול שעלולות לפגוע רצונם לחקור את הזירה, ולאחר מכן, את האובייקטים. באופן אידיאלי, להתמודד עם עכברים 1 - 2 פעמים / יום במשך לפחות 1 דקה, 1-2 שבועות לפני בדיקת 15 , 29.</li>
	<li>לשימוש הזירה המרכזית, חדר מרובע (בסביבות 40 ס"מ על 40 ס"מ x 40 ס מ) זני לבן או שחור, פלסטיק שאינו נקבובי, בניגוד לצבע של העכבר. לחלופין, השתמש בעריכת ארנה בסיבוב במיוחד, בעת שימוש עכברים חרדה יכול לשבת בפינות ארנה מרובע, ארנה עגול עשוי להיות עדיף לעודד התנהגות גישוש 18 , 30-
	<ol><li>ביום אימון, מקום 2 עצמים זהים באלכסון (קרי אחת לפינה NW ואחד בפינה SE). אם אובייקטים הם קלים מדי, ניתן להעביר על ידי העכבר להדק אותם על הרצפה. שליפת הרכבה יצירות מרק טוב.</li>
		<li>בדיקה ביום, להשתמש עוד בעותק 3 rd כל אובייקט כדי למקם אובייקט מוכר אחד, אובייקט רומן אחד על אותו באלכסון כמו ביום אימון ( איור 2).</li>
		<li>מאוזנים השימוש של כל ערכה של אובייקטים כך כל אובייקט משמשת באותה מידה כמו אובייקט מוכר, כאובייקט הרומן. כמו כן, מאוזנים המיקום של האובייקט הרומן לכל אחד 4 הפינות של הזירה. הקפידו לציין אילו אלכסון משמש עבור איזו חיה כך האלכסון פעם ביום אימון הוא זהה לזה המשמש ביום הבדיקה, עבור כל עכבר.</li>
		<li>ניקוי יסודי את המנגנון ואת האובייקטים כדי להסיר ריח רמזים לפני ובין שימוש (70% vol/כרך אתנול הוא המתאים).</li>
	</ol></li> <li>למקם את המצלמה ישירות תקורה של המנגנון לתצוגה אופטימלית של חקר. רק להשתמש בתוכנה עם האף-נקודת זיהוי לניתוח מדויק. אם משתמש בתוכנת, לכידת תמונת רקע עם האובייקטים במקום לפני הפעלת. התוכנה, הגדר את האזור של חקר להיות כ 2-3 ס מ מסביב לאובייקט.</li>
	<li>כדי להפחית הפרעות הנסיין, להקליט את המשפט, ציון על זה מאוחר יותר. עיוור השערים לתנאים ניסיוני. אם ניקוד ידני במהלך הניסוי, ודא כי הנסיין הוא יותר מ- 1 מטר מן הזירה, וגלוי לא העכבר. 
	הערה: בכל זמן העכבר מבלה בישיבה על האובייקט ללא פעיל vibrissae גורף או להסניף לא נחשב חקר זמן.</li>
	חקר <li>הגדר כאשר העכבר &#39; s רעש הוא הצביע לעבר האובייקט ותוך 2-3 ס מ של האובייקט, עם vibrissae פעיל גורף או להסניף. זה לא נחשב עת יושב על האובייקט ללא אינדיקציה לחקירת פעילים.</li>
</ol> 2. הצורך טייס הניסויים <ol><li>בדיקה על העדפה המושרה <ol><li>עבור habituation, להסיר את העכבר מכלובה הביתה ומניחים אותו באמצע המגרש פתוח. לאפשר את העכבר כדי לחקור בחופשיות על 5 דק</li>
		<li>על יום אימונים (T1), מקום 2 אובייקטים שונים מול הגזרות של המנגנון, (דהיינו, NW פינות SE). להסיר את העכבר מכלובה הביתה ומניחים אותו באמצע המגרש פתוח. לאפשר גלישה חופשית במשך 10 דקות</li>
		<li>לחשב מדד אפליה. אם אין העדפה המושרה, מדד אפליה צריך להיות ליד או אפס. כל האובייקטים מראים העדפה לא אמור לשמש אורט.</li>
	</ol></li> <li>בדיקה ליכולת אפליה <ol><li>עבור habituation, להסיר את העכבר מכלובה הביתה ומניחים אותו באמצע המגרש פתוח. לאפשר את העכבר כדי לחקור בחופשיות על 5 דק</li>
		<li>על אימון (T1), מקום 2 עצמים זהים מול הגזרות. הנח את העכבר במרכז הזירה ולאפשר את העכבר כדי לחקור במשך 10 דקות</li>
		<li>על בדיקות הפעלה (T2), מקום אחד של האובייקט ששימש T1 ואובייקט אחד הרומן ברבעים הנגדי (קרי, NW, פינות SE). שישים דקות אחרי T1, מקם את העכבר במרכז הזירה ולאפשר גלישה חופשית במשך 10 דקות</li>
		<li>לחשב מדד אפליה. במרווח השמירה 60 דקות, מדד אפליה צריך להיות מעל 0.25-</li>
	</ol></li></ol> 3. ניתוח ניסיוני <ol><li>Habituation <ol><li>להסיר את העכבר מכלובה הביתה ומניחים אותו באמצע המגרש פתוח, ריק. אפשר בחינם חקר הזירה של 5 דקות. לאחר הכלוב בבית ריק, לשמור אותה לשימוש כלוב אחזקות למחרת.</li>
		<li>בסוף 5 דקות, להסיר את העכבר והצב בכלוב החזקה. אל תחזרו על העכבר בכלוב המקורי, או זה עלול להשפיע על ההתנהגות של העכברים הנותרים להיבדק.</li>
		<li>לנקות ביסודיות את המנגנון בין עכברים באמצעות אתנול vol/כרך 70%- 
		הערה: במהלך habituation, התנהגות חרדה יכול להיות מוערך על ידי חישוב הזמן המושקע במרכז (ראה ליד &#38; Belzung 2003 31). זהו מדד של שימושי כאשר בוחנים את משך הזמן עבור T1. עכברים חרדה גבוהה יותר עשויה לדרוש הפעלה 10 דקות להגיע לקריטריון חקר מינימום.</li>
	</ol></li> <li>אימונים (T1) <ol><li>מקום שני עצמים זהים ברבעים מול הזירה (קרי, פינה NE, פינה SW).</li>
		<li>24 שעות לאחר habituation, להסיר את העכבר מכלובה הביתה ומניחים אותו במרכז הזירה, במרחר שווה האובייקטים זהים 2.</li>
		<li>מאפשרים גלישה חופשית למשך תקופה מינימלית של 5 דקות. אם משתמש זן של עכברים ידועים נמוך גינקולוגיות או חקר פעילות, (קרי, במרבית העכברים לא מגיעים מינימום של 20 s חקר של שני העצמים על ידי 5 דקות, כאמור את הניסויים פיילוט או הספרות), להרחיב את המשפט 10 דקות עבור כל מיקרופון e במדגם.</li>
		<li>בסוף המשפט, להסיר את העכבר והצב בכלוב החזקה. לאחר הכלוב בבית ריק, לשמור אותה לשימוש כמו בכלוב החזקה על בדיקות ביום.</li>
		<li>ניקוי יסודי את המנגנון ואת האובייקטים בין עכברים באמצעות אתנול vol/כרך 70%-</li>
	</ol></li> <li>בדיקה (T2) <ol><li>למקם אובייקט אחד לשימוש בזמן T1 (כלומר, האובייקט מוכר), אובייקט אחד הרומן ברבעים הנגדי של הזירה. השתמש באותם המקומות המשמשים במהלך T1 עבור כל עכבר.</li>
		<li>-T1 לערך מרווח זמן T2 של בחירה, להסיר את העכבר מכלובה הביתה ומניחים אותו בזירה מרכז, במרחר שווה את האובייקט מוכר והאובייקט הרומן. 
		הערה: בכל מרווח זמן השמירה של 24 שעות, במרבית העכברים לא תהיה אפשרות להפלות בין האובייקט מוכר ואת הרומן (בדרך כלל-0.2 &#60; d2 &#60; 0.2, לעומת חיובי לשלוט 32). אם בודקים תופעות nootropic, השתמש בנקודה זמן כדי לחקור שיפור הזיכרון. כדי לחקור זיכרון גירעונות, להשתמש למרווח זמן קצר יותר שמירה על מקום בין 20 דקות ל- 4 שעות, בהתאם המתח של העכבר.</li>
		<li>מאפשרים גלישה חופשית למשך 10 דקות. בסוף המשפט, להסיר את העכבר והצב בכלוב החזקה.</li>
	</ol></li> <li>עבור שניהם T1 ו T2, ציון של 5 דקות קודם. אם העכבר אינו עומד הפעם חקר מינימלי של 20 s עבור שני אובייקטים, להמשיך הבקיע אחרי 5 דקות עד חקר הכולל עולה על 20 ס</li>
</ol> 4. ניתוח נתונים <ol><li>לקבלת פטור <ol><li>במהלך שני אימונים (T1) ובדיקות (T2), לחשב זמן חקר הכולל שני האובייקטים עבור כל מושב (e1, e2). במרבית העכברים אמורים להגיע חקר המינימלי הכולל עבור שני אובייקטים של 20 s על ידי 5 דק</li>
		<li>הזמן להרחיב T1 ו T2 10 דקות עבור זנים של עכברים יש חקר נמוכה, לא בקריטריון זה מינימום על ידי 5 דקות, כפי שנצפה במהלך הבדיקה טייס.</li>
