Name: בדיקות בבעלי חיים חרדה אצל חולדות: ההשפעות של אדני היד פתוחה סגורה זרוע קיר שקיפות מוגבר בתוספת מבחן מבוך (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-29T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 54 s
Description: חקור מדידת חרדה בעכברושים באמצעות מבוך פלוס מורם. למד כיצד תכונות המתקן משפיעות על רגישות גילוי השפעות תרופות אנקסיוליטיות ועל אמינות הנתונים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים רוצים להודות מר Akihiro הירנו לסיוע שלו בהפקת המנגנון מותאם אישית. המחברים רוצה להודות קוסוקה מר טקהאשי, מר שינגו נקאג'ימה לסיוע טכני שלהם. עבודה זו נתמכה על ידי מחקר על הסיכון של חומרים כימיים, בריאות, מענקי מחקר מדעי מעבדה, משרד הבריאות, עבודה, רווחה, יפן (H25-KAGAKU-IPPANN-003) גרנט פרוייקט מחקר A על ידי מכון למדע, טכנולוגיה מייג'י אוניברסיטת, יפן.

כל ההליכים ניסיוני המתוארים כאן אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ו ועדת שימוש של מאיג'י האוניברסיטה (IACUC 14-0002(1)). בהמות המשמשות את התוצאות נציג הוכנו כדלקמן: חולדות זכרים ספראג-Dawley היו שנרכשו מחברה חיות מעבדה, שוכנו קבוצות של בעלי חיים 4 לכל כלוב עכבר סטנדרטי (W200 × D410 × H250 מ"מ) למשך לפחות שבוע לפני תחילת בניסוי התנהגותי. בחדר דיור בעלי חיים היה ומתוחזק על הסביבה תנאים סטנדרטיים של אור (12:12 לוח הזמנים/כהה עם האורות בשעה 10:00 h), בטמפרטורת החדר (25.0 ± 0.5 ° C), לחות (55 10 ± %), אוורור (פי 10 קמ), והיו בעלי גישה ad libitum מזון ( אוריינטל שמרים ושות' בע מ, טוקיו, יפן) ומים. החיות הוחזקו בתוך כלוב עכבר סטנדרטי (W410 x D250 x H200 מ מ, Toyoriko ושות', בע מ, איצ'י, יפן) עם נייר מצעים (אלפא-dri, LSG Corporatin, טוקיו, יפן).
1. גבוהות וגם מבחן מבוך
<ol><li>להגדיר את הפלוס מוגברות מבוך המנגנון במיכל מותאם אישית (W1, × 500 D1, × 500 H2, 000 מ מ) (איור 1 א') עם מסגרת מתכת בצורת פלוס 500 מ מ מעל הרצפה כדי לתמוך לברוח דרך הזרועות (איור 1B), תאורה בתקרה מיכל כדי להאיר את פני השטח של המבוך עוצמת האור הנדרשת (איור 1C), מצלמת וידאו דיגיטלית בתקרה במרכז כדי לאפשר ניטור וידאו בשידור חי של הבדיקות התנהגותית (איור 1C).</li>
	<li>לתקן את הזרועות (L500 x W100 מ מ) על המסגרת בצורת פלוס ולאחר מכן לתקן את הפלטפורמה הכיכר המרכזית (W100 x D100 מ מ) במרכז ארבע הזרועות (איור 1D -F). הערה: במעבדה שלנו, יש לנו שני סוגים של זרועות פתוחות (L500 x W100 מ מ) שני סוגי הזרועות סגור (L500 x מ מ W100 x H450) (איור 1D). הזרועות סגור יש קירות שקופים או אטומים (איור 1D), ועוצבו בזרועות פתוחות עם או בלי מדף קצר (ממ H5, איור 1E). פלטפורמת הכיכר המרכזית (W100 × D100 מ"מ) ממוקם במרכז של ארבע הזרועות (איור 1D -F). לפיכך, ניתן להכין את ארבעת השילובים הבאים של נשק על-פי ניסיוני מטרה: לפתוח זרועות עם מדפים + ידיים סגורות עם קירות שקופים (מדפים/שקוף), ידיים פתוחות עם מדפים + ידיים סגורות עם קירות אטומים (מדפים/אטום), בזרועות פתוחות ללא מדפים + סגורה עם קירות שקופים (לא-מדפים/שקוף), והידיים זרועות פתוחות ללא מדפים + ידיים סגורות עם אטום קירות (לא-מדפים/אטום). פני השטח של המסלול הזרוע הוא שחור, כדי לאפשר יותר חיה מעקב על ידי תוכנת ניתוח התנהגות אוטומטית, כמפורט בסעיף 2, ניתוח התנהגותי.</li>
	<li>להתאים את עוצמת התאורה על פני השטח של החלק הדיסטלי של כל זרוע, פלטפורמה מרכזית ללאקס כ-100.</li>
	<li>לפני כל בדיקה, לנקות את כל המתקן עם 70% אתנול פתרון, לנגב עם מים מזוקקים.</li>
	<li>לחץ על "לחצן הרשומה" בחלילית בדיסק הקשיח כדי להפעיל את מצלמת הווידאו הדיגיטלית אשר יתעד את ההתנהגות של החולדה עבור הווידאו הדמיה ניתוח המתוארים בסעיף 2, ניתוח התנהגותי.</li>
	<li>במקום חיה על הבמה המרכזית מול זרוע פתוחים ומאפשרים גלישה חופשית על המנגנון במשך 5 דקות.</li>
	<li>לחץ על "לחצן עצור" בחלילית בדיסק הקשיח כדי לסיים את ההקלטה.</li>
	<li>לספור את כמות צואה, urinations לאחר שחזר החיה נבדק בחדר דיור בעלי חיים.</li>
	<li>חזור מ שלב 1.4 עד סוף הניסוי. הערה: מבחן יבש תמיד מבוצע לפני התחלת ניסוי כדי לבדוק כי כל ההגדרות ניסיוני כראוי מוגדרים לפני כל חיות ניסוי חשופים לתנאי הניסוי. אחרת, בעלי חיים, במיוחד את החיה הראשונה עלולים לחוות תנאים סביבתיים שונים (למשל, רעשים ואולי המושרה על ידי הנסיין במהלך רמזים מניפולציה ו/או בעלי חיים אולי השאיר על-ידי החיה שנבדקו בעבר). הערה: ניסויים בעת ליד המכולה נבדק. חיה. לפיכך, אף-על-פי ניסויים אינם גלויים העכברוש עדיין ייתכן מסוגל להרגיש אותם באמצעות ריח ו/או קול.</li>
</ol>2. ניתוח התנהגותי
הערה: חקר ההתנהגות מבוצעת באמצעות התבוננות ידנית, אוטומטית ניתוח תוכנה.
<ol><li>
תצפית ידנית
	<ol>
