25 בספטמבר 2017
המטרה של פרוטוקול זה היא לתאר צעד אחר צעד הטכניקה של פולשנית רוחבי אבי העורקים הכיווץ (טק) בעכברים. על ידי חיסול של צנרור ואוורור אשר הכרחיות עבור הליך רגיל בשימוש נפוץ, טק פולשנית ומפשט את תהליך פעיל ומפחית את הלחץ על החיה.
המטרה הכוללת של פרוטוקול זה היא לבסס התכווצות אבי העורקים הרוחבית הזעיר פולשנית בעכברים. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח לגבי יישום התכווצות אבי העורקים הרוחבית בעכברים, כגון כיצד ליצור מעבר מתחת לקשת אבי העורקים. היתרונות העיקריים של טכניקה זו הם שהיא פשוטה, ידידותית למשתמש, ושהיא מבטלת את הצורך באינטובציה ואוורור של העכברים.
אני אדגים את ההליך עם הפוסט-דוקטורנטית שלנו סימונה נמסקה שתבצע את הכנת בעלי החיים לפני הניתוח ושלבי המעקב לאחר הניתוח. ביום ההליך יש לגלח את הצוואר והחזה של עכבר מורדם ולחטא את העור החשוף באתנול 70%. לאחר אישור רמת ההרגעה המתאימה על ידי צביטת הבוהן, אבטח את החיה במצב שכיבה על משטח עבודה נקי של שעם.
לאחר מכן, השתמש בלהב סכין מספר 11 כדי לבצע חתך צוואר הרחם בקו האמצע האורכי של 10 מילימטר מהחריץ העל-חזה לאמצע החזה כדי לחשוף את עצם החזה. בעזרת מחזיק מחט מעץ קריל, העבירו תפר שהייה מפוליפרופילן מונופילמנט 4-0 כדי להחזיר את בלוטת התריס. והדביקו את התפר לכרית העבודה.
לאחר מכן הזיזו את כרית העבודה מתחת למיקרוסקופ כירורגי והשתמשו במלקחיים מיקרו-כירורגיים כדי להפריד באופן בוטה את שרירי קנה הנשימה כדי לחשוף את קנה הנשימה. החלק בעדינות את הקצוות הסגורים של זוג מלקחיים מיקרו-כירורגיים מעוקלים מעל קנה הנשימה ומאחורי עצם החזה ופתח וסגור בזהירות את המלקחיים המעוקלים כדי לנתח את הצדר בצורה בוטה. השתמש במלקחיים המיקרו-כירורגיים הישרים כדי לתפוס את השרירים הסופרקלביקולרים הימניים ולמשוך בעדינות את החזה.
החלקת הקצה התחתון של ציפורן העצם מתחת לעצם החזה, בצעו סטרנוטומיה חלקית עליונה של שלושה עד ארבעה מילימטרים, והפנו מעט את החלק התחתון של המיני סטרנוטומיה לכיוון שמאל. בעזרת מחזיק מחט מיקרו-כירורגי, העבירו תפר שהייה מפוליפרופילן מונופילמנט 7-0 מבפנים לחוץ של החלל הבין-צלעי השני בכל צד של הסטרנוטומיה המיני. השתמש בתפרי שהייה של פוליפרופילן מונופילמנט 7-0 כדי לפזר את קצוות החזה מכל צד.
והשתמש במלקחיים המעוקלים כדי להזיז בעדינות את שרירי קנה הנשימה, השומן המדיאסטינלי והתימוס הצידה כדי לדמיין את קשת אבי העורקים בהגדלה בעוצמה נמוכה. כדי לחשוף את הרקמה הרכה מתחת לקשת אבי העורקים, הכנס מלקחיים קשירה מתחת לקשת כשהקצוות סגורים ופתח בעדינות את המלקחיים. השתמש במלקחיים קשירה שנייה כדי ליצור מנהרה ברקמה הרכה מתחת לקשת אבי העורקים על ידי פתיחה וסגירה עדינה של המלקחיים ברקמה הרכה.
לאחר מכן העבירו חתיכה של קשירה משי 6-0 המושחלת דרך העין של עזר קשירה מתחת לקשת אבי העורקים, באמצעות מלקחיים קשירה כדי להוציא את התפר בין מקור עורקי הצוואר המשותפים הימניים והשמאליים. השלב הקשה ביותר בהליך הוא החדרת התפר מתחת לקשת אבי העורקים. טיפול הולם בעת יצירת המנהרה מתחת לקשת יקל על מיקום התפרים שלאחר מכן.
כעת השתמש במלקחיים הישרים כדי למקם מחט קהה בגודל 27 ליד קשת אבי העורקים והשתמש בשני מלקחיים הקשירה כדי לקשור את התפר בחוזקה סביב המחט ואבי העורקים בין עורקי הצוואר הנפוצים הימניים והשמאליים. כאשר התפר מאובטח, הסר את המחט במהירות אך בעדינות כדי להשיג היצרות בקוטר 0.4 מילימטר והתכווצות רוחבית הניתנת לשחזור של 65 עד 70% אבי העורקים. לאחר אישור המוסטזיס, הסר את תפרי השהות מפוליפרופילן מונופילמנט 7-0 המשמשים לפיזור קצוות החזה.