		<li>ציון התנהגות במשך 5 דקות או מעבר 5 דקות עד שהם מגיעים הקריטריון המינימלי 20 s.</li>
		<li>אם עכברים לא להגיע למינימום 20 s של חקר עבור שני אובייקטים עבור T1 או T2-10 דקות, אל תכלול ניתוח, כפי שזה לא יכול להיות מאושרות הם בילו מספיק זמן לחקור ללמוד/להפלות.</li>
	</ol></li> <li>המוחלט לעומת ניתוח יחסי הערה: נוסחאות שונות עבור ניתוח ואת הקשר שלהם אחד לשני ניתן לראות בטבלה 1.
	E1 <ol><li>חישוב זמן חקר סה כ במהלך אימון עבור 2 עצמים זהים, a1 ו- a2 איפה החפצים זהים. 
		e1 = a1 + a2</li>
		E2 <li>חישוב משך הזמן הכולל חקר במהלך הבדיקה עבור האובייקט מוכר (a) והרומן אובייקט (ב). 
		e2 = + b</li>
		<li>חישוב d1 בפשטות את הזמן לחקור את הרומן אובייקט פחות זמן בילו לחקור את האובייקט מוכר. המדד אפליה מוחלטת (d1) לא לוקח מתחשבת בהבדלים בין עכברים או טיפול בזמן חקר קבוצות, אבל בנסיבות מסוימות, ייתכן מדד רגיש יותר 2- 
		d1 = b-a</li>
		<li>D2 חישוב הזמן בילה לחקור את האובייקט הרומן מינוס הזמן בילה לחקור את האובייקט מוכר מחולק על ידי חקר סה כ זמן. המדד הנפוץ ביותר הוא ערך יחסי אפליה המכונה לעתים קרובות האינדקס אפליה (d2), אשר לא מושפע על ידי הבדלים בזמן חקירה. זה אומר כל הערכים תיפול בין-1 ו- +1. 
		d2 = d1/e2</li>
		לחלופין, <li>לחשב את זיהוי או העדפה אינדקס (d3) 3. זה הזמן המושקע לחקור את האובייקט הרומן מחולק הזמן הכולל. משמעות הדבר היא שכל הערכים תיפול בין 0 ל-1. לעיתים קרובות מוכפלים ב- 100, משמש כערך אחוז. 
		d3 = b/e2 * 100</li>
	</ol></li> <li>ניתוח סטטיסטי <ol><li>באמצעות הערכים אפליה רעה עבור כל קבוצה, לקבוע ביצועי זיכרון באמצעות חד-כיווני אנובה. לצורך ניתוח נוסף, לערוך השוואות דו-כיווני פוסט הוק עם שטופלו לעומת מצב הרכב ואת קבוצות שליטה חיובי/שלילי.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Ennaceur, A., Meliani, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+one-trial+test+for+neurobiological+studies+of+memory+in+rats+III.+Spatial+vs.+non-spatial+working+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">A new one-trial test for neurobiological studies of memory in rats III. Spatial vs. non-spatial working memory.</a> Behav. Brain Res. 51 (1), 83-92 (1988).</li>
<li>Akkerman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Object+recognition+testing%3A+methodological+considerations+on+exploration+and+discrimination+measures%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Object recognition testing: methodological considerations on exploration and discrimination measures.</a> Behav. Brain Res. 232 (2), 335-347 (2012).</li>
<li>Antunes, M., Biala, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+novel+object+recognition+memory%3A+neurobiology%2C+test+procedure%2C+and+its+modifications%5BTitle%5D)+AND+%22Cogn.+Process%22%5BJournal%5D)">The novel object recognition memory: neurobiology, test procedure, and its modifications.</a> Cogn. Process. 13 (2), 93-110 (2012).</li>
<li>Leger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Object+recognition+test+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Object recognition test in mice.</a> Nat. Protoc. 8 (12), 2531-2537 (2013).</li>
<li>van Goethem, N. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Object+recognition+testing%3A+Rodent+species%2C+strains%2C+housing+conditions%2C+and+estrous+cycle%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Object recognition testing: Rodent species, strains, housing conditions, and estrous cycle.</a> Behav. Brain Res. 232 (2), 323-334 (2012).</li>
<li>Lueptow, L. M., Zhang, C. -G., O'Donnell, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclic+GMP-mediated+memory+enhancement+in+the+object+recognition+test+by+inhibitors+of+phosphodiesterase-2+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Cyclic GMP-mediated memory enhancement in the object recognition test by inhibitors of phosphodiesterase-2 in mice.</a> Psychopharmacology (Berl). , (2015).</li>
<li>Ennaceur, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One-trial+object+recognition+in+rats+and+mice%3A+Methodological+and+theoretical+issues%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">One-trial object recognition in rats and mice: Methodological and theoretical issues.</a> Behav. Brain Res. 215 (2), 244-254 (2010).</li>
<li>Berlyne, D. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/232522058_Novelty_and_Curiosity_as_Determinants_of_Exploratory_Behavior">Novelty and curiosity as determinants of exploratory behavior.</a> Br. J. Psychol. 41 (1-2), 68-80 (1950).</li>
<li>Ennaceur, A., Delacour, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+one-trial+test+for+neurobiological+studies+of+memory+in+rats+I.+Behavioral-data%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">A new one-trial test for neurobiological studies of memory in rats I. Behavioral-data.</a> Behav. Brain Res. 31 (1), 47-59 (1988).</li>
<li>Aguilar-Valles, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+the+stress+response+in+rats+trained+in+the+water-maze%3A+differential+expression+of+corticotropin-releasing+hormone%2C+CRH-R1%2C+glucocorticoid+receptors+and+brain-derived+neurotrophic+factor+in+limbic+regions%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroendocrinology%22%5BJournal%5D)">Analysis of the stress response in rats trained in the water-maze: differential expression of corticotropin-releasing hormone, CRH-R1, glucocorticoid receptors and brain-derived neurotrophic factor in limbic regions.</a> Neuroendocrinology. 82 (5-6), 306-319 (2005).</li>
<li>Anisman, H., Hayley, S., Kelly, O., Borowski, T., Merali, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychogenic%2C+neurogenic%2C+and+systemic+stressor+effects+on+plasma+corticosterone+and+behavior%3A+Mouse+strain-dependent+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Psychogenic, neurogenic, and systemic stressor effects on plasma corticosterone and behavior: Mouse strain-dependent outcomes.</a> Behav. Neurosci. 115 (2), 443-454 (2001).</li>