<li>אחרי החיה מושם על המדף, לבחון את הדברים הבאים: מספר ערכים (ערך על זרוע מוגדר כמופע כלשהו כאשר כל 4 כפות רגליים על הזרוע), הזמן המושקע כל זרוע ולאחר מספר השתתפות נמתח תנוחות מול זרוע פתוח , בזמן הוויתור הרציף המרכזי לעבר יד סגורה.</li>
		<li>למדוד המשך והתדירות של ההתנהגויות שהוגדרו לעיל על-ידי סטופר וספירה עבור 5 דקות, החל כאשר הדלתות של המיכל סגורות.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
ניתוח אוטומטיות
	<ol>
<li>באמצעות התוכנה זמינה, להקליט את הדברים הבאים: מרחק למולדתי, זמן עמדות שונות בילה על זרועות פתוחות (proximal, האמצעי, דיסטלי וקטעים מן הרציף המרכזי) ולאחר ניתוח דקות-לפי-דקה מהזמן המושקע פתח וסגר . זרועות</li>
		<li>לחץ על "לחצן התחל" של תוכנת ניתוח אוטומטיות באותו זמן כמו התצפית ידנית מתחיל (ההקלטה תיפסק באופן אוטומטי אם הקלטת משך זמן מוגדר). הערה: התוכנה ניתוח התנהגותי השתמשו במחקר זה עוקב אחר החיה באמצעות הניגוד שלה עם רקע השדה; החיה, אשר מוקצה גודל קבוע, מזוהה כמו של האובייקט בהיר והוא ומכניקה של נקודת המרכז שלה ובכך ניתן להשתמש לצורך מעקב בעלי חיים.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Nestler, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+Brain%27s+Reward+Circuitry+in+Depression%3A+Transcriptional+Mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Rev+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Role of the Brain's Reward Circuitry in Depression: Transcriptional Mechanisms.</a> Int Rev Neurobiol. 124, 151-170 (2015).</li>
<li>Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+mouse+behavior%3A+interactions+with+laboratory+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Genetics of mouse behavior: interactions with laboratory environment.</a> Science. 284 (5420), 1670-1672 (1999).</li>
<li>Handley, S. L., Mithani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+alpha-adrenoceptor+agonists+and+antagonists+in+a+maze-exploration+model+of+%27fear%27-motivated+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Naunyn+Schmiedebergs+Arch+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Effects of alpha-adrenoceptor agonists and antagonists in a maze-exploration model of 'fear'-motivated behaviour.</a> Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 327 (1), 1-5 (1984).</li>
<li>Pellow, S., Chopin, P., File, S. E., Briley, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+open%3Aclosed+arm+entries+in+an+elevated+plus-maze+as+a+measure+of+anxiety+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Validation of open:closed arm entries in an elevated plus-maze as a measure of anxiety in the rat.</a> J Neurosci Methods. 14 (3), 149-167 (1985).</li>
<li>Violle, N., Balandras, F., Le Roux, Y., Desor, D., Schroeder, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variations+in+illumination%2C+closed+wall+transparency+and%2For+extramaze+space+influence+both+baseline+anxiety+and+response+to+diazepam+in+the+rat+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Variations in illumination, closed wall transparency and/or extramaze space influence both baseline anxiety and response to diazepam in the rat elevated plus-maze.</a> Behav Brain Res. 203 (1), 35-42 (2009).</li>
<li>Hogg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+the+validity+and+variability+of+the+elevated+plus-maze+as+an+animal+model+of+anxiety%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">A review of the validity and variability of the elevated plus-maze as an animal model of anxiety.</a> Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 21-30 (1996).</li>
<li>Martinez, J. C., Cardenas, F., Lamprea, M., Morato, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+vision+and+proprioception+in+the+aversion+of+rats+to+the+open+arms+of+an+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Processes%22%5BJournal%5D)">The role of vision and proprioception in the aversion of rats to the open arms of an elevated plus-maze.</a> Behav Processes. 60 (1), 15-26 (2002).</li>
<li>Anseloni, V. Z., Brandao, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethopharmacological+analysis+of+behaviour+of+rats+using+variations+of+the+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Ethopharmacological analysis of behaviour of rats using variations of the elevated plus-maze.</a> Behav Pharmacol. 8 (6-7), 533-540 (1997).</li>
