Name: אלקטרופורזה דו-ממדית בגל בשילוב עם שיטות ספקטרומטר מסה על ניתוח של רקמת גידול בבלוטת יותרת המוח האנושי פרוטאום (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-02T13:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 34 s
Description: למד אלקטרופורזה דו-ממדית בשילוב ספקטרומטר מסה לניתוח פרוטאום של גידולים בבלוטת יותרת המוח האנושית. שיטה זו מאפשרת זיהוי חלבונים בנפח נמוך ומספקת תובנות לביולוגיה של הגידול.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדע הטבע של סין (מענק מס ' 81572278 ו- 81272798 כדי XZ), המענקים של סין "863" תוכנית הפרוייקט (מענק מס ' 2014AA020610-1 כדי XZ), את הכספים בבית החולים Xiangya עבור הכישרון מבוא (XZ) של הונאן קרן מחוזי מדעי הטבע של סין (מענק מס 14JJ7008 כדי XZ). המחברים גם להכיר את התרומה המדעית של ד ר דומיניק מ Desiderio ב המרכז למדעי הבריאות אוניברסיטת טנסי. X.Z. ברציפות פיתח, השתמשו בשיטות 2DE-MS כדי לנתח גידול בבלוטת יותרת המוח פרוטאום החל מ- 2001 הגה את הרעיון של היד, כתב, תוקן כתב היד, תיאם את העבודה הרלוונטי, היה אחראי תמיכה כספית, עבודה המתאימה. ובמקורות השתתפו תיקון של כתב היד. Y.H השתתף אוסף של הפניות, ובחינה של כתב היד. כל המחברים אישרה את כתב היד הסופי.

