8 בנובמבר 2017
הכניסה פוליאוריתן קטטר לתוך לומן אבי העורקים ואת תפר מצדו של אבי העורקים לגרום היפוקסיה כרונית עקב זילוח של adventitial צינורי. מאמר זה מתאר מודל בעלי חיים הרומן של מפרצת אב-עורקית של הבטן (AAA) עם מאפיינים דומים לאלה של AAA בבני אדם.
המטרה הכוללת של הליך זה היא לגרום להיפוקסיה של רקמת אבי העורקים להתחלת מפרצת אבי העורקים הבטני או AAA עם התרחבות אבי העורקים המתקדמת בחולדה. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתקופת המחקר של מפרצת אבי העורקים לגבי המנגנונים האחראים להתפתחות מפרצת אבי העורקים הבטני וקרע. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהמאפיינים המורפולוגיים והפתולוגיים של זה שבין מודל החולדה דומים לאלה הנראים במפרצות אבי העורקים בבטן האנושית.
הרעיון לשיטה הזו עלה לנו לראשונה כשחקרנו אפשרות נוספת של AAA אנושי. הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית מכיוון שקשה ללמוד את ניתוח האינדוקציה של היפוקסיה באמצעות הוראה בקיא בטקסט בלבד. ידגימו את ההליך טטסורו יאטה, מנתח כלי הדם שלנו, והירונה קוגו, שניהם רופאים לשעבר מהמעבדה שלנו.
לאחר אישור רמת ההרגעה המתאימה על ידי צביטת הבוהן, השתמש בסכין גילוח חשמלי כדי לגלח את שיער הבטן של חולדה במשקל 300 עד 400 מיליגרם, ולאחר מכן חיטוי תמיסת אלכוהול ופובידון-יוד של העור החשוף. הניחו את החולדה על שולחן הניתוחים במצב שכיבה ומרחו משחה על עיני החיה. לאחר מכן, השתמש במספריים כדי לבצע חתך בטן בקו האמצע הגחוני והשתמש בגזה סטרילית ובמפסק פצע כדי לארוז את תוכן הבטן בתוך חלל הבטן.
כדי לנתק את אבי העורקים מהרקמה הפרי-וסקולרית, השתמש בפינצטה כדי להרים ולקרוע בעדינות את הרטרופריטונאום, ולחשוף את דופן אבי העורקים. לאחר מכן, יש לקלף את אבי העורקים האינפרא-כלייתי בתוך החלל הרטרופריטונאלי מווריד הכליה השמאלי ועד להתפצלות מהרקמה הפרי-וסקולרית. השתמש בתפר משי 5-0 כדי לקשור את כלי הדם המסתעפים מאבי העורקים הבטני כדי לחסום את אספקת הדם בנקודה הרחק מאבי העורקים שאינה מצמצמת את לומן אבי העורקים.
כדי לחסום את זרימת הדם של אבי העורקים, הניחו קליפסים וסקולריים ממש מתחת לעורק הכליה וממש מעל התפצלות אבי העורקים. בדומה ליצירת דימום נקודתי על פני דופן אבי העורקים, הכנס את המספריים המיקרו-מספריים 5 מ"מ דיסטלי מהקליפ של אבי העורקים הסמוך לענפי עורק הכליה כדי לחתוך את דופן אבי העורקים הקדמי והשתמש במחט שוכנת בגודל 24 כדי להכניס באופן רדוד קטטר פוליאוריטן דרך החתך. חבר מזרק של 1 מ"ל מלא במים לפוליאוריטן ושטוף את שארית הדם מאבי העורקים.
לאחר מכן, חתוך קטטר פוליאוריתן חדש לאורך 10 מ"מ והכנס לחלוטין את הצנתר הזה לחתך הלומן של אבי העורקים. מקם מחדש את נקודת האמצע של הצנתר כך שתתאים למיקום החתך והשתמש ב-8-0 תפר מונופילמנט לסגירת החתך בתפר קטוע. קשרו את אבי העורקים הבטני עם קשר מנתח באמצעות תפר משי 5-0 וצנתר פוליאוריטן.
כאשר הצנתר מאובטח, הסר את תפסי כלי הדם בהתפצלות אבי העורקים ומתחת לעורק הכליה כדי להחזיר את זרימת הדם הקדמית ולאשר את נוכחותה של פעימת אבי העורקים הגסה. לאחר הסרת הגזה, השתמש בתפר פוליפרופילן 4-0 כדי לסגור היטב את חתך הבטן בשתי שכבות כדי למנוע איבר בולט. לאחר מכן, מרחו לידוקאין מקומי על החתך בבטן והניחו את החולדה על כרית חימום עם ניטור עד לפיצוי מלא.
