Name: מודל עכברוש של Orthotopic השתלת כבד בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים עבור שחזור הנבוב Suprahepatic (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-03-19T12:30:00.000+00:00
Duration: 14 min 33 s
Description: למד טכניקת אנסטומוזה מגנטית לשחזור הווריד הסופראהפטי בהשתלת כבד אורתוטופית בעכברוש. שיטה זו מקצרת את שלב האנהפטי ומשפרת את שיעורי ההישרדות לאחר הניתוח.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי מענקים משרד של החינוך חדשנות צוות פיתוח תוכנית של סין (מס ' IRT16R57), הלאומית למדע הטבע של סין (מספר 81470896), מחקר קרן עבור צעירים כישרון גיוס תוכניות של שיאן ג'יאוטונג של האוניברסיטה (RW).

הפרוטוקול בוצע בהתאם להנחיות על טיפוח ועל שימוש של חיות מעבדה, אושרה על ידי ועדת האתיקה של בעלי חיים בניסויים של שיאן אוניברסיטת ג'יאוטונג של, שיאן, מחוז שאאנשי, סין.
הערה: אף הליכים לפי פרוטוקול זה בוצעה תחת מיקרוסקופ כירורגי.
1. הכנה לפני הניתוח
<ol><li>העיצוב והצורה של טבעות מגנטי (איור 1)<ol>
<li>להרכיב את המכשיר השקה מגנטי על ידי התאמת זוג טבעות מגנטי-בורון ניאודימיום ברזל.</li>
		<li>עיצוב הטבעות לפי הפרמטרים של עכברוש SHVC עם קוטר ציר מרכזי, קוטר ציר קטין, עובי, משקל של 8 מ"מ, 5.5 מ מ, 1 מ מ, 0.5 g, בהתאמה.</li>
		<li>עקומת את הטבעות כדי לצורה הרצויה על-ידי טכניקה חיתוך-אלקטרודות, ואז להרגיע את הטבעות שהושג במברשת תחמוצת טיטניום, לחטא עם 500 mg/L אתילן אוקסיד-55-60 מעלות צלזיוס במשך 6 שעות.</li>
	</ol>
</li>
	<li>האזיקים (איור 2)<ol>
<li>היכונו שהקפל השקה של IHVC, PV על ידי חיתוך צינור פוליאתילן. להבטיח כי הגוף השרוול הוא 5 מ מ ארוך עם סיומת השרוול 2 מ מ. הערה: הקוטר הפנימיים והחיצוניים של השרוול PV הינם 1.8 ו- 2.1 מ מ, בעוד אלה של השרוול IHVC הם 2.6 ו- 2.8 mm, בהתאמה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>סטנט (איור 2)<ol>
<li>הכן סטנט על השקה של BD באמצעות חיתוך 24-G בצינורית תוך ורידי באורך של 5 מ מ כדי לייצר שיפוע בשני קצותיו.</li>
	</ol>
</li>
	<li>חיות ניסוי<ol>
<li>השתמש חולדות ספראג Dawley זכר שוקל בין 250 ו- 280 g כמו תורמים הנמענים. ודא כי הנמען משקל זהה או מעט כבד יותר (< 10 גרם) מאשר התורם.</li>
		<li>שמור את החולדות מבוקר אקלים חדרים עם גישה חופשית מזון ומים לפני הניתוח.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. התורם המבצע
<ol><li>להזריק הבופרנורפין (0.05 מ"ג/ק"ג) subcutaneously בתור מקבל 1 שעה לפני הניתוח.</li>
	<li>עזים ומתנגד העכברוש התורם באמצעות אינהלציה איזופלוריין. שימוש 5 vol איזופלוריין % בקצב הזרימה של 1.5 ליטר/דקה בתוך קופסת פרספקס עבור אינדוקציה הרדמה, vol 2% איזופלוריין בספיקה 0.6-0.8 L/min בקונוס מסיכה לשם קיום הרדמה. לאשר עומק ההרדמה על-ידי ביצוע קמצוץ הבוהן, קמצוץ העור.</li>
	<li>לגלח כולו בעור בטן של העכברוש באמצעות מכונת גילוח חשמלית כדי לאפשר חשיפה מנקה. לחטא את העור המתאים עם פתרון povidone יוד.</li>
	<li>פתיחת חלל הבטן דרך חתך בצורת צלב באמצעות מספריים כירורגיים מהשורש של הפין הארכת עד 1 ס מ מעל xiphisternum לאורך לינאה אלבה, מן האמצע של החתך האורך. מרחיב אל קו טוב. Exteriorize של מערכת העיכול משמאל, לכסות את זה עם גזה רטוב.</li>
	<li>מלחציים ומשוך את xiphisternum לכיוון הראש באמצעות מלקחיים hemostatic. לנתח רצועה falciform, אל הרקמות סביב הכבד. לבודד, מאתרים ומפסיקים את הווריד השמאלי הסרעפת נחות בתפר משי 6-0.</li>
