Name: כוונון להקת הטטה בהיפוקמפוס במבחנה מתודולוגיות להקלטת מכרסמת מבודדת מעגל ספוטוהיפוקמפוס (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-08-02T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 37 s
Description: למדו את שיטת ההקלטה החשמלית מבודדת מהיפוקמפוס לחקר תנודות תטא וגמא. פרוטוקול זה מציג חיתוך מוח, הקלטות patch-clamp וגירוי אופטוגנטי לחקירת מעגלים עצביים בזיכרון.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי המכון הקנדי לבריאות ומחקר מדעי הטבע.

<ol><li>Buzsaki, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Theta+rhythm+of+navigation%3A+link+between+path+integration+and+landmark+navigation%2C+episodic+and+semantic+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Hippocampus%22%5BJournal%5D)">Theta rhythm of navigation: link between path integration and landmark navigation, episodic and semantic memory.</a> Hippocampus. 15 (7), 827-840 (2005).</li>
<li>Sanders, H., Renno-Costa, C., Idiart, M., Lisman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Grid+Cells+and+Place+Cells%3A+An+Integrated+View+of+their+Navigational+and+Memory+Function%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Grid Cells and Place Cells: An Integrated View of their Navigational and Memory Function.</a> Trends Neurosci. 38 (12), 763-775 (2015).</li>
<li>O'Keefe, J., Recce, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phase+relationship+between+hippocampal+place+units+and+the+EEG+theta+rhythm%5BTitle%5D)+AND+%22Hippocampus%22%5BJournal%5D)">Phase relationship between hippocampal place units and the EEG theta rhythm.</a> Hippocampus. 3 (3), 317-330 (1993).</li>
<li>Winson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+hippocampal+theta+rhythm+results+in+spatial+memory+deficit+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Loss of hippocampal theta rhythm results in spatial memory deficit in the rat.</a> Science. 201 (4351), 160-163 (1978).</li>
<li>M'Harzi, M., Jarrard, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategy+selection+in+a+task+with+spatial+and+nonspatial+components%3A+effects+of+fimbria-fornix+lesions+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neural+Biol%22%5BJournal%5D)">Strategy selection in a task with spatial and nonspatial components: effects of fimbria-fornix lesions in rats.</a> Behav Neural Biol. 58 (3), 171-179 (1992).</li>
<li>Osipova, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Theta+and+gamma+oscillations+predict+encoding+and+retrieval+of+declarative+memory%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Theta and gamma oscillations predict encoding and retrieval of declarative memory.</a> J Neurosci. 26 (28), 7523-7531 (2006).</li>
<li>Stumpf, C., Petsche, H., Gogolak, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+significance+of+the+rabbit%27s+septum+as+a+relay+station+between+the+midbrain+and+the+hippocampus.+II.+The+differential+influence+of+drugs+upon+both+the+septal+cell+firing+pattern+and+the+hippocampus+theta+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Electroencephalogr+Clin+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">The significance of the rabbit's septum as a relay station between the midbrain and the hippocampus. II. The differential influence of drugs upon both the septal cell firing pattern and the hippocampus theta activity.</a> Electroencephalogr Clin Neurophysiol. 14, 212-219 (1962).</li>
<li>Mitchell, S. J., Ranck, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+theta+rhythm+in+medial+entorhinal+cortex+of+freely+moving+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Generation of theta rhythm in medial entorhinal cortex of freely moving rats.</a> Brain Res. 189 (1), 49-66 (1980).</li>
<li>Alonso, A., Garcia-Austt, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+sources+of+theta+rhythm+in+the+entorhinal+cortex+of+the+rat.+I.+Laminar+distribution+of+theta+field+potentials%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Neuronal sources of theta rhythm in the entorhinal cortex of the rat. I. Laminar distribution of theta field potentials.</a> Exp Brain Res. 67 (3), 493-501 (1987).</li>
<li>Vertes, R. P., Kocsis, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brainstem-diencephalo-septohippocampal+systems+controlling+the+theta+rhythm+of+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Brainstem-diencephalo-septohippocampal systems controlling the theta rhythm of the hippocampus.</a> Neuroscience. 81 (4), 893-926 (1997).</li>
<li>Bland, B. H., Colom, L. V., Konopacki, J., Roth, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracellular+records+of+carbachol-induced+theta+rhythm+in+hippocampal+slices%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Intracellular records of carbachol-induced theta rhythm in hippocampal slices.</a> Brain Res. 447 (2), 364-368 (1988).</li>
<li>Cobb, S. R., Buhl, E. H., Halasy, K., Paulsen, O., Somogyi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synchronization+of+neuronal+activity+in+hippocampus+by+individual+GABAergic+interneurons%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Synchronization of neuronal activity in hippocampus by individual GABAergic interneurons.</a> Nature. 378 (6552), 75-78 (1995).</li>
<li>Williams, J. H., Kauer, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Properties+of+carbachol-induced+oscillatory+activity+in+rat+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Properties of carbachol-induced oscillatory activity in rat hippocampus.</a> J Neurophysiol. 78 (5), 2631-2640 (1997).</li>
<li>Chapman, C. A., Lacaille, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholinergic+induction+of+theta-frequency+oscillations+in+hippocampal+inhibitory+interneurons+and+pacing+of+pyramidal+cell+firing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Cholinergic induction of theta-frequency oscillations in hippocampal inhibitory interneurons and pacing of pyramidal cell firing.</a> J Neurosci. 19 (19), 8637-8645 (1999).</li>