<ol><li>Zhan, X., Wang, X., Cheng, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+pituitary+adenoma+proteomics%3A+new+progresses+and+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Human pituitary adenoma proteomics: new progresses and perspectives.</a> Front. Endocrinol. 7 (54), (2016).</li>
<li>Zhan, X., Desiderio, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+proteomics+analysis+of+human+pituitary+adenomas%3A+Current+status+and+future+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Mass+Spectrom.+Rev%22%5BJournal%5D)">Comparative proteomics analysis of human pituitary adenomas: Current status and future perspectives.</a> Mass Spectrom. Rev. 24 (6), 783-813 (2005).</li>
<li>Wang, X., Guo, T., Peng, F., Long, Y., Mu, Y., Yang, H., Ye, N., Li, X., Zhan, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteomic+and+functional+profiles+of+a+follicle-stimulating+hormone-positive+human+nonfunctional+pituitary+adenoma%5BTitle%5D)+AND+%22Electrophoresis%22%5BJournal%5D)">Proteomic and functional profiles of a follicle-stimulating hormone-positive human nonfunctional pituitary adenoma.</a> Electrophoresis. 36 (11-12), 1289-1304 (2015).</li>
<li>Karppinen, A., Kivipelto, L., Vehkavaara, S., Ritvonen, E., Tikkanen, E., Kivisaari, R., Hernesniemi, J., Setälä, K., Schalin-Jäntti, C., Niemelä, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transition+from+microscopic+to+endoscopic+transsphenoidal+surgery+for+nonfunctional+pituitary+adenomas%5BTitle%5D)+AND+%22World+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Transition from microscopic to endoscopic transsphenoidal surgery for nonfunctional pituitary adenomas.</a> World Neurosurg. 84 (1), 48-57 (2015).</li>
<li>Liu, X., Ma, S., Dai, C., Cai, F., Yao, Y., Yang, Y., Feng, M., Deng, K., Li, G., Ma, W., Xin, B., Lian, W., Xiang, G., Zhang, B., Wang, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antiproliferative%2C+antiinvasive%2C+and+proapoptotic+activity+of+folate+receptor+%CE%B1-targeted+liposomal+doxorubicin+in+nonfunctional+pituitary+adenoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Antiproliferative, antiinvasive, and proapoptotic activity of folate receptor α-targeted liposomal doxorubicin in nonfunctional pituitary adenoma cells.</a> Endocrinol. 154 (4), 1414-1423 (2013).</li>
<li>Zhan, X., Wang, X., Desiderio, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pituitary+adenoma+nitroproteomics%3A+current+status+and+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Oxid.+Med.+Cell.+Longev%22%5BJournal%5D)">Pituitary adenoma nitroproteomics: current status and perspectives.</a> Oxid. Med. Cell. Longev. 2013, 580710(2013).</li>
<li>Zhan, X., Wang, X., Desiderio, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mass+spectrometry+analysis+of+nitrotyrosine-containing+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Mass+Spectrom.+Rev%22%5BJournal%5D)">Mass spectrometry analysis of nitrotyrosine-containing proteins.</a> Mass Spectrom. Rev. 34 (4), 423-448 (2015).</li>
<li>Zhan, X., Desiderio, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+reference+map+of+a+pituitary+adenoma+proteome%5BTitle%5D)+AND+%22Proteomics%22%5BJournal%5D)">A reference map of a pituitary adenoma proteome.</a> Proteomics. 3 (5), 699-713 (2003).</li>
<li>Desiderio, D. M., Zhan, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+study+of+the+human+pituitary+proteome%3A+The+characterization+of+differentially+expressed+proteins+in+an+adenoma+compared+to+a+control%5BTitle%5D)+AND+%22Cell.+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">A study of the human pituitary proteome: The characterization of differentially expressed proteins in an adenoma compared to a control.</a> Cell. Mol. Biol. 49 (5), 689-712 (2003).</li>
<li>Zhan, X., Desiderio, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterogeneity+analysis+of+the+human+pituitary+proteome%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Chem%22%5BJournal%5D)">Heterogeneity analysis of the human pituitary proteome.</a> Clin. Chem. 49 (10), 1740-1751 (2003).</li>
<li>Zhan, X., Evans, C. O., Oyesiku, N. M., Desiderio, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteomics+and+tanscriptomics+analyses+of+secretagogin+down-regulation+in+human+non-functional+pituitary+adenomas%5BTitle%5D)+AND+%22Pituitary%22%5BJournal%5D)">Proteomics and tanscriptomics analyses of secretagogin down-regulation in human non-functional pituitary adenomas.</a> Pituitary. 6 (4), 189-202 (2003).</li>
<li>Moreno, C. S., Evans, C. O., Zhan, X., Okor, M., Desiderio, D. M., Oyesiku, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+molecular+signaling+in+human+clinically+non-functional+pituitary+adenomas+identified+by+gene+expression+profiling+and+proetomic+analyses%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Novel molecular signaling in human clinically non-functional pituitary adenomas identified by gene expression profiling and proetomic analyses.</a> Cancer Res. 65 (22), 10214-10222 (2005).</li>
<li>Zhan, X., Wang, X., Long, Y., Desiderio, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterogeneity+analysis+of+the+proteomes+in+clinically+nonfunctional+pituitary+adenomas%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Med.+Genomics%22%5BJournal%5D)">Heterogeneity analysis of the proteomes in clinically nonfunctional pituitary adenomas.</a> BMC Med. Genomics. 7, (2014).</li>
<li>Zhan, X., Giorgianni, F., Desiderio, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteomics+analysis+of+growth+hormone+isoforms+in+the+human+pituitary%5BTitle%5D)+AND+%22Proteomics%22%5BJournal%5D)">Proteomics analysis of growth hormone isoforms in the human pituitary.</a> Proteomics. 5 (5), 1228-1241 (2005).</li>
<li>Kohler, M., Thomas, A., Püschel, K., Schänzer, W., Thevis, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+human+pituitary+growth+hormone+variants+by+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Proteome+Res%22%5BJournal%5D)">Identification of human pituitary growth hormone variants by mass spectrometry.</a> J. Proteome Res. 8 (2), 1071-1076 (2009).</li>