	<li>הכנסת סטנט המרה.<ol>
<li>מלחציים BD ממש מעל הנקודה שבה הווריד gastroduodenal מצטרף וריד שער הכבד, ומשוך אותו כדי לשמור על מתח קטן באמצעות microforceps. לאחר מכן לבצע חתך "V" של 1 מ מ אורך על הקיר הקדמי proximal המפגש בכיס המרה כ- 5 מ"מ על ידי מספריים מיקרו.</li>
		<li>הכנס סטנט לתוך לומן של המרה באמצעות של microforceps מעוקל. ודא כי לפחות מחצית השקרים סטנט מחוץ המרה.</li>
		<li>לאבטח סטנט בתפר משי 6-0. חותכים קצה אחד של התפר. תשמור על השני לקיים במהלך השקה מאוחר יותר. Transect המרה מתחת סטנט וודא שהמרה יכול לצאת סטנט.</li>
	</ol>
</li>
	<li>לבודד את IHVC עד לרמת וריד הכליה השמאלית. לפנות את IHVC של הרקמות הסובבות anterior ואת לרוחב על-ידי דיסקציה באד כותנה עד IHVC זה skeletonized. נפרדים, מאתרים ומפסיקים את הווריד יותרת הכליה, את הווריד כליות בדיוק בתפר משי 6-0.</li>
	<li>Heparinize העכברוש ב-50 שהזרקת U של הפארין מעורבבת עם 2 מ ל תמיסת רגילה דרך הווריד הגבי של הפין.</li>
	<li>Perfuse הכבד.<ol>
<li>לבודד את. העורק הראשי מתחת וריד הכליה השמאלית. להכניס צנתר 22-G אבי העורקים.</li>
		<li>לבצע ניקור, תהדק את העורקים החזי באמצעות של microforceps.</li>
		<li>Perfuse הכבד התורם דרך הקטטר באבי העורקים עם 20 מ ל תמיסת מלח רגיל המכיל 25 U של הפארין (4 ° C) בקצב של 3 mL/min עם משאבת אינפוזיה. בינתיים חותכים את הווריד הנבוב מתחת הווריד כליות נכון לאפשר את הפתרון זלוף לזרום מתוך הכבד.</li>
		<li>Transect את SHVC יחד עם חלק הסרעפת ואת IHVC ברמה של הווריד הכליה השמאלית של הכבד התורם הפכה החיוור.</li>
	</ol>
</li>
	<li>לנתח את רקמת החיבור המקיף PV על ידי מלקחיים מיקרו שני. מאתרים ומפסיקים ולחלק את הוורידים מולדת בתפר prolene 8-0. Transect PV ברמה של הווריד של הטחול. לסלק את הכבד התורם, לשטוף אותו עם תמיסת מלח רגיל קר. מקום זה בתוך תמיסת מלח קר אמבטיה 4 ° C.</li>
</ol>3. להשתיל הכנה
הערה: כל הפרוצדורות להכנת השתלת כבד מתבצעות בתוך אמבט מלוחים קרים ב 4 º C.
<ol><li>לצרף מגבון IHVC של התורם (איור 3).<ol>
<li>הכנס את IHVC לתוך השרוול שלה עם הסיומת השרוול והצביע לעבר הכבד. מקם את הסיומת השרוול על הקיר האחורי של IHVC. תיקון הסיומת השרוול את IHVC עם microforceps מעוקל עצמו מחובר באמצעות קליפ קובץ המכל מרחץ.</li>
		<li>אוורט בקצה הדיסטלי של IHVC מעל הגופה השרוול באמצעות מלקחיים מיקרו שני.</li>
		<li>אבטח את הקצה בתפר משי 6-0. ודא ש-IHVC זה לא מעוות בתהליך.</li>
	</ol>
</li>
	<li>חזור על שלב 3.1 ב- PV לצרף מגבון PV של התורם.</li>
	<li>לצרף טבעת מגנטית SHVC של התורם (איור 4).<ol>
<li>משוך את הסרעפת דרך ארבע המלקחיים, לקצץ את SHVC.</li>
		<li>עוברים את SHVC דרך טבעת מגנטית עם המלקחיים סגסוגת טיטניום מיקרו.</li>
		<li>מעל הטבעת, אוורט בקצה הדיסטלי של SHVC.</li>
		<li>אבטח את הטבעת 6-0 בתפר משי. ודא ש-SHVC זה לא מעוות בתהליך.</li>
		<li>הסר את הסרעפת עודף סביב הכבד.</li>
	</ol>
</li>
	<li>לטבול הכבד התורם באמבט מלוחים נורמלי קר ולאחסן ב 4 º C.</li>
</ol>4. הנמען מבצע
הערה: הסכימה של ההשתלה שתל בחולדה הנמען מוצג באיור5.
<ol><li>להזריק הבופרנורפין (0.05 מ"ג/ק"ג) subcutaneously בתור מקבל 1 שעה לפני הניתוח. עזים ומתנגד העכברוש התורם באמצעות אינהלציה איזופלוריין. שימוש 5 vol איזופלוריין % בקצב הזרימה של 1.5 ליטר/דקה בתוך קופסת פרספקס עבור אינדוקציה הרדמה, vol 2% איזופלוריין בספיקה 0.6-0.8 L/min בקונוס מסיכה לשם קיום הרדמה.</li>
