-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

HE

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
<<<<<<< HEAD
K12 Schools
Biopharma
=======
K12 Schools
>>>>>>> dee1fd4 (fixed header link)

Language

he_IL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Neuroscience
פשוט Neuronal מכני מתודולוגיה פגיעה ללמוד תסיסנית נוירון מוטון ניוון
פשוט Neuronal מכני מתודולוגיה פגיעה ללמוד תסיסנית נוירון מוטון ניוון
JoVE Journal
Neuroscience
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Neuroscience
A Simple Neuronal Mechanical Injury Methodology to Study Drosophila Motor Neuron Degeneration

פשוט Neuronal מכני מתודולוגיה פגיעה ללמוד תסיסנית נוירון מוטון ניוון

Full Text
5,890 Views
04:18 min
July 19, 2017

DOI: 10.3791/56128-v

Erika B. Danella1, Lani C. Keller1

1Department of Biological Sciences,Quinnipiac University

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents a cost-effective method for inducing mechanical injury to segmental nerves in Drosophila larvae, allowing for visualization and quantification of neurodegeneration at the neuromuscular junction (NMJ). By utilizing this approach, researchers can investigate the cellular events associated with neurodegeneration, providing crucial insights into the underlying mechanisms of neuronal injury.

Key Study Components

Area of Science

  • Neurodegeneration
  • Neuroscience
  • Model Organisms

Background

  • Drosophila larvae serve as an ideal model for studying neurodegenerative processes.
  • Understanding the time sequence of events in neurodegeneration is critical for advancing research.
  • This method is accessible and compatible with standard Drosophila laboratory equipment.
  • Previous studies have shown that injuries can result in significant changes at the NMJ.

Purpose of Study

  • To develop a simple method to injure Drosophila segmental nerves.
  • To visualize and quantify neurodegeneration of motor neurons.
  • To elucidate the cellular events that lead to neurodegeneration in a model organism.

Methods Used

  • The primary platform involves mechanical injury to segmental nerves in Drosophila larvae.
  • The biological model used is third instar Drosophila larvae, where segmental nerves are targeted.
  • No multiomics workflow is explicitly mentioned in the text.
  • Prior to injury, larvae are anesthetized, rolled for nerve visibility, and then subjected to mechanical injury with forceps.
  • Post-injury care includes placement on agar plates with yeast paste for feeding.

Main Results

  • Injured larvae exhibited neurodegeneration indicated by the absence of presynaptic active zone proteins at the NMJ.
  • While some larvae may experience high mortality rates, appropriate injury levels can be achieved to allow for study.
  • This method enables the tracking of neurodegenerative processes over time.
  • Research confirms the potential for this method to explore critical neurodegeneration dynamics.

Conclusions

  • This study demonstrates a viable approach for investigating neurodegeneration in a model organism.
  • The method allows for detailed analysis of neuronal injury and subsequent cellular responses.
  • Insights gained can enhance our understanding of neurodegenerative mechanisms and inform future studies in related areas.

Frequently Asked Questions

What are the advantages of the method described?
The method is inexpensive and utilizes equipment commonly found in Drosophila labs, making it widely accessible for researchers.
How is the injury to the larvae administered?
Injury is induced by mechanically crushing the segmental nerves with forceps while ensuring the cuticle remains intact.
What types of data can be obtained from this method?
The technique allows for visualization and quantification of neurodegeneration, particularly changes at the neuromuscular junction.
How can this method be adapted for different experiments?
Researchers can adjust the crushing force or the duration of recovery to study various levels of neurodegeneration and cellular responses.
What limitations should be considered when using this approach?
Care must be taken to apply appropriate force to avoid excessive mortality and ensure that neurodegeneration can be accurately measured.
How does this study contribute to neurodegenerative research?
It provides a practical platform for exploring the cellular mechanisms of neurodegeneration, paving the way for future research in this critical area.

כאן אנו מתארים שיטה פשוטה ונגישה באופן נרחב לפגוע עצבים סגמנטליים בזחלים תסיסנית לדמיין לכמת neurodegeneration של נוירונים המנוע בצומת neuromuscular (NMJ) של הזחלים instar השלישי.

המטרה הכוללת של הליך זה היא לגרום לפגיעה מכנית של נוירונים מוטוריים בזחלי דרוזופילה. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום המחקר הנוירודגנרטיבי כגון הרצף הזמני של אירועים תאיים המובילים לניוון עצבי. היתרונות העיקריים של טכניקה זו הם שהיא זולה ומשתמשת בציוד שכבר יש ברוב מעבדות הדרוזופילה.

ההשלכות של טכניקה זו משתרעות על הבנת המנגנונים המולקולריים המניעים ניוון עצבי. כדי להתחיל את הפרוטוקול, בחר 10 זחלי כוכב שני או שלישי מבקבוקון או בקבוק של דרוזופילה המכילים זחלי כוכב שלישי נודדים שגודלו ב-25 מעלות צלזיוס. השתמש במלקחיים כדי לאסוף בזהירות זחלים בודדים באמצעות מלקחיים או מכחול מבלי לדחוס אותם.

הנח ישירות את 10 הזחלים בכלי זכוכית המכיל 1x PBS קר כדי להסיר שאריות מזון ולהאט את תנועתיות הזחלים. זהה את זחלי הכוכב השלישי לפי ספירקולות הענף הקדמיות שלהם ואת זחלי הכוכב השני לפי גודלם הקטן יותר והספירקלים הקדמיים דמויי המועדון. הניחו כל זחל על מכשיר הרדמה CO2.