<li>Zhan, X., Desiderio, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+human+pituitary+nitroproteome%3A+detection+of+nitrotyrosyl-proteins+with+two-dimensional+Western+blotting%2C+and+amino+acid+sequence+determination+with+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem.+Biophys.+Res.+Commun%22%5BJournal%5D)">The human pituitary nitroproteome: detection of nitrotyrosyl-proteins with two-dimensional Western blotting, and amino acid sequence determination with mass spectrometry.</a> Biochem. Biophys. Res. Commun. 325 (4), 1180-1186 (2004).</li>
<li>Zhan, X., Desiderio, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitroproteins+from+a+human+pituitary+adenoma+tissue+discovered+with+a+nitrotyrosine+affinity+column+and+tandem+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Biochem%22%5BJournal%5D)">Nitroproteins from a human pituitary adenoma tissue discovered with a nitrotyrosine affinity column and tandem mass spectrometry.</a> Anal. Biochem. 354 (2), 279-289 (2006).</li>
<li>Zhan, X., Desiderio, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Linear+ion-trap+mass+spectrometric+characterization+of+human+pituitary+nitrotyrosine-containing+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">Linear ion-trap mass spectrometric characterization of human pituitary nitrotyrosine-containing proteins.</a> Int. J. Mass Spectrom. 259, 96-104 (2007).</li>
<li>Zhan, X., Desiderio, D. M., Wang, X., Zhan, X., Guo, T., Li, M., Peng, F., Chen, X., Yang, H., Zhang, P., Li, X., Chen, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+the+proteomic+variations+of+invasive+relative+to+noninvasive+nonfunctional+pituitary+adenomas%5BTitle%5D)+AND+%22Electrophoresis%22%5BJournal%5D)">Identification of the proteomic variations of invasive relative to noninvasive nonfunctional pituitary adenomas.</a> Electrophoresis. 35 (15), 2184-2194 (2014).</li>
<li>Zhan, X., Desiderio, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Signal+pathway+networks+mined+from+human+pituitary+adenoma+proteomics+data%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Med.+Genomics%22%5BJournal%5D)">Signal pathway networks mined from human pituitary adenoma proteomics data.</a> BMC Med. Genomics. 3, 13(2010).</li>
<li>O’Farrell, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+resolution+two-dimensional+electrophoresis+of+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biol.+Chem%22%5BJournal%5D)">High resolution two-dimensional electrophoresis of proteins.</a> J. Biol. Chem. 250 (10), 4007-4021 (1975).</li>
<li>Klose, J., Kobalz, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-dimensional+electrophoresis+of+proteins%3A+an+updated+protocol+and+implications+for+a+functional+analysis+of+the+genome%5BTitle%5D)+AND+%22Electrophoresis%22%5BJournal%5D)">Two-dimensional electrophoresis of proteins: an updated protocol and implications for a functional analysis of the genome.</a> Electrophoresis. 16 (6), 1034-1059 (1995).</li>
<li>Zhan, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+status+of+two-dimensional+gel+electrophoresis+and+multi-dimensional+liquid+chromatography+as+proteomic+separation+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Chromatogr.+Sep.+Tech%22%5BJournal%5D)">Current status of two-dimensional gel electrophoresis and multi-dimensional liquid chromatography as proteomic separation techniques.</a> Ann. Chromatogr. Sep. Tech. 1 (2), 1009(2015).</li>
<li>Wasinger, V. C., Cordwell, S. J., Cerpa-Poljak, A., Yan, J. X., Gooley, A. A., Wilkins, M. R., Duncan, M. W., Harris, R., Williams, K. L., Humphery-Smith, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress+with+gene-product+mapping+of+the+Mollicutes%3A+Mycoplasma+genitalium%5BTitle%5D)+AND+%22Electrophoresis%22%5BJournal%5D)">Progress with gene-product mapping of the Mollicutes: Mycoplasma genitalium.</a> Electrophoresis. 16, 1090-1094 (1995).</li>
<li>Zhan, X., Desiderio, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differences+in+the+spatial+and+quantitative+reproducibility+between+two+second-dimensional+gel+electrophoresis%5BTitle%5D)+AND+%22Electrophoresis%22%5BJournal%5D)">Differences in the spatial and quantitative reproducibility between two second-dimensional gel electrophoresis.</a> Electrophoresis. 24 (11), 1834-1846 (2003).</li>
<li>Zhan, X., Desiderio, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spot+volume+vs.+amount+of+protein+loaded+onto+a+gel.+A+detailed%2C+statistical+comparison+of+two+gel+electrophoresis+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Electrophoresis%22%5BJournal%5D)">Spot volume vs. amount of protein loaded onto a gel. A detailed, statistical comparison of two gel electrophoresis systems.</a> Electrophoresis. 24 (11), 1818-1833 (2003).</li>
<li>Zhan, X. Two-dimensional electrophoresis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aZhan%2C+X+%22Experimental+Protocols+for+Medical+Molecular+Biology+in+Chinese+and+English%22">Experimental Protocols for Medical Molecular Biology in Chinese and English</a>. Zheng, W. , Peking Union Medical College Press. Beijing. 93-108 (2005).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Electrophoresis+in+Practice%3A+A+guide+to+Methods+and+Applications+of+DNA+and+Protein+Separations%22">Electrophoresis in Practice: A guide to Methods and Applications of DNA and Protein Separations</a>. Westermeier, R. , VCH Wiley. Weinheim. (1997).</li>
<li>Zhan, X., Yang, H., Peng, F., Li, J., Mu, Y., Long, Y., Cheng, T., Huang, Y., Li, Z., Lu, M., Li, N., Li, M., Liu, J., Jungblut, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+many+proteins+can+be+identified+in+a+2DE+gel+spot+within+an+analysis+of+a+complex+human+cancer+tissue+proteome%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Electrophoresis%22%5BJournal%5D)">How many proteins can be identified in a 2DE gel spot within an analysis of a complex human cancer tissue proteome?</a> Electrophoresis. , (2018).</li>
</ol>