	<li>לגלח את כל המעטפת בטן של העכברוש. לחטא את העור המתאים עם פתרון povidone יוד.</li>
	<li>פתח את חלל הבטן דרך חתך קו האמצע 4 ס מ. מקם את רטרקטורים בטן. משוך את הצלעות הכי רחוקים ככל האפשר מן האמצע.</li>
	<li>מלחציים ומשוך את xiphisternum לכיוון הראש באמצעות מלקחיים hemostatic. לנתח את רקמות החיבור והרצועות סביב הכבד. מאתרים ומפסיקים ולחלק רצועה hepato-הוושט. מאתרים ומפסיקים ולחלק את עורק הכבד בתפר prolene 8-0.</li>
	<li>לבודד את צינור המרה מן הכבד הפורטל הראשון. מקום suture משי 6-0 סביב צינור המרה מתחת חלוקתה, מאתרים ומפסיקים את צינור המרה.</li>
	<li>לנתח את IHVC למטה הווריד כליות. מאתרים ומפסיקים ולחלק את הווריד יותרת הכליה. מקום רצועה SHVC של הכבד.</li>
	<li>תהדק את IHVC מעל הווריד כליות עם קטעי microvessel. תהדק את PV ברמה של הווריד מולדת עם קטעי microvessel.<ol>
<li>לשטוף את הדם בכבד, לאט לאט להחדיר 2 מ ל תמיסת מלח דרך PV. גרור את הכבד על ידי משיכת הרצועה הקודם שמוקם. מהדק את SHVC וחלק הסרעפת עם סטינסקי.</li>
		<li>Transect את IHVC קרוב parenchyma של PV-hepatis פורטה. לסלק את הכבד על-ידי transecting את SHVC מעל הכבד. הסר את הכבד הנמען במהירות.</li>
	</ol>
</li>
	<li>לצרף טבעת מגנטית SHVC של המטופל.<ol>
<li>הכנס SHVC הנותרים של הנמען טבעת מגנטית.</li>
		<li>לתקן את טבעת מגנטית על סטינסקי על-ידי משיכה מגנטית.</li>
		<li>אוורט את SHVC מעל הטבעת מגנטי עד הספינה מכסה את הקצה של הטבעת.</li>
	</ol>
</li>
	<li>מקום orthotopically השתלת כבד את התורם, לכסות את זה עם גזה רטוב קר.</li>
	<li>למלא לומן של SHVCs של התורם, של המטופל עם תמיסת מלח רגיל. הסר את בועות האוויר ביסודיות כדי למנוע. תסחיף אוויר. סיום השחזור SHVC על-ידי התאמת הטבעות מגנטי מוטבע SHVC של התורם של המטופל יחד באמצעות כוח מגנטי.</li>
	<li>לשחזר את PV.<ol>
<li>בדרכי הענף הימני והשמאלי של PV של המטופל על ידי מושכים התפירות prolene של 8-0 כדי לשמור על המתח של PV.</li>
		<li>להעביר את המלחציים של המטופל PV למטה הווריד השוער לוריד הטחול על מנת לחשוף את הווריד באופן מלא.</li>
		<li>פצעים וחתכים בקיר הקדמי של הנמען. למלא לומן של PV עם תמיסת מלח רגיל.</li>
		<li>החזק את הסיומת השרוול של PV של התורם עם מלקחיים מעוקל.</li>
		<li>הכנס את הגוף השרוול של PV של התורם PV של הנמען בזמן לשמור על שטיפה לומן PV עם תמיסת מלח.</li>
		<li>. אבטחו עם במבניו קשירה משי 6-0 ליצור מחדש את זרימת הדם אל הכבד השתל על ידי שחרור את התפסים על PV ו SHVC.</li>
	</ol>
</li>
	<li>חזור על שלב 4.11-IHVC לשחזר את IHVC.</li>
	<li>לשחזר את צינור המרה על ידי הטכניקה סטנט.<ol>
<li>פצעים וחתכים "V" על הקיר הקדמי של צינור המרה הנמען.</li>
		<li>הכנסת סטנט התורם לומן של הנמען BD ולתקן את זה 6-0 בתפר במבניו משי. משוך התפרים על שני צינורות המרה יחד, לקשור את התפרים להביא BD קרובים אחד לשני.</li>
		<li>לעטוף omentum רקמות סביב האתר anastomotic למניעת דליפת מרה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>להשקיית הבטני עם תמיסת מלח רגיל חמים. סגור החתך בבטן בשתי שכבות עם רציפה תפירה נספגים 3-0.</li>
	<li>לנהל הספורוקסים 16 מ"ג/ק"ג (אנטיביוטיקה), 0.05 מ"ג/ק"ג. הבופרנורפין (מקבל) בזריקה תת עורית אחרי הניתוח באופן מיידי.</li>
	<li>מקם את החולדה בתוך כלוב נקי ולא לאפשר למזון ומים ad libitum.</li>
	<li>מזריקים הספורוקסים (16 מ"ג/ק"ג), הבופרנורפין (0.05 מ"ג/ק"ג) לתוך חלל הבטן כל 12 שעות במשך 3 ימים.</li>
</ol>