<li>Kim, J. J., Diamond, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+stressed+hippocampus%2C+synaptic+plasticity+and+lost+memories%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The stressed hippocampus, synaptic plasticity and lost memories.</a> Nat. Rev. Neurosci. 3 (6), 453-462 (2002).</li>
<li>Willner, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validity%2C+reliability+and+utility+of+the+chronic+mild+stress+model+of+depression%3A+a+10+year+review+and+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Validity, reliability and utility of the chronic mild stress model of depression: a 10 year review and evaluation.</a> Psychopharmacology (Berl). 134, 319-329 (1997).</li>
<li>Leussis, M. P., Bolivar, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Habituation+in+rodents%3A+A+review+of+behavior%2C+neurobiology%2C+and+genetics%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">Habituation in rodents: A review of behavior, neurobiology, and genetics.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 30 (7), 1045-1064 (2006).</li>
<li>Hurst, J. L., West, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taming+anxiety+in+laboratory+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Methods%22%5BJournal%5D)">Taming anxiety in laboratory mice.</a> Nat. Methods. 7 (10), 825-826 (2010).</li>
<li>Dere, E., Huston, J. P., De Souza Silva, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pharmacology%2C+neuroanatomy+and+neurogenetics+of+one-trial+object+recognition+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">The pharmacology, neuroanatomy and neurogenetics of one-trial object recognition in rodents.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 31, 673-704 (2007).</li>
<li>Winters, B. D., Saksida, L. M., Bussey, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Object+recognition+memory%3A+Neurobiological+mechanisms+of+encoding%2C+consolidation+and+retrieval%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">Object recognition memory: Neurobiological mechanisms of encoding, consolidation and retrieval.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 32, 1055-1070 (2008).</li>
<li>Rutten, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time-dependent+involvement+of+cAMP+and+cGMP+in+consolidation+of+object+memory%3A+studies+using+selective+phosphodiesterase+type+2%2C+4+and+5+inhibitors%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Time-dependent involvement of cAMP and cGMP in consolidation of object memory: studies using selective phosphodiesterase type 2, 4 and 5 inhibitors.</a> Eur. J. Pharmacol. 558 (1-3), 107-112 (2007).</li>
<li>Prickaerts, J., De Vente, J., Honig, W., Steinbusch, H. W. M., Blokland, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((cGMP%2C+but+not+cAMP%2C+in+rat+hippocampus+is+involved+in+early+stages+of+object+memory+consolidation%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">cGMP, but not cAMP, in rat hippocampus is involved in early stages of object memory consolidation.</a> Eur. J. Pharmacol. 436 (1-2), 83-87 (2002).</li>
<li>Bertaina-Anglade, V., Enjuanes, E., Morillon, D., Drieu la Rochelle, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+object+recognition+task+in+rats+and+mice%3A+A+simple+and+rapid+model+in+safety+pharmacology+to+detect+amnesic+properties+of+a+new+chemical+entity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Toxicol.+Methods%22%5BJournal%5D)">The object recognition task in rats and mice: A simple and rapid model in safety pharmacology to detect amnesic properties of a new chemical entity.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 54 (2), 99-105 (2006).</li>
<li>Li, S., Wang, C., Wang, W., Dong, H., Hou, P., Tang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+mild+stress+impairs+cognition+in+mice%3A+From+brain+homeostasis+to+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Chronic mild stress impairs cognition in mice: From brain homeostasis to behavior.</a> Life Sci. 82 (17), 934-942 (2008).</li>
<li>Frick, K. M., Gresack, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+Differences+in+the+Behavioral+Response+to+Spatial+and+Object+Novelty+in+Adult+C57BL%2F6+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Sex Differences in the Behavioral Response to Spatial and Object Novelty in Adult C57BL/6 Mice.</a> Behav. Neurosci. 117 (6), 1283-1291 (2003).</li>
<li>Grayson, B., Leger, M., Piercy, C., Adamson, L., Harte, M., Neill, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+disease-related+cognitive+impairments+using+the+novel+object+recognition+%28NOR%29+task+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Assessment of disease-related cognitive impairments using the novel object recognition (NOR) task in rodents.</a> Behav. Brain Res. 285, 176-193 (2015).</li>
<li>Tuscher, J. J., Fortress, A. M., Kim, J., Frick, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+object+recognition+and+object+placement+by+ovarian+sex+steroid+hormones%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Regulation of object recognition and object placement by ovarian sex steroid hormones.</a> Behav. Brain Res. 285, 140-157 (2015).</li>
<li>Balderas, I., Moreno-Castilla, P., Bermudez-Rattoni, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dopamine+D1+receptor+activity+modulates+object+recognition+memory+consolidation+in+the+perirhinal+cortex+but+not+in+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Hippocampus%22%5BJournal%5D)">Dopamine D1 receptor activity modulates object recognition memory consolidation in the perirhinal cortex but not in the hippocampus.</a> Hippocampus. 23 (10), 873-878 (2013).</li>