<li>Strata, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrinsic+oscillations+in+CA3+hippocampal+pyramids%3A+physiological+relevance+to+theta+rhythm+generation%5BTitle%5D)+AND+%22Hippocampus%22%5BJournal%5D)">Intrinsic oscillations in CA3 hippocampal pyramids: physiological relevance to theta rhythm generation.</a> Hippocampus. 8 (6), 666-679 (1998).</li>
<li>Kocsis, B., Bragin, A., Buzsaki, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interdependence+of+multiple+theta+generators+in+the+hippocampus%3A+a+partial+coherence+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Interdependence of multiple theta generators in the hippocampus: a partial coherence analysis.</a> J Neurosci. 19 (14), 6200-6212 (1999).</li>
<li>Fellous, J. M., Sejnowski, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholinergic+induction+of+oscillations+in+the+hippocampal+slice+in+the+slow+%280.5-2+Hz%29%2C+theta+%285-12+Hz%29%2C+and+gamma+%2835-70+Hz%29+bands%5BTitle%5D)+AND+%22Hippocampus%22%5BJournal%5D)">Cholinergic induction of oscillations in the hippocampal slice in the slow (0.5-2 Hz), theta (5-12 Hz), and gamma (35-70 Hz) bands.</a> Hippocampus. 10 (2), 187-197 (2000).</li>
<li>Gillies, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+of+atropine-resistant+theta+oscillations+in+rat+hippocampal+area+CA1%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">A model of atropine-resistant theta oscillations in rat hippocampal area CA1.</a> J Physiol. 543 (Pt 3), 779-793 (2002).</li>
<li>Gloveli, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthogonal+arrangement+of+rhythm-generating+microcircuits+in+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Orthogonal arrangement of rhythm-generating microcircuits in the hippocampus.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 102 (37), 13295-13300 (2005).</li>
<li>Konopacki, J., Eckersdorf, B., Kowalczyk, T., Golebiewski, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Firing+cell+repertoire+during+carbachol-induced+theta+rhythm+in+rat+hippocampal+formation+slices%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Firing cell repertoire during carbachol-induced theta rhythm in rat hippocampal formation slices.</a> Eur J Neurosci. 23 (7), 1811-1818 (2006).</li>
<li>Hajos, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maintaining+network+activity+in+submerged+hippocampal+slices%3A+importance+of+oxygen+supply%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Maintaining network activity in submerged hippocampal slices: importance of oxygen supply.</a> Eur J Neurosci. 29 (2), 319-327 (2009).</li>
<li>Manseau, F., Goutagny, R., Danik, M., Williams, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hippocamposeptal+pathway+generates+rhythmic+firing+of+GABAergic+neurons+in+the+medial+septum+and+diagonal+bands%3A+an+investigation+using+a+complete+septohippocampal+preparation+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The hippocamposeptal pathway generates rhythmic firing of GABAergic neurons in the medial septum and diagonal bands: an investigation using a complete septohippocampal preparation in vitro.</a> J Neurosci. 28 (15), 4096-4107 (2008).</li>
<li>Goutagny, R., Jackson, J., Williams, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-generated+theta+oscillations+in+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Self-generated theta oscillations in the hippocampus.</a> Nat Neurosci. 12 (12), 1491-1493 (2009).</li>
<li>Jackson, J., Goutagny, R., Williams, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fast+and+slow+gamma+rhythms+are+intrinsically+and+independently+generated+in+the+subiculum%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Fast and slow gamma rhythms are intrinsically and independently generated in the subiculum.</a> J Neurosci. 31 (34), 12104-12117 (2011).</li>
<li>Amilhon, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parvalbumin+Interneurons+of+Hippocampus+Tune+Population+Activity+at+Theta+Frequency%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Parvalbumin Interneurons of Hippocampus Tune Population Activity at Theta Frequency.</a> Neuron. 86 (5), 1277-1289 (2015).</li>
<li>Huh, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excitatory+Inputs+Determine+Phase-Locking+Strength+and+Spike-Timing+of+CA1+Stratum+Oriens%2FAlveus+Parvalbumin+and+Somatostatin+Interneurons+during+Intrinsically+Generated+Hippocampal+Theta+Rhythm%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Excitatory Inputs Determine Phase-Locking Strength and Spike-Timing of CA1 Stratum Oriens/Alveus Parvalbumin and Somatostatin Interneurons during Intrinsically Generated Hippocampal Theta Rhythm.</a> J Neurosci. 36 (25), 6605-6622 (2016).</li>
<li>Gu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NMDA-dependent+phase+synchronization+between+septal+and+temporal+CA3+hippocampal+networks%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">NMDA-dependent phase synchronization between septal and temporal CA3 hippocampal networks.</a> J Neurosci. 33 (19), 8276-8287 (2013).</li>
<li>Jackson, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversal+of+theta+rhythm+flow+through+intact+hippocampal+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Reversal of theta rhythm flow through intact hippocampal circuits.</a> Nat Neurosci. 17 (10), 1362-1370 (2014).</li>
<li>Gonzalez-Burgos, G., Lewis, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GABA+neurons+and+the+mechanisms+of+network+oscillations%3A+implications+for+understanding+cortical+dysfunction+in+schizophrenia%5BTitle%5D)+AND+%22Schizophr+Bull%22%5BJournal%5D)">GABA neurons and the mechanisms of network oscillations: implications for understanding cortical dysfunction in schizophrenia.</a> Schizophr Bull. 34 (5), 944-961 (2008).</li>
</ol>

המחברים אינם מכריזים על אינטרסים מסחריים או פיננסיים מתחרים.

