Name: טכניקות חוקר האנטומיה של מערכת הראייה נמלה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-11-27T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 56 s
Description: חקור את מערכת הראייה של נמלים באמצעות מיקרוסקופיית אור ואלקטרונים. טכניקות אלו מספקות מידע אנטומי מפורט ומאפשרות הערכת פרמטרים חזותיים כגון רגישות אופטית וחדות ראייה במגוון מינים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנחנו אסירי תודה יוכן Zeil, פול קופר, בירגיט גריינר לחלוק את הידע שלהם באנטומיה חרקים, על הפגנת כמה מהטכניקות שתיארנו כאן. אנחנו אסירי תודה לצוות מוכשר ותומכת במרכז מיקרוסקופיה מתקדמת באוניברסיטה, יחידת מיקרוסקופיה MQU עבודה זו נתמכה על ידי מלגה לתואר שני FRE ומענקים מטעם המועצה מחקר אוסטרלי (DE120100019, FT140100221, DP150101172).

<ol><li>Zeil, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+homing%3A+an+insect+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Visual homing: an insect perspective.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 22, 285-293 (2012).</li>
<li>Wehner, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Desert+ant+navigation%3A+how+miniature+brains+solve+complex+tasks%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+A%22%5BJournal%5D)">Desert ant navigation: how miniature brains solve complex tasks.</a> J. Comp. Physiol. A. 189, 579-588 (2003).</li>
<li>Fent, K., Wehner, R. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17779641">Ocelli: a celestial compass in the desert ant Cataglyphis.</a> Science. 228, 192-194 (1985).</li>
<li>Warrant, E. J., Dacke, M. <a target="_blank" href="http://physiologyonline.physiology.org/content/31/3/182">Visual navigation in nocturnal Insects.</a> Physiology. 31, 182-192 (2016).</li>
<li>Taylor, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dual+function+of+Orchid+bee+ocelli+as+revealed+by+x-ray+microtomography%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Biol%22%5BJournal%5D)">The dual function of Orchid bee ocelli as revealed by x-ray microtomography.</a> Curr. Biol. 26, 1-6 (2016).</li>
<li>Hölldobler, B., Wilson, E. O. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aH%C3%B6lldobler%2C+B+%22The+Ants%22">The Ants</a>. , Springer-Verlag. Berlin Heidelberg. (1990).</li>
<li>Ali, T. M. M., Urbani, C. B., Billen, J. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/BF01140185">Multiple jumping behaviors in the ant Harpegnathos saltator.</a> Naturwissen. 79, 374-376 (1992).</li>
<li>Weiser, M. D., Kaspari, M. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.0307-6946.2006.00759.x/abstract">Ecological morphospace of New World ants.</a> Ecol. Entomol. 31, 131-142 (2006).</li>
<li>Bulova, S., Purce, K., Khodak, P., Sulger, E., O'Donnell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Into+the+black+and+back%3A+the+ecology+of+brain+investment+in+Neotropical+army+ants+%28Formicidae%3A+Dorylinae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Naturwissen%22%5BJournal%5D)">Into the black and back: the ecology of brain investment in Neotropical army ants (Formicidae: Dorylinae).</a> Naturwissen. 103, 3-4 (2016).</li>
<li>Narendra, A., Reid, S. F., Hemmi, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+twilight+zone%3A+ambient+light+levels+trigger+activity+in+primitive+ants%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+R.+Soc.+B%22%5BJournal%5D)">The twilight zone: ambient light levels trigger activity in primitive ants.</a> Proc. R. Soc. B. 277, 1531-1538 (2010).</li>
