פרוטוקול אוניברסלי עבור gRNA בקנה מידה גדול ספריית הפקה מכל מקור ה-DNA

12.4K צפיות

צוטט 2 פעמים

10:32 דק׳

6 בדצמבר 2017

10.3791/56264-v

6 בדצמבר 2017

12.4K צפיות
 , 

שיטות ליצירת ספריות gRNA בקנה מידה גדול צריך להיות פשוט, יעיל וחסכוני. אנו מתארים פרוטוקול לייצור של ספריות gRNA מבוסס על עיכול אנזימטי של יעד ה-DNA. שיטה זו, CORALINA (ספריית gRNA מקיף הדור באמצעות פעילות נוקלאז מבוקר) מציג אלטרנטיבה סינתזה יקר oligonucleotide מותאם אישית.

גלה סרטונים נוספים

מערכת CRISPR/Cas9

Chapters in this video

0:05

כותרת

0:48

עיכול DNA באמצעות MNase והפרדת מקטעי DNA באמצעות PAGE

3:05

בידוד מקטעי DNA מג'לי PAGE ויצירת לינקרים

4:26

תיקון קצוות של מקטעים שנוקו מג'ל וליגציה של לינקרים

5:32

ברירה לפי גודל והרכבה של מבנה וקטור-אינסרט

6:18

אלקטרופורציה של תאי *E. coli* מסוג TG1 אלקטרו-קומפטנטים

8:38

תוצאות: ניתן ליצור ספריית gRNA מ-DNA מטרה

9:56

סיכום

Related Videos