<li>Akkerman, S., Blokland, A., Prickaerts, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mind+the+gap%3A+delayed+manifestation+of+long-term+object+memory+improvement+by+phosphodiesterase+inhibitors%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol.+Learn.+Mem%22%5BJournal%5D)">Mind the gap: delayed manifestation of long-term object memory improvement by phosphodiesterase inhibitors.</a> Neurobiol. Learn. Mem. 109, 139-143 (2014).</li>
<li>Domek-Łopacińska, K., Strosznajder, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+selective+inhibition+of+cyclic+GMP+hydrolyzing+phosphodiesterases+2+and+5+on+learning+and+memory+processes+and+nitric+oxide+synthase+activity+in+brain+during+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The effect of selective inhibition of cyclic GMP hydrolyzing phosphodiesterases 2 and 5 on learning and memory processes and nitric oxide synthase activity in brain during aging.</a> Brain Res. 1216, 68-77 (2008).</li>
<li>Reneerkens, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+phoshodiesterase+type+2+or+type+10+reverses+object+memory+deficits+induced+by+scopolamine+or+MK-801%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Inhibition of phoshodiesterase type 2 or type 10 reverses object memory deficits induced by scopolamine or MK-801.</a> Behav. Brain Res. 236 (1), 16-22 (2013).</li>
<li>Deacon, R. M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Housing%2C+husbandry+and+handling+of+rodents+for+behavioral+experiments%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Housing, husbandry and handling of rodents for behavioral experiments.</a> Nat. Protoc. 1 (2), 936-946 (2006).</li>
<li>Şık, A., van Nieuwehuyzen, P., Prickaerts, J., Blokland, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performance+of+different+mouse+strains+in+an+object+recognition+task%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Performance of different mouse strains in an object recognition task.</a> Behav. Brain Res. 147 (1-2), 49-54 (2003).</li>
<li>Prut, L., Belzung, C., Rabelias, U. F., Psychobiologie, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+open+field+as+a+paradigm+to+measure+the+effects+of+drugs+on+anxiety-like+behaviors+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">The open field as a paradigm to measure the effects of drugs on anxiety-like behaviors a review.</a> Eur. J. Pharmacol. 463, 3-33 (2003).</li>
<li>Akkerman, S., Prickaerts, J., Steinbusch, H. W. M., Blokland, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Object+recognition+testing%3A+statistical+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Object recognition testing: statistical considerations.</a> Behav. Brain Res. 232 (2), 317-322 (2012).</li>
<li>Balderas, I., Rodriguez-Ortiz, C. J., Bermudez-Rattoni, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retrieval+and+reconsolidation+of+object+recognition+memory+are+independent+processes+in+the+perirhinal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Retrieval and reconsolidation of object recognition memory are independent processes in the perirhinal cortex.</a> Neuroscience. 253, 398-405 (2013).</li>
<li>de curtis, M., Pare, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rhinal+cortices%3A+a+wall+of+inhibition+between+the+neocortex+and+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">The rhinal cortices: a wall of inhibition between the neocortex and the hippocampus.</a> Prog. Neurobiol. 74 (2), 101-110 (2004).</li>
<li>Brown, M. W., Barker, G. R. I., Aggleton, J. P., Warburton, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+pharmacological+interventions+indicate+concerning+the+role+of+the+perirhinal+cortex+in+recognition+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychologia%22%5BJournal%5D)">What pharmacological interventions indicate concerning the role of the perirhinal cortex in recognition memory.</a> Neuropsychologia. 50 (13), 3122-3140 (2012).</li>
<li>Moore, S. J., Deshpande, K., Stinnett, G. S., Seasholtz, A. F., Murphy, G. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conversion+of+short-term+to+long-term+memory+in+the+novel+object+recognition+paradigm%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol.+Learn.+Mem%22%5BJournal%5D)">Conversion of short-term to long-term memory in the novel object recognition paradigm.</a> Neurobiol. Learn. Mem. 105, 174-185 (2013).</li>
<li>Suzuki, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+anatomy%2C+physiology+and+functions+of+the+perirhinal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">The anatomy, physiology and functions of the perirhinal cortex.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 6, 179-186 (1996).</li>
<li>Wan, H., Aggleton, J. P., Brown, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+contributions+of+the+hippocampus+and+perirhinal+cortex+to+recognition+memory%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Different contributions of the hippocampus and perirhinal cortex to recognition memory.</a> J. Neurosci. 19 (3), 1142-1148 (1999).</li>
<li>Warburton, E. C., Brown, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Findings+from+animals+concerning+when+interactions+between+perirhinal+cortex%2C+hippocampus+and+medial+prefrontal+cortex+are+necessary+for+recognition+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychologia%22%5BJournal%5D)">Findings from animals concerning when interactions between perirhinal cortex, hippocampus and medial prefrontal cortex are necessary for recognition memory.</a> Neuropsychologia. 48 (8), 2262-2272 (2010).</li>
</ol>