השתמש במחזיק מחט מיקרו-כירורגי כדי להעביר תפר פוליפרופילן מונופילמנט פשוט 6-0 מבחוץ לחלק הפנימי של החלל הבין-צלעי השני השמאלי ומבפנים לחוץ של החלל הבין-צלעי השני הימני. השתמש במחזיק המחט Crile-Wood כדי להפגיש את קצוות החזה עם תפר פוליפרופילן מונופילמנט 6-0. וסגרו את העור עם תפר ריצה מפוליפרופילן מונופילמנט 5-0 בשכבה אחת עם מחזיק מחט מעץ קריל.
לאחר מכן החזירו את החיה לכלוב שלה במצב נוטה תחת התחממות עם ניטור עד להחלמה מלאה. ניתן לאמת את היעילות של אינדוקציה של היפרטרופיה של החדר השמאלי על ידי השוואת היחס בין משקל הלב למשקל הגוף של חיות הדמה לזה של חיות הניסוי בימים השלישי, השביעי, ה-14 וה-28 לאחר הניתוח. היחס עולה באופן משמעותי בבעלי החיים המצומצמים בהשוואה לקבוצות הדמה מהיום השביעי לאחר הניתוח, ונשאר גבוה משמעותית בבעלי החיים המכווצים עד היום ה-28 לאחר הניתוח.
העלייה הנצפית ביחס הלב למשקל הגוף נובעת אך ורק מעלייה ביחס משקל הגוף של החדר השמאלי מכיוון שיחס משקל הגוף של החדר הימני נשאר דומה בין התכווצות אבי העורקים הרוחבי לבין בעלי החיים שנותחו במזומה לאורך כל תקופת התצפית. בנוסף, ביטוי ה-mRNA של הפפטיד הנטריאורטי במוח, בקרה חיובית להיפרטרופיה של הלב בחדרים השמאליים, גבוה משמעותית בבעלי חיים עם פס אבי העורקים בהשוואה לבעלי חיים שנותחו על ידי ביקורת ביום 14, מה שמאמת עוד יותר את יעילות הטכניקה. לאחר שליטה, ניתן להשלים טכניקה זו תוך 20 דקות אם היא מבוצעת כראוי.
בעת ניסיון הליך זה, חשוב להשתמש בעזר קשירה וקשירת מלקחיים הדומים לאלה המשמשים בפרוטוקול שלנו. לאחר פיתוחה, טכניקה זו סיפקה מודל אמין ופשוט לחקר המנגנונים המעורבים ביצירת היפרטרופיה של החדר השמאלי הנגרמת על ידי עומס יתר בלחץ. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לבצע התכווצות אבי העורקים הרוחבית הזעיר פולשנית בעכברים עם דגש מיוחד על המעבר מתחת לקשת אבי העורקים.
אל תשכח שיצירת המעבר מתחת לקשת אבי העורקים היא השלב הקריטי ביותר בהליך, ושימוש בעזר קשירה וקשירת מלקחיים מפחית במידה ניכרת את הסיכון לפציעה בקשת.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
פרוטוקול זה מתאר טכניקה זעיר-פולשנית לביצוע היצרה רוחבית של אבי העורקים (TAC) בעכברים. על ידי הימנעות מאינטובציה והנשמה, שיטה זו מפשטת את ההליך וממזערת את הלחץ המופעל על בעלי החיים.
פרוטוקול זה מספק שיטה פשוטה ופולשנית באופן מינימלי להשראת היפרטרופיה של החדדר השמאלי בעכברים, ובכך עונה על הצורך במודלים פרה-קליניים יעילים עם רמות סטרס נמוכות לגילוי תרופות למערכת הלב וכלי הדם. על ידי ביטול הצורך באינטובציה והנשמה, הטכניקה מפחיתה את המורכבות הפרוצדורלית ואת העומס על בעלי החיים, ובכך תומכת בספיק גבוה יותר ובשיפורה של רפואת בעלי החיים במחקרי תיקוף של מטרות טיפוליות. המודל מאפשר הערכה מהימנה של מועמדים טיפוליים המכוונים לשינוי מבני של הלב המושרה על ידי עומס לחץ, ובכך מקל על הפחתת סיכונים מכניסטיים בשלבים מוקדמים של תהליך הגילוי.
השיטה משתלבת ברצף הגילוי, החל מתיקוף המטרה, דרך זיהוי מובילים (lead identification) ועד לבדיקות יעילות פרה-קליניות, ובכך מספקת מערכת הרלוונטית למחלה עבור מחקרים מכניסטיים של היפרטרופיה של שריר הלב.