<li>Anseloni, V. Z., Motta, V., Lima, G., Brandao, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+pharmacological+validation+of+the+elevated+plus+maze+constructed+with+transparent+walls%5BTitle%5D)+AND+%22Braz+J+Med+Biol+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral and pharmacological validation of the elevated plus maze constructed with transparent walls.</a> Braz J Med Biol Res. 28 (5), 597-601 (1995).</li>
<li>Hagenbuch, N., Feldon, J., Yee, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+elevated+plus-maze+test+with+opaque+or+transparent+walls+in+the+detection+of+mouse+strain+differences+and+the+anxiolytic+effects+of+diazepam%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Use of the elevated plus-maze test with opaque or transparent walls in the detection of mouse strain differences and the anxiolytic effects of diazepam.</a> Behav Pharmacol. 17 (1), 31-41 (2006).</li>
<li>Fernandes, C., File, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+open+arm+ledges+and+maze+experience+in+the+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">The influence of open arm ledges and maze experience in the elevated plus-maze.</a> Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 31-40 (1996).</li>
<li>Horii, Y., Kawaguchi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Higher+detection+sensitivity+of+anxiolytic+effects+of+diazepam+by+ledge-free+open+arm+with+opaque+walled+closed+arm+elevated+plus+maze+in+male+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Higher detection sensitivity of anxiolytic effects of diazepam by ledge-free open arm with opaque walled closed arm elevated plus maze in male rats.</a> Behav Brain Res. 294, 131-140 (2015).</li>
<li>Santos, R. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+effect+of+acute+sibutramine+in+female+rats+in+the+elevated+T-maze+and+elevated+plus-maze+tests%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Clin+Pharmacol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the effect of acute sibutramine in female rats in the elevated T-maze and elevated plus-maze tests.</a> Basic Clin Pharmacol Toxicol. 114 (2), 181-187 (2014).</li>
<li>Lynn, D. A., Brown, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ontogeny+of+anxiety-like+behavior+in+rats+from+adolescence+to+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">The ontogeny of anxiety-like behavior in rats from adolescence to adulthood.</a> Dev Psychobiol. 52 (8), 731-739 (2010).</li>
<li>Horii, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+Hatano+high-avoidance+rats+show+high+avoidance+and+high+anxiety-like+behaviors+as+compared+with+male+low-avoidance+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Anim%22%5BJournal%5D)">Male Hatano high-avoidance rats show high avoidance and high anxiety-like behaviors as compared with male low-avoidance rats.</a> Exp Anim. 61 (5), 517-524 (2012).</li>
<li>Walf, A. A., Frye, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+the+elevated+plus+maze+as+an+assay+of+anxiety-related+behavior+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents.</a> Nat Protoc. 2 (2), 322-328 (2007).</li>
<li>Yang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+pharmacological+investigation+of+anxiety+and+maternal+responsiveness+of+postpartum+female+rats+in+a+pup+elevated+plus+maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral and pharmacological investigation of anxiety and maternal responsiveness of postpartum female rats in a pup elevated plus maze.</a> Behav Brain Res. 292, 414-427 (2015).</li>
<li>Albani, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavior+in+the+elevated+plus+maze+is+differentially+affected+by+testing+conditions+in+rats+under+and+over+three+weeks+of+age%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Behavior in the elevated plus maze is differentially affected by testing conditions in rats under and over three weeks of age.</a> Front Behav Neurosci. 9, 31(2015).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