המחבר אין לחשוף.

אורט היא שיטה יעילה וגמישה עבור הלומדים בלמידה ובזיכרון בעכברים. בעת הגדרת ניסוי, חשוב לקחת בחשבון מספר משתנים אשר יכולים להשפיע על התוצאה. כפי שפורט בתוצאות נציג, המתח של העכבר ישפיע על שני מרווח זמן ושמירה של חקר. ירידה בזמן חקירה עשויים להטות או מסיכת תוצאות אפליה מוחלטת ניתוח2,3,5,30,32. זנים מסוימים של עכברים ייתכן ערכים נמוכים יותר אפליה במרווחי זמן קצרי...

המבחן זיהוי האובייקט (אורט), הידוע גם בשם אובייקט הרומן זיהוי הבדיקה (), הוא אמצעי יחסית מהיר ויעיל לבדיקת שלבים שונים של למידה וזיכרון בעכברים. זה היה במקור שתואר על ידי Ennaceur ו- Delacour בשנת 1988, המשמשים בעיקר חולדות1; עם זאת, מאז, עברו בהצלחה המותאמים לשימוש בעכברים2,3,4,5,6,7. המבחן מתבסס על כמה כמו שלוש פגישות: מושב אחד habituation אימון אחד, מבחן אחד. אימון פשוט כרוך חקר חזותי של שני עצמים זהים, בזמן הפעלת הבדיקה כרוכה בהחלפת אחד מהאובייקטים בחנו בעבר עם חפץ הרומן. מאחר מכרסמים בהעדפה מולדת לחדשנות, מכרסם שזוכר את האובייקט מוכר אבלה יותר זמן לחקור את האובייקט הרומן7,8,9.
היתרון העיקרי של אורט על בדיקות זיכרון מכרסמים אחרים הוא זה מסתמך על נטייה טבעית של מכרסמים לחקר חידוש8. לכן אין צורך רבים סשנים של הדרכה או כל חיזוק חיובי או שלילי להניע התנהגות. פירוש אורט הוא הרבה פחות מלחיץ, ביחס אחרים בדיקות10,11,12,13,14,15, ולא דורש באופן משמעותי פחות זמן מאשר זיכרון נפוץ אחר בדיקות, כמו מבוך המים מוריס או מבוך בארנס, אשר שניהם יכול לקחת שבוע או יותר. כתוצאה מכך, התנאים של אורט להידמות יותר מאלה המשמשים לומד האדם קוגניציה, גובר תוקף אקולוגי של הבדיקה מבדקים זיכרון מכרסמים רבים אחרים. באופן דומה, כי אורט היא משימה פשוטה זיכרון חזותי, עבר בהצלחה המותאמים לשימוש במינים רבים, כולל בני אדם, קופים, כדי להעריך היבטים בין מינים שונים של זיכרון הצהרתי 2,16 ,17. לבסוף, אורט ניתן בקלות לשנות לבחון שלבים שונים של למידה וזיכרון (קרי, רכישה, איחוד או האחזור), כדי להעריך סוגים שונים של זיכרון (למשל, זיכרון מרחבי), או כדי להעריך שמירה שונה מרווחים (קרי, זיכרון לטווח קצר לעומת לטווח ארוך).
צדדיות של אורט מספק פלטפורמה ליישומים אין ספור מחקרים. הלימודים יכולים לעשות שימוש סוכנים תרופתי כדי לשבש או לשפר את הזיכרון. משתנה הזמן של המנהל הסמים לפני או אחרי אימון, או לפני בדיקות יכול מרמזות על הבסיס העצבי מנגנונים להוביל משובשות או משופרת זיכרון6,18,19, 20. באופן דומה, ניתן optogenetic טכנולוגיה נהג על אלו גם נקודות זמן שונות להסתכל עצבית ההפעלה/עיכוב אשר תורם השלבים השונים של למידה וזיכרון. אורט, היא מתאימה גם להערכת ההבדלים בבעלי חיים מהונדס, במחקרים הנגע, או במודלים ניווניות או הזדקנות מחקרים21,22,23,24, 25 , 26 , 27 , 28. ניתן לשנות את הזמן בין בדיקה, המכונה את מרווח זמן השמירה, והדרכה כדי להעריך שינויים אלה על הזיכרון לטווח קצר, ארוך26. בסופו של דבר, אורט יכול לשמש ככלי ללמוד שינויים תרופתי, גנטי, נוירולוגיות למידה וזיכרון, או כלים אלה ניתן ללמוד את הבסיס של למידה וזיכרון ב אורט.