המחברים מצהירים כי שאין התנגשות של אינטרסים.

2DE, בשילוב עם שיטות MS כולל PMF 2DE-MS ו- 2DE-MS/MS, שימש בהצלחה בתוכנית שלנו לטווח ארוך - השימוש פרוטאומיקס ללמוד האנושי NFPA פרוטיאומיה מבנית וריאציות ווריאציות רשת מולקולרית עבור הבהרה של המנגנונים המולקולריים ו גילוי של סמנים ביולוגיים יעיל עבור NFPAs. מבוסס על 2DE פרוטאומיקס השוואתית עם הפארמצבטית טוב ממלא תפקיד חשוב הזיהוי של NFPA פרוטיאומיה מבנית וריאציות9,10,11,12,<sup class...

הרשות הפלסטינית הוא גידול נפוצה המתרחשת ב בלוטת יותרת המוח האנושי במערכות ציר היפותלמוס-יותרת המוח-ממוקד איברים, ממלאים תפקיד חשוב במערכת האנדוקרינית האנושית. הרשות הפלסטינית כולל קלינית ולא פעולות PAs (FPA ו- NFPA)1,2. NFPA קשה לאבחון בשלב מוקדם, טיפול בגלל רמות ההורמונים רק מעט יותר גבוהה מהרגיל (למשל, LH ו- FSH) בדם בהשוואה FPA, המגדילה באופן משמעותי את רמות של הורמונים המתאימים דם3,4 ,5. ההבהרה של המנגנונים המולקולריים וגילוי של סמנים ביולוגיים יעיל יש משמעות קלינית חשוב באבחון, טיפול, ולאחר הפרוגנוזה של NFPA. מטרתנו לטווח ארוך היא לפתח להשתמש בשיטות פרוטיאומיה מבנית ללמוד NFPA גילוי סמנים ביולוגיים אמין כדי להבהיר את המנגנונים המולקולריים שלה ושל לזהות מטרות טיפולית יעילה, כמו גם סמנים אבחון ו prognostic. 2-DE בשילוב עם שיטות MS היו בשימוש נרחב בתוכנית מחקר ארוך טווח שלנו לגבי האדם הרשות הפלסטינית פרוטאום1,2,6,7, כולל הקמת פרוטאום הפניה מפות3,8, ניתוח של חלבון באופן שונה ביטוי פרופילים9,10,11,12,13, הורמון גרסאות14 ,15, שינויים post-translational כגון זרחון14 וטירוזין ניטרציה16,17,18, הווריאציות פרוטיאומיה מבנית של פולשני יחסית NFPAs לא פולשנית19, והטרוגניות פרוטיאומיה מבנית של NFPA יחוברו13, אשר הוביל אל הגילוי של ריבוי רשתות מסלול חשוב (תפקוד מיטוכונדריאלי dysregulation מחזור התא, סטרס חמצוני, MAPK איתות מערכת חריגות) זה שונו ב- NFPA13,19,20.
2DE מפריד חלבונים על פי שלהם נקודה איזואלקטרית (pI) (לגירויי כאב תוך התמקדות, הפורום הישראלי לאנרגיה), משקל מולקולרי (באמצעות סודיום dodecyl סולפט לזיהוי בג'ל, עמודים מרחביות)1,2,3, 4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14 , 15 , 16 , 17 , 18 , 19 , 20 , 21 , 22 , 23. זוהי טכניקה קלאסית ומקובל ההפרדה בתחום פרוטאומיקס, מאז כניסתה של המושגים של פרוטאום ו פרוטאומיקס ב 199524. MS היא הטכניקה מכריע בשביל לגלות את זהותו של חלבונים מופרדת 2DE, כולל אסטרטגיות PMF ו- MS/MS. ההתפתחות המהירה מאוד של כלי MS, במיוחד בהיבטים של איתור רגישות ורזולוציה, בשילוב עם השיפור של מערכת LC, משפר באופן משמעותי את זהותו של חלבונים שפע נמוך או נמוך ביותר ב פרוטאום כדי למקסם סיקור פרוטאום. גם האתגרים שלנו מושגים מסורתיים שרק אחת או שני חלבונים הנמצאים במקום ניתוח של רקמות אנושיות מורכבות פרוטאום ג'ל דו-ממדי, ומספק הזדמנות לזהות חלבונים מרובים ב- 2D ג'ל במקום ניתוח של רקמות אנושיות מורכבות פרוטאום ולמקסם את הכיסוי של NFPA פרוטאום.
כאן נתאר הפרוטוקולים מפורט של PMF MS 2DE-MALDI, 2DE-MALDI MS/MS, ו 2DE-LC-MS/MS אשר שימשו בהצלחה בניתוח פרוטאום NFPA אנושי. הפרוטוקולים כוללים הכנה של דגימות, תחילה dimension (לגירויי כאב תוך התמקדות, הפורום הישראלי לאנרגיה), המימד השני (מרחביות-עמוד), ויזואליזציה של חלבונים (צביעת כסף, כחול Coomassie מכתים), ניתוח של ג'ל דו-ממדי, עיכול בג'ל טריפסין, תמונה טיהור של פפטידים tryptic, PMF, MS/MS מסד הנתונים כובש3,8,25,26. יתר על כן, פרוטוקול זה מתרגם בקלות לניתוח של אחרים proteomes רקמה אנושית.

