חיתוך חלקי עצב הראייה אצל חולדות: מודל הקים עם גישה חדשה פעיל כדי להעריך משני ניוון של תאי גנגליון

ניוון משני של תאי גנגליון ברשתית מתרחש בעיקר בגלאוקומה. מאמר זה מדגים מודל גישת פעולה חדשני של חתך חלקי של עצב הראייה. גישה אופרטיבית חוסכת מקום זו משפרת את יכולתו של החוקר לתת תרופות או נשאים או עוקבים סלקטיביים של RGCs על גדם עצב הראייה העובר חלקית ומאפשרת לחוקרים לחקור את מנגנוני הפגיעה המשניים של RGCs בדרך חדשה.

גלאוקומה היא מחלה ניוונית כרונית, והנוירופתולוגיה המתקדמת נמשכת זמן רב. יתר לחץ דם בעיניים הוא סיבה ברורה אחת לגלאוקומה, והפחתת יתר לחץ דם בעין הוכחה כטיפול היעיל היחיד המאושר לטיפול בגלאוקומה. אך מצבם של חלק מהחולים יתדרדר עוד יותר, גם לאחר שליטה ביתר לחץ דם בעיניים.

לכן, ניוון משני של RGCs מאמינים כי מתרחש בגלאוקומה. עם זאת, המנגנון הקשור ספציפית לניוון ראשוני או משני עדיין אינו ברור. מנגנון הניוון המשני של RGCs ינחה את הטיפול בנוירוטראומה ובמחלות ניווניות של CES.

כדי לסייע בחתך כמותי חלקי של עצב הראייה, אנו מציגים מכשיר כירורגי חדש בעלות נמוכה. הכלי מורכב משני חלקים, מוט ידני וראש מחורץ. הראש המחורץ, חצי עגול בעומק אנכי של 200 מיקרומטר, והמשטח המחורץ, מאפשר לעצב הראייה הגחוני לשכב בתוכו ולייצב אותו לחתך.

הנח את עצב הראייה בחריץ הכלי. המשטח המחורץ של המכשיר מאפשר לייצב את עצב הראייה לצורך חתך. לאחר מכן חצו אנכית את עצב הראייה עם קצה מחט או חוד סכין מתאימים.

שימו לב שרק החלק הגבי של עצב הראייה מנותק מכיוון שהחלק הגחוני מוגן על ידי המכשיר. הפרד ונתק את הדורה סביב עצב הראייה, תוך הקפדה על אי ניתוק עורק העין הקשור למעטפת קרום המוח. הפגיעה הראשונית הושגה ב-RGCs המתאימים לאקסונים של עצב הראייה העוברים טרנסקטציה כמותית, הצד הגבי, בעוד שהפגיעה המשנית תבוצע ב-RGCs המתאימים לאקסונים של עצב הראייה הלא מועברים, הצד המרכזי והגחוני, ללא נזק ישיר.

חולדות הורדמו, באמצעות מערכת אידוי איזופלורן וטרינרית. ההרדמה נוטרה במהלך הניתוח, ומינון האיזופלורן הותאם בהתאם. העריכו כל הזמן את עומק וקצב הנשימה, ובצעו הערכת צביטה בבוהן כל חמש דקות כדי לוודא היעדר כאב עמוק.

הנח את הצד הימני של החולדה כלפי מעלה על שולחן הניתוח כשהראש פונה לניתוח. כוונן את המסלול הימני במרכז שדה הראייה הכירורגי. לאחר מכן נקו את אזור החתך מספר פעמים לאורך הקנתוס הצדדי לנקב האקוסטי החיצוני של עור המסלול הימני עם מריחה של 0.5% כלורהקסידין ו-75% אתנול.

הסר את הפרווה בין הקנטוס הצדדי לנקב האקוסטי החיצוני, בעזרת מספריים לקשתית. בצע חתך בעור, בעזרת מספריים לקשתית, לאורך הקנטוס הרוחבי לנקב האקוסטי החיצוני באורך של 0.5 עד סנטימטר אחד. לאחר מכן צבטו את הפאשיה ומשכו כלפי מעלה כדי ליצור טריז משולש עם מלקחיים בעלי שיניים של 0.12 מילימטר.