<table><tbody><tr><td>LE800SC מכשיר</td><td>Panlab/Harvard</td><td></td><td>Box פתוח זמין באפור, לבן או שחור</td></tr><tr><td>ANY-maze</td><td>Stoelting Co.</td>מערכת <td>מעקב</td>התנהגות <td>60000</td></tr><tr><td>EthoVisionXT 12</td><td>Noldus</td><td></td><td>Behavior Tracking System; דורש מצלמת וידאו למעקב אחר 3 נקודות</td></tr><tr><td></td><td>כל</td><td></td><td>מצלמת וידאו צריכה להיות מותקנת ישירות מעל המכשיר</td></tr><tr><td>70% אתנול&nbsp;</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>BP2818-4</td><td>לפני תחילת הבדיקה ובין הניסויים, יש לנקות בזהירות כל חפץ. יש לנקות גם את הרצפה והקירות של המנגנון.&nbsp;</td></tr></tbody></table>

אובייקט הרומן מבחן ההכרה לחקירה של למידה וזיכרון בעכברים

Novel Object Recognition Test for the Investigation of Learning and Memory in Mice

המבחן זיהוי האובייקט (אורט) הוא assay התנהגותית נפוץ לחקור אספקטים שונים הקשורים בלמידה ובזיכרון בעכברים. אורט הוא פשוט למדי, ניתן להשלים במשך 3 ימים: habituation יום, יום אימונים ויום הבדיקה. במהלך האימון, העכבר מותר לחקור 2 עצמים זהים. ביום הבדיקה, אחד מהאובייקטים הכשרה מוחלף אובייקט הרומן. כי עכברים יש העדפה של מולדת החדשנות, אם העכבר מזהה האובייקט מוכר, זה תוכלו לבלות את רוב זמנה על האובייקט הרומן. בשל העדפה מולדת זו, יש אין צורך חיזוק חיובי או שלילי או זמן הכשרה לוחות זמנים. בנוסף, ניתן לשנות את אורט גם עבור יישומים רבים. מרווח זמן השמירה ניתן מקוצר לבחון את הזיכרון לטווח קצר, או מאורכים כדי לחקור זיכרון לטווח ארוך. להתערבות פרמקולוגית ניתן להשתמש ב במועדים שונים לפני אימון, לאחר הכשרה, או לפני האחזור לחקור שלבים שונים של למידה (קרי, רכישה, איחוד מוקדם או מאוחר או החזרה). בסך הכל, אורט היא בדיקת מתח נמוך יחסית, יעיל עבור זיכרון בעכברים, המתאים עבור זיהוי שינויים שתלמידים בעקבות מניפולציות תרופתי, ביולוגי או גנטית.

ניסיוני הכנה אורט כללי מוצגת באיור2. על habituation ממוקמים היום (T0) עכברים בזירה ריק עבור 5 דק. עשרים וארבע שעות אחר כך, עכברים להציב בחזרה בבית הבליעה עם 2 עצמים זהים ואסור לחקור בחופשיות עד 10 דקות (T1). על בדיקות היום (T2), העכברים שוב להציב בזירה, אך עם אובייקט מוכר אחד, אובייקט רומן אחד, מותר לחקור עד 10 דקות. מרווח הזמן השמירה, הזמן בין T1 ו T2, יכול להשתנות, בהתאם המטרות הסופיות של הניסוי. בנתונים ייצוגית, כי מעכבי צפויים כדי לשפר את הזיכרון, העכברים...

המבחן זיהוי האובייקט (אורט) הוא assay פשוט ויעיל להערכת בלמידה ובזיכרון בעכברים. המתודולוגיה המתוארת להלן.

The object recognition test (ORT) is a commonly used behavioral assay for the investigation of various aspects of learning and memory in mice. The ORT is ...