<table><tbody><tr><td>איתן IPGphor 3&nbsp;</td><td>מערכת מיקוד איזואלקטרית</td> <td>של GE Healthcare</td><td></td>.</tr><tr><td>Ettan DALTsix גלגלת מולטי ג'ל</td><td>Amersham Pharmacia Biotech, פיסקאטאווי, ניו ג'רזי, ארה"ב</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ettan DALT II System</td><td>Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ, ארה"ב</td><td></td><td>מערכת האלקטרופורזה האנכית</td></tr><tr><td>Ettan IPGphor מחזיק רצועות</td><td>Amersham Pharmacia Biotech, פיסקאטאווי, ניו ג'רזי, ארה"ב</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ettan DALTsix גלגלת מולטי ג'ל</td><td>Amersham Pharmacia Biotech, פיסקאטאווי, ניו ג'רזי, ארה"ב</td><td></td><td>גלגלת מולטי ג'ל</td></tr><tr><td>Voyager DE STR MALDI-TOF MS&nbsp;</td><td>ABI, פוסטר סיטי, CA</td><td></td><td>MALDI-MS PMF</td></tr><tr><td>MALDI-TOF-TOF</td><td>Autoflex III, Bruker</td><td></td><td>MALDI-MS/MS ספקטרומטר מסה</td></tr><tr><td>LTQ-OrbiTrap Velos Pro</td><td>ETD Thermo Scientific, וולת'אם, MA, ארה"ב</td><td></td><td>ספקטרומטר מסה ESI-MS/</td></tr><tr><td>MS מערכת EASY-nano LC&nbsp;</td><td>Proxeon Biosystems, אודנסה, דנמרק</td><td></td><td>מערכת כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים</td></tr><tr><td>עמודת מלכודת PepMap C18&nbsp;</td><td>300 &mu; תעודת זהות וזמנים; אורך 5 מ"מ; Dionex Corp., Sunnyvale, CA, ארה"ב</td><td></td><td></td></tr><tr><td>RP C18 טור</td><td>75 &mu; תעודת זהות, אורך 15 ס"מ; Dionex Corp., Sunnyvale, קליפורניה, ארה"ב</td><td></td><td></td></tr><tr><td>KimWipe Kimvipe</td><td>&nbsp;</td><td></td><td>ווטר מגבת נייר בלתי מסיס</td></tr><tr><td></td><td>תוצרת מכשיר גמיש</td><td></td><td></td>PURELAB</tr><tr><td>פוליטרון דגם P710/35 הומוגנייזר</td><td>ברינקמן אינסטרומנטס, ווסטבורי, ניו יורק</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PDQuest</td><td>Bio-Rad, &nbsp; הרקולס, קליפורניה</td><td></td><td>תוכנת ניתוח תמונות ג'ל דו-ממדיות</td></tr><tr><td>SEQUEST&nbsp;</td><td>Thermo Proteome Discoverer 1.3 (גרסה מס' 1.3.0.339)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DataExplore (גרסה 4.0.0.0) תוכנה</td><td></td><td></td><td>לעיבוד ספקטרום MS</td></tr><tr><td>תוכנת</td><td></td><td></td> קמע <td>תוכנה לחיפוש חלבונים מבוססת PMF&nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>תוכנת</td><td></td><td></td> קמע <td>תוכנה לחיפוש חלבונים מבוססת MS/MS</td></tr><tr><td>תוכנת Proteome Discoverer v.1.3 בטא</td><td>תוכנת Thermo Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Xcalibur v.2.1</td><td></td><td></td><td>MS/MS תוכנת ניהול נרכשת נתונים&nbsp;</td></tr><tr><td>גרסת Uniprot 201410.1_HUMAN.fasta</td><td></td><td></td><td>מסד נתונים של חלבון אנושי</td></tr><tr><td>SEQUEST (גרסה מס' 1.3.0.339)&nbsp;</td><td></td><td></td><td>תוכנה לחיפוש חלבונים מבוססת MS/MS I</td></tr><tr><td>MASCOT (גרסה 2.3.02)&nbsp;</td><td></td><td></td><td>תוכנה לחיפוש חלבונים מבוססת MS/MS II</td></tr><tr><td>C18 ZipTip microcolumn</td><td>Millipore</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PeptideMass Standard kit&nbsp;</td>ערכת בדיקת חלבון <td>BCA של Perspective Biosystems</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pierce&nbsp;</td><td>תרמו&nbsp; Fisher Scientific</td><td>23227</td><td></td></tr><tr><td>ערכת קוונטית דו-ממדית</td><td>GE Healthcare</td><td>80-6483-56</td><td></td></tr><tr><td>BIS-ACRYLAMIDE</td><td>AMRESCO</td><td>0172</td><td></td></tr><tr><td>ACRYLAMIDE</td><td>AMRESCO</td><td>0341</td><td></td></tr><tr><td>DTT</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D0632</td><td></td></tr><tr><td>Thiourea</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8656</td><td></td></tr><tr><td>אוריאה</td><td>VETEC</td><td>V900119</td><td></td></tr><tr><td>SDS</td><td>AMRESCO</td><td>0227</td><td></td></tr><tr><td>CHAPS</td><td>AMRESCO</td><td>0465</td><td></td></tr><tr><td>TEMED</td><td>AMRESCO</td><td>M146</td><td></td></tr><tr><td>אמוניום פרסולפט</td><td>AMRESCO</td><td>M133</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin</td><td>Promega, מדיסון, ויסקונסין, ארה"ב</td><td>V5111</td><td></td></tr><tr><td>IPG buffer pH 3-10, NL</td><td>GE Healthcare</td><td>17-6000-87</td><td></td></tr><tr><td>רצועה יבשה אימובילין pH 3-10NL, 18 ס"מ</td><td>GE Healthcare</td><td>17-1235-01</td><td></td></tr></tbody></table>

