אוטומטיות והרצתי ניתוח אצל עכברים עם פציעה כרונית הכיווץ

ההערכה המדויקת של תגובת כאב במודל בעלי חיים נוירופתי חיוני לחקור הפתופיזיולוגיה של כאב מחלות ולפתח משככי כאבים חדשים. אנו מציגים שיטה אובייקטיבית רגיש כדי לקבוע את תפקוד חושי למכרסמים הינד כף של מערכת ניתוח הילוך אוטומטי.

המטרה הכוללת של הליך זה היא לנתח אלודיניה מכנית של עכברים עם פגיעת התכווצות כרונית באמצעות מערכת ניתוח הליכה אוטומטית. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום חקר הכאב על ידי מדידת תפקוד חושי לאחר פגיעה עצבית היקפית במכרסמים. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שמערכת הניתוח מהירה וקלה לשימוש והיא גם מעניקה אוטומטית פרמטרי הליכה שונים.

לצורך מחקר זה, עכברי ICR זכרים במשקל 20 עד 25 גרם בתנאים סטנדרטיים למשך שבוע אחד לפחות. בחר עכברים על סמך המראה וההתנהגות שלהם. אין להשתמש בעכברים המציגים מראה או התנהגות חריגים כגון נשירת שיער, צלקות ופחות תנועה.

באמצעות העכברים שנבחרו, החל מחמישה ימים לפני הניתוח, אוספים נתוני הליכה אוטומטיים על בסיס יומי כדי לקבל מדידה בסיסית. יום אחד לפני הניתוח בצע את בדיקת פון פריי עם חוט של גרם אחד על כפה אחורית כדי לקבל תגובה בסיסית. איזון התגובות בין קבוצת הפציעות לקבוצת הדמה.

בכל יום מבחן הביאו עכברים לחדר הבדיקות ההתנהגותיות והתאקלמו בכלוב הביתי שלהם לפחות 30 דקות לפני הבדיקה. אחת ליומיים לאחר הניתוח, מדדו אלודיניה מכנית באמצעות מבחן פון פריי. הכניסו את העכבר לקופסת אקריליק שקופה ונקייה על רצפת רשת מתכת ותנו לו להתאקלם בקופסה למשך 30 דקות.

לאחר מכן, יש למרוח בעדינות נימה של פון פריי במשקל גרם אחד על פני השטח של הכף האחורית המקבילה עד שהחוט מתכופף. חזור על דפוס גירוי זה 10 פעמים תוך התבוננות בנסיגת כפות. המתן לפחות 10 שניות בין גירוי.

רשום את מספר המשיכות וציין את תדירותן לניתוח. כל יומיים, בצע גם את מבחן ניתוח ההליכה שיש לבצע בחושך. שוב, התאקלמו העכברים בחדר הבדיקה בכלוב הביתי שלהם למשך 30 דקות לפחות.

כדי להגדיר את מכשיר ניתוח ההליכה, עבור אל בקרת התוכנה. תחת לשונית ההגדרה הגדר את אורך השביל ל-30 סנטימטרים, הגדר את משך הריצה המרבי לחמש שניות והגדר את וריאציית הריצה המקסימלית ל-50%לאחר מכן, בחר מצלמה רשומה מלשונית ההגדרה של תפריט התוכנית ולאחר מכן בחר רכישה פתוחה מלשונית הרכישה. לאחר הודעת המצב, לחץ על לחצן הצמד רקע כדי לצלם תמונת רקע של השביל הריק.

כעת הניחו עכבר על השביל ואפשרו לו להתאקלם למכשיר למשך 10 דקות. יש לשטוף את המכשיר תמיד באלכוהול בין עכברים. לאחר שהעכבר הסתגל למכשיר, לחץ על כפתור התחל רכישה.

ההקלטה מתחילה אוטומטית בהתאם לתנועת העכבר. כאשר העכבר עובר בבירור על פני השביל, התוכנית תסווג אוטומטית את הריצות התואמות עם סמל ירוק. אם התוכנה לא מצליחה לזהות את טביעות הרגליים, יידלק סמל אדום.

לאחר איסוף לפחות חמש ריצות תואמות, בחר באפשרות סיווג הפעלות מהכרטיסייה רכישה בתפריט התוכנית. בחר איזו ריצה יש לנתח ולחץ על כפתור הסיווג האוטומטי. התוצאות נשמרות אוטומטית.

לצפייה בתוצאות לחץ על הצג סטטיסטיקות הפעלה מתפריט הניתוח. מבחן פון פריי וניתוח הליכה אוטומטי שימשו להערכת עכברים שעברו את ניתוח CCI 10 ימים רצופים לאחר הניתוח. תדירות נסיגת הכפות עלתה יומיים לאחר הניתוח ונמשכה 10 ימים.

ניתן להפחית השפעה זו באופן משמעותי על ידי זריקות יומיות של גבאפנטין לאחר הניתוח. באמצעות תוכנת ניתוח ההליכה ניתן להשוות את גודל טביעות הכפות האחוריות השמאלית והימנית. בדרך כלל האזורים זהים, מה שמסומן על ידי ערך של 50%.

לניתוח CCI הייתה השפעה משמעותית על טביעת כפות הרגליים וניתן היה להפחית את ההשפעה הזו באופן משמעותי באמצעות גבאפנטין. תוכנת ניתוח ההליכה מסוגלת גם לקלוט את השינוי של משכי עמידה בודדים כאשר העכבר נושא משקל על כפה אחורית אחת בלבד. זה מחושב ומוצג כאחוז שינוי.

מדד זה מראה את אותה השפעה עבור ניתוח CCI וטיפולי גבאפנטין. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד להפעיל ולנתח מערכות ניתוח הליכה אוטומטיות כדי לחקור את הפתופיזיולוגיה של כאב נוירופתי במודלים של בעלי חיים כמו פגיעה כרונית בהתכווצות.