27 בספטמבר 2017
נתאר כאן שיטות לטיפול קפסאיצין neonatal לזירוז אטופיק דרמטיטיס חולדות, חשיפה של פורמלדהיד מתאדה לחקור את ההשפעות של פורמלדהיד אינהלציה-אטופיק דרמטיטיס.
המטרה הכוללת של הליך זה היא לגרום לתסמינים דמויי אטופיק דרמטיטיס על ידי טיפול בקפסאיצין בילודים. ולמדוד את השפעת הפורמלדהיד על תסמינים אטופיים דמויי דרמטיס. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלת מפתח הקשורה לפתופיזיולוגית של אטופיק דרמטיטיס בתחום הדרמטולוגי.
היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא השראת תסמינים דמויי אטופיק דרמטיטיס והקמת מערכת חשיפה חשובה עם התוספות. להכנת חמישה מיליגרם לתמיסת קפסאיצין של מיליליטר הוסף מיליליטר אחד של טווין 80, מיליליטר אחד של 100% אתנול ו-50 מיליגרם קפסאיצין לצינור חרוטי של 15 מיליליטר. לאחר מכן הוסף שמונה מיליליטר של מי מלח רגילים לצינור החרוטי.
יש לכסות ולנער את הצינור בחוזקה עד שלא נראות שכבות מופרדות. חיוני לספק את הקפסאיצין בין 12 ל-48 שעות לאחר הלידה. הזרקו את תמיסת הקפסאיצין לרקמה התת עורית בקו האמצע והחלק האחורי של הצוואר של חולדת Sprague Dawley שזה עתה נולדה.
כדי למנוע דום נשימה עקב הזרקת הקפסאיצין, הניחו את היילודים בתא חמצן עד שהנשימה הופכת לנורמלית. במידת הצורך דחפו את חזה היילודים כדי לעודד נשימה. התחל בהכנת תאי פלסטיק המצוידים במראה כדי לאפשר כיסוי מלא לצפייה וחורים כדי לאפשר לחולדות לנשום.
הניחו את החולדות בתא הפלסטיק וכסו את תקרת החדר בחפץ כבד כדי למנוע את פתיחת המכסה. לאחר מכן הגדר מצלמת וידאו דיגיטלית כדי להקליט בו זמנית גם את תצוגות המראה וגם את המבט הקדמי של החולדות. לאחר מכן רשמו את ההתנהגויות הספונטניות של החולדות למשך שעה.
הפעל את קטעי הווידיאו וספור את מספר התנהגויות השריטה כמו אלה שמציגה החולדה מימין. והחולדה במרכז. כדי לדרג את הנגעים לזהות את היקף וחומרת דרמטיטיס באוזניים ובחלקים אחרים של חולדה מורדמת.
הגדר את גודל היחידה עבור היקף נגעי העור כ-0.25 סנטימטרים בריבוע. וחומרת נגעי העור באמצעות טבלה זו. הכן קופסת זכוכית אקרילית שיש לה שני מחברים בצדדים מנוגדים.
לצורך זרימת גז פורמלדהיד, יש למקם את יציאת האוורור גבוה יותר משקע צריכת הגז. חבר צינורות לשני המחברים. הפעל את צינור יציאת האוורור אל מכסה המנוע או מחוץ לבניין לצורך פליטת הגז.
וחבר את צינור הכניסה השני לווסת חמצן רפואי. הניחו כלוב חולדות קונבנציונאלי בתוך קופסת הזכוכית האקרילית. הכניסו חולדות בנות שבוע לכלוב ואז אטמו את קופסת הזכוכית האקרילית בצורה הדוקה ככל האפשר כדי למנוע דליפת גז.
מרחו סרט נצמד כדי לעטוף את החדר וסגרו את החדר עם מכסה גומי לאיטום הדוק. הוסף תמיסת פורמלדהיד 0.5% לבקבוק מכשיר האדים המחובר לווסת החמצן הרפואי. אל תשכח שעבודה בפורמלדהיד יכולה להיות מסוכנת ביותר.
ותמיד יש לנקוט באמצעי זהירות כמו מסכות וכפפות על ידי ביצוע הליך זה. לאחר מכן, הפעל את הרגולטור והגדר את קצב הזרימה לחמישה ליטר לדקה. חשוף את החולדות לגז פורמלדהיד למשך שעתיים.
מוצגים כאן תמונות מייצגות של דלקת עור בחולדה שטופלה בקפסאיצין. ההתפתחות הכרונולוגית של דרמטיטיס של החולדות שטופלו בקפסאיצין מוצגת כאן. תמונה זו מתארת את ההתפתחות הכרונולוגית של התנהגויות גירוד בחולדות שטופלו בקפסאיצין.
זוהי תמונה מייצגת של נגעי עור התקפיים של חולדות בנות 16 שבועות שטופלו בקפסאיצין. רמות IgE בסרום גבוהות באופן משמעותי בבעלי חיים שטופלו בקפסאיצין. עלייה משמעותית בביטוי ה-mRNA של IL-4 נצפתה גם בבעלי חיים שטופלו בקפסאיצין.
עלייה משמעותית בביטוי ה-mRNA של IL-13 בבעלי חיים שטופלו בקפסאיצין מוצגת כאן. תמונות מייצגות אלה מראות אטופיק דרמטיטיס לאחר השבוע החמישי של הטיפול תוך שימוש ב-1.2 חלקים למיליון. ו-0.8 חלקים למיליון פורמלדהיד בהשוואה לטיפול מבוקר באוויר.
חשיפה ל-1.2 חלקים למיליון פורמלדהיד אך לא 0.8 חלקים למיליון פורמלדהיד החמירה משמעותית את דלקת הגרד במודל אטופיק דרמטיטיס שטופל בקפסאיצין. תוצאות דומות נצפו כאשר נמדדה דרמטיטיס. רמות IgE מוגברות בסרום נצפו במודל חולדות AD שטופלו בקפסאיצין שטופלו בחשיפה של 1.2 חלקים למיליון פורמלדהיד.
בעקבות הליך זה ניתן להשתמש בחומרים אחרים כמו תמיסת ג'ילקול כדי לענות על שאלות נוספות הקשורות להשפעות של חומר מסוים על אטופיק דרמטיטיס. לאחר התפתחויות אלה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום רפואת העור לחקור את תפקידם של גורמים סביבתיים בפתוגנזה של אטופיק דרמטיטיס.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
מאמר זה מתאר שיטות להשראת תסמינים דמויי דרמטיטיס אטופית בחולדות באמצעות טיפול בקפסאיצין בשלב היילוד ובחינת ההשפעות של שאיפת פורמלהיד. המחקר נועד להעמיק את ההבנה של הפתופיזיולוגיה של דרמטיטיס אטופית.
טריגרים סביבתיים בדלקת עור אטופית נותרו נעלמים קריטיים בדרמטולוגיה תרגומית, דבר המשפיע על רמת הוודאות החיזויית לפיתוח טיפוליים. מודל חולדה זה מאפשר הערכה סיסטמטית של חשיפות סביבתיות, כגון פורמלהיד, על התקדמות המחלה ותגובת ביומרקרים. גישה זו תומכת בהפחתת סיכונים מנגנונית ומספקת מידע לקבלת החלטות בשלבים מוקדמים עבור סל פיתוחים בדרמטולוגיה.
מודל זה מגשר בין שלבי הגילוי המוקדמים לבין תיקוף פרה-קליני, על ידי מתן אפשרות לבדיקה מבוקרת של היפותזות הנוגעות לגורמים סביבתיים בהתקדמות של דלקת עור אטופית.