<li>Narendra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Caste-specific+visual+adaptations+to+distinct+daily+activity+schedules+in+Australian+Myrmecia+ants%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+R.+Soc.+B%22%5BJournal%5D)">Caste-specific visual adaptations to distinct daily activity schedules in Australian Myrmecia ants.</a> Proc. R. Soc. B. 278, 1141-1149 (2011).</li>
<li>Moser, J., et al. <a target="_blank" href="https://www.treesearch.fs.fed.us/pubs/9853">Eye size and behaviour of day-and night-flying leafcutting ant alates.</a> J. Zool. 264, 69-75 (2004).</li>
<li>Stöckl, A. L., Ribi, W. A., Warrant, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptations+for+nocturnal+and+diurnal+vision+in+the+hawkmoth+lamina%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Adaptations for nocturnal and diurnal vision in the hawkmoth lamina.</a> J. Comp. Neurol. 524, 160-175 (2016).</li>
<li>Zeil, J. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/BF00605027">Sexual dimorphism in the visual system of flies: the compound eyes and neural superposition in Bibionidae (Diptera).</a> J. Comp. Physiol. A. 150, 379-393 (1983).</li>
<li>Dacke, M., Nordström, P., Scholtz, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Twilight+orientation+to+polarised+light+in+the+crepuscular+dung+beetle+Scarabaeus+zambesianus%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Twilight orientation to polarised light in the crepuscular dung beetle Scarabaeus zambesianus.</a> J. Exp. Biol. 206, 1535-1543 (2003).</li>
<li>Greiner, B., Ribi, W. A., Warrant, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+and+optical+adaptations+for+nocturnal+vision+in+the+halictid+bee+Megalopta+genalis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tiss+Res%22%5BJournal%5D)">Retinal and optical adaptations for nocturnal vision in the halictid bee Megalopta genalis.</a> Cell Tiss Res. 316, 377-390 (2004).</li>
<li>Warrant, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nocturnal+vision+and+landmark+orientation+in+a+tropical+halictid+bee%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Biol%22%5BJournal%5D)">Nocturnal vision and landmark orientation in a tropical halictid bee.</a> Curr. Biol. 14, 1309-1318 (2004).</li>
<li>Lattke, J. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLattke%2C+JE+%22Ants+Standard+Methods+for+Measuring+and+Monitoring+Biodiversity%22">Ants Standard Methods for Measuring and Monitoring Biodiversity</a>. , 155-171 (2000).</li>
<li>Ribi, W. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRibi%2C+WA+%22A+Handbook+in+Biological+Electron+Microscopy%22">A Handbook in Biological Electron Microscopy</a>. , 1-106 (1987).</li>
<li>Narendra, A., Ramirez-Esquivel, F., Ribi, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compound+eye+and+ocellar+structure+for+walking+and+flying+modes+of+locomotion+in+the+Australian+ant%2C+Camponotus+consobrinus%5BTitle%5D)+AND+%22Sci.+Rep%22%5BJournal%5D)">Compound eye and ocellar structure for walking and flying modes of locomotion in the Australian ant, Camponotus consobrinus.</a> Sci. Rep. 6, 22331(2016).</li>