הכנס את הלהב התחתון של מספריים קפיציים של Vannas לאזור החתך וחתוך את הפאשיה באותו כיוון גזירה כמו עור המספריים. במיוחד בעת חיתוך הפאשיה התת עורית בקנתוס הצדדית החיצונית, השתמש במלקחיים המשוננים החדים כדי למשוך כלפי מעלה את הפאשיה התת עורית על פני הפאשיה אנכית, וחתוך את הפאשיה עם מספריים קפיציים של Vannas כדי למנוע נזק לווריד האורביטלי בקנתוס החיצוני כדי לגרום לכשל במודל על ידי דימום מוגזם. חותכים את הפאשיה במספריים לקשתית וחושפים את וריד המסלול.

השתמש בדיסקציה קהה כדי לפתוח את שני צידי החתך. היתרון בהליך זה הוא שהוא יכול למנוע דימום בעת ניתוק ישיר של כלי הדם. לאחר מכן השתמש במספריים לקשתית כדי לחתוך את הקנתוס הצדדי הימני לאורך קו החתך כדי לחשוף באופן מלא את הגישה הכירורגית ולחשוף באופן מלא את שדה הראייה למעקב אחר דיסקציה קהה של שרירי המסלול.

המשך להדק את התיקיה של שריר האורביטל התת-פאסיאלי, והקהה את ההפרדה אנכית לכיוון העור וחתך הפאשיה. לאחר מכן יש להפריד לאורך הצדדים בהדרגה כדי להגיע לעומק המסלול עד להופעת רקמת שומן מסלולית. הליך זה יפתח חלקים עמוקים יותר של חלל המסלול, יספק חלון כירורגי גדול יותר לעבוד בו ויאפשר גישה ללא הפרעה לרקמות המכסות את עצב הראייה.

בהליכים לעיל, אם מתרחש דימום, הפעל לחץ, באמצעות ספוגיות כירורגיות סטריליות או צמר גפן. לאחר חשיפת רקמת השומן במסלול, שנה את כיוון ראש החולדה מהפנייה אנכית למנתח לצד ימין של המנתח. חתכו רקמות שומן אורביטליות המכוסות על חרוט שריר המסלול סביב עצב הראייה.

פעולה זו יכולה להבטיח, לחשוף את הגישה הכירורגית המתאימה. שימו לב לשמור על נפח רקמת השומן שנכרתה בטווח רציונלי כדי למנוע דימום מתמשך. לאחר חיתוך רקמת השומן, הרקטוס הרוחבי נחשף.

מהדקים את פי הטבעת לרוחב כלפי חוץ, ואז חותכים אותו במספריים קפיציים של Vannas. מטרת הליך זה היא להשיג חשיפה טובה יותר של עצב הראייה, שכן פי הטבעת הצדדי רחב בהרבה וחוסם כמובן את הראייה של עצב הראייה. אם עדיין יש רקמת שומן מתחת לרקטוס הרוחבי, משוך כלפי מעלה את השומן המכסה את עצב הראייה, באמצעות מלקחיים בעלי שיניים של 0.12 מילימטר, וחתוך בעזרת מספריים קפיציים של ואנאס.

ואז נראית מעטפת הרקמה סביב העצב האופטי. המשך להפריד את מעטפת הרקמה לאורך כיוון עצב הראייה בעומק המסלול עד לחשיפה מלאה של עצב הראייה. שמור על האזור נקי על ידי שימוש במקלונים כירורגיים לניקוי כמויות קטנות של דם הנובעות מהסרת הרקמות.

עכשיו עצב הראייה אמור להיות גלוי. על מנת לגשת לעצב, הסר את מעטפת קרום המוח המקיפה את העצב מבלי לפגוע בעורק העין. סובב בעדינות את הנדן כדי לבחון את דפוס כלי הדם של הדורה עם הגדלה גבוהה יותר של מיקרוסקופ ההפעלה.

חפש אזור נטול כלי דם ואפשר חתך אורכי על הדורה. קרע את הנדן במקביל לכיוון עצב הראייה בעזרת קצה המחט או חוד הסכין בזהירות על מנת למנוע נזק לכלי הדם עם חתכים לרוחב. היחיד שנותר שכיסה את העצב היה הממברנה הארכנואידית.

