החזרה של שוחרת סמים בעכברים באמצעות הפרדיגמה העדפה המקום ממוזגים
7 ביוני 2018
פרוטוקול זה מתאר את העדפה המקום ממוזגים (CPP) כמודל של relapse. הליך זה מאפשר את המדידה של relapse בחיות מעבדה, שקילת ההשפעה של התרופה-הקשורים רמזים סביבתיים כמו התשוקה והוא relapse בשנת מכורים נמנעים כרגע המוקד של תוכניות טיפול שימוש בסמים.
המטרה הכוללת של הליך זה היא להעריך את החזרת התנהגות חיפוש הסמים בחיות מעבדה בהתחשב בהשפעת הרמזים הסביבתיים והלחץ הקשורים לתרופה. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום ההתמכרות לסמים, כגון התפקיד של מניפולציות סביבתיות שונות שיכולות לווסת את ההישנות לחיפוש סמים. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהחזרת ה-CPP נחשבת כמשקפת את ההפעלה מחדש של ערך התמריץ המוטיבציוני של גירוי ההקשר בשילוב עם התרופה העקבית בהופעה המחודשת של התנהגות הגישה להקשר.
ההשלכות של טכניקה זו משתרעות על האתולוגיה של הישנות סמים, מכיוון שזו דרך שימושית ורגישה להעריך מניפולציות סביבתיות שונות, שהן הטריגרים העיקריים להישנות אנושית. חדש בשיטה זו יתקשה מכיוון שמודל ההחזרה רגיש מאוד לשינויים סביבתיים. מצב החדר והסביבה צריך להישאר קבוע במהלך ההליך, במיוחד עם בני זוג מהמין השני, רעשים או תנאי תאורה.
התגובות לתרופה והחזרה הנגרמת על ידי מתח מבוצעות על ידי הליכים שונים שיכולים להשפיע על התוצאות. במיוחד מסיבה זו, חשוב להראות תבוסה חברתית כגורם מכריע להחזרה. כדי להתחיל, טפל בעכברים במשך דקה עד שתיים כל שלושה ימים לפני הבדיקה.
הגדר קופסאות זהות, חדר בדיקות ותמיסת קוקאין, לפי ההוראות בפרוטוקול הכתוב. כל יום, הביאו את העכברים לחדר הבדיקות בכלובים הביתיים שלהם. אפשר לעכברים לשבת ללא הפרעה במשך 15 דקות, כתקופת ההתרגלות לכל הרעשים והגירויים הקשורים לבדיקה.
ודא שדלתות הגיליוטינה הוסרו מהכלוב, והתחל להגדיר את המחשב. הזן את מזהה העכבר ולחץ על הפקודה ניסיון והתחל. לאחר מכן, הנח את העכבר בתא האמצעי של הקופסה, ושמור על רעש מינימלי בחדר הבדיקות.
בסיום הניסוי, אספו את העכברים בחזרה לכלובים הביתיים שלהם, ושמרו את הנתונים במחשב. אפשר לכל עכבר לגשת לשני תאי הקופסאות למשך 15 דקות ביום, במשך שלושה ימים רצופים. ביום השלישי, רשום את משך הזמן שכל עכבר מבלה בכל תא.
לאחר מכן, הקצו מחצית מהעכברים לקבל את התרופה בתא אחד ואת החצי השני בתא השני. ראשית, שקלו את העכברים כדי לקבוע את מינון הקוקאין המתאים. לאחר מכן, הכינו מזרקים עם המינון המתאים של קוקאין או מי מלח.
הזריק כל עכבר בכל פעם תוך צפק, והנח אותו בעדינות בתא שהוקצה לו. לאחר ארבע שעות, הזריק את מנת הקוקאין, והגביל את העכבר לתא המזווג שלו למשך 30 דקות. ודא שדלתות הגיליוטינה המפרידות בין שני התאים סגורות.
ביום הבדיקה שלאחר ההתניה הביאו את בעלי החיים לחדר הבדיקה, ואפשרו להם להתרגל למשך 15 דקות. הסר את דלתות הגיליוטינה, הפריד בין שני התאים והגדר את תוכנת המחשב. הזן את מזהי בעלי החיים ולחץ על פקודת ההתחלה.
רשום את משך הזמן שהעכברים הלא מטופלים בילו בתא הקופסה במהלך תקופת התצפית של 15 דקות. כשתקופת התצפית מסתיימת, אספו את העכברים בחזרה לכלובי הבית שלהם, ושמרו את הנתונים במחשב. בכל שבוע, ערכו מפגש הכחדה עם כל העכברים שהפגינו העדפה לתא מזווג התרופות.