אלקטרופורזה דו-ממדית בג'ל בשילוב עם שיטות ספקטרומטר מסה על ניתוח של רקמת גידול בבלוטת יותרת המוח האנושי פרוטאום

Two-dimensional Gel Electrophoresis Coupled with Mass Spectrometry Methods for an Analysis of Human Pituitary Adenoma Tissue Proteome

גידול בבלוטת יותרת המוח האנושי (PA) הוא גידול נפוצה המתרחשת ב בלוטת יותרת המוח האנושי במערכות ציר היפותלמוס-יותרת המוח-ממוקד איברים, והוא עשוי להיות מסווגת כ- PA או פונקציונלי קלינית או מתפקד (FPA ו- NFPA). NFPA קשה לאבחון בשלב מוקדם וטיפול בשל בקושי היא מרוממת הורמונים בדם בהשוואה FPA. מטרתנו לטווח ארוך היא להשתמש בשיטות פרוטאומיקס כדי לגלות סמנים ביולוגיים אמין עבור הבהרה של המנגנונים המולקולריים הרשות הפלשתינית והכרה של סמנים אבחון, prognostic יעילה לבין מטרות טיפוליות. יעיל דו-ממדית בג'ל (2DE) בשילוב עם שיטות ספקטרומטר מסה (MS) הוצגו כאן כדי לנתח את האדם proteomes הרשות הפלסטינית, כולל הכנת דוגמאות דו-ממדית בג'ל, חלבון ויזואליזציה, ניתוח תמונות, בג'ל עיכול טריפסין, פפטיד המוני טביעות אצבע (PMF) וטנדם מסה ספקטרומטר (MS/MS). 2-ממדי ג'ל אלקטרופורזה לייזר בסיוע מטריקס desorption/יינון ספקטרומטר מסה PMF (2DE-MALDI MS PMF), 2DE-MALDI MS/MS ופרוצדורות MS/MS 2DE נוזלי כרומטוגרפיה (LC) בהצלחה יושמו ניתוח של NFPA פרוטאום. עם השימוש של ספקטרומטר מסה רגישות גבוהה, חלבונים רבים זוהו עם שיטת 2DE-LC-MS/MS כל ג'ל 2D במקום ניתוח של רקמות מורכבות הרשות הפלסטינית כדי למקסם את הכיסוי של האדם פרוטאום הרשות הפלסטינית.

1. 2DE-MALDI MS PMF: עם ההליך ניסיוני שתוארו לעיל, סכום כולל של 150 חלבונים µg חולצו רקמות NFPA הביע-FSH (נקבה; בן 50, זינק (-), GH (-), PRL (-), (-) LH, FSH (+), ו- TSH (-)) והציב עם 18 ס מ רצועת IPG (NL pH 3-10), ג'ל מרחביות עמודים בפורמט גדול, אז דמיינו צביעת כסף. השגנו דפוס ג'ל 2DE טוב הדירים פרוטאום רקמות NFPA (איור 1), עם סטיית מיקומיים הממוצע של 1.98 ± 0.75 מ מ לכיוון הפורום הישראלי לאנרגיה, ± 1.62 0.68 מ מ בכיוון מרחב...

כאן, אנו מציגים דו-ממדית בג'ל (2DE) בשילוב עם ספקטרומטר מסה (MS) להפריד ולזהות פרוטאום רקמת גידול בבלוטת יותרת המוח האנושי, אשר מציג תבנית לשחזור וטוב 2DE. חלבונים רבים שנצפו במקום כל 2DE בעת ניתוח סרטן מורכב פרוטאום עם השימוש של MS רגישות גבוהה.

Human pituitary adenoma (PA) is a common tumor that occurs in the human pituitary gland in the hypothalamus-pituitary-targeted organ axis systems, and may ...