בעוד הקלטות אלקטרו מפרופילים בהיפוקמפוס חריף מהווים תקן במבחנה טכניקה, השיטות המוצגות כאן שונה באופן משמעותי מן הגישה הקלאסית. שלא כמו ההכנות פרוסת דק שבו שכבות תאים ספציפיים גלויים על פני השטח ניתן לבדוק ישירות, ההכנות בהיפוקמפוס שלם דומים יותר בתצורות vivo שבו האלקטרודות מופחתים לתוך אזורים במוח ממוקד בעת חציית שכבות בודדות. יושרה של ההיפוקמפוס נשמר יחד עם קישוריות תפקודית ומאפיינים של אוכלוסיות נוירונים מקומיים. זה מספק כלי מורכב ורב עוצמה לחקור תנודות רשת קטנ...

תנודות הטטה בהיפוקמפוס (4-12 Hz) הן בין הצורות השכיחות ביותר של פעילות קצבית במוח היונקי, והן מאמינות כי הן ממלאות תפקידים מרכזיים בתפקודים קוגניטיביים כגון עיבוד מידע spatiotemporal ויצירת זיכרונות אפיזודיים 1 , 2 , 3 . בעוד כמה מחקרים vivo המדגישים את הקשר של תאטה מקום תאים עם הניווט המרחבי ומחקרי הנגע, כמו גם ראיות קליניות, תומכים את הדעה כי תנודות טטה בהיפוקמפוס מעורבים היווצרות זיכרון 4 , 5 , 6 , המנגנונים הקשורים עם הדור של תנודות thta בהיפוקמפוס עדיין לא הבינו לחלוטין. מחקרים מוקדמים בתחום ה- vivo הראו שפעילות התטה תלויה בעיקר במתנדים חיצוניים, ובמיוחד בתשומות קצובותמן המבנים המוחיים כגון מחיצות וקורטקס אנטורהינל 7 , 8 , 9 , 10 . תפקיד של גורמים פנימיים - קישוריות פנימית של רשתות עצביות בהיפוקמפוס יחד עם המאפיינים של נוירונים בהיפוקמפוס - הונח גם על סמך תצפיות חוץ גופית 11 , 12 , 13 , 14 , 15 , 16 , 17 , 18 . עם זאת, מלבד כמה מחקרים ציון 19 , 20 , 21 , קשיים בפיתוח גישות שעלולות לשכפל פעילות פיזיולוגית ריאליסטית האוכלוסייה בהכנת פשוטה במבחנה חוץ גופיתS יש, במשך זמן רב, עיכוב בדיקה ניסיונית מפורטת יותר של היכולות המהותיות של ההיפוקמפוס ואת האזורים הקשורים עצמית לייצר תנודות תטה. חיסרון חשוב של תקן במבחנה דק פרוסה הגדרה ניסיונית היא כי הארגון הסלולר 3D ו הסינפטי של מבנים מוחיים נפגעת בדרך כלל. משמעות הדבר היא כי צורות רבות של פעילויות רשת מתואמות המבוססות על מכלולים תאיים מבוזרים מרחביים, החל מקבוצות מקומיות (רדיוס 1 מ&quot;מ) לאוכלוסיות של נוירונים הפרושות על פני אזור מוח אחד או יותר (&gt; 1 מ&quot;מ), לא ניתן לתמיכה. בהתחשב בשיקולים אלה, נדרש סוג אחר של גישות כדי ללמוד כיצד מופיעות תנודות התטה בהיפוקמפוס, והן מתפשטות למבנים של קליפת המוח וקורטקורט. בשנים האחרונות, הפיתוח הראשוני של &quot;להשלים septo-hippocampal&quot; הכנה לבחון interaional דו כיווניתCtions של שני מבנים 22 , ואת ההתפתחות שלאחר מכן של ההכנה &quot;ההיפוקמפוס מבודדים&quot;, גילו כי תנודות תטה מהותי להתרחש ספונטנית בהיפוקמפוס חסר קלט קצבי חיצוני 23 . הערך של גישות אלה טמון על התובנה הראשונית כי המבנה הפונקציונלי כולו של אזורים אלה היה צריך להישמר על מנת לתפקד כמו מחולל קצב תטה במבחנה 22 .