<ol><li>Aller, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+half+century+%281961-2011%29+of+applying+microsurgery+to+experimental+liver+research%5BTitle%5D)+AND+%22World+journal+of+hepatology%22%5BJournal%5D)">A half century (1961-2011) of applying microsurgery to experimental liver research.</a> World journal of hepatology. 4, 199-208 (2012).</li>
<li>Aller, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+value+of+microsurgery+in+liver+research%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+international+%3A+official+journal+of+the+International+Association+for+the+Study+of+the+Liver%22%5BJournal%5D)">The value of microsurgery in liver research.</a> Liver international : official journal of the International Association for the Study of the Liver. 29, 1132-1140 (2009).</li>
<li>Lee, S., Charters, A. C., Chandler, J. G., Orloff, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A technique for orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 16, 664-669 (1973).</li>
<li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47-50 (1979).</li>
<li>Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+visualized+experiments+%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation in rats.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , (2012).</li>
<li>Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+procedures+for+a+rat+model+of+partial+orthotopic+liver+transplantation+with+hepatic+arterial+reconstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+visualized+experiments+%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , e4376(2013).</li>
<li>Liu, X., He, C., Huang, T., Gu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+New+Technique+for+Reconstruction+of+Hepatic+Artery+during+Liver+Transplantation+in+Sprague-Dawley+Rat%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Development of a New Technique for Reconstruction of Hepatic Artery during Liver Transplantation in Sprague-Dawley Rat.</a> PloS one. 10, e0145662(2015).</li>
<li>Jamshidi, R., Stephenson, J. T., Clay, J. G., Pichakron, K. O., Harrison, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnamosis%3A+magnetic+compression+anastomosis+with+comparison+to+suture+and+staple+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+pediatric+surgery%22%5BJournal%5D)">Magnamosis: magnetic compression anastomosis with comparison to suture and staple techniques.</a> Journal of pediatric surgery. 44, 222-228 (2009).</li>
<li>Pichakron, K. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnamosis+II%3A+Magnetic+compression+anastomosis+for+minimally+invasive+gastrojejunostomy+and+jejunojejunostomy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Surgeons%22%5BJournal%5D)">Magnamosis II: Magnetic compression anastomosis for minimally invasive gastrojejunostomy and jejunojejunostomy.</a> Journal of the American College of Surgeons. 212, 42-49 (2011).</li>
<li>Gonzales, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnamosis+III%3A+delivery+of+a+magnetic+compression+anastomosis+device+using+minimally+invasive+endoscopic+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+pediatric+surgery%22%5BJournal%5D)">Magnamosis III: delivery of a magnetic compression anastomosis device using minimally invasive endoscopic techniques.</a> Journal of pediatric surgery. 47, 1291-1295 (2012).</li>
<li>Wall, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MAGNAMOSIS+IV%3A+magnetic+compression+anastomosis+for+minimally+invasive+colorectal+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Endoscopy%22%5BJournal%5D)">MAGNAMOSIS IV: magnetic compression anastomosis for minimally invasive colorectal surgery.</a> Endoscopy. 45, 643-648 (2013).</li>
<li>Xue, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Choledochojejunostomy+with+an+innovative+magnetic+compressive+anastomosis%3A+How+to+determine+optimal+pressure%3F%5BTitle%5D)+AND+%22World+journal+of+gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Choledochojejunostomy with an innovative magnetic compressive anastomosis: How to determine optimal pressure?</a> World journal of gastroenterology. 22, 2326-2335 (2016).</li>
<li>Yan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portacaval+shunt+established+in+six+dogs+using+magnetic+compression+technique%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Portacaval shunt established in six dogs using magnetic compression technique.</a> PloS one. 8, e76873(2013).</li>
<li>Dorman, R. M., Vali, K., Harmon, C. M., Zaritzky, M., Bass, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repair+of+esophageal+atresia+with+proximal+fistula+using+endoscopic+magnetic+compression+anastomosis+%28magnamosis%29+after+staged+lengthening%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+surgery+international%22%5BJournal%5D)">Repair of esophageal atresia with proximal fistula using endoscopic magnetic compression anastomosis (magnamosis) after staged lengthening.</a> Pediatric surgery international. 32, 525-528 (2016).</li>
<li>Russell, K. W., Rollins, M. D., Feola, G. P., Scaife, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnamosis%3A+a+novel+technique+for+the+management+of+rectal+atresia%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ+case+reports%22%5BJournal%5D)">Magnamosis: a novel technique for the management of rectal atresia.</a> BMJ case reports. , (2014).</li>
<li>Shi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+ring+anastomosis+of+suprahepatic+vena+cava%3A+novel+technique+for+liver+transplantation+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+international+%3A+official+journal+of+the+European+Society+for+Organ+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Magnetic ring anastomosis of suprahepatic vena cava: novel technique for liver transplantation in rat.</a> Transplant international : official journal of the European Society for Organ Transplantation. 28, 89-94 (2015).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