המטרה הכללית של בדיקה התנהגותית זו היא לבחון היבטים שונים של למידה וזיכרון בעכברים. שיטה זו יכולה לסייע במתן תשובות לשאלות רבות בתחום הקוגניציה של מכרסמים, החל מהבסיס לפיתוח הבנה מעמיקה יותר של היבטים מסוימים של למידה וזיכרון בעכברים, ועד לסוגיות מורכבות יותר, כגון ליקוי קוגניטיבי, כולל מודלים של מחלות, כגון מחלת אלצהיימר, ועד לחקירת שיפור קוגניטיבי פוטנציאלי. היתרון המרכזי של ה-ORT הוא הפשטות, היעילות והגמישות שלו בחקר למידה וזיכרון בעכברים.אנדריי ז'לטי (Andrei Jeltyi), טכנאי מעבדה מהמעבדה שלנו, ידיגם הליך זה. התחילו בבחירת חפצים בגודל של מול (mole) שניתן להבחין ביניהם בקלות על ידי החיה, אך בעלי דרגה דומה של מורכבות במאפיינים כגון מרקם, צורה או בהירות, כדי למזער העדפה פוטנציאלית לחפץ העלולה להטות את התוצאות. בנוסף, כדי להפחית עוד יותר העדפות מושרות, ודאו שהעכברים מסוגלים לטפס על שני החפצים או על אף אחד מהם.היכולת לטפס על חפץ עשויה להגביר את העניין בחקירה. כדי למזער את הלחץ הנגרם מתאורה בהירה, השתמשו בתאורה נמוכה ומפוזרת, כאשר מרכז המבוך מואר בעוצמה של כ-20 lux. גשמו את העכברים לכל חדר בדיקה חדש למשך שעה אחת לפחות לפני השימוש בכל יום, ושמרו על טמפרטורה ולחות הדומות לתנאי הדיור הרגילים.שימו לב, יש לטפל בעכברים פעם אחת עד פעמיים ביום למשך דקה אחת לפחות, במהלך שבוע עד שבועיים לפני הבדיקה. לבסוף, עבור הזירה הראשית, השתמשו בתא ריבועי עשוי פלסטיק לא נקבובי בצבע לבן או שחור, בניגוד לצבע העכבר. התחילו בהוצאת העכבר מכלוב המגורים שלו והנחתו במרכז הזירה הפתוחה והריקה.אפשרו חקירה חופשית של הזירה למשך חמש דקות. ברגע שכלוב הבית מתרוקן, שמרו אותו לשימוש ככלוב המתנה למחרת. בתום חמש הדקות, הוציאו את העכבר והעבירו אותו לכלוב המתנה.אין להחזיר את העכבר לכלוב הבית המקורי שלו, שכן הדבר עלול להשפיע על התנהגות העכברים שטרם נבדקו. לאחר מכן, יש לנקות ביסודיות את המכשיר בין בדיקה של עכבר אחד למשנהו, באמצעות ethanol בריכוז 70% volume per volume. לאחר מכן, התחילו את שלב האימון או T1, על ידי הצבת שני אובייקטים זהים ברביעים מנוגדים של הזירה.לדוגמה, אחד בפינה הצפון-מערבית ואחד בפינה הדרום-מזרחית. הצמידו לרצפה חפצים קלים מדי באמצעות דבק עיגון נסיר. בצעו איזון (Counter balance) לשימוש בכל סט של חפצים, וכן למיקום החפץ החדש בארבע הפינות של הזירה.יש לוודא איזו אלכסון משמש עבור איזו חיה, כדי שהשימוש באלכסון ביום האימון יהיה במבנה זהה לזה ששימש ביום הבדיקה עבור כל עכבר. 24 שעות לאחר ההסתגלות, הוציאו את העכבר מכלוב מגוריו והניחו אותו במרכז הזירה, במרחק שווה משני החפצים הזהים, כדי להתחיל באימון. אפשרו חקירה חופשית למשך חמש דקות לפחות; אם משתמשים בזן עכברים הידוע כבעל פעילות מוטורית או חקירתית נמוכה, האריכו את הניסוי ל-10 דקות עבור כל העכברים בקבוצות.בסיום ניסוי האימון, הוציאו את העכבר והניחו אותו בכלוב ההמתנה. ברגע שכלוב הבית מתרוקן, שמרו אותו לשימוש ככלוב המתנה ביום הבדיקה. הקפידו לנקות את המכשיר ואת החפצים בין עכבר לעכבר.בשלב הבא, התחילו את שלב הבדיקה או T2, על ידי הנחת החפץ המוכר ששימש במהלך האימון וחפץ חדש אחד ברביעיים נגדיים של הזירה. השתמשו עבור כל עכבר באותם מיקומים שבהם השתמשתם במהלך האימון. במרווח הזמן שבין T1 ל-T2, הוציאו את העכבר מכלוב הבית שלו והניחו אותו במרכז הזירה, במרחק שווה מהחפץ המוכר ומהחפץ החדש.אפשרו חקירה חופשית למשך 10 דקות. לבסוף, בסיום ניסוי הבדיקה, הוציאו את העכבר והניחו אותו בכלוב ההמתנה. לצורך הניתוח, חקירה מוגדרת כאף המופנה לעבר האובייקט במרחק של שני עד שלושה סנטימטרים, בליווי סריקה פעילה של השפנים.עם זאת, זמן שהייה של העכבר על גבי האובייקט אינו נספר כזמן חקירה. עבור T1 ו-T2, יש לדרג את חמש הדקות הראשונות ולחשב את סך זמן החקירה של שני האובייקטים עבור כל סשן. אם העכבר אינו מגיע לזמן חקירה מינימלי של 20 שניות עבור שני האובייקטים, יש להמשיך בדירוג מעבר לחמש דקות, עד שסך זמן החקירה יעלה על 20 שניות.האריכו את זמני T1 ו-T2 ל-10 דקות עבור זני עכברים המראים רמת חקירה נמוכה שאינה עומדת בקריטריון המינימלי בתוספת של חמש דקות, כפי שנצפה במהלך בדיקות הפיילוט. לבסוף, אם העכברים אינם מגיעים למינימום של 20 שניות של חקירה עבור שני החפצים, הן ב-T1 והן ב-T2, לאחר 10 דקות, הוציאו אותם מהניתוח, שכן לא ניתן לאשר שהחיה בילתה מספיק זמן בחקירה כדי ללמוד ולהבחין בין החפצים. משימת זיהוי החפצים היא שיטה יעילה וגמישה לחקר למידה וזיכרון בעכברים, כאשר הוכח כי מעכבי phosphodiesterase 2 משפרים את הביצועים במשימה זו.בהשוואה לקבוצת הביקורת (vehicle), מתן מעכבי PDE2 מסוג bays 60-7550 או ND7001 שיפר משמעותית את הזיכרון באופן התלוי במינון, כאשר הם ניתנו 30 דקות לפני האימון. כאשר ניתן מעכב ה-PDE2 מסוג bay 60-7550 בנקודות זמן שונות ביחס לאימון ולבדיקה, הוא שיפר משמעותית את הזיכרון כאשר ניתן 30 דקות לפני האימון, כמו גם מיד לאחר האימון ו-30 דקות לפני השליפה (recall). לאחר השליטה בטכניקה, ניתן להשלימה בתוך יומיים עד שלושה ימים אם היא מבוצעת כהלכה.בעת ביצוע פרוצדורה זו, חשוב לזכור להריץ מחקרי פיילוט ולבחור בקפידה את הרווח שבין T1 ל-T2, שכן בחירה ברווח שגוי עלולה להוביל לתוצאה מוטעית. לאחר ביצוע פרוצדורה זו, ניתן לבצע שיטות אחרות, כגון מבוך Barn, כדי לענות על שאלות נוספות, למשל הבדלים בלמידה, שאינם יכולים להיבחן באופן מלא באמצעות מבחני זיהוי חפצים. לאחר פיתוחה, סללה טכניקה זו את הדרך עבור חוקרים בתחום הלמידה והזיכרון לחקור את המנגנונים הביולוגיים הבסיסיים של הזיכרון, וכן לבחון מנגנונים פוטנציאליים של ליקויים קוגניטיביים שונים במכרסמים.לאחר צפייה בסרטון זה, תרכשו הבנה טובה לגבי האופן שבו יש להקים ולתכנן ניסוי מתאים באמצעות מבחן זיהוי חפצים, כולל ביצוע מחקרי פיילוט, בחירת חפצים ובחירת המרווח המתאים בין T1 ל-T2. תודה שצפיתם ובהצלחה בניסויים שלכם.

novel-object-recognition-test-for-investigation-learning-memory

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

מאמר זה מציג את פרוטוקול של T-מבוך בדיקות באמצעות מנגנון אוטומטי שונה להערכת הלמידה והזיכרון פונקציות בעכברים.