מספר החולים הסובלים הפרעות פסיכיאטריות, כולל הפרעת חרדה, גודלת, חשוב לפתח לימודים חדשנית לשיפור ההבנה של המנגנון הבסיסי של חרדה. כדי להשיג זאת, חשוב גם לייעל את ההליכים ניסיוני. לכן, כדי לשפר את היישום של גבוה בתוספת מבחן מבוך, הראו את השפעת תכונות הזרוע על תוצאות הניסוי באמצעות חולדות.
גבוהות בתוספת מבוך הוקמה במקור כדי חרדת חיות מכרסמים4, אבל למרות המבנים הבסיסיים הם בדרך כלל עקבית (למשל, גבוהות 500 מ מ מעל הרצפה בצורת פלוס), זרוע עיצובים שונים משמשים לעתים ק...

מספר החולים הסובלים הפרעות במצב הרוח, כולל הפרעת חרדה ודיכאון, גוברת. למרות ההתפתחות של הפרעות אלה כרוכה גורמים גנטיים וסביבתיים, המנגנונים פתוגניים מפורט עדיין אינם מובנים במלואם1. לפיכך, המחקר צריך להתמקד לחשוף את המנגנונים המשמשת כבסיס של הפרעות במצב הרוח, כמו גם הפיתוח של תרופות יעילות יש פחות תופעות לוואי.
מבחנים התנהגותיים על חיות מעבדה שימושיים על חקירת תפקוד גבוה יותר המוח, כולל רגש. כמו התנהגות בעלי חיים זה משתנה מאוד, ניסיוני תוצאות קרובות שונות בין מעבדות, אפילו אם זן המפגרים זהה היה בשימוש2. לכן, החוקרים גם צריכים להבין את התכונות הבסיסיות של המכשירים ניסיוני שהם מאמצים על מנת לספק תוצאות אמין, מדויק במעבדה.
גבוהות בתוספת מבחן מבוך הוקמה במקור לבחון תגובתיות רגשית מכרסמים3,4. כל המתקן ממוקם בדרך כלל 500 מ מ מעל הרצפה, מורכב שתיים פקוחות שתי זרועות סגור שהופכים לצורת בתוספת. מדידות של חקר הזרוע (כולל המשך והתדירות של ערכים על כל זרוע), מרחק למולדתי, והתנהגויות שצוין כגון השתתפות שרוע בתנוחה של חיות וכפופים נרשמים בתקופות תצפיתית. על ידי אמצעים אלה, חרדה חיה מוערך כפועל ניסיוני.
גבוהות בתוספת מבחן מבוך משמש ברחבי העולם, אבל לא כל המעבדות להשתמש באותו מכשיר עיצוב5,6, הבדלים אלה עשויים להשפיע על התוצאות ניסיוני. כך למשל, ההבדלים כוללים נוכחות או היעדרות של מדפים לאורך הזרועות פתוח ו/או השימוש של קירות שקופים או אטומים עבור זרועות סגור5,6. מדפי לאורך בזרועות פתוחות, השימוש של קירות שקופים עבור זרועות סגור פותחו כדי למנוע חיות ליפול את המנגנון7, וכדי להקל על תצפיות התנהגותיות בתוך הזרועות סגור, בהתאמה8,9. אמנם היו כמה מחקרים שבדקו הבדלים אינדיבידואליים איך של מבנה היד עשוי להשפיע על היכולת לזהות חרדה בבעלי חיים1,2,5,10,11 , ההשפעות המשולבות של פתח (עם/בלי מדף קצר) ותכונות היד סגורה (קירות שקוף/אטום) על התנהגות בעלי חיים עדיין לא נחקרו.
בדו ח זה התבצעה, דיברנו על ההשפעה של אלה שילובים של הזרוע עיצובים על התנהגות חרדה חולדות12- בקצרה, אדני היד פתוחה גדל באופן משמעותי התנהגות חרדה בחולדות, ואילו הזרועות שקוף עשוי גם להיות ירידה התנהגות זו. יתר על כן, נוכל לאמת רגישות גבוהה יותר לזיהוי של השפעת סם נוגד חרדה בשילוב של היד פתוחה לא-ledged + אטום היד סגורה המוקפת חומה בהשוואה עם שילוב של היד פתוחה ledged + שקוף היד סגורה המוקפת חומה. בדו ח זה, אנחנו להציג את הפרוטוקול שלנו עבור גבוהות פלוס מבוך מבחן, יחד עם הדיון התוצאות מפתח של הדוח הקודם. אנו מאמינים שבדו ח זה יספק מידע שימושי עבור אלה אשר המועסקים או מי מתכנן להשתמש גבוהות של פלוס מבוך בלימודיהם.