<table><tbody><tr><td><חזק>ריאגנטים</חזקים></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>נתרן כלורי</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>S9625</td><td></td></tr><tr><td>סוכרוז</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>S9378</td><td></td></tr><tr><td>נתרן ביקרבונט</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>S5761</td><td></td></tr><tr><td>NaH<תת>2</תת>PO<תת>4</תת> - נתרן פוספט מונו-בסיסי</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>S8282</td><td></td></tr><tr><td>מגנזיום גופרתי</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>M7506</td><td></td></tr><tr><td>אשלגן כלורי</td><td>סיגמא אולדריץ</td>' <td>P3911</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-גלוקוז</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>G7528</td><td></td></tr><tr><td>סידן כלוריד דיהידרט</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>C5080</td><td></td></tr><tr><td>נתרן אסקורבט</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>A7631-25G</td><td></td></tr><tr><td><חזק>שם</חזק> </td><td><חזק>חברה</חזק></td><td><חזק>מספר קטלוגי</חזק></td><td><חזק>הערות</חזק></td></tr><tr><td><חזק>ציוד</חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>סטנדרטי מספריים חיתוך</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>08-951-25</td><td>מיצוי מוח</td></tr><tr><td>ידית אזמל #4, 14 ס"מ</td><td>WPI</td><td>500237</td><td>מסנן מיצוי מוח</td></tr><tr><td> מלקחיים, לסתות שטוחות, ישרות (11 ס"מ)</td> <td>WPI</td><td>500456</td><td>מיצוי מוח</td></tr><tr><td>פרגון להבי אזמל נירוסטה #20</td><td>Ultident</td><td>02-90010-20</td><td>מיצוי מוח</td></tr><tr><td>מספריים לחיתוך מעוקל נקודה</td><td>עדינה תרמו פישר 711999 מדעי</td><td></td><td>מיצוי מוח</td></tr><tr><td>טפלון (PTFE) - מרית דקה מצופה</td><td>VWR</td><td>82027-534</td><td>הכנת</td></tr> <tr><td>היפוקמפוסהיימן סטייל מיקרוספטולה</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>21-401-25A</td><td>הכנת היפוקמפוס</td></tr><tr><td>כף מעבדה</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>14-375-20</td><td>הכנת היפוקמפוס</td></tr><tr><td>בורוסיליקט זכוכית פסטר פישר</td><td>סיינטיפיק</td><td>13-678-20A</td><td>הכנת היפוקמפוס</td></tr><tr><td>טפטפת</td> פישר <td>הכנת היפוקמפוס</td><td>מדעית</td><td></td></tr><tr><td>סכיני גילוח חד שוליים</td><td>VWR</td><td>55411-055</td><td>הכנת היפוקמפוס</td></tr><tr><td>נייר עדשה (4 x 6 אינץ')</td> <td>VWR</td><td>52846-001</td><td>הכנת היפוקמפוס</td></tr><tr><td>צלחות פטרי זכוכית (100 x 20 מ"מ)</td> <td>VWR</td><td>25354-080</td><td>הכנת היפוקמפוס</td></tr><tr><td>מגש פלסטיק לקרח; גודל 30 x 20 x 5 ס"מ</td> n.a.n.a.הכנת <td></td><td></td><td>היפוקמפוס</td></tr><tr><td>מחמם פתרון מוטבע יחיד וורנר</td><td>מכשירים</td><td>מערכת</td><td>זלוף</td>SH-27B</tr><tr><td>אבני אוויר לאקווריום לבעבוע</td> <td>מערכת זילוף</td><td>n.a.n.a.a</td><td></td></tr> <tr><td>צינורות Tygon E-3603 (מזהה 1/16 OD 1/8)</td> <td>Fisherbrand</td><td>14-171-129</td><td>מערכת זלוף</td></tr><tr><td>מחבת חשמלית</td><td>שחורה & מערכת דקר</td><td>n.a.perfusion</td><td></td></tr> <tr><td>95% O2/5% CO2 תערובת גזים (קרבוגן)&nbsp;</td><td>מערכת זלוף</td> <td>SG466204A Vitalaire</td><td></td></tr><tr><td>בקבוקי זכוכית/צלוחיות (4 x 1 ליטר)</td> <td>מערכת זילוף</td>n.a.n.a.a.תא <td></td><td></td></tr><tr><td>הקלטה שקוע</td><td>עיצוב מותאם אישית (FM)</td> <td>n.a.</td> <td>ניתן להשתמש בחלופה מסחרית</td></tr><tr><td>פיפטות זכוכית (1.5/0.84 OD/ID (מ"מ) ) WPI</td><td></td> <td>1B150F-4</td><td>אלקטרופיזיולוגיה</td></tr><tr><td>Hum Bug 50/60 הרץ מסלק רעש</td><td>Quest Scientific</td><td>Q-Humbug</td><td>אלקטרופיזיולוגיה</td></tr><tr><td>Multiclamp 700B מגבר טלאי-מהדק</td><td>התקנים מולקולריים</td><td>MULTICLAMP</td><td>אלקטרופיזיולוגיה</td></tr><tr><td>Multiclamp 700B Commander Program</td><td>התקנים מולקולריים</td><td>MULTICLAMP</td><td>אלקטרופיזיולוגיה</td></tr><tr><td>ממיר דיגיטלי/אנלוגי</td><td>התקנים מולקולריים</td><td>DDI440</td><td>אלקטרופיזיולוגיה</td></tr><tr><td>PCLAMP10</td><td>מכשירים</td> <td>מולקולרייםPCLAMP10</td><td>אלקטרופיזיולוגיה</td></tr><tr><td>טבלת בידוד רעידות&nbsp;</td><td>ניופורט</td><td>n.a.electrophysiology</td><td></td></tr> <tr><td>מיקרומניפולטורים (מופעלים ידנית)</td> <td>Siskiyou&nbsp;</td><td>MX130</td><td>אלקטרופיזיולוגיה (LFP)</td></tr><tr><td>מיקרומניפולטורים (אוטומטיים)</td><td>Siskiyou&nbsp;</td><td>MC1000e</td><td>אלקטרופיזיולוגיה (תיקון)</td></tr><tr><td>מוניטור אודיו&nbsp;</td><td>A-M Systems</td><td>דגם 3300</td><td>אלקטרופיזיולוגיה</td></tr><tr><td>חולץ פיפטה מיקרופיפטה/תיקון</td><td>Sutter</td><td>P-97</td><td>אלקטרופיזיולוגיה</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ פלואורסצנטי זקוף שנבנה בהתאמה אישית</td><td>Siskiyou</td><td>n.a.מצלמת</td><td></td></tr> <tr><td>וידאו אנלוגית</td> הדמיה <td>COHU</td><td>4912-2000/0000</td><td>הדמיה</td></tr><tr><td>תופס מסגרת דיגיטלי עם תוכנת הדמיה</td><td>EPIX, Inc</td><td>PIXCI-SV7</td><td>הדמיה</td></tr><tr><td>אולימפוס 2.5X אובייקט</td><td>אולימפוס</td><td>MPLFLN</td><td>הדמיה</td></tr><tr><td>אולימפוס 40X מטרת טבילה במים</td><td>אולימפוס</td><td>UIS2 LUMPLFLN</td><td>הדמיה</td></tr><tr><td>מערכת דיודות פולטות אור (LED) בהתאמה אישית&nbsp;</td>גירוי <td>אופטוגנטי מותאם אישית</td><td></td> <td>(Amhilon et al., 2015)</td></tr><tr><td>שם</td><td>Company</td><td>Catalog Number</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Animals</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>PV::Cre (KI) עכברי</td><td>מעבדת ג'קסון</td><td>מספר מלאי 008069</td><td>אפשר&nbsp; ביטוי גנים מכוון Cre באינטרנוירונים PV</td></tr><tr><td>עכברי Ai9 מכוננים-מותנים (R26-lox-stop-lox-tdTomato (KI))</td> מספר <td>מלאי</td> <td>מעבדת ג'קסון</td><td>007905 Express TdTomato בעקבות רקומבינציה בתיווך Cre</td></tr><tr><td>עכברי Ai32 (R26-lox-stop-lox-ChR2(H134R)-EYFP</td><td></td><td>Jackson Laboratory stock number 012569</td><td>מבטאים את חלבון ההיתוך המשופר channelrhodopsin-2/EYFP לאחר חשיפה ל-Cre </td></tr><tr><td>עכברי PVChY</td><td>רקומבינאז בגידול ביתי</td><td>n.a.צאצאים</td> <td>שהתקבלו מהכלאה של קו PV-Cre עם עכברי Ai32 (R26-lox-stop-lox-ChR2(H134R)-EYFP</td></tr></tbody></table>

