19 ביולי 2018
מאמר זה מציג את שיטת המיקום כירורגי בעכברים של קטטר בקרום הבטן מחובר ליציאת גישה זה ממוקם מאחורי החיה. יתר על כן, זה מסביר את השגרה כריתת כליה 5/6 להידמות המדינה uremic של החולים במחלה.
שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום הדיאליזה הפריטונאלית לגבי שינויים צפקיים או מערכתיים בתגובה לחשיפה לנוזלים בתנאים אורמיים או לא אורמיים. היתרונות העיקריים של טכניקה זו הם שניתן להזריק כמויות גדולות של נוזלים תוך צפקית לאורך תקופת טיפול ארוכה ושהיא מאפשרת שימוש בבעלי חיים מהונדסים גנטית. ההשלכות של טכניקה זו משתרעות על הטיפול והאבחון של הידרדרות צפקית מבנית ותפקודית, מכיוון שהיא מאפשרת בדיקות אסטרטגיות טיפוליות פוטנציאליות והערכת סמנים ביולוגיים.
הרעיון לשיטה זו עלה לראשונה כאשר צפינו את הצורך בשימוש בעכברים מהונדסים גנטית כדי להתחיל את הרמזים המולקולריים המעורבים בנזק לצפק. למיקום קטטר, לאחר גילוח האגפים והגב הימני של כל בעל חיים, יש לאשר חוסר תגובה לצביטה בבוהן ולמרוח משחה על עיני החיה. לאחר מכן, הניחו את החיה הראשונה על צידה השמאלי על שולחן הניתוחים וחטאו את העור החשוף בתמיסת כלורהקסידין גלוקונאט 1%.
השתמש במספריים קהים כדי לבצע חתך עור חתוך של 0.5 ס"מ בצד ימין של הגוף. לאחר מכן, הפרד בזהירות את העור משכבת השרירים הסמוכה עד שהעור המכסה את כל גב החיה מופרד היטב. בצע חתך בקוטר מילימטר אחד בשכבת השריר דרך חתך העור והכניס את קצה הקטטר ואת טבעת הפלסטיק הראשונה לחתך השריר.
תפרו את דופן הצפק בחוזקה סביב הצנתר עם התפר הבלתי נספג 5-0 או 6-0, עם טבעת פלסטיק אחת בתוך חלל הצפק והשנייה בין השריר לעור. יש להכין את התפרים לפני ביצוע החתך ואין לשחרר את השריר עד להחדרת הקטטר. אחרת, מכיוון שהחתך קטן מאוד, ייתכן שיהיה קשה למצוא אותו שוב.
הכנס את יציאת הגישה לחלל התת עורי לכיוון זנב העכבר וסגור את הפצע בתפר שני. לאחר מכן, החזירו את החיה לכלוב שלה לאחר שכיבה מלאה על החזה. ארבעה עד שבעה ימים לאחר מכן, כדי להתחיל את טיפול הדיאליזה הפריטונאלית, טען תחילה מזרק עם שני מיליליטר נוזל דיאליזה פריטונאלי, וחטא את העור המקיף את היציאה בתמיסת כלורהקסידין גלוקונאט 1%.
לאחר מכן השתמש ביד אחת כדי לרסן את החיה על ידי הזנב ויציאת הגישה, והזריק את הנוזל לפתח ביד השנייה באמצעות מחט משופעת. לכריתת כליה וקטטר 5/6, לאחר הכנת החיות לניתוח, כפי שהודגם, בצע חתך עור של 0.5 ס"מ בצד שמאל של החיה קרוב לתחתית הצלעות. פתחו חתך קטן בשריר כדי להוציא את הכליה השמאלית מהצפק, והוציאו את הקפסולה ואת בלוטת יותרת הכליה.