<li>Narendra, A., Greiner, B., Ribi, W. A., Zeil, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light+and+dark+adaptation+mechanisms+in+the+compound+eyes+of+Myrmecia+ants+that+occupy+discrete+temporal+niches%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Light and dark adaptation mechanisms in the compound eyes of Myrmecia ants that occupy discrete temporal niches.</a> J. Exp. Biol. 219, 2435-2442 (2016).</li>
<li>Ribi, W. A., Zeil, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+visual+system+of+the+Australian+%26%2334%3BRedeye%26%2334%3B+cicada+%28Psaltoda+moerens%29%5BTitle%5D)+AND+%22Arthr.+Struct.+Dev%22%5BJournal%5D)">The visual system of the Australian &#34;Redeye&#34; cicada (Psaltoda moerens).</a> Arthr. Struct. Dev. 44, 574-586 (2015).</li>
<li>Ribi, W. A., Warrant, E. J., Zeil, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+organization+of+honeybee+ocelli%3A+regional+specializations+and+rhabdom+arrangements%5BTitle%5D)+AND+%22Arthr.+Struct.+Dev%22%5BJournal%5D)">The organization of honeybee ocelli: regional specializations and rhabdom arrangements.</a> Arthr. Struct. Dev. 40, 509-520 (2011).</li>
<li>Ribi, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colour+receptors+in+the+eye+of+the+digger+wasp%2C+Sphex+cognatus+Smith%3A+evaluation+by+selective+adaptation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tiss.+Res%22%5BJournal%5D)">Colour receptors in the eye of the digger wasp, Sphex cognatus Smith: evaluation by selective adaptation.</a> Cell Tiss. Res. 195, 471-483 (1978).</li>
<li>Ribi, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructure+and+migration+of+screening+pigments+in+the+retina+of+Pieris+rapae+L.+%28Lepidoptera%2C+Pieridae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tiss.+Res%22%5BJournal%5D)">Ultrastructure and migration of screening pigments in the retina of Pieris rapae L. (Lepidoptera, Pieridae).</a> Cell Tiss. Res. 191, 57-73 (1978).</li>
<li>Lau, T., Gross, E., Meyer-Rochow, V. B. <a target="_blank" href="https://www.eje.cz/pdfs/eje/2007/03/14.pdf">Sexual dimorphism and light/dark adaptation in the compound eyes of male and female Acentria ephemerella (Lepidoptera: Pyraloidea: Crambidae).</a> Eur. J. Entomol. 104, 459-470 (2007).</li>
<li>Wipfler, B., Pohl, H., Yavorskaya, M. I., Beutel, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+methods+for+analysing+insect+structures+-+the+role+of+morphology+in+the+age+of+phylogenomics%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Insect+Sci%22%5BJournal%5D)">A review of methods for analysing insect structures - the role of morphology in the age of phylogenomics.</a> Curr. Opin. Insect Sci. 18, 60-68 (2016).</li>
<li>Streinzer, M., Brockmann, A., Nagaraja, N., Spaethe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+and+caste-specific+variation+in+compound+eye+morphology+of+five+honeybee+species%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Sex and caste-specific variation in compound eye morphology of five honeybee species.</a> PLoS ONE. 8, e57702(2013).</li>
<li>Somanathan, H., Warrant, E. J., Borges, R. M., Wallén, R., Kelber, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resolution+and+sensitivity+of+the+eyes+of+the+Asian+honeybees+Apis+florea%2C+Apis+cerana+and+Apis+dorsata%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Resolution and sensitivity of the eyes of the Asian honeybees Apis florea, Apis cerana and Apis dorsata.</a> J. Exp. Biol. 212, 2448-2453 (2009).</li>
</ol>