כוונון להקת הטטה בהיפוקמפוס<em&gt; במבחנה</em&gt; מתודולוגיות להקלטת מכרסמת מבודדת מעגל ספוטוהיפוקמפוס

Tuning in the Hippocampal Theta Band In Vitro: Methodologies for Recording from the Isolated Rodent Septohippocampal Circuit

פרוטוקול זה מתאר את ההליכים להכנת והקלטה של ​​ההיפוקמפוס כולו מבודד, של WT ו עכברים מהונדס, יחד עם שיפורים האחרונות במתודולוגיות ויישומים לחקר תנודות תטה. אפיון פשוט של ההכנה בהיפוקמפוס מבודדת מוצג לפיה היחסים בין מתנדים תטא בהיפוקמפוס פנימי נבדק יחד עם פעילות של תאים פירמידליים, ו intereurons GABAergic, של Cornu ammonis-1 (CA1) ותת תחומים (SUB) אזורים. בסך הכל, אנו מראים כי ההיפוקמפוס מבודד מסוגל לייצר תנודות תטה מהותי במבחנה וכי קצביות שנוצר בתוך ההיפוקמפוס ניתן מניפולציה מדויקת על ידי גירוי optogenetic של intervalons חיובי parvalbumin (PV). ההכנה במבחנה מבודדת בהיפוקמפוס מציעה הזדמנות ייחודית להשתמש בשדה סימולטני ובתקן תאיים קליפ תיקון של ניאו מזוהה חזותיתRons כדי להבין טוב יותר את המנגנונים מאחורי הדור קצב.

<html> סעיף זה ממחיש דוגמאות של תוצאות שניתן להשיג על ידי לימוד תנודות theta בהכנת העכבר בהיפוקמפוס מבודד במבחנה . הליך לנתיחה לחילוץ ההיפוקמפוס מבודדת באיור 1 . באמצעות הכנה זו, תנודות תטה מהותי ניתן לבחון במהלך המיקום של אלקטרודות שדה מרובים, הקלטה הפעילות הכוללת סינכרוני תשומות סינפטיות לאוכלוסיות נוירונים באזורים שונים ושכבות של ההיפוקמפוס מבודדים ( איור 2 ). תוצאות נציג מ סימו...

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להקלטת קצבית רשת עצבית theta ו תנודות גמא מ הכנה בהיפוקמפוס שלם מבודד. אנו מתארים את השלבים ניסיוני מן החילוץ של ההיפוקמפוס לפרטים של שדה, יחידית תא שלם קליפת הקלטות מהדק, כמו גם צעדה optogenetic של קצב theta.

This protocol outlines the procedures for preparing and recording from the isolated whole hippocampus, of WT and transgenic mice, along with recent ...