המטרה הכוללת של אלקטרופורזה דו-ממדית זו של ג'ל יחד עם הליך ספקטרומטריית מסה היא להפריד ולזהות פרוטאום רקמת אדנומה של יותרת המוח האנושית. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום הפרוטאומים. כגון היי של פרוטאום.וגילוי מצב החלבון, חלבון ארבע וחלבון מרווח. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שאלקטרופורזה דו-ממדית של ג'ל משולבת בקלות עם ספקטרומטריית מסה ברגישות גבוהה לזיהוי פרוטאום, במיוחד חלבונים בשפע נמוך. מצב חלבון, חלבון ארבע וחלבון מרווח.היישומים של טכניקה זו נוטים לכיוון PQ של טיפול בבעלי חיים. בגלל חלבון מפתח לחלבון מרווח או דפוס חלבון שימושי באבחון חולים. אנו מראים שהדגמה של שיטה זו היא קריטית מכיוון שקשה ללמוד את שלבי האלקטרופורזה הדו-ממדיים של הג'ל מכיוון שהיא לוקחת זמן רב ועבודה אינטנסיבית וישנם מספר טריקים ניסיוניים.כדי להתחיל בהליך זה, הוסף 250 מיקרוליטר של תמיסת דגימת חלבון שהוכנה בעבר לכל חריץ של מחזיק רצועות IPG בגודל 13 סנטימטר. הניחו רצועת IPG בגודל 18 סנטימטר, כשצד הג'ל כלפי מטה, על כל תמיסת דגימת חלבון תוך הקפדה על הימנעות מבועות. לאחר מכן הוסיפו שלושה עד ארבעה מיליליטר שמן מינרלי כדי לכסות כל רצועת IPG.לאחר מכן, הרכיבו כל מחזיק רצועות IPG למערכת מיקוד איזואלקטרית עם הקצה המחודד בלוח האחורי והקצה המרובע בצלחת הקדמית. לאחר החזרת רצועות ה-IPG למשך 18 שעות בטמפרטורת החדר, הגדר את פרמטרי ה-IEF במערכת המיקוד האיזואלקטרית עם זמן ריצה כולל של 7.5 שעות ו-36, 875 וולט שעות. לאחר IEF, הוצא כל רצועת IPG ממערכת המיקוד האיזואלקטרית והסר את עודפי השמן המינרלי בעזרת מגבת נייר בלתי מסיסה.לאחר מכן עוטפים כל רצועה בדף ניילון נצמד ושומרים בטמפרטורה של מינוס 80 מעלות צלזיוס. כדי להטיל ג'ל 12% PAGE יש להוסיף מים מזוקקים כפולים, 1.5 מולארי טריס-הידרוכלורי, 40% אקרילאמיד, תמיסת ביס-אקרילאמיד, 10% אימודיום פרסולפט ומתוזמן לכוס. מערבבים את תמיסת הג'ל בעדינות, מקפידים להימנע מבועות.יוצקים בעדינות את תמיסת הג'ל לתא רב יציקה עד לגובה הג'ל הצפוי של 19 סנטימטרים. הוסף מיד כשלושה מיליליטר מים מזוקקים כפולים לתא הרב-יציקה כדי לכסות כל ג'ל ממיס ולאפשר לכל ג'ל להתפלמר למשך כשעה. שלב זה חשוב מאוד להכנת ג'ל SDS-PAGE איכותי ויש להוסיף מיד את המים על גבי כל ג'ל.הכן שני ליטר של מאגר אלקטרופורזה ולאחר מכן הוסף את המאגר למיכל חיץ יחידת הפרדת אלקטרופורזה. לאחר הוצאת רצועות ה-IPG הממוקדות מהמקפיא, הניחו אותן בכלי פלסטיק המכיל מיליליטר אחד של מאגר שיווי משקל מפחית ועקבות של ברומופנול כחול ואזנו אותן למשך 10 דקות עם נדנוד עדין. לאחר הסרת מאגר שיווי המשקל המפחית, הוסף ארבעה מיליליטר של מאגר שיווי משקל קריאה, ועקבות של ברומופנול כחול לרצועות ה-IPG ואזן אותם למשך 10 דקות עם נדנוד עדין.במהלך שיווי המשקל של הג'ל, פרק את תא היציקה המרובה והסר את קלטת הג'ל המוכנה. שטפו את קלטת הג'ל שלוש פעמים במים מזוקקים כפולים, ואז הסירו את מי הגישה מקלטת הג'ל בעזרת מגבת נייר בלתי מסיסה והניחו אותם במעמד ג'ל. לאחר מכן, שטפו את רצועות ה-IPG המאוזנות עם מאגר אלקטרופורזה והסירו עודפי נוזלים על כל משטח רצועת IPG בעזרת מגבת נייר בלתי מסיסה.הנח פס IPG על ג'ל ה-SDS-PAGE המתפרק, ואפשר לצד הפלסטיק של פס ה-IPG ליצור קשר עם לוחית הזכוכית הארוכה יותר עם הקצה המחודד שמאלה. כעת הוסף במהירות שלושה עד ארבעה מיליליטר של מאגר אלקטרופורזה חם של 1% אגרוז ו-SDS כדי לאטום את רצועת ה-IPG בחלק העליון של כל ג'ל SDS-PAGE, והנח את הצד העליון של רצועת ה-IPG כלפי מטה על החלק העליון של צלחת הזכוכית הקצרה יותר, תוך הקפדה על מניעת בועות. שלבים אלה חשובים מאוד כדי לאטום את רצועת ה-IPG לג'ל SDS-PAGE.יש להוסיף מיד את תמיסות האגרוז החמות ולהניח מיד את רצועת ה-IPG בחלק העליון של ג'ל ה-SDS. לאחר פילמור, הכנס את קלטת הג'ל המורכבת אנכית בין אטמי הפלסטיק במערכת אלקטרופורזה אנכית. מניחים את החלק העליון של הג'ל עם רצועת ה-IPG ליד הקתודה.לאחר מכן, התאם את רמת מאגר האלקטרופורזה כדי לטבול את קלטת הג'ל על ידי הוספת נפח המאגר המתאים למערכת האלקטרופורזה. חבר והגדר את ספק הכוח במצב מתח קבוע והפעל ב-200 וולט למשך כ-370 דקות תוך ניטור הצבע. לאחר סיום הריצה, הוציאו את קלטת הג'ל ממערכת האלקטרופורזה והוציאו בעדינות את הג'ל מקלטת הג'ל, תוך הקפדה להימנע מקריעת הג'ל.מעבירים בזהירות את הג'ל למגש המכיל 250 מיליליטר תמיסת קיבוע ומנערים בעדינות את הג'ל למשך 20 דקות. לאחר מכן, השליכו את התמיסה והוסיפו למגש 250 מיליליטר של 50% מתנול. ואז לנער בעדינות את הג'ל למשך 10 דקות.לאחר ניעור הג'ל במים מזוקקים כפולים, הוסף 250 מיליליטר של מאגר רגישות המכיל 0.02% נתרן גופרתי. יש לנער בעדינות את הג'ל למשך דקה. לאחר ניעור הג'ל פעמיים במים מזוקקים כפולים, הוסיפו 250 מיליליטר תמיסת תגובת כסף ונערו בעדינות את הג'ל למשך 20 דקות.לאחר ניעור הג'ל במים מזוקקים כפולים, מוסיפים 250 מיליליטר תמיסת פיתוח ומנערים בעדינות עד לקבלת הצביעה הרצויה, שהיא בדרך כלל דקה עד שלוש דקות. כעת הוסיפו 250 מיליליטר של חומצה חומצית 5% כדי להפסיק את הצביעה ונערו בעדינות את הג'ל למשך 10 דקות. לאחר ניעור הג'ל במים מזוקקים כפולים, מוסיפים 250 מיליליטר של 8.8% גליצרול ומאחסנים את הג'ל בארבע מעלות צלזיוס עד לניתוח.דפוס ג'ל דו-ממדי הניתן לשחזור וטוב של פרוטאום רקמת NFPA התקבל מאלקטרופורזה של ג'ל עם כ-1,200 כתמי חלבון שזוהו במפת הג'ל הדו-ממדית שהופצו בעיקר באזור ה-pH ארבע עד שמונה ומסה של 15 עד 150 קילודלטון. בסך הכל זוהו 192 חלבונים מיותרים מ-141 כתמי ג'ל מתוך 337 כתמי הג'ל שנותחו בניתוח MALDI-MS PMF ולא זוהה חלבון ב-196 הכתמים הנותרים. צביעה בכחול קומאסי הניבה דפוס ג'ל דו-ממדי הניתן לשחזור ואיכותי של פרוטאום רקמת NFPA פולשנית וכ-1,100 כתמי חלבון שזוהו במפת ג'ל דו-ממדית שהופצו בעיקר בטווח של pH 4 עד 8 ומסה של 15 עד 150 קילודלטון.זוהה בממוצע חלבון אחד לכל נקודה עם ניתוח MALDI tof MS MS. כאשר כמה שיותר חלבונים בכל נקודה מתאימה זוהו בניתוח LC-ESI-MS/MS. נתונים אלה מדגימים בבירור כי כל נקודת ג'ל דו-ממדית מכילה חלבונים רבים בפרוטאום המורכב של רקמת הסרטן האנושית.לאחר שליטה, טכניקה זו יכולה להיעשות תוך 32 שעות לאלקטרופורזה דו-ממדית של ג'ל אם היא מבוצעת כראוי. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור לבצע את השלבים, במיוחד על פי הפרוטוקול. בעקבות הליך זה, ניתן לבצע שיטות אחרות כמו תיוג יציב על מנת לענות על שאלות נוספות כמו קודיפיקציה של חלבונים בפרוטאום.לאחר פיתוחה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום תערובת החלבונים לחקור חלבון בשפע נמוך בקנה מידה גדול יותר לאחר שינויים תרגומיים, התמחות חלבון, חלבון מרווח וחלבון ארבע בתנאי מודל, חולים ומערכות איברים. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לבצע אלקטרופורזה דו-ממדית של ג'ל יחד עם ספקטרומטריית מסה, להשיג דפוס אלקטרופורזה דו-ממדי טוב וניתן לשחזור ולזהות חלבונים רבים בכל נקודה. אל תשכח שעבודה עם SDS achreomy ו-TEMED עלולה להיות מסוכנת ביותר ותמיד יש לנקוט באמצעי זהירות כגון לבישת כפפות פלסטיק בעת ביצוע הליך זה.