רבים קליני מתקדם השתלת כבד ניתן לייחס מחקרים שנעשו בבעלי חיים. עכברוש OLT הוא מודל נפוץ ומקובל גם במחקר של שימור איברים, השתלת אימונולוגיה, פיזיולוגיה, פתולוגיה. עם זאת, היא גם הליך מורכב מאוד, דורש מיומנות השתלה מתקדמות. למרות שיפורים רבים בהליך של עכברוש OLT, והחיבור SHVC נותרו צעד מאתגר. במאמר זה, אנו מתארים טכניקה השקה מגנטיים חדשניים עבור שיקום SHVC חולדה OLT. היישום של טכניקה זו לצמצם את זמן השיקום SHVC פחות מ 2 דקות, שלב anhepatic של החולדה OLT כ 10 דקות. אנו מאמינים שטכניקה זו יש השלכות גדול במחקר להשתלה.
<p ...

הדגם עכברוש של השתלת כבד orthotopic (OLT) חיוני עבור השתלה מחקר1,2. העכברוש הראשון OLT תוארה על ידי Lee. et al. ב 19733. במודל זה, כל כלי שוחזרו על ידי טכניקת היד-תפר. הטכניקה ' היד-תפר דורש מיומנויות השתלה מתקדמות, אשר מגביל משמעותית את הניצול. מאז, למגוון שינויים בפרוטוקול המקורי של עכברוש OLT דווחו. ביניהם, הטכניקה השרוול על השקה של וריד שער הכבד (PV), infrahepatic vena cava (IHVC) שדווחו על-ידי קמהדע. et al. ב-1979 נחשב על שיפור משמעותי מודל זה, כמו זה לפשט באופן משמעותי את ההליכים שחזור4 . עם זאת, בשל הקיר הקדמי קצר של הנמענים suprahepatic הנבוב העליון (SHVC), הטכניקה השרוול הוא קשה מאוד לשימוש מחדש של SHVC. רוב החוקרים בתחום זה עדיין להשתמש בטכניקה היד-תפר SHVC שיקום, מה שהופך אותו השלב צוואר בקבוק ב עכברוש OLT5,6,7.
הטכניקה השקה מגנטי (קרי, magnamosis) היא שיטת חיבור שתי ספינות או מבנים צינורי אחרים באמצעות הכוח אטרקטיביים בין שני מגנטים8,9,10,11. הכוח המגנטי בהדרגה דוחס, remodels הרקמה לתוך12,השקה חזק, sutureless13. השקה דחיסה זה הוכח כיעיל בני14,15. עיצבנו זוג טבעות מגנטי במיוחד עבור ההשקה של SHVC אצל חולדות. מחקר שנערך שלנו הראו כי הטכניקה השקה מגנטי עדיפה טכניקת היד-תפר שיקום SHVC חולדה OLT16. מטרת מאמר זה היא לספק פרוטוקול מפורט, צעד אחר צעד עבור שחזור SHVC בחולדות בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים.

<table><tbody><tr><td>מכונת הרדמה</td><td>הרווארד</td><td>&nbsp; שולחן</td><td>הרדמה לבעלי חיים</td></tr><tr><td>PLX7000B HF נייד דיגיטלי C-arm מערכת</td><td>פרלונג PLX7000B רפואי</td><td></td><td>הוא משמש בעיקר לאנגיוגרפיה וצילום של פעולות שונות</td></tr><tr><td>משאבת מזרק</td><td>Mindray</td><td>BeneFusion SP5</td><td>עירוי תוך ורידי</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>RWD Life Science Co.</td><td></td><td>הרדמה: לאינדוקציה ותחזוקה של הרדמה</td></tr><tr><td>iohexol</td><td>שנחאי General Pharmaceutical Co</td><td></td><td>&nbsp; חומרי ניגוד תוך-וסקולריים&nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>הזרקת נתרן הפרין</td><td>SPH מס' 1 ביוכימי & פרמצבטיקה בע"מ&nbsp;</td><td></td><td>&nbsp; למנוע היווצרות פקקת&nbsp;</td></tr><tr><td>צפורוקסימה&nbsp;</td><td>Glaxo Operations UK Limited&nbsp;</td><td></td><td>אנטיביוטיקה</td></tr><tr><td>בופרנורפין&nbsp;</td><td>TIPR פרמצבטיקה אחראית ושות', בע"מ</td><td></td><td>משכך כאבים</td></tr><tr><td>מיקרו-מלקחיים מעוקל</td><td>שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ.</td><td>W40350</td><td>כלי כירורגי</td></tr><tr><td>מלקחיים המוסטטיים (ישר)</td> <td>שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ.</td><td>J31010</td><td>כלי כירורגי</td></tr><tr><td>מלקחיים המוסטטיים (מעוקלים)</td> <td>שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ.</td><td>J31020</td><td>כלי כירורגי</td></tr><tr><td>Satinsky clamp</td><td>שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, Corp.</td>מחזיק מחט <td>כלי כירורגי</td> <td>XEC050</td></tr><tr><td></td><td>שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ.</td><td>J32010</td> מחזיק מיקרו-מחט <td>כלי כירורגי</td></tr><tr><td></td><td>שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ.</td><td>WBA040</td><td>כלי כירורגי</td></tr><tr><td>מלקחיים מחורצים</td><td>שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ.</td><td>J42010</td><td>כלי כירורגי</td></tr><tr><td>מלקחיים לרקמות (עם וו)</td> <td>שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ.</td><td>J41010</td> מספריים <td>רקמות כלי כירורגי</td></tr><tr><td></td><td>שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ.</td><td>Y00040</td><td>מספריים כירורגיים כלי כירורגי</td></tr><tr><td></td><td>שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ.</td><td>Y00030</td><td>כלי כירורגי</td></tr><tr><td>מיקרו מספריים</td><td>שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ.</td><td>MR-S121T</td><td>כלי כירורגי</td></tr><tr><td>מיקרו-כלי קליפס</td><td>שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ.</td><td>XEC240</td><td>כלי כירורגי</td></tr><tr><td>מיקרו-מלקחיים ישרים (סגסוגת טיטניום)</td> <td>שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ.</td><td>כלי כירורגי</td> <td>WCC010</td></tr><tr><td>מיקרו-מלקחיים מעוקלים&nbsp; (סגסוגת טיטניום)</td><td>שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) בע"מ, קורפ.</td><td>כלי כירורגי</td> <td>WCC020</td></tr></tbody></table>