המטרה הכללית של פרוטוקול זה היא להציג נהלים להוצאת הכנה של ההיפוקמפוס השל ולחקור את היווצרות רשת נוירונלית קצבית באמצעות הקלטות שדה (field), יחידה (unitary) וסגירה של ממברנה (patch-clamp), כמו גם באמצעות גירוי אופטוגנטי. שיטה זו יכולה לסייע במתן תשובות לשאלות מפתח בתחום הנוירומדעים של למידה וזיכרון, על ידי הקלה משמעותית על חקר המנגנונים התאיים והסינפטיים העומדים בבסיס תנודות קצביות בהיפוקמפוס. היתרון המרכזי של טכניקה זו הוא השימוש בהכנה שעברה אופטימיזציה כדי לחקור מעגלים בתנודות מפורטות, אשר ממלאות תפקיד מכריע במידע של זיכרון התלוי בהיפוקמפוס.כדי להתחיל בהליך זה, הניחו את המוח על צלחת הניתוח במצב זקוף, הסירו את המוחון באמצעות להב תער, לאחר מכן חתכו את המוח לשניים לאורך מישור הסגיטלי המרכזי והחזירו את שני ההמיספרים המבודדים לתא ההחזקה. לאחר מכן, הניחו המיספר בודד של המוח במצב זקוף על צלחת הניתוח. סובבו את הצלחת עד שהמבנים הסגיטליים המרכזיים פונים לעבר המנסה, וקו המתאר המוטמע של קומפלקס המחיצה (septal complex) נראה כשכבה דקה של רקמה בצורת אגס בתוך התלמוס.לאחר מכן, הכניסו שפכטל מצופה מתחת למחיצה (septum) והורידו את קצהו כלפי מטה עד להגעה לצלוחית הניתוח, וחתכו את הסיבים המחברים את אזור המחיצה באופן רדיאלי. כעת, חזרו על אותה פעולה לאורך הקצה הקדמי של המחיצה וחתכו את הסיבים המתחברים לחלק הקדמי של המוח. כאשר השפכטל מחזיק קלות את החלק הפנימי של קליפת המוח (cortex) ממש מעל להיפוקמפוס במצב זקוף, השתמשו במיקרו-שפכטל כדי למשוך בזהירות כלפי מטה את הגרעינים של התלמוס, ההיפותלמוס ויתרת גזע המוח.לאחר מכן, השתמש בשפכטול כדי לחתוך ולהסיר את הרקמה שהוברחה. לאחר מכן, הכנס את השפכטול המצופה לתוך הפרוזדור הצדי (lateral ventricle) מתחת לקצה הרוסטרלי של ההיפוקמפוס הדורסלי. החזק את השפכטול בצורה אופקית, במקביל למישור הסגיטלי המרכזי של המוח החצוי, והחלק אותו דרך הקו התוואי החלק של דפנות הפרוזדור, עד שהקצה יבצבץ באופן קורדיאלי.החזיקו את השפכטל מתחת להיפוקמפוס ולחצו בעדינות על הסיבים המחברים לאורך השכבה הפנימית, במקום שבו ההיפוקמפוס מתחבר לקורטקס העליון, לאחר מכן, הניחו את המיקרו-שפכטל בצד החיצוני של שכבה זו ולחצו אותו אל השפכטל המוצב כדי לחתוך דרך הסיבים המחברים. להשלמת החילוץ, סובבו את צלחת הניתוח והחדירו את השפכטל מתחת להיפוקמפוס הוונטרלי. החזיקו בעדינות את ההיפוקמפוס באמצעות השפכטל וחתכו את הקשרים האנדוקרינליים באמצעות תנועת חיתוך כנגד השפכטל.עם השלמת הבידוד, השאירו את ההיפוקמפוס על הצלחת והוסיפו טיפה של תמיסת סוכרוז קרה מאוד כדי לשמור על טמפרטורה נמוכה. גזמו בזהירות את שאריות הקורטקס והסיבים, והפרידו את ההיפוקמפוס מהמחיצה (septum) על ידי הפעלת להב תער בעדינות על הפורניקס (fornix). לאחר מכן, העבירו את הדגימה לתמיסת סוכרוז בטמפרטורת החדר והניחו לה להתאושש במשך 15 עד 30 דקות לפני ההעברה לתא ההקלטה.בשלב זה, הגדירו את מערכת הפרפוזיה המונעת על ידי כבידה כדי לאפשר זרימה רציפה ומהירה של ACSF מחומצן פנימה. לאחר מכן, הפסיקו את זרימת ה-ACSF והעבירו את ההיפוקמפוס לתא ההקלטה, באמצעות הקצה הרחב של פיפטה מזכוכית. אפשרו להכנה הרוויה בסוכרוז לשקוע ולהתייצב בתחתית.הנח את הדגימה במרכז תא ההקלטה, כאשר השטח החלק של CA1 והסובוליקום (subiculum) פונים כלפי מעלה. ייצב את ההיפוקמפוס באמצעות משקולות קטנות בקצוות הספטליים והטמפורליים והפעל מחדש את זרימת ה-ACSF. בפעולה זו, הורד את אלקטרודת ה-LFP אל פני השטח של ההיפוקמפוס.העבירו את אלקטרודת ה-LFP דרך שכבת הפרמטרים וצפו בעלייה בפעילות ה-spiking החוץ-תאית, בעוד מזוהה פריקה של יחידה בודדת (single unit discharge) מנוירונים בודדים. הנמיכו את האלקטרודה עוד יותר ושימו לב שה-spiking מתחיל לדעוך שוב כאשר הקצה חוצה אל ה-radiatum. צפו כי תנודה רשתית הנראית בבירור בטווח תדרי ה-theta הופכת ניכרת ומגיעה לאמפליטודה מרבית ככל שמיקום ההקלטה מונמך דרך ה-radiatum.כדי לבחון את התכונות המרחביות של תנודות תטא ספונטניות ברחבי אזור CA1, מקמו אלקטרודת LFP שנייה באתר ב-CA1 והבחינו כי תנודות תטא ב-CA1 מסתנכרנות על פני מרחקים גדולים. כדי לבחון את תכונות תנודות התטא בשכבות ההיפוקמפוס, השאירו אלקטרודת LFP ייחוס באתר radiatom ב-CA1. החל מנקודה מעט מעל ה-stratum oriens, הורידו אלקטרודה שנייה אל שכבת תאי הפירמידה ודרך ה-radiatom.