תחת מיקרוסקופ מנתח, גלגלו בזהירות כל זחל על הצד הגבי שלו כדי לדמיין את העצבים הסגמנטליים לאורך הציפורן. חיוני לגלגל בזהירות כל זחל על הצד הגבי שלו על מנת לדמיין את העצבים הסגמנטליים דרך הציפורן לפני הפציעה. החל מווי הפה, מקם מלקחיים בגודל 5 כחצי עד שני שליש מהדרך לאורך הזחל.

לאחר המיקום, צבט כשליש מהציפורן הגחונית המכילה את העצבים הסגמנטליים בגודל 5. כדי להבטיח שהעצבים הסגמנטליים של הזחל ייפגעו, הפעילו מספיק כוח כדי לרסק את העצבים הסגמנטליים אך השאירו את הקוטיקולה שלמה. כדי לקבוע את כמות הכוח הנכונה, יש לרסק 10 זחלים ולהבטיח ששיעור התמותה לאחר חמש שעות יהיה מתחת ל -50%לאחר הפציעה, העבירו בזהירות את הזחלים לצלחת אגר מיץ פירות המכילה כ -0.5 גרם רסק שמרים.

מניחים כל זחל כך שהקצה הקדמי שלו יהיה על משחת השמרים להמשך האכלה. מניחים צלחות אגר המכילות רסק שמרים ו -10 זחלים פצועים על תחתית צלחת פטרי ריקה בגודל 100 על 15 מילימטר. מכסים את צלחת הפטרי במגבת נייר לחה, ומוודאים שמגבת הנייר לא תיגע בזחלים או בצלחות האגר.

לאחר מכן מניחים את צלחת הפטרי בכלי אטום בטמפרטורת החדר. לבסוף, אחזר זחלים לדיסקציה לאחר תקופות מוגדרות לאחר הפציעה. לפני הפציעה, צמתים עצביים-שריריים מסוג פרא, או NMJs, מראים את סמן האזור הפעיל הפרה-סינפטי Brp במיקום לסמן הפוסט-סינפטי Dlg לאורך כל ה-NMJ.

פגיעה מכנית של עצבים סגמנטליים עלולה לגרום לניוון עצבי בינוני עד חמור שבו בוטונים המוכתמים ב-Dlg חסרים כעת את חלבון האזור הפעיל הפרה-סינפטי Brp. לאחר פיתוחה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים החוקרים פגיעה עצבית לחקור את הרצף הטמפורלי של אירועים תאיים המובילים לניוון עצבי בצומת העצבי-שרירי בדרוזופילה.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

נוירוביולוגיה גליון 125 תסיסנית פגיעה מכנית אקסונים זחלי אינסטאר עצבים סגמנטליים נוירונים מוטוריים צומת neuromuscular (NMJ)

Related Videos

פגיעה עצבית הנגרמת על ידי לייזר בשני פוטונים: שיטה לצפייה בניוון והתחדשות אקסונים בזחלי דרוזופילה

04:49

פגיעה עצבית הנגרמת על ידי לייזר בשני פוטונים: שיטה לצפייה בניוון והתחדשות אקסונים בזחלי דרוזופילה

Related Videos

2.6K Views

פגיעה מכנית בזחלי דרוזופילה עצבים סגמנטליים כדי לגרום לניוון עצבי

02:57

פגיעה מכנית בזחלי דרוזופילה עצבים סגמנטליים כדי לגרום לניוון עצבי

Related Videos

466 Views

הערכת השלמות המבנית של הצמתים העצביים-שריריים האורכיים הגביים בדרוזופילה

04:04

הערכת השלמות המבנית של הצמתים העצביים-שריריים האורכיים הגביים בדרוזופילה

Related Videos

487 Views

פרדיגמה פגיעה לחקור תיקון של מערכת עצבים מרכזי ב דרוזופילה

10:49

פרדיגמה פגיעה לחקור תיקון של מערכת עצבים מרכזי ב דרוזופילה

Related Videos

13.8K Views

באמצעות שבבי מיקרופלואידיקה עבור הדמית חיה וחקר תגובות פגיעה ב דרוזופילה זחלים

11:46

באמצעות שבבי מיקרופלואידיקה עבור הדמית חיה וחקר תגובות פגיעה ב דרוזופילה זחלים

Related Videos

15.9K Views

ניתוח Immunofluorescent מכתים של פטריות הגוף והנפש ומה קולט אור נוירונים במוח למבוגרים דרוזופילה melanogaster

10:13

ניתוח Immunofluorescent מכתים של פטריות הגוף והנפש ומה קולט אור נוירונים במוח למבוגרים דרוזופילה melanogaster

Related Videos

20.5K Views

מודל פציעה דרוזופילה In Vivo ללמוד Neuroregeneration ב ההיקפית ואת מערכת העצבים המרכזית

09:55

מודל פציעה דרוזופילה In Vivo ללמוד Neuroregeneration ב ההיקפית ואת מערכת העצבים המרכזית

Related Videos

10.2K Views

מעקב רטרוגרדי של דרוזופילה ממונע נוירונים מוטוריים שימוש בצבעי פלורסנט

08:25

מעקב רטרוגרדי של דרוזופילה ממונע נוירונים מוטוריים שימוש בצבעי פלורסנט

Related Videos

6.6K Views

הערכה מורפולוגית ופונקציונלית של Axons וסינפסות שלהם במהלך מוות Axons בדרוסופילה מלאנוסטר

10:29

הערכה מורפולוגית ופונקציונלית של Axons וסינפסות שלהם במהלך מוות Axons בדרוסופילה מלאנוסטר

Related Videos

8.4K Views

הדמיה ניוון סינפטי ב דרוזופילה למבוגרים בשיתוף עם ניוון עצבי

06:10

הדמיה ניוון סינפטי ב דרוזופילה למבוגרים בשיתוף עם ניוון עצבי

Related Videos

6.7K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code