מודל עכברוש של orthotopic השתלת כבד בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים עבור שחזור הנבוב suprahepatic

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

הדגם עכברוש של השתלת כבד orthotopic (OLT) חיוני למחקר השתלות. זה מודל בעלי חיים מאוד מתוחכמים ודורש עקומת למידה תלולה. המבוא של הטכניקה השרוול על השקה של וריד שער הכבד (PV), infrahepatic הנבוב העליון (IHVC) פישטה משמעותית בניתוח השתלה אצל חולדות. עם זאת, בשל הקיר הקדמי קצר של הנמענים suprahepatic הנבוב העליון (SHVC), הטכניקה השרוול הוא קשה מאוד לשימוש מחדש של SHVC. רוב החוקרים בתחום זה עדיין להשתמש בטכניקה היד-תפר SHVC שיקום, מה שהופך אותו השלב צוואר בקבוק בהשתלת הכבד orthotopic חולדה. הטכניקה השקה מגנטי (קרי, magnamosis) היא שיטת חיבור שתי ספינות באמצעות הכוח אטרקטיביים בין שני מגנטים. מחקר שנערך שלנו הראו כי הטכניקה השקה מגנטי עדיפה טכניקת היד-תפר SHVC שחזור בחולדות. במאמר זה אנו מראים פרוטוקול צעד אחר צעד עבור שחזור SHVC בחולדות בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים. במודל זה, השחזור של PV, IHVC בוצע על ידי טכניקה סטנדרטית קאף, בזמן השחזור של המרה (BD) בוצע על ידי טכניקה סטנט. Arterialization מחדש הכבד לא בוצעה. הטכניקה השקה מגנטי עשוי שחזור SHVC הרבה יותר קל וקיצור משמעותי השלב anphepatic. אחרי עקומת למידה סבירה, אפילו חוקרים ללא מיומנויות השתלה מתקדמות יכול לייצר תוצאות לשחזור ואמין באמצעות מודל זה עכברוש של OLT.

לאחר כ 10 ניסיונות, הטכניקה השקה מגנטי עבור שחזור SHVC היה mastered בהצלחה ע י חוקר שהיה לו שום הכשרה השתלה מוקדמת. השחזור של SHVC לקח פחות מ 2 דקות. השלב anhepatic של החולדות הנמען היה כ- 10 דקות. אין פקקת, דימום או angiostegnosis נצפתה ב 1, 5 ו 30 ימים לאחר פגיעה reperfusion באתר anastomotic SHVC. Cavography vena נחות בוצעה ב 2 שבועות לאחר ההשתלה. כפי שמוצג באיור 6, הטבעות מגנטי היו שלמים, זרימת הדם היה פטנט דרך ההשקה SHVC. שיעור ההישרדות שלאחר ההשתלה היה 9...

השחזור של הווריד הנבוב suprahepatic (SHVC) נשאר צעד קשה בהשתלת הכבד orthotopic חולדה. במאמר זה אנו מראים פרוטוקול צעד אחר צעד עבור שחזור SHVC בחולדות בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים.