<table><tbody><tr><td>מיכל מותאם אישית (W1500 ופעמים; D1500 ופעמים; H2000 מ"מ)</td> <td>NA</td><td></td><td>NA בעבודת יד על ידי מר Akihiro Hirano</td></tr><tr><td>תאורה</td><td>NA</td><td>NA</td><td>בעבודת יד על ידי מר Akihiro Hirano</td></tr><tr><td>מכשיר מבוך מוגבה בתוספת NA</td><td></td><td>NA</td><td>עבודת יד על ידי מר Akihiro Hirano</td></tr><tr><td>מצלמת וידאו דיגיטלית</td><td>Watec</td><td>WAT-250D2</td><td>ניתן לחבר כל מצלמת וידאו מתאימה למקליט דיסק קשיח להקלטת פרופילי מעקב.</td></tr><tr><td>מקליט דיסק קשיח</td><td>TOSHIBA</td><td>RD-R200</td><td>ניתן לחבר כל מקליט דיסק קשיח מתאים למצלמת הווידיאו הדיגיטלית.</td></tr><tr><td>Sprague-Dawley חולדות מעבדות</td><td>צ'ארלס ריבר יפן, בע"מ</td><td>NA</td><td>כל חולדה מתאימה יכולה לשמש למחקר שלך</td></tr><tr><td>כלוב עכברושים סטנדרטי</td><td>Toyoriko</td><td>TP-105</td><td>כל כלוב חולדות מתאים ישמש למחקר שלך</td></tr><tr><td>מכשיר למדידת עוצמת האור</td><td>AS ONE</td><td>1-5818-02</td><td>כל מכשיר מתאים למדידת עוצמת האור</td></tr><tr><td>EthoVision XT גרסה 8.0</td><td>Noldus</td><td>NA</td><td>כל תוכנה מתאימה למדידת התנהגות בעלי חיים</td></tr><tr><td>Diazepam</td><td>תעשיית התרופות Taiyo</td><td>1124402A2061</td><td>ניתן להשתמש בכל תרופה מתאימה למחקר שלך</td></tr><tr><td>Tween 80</td><td>Wako Pure Chemical Industries</td><td>9005-65-6</td><td>ניתן להשתמש בכל תרופה מתאימה למחקר שלך</td></tr></tbody></table>

בדיקות בבעלי חיים חרדה אצל חולדות: ההשפעות של אדני היד פתוחה סגורה זרוע קיר שקיפות מוגבר בתוספת מבחן מבוך

Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test

גבוהות בתוספת מבחן מבוך הוא מבחן התנהגותיות להערכת חרדה בבעלי חיים בחולדות. אף על פי מבחן זה מוחל נרחב בתחום מדעי ההתנהגות, תוצאות סותרות ניתנים לעיתים קרובות בין מעבדות שונות. כדי לזהות את הסיבות תוצאות שונות, בעבר התמקדנו הזרוע תכונות, המשתנות בין מעבדות, רוב ובמיוחד הנוכחות/בהעדר מדפים צדי זרועות פתוחות, השקיפות/opaqueness של היד סגורה קירות. בדוח הקודם, אנחנו להשתמש מיכל מעוצב מותאם אישית כדי להשוות התנהגות חולדה על שילובים שונים של הזרוע פתוחים וסגורים עיצובים בתנאים זהים אחרת ניסיוני, והראה כי הבדלים בתכונות הזרוע להפריע ניסיוני תוצאות. בקצרה, אדני היד פתוחה גדל באופן משמעותי התנהגות חרדה בחולדות, ואילו הזרועות שקוף עשוי גם להיות ירידה התנהגות זו. יתר על כן, נוכל לאמת את רגישות זיהוי גבוהה יותר של השפעת סם נוגד חרדה בשילוב של היד פתוחה לא-ledged + אטום היד סגורה המוקפת חומה בהשוואה עם שילוב של היד פתוחה ledged + שקוף היד סגורה המוקפת חומה. בדו ח זה, אנו מציגים שלנו פרוטוקול גבוהות פלוס מבחן מבוך, יחד עם הדיון תוצאות מפתח הדוח הקודם וניסיון ניסיוני שלנו. אנו מאמינים שבדו ח זה יספק מידע שימושי עבור חוקרים מי המועסקים או מי מתכנן להשתמש גבוהות של פלוס מבוך בלימודיהם.