המחברים מצהירים אין אינטרסים מתחרים.

הסוויטה מהשיטות המתוארות למעלה מאפשרים חקירה יעילה לתוך המערכת האופטית של נמלים וחרקים אחרים. טכניקות אלה מתבקשים ליידע את ההבנה שלנו של רזולוציית דגימה, רגישות אופטי פוטנציאל הרגישות קיטוב של העין נחקר. הידע הזה מספק בסיס חשוב פיזיולוגיים והתנהגותיים בחקירה שלהם יכולות חזותיות. יתר על כן, בעוד השיטות שתוארו כאן התמקדו מערכות חזותיות נמלה, שיטות אלה ניתן להשתמש חרקים אחרים, אמנם עם שינויים קלים בפרוטוקול (למשל, הגדלת משך קיבוע וחדירה ברקמות עבה יותר) . פרוטוקולים מעט שונה שימשו כדי לאפיין את מערכות חזותיות מגוון...

החזון הוא אפנות החישה חשוב עבור רוב בעלי החיים. ראייה חיונית במיוחד בהקשר של הניווט עבור מטרות איכון, הקמת הקפדה על מסלולים ואת קבלת מידע מצפן1,2. חרקים לזהות מידע חזותי באמצעות זוג עיניים מורכבות וקרא, במקרים מסוימים, הניח dorsally העיניים פשוט אחד עד שלושה ocelli3,4,5.
העיניים של נמלים הם מעניינים במיוחד, כי בעוד נמלים הם מגוונים להפליא, הם משמרים בכמה מאפיינים מרכזיים על פני מינים. למרות וריאציה דרמטי של האנטומיה, בגודל אקולוגיה, הרוב המכריע של מינים הם eusocial, לחיות במושבות; כתוצאה מכך, מינים שונים בפני אתגרים חזותית דומה מבחינת ניווט אחורה וקדימה בין מקום מרכזי משאבים. מעבר הנמלים bauplan העין בסיסי זהה יכול להיות שנצפו בבעלי חיים הנע בין 0.5-26 מ מ, אורך הגוף, מן באופן בלעדי ההשתנות היומית למינים בקפדנות ליליים, ומן איטי הליכה התת-קרקעי מזנק טורפים חזותי6,7, 8,9,10. כל אלה הבדלים מזעזעת אקולוגיה והתנהגות להצמיח התמורות הרבות של מבנים בסיסיים העין אותה כדי להתאים סביבות שונות, אורחות חיים, את גודל הגוף11,12. כתוצאה מכך, לומד את האקולוגיה חזותי של נמלים מספק אוצר אמיתי של אפשרויות לחוקר נחוש.
הבנת מערכת הראייה של חרקים חיוני הצצה יכולות התנהגותיות שלהם. זה לכאורה אינטגרטיבי מחקרים המשלבים יפה האנטומיה עם אקולוגיה והתנהגות כדי הצלחה גדולה כמה קבוצות חרקים (למשל, הפניות13,14,15,16, 17)-למרות בתחום הניווט נמלה והתנהגות נמלה באופן כללי היה מוצלח למדי, מעט מאוד דגש הושם על נמלה החזון מחוץ זנים נבחרים אחדים. כאן, אנחנו לפרט על טכניקות מעורב בחקירת עין עיצוב של נמלים. בעוד אנו נתמקד נמלים, שיטות אלה ניתן להחיל, עם שינויים קלים, חרקים אחרים, גם.

<table><tbody><tr><td>נמלה</td><td>Myrmecia midas</td><td></td><td></td></tr><tr><td>סטריאומיקרוסקופ</td><td>Leica M205 FA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מקרטע ציפוי</td><td>Pro Sci Tech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>אתנול</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td></td><td></td></tr><tr><td>פטרי צלחת</td><td>ProSciTech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ניתוח מיקרוסקופ</td><td>Leica MZ6</td><td></td><td></td></tr><tr><td>סיכת</td> <td>חרקיםלק ProSciTech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>חסר צבע</td><td>לא ממותג: מכל חנות</td><td></td><td></td>קוסמטיקה</tr> זכוכית <tr><td>שקופית סכין גילוח</td><td>ProSciTech</td> ProSciTech <td></td><td></td></tr><tr><td>Foreceps</td><td>ProSciTech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>כיסוי להחליק</td><td>ProSciTech</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td> מיקרוסקופ תרכובת Leica DM5000 B <td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>גלוטראלדהיד</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td></td><td></td></tr><tr><td>פרפורמלידהידהיד</td><td>סיגמא אלדריץ</td><td></td><td></td></tr>' <tr><td>אשלגן כלורי (KCl)</td><td>סיגמא אולדריץ</td><td></td><td></td></tr>' <tr><td>די-נתרן מימן פוספט (Na2HPO4)</td><td>סיגמא אולדריץ</td><td></td><td></td></tr>' <tr><td>אשלגן די-מימן פוספט (KH2PO4)</td><td>סיגמא אולדריץ</td><td></td><td></td></tr>' <tr><td>נתרן כלוריד (NaCl)</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td></td><td></td></tr><tr><td>אוסמיום טטרוקסיד</td><td>סיגמא אולדריץ</td><td></td><td></td></tr>' <tr><td>אצטון</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ארלדיט שרף אפוקסי</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td></td><td></td></tr><tr><td>פסטר פיפטה</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td></td><td></td></tr><tr><td>טולוידי כחול</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td></td><td></td></tr><tr><td>פלטה חמה</td><td>ריכרט HK120</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