ראשית, הסר את דלת הגיליוטינה מהקופסה, והניח את החיה בקופסה למשך 15 דקות. כאשר קבוצה שלמה לא מפגינה העדפה לתא המזווג לתרופות, חזור על הבדיקה 24 שעות לאחר מכן כדי לאשר את ההכחדה. כדי להחזיר את החיות לחדר אחר 24 שעות לאחר אישור ההכחדה.
לאחר מכן, הזריקו להם מחצית מהמינון הקודם של קוקאין, והחזירו אותם לוויווריום שלהם למשך 15 דקות. לאחר מכן, הכניסו את העכברים לחדר הבדיקות, והניחו אותם בקופסה למשך 15 דקות. רשום את משך הזמן שכל עכבר מבלה בכל תא, ושמור את הנתונים במחשב.
כדי להעריך את ההשפעות של החזרה למצב המושרה על ידי לחץ, קחו את העכברים לחדר אחר 24 שעות לאחר אישור ההכחדה. לאחר מכן, הכניסו עכבר ניסיוני לכלוב פלסטיק עם עכבר יריב אגרסיבי למשך 10 דקות. לאחר המפגש האנטגוניסטי, הוציאו את עכברי הניסוי והביאו אותם לחדר הבדיקות.
לבסוף הסר את דלת הגיליוטינה, ושמור את העכברים בקופסה למשך 15 דקות. בנוגע ללחץ חברתי, עלינו לאשר שהחיה אכן הובסה. מפגש חברתי חיובי, שאינו מסתיים בתבוסה, מראה השפעות הגנה, וחוסם את החזרת העדפת המקום לקוקאין.
באמצעות פרוטוקול CPP, עכברים זכרים במחקר זה היו נתונים למניפולציות סביבתיות שונות כדי למדוד הישנות מקוקאין. החזרה המושרה על ידי תחול הייתה נתונה למינונים יורדים לאחר מכן עד שמינון ההתחלה אושר כלא יעיל. כפי שמוצג באיור זה, להתחלה עם 12.5, 6.25, 3.125 ו-1.56 מיליגרם לק"ג קוקאין הייתה השפעה משמעותית על החזרת הקוקאין.
העכברים היו נתונים לאינטראקציה חברתית, שבה חיות הניסוי הובסו על ידי יריב אגרסיבי כדי למדוד את החזרה למצב כתוצאה ממתח. חשיפה לחיה תוקפנית והובסה 15 דקות לפני הניסוי הובילה להחזרת ההעדפה שנכחקה בעבר. עכברים שסבלו מתבוסה חברתית חוזרת ונשנית לפני הליך ה-CPP, הראו השפעות מתגמלות מותאמות של מינונים נמוכים של קוקאין.
לאחר הכחדת ההעדפה, עכברים מובסים חברתית החזירו את העדפתם עם מינון ראשוני של 0.5 מיליגרם בלבד לק"ג קוקאין. חשוב לזכור שנקודת המפתח של מחקר ההתמכרות לקראק היא פיתוח טיפולים המפחיתים את התשוקה וכתוצאה מכך מפחיתים את הפגיעות להישנות. ניתן לבצע שיטות אחרות, כמו מתן עצמי תוך ורידי, על מנת לענות על שאלות נוספות כמו כפייתיות או מוטיבציה להשיג את התרופה.
לאחר התפתחות זו, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום ההתמכרות לסמים לחקור את החזרה לחיפוש סמים בעכברים. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לגרום להישנות באמצעות מניפולציות סביבתיות שונות, כגון הקשר או רמזים לתרופות, אשר מבססים מחדש את העדפת המקום.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
סקירה כללית
פרוטוקול זה מתאר את שיטת העדפת המקום המותנית (CPP) כמודל להזרה, תוך התמקדות במדידת ההזרה בבעלי חיים במעבדה. הוא מדגיש את השפעתם של רמזים סביבתיים הקשורים לסמים על תשוקה והזרה, שהם תחומים קריטיים בתוכניות לטיפול בהתמכרות לסמים.
מרכיבי מפתח של המחקר
תחום המדע
- מדעי המוח
- פסיכולוגיה התנהגותית
- מחקר על התמכרויות לסמים
רקע
- CPP היא שיטה נפוצה לחקר התנהגות של חיפוש סמים.
- הפרוצדורה מעריכה את ההשפעה של רמזים סביבתיים על נסיגה (relapse).