במחקר הקודם, השווינו ההשפעות המשולבות של אדני היד פתוח ושקיפות של קירות היד סגורה על ההתנהגויות גישוש ב מבוך12. חולדות בילה באופן משמעותי פחות זמן על זרועות פתוחות ללא מדפים מאשר על זרועות פתוחות עם מדפים (F [1, 60] = 13.49, P = 0.0005) (איור 2 א). תוצאות דומות נמצאו גם עבור מספר ערכים לתוך זרועות פתוחות (F [1, 60] = 11.17, P &lt; 0.0014)12, רומז כי הנוכחות של מדפים מגביר התנהגות גישוש חולדה על...

התנהגות חרדה של חולדות שנבדקו על-ידי גבוהות בנוסף מבוך משתנה מאוד בהתאם סביבת הבדיקות. הנה אנחנו מראים כיצד הגדרות מכשיר, במיוחד במבנה היד, משפיעות על התנהגות על המבוך, ולהסביר לנו פרוטוקול אמין כדי לזהות השפעות הסמים נוגד חרדה. דו ח זה יתרום למחקר חרדה.

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral ...

המטרה הכוללת של ניסוי זה היא למדוד חרדה בחולדות, באמצעות מבוך פלוס מוגבה מתאים. הממצא העיקרי של מחקר זה הוא שרגישות הזיהוי של אפקט התרופה החרדה יכולה להשתנות בהתאם לתכונות של מנגנון המבוך הצולב המוגבה. מחקר זה יכול לסייע לחוקרים להקים את מנגנון המבוך במעבדה, המתאים למטרת הניסוי שלהם, ולהבטיח רישום נהדר של נתונים.מי שידגים את ההליך יהיה חוקר אורח מהמעבדה שלי. כדי להתחיל הגדר את מנגנון המבוך המוגבה פלוס במיכל ארון מותאם אישית. יש להגביה את מסגרת המתכת בצורת פלוס של המבוך כחצי מטר מהרצפה.שמור על בהירות עקבית לאורך כל המבוך בעוצמה הנדרשת. בנקודת המרכז העליונה התקן מצלמת וידאו דיגיטלית כדי להקליט ולנטר את הבדיקות. כעת קבע את זרועות המבוך על המסגרת.ישנם שני סוגים של זרועות פתוחות, עם או בלי מדפים של 5 מ"מ לאורך הצדדים. ישנם גם שני סוגים של זרועות סגורות. הקירות יכולים להיות שקופים או אטומים.חבר את הפלטפורמה המרכזית המרובעת בין הזרועות. הפלטפורמה המרכזית ומשטחי המסלול של זרוע המבוך צבועים בשחור למעקב טוב יותר אחר בעלי חיים על ידי ניתוח התנהגותי אוטומטי. כעת עם זרועות במקום התאם את עוצמת התאורה, כך שיש כ-100 לוקס על פני החלק הקצה הדיסטלי של כל זרוע, ובפלטפורמה המרכזית.לפני כל בדיקה יש לנקות את כל המכשיר בתמיסת אתנול 70%, ולאחר מכן לנגב אותו במים מזוקקים. לחץ על כפתור ההקלטה במקליט הדיסק הקשיח, כדי להתחיל לאסוף תמונות ממצלמת הווידיאו הדיגיטלית. אם הציוד פועל, בצע את הבדיקה.התחל את הבדיקה על ידי הנחת החולדה על הרציף המרכזי, כך שהיא פונה לזרוע פתוחה, וסגור את דלתות הארון. לאחר מכן אפשר חקירה חופשית על המכשיר למשך חמש דקות. תוצאת הניסוי עשויה להשתנות, תלוי אם החולדה מוערכת מול זרוע פתוחה או שלובה.עדיף תמיד להניח חולדות, מונחות על זרוע פתוחה כדי למנוע הקפאה, בכניסה הראשונה לזרוע הסגורה. לאחר חמש דקות, הפסק את ההקלטה כדי לסיים את הבדיקה. לאחר מכן החזירו את החולדה לכלוב שלה, וספרו את מספר הצואה והשתנה במבוך לפני שתנקו אותה.