T-מבוך לסירוגין בכפייה של שמאל וימין משימות אפליה להערכת עבודה וזיכרון העזר עכברים

התנהגויות מוגבלות וחוזרות על עצמן מסדר גבוה יותר משבשות את חייהם של אנשים מושפעים.  התנהגויות אלה מאתגרות למידול במכרסמים, מה שמקשה על מחקר ביו-רפואי בסיסי על טיפולים או התערבויות פוטנציאליים ל-RRBs.  כאן אנו מתארים חקר אובייקטים חדשים כמבחן פוטנציאלי ל-RRBs מסדר גבוה יותר בעכברים.

חיפושי אובייקט רומן בתור Assay פוטנציאל התנהגויות חוזרות מסדר גבוה של עכברים

תיאר כאן היא מבוימת, התנהגות ההקרנה התנהגותית שניתן להשתמש בהם כדי המסך עבור תרכובות כי התערוכה יעילות vivo על התנהגויות מוטוריות קוגניטיבית ופונקציונלית מודלים עכבר מהונדס של עמילואידוזיס β ו tauopathy. שיטות אלה מותאמות לתצוגת תרכובות עבור פעילות במשימות זיכרון לטווח קצר ולזיכרון עבודה.

הערכה של חלופה ספונטנית, זיהוי אובייקטים רומנטי ו Clbing איברים מודלים עכבר מהונדס של Amyloid-β ו נוירופתולוגיה טאו

כאן, אנחנו מאמנים עכברים בפעילות associative learning כדי לבדוק את ריח אפליה. פרוטוקול זה מאפשר גם במחקרים על למידה-induced שינויים מבניים במוח.

מבחן אובייקטיבי, לשחזור של למידה חוש הריח ואפליה בעכברים

כאן אנו מספקים פרוטוקול הכוללת הוראות מקיפה להקמת חסכוני של מיקום אובייקט מאתר ובדיקה אובייקט הרומן זיהוי התנהגותית, לרבות עיצוב, עלות, בניית נדרש ציוד כמו גם ביצוע של בדיקה התנהגותית, איסוף נתונים, ניתוח.

הרומן וראייה ומיקום אובייקט ההתנהגותי בוחן בעכברים על תקציב

סוללה מבחן התנהגותי מקיף של מיומנויות מוטוריות, רוח — לרבות אינטראקציה חברתית, דיכאון וחרדה – קוגניציה מיועד המבדק חוזרות ונשנות של שינויים התנהגותיים הקשורים ניוון מוחיים הקשורים בעכברים.

סוללה בדיקה התנהגותית להערכה חוזרת ונשנית של מיומנויות מוטוריות, מצב רוח, קוגניציה בעכברים

מאמר זה מציג הליכים ניסיוניים להערכת ליקויי זיכרון בעכברים אפילפסיה הנגרמת על ידי pilocarpine. פרוטוקול זה יכול לשמש כדי ללמוד את המנגנונים הפתופיזיטיביים של התדרדרות קוגניטיבית הקשורה לאפילפסיה, שהיא אחת הנפוצות ביותר במחלת התחלואה באפילפסיה.

הערכה של תפקוד הזיכרון בפילסוקרפיין-עכברים מבוססי אפילפסיה

הפרוטוקול המוצג כאן מספק מידע על אלקטרואנצפלוגרפיה בו זמנית (EEG) והערכה התנהגותית בזמן אמת. דנו בכל השלבים הכרוכים בפרוטוקול זה כפתרון אטרקטיבי לחוקרים בתחומים רבים של מדעי המוח, במיוחד בתחומי למידה וזיכרון.

ניטור סימולטני של אלקטרופיזיולוגיה אלחוטית ומבחן התנהגותי של זיכרון ככלי לחקר נוירוגנזה בהיפוקמפוס

פרוטוקול זה מספק שלבים מפורטים עבור משימת מיקום אובייקט עם ארבע חזרות באמצעות אותה קבוצת חולדות. קידוד חלש וחזק יכול לייצר זיכרונות לטווח קצר וארוך. הגמישות של הפרוטוקול עם חזרה יכולה להיות מועילה למחקרים הכוללים ניתוחים על ידי חיסכון בזמן ובעבודה.

עיצוב ניסיוני בתוך נושא באמצעות משימת מיקום אובייקט בחולדות

פרוטוקול זה מספק תיאור מקיף של שיטה לרישום סימולטני של אותות סידן מנוירונים ואסטרוציטים באזורים מוחיים רבים הקשורים לזיכרון ומדגים את יישומו במהלך פרדיגמת התנהגות למידה וזיכרון.

שיטת פוטומטריית סיבים דו-צבעונית לתיעוד פעילות אסטרוציטים-נוירונים באזורים שונים במוח במהלך התנהגויות למידה וזיכרון

למדו את מבחן הכרת האובייקטים (ORT) לחקירת למידה וזיכרון בעכברים. שיטה זו מאפשרת הערכת זיכרון הכרה בקלות וביעילות, ומתאימה למחקרים בתחום הנוירומדעים ההתנהגותיים ולמניפולציות פרמקולוגיות וגנטיות.

אובייקט הרומן מבחן ההכרה לחקירה של למידה וזיכרון בעכברים

גלה סרטונים נוספים