מודל עכברוש של Orthotopic השתלת כבד בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים עבור שחזור הנבוב Suprahepatic

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

המטרה הכוללת של פרוטוקול זה היא להציג מודל השתלת כבד אורתוטופי של חולדה באמצעות טכניקת אנסטומוזה מגנטית לשחזור וריד נבוב על-הפטי. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלת מפתח במודל השתלת כבד לגבי שחזור וריד נבוב על-הפטי. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא בכך שהיא מפחיתה את השלב האנפטי של השתלת כבד ומשפרת מאוד את שיעור ההישרדות לאחר הניתוח.ראשית, יש לגלח את כל עור הבטן של החולדה. יש לחטא את העור המתאים בתמיסת פובידון-יוד. נתח את הרצועה הפלציפורמית סביב הכבד.לאחר מכן, בודד וקשר את הווריד הפרני התחתון השמאלי. בצע חתך V בדופן הקדמית. הכנס את הסטנט ללומן של צינור המרה.ודא שלפחות מחצית מהסטנט נמצא מחוץ לצינור המרה. אבטח את הסטנט עם תפר משי 6-0. חותכים קצה אחד של התפר.שמור את השני להחזיק במהלך אנסטומוזיס מאוחר יותר. בודד את הווריד הנבוב האינפרה-כבדי עד לרמת וריד הכליה השמאלי. נתח אותו עד שהשלד של הווריד הנבוב התת-כבדי.הפרד וקשר את הווריד העל-פרנלי הימני. הפרד וקשר את וריד הכליה הימני. הפרין את החולדה דרך הווריד הגבי של הפין.הכנס קטטר בגודל 22 לאבי העורקים הבטני מתחת לווריד הכליה השמאלי. בצע כריתת בית החזה. מהדקים את אבי העורקים החזי באמצעות מיקרו-מלקחיים.לחלחל את הכבד התורם דרך הצנתר באבי העורקים. לחצות את הווריד הנבוב העל-הפטי. בינתיים, חתכו את הווריד הנבוב מתחת לוורידי הכליה הימניים כדי לאפשר לפרפוזה לזרום החוצה מהכבד.נתח את רקמת החיבור המקיפה את וריד הפורטל. קשר וחלקו את הווריד הפילורי. לחצות את וריד הפורטל בגובה וריד הטחול.לחצות את הווריד הנבוב האינפרה-כבדי בגובה וריד הכליה השמאלי. תכשירים להשתלת כבד מבוצעים באמבט מי מלח של ארבע מעלות צלזיוס. הכניסו את הווריד הנבוב לתוך השרוול שלו, כאשר הארכת השרוול פונה לכיוון הכבד.הרחק את הקצה הדיסטלי של הווריד הנבוב התת-כבדי מעל גוף השרוול. אבטח את הקצה עם תפר משי 6-0. חזור על השלבים לעיל על וריד הפורטל כדי לחבר שרוול לווריד הפורטל של התורם.משוך את הסרעפת דרך המלקחיים, וחתוך את הווריד הנבוב העל-פטי. העבירו את הווריד הנבוב העל-הפטי דרך הטבעת המגנטית. מעבר לקצה הדיסטלי של הווריד הנבוב העל-הפטי מעל הטבעת.ואבטח את הטבעת עם תפר משי 6-0. לאחר מכן, הסר את עודפי הסרעפת סביב הכבד. הניחו תפר משי 6-0, וקשרו את צינור המרה המשותף.בודד את צינור המרה המשותף מפורטל הכבד הראשון. קשרו וחלקו את וריד יותרת הכליה הימני. הנח רצועה בווריד הנבוב העל-הפטי של הכבד.מהדקים את הווריד הנבוב התת-כבדי ממש מעל וריד הכליה הימני בעזרת קליפסים של כלי דם. מהדקים את וריד הפורטל בגובה הווריד הפילורי. הזריק שני מיליליטר מי מלח רגילים דרך וריד הפורטל באיטיות כדי לשטוף את הדם מהכבד.גרור את הכבד כלפי מטה על ידי משיכת הרצועה הקודמת שהוצבה. מהדקים את הווריד הנבוב העל-הפטי וחלק מהסרעפת בעזרת מהדק סטינסקי. כרתו את הכבד על ידי מעבר הווריד הנבוב העל-הפטי ממש מעל הכבד.לחצות את הווריד הנבוב האינפרה-כבדי קרוב לפרנכימה ולווריד הפורטלי בפורטה הפטיס. הכנס את הווריד הנבוב העל-הפטי הנותר של הנמען לטבעת מגנטית. קבע את הטבעת המגנטית על Satinsky clamp על ידי משיכה מגנטית.הרחק את הווריד הנבוב העל-הפטי מעל הטבעת המגנטית. הנח את שתל הכבד של התורם בצורה אורתוטופית, ומלא את הלומן בתמיסת מלח רגילה, תוך צימוד הטבעות המגנטיות כדי למלא את מבנה הכלי. שחזר את וריד השער.מלאו את לומן וריד הפורטל במי מלח רגילים. הכנס את גוף השרוול של וריד הפורטל של התורם לווריד הפורטל של המקבל. ואבטח את זה עם קשירת משי היקפית של 6-0.הסר את ה-Satinsky clamp מהווריד הנבוב העל-הפטי. חתך V על הדופן הקדמית של צינור המרה המשותף. הכנס את הסטנט של התורם ללומן של צינור המרה המקבל.ותקן את זה עם תפר היקפי משי 6-0. משוך את התפרים בשתי דרכי המרה יחד, וקשר את התפרים כדי לקרב את דרכי המרה זו לזו. האנגיוגרפיה POD של שבועיים הראתה זרימת דם פטנטית של הווריד הנבוב העל-הפטי אנסטומוזיס.שיעור ההישרדות לאחר ההשתלה היה עד 85% ליום 30 POD. טכניקת האנסטומוזה המגנטית מאפשרת שחזור קל ומהיר של וריד נבוב בחולדות. לאחר צפייה בסרטון זה, ללא כישורים מיקרוכירורגיים מתקדמים, יכול להפיק תוצאות אמינות וניתנות לשחזור באמצעות מודל חולדה זה של השתלת כבד.