בצע תמיד את הניתוח ההתנהגותי הן באמצעות תצפית ידנית והן באמצעות תוכנת ניתוח אוטומטית. מהסרטון רשום ידנית את מספר הכניסות שהחולדה מבצעת לזרועות המבוך. ערך מוגדר ככל מופע שבו כל ארבע הכפות נמצאות על הזרוע.רשום גם את הזמן המושקע בכל זרוע, ואת מספר תנוחות ההשתתפות המתוחות שנעשו בזמן שהחולדה נמצאת על המשטח המרכזי הפונה לכיוון זרוע פתוחה, ונשענת לאחור לזרוע סגורה. בצע מדידות אלה באמצעות שעון עצר ומונה במהלך הבדיקה של חמש הדקות. כדי לבצע ניתוח אוטומטי, פתח את הקלטת הווידאו בתוכנה מסחרית.התוכנה עוקבת אחר החיה במבוך, תוך שימוש בניגוד בין החיה לרצפה החשוכה. תחילה הקצה את החיה לכתם ניגודיות בגודל מסוים ולאחר מכן הקצה את מרכז הכתם כנקודת המעקב. לאחר מכן, במבחן של חמש דקות מלאות, בקשו מהתוכנה לרשום את המרחק שעברה, את הזמן שהושקע בתנוחות שונות בזרועות פתוחות, ואת הזמן הכולל שהושקע בזרועות פתוחות וסגורות.לפעמים הניתוח האוטומטי אינו יכול להבחין בין כניסות לאי-כניסות לזרועות. לכן, אנו ממליצים לבצע תמיד תצפית ידנית בנוסף לניתוח אוטומטי. התוצאות של התנהגות חקר חולדות במבוך פלוס מוגבה עם עיצובים שונים של זרועות פתוחות וסגורות, מראות כי חולדות מבלות יותר זמן בזרועות פתוחות עם מדפים, מאשר בזרועות פתוחות ללא מדפים.הם גם ביצעו יותר כניסות לזרועות אלה, ולכן סביר להניח שהמדפים מגבירים את התנהגות החקר בזרועות פתוחות. חולדות הראו באופן משמעותי פחות יציבה מתוחה על זרועות סגורות עם קירות שקופים, מאשר על זרועות סגורות עם קירות אטומים. מה שמרמז על כך שקירות זרועות סגורים שקופים הפחיתו התנהגות דמוית חרדה.חולדות גם בילו זמן רב יותר על החלקים הדיסטליים של הזרועות הפתוחות כאשר לזרועות הסגורות היו קירות שקופים, מאשר כאשר לזרועות הסגורות היו קירות אטומים. יתר על כן, חקר זרוע פתוחה דיסטלית היה נמוך משמעותית במבוכים ללא מדפים ושילובי זרועות אטומים, מאשר במדפים ובשילובי זרועות שקופות. לכן רגישות הזיהוי עשויה להשתנות, בהתאם לשילוב של עיצובי הזרועות בהם נעשה שימוש.כדי לאמת את ההבדלים ברגישות הזיהוי בין סוגים שונים של עיצוב זרועות, בוצע ניסוי נוסף באמצעות התרופה נוגדת החרדה Diazepam. בקצרה, ההשפעה של טיפול בדיאזפאם במינון גבוה התגלתה במנגנון הקיר האטום ללא מדפים, אך לא במנגנון הקיר השקוף עם מדפים. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור לטפל בכל בעלי החיים באותם תנאי ניסוי, ולוודא שכל בעלי החיים ממוקמים מול אותה זרוע פתוחה או סגורה בתחילת כל בדיקה.לאחר צפייה בסרטון זה, עליכם להבין כיצד להקים את מנגנון המבוך הצולב המוגבה. חשוב לזכור שתוצאות הניסוי יכולות להשתנות בהתאם לעיצוב הזרוע. לכן אנו ממליצים להשתמש בזרועות מתאימות למטרות הניסוי שלך.

testing-animal-anxiety-rats-effects-open-arm-ledges-closed-arm-wall

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

המבחן גבוהות מבוך פלוס הוא אחד המבחנים הנפוצים ביותר למדידת חרדה כמו התנהגות בעכברים. כאן, אנו מציגים סרט המראה את הליכי מפורט לביצוע הבדיקה.