השתמש בצריבה כדי לשרוף ולחתוך את גפיים הכליה ולהחזיר את הכליה לחלל הצפק. לאחר מכן, סגרו את השריר ואת פצעי העור בתפרים בלתי מסיסים 5-0 או 6-0 והחזירו את החיה לכלוב שלה כשהיא מתאוששת לחלוטין. למחרת, בצע חתך עור של 0.5 סנטימטר בצד ימין של החיה והפריד את העור בחלק האחורי של החיה מהשריר, כפי שהודגם.
בצע חתך של 0.3 עד 0.4 סנטימטר בשריר והוציא את הכליה הימנית מחלל הצפק. הסר את הקפסולה ואת בלוטת יותרת הכליה והשתמש בתפר 5-0 או 6-0 שאינו נספג כדי לקשור את וריד הכליה, העורק והשופכן. כעת הסר את הכליה לחלוטין והכנס את הקטטר כך שהשריר יישמר בין שתי טבעות הפלסטיק, כפי שהודגם, לפני סגירת פצע השריר.
הכנס את יציאת הגישה לחלל התת עורי וסגור את העור, כפי שמודגם. לאחר מכן החזירו את החיה לכלוב שלה עם ניטור עד להחלמה מלאה, ואפשרו לבעל החיים להתאושש לפחות 10 ימים לפני מתן הנוזל ההיפראוסמוטי, כפי שהודגם. רקמות צפקיות פריאליות של עכברים המתקבלות מהאזור המרוחק ביותר של הצנתר, מדגימות עובי מוגבר וגיוס תאים במהלך הדיאליזה שמחמיר עוד יותר בבעלי החיים הנפרקטומיים.
תאי אפיתל התימוס מציגים גם מורפולוגיה שונה עקב פירוק איחוד בין-תאי הנגרם על ידי הדיאליזה הצפקית. דגימות סרום מעכברים שעברו נפרקטומיה, מצביעות על כך שכריתת כליה 5/6 גורמת למצב אורמי, ומגדילה את רמות החנקן האורי במהלך הניסוי, בהשוואה לנקודת ההתחלה. יתרה מכך, כאשר הכליות מתפקדות במלואן, רמות החנקן האוריק נשארות דומות למצב הבסיסי, אפילו בעכברים שנחשפו לנוזל דיאליזה פריטונאלי.
ניתן להשלים טכניקות אלה תוך חמש עד שבע דקות. ללא כריתת הכליה, 15 עד 20 דקות. לצריבה של הכליה השמאלית, 20 עד 25 דקות.
להוצאת כליה נכונה והנחת קטטר, אם המתודולוגיה שלה מבוצעת כראוי. לאחר פיתוחה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום הדיאליזה הפריטונאלית לחקור אפשרויות טיפוליות לשימור הצפק בחולי כליות הנתונים לטיפול בדיאליזה פריטונאלית.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
מאמר זה מדגים שיטה כירורגית להחדרת קטטר תו-פריטוני בעכברים, החיונית לחקר דיאליזה פריטונית. כמו כן, הוא מפרט הליך של כריתת 5/6 מהכליות כדי לדמות מצב אורמי בחולים.
מודל כירורגי זה מאפשר הערכה פרה-קלינית של התערבויות בדיאליזה פריטוניאלית על ידי אספקת מערכת הניתנת לשחזור לחשיפה ארוכה למנוזות ולמידול של מצב אורמי. המודל תומך בתיקוף מטרות ובצמצום סיכונים מכניסטיים במסלולי פיברוזיס ודלקת פריטוניאלית באמצעות שימוש בעכברים שעברו שינוי גנטי. הטכניקה מקלה על הערכת סממנים ביולוגיים ובדיקת אסטרטגיות טיפוליות הרלוונטיות לפיתוח טיפולים חליפיים לכליות.
השיטה משתלבת בתהליכי גילוי ביולוגי ובמסלולי עבודה פרה-קליניים על ידי כך שהיא מאפשרת בדיקת היפותזות, הבהרת מסלולים והערכה כמותית של תגובות פריטוניאליות להתערבויות טיפוליות.