a-rat-model-orthotopic-liver-transplantation-using-novel-magnetic

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אנו מציגים גרסה לא קל ליצור בטכניקה של שתי השרוול קלאסית השתלת כבד orthotopic בחולדה.

השתלת כבד Orthotopic בחולדות

השתלת הכבד orthotopic בחולדות היא מודל ניסיון הכרחי למחקר ביו. כאן אנו מציגים הניתוחים שלנו להשתלת כבד חולדת orthotopic עם שחזור עורק כבד באמצעות 50% שתל חלקי.

ניתוחים למודל חולדה של השתלה כבדה orthotopic חלקית עם שחזור עורקית כבדיה

נתאר לנו את העיצוב של המכשיר "מהיר מקשר" להשתלת כבד חולדת orthotopic קלה יותר.

התקני ייצור מכשירים להשתלת כבד חולדה קלה יותר

אנו מתארים טכניקה חדשה להשתלת לב-ריאה בטנית הטרוטופית (HAHLT) בחולדות. תצורת ההשתלה מביאה לזרימת שתל טעונה חלקית, המאפשרת הערכה תפקודית ישירה. מודל זה עשוי לשמש למחקרים חריפים או כרוניים של תפקוד ומצב חיסוני של השתל המושתל.

עכברוש Heterotopic בטן לב / השתלת ריאה בודדת בתצורה טעונה נפח

כאן, מוצג פרוטוקול מעורבים השתלת כבד חלקית עכברוש arterialized מחדש. באופן ספציפי, 70% הכבד היה resected ויוו באמצעות טכניקת מעודכן של hepatectomy מונחה כלי השיט. עורק הכבד שוחזר בצורה הקצה לצד. הטכניקה השרוול שונה כדי לקצר את זמן השקה של infrahepatic את הווריד הנבוב.

מחדש Arterialized השתלת הכבד חלקית עכברוש עם ויוו מונחה כלי 70% Hepatectomy

המטרה של מחקר זה היא לשנות את מודל השתלת כבד אורתוטופית חולדה כדי לייצג טוב יותר השתלת כבד אנושי ולשפר את הישרדות הנמען. השיטה המוצגת מחדש את זרימת העורקים הכבדים על ידי חיבור עורק הכבד המשותף של הכבד התורם לעורק הכבד התקין של הכבד הנמען.

סיבוכים מופחתים לאחר חיבור מחדש עורקי במודל חולדה של השתלת כבד אורתוטופית

בפרוטוקול זה נדון ביישום מודל של השתלת כבד אורתוטופית מוצלחת (OLT) בעכברים. בנוסף, נדונים גם אדג'ובנטים לניתוח נוסף של פטנטיות אלוגרפט לאחר OLT מוצלח בעכבר, במיוחד באמצעות סריקות טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת (microCT).

השתלת כבד אורתוטופית מוצלחת בעכברים באמצעות טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת אנגיוגרפיה

פרוטוקול זה מספק מידע טכני לשחזור כלי דם באמצעות טכניקת השרוול בהשתלת כבד אורתוטופית בעכבר.

שחזור כלי דם בטכניקת השרוול בהשתלת כבד אורתוטופית בעכבר

פרוטוקול השתלת כבד עזר הטרוטופי של חולדות המתואר כאן מציע כלי מחקר מעשי לחקר מנגנונים של דחיית השתלת כבד. מודל זה מסייע להקל על המכשולים הכירורגיים והלחץ של בעלי חיים של השתלת כבד אורתוטופית בחולדות.

מודל השתלת חולדה בכבד שלם עזר הטרוטופי תוך שימוש בכבד כבד למחקרי דחיית אלוגרפט

וידאו זה מדגים את מודל orthotopic השתלת מסתם אאורטלי כמודל פשוט ללמוד את הפיתוח של vasculopathy ההשתלה (TVP) בחולדות.

Orthotopic אבי העורקים להשתלות: מודל עכברוש לחקר התפתחות vasculopathy כרונית

למד טכניקת אנסטומוזה מגנטית לשחזור הווריד הסופראהפטי בהשתלת כבד אורתוטופית בעכברוש. שיטה זו מקצרת את שלב האנהפטי ומשפרת את שיעורי ההישרדות לאחר הניתוח.

מודל עכברוש של Orthotopic השתלת כבד בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים עבור שחזור הנבוב Suprahepatic

גלה סרטונים נוספים