טכניקות חוקר האנטומיה של מערכת הראייה נמלה

Techniques for Investigating the Anatomy of the Ant Visual System

מאמר זה מתאר חבילת טכניקות במיקרוסקופ אור (LM) ואלקטרון (EM) אשר יכול לשמש כדי ללמוד על האנטומיה העין הפנימיים והחיצוניים של חרקים. אלה כוללים טכניקות מסורתיות היסטולוגית ממוטבים לעבודה על העיניים נמלה, הותאם לעבודה בתאום עם טכניקות טיפול נוספות במיקרוסקופ אלקטרונים הילוכים (TEM) ואלקטרון סריקה (SEM). שיטות אלה, למרות מאוד שימושי, יכול להיות קשה microscopist המתחיל, לכן דגש רב הושם במאמר זה על פתרון בעיות, אופטימיזציה עבור פרטים שונים. אנו מספקים מידע על טכניקות הדמיה עבור הדגימה כולה (מיקרוסקופיה-צילום ו- SEM), לדבר על היתרונות והחסרונות שלהם. אנו להדגיש המשמשת לקביעת קטרים העדשה לעין כל, לדבר על טכניקות חדשות לשיפור. לבסוף, נדון בטכניקות מעורב בהכנת הדגימות באימות LM ו- TEM, חלוקתה מכתים, הדמיה אלה דוגמאות. נדון על משוכות אחד עשוי לבוא על פני בעת הכנת דוגמאות, הדרך הטובה ביותר לנווט אותם.

השיטות המתוארות כאן מאפשרים לימוד מפורט של התם עיניים מורכבות של נמלים. הדמיה התצוגה הגבי של הראש תוך שימוש בטכניקות photomicrography Z-מחסנית מאפשרת לקבל מבט כולל על הפריסה של מערכת הראייה (איור 1). זוהי הכנה טובה עבור ניתוח וכדי לקבוע את הזווית אופטים הנדרש. טכניקה זו שימושית גם את המידות כגון ראש רוחב, אורך עין העדשה ocellar קטרים. הדמיה SEM גם נותן סקירה מפורטת תמונות אבל בנוסף מאפשר רכישת בהגדלה ותמונות ברזולוציה גבוהה. אזורים מסוימים עניין בעין אפשר לבח...

מאמר זה מתאר חבילת של טכניקות אור ואלקטרון ללמוד על האנטומיה העין הפנימיים והחיצוניים של חרקים. אלה כוללים מספר טכניקות מסורתיות ממוטבים לעבודה על נמלה, מפורט לפתרון בעיות עיניים הצעות עבור אופטימיזציה עבור דגימות שונות ואזורים מעניינים.

This article outlines a suite of techniques in light microscopy (LM) and electron microscopy (EM) which can be used to study the internal and external eye ...