ניתן להבחין בהיפוך הדרגתי של אות ה-LFP לאורך השכבה הפירמידית. כדי לבחון תנודות גמא וצימוד תטא-גמא בהיפוקמפוס שלם, מקמו אלקטרודת שדה בגבול שבין CA1 לסובליקולום (subiculum) והורידו אותה עד שתתמקם בממשק שבין השכבה הפירמידית לשכבה המולקולרית. ברמה זו, ניתן להקליט פוטנציאל שדה המראה תנודות גמא ברורות עם שינויים באמפליטודה הנמצאים בנעילה פאזית (phase locked) למקצב התטא המקומי.לאחר מכן, התאימו את קנה המידה כדי להבחין בסולם הזמן האיטי של צימוד תטא-גמא. שימו לב שפרצי גמא מופיעים בשני טווחים שונים של תדרים, אותם ניתן להבחין בסינון תדרים בתוך אות ה-LFP השוטף, בטווח הגמא האיטי והמהיר. עבור הקלטת patch clamp של תא שלם במהלך תנודות תטא היפוקמפליות in vitro, השתמשו במיקרוסקופיית וידאו פלואורסצנטית עם הגדלה נמוכה וגבוהה כדי להדמיות של אינטרנוירונים חיוביים ל-tdTomato הממוקמים ליד פני השטח של דגימת היפוקמפוס מעכבר PV tom.תחת תצוגה בהגדלה נמוכה של ההיפוקמפוס, מקם אלקטרודת LFP ב-CA1 subiculum כדי לנטר תנודות תטא בזמן ההכנה לניסויי patch clamp. לאחר מכן, עברה להגדלה של 40x והטבל את העדשה מעל אזור המטרה. הורד אותה עד שהשכבות העליונות יהיו גלויות, ותחת מיקרוסקופיה פלואורסצנטית, בחר תא PV tom פלואורסצנטי והתקרב אליו בעזרת פיפטת patch מלאה בתמיסה בין-תאית סטנדרטית.לאחר המעבר לתצורת תא שלם (whole cell), בחן את התכונות הפיזיולוגיות של תא ה-PV שזוהה במהלך תנודתיים היפוקמפליים ספונטנייםים. צפה בהקלטת פוטנציאל ממבנה הממברנה הבין-תאיים של תאי PV המתאפיינים בהתנהגות של פריקה מהירה (fast spiking) ופרצי פוטנציאלי פעולה מסונכרנים למקצב התטא השורר ב-CA1 subiculum. בהליך זה, מקם אלקטרודת LFP באזור ה-CA1 subiculum ובצע patch לתא פרמטר סמוך בהיפוקמפוס מבודד של עכבר, המבטא את האופסין המעורר הרגיש לאור כחול, CHR2, בנוירונים מעכבים מסוג PV.מקם מוליך אור של סיב אופטי מעל דגימת ההיפוקמפוס ומרכז אותו מעל האזור המוקלט. השתמש באור כחול ממקור LED לעבור גרייה אופטו-גנטית, המורכבת מפולסי אור של 10 עד 20 מילישניות או פקודות מתח בגלי סינוס המועברות בתדרי תטא. במצב current clamp, אפיין את הפעילות של התא המוקלט במהלך תנודות תטא ספונטניות.לאחר מכן, התחילו את פרוטוקול הגירוי והקליטו את התגובות לאור. שימו לב כי תנודות השדה והפעילות הסינפטית של הנוירון המוקלט הופכות לסנכרוניות יותר במהלך גירוי אופטוגנטי, וכי קצב מחזורי של תאי PV מוביל לבקרה חסונה הן על התדירות והן על העוצמה של תנודות תטא. מוצגת כאן הפעילות האלקטרופיזיולוגית שהוקליטה מתא פרמטרי במהלך תנודות תטא.עקומות current clamp מראות פריקה ספונטנית אך לא קצבית במצב מנוחה, ופוטנציאלים פוסט-סינפטיים מעכבים שלא היו מסונכרנים בבירור עם תנודות ה-LFP המופיעות באיטיות. רישומי voltage clamp מראים כי לזרמים פוסט-סינפטיים מעכבים תואמים יש פוטנציאל היפוך של כ-70- millivolts. וכאן, מוצגת הפעילות האלקטרופיזיולוגית שהוקלטה מנוירון PV אינטרניורון פלורסצנטי בעל פריקה מהירה (fast spiking) במהלך תנודות תטא.במצב של current clamp, תא זה הפגין פריקה ספונטנית במצב מנוחה והונע באופן חזק על ידי פוטנציאלים פוסט-סינפטיים עירורי קצביים שהיו מסונכרנים עם תנודתי ה-LFP היציבה. בהקלטות voltage clamp, פוטנציאל ההיפוך של הזרם הפוסט-סינפטי העירורי היה בקירוב ב-0 millivolts. לאחר השליטה בטכניקה, ניתן לבצע אותה בשעתיים עד שלוש שעות; בעת ניסיון ביצוע הליך זה, חשוב לזכור לחממן את התמיסה בחמצן בעוצמה ולהשתמש במערכת פרפוזיה המאפשרת זרימה מהירה אך קבועה של ACSF מחומצן על פני הדגימה במהלך ההקלטות האלקטרופיזיולוגיות.בעקבות הליך זה, ניתן להשתמש בשיטות אחרות, כגון גרייה אופטוגנטית או השתקה של אוכלוסיות סוגי תאים ספציפיים, כדי לענות על שאלות נוספות, כגון זיהוי תתי-הסוגים התאיים המהווים מתנדים של גלי תטא בהיפוקמפוס. לאחר פיתוחה, סללה טכניקה זו את הדרך עבור חוקרים בתחום מדעי המוח לחקור באופן שיטתי את הדינמיקה של תנודות תטא לאורך הציר הטמפורלי-ספטלי של ההיפוקמפוס in vitro. לאחר צפייה בסרטון זה, תרכשו הבנה טובה לגבי אופן הפקת דגימה של היפוקמפוס שלם לצורך חקירת התפקוד של רשתות נוירונליות קצביות באמצעות רישומי שדה (field), יחידה (unit) ו-patch clamp, כמו גם גרייה אופטוגנטית.