הוא מאוד דק ושקוף. בדומה לשלב הקודם, קרעו את הממברנה הארכנואידית בעדינות, בעזרת קצה מחט או חוד סכין, במקביל לכיוון עצב הראייה. הנח את עצב הראייה בתוך חריץ המכשיר ברכות ובזהירות, וכתוצאה מכך עצב הראייה הגבי היה מעט גבוה יותר מקצה ראש החריץ.

לאחר מכן חצה את עצב הראייה הגבי מעל קצה הפלטפורמה של ראש החריץ עם קצה המחט או נקודת הסכין כדי להשלים את חתך עצב הראייה החלקי. הזז את המכשיר מעט עמוק יותר, לכיוון הכיוון האנכי של עצב הראייה, כדי לשחרר את עצב הראייה. לאחר מכן הוצא את ראש החריץ של הכלי בעדינות.

נסו לא לגרד את שרירי העין או רקמות אחרות כדי למנוע נזק נוסף. לאחר מכן ניתן להבחין בגדם של חתך חלקי של עצב הראייה. החלף את פי הטבעת הרוחבי, הפאשיה ואחרים סביב רקמות העין למיקום המקורי.

לאחר מכן תפר את שכבת השריר ואת שכבת העור של האורביטל ברצף. מרחו משחה אנטיביוטית על הפצע כדי למנוע זיהום לאחר התפר. בתהליך החייאת חולדות, הכינו בידוד תרמי על ידי מחצלת מחוממת, או כסו בריפוד יבש בכלוב.

שמיכה אותם כדי להתחמם. ודא סבלנות של דרכי הנשימה של חולדות במהלך תהליך ההחלמה. בעלי החיים שוכנו באופן עצמאי והיו תחת פיקוח קפדני לאחר הניתוח.

על מנת לאמת את ההצלחה לגבי הקמת מודל פציעה משנית עם גישה אופרטיבית חדשה על ידי שימוש במכשיר העוזר הכירורגי שתוכנן בעצמו, ה-RGCs סומנו בדיעבד מיד לאחר הקמת המודל. מטרת הליך זה הייתה לתייג את ה-RGCs בדיעבד על ידי הזרקת צבע עוקב עצבי לקוליקולוס העליון. הצבע ייקלט לאחור על ידי ה-RGCs ברשתית ומספק סמן ל-RGCs החיים עם האקסונים הלא מועברים בעין ימין.

בעוד ש-RGCs התואמים לאקסונים של עצב הראייה שעברו טרנסקטציה חלקית בעין ימין לא היו מסוגלים להיות מסומנים בפלואורו-גולד, כעין ביקורת, העין השמאלית ללא כל ניתוח, ה-RGCs לאורך עצב הראייה על הרשתית סומנו כולם בצבע זהב פלואורסצנטי באופן רטרוגרדי מהקוליקולוס העליון. הוצגו תוצאות של RGCs המסומנים בפלואורסצנטיות עם או בלי חתך חלקי של עצב הראייה. רק ה-RGCs ברשתית הימנית המתאימים לחלק הלא מועבר של עצב הראייה סומנו בזהב פלואורסצנטי, והוצג הגבול הברור של ה-RGCs הלא מסומנים והמסומנים, שהדגים את החתך החלקי של עצב הראייה.

כעין הביקורת, כל ה-RGCs של רשתית העין השמאלית סומנו בזהב פלואורסצנטי. תמונות אלה מראות כי אספקת הדם של עין ימין נצפתה לפני ואחרי הניתוח. לאחר הניתוח, העורקים עדיין התמלאו בדם, ולא נצפתה חסימה של הוורידים.

זה הצביע על כך שלא נגרם נזק למערכת אספקת הדם במהלך הניתוח. מודל הניוון המשני של RGCs הוקם בהצלחה. מודל חיתוך פוטנציאלי של עצב הראייה הוא מודל בעלי חיים שמיש לחקר מנגנון הניוון המשני והקרנה של תרופות נוירו-פרוטקטיביות במאבק נגד ניוון משני.

הנישואים של מודל זה הם היכולת להפריד ניוון ראשוני ומשני במדויק במיקום, הן בעצב הראייה והן ברשתית. היתרון העיקרי של המכשיר המעוצב שלנו ניתן לשחזור וקל יותר לתפעול. עם תרגול, ניתן לבצע את כל השלבים בהליך הכירורגי המלא תוך 10 עד 15 דקות לעין לאחר ביצוע חתכי הכניסה הראשוניים.