המטרה הכוללת של חבילה זו של טכניקות מיקרוסקופיה היא להשיג מידע אנטומי מפורט על מערכת הראייה של הנמלים. שיטה זו יכולה לסייע במענה לשאלות מפתח בתחום האקולוגיה הראייתית ולהעריך פרמטרים חזותיים שונים, כגון רגישות אופטית, חדות ראייה וגודל שדה הראייה. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא בכך שהיא נותנת סקירה מקיפה של מערכת ראייה נתונה.ניתן להתאים אותו גם לשימוש עם מינים רבים ושונים. כדי ליצור העתקים של הקרנית, השתמשו בנמלים שנשמרו באתנול או מותקנות על סיכה, או בפלסטלינה. אם הראש גדול יחסית, ניתן להסיר את חלקי הגוף הנותרים.כדי להתחיל, יש למרוח במהירות לק חסר צבע המתייבש במהירות על העין, בעזרת קיסם, מבלי לשרוט את העין. תן ללק להתייצב בטמפרטורת החדר. לאחר מכן, השתמשו בסיכת חרקים עדינה כדי להרים בעדינות את ההעתק מקפסולת הראש המקיפה את העין.ובעזרת מלקחיים תופסים את החלק של ההעתק שמכסה את הראש, אך לא את העין. לאחר מכן, הניחו את ההעתק על מגלשת זכוכית. שם, השתמש בסכין גילוח כדי לקצץ בזהירות עודפי חומר סביב העין, תוך אבטחת ההעתק.לפני הנחת החלקת כיסוי מעל ההעתק, ייתכן שיהיה צורך להכין שלוש עד ארבע פרוסות רדיאליות חלקיות עדינות כדי לעזור לשטח אותו. בעת הנחת פתק הכיסוי, תעד את כיוון העותק המשוכפל בשקופית. לאחר מכן, אטמו את החלקת הכיסוי, בעזרת טפיחות קטנות של לק בפינות, וודאו שהנוזל לא נוגע בהעתק.לאחר מכן השקופית מוכנה לצילום באמצעות מיקרוסקופ מורכב. כדי להתחיל, הרדימו את הנמלה והניחו אותה בצלחת פטרי. אם יש צורך להתאים את הצבע לתנאים בהירים או נקודתיים, יש לעשות זאת מספר שעות לפני הדיסקציה.אם נראה שתנאי הנקודה נשמרים, יש לבצע את החיתוך באור אדום. ראשית, הסר את האנטנות באמצעות מלקחיים. לאחר מכן, הסר את חלקי הפה באמצעות סכין גילוח חד.בדגימות גדולות יש לחתוך את החלק הקדמי של העין. בדגימה קטנה יש לחתוך קרוב ככל האפשר לעיניים, מבלי למשוך את המוח, מכיוון שהדבר עלול לקרוע את הרשתית. לאחר מכן, כוונו את הראש ובצעו חתך רוחבי, שמסיר את החלק הגחוני של הראש, שעשוי לכלול חלק מהעין הגחונית.לאחר מכן, נתק את קפסולת הראש עם חתך קורונלי, ממש אחורי לעין המורכבת. בדוגמה זו, החתכים הרוחביים והעטרה נעשים בו זמנית. לבסוף, העבירו את קפסולת הראש המנותחת עם העיניים המורכבות לקיבוע קר כקרח.חשוב לבצע את השלבים הללו במהירות, כדי למנוע את השפלת הרקמה, ולכן הרקמה צריכה להיכנס לקיבוע תוך שתי דקות מהחתך הראשון. בהתאם לפרוטוקול הטקסט, הכינו את הדגימה ורוקנו את עודפי השרף. לאחר מכן, הנח את הדגימה על הבלוק במצב אנכי, ובמידת הצורך, השתמש במעט שרף עודף כדי לאבטח אותו שם.סמן את הבלוק עם תוויות נייר המוטבעות בשרף, או מחוברות לבלוק. לאחר מכן, רפאו את השרף בתנור של 60 מעלות צלזיוס, למשך 12 עד 14 שעות. לאחר הריפוי, טען את הדגימה למעטפה נקייה.לאחר מכן, הרכיב את הבלוק על צ'אק מיקרוטום. לפני החיתוך, ודא תחילה שכיוון הדגימה מתאים למישור החיתוך. תחת מיקרוסקופ מנתח, חתוך את גוש השרף בעזרת סכין גילוח.