tuning-hippocampal-theta-band-vitro-methodologies-for-recording-from

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

סרטון זה מדגים פרוטוקול לוויסות תנודות תטא במודל עכבר מהונדס גנטית עם תעלות יונים רגישות לאור בנוירוני המחיצה המדיאלית GABAergic שלו. על ידי העברת פולסי אור להיפוקמפוס, הפרוטוקול נועד לסנכרן את הפעילות העצבית וליצור תנודות תטא, אשר נרשמות כפוטנציאלי שדה מקומיים.

מניפולציה סלקטיבית של תנודות תטא במודל עכבר

סרטון זה מדגים שיטה לתיעוד תגובות סינפטיות CA3-CA1 בפרוסת היפוקמפוס של חולדה. הוא מתאר את השלבים הכרוכים בהצבת אלקטרודות הגירוי וההקלטה על פרוסת ההיפוקמפוס ובמדידת הפוטנציאל הפוסט-סינפטי מעורר השדה (fEPSP) כדי להעריך את עוצמת התגובה הסינפטית.

הקלטת תגובות סינפטיות CA3-CA1 בפרוסה היפוקמפוסית של חולדה

סרטון זה מדגים את ההשתלה הסטריאוטקטית של מערך אלקטרודות תיל וסיב אופטי בהיפוקמפוס של מודל עכבר.

השתלת מערך אלקטרודות וסיבים אופטיים בהיפוקמפוס של העכבר

סרטון זה מדגים הקלטה של פעילות רשת עצבית קצבית, הידועה גם בשם תנודות תטא, בהיפוקמפוס מבודד. אלקטרודות מוכנסות לשכבות שונות ולמיקומים מרחביים שונים כדי לזהות ולנתח תנודות תטא. זה מראה את ההרכבים העצביים הייחודיים ואת הקישוריות של הרשת העצבית על פני שכבות שונות של ההיפוקמפוס.

הקלטה חוץ גופית של תנודות תטא בהיפוקמפוס העכבר

סרטון זה מדגים את השיטה להשתמש באופטוגנטיקה כדי לווסת את הדינמיקה של רשת ההיפוקמפוס על ידי הפעלת נוירונים בין-עצביים מהונדסים גנטית הרגישים לאור בפרוסת מוח של עכבר, שיפור סנכרון תנודות תטא ולימוד התנהגות מעגלים עצביים.

בקרה אופטוגנטית של דינמיקת רשת ההיפוקמפוס

פעילות תטא בהיפוקמפוס קשורה לשלבים קוגניטיביים והתנהגותיים ספציפיים. כאן, אנו מתארים שיטה אנליטית לאיתור תנודות תטא מאורגנות מאוד בתוך ההיפוקמפוס באמצעות גישה מבוססת תדר זמן (כלומר, ניתוח גלים).

זיהוי אוטומטי של תנודות תטא מאורגן ב Murine EEG

אנו מתארים את השימוש optogenetics והקלטות אלקטרופיזיולוגיות עבור מניפולציות סלקטיבי התנודות תטא בהיפוקמפוס (5-10 Hz) בעכברים להתנהג. היעילות של entrainment הקצב נעשה באמצעות שדה מקומי פוטנציאל. שילוב של באופטו - וניגוד pharmacogenetic מטפל מדידה efferent הסינכרון בהיפוקמפוס.

Optogenetic Entrainment התנודות תטא בהיפוקמפוס ב מתנהג עכברים

אנו מדגימים כיצד לבצע הקלטה וחשמליים מודולציה של פעילות אפילפטית 4-aminopyridine-induced פרוסות המוח מכרסמים באמצעות מערכי microelectrode. חדר הקלטה מותאמת אישית שומר על רקמות הכדאיות ברחבי מישיבות ניסיוני. חיים מיפוי אלקטרודה, מבחר זוגות מגרה מבוצעות על ידי ממשק משתמש גרפי מותאם אישית.

הקלטה של אפנון של הפעילות פרוסות המוח מכרסמים מצמידים מערכים Microelectrode

פרוטוקול זה מתאר את ההקלטה של פוטנציאל שדה מקומי עם רב shank סיליקון ליניארי רגשים. המרה של האותות באמצעות ניתוח צפיפות המקור הנוכחי מאפשר השחזור של הפעילות החשמלית המקומית בהיפוקמפוס העכבר. בטכניקה זו, תנודות המוח מוגבל יכול להילמד במעבר בחופשיות עכברים.

הקלטה במרחב מוגבל תנודות בהיפוקמפוס מתנהגים באופן עכברים

השתמשנו והקליט אלקטרודות של היפוקמאל פרוסות המוח האורך ו longitudinally הקלטה ואלקטרודות גירוי ההיפוקמפוס הראש ב vivo לעורר את הפוטנציאל המיטיות בפוטנציאלים והפגינו הפלסטיות הסינפטית ארוכת הטווח לאורך CA1 האורך האורכי.

חקירת הפלסטיות הסינפטית לטווח ארוך בהיפוקמפוס הCA1 על ידי אלקטרופיזיולוגיה הקלטת שדה

פרוטוקול זה מתאר את השימוש במכשיר הקלטה מותאם אישית ובאלקטרודות כדי להקליט פוטנציאלים של שדות מקומיים ולחקור את זרימת המידע בהיפוקמפוס העכבר ובקליפת המוח הקדם-מצחית.

הקלטות חוץ-תאיות כפולות בהיפוקמפוס העכבר ובקליפת המוח הקדם-מצחית

למדו את שיטת ההקלטה החשמלית מבודדת מהיפוקמפוס לחקר תנודות תטא וגמא. פרוטוקול זה מציג חיתוך מוח, הקלטות patch-clamp וגירוי אופטוגנטי לחקירת מעגלים עצביים בזיכרון.

כוונון להקת הטטה בהיפוקמפוס

גלה סרטונים נוספים