מבוך פלוס גבוהות עבור עכברים

צעדי פלוס מבוך חרדה כמו התנהגות במכרסמים. ישנם שני ההפך סגור ושתי זרועות פתוחות מנוגדות; מכרסמים חרדה למנוע את זרועות הפתוחות. האזור המרכזי הוא לא לגמרי פתוח ולא סגור, כך שהזמן שבילה כאן הוא דו משמעי וקשה לפרש. כאן שינוי של הפרוטוקול בתוספת-מבוך ביטול תחום זה מתואר.

מבחן הסמטאות הרצוף של חרדה בעכברים וחולדות

ליקוי קוגניטיבי הנובע מטיפול רדיותרפי בגידולי מוח מהווה מצב קליני שקשה לטיפול, המשפיע לרעה על איכות החיים. היכולת להעריך באופן ביקורתי התערבויות פוטנציאליות לשיפור פגיעות קוגניטיביות הנגרמות מקרינה תלויה בסופו של דבר ביכולת לבצע הערכות כמותיות קפדניות של התפקוד הקוגניטיבי.

כימות decrements קוגניטיבי נגרמת על ידי הקרנות גולגולתי

מבוך בארנס היבשתי נעשה שימוש נרחב כדי למדוד את יכולת ניווט המרחבי לגירויים המעטה מרתיעים תגובה. במשך ימים רצופים, ביצועים (למשל השהיה לאתר כלוב בריחה) של נבדקי ביקורת משתפרת, מעיד על למידה וזיכרון רגילים. הבדלים בין חולדות ועכברים מחייבים שינויי מנגנון ומתודולוגיה המפורטים כאן.

בארנס מבוך אסטרטגיות בדיקה עם קטן ומודלים מכרסמים גדולים

פרוטוקול מסופק לשימוש במבוך שדה פתוח כדי לגשת לפעילות תנועתית כללית, חרדה ורגשות במודל של עכבר מעבדה.

שימוש בשדה הפתוח המבוך כדי למדוד התנהגות כמו חרדה של תנועה ובעכברים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לחקור שינויים ברמת החרדה של מודלים בעלי חיים מכרסם. מוגברות וגם מבוך במבחן (EPM), המשמש יחד עם וידאו מעקב תוכנה, מספק שיטה אמינה לתעד את ההשפעה של טיפולים שונים נוגד חרדה פוטנציאליים בתרחישים מעבדה פרה.

גבוהות בתוספת מבוך מבחן משולב עם וידאו מעקב תוכנה כדי לחקור את האפקט נוגד חרדה של תוספי תזונה קטוגנית אקסוגני

עם מניפולציה אופטוגנטית של אוכלוסיות עצביות ספציפיות או אזורים במוח, התנהגות ניתן לשנות עם רזולוציה זמנית ומרחבית גבוהה בבעלי חיים נעים בחופשיות. באמצעות כלים אופטוגנטיים שונים בשילוב עם סיבים אופטיים מושתלים כרונית, ניתן לבצע מגוון של אפנון עצבי ובדיקות התנהגותיות.

מניפולציה אופטוגנטית של פעילות עצבית לווסת את ההתנהגות בעכברים נעים בחופשיות

מוצג כאן מודל עכברי חרדה המושרה על ידי בידוד חברתי (SI) המשתמש בעכברי C56BL/6J מסוג פראי כדי לגרום ללחץ והתנהגות דמוית חרדה עם טיפול מינימלי וללא הליכים פולשניים. מודל זה משקף דפוסי חיים מודרניים של בידוד חברתי והוא אידיאלי לחקר חרדה והפרעות נלוות.

מודל בידוד חברתי: מודל מכרסם לא פולשני של מתח וחרדה

כתב יד זה מציג סדרה של מבחנים התנהגותיים הניתנים לשחזור כדי לאמת מודל עכבר של תסמונת אנג'למן.

אפיון התנהגותי של מודל עכבר תסמונת אנג'למן

פרוטוקול זה מתאר מודל לחץ קל כרוני בלתי צפוי (CUMS) לדיכאון המבוסס על תיאוריה רפואית מונגולית, יחד עם שיטות לאימות מבחנים התנהגותיים.

לחץ כרוני בלתי צפוי קל בחולדות מבוסס על התרופה המונגולית

חקור מדידת חרדה בעכברושים באמצעות מבוך פלוס מורם. למד כיצד תכונות המתקן משפיעות על רגישות גילוי השפעות תרופות אנקסיוליטיות ועל אמינות הנתונים.

בדיקות בבעלי חיים חרדה אצל חולדות: ההשפעות של אדני היד פתוחה סגורה זרוע קיר שקיפות מוגבר בתוספת מבחן מבוך

גלה סרטונים נוספים