לאחר מכן, הרכיבו מחדש את הצ'אק על זרוע המיקרוטום, וזווית הדגימה. לאחר מכן, מלאו את סירת הסכינים במים מזוקקים באמצעות מזרק עם פילטר 0.45 מיקרון. טען את המים עד קצה הסכין.במקומות מסוימים המניסקוס עשוי להיות קמור. לאחר מכן, מסננים את הסירה עד שהמניסקוס קעור מעט מאוד, אך עדיין מגיע לקצה הסכין. כעת, הביאו לאט ובזהירות את הסכין לכיוון הדגימה, ויישרו את הבלוק לסכין.בצע בדיקות תכופות דרך העיניים. כאשר הסכין קרובה אך עדיין לא חותכת את הדגימה, התחל להניע את גלגל המיקרוטום כדי להשלים את הגישה. לאחר מכן, כאשר מתקרבים לאזור העניין בבלוק, התאם את עובי איסוף הקטע.במקרה זה, סכין יהלום משמשת לייצור קטעי מיקרון אחד. לאחר מכן, מהמזרק המצויד במסנן, הניחו סדרה של טיפות קטנות של מים מזוקקים על מגלשה. כדי לאסוף קטע מעניין, הרם אותו באמצעות כלי ריסים.ובזהירות, צף את החלק שנאסף על טיפת מים. המשך לטעון כמה שיותר חלקים על כל שקופית שניתן. כאשר מגלשה נטענת במלואה, העבירו אותה לפלטה חמה בטמפרטורה של 60 מעלות צלזיוס כדי לאדות את המים, והדביקו את החלקים למגלשה.זה לוקח בערך 15 עד 20 דקות. לאחר מכן, השתמש במזרק אחר המצויד בפילטר כדי להפקיד טיפה של צבע כחול טולואידין על המגלשה. הניחו את הטיפה בקצה אחד של השקופית ופזרו אותה באמצעות קצה המחט מבלי לגעת או לגרד את החלקים.לאחר מכן, הנח את השקופית על הפלטה החמה למשך 20 עד 60 שניות. לאחר מכן, רססו את השקופית במים מזוקקים מבקבוק כביסה, והשתמשו בפלטה החמה כדי לייבש אותה. מאוחר יותר, בדוק את השקופיות מתחת למיקרוסקופ המורכב ולאחר מכן צלם אותן.הטכניקות המתוארות מאפשרות מחקר מפורט של העיניים הפשוטות והמורכבות של נמלים. הדמיית המבט הגבי של הראש באמצעות פוטומיקרוגרפיה Z-Stack מספקת סקירה כללית של פריסת מערכת הראייה שימושית לביצוע מדידות ברוטו. הדמיית SEM מספקת את הפרטים הדרושים לפתרון עיניים קטנות ואת הפרטים הדרושים לזיהוי הצורה של כל עדשה.קטעים דקים למחצה שצולמו באמצעות מיקרוסקופ אור מראים את האנטומיה הפנימית של העין. ניתן למדוד את מידות העדשה, החרוט הגבישי והרבדומר ברזולוציה ובהגדלה זו. ניתן לחקור גם תאי פיגמנט, נוכחות דרכי חרוט והתפלגות צורת רבדומר.קטעים דקים במיוחד שצולמו על ידי TEM מספקים מידע אולטרה-מבנה, כגון כיוון מיקרו-וילאר, ולמשל, רוחב מערכת החרוט הגבישית המצומצמת. בזמן שמנסים את הטכניקה הזו, חשוב מאוד להיות סבלניים, להשתמש במכשירים נקיים ולהשתמש בפתרונות טריים. בעקבות ניסויים אלה ניתן לבצע ניסויים התנהגותיים או פיזיולוגיים נוספים.ניסויים אלה יספקו לנו מידע על יכולות הראייה התפקודיות של החיה, ביחס לאנטומיה של העין. השימוש בטכניקות האלה מאפשר לנו לחקור את המגוון של מערכות הראייה, וכיצד הן התפתחו כדי להתאים לסגנונות חיים שונים ולאקולוגיות שונות, במינים שונים של נמלים. למרות ששיטה זו יכולה לספק תובנה לגבי מערכת הראייה של הנמלים, היא יכולה לשמש גם לחקר מערכת הראייה של חרקים אחרים, כמו גם רקמות עצבים אחרות.אל תשכח שעבודה עם מקבעים ושרפים מסוכנת ביותר ותמיד יש לנקוט באמצעי זהירות כמו עבודה במכסה האדים ולבישת כפפות ניטריל.