two-dimensional-gel-electrophoresis-coupled-with-mass-spectrometry

Research

JoVE Journal

Cancer Research

מחקר סרטן

בסרטון זה אנו מדגימים שיטת אלקטרופורזה דו-ממדית בג'ל המפרידה חלבונים בודדים מתערובת חלבונים מורכבת המתקבלת מרקמות גידוליות של אדנומת יותרת המוח האנושית הלא תפקודית (NFPA). החלבונים מופרדים על בסיס המטען החשמלי שלהם בממד הראשון ובהמשך מופרדים על בסיס משקלים מולקולריים בממד השני.

אלקטרופורזה ג'ל פוליאקרילאמיד דו-מימדי: טכניקת הפרדה לניתוח חלבונים בתערובת חלבונים מורכבת המבוססת על מטען ומשקל מולקולרי

מקור: Wulf, M., et.al.  פרוטוקול מבוסס מיקרו-דיסקציה בלייזר לניתוח LC-MS/MS של הפרופיל הפרוטאומי של גרגירי נוירומלנין. J. Vis. Exp. (2021). סרטון זה מדגים את הניתוח של דגימות פפטיד מגרגירי נוירומלנין (NMGs) שבודדו מרקמת מוח אנושית לאחר המוות. הפפטידים מופרדים תחילה באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC) ולאחר מכן מנותחים על ידי ספקטרומטריית מסה כדי לקבוע את יחסי המסה למטען שלהם (m/z). פפטידים ממוקדים מפוצלים כדי לזהות שינויים לאחר התרגום והנתונים המתקבלים מושווים למסד נתונים...

ניתוח LC-MS/MS של הפרופיל הפרוטאומי של גרגירי נוירומלנין שבודדו מרקמת מוח אנושית

פרוטוקול מיצוי חלבון נפוץ באמצעות מאגר האוריאה / thiourea / SDS לרקמת מוח אדם ועכברים מאפשר indentification של חלבונים על ידי 2D-DIGE והאפיון הבא שלהם על ידי immunoblotting 2DE המיני. שיטה זו מאפשרת לאדם להשיג תוצאות יותר לשחזור ואמינים מביופסיות אדם ומודלים ניסיוניים.

חלבון נגזר מוח קונסנסוס, חליצה ​​פרוטוקול לחקר האדם וMurine המוח Proteome שימוש בשתי 2D-DIGE ומיני 2DE immunoblotting

כאן אנו מתארים פרוטוקול כי זוגות שתי טכניקות proteomic, כלומר 2 ממדים אלקטרופורזה (2DE) וספקטרומטריית מסה (MS), לזהות הביעו באופן דיפרנציאלי / חלבונים שונה שלאחר translational בין שתיים או יותר קבוצות של דגימות ראשוניות. גישה זו, יחד עם ניסויים פונקציונליים, מאפשרת זיהוי ואפיון של סמנים / מטרות טיפוליות פרוגנוסטיים.

מספוט 2DE-ג&#39;ל לתפקוד חלבון: לקח מHS1 בכרוני לימפוציטית לוקמיה

ניתוחים מעמיקים של פרוטאומים של תאים סרטניים מקלים על זיהוי מטרות תרופות חדשות וסמנים ביולוגיים אבחוניים. אנו מתארים זרימת עבודה ניסויית לניתוח כמותי של פרוטאומים (פוספו-) בתת-אוכלוסיות של תאים סרטניים שמקורם בגידולים נוזליים ומוצקים. זה מושג על ידי שילוב של אסטרטגיות העשרה תאיות עם ספקטרומטריית מסה כמותית מבוססת Super-SILAC.

Mass כמותי spectrometric פרופיל של Proteomes סרטן התאים נגזרים מנוזלים וגידולים מוצקים

כאן אנו מציגים פרוטוקולים לטיהור זיקה של קומפלקסי חלבונים והפרדה שלהם לפי דף ילידי כחול, ואחריו פרופיל מתאם חלבון באמצעות ספקטרומטריית מסה כמותית בחינם תווית. שיטה זו שימושית כדי לפתור interactomes לתוך מתחמי חלבון ברורים.

פתרון מתחמי פרוטאין טהור זיקה לפי דף Native הכחול פרופיל מתאם חלבון

הפרוטוקול נועד להציג את השימוש בספקטרומטר מסה מרובע משולש לניטור תגובה מרובה (MRM) של חלבונים מדגימות קליניות. סיפקנו זרימת עבודה שיטתית החל מהכנת מדגם לניתוח נתונים עבור דגימות קליניות עם כל אמצעי הזהירות הדרושים שיש לנקוט.

זרימת עבודה של פרוטאומיה כמותית באמצעות זיהוי מבוסס ניטור תגובה מרובה של חלבונים מרקמת המוח האנושית

שיטה זו מתארת אסטרטגיה פשוטה ומהירה לאפיון וחקירה של פרוטאופורמים של היסטון.

חשיפת היסטון פרוטאופורמים באמצעות אלקטרופורזה של ג'ל 2D-TAU

כאן, אנו מקימים שיטה פרוטאומית מבוססת ספקטרומטריית מסה תוך שימוש באזורי עניין מבודדים בקטעי רקמה קבועים בפורמלין, משובצים בפרפין. פרוטוקול זה משמש לניתוח פרוטאום מאזורי רקמה ספציפיים בקטעי רקמה קבועים בפורמלין, משובצים בפרפין.

גישה יעילה לפרוטאומיקה מבוססת ספקטרומטריית מסה תוך שימוש באזורי רקמה נבחרים

פרוטוקול זה הצליח להכין מספיק רקמות ניאווסקולריות איכותיות מדגימות גליומה באמצעות מיקרודיסקציה באמצעות לכידת לייזר לניתוח פרוטאומיקה כמותי של אנגיוגנזה גידולית, תוך התגברות על מגבלות מחקרים שמסורתית מתמקדים בעיקר בגורמים אנגיוגניים וסיפק פרופיל פרוטאומיקה רחב היקף של אנגיוגנזה של גליומה.

הכנת רקמות ניאווסקולריות מרקמות גליומה אנושיות לניתוח פרוטאומיקה כמותי של אנגיוגנזה של גידול

למד אלקטרופורזה דו-ממדית בשילוב ספקטרומטר מסה לניתוח פרוטאום של גידולים בבלוטת יותרת המוח האנושית. שיטה זו מאפשרת זיהוי חלבונים בנפח נמוך ומספקת תובנות לביולוגיה של הגידול.

אלקטרופורזה דו-ממדית בג'ל בשילוב עם שיטות ספקטרומטר מסה על ניתוח של רקמת גידול בבלוטת יותרת המוח האנושי פרוטאום

גלה סרטונים נוספים