לאחר הניתוח, התבונן בהתפתחות מהלך הזמן של אבי העורקים המוגדל באקוגרמה אולטרסאונד, ומדוד את הקוטר המקסימלי מהקצה הפנימי לקצה החיצוני של אבי העורקים הבטני על פי פרוטוקולים סטנדרטיים. 28 יום לאחר הניתוח, השתמש באזמל כדי לפתוח את הבטן עם חתך גחון חדש והשתמש במספריים כדי לקצור את המפרצת. מניחים את אבי העורקים שנקטפו בפורמלין 10% חוצץ ניטרלי למשך 24 עד 48 שעות.
לאחר הטמעת אבי העורקים בפרפין והשגת חלקים מרקמת אבי העורקים, על פי פרוטוקולים סטנדרטיים, יש להרטיב את חלקי הפרפין הקבועים במים מזוקקים למשך 10 דקות, ולאחר מכן הדגירה בהמטוקסילין של ורהוף. ניתן לזהות חלודה וקורוזיה עם המטוקסילין של ורהוף ופעילות מעבדת הפתרונות של ואן גיסון. לכן, הטריות וזמני הדגירה של צבעי רקמות אלה חשובים לארכיון וצביעה אופציונלית.
לאחר 25 דקות, שטפו את החלקים בשלוש שטיפות של דקה אחת במים, ולאחר מכן 10 עד 30 טבילות בתמיסה מבדילה. שטפו שוב את החלקים שלוש פעמים במים והניחו את הדגימות ב-5% נתרן תיוסולפט למשך דקה אחת. לאחר שטיפת מים נוספת, טבלו את הדגימות בתמיסת ואן גיסון למשך חמש דקות.
לאחר מכן, ייבשו את הרקמות בטבילות אתנול עולות של 30 שניות, ולאחר מכן פינוי עם שתי דגירות קסילן של 5 דקות. לאחר מכן השתמש במדיום הרכבה תהודה כדי לכסות את החלקים בהחלקות כיסוי בגודל מתאים. בתמונות אלה מוצגת מפרצת אבי העורקים הבטני מייצגת, 28 ימים לאחר החדרת הצנתר.
מדידת הקצה העליון והתחתון של אבי העורקים על ידי אולטרסאונד טרנס-בטני מגלה קוטר תקין ללא התרחבות מיד לאחר הנחת הצנתר, שגדל לגודל מקסימלי כ-14 יום לאחר ההצבה ונשאר ללא שינוי או עולה מעט עד סוף תקופת הניסוי. ניתוח היסטופתולוגי של המפרצת ביום 28 מגלה השפלה בולטת של סיבים אלסטיים בהשוואה לזו שנצפתה ביום האפס. לאחר שליטה, ניתן להשלים טכניקה זו תוך כשעה אם היא מבוצעת כראוי.
בעקבות הליך זה, ניתן לבצע שיטות אחרות כמו ניתוח מבחנה כדי לענות על שאלות נוספות לגבי הפונקציות הטוריות הבודדות. לאחר פיתוחה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום מפרצת אבי העורקים הבטני לחקור את המחלה בדמוגרפיה ספציפית של חולים. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לגרום להיפוקסיה של רקמת אבי העורקים להתחלת מפרצת אבי העורקים הבטני עם התרחבות אבי העורקים המתקדמת בחולדה.
אל תשכח שעבודה עם מכשירים כירורגיים עלולה להיות מסוכנת ביותר וכי תמיד יש לנקוט באמצעי זהירות מפני פציעה וזיהום בעת ביצוע הליך זה.
מאמר זה מציג מודל חיות חדשני לחקר מפרצת באבי העורקים הבטני (AAA) בחולדות, המדמה מאפיינים של AAA בבני אדם. המודל מקומם באמצעות השחלת קטטר פוליאוריתן וליגציה באמצעות תפר, המובילים להיפוקסיה כרונית ולהרחבה של אבי העורקים.
מודל מכרסם זה ממלא פער קריטי במחקר פרה-קליני של AAA על ידי שחזור של פגיעה היפוקסית דמוית-אנוש בדופן האורטה, מה שמאפשר הפחתת סיכונים מכניסטית של פתולוגיה וסקולרית. המודל תומך בתיקוף מטרות ובסריקה פנוטיפית על ידי אספקת מערכת רלוונטית למחלה עם הרחבה פרוגרסיבית של האורטה ופירוק של סיבי אלסטין. התועלת שלו טמונה בשיפור הביטחון החזוי עבור התערבויות טיפוליות המכוונות למניעת היווצרות מפרצת המונעת על ידי היפוקסיה.
המודל משתלב ברצף הגילוי, החל מתיקוף המטרה, דרך זיהוי מובילים ועד לבדיקת יעילות פרה-קלינית, במיוחד עבור חומרים המווסתים היפוקסיה או מייצבים את המטריקס.