techniques-for-investigating-the-anatomy-of-the-ant-visual-system

Research

JoVE Journal

Environment

סביבה

פרימטים שאינם בני אדם היא מין translational חשוב להבנת התפתחות והזדקנות. הארגון האנטומי של הרשתית הפרימטים עשויה לספק תובנות חשובות בתנאים נורמליים ופתולוגיים אצל בני אדם.

השער המוח: בניתוח עיניים הפרימאטים

הכנת פיתוח למבוגרים תסיסנית מוח רשתיות עבור הדמיה חיה

טכניקות להדמית cytoarchitecture רשתית ישירות בסמוך לאלקטרודות בודדות בתוך ממריץ רשתית.

טכניקות לעיני עיבוד השתלה תותבת רשתית לניתוח Histopathological מרוכזות

כאן אנו מראים כיצד לכמת את מספר הפריסה המרחבית של אזורי הפעילות הסינפטית קולטני האור תסיסנית, הדגיש עם סמן מולקולרי מקודדים גנטית, אפנון שלהם לאחר חשיפה ממושכת לאור.

ניתוח Synaptic אפנון של<em&gt; תסיסנית</em&gt; קולטני אור לאחר חשיפה לאור ממושך

אנו מציגים פרוטוקול על התניה קלאסית של נמלים מרוסן, המתיר חוקרים ללמוד צורה למידה וזיכרון חזותיים ברמה של ניתוח לא ניתן לנוע בחופשיות יחידים.

התניה קלאסית חזותי של נמלות עץ

פרוטוקול זה מתאר שלושה שלבים להכנת אונות אופטיות דרוזופילה בוגרות של זחלים ובוגרים להדמיה: 1) דיסקציות מוחיות, 2) אימונוהיסטוכימיה ו-3) הרכבה. דגש מושם על שלב 3, שכן נדרשים כיווני הרכבה ברורים כדי לדמיין מבנים ספציפיים של האונה האופטית.

דיסקציה, אימונוהיסטוכימיה והרכבה של מוחות זחלים ודרוזופילה בוגרים להדמיית האונה האופטית

הפרוטוקול הנוכחי מדגים שיטה פשוטה להתחקות אחר תחזיות גלוטמט אזור טגמנטלי גחוני (VTA) להיפוקמפוס. פוטוטימולציה של נוירונים גלוטמט VTA שולב עם הקלטת CA1 כדי להדגים כיצד מסופי גלוטמט VTA לווסת CA1 קצב ירי פירמידלי putative ב vivo.

מעקב אנטומי ותפקודי משולב של מסופי גלוטמט באזור הגונטם הגחמני בהיפוקמפוס

פרוטוקול זה מתאר את הליך הנתיחה, מצב התרבית וההדמיה החיה של מערכת אקספלנט של אנטנות-מוח לצורך חקר מכלול מעגלי חוש הריח.

מערכת אקספלנט למחקרי הדמיה בהילוך מהיר של מכלול מעגלי חוש הריח בדרוזופילה

הפרוטוקול כאן מתאר את מדידת הארגון המרחבי של הצירים החזותיים של עיני הבית, הממופים על ידי מכשיר אוטומטי, באמצעות תופעת הפסאודו-פופיל ומנגנון האישון של תאי הפוטורצפטור.

תרשימים אוטומטיים של המרחב החזותי של העיניים המורכבות של Housefly

אנו מתארים כאן שיטות להשראת וניתוח שיפוץ תלוי חוויית ריח של גלומרולי סינפטי של אונת אנטנה במוח הצעיר של דרוזופילה .

עיצוב מחדש תלוי ניסיון של נוירון חושי חושי הריח של המוח הצעיר קישוריות סינפטית בתקופה קריטית לחיים מוקדמים

חקור את מערכת הראייה של נמלים באמצעות מיקרוסקופיית אור ואלקטרונים. טכניקות אלו מספקות מידע אנטומי מפורט ומאפשרות הערכת פרמטרים חזותיים כגון רגישות אופטית וחדות ראייה במגוון מינים.

טכניקות חוקר האנטומיה של מערכת הראייה נמלה

גלה סרטונים נוספים