- הבנת רמזים אלה חיונית לפיתוח אסטרטגיות טיפול יעילות.
- הרגישות של המודל לשינויים סביבתיים היא קריטית לקבלת תוצאות מדויקות.
מטרת המחקר
- להערכת השחזור של התנהגות חיפוש סמים בבעלי חיים במעבדה.
- לבחינת תפקידן של מניפולציות סביבתיות בהישחוק (relapse) של שימוש בסמים.
- לספק תובנות לגבי האתולוגיה של הישחוק של שימוש בסמים.
שיטות שנעשה בהן שימוש
- תהליך העדפת מקום מותנית (CPP).
- הערכה של רמזים סביבתיים וגורמי סטרס.
- תנאים מבוקרים למזעור השפעות חיצוניות.
- הערכה של תגובות התנהגותיות להקשרים הקשורים לתרופה.
תוצאות עיקריות
- החזרת ה-CPP משקפת את הפעלתו מחדש של הערך המוטיבציוני של התמריץ.
- מניפולציות סביבתיות משפיעות באופן משמעותי על התנהגות חיפוש הסמים.
- תנאי חדר ותנאים סביבתיים עקביים חיוניים לקבלת תוצאות מהימנות.
- הטכניקה רגישה לשינויים בגורמים סביבתיים.
מסקנות
- CPP הוא כלי בעל ערך לחקר מנגנוני חזרת התחלבות של תרופות.
- הבנת טריגרים סביבתיים יכולה לסייע בגישות טיפוליות.
- נדרש מחקר נוסף כדי לבחון את הניואנסים של השפעות סביבתיות על חזרת התחלבות.
שאלות נפוצות
רלוונטיות תעשייתית למס으로는
מודל השחזור של העדפת מקום מותנית (CPP) מספק מסגרת ניבוי להערכת טריגרים סביבתיים להישחלות בהפרעות של שימוש בחומרים, ובכך תומך בתיקוף מטרות בטיפולים להתמכרויות. באמצעות כימות של שחזור התנהגות חיפוש סמים שכובדה, המונח על ידי רמזים או סטרס, הבדיקה מאפשרת הפחתת סיכונים מכניסטית של תרכובות שמטרתן להפחית את הפגיעות לדחפים (craving). תוצאה התנהגותית זו מסייעת בקבלת החלטות לגבי תיקי תרופות על ידי זיהוי התערבויות המודולות את הערך המוטיבציוני התמריצי ללא השפעה על חיזוק ראשוני.
יישומים אסטרטגיים במחקר ופיתוח בביופארמה
גילוי מוקדם ותיקוף מטרה
- ערך מדעי: בוחן השערות טיפוליות הנוגעות לתגובתיות לרמזים ונתיבי סטרס במודלים של נסיגה (relapse) מהתמכרויות.
- ערך תפעולי: מאפשר תיקוף פונקציונלי של מטרות המעורבות במוטיבציה לתגמול (incentive motivation) באמצעות שחזור התנהגותי מדיד.
- ערך ניבוי: מחזק את הביטחון במעורבות המטרה על ידי מדידת ההפחתה בשחזור ההתנהגות תחת מניפולציות פרמקולוגיות.
סריקה ופיתוח בדיקות (Assay)
- מוכנות הבדיקה: הכנת מערכות ביולוגיות עובדות להערכת תגובה למינון של priming ושחזור מושרא על ידי סטרס.
- פלט כמותי: הפקת מדידות של זמן-בתא המאפשרות השוואה סטנדרטית בין תנאי הבדיקה.
- שחזור: דורש בקרה סביבתית קפדנית כדי להבטיח קריאות שחזור אמינות לאורך הסשנים.
מחקר תרגומי ופרה-קליני
- רלוונטיות למחלה: מדמה טריגרים להישנות אנושית, כגון רמזים לתרופה וסטרס חברתי, ובכך משפר את התקפות התרגומית.
- המשכיות מנגנונית: מקשר בין ממצאי שלב הגילוי להערכה פרה-קלינית של התערבויות למניעת הישנות.
- קידום מותאם סיכונים: מספק בסיס להחלטות של המשך או הפסקת פיתוח (go/no-go) על בסיס הפחתת השיקום על ידי תרופות מועמדות.
שילוב תהליכי עבודה וצנרת עיבוד (Pipeline)
בדיקת השחזור של ה-CPP משתלבת ברצף הגילוי, החל מבדיקת השערות לגבי המטרה ועד לאופטימיזציה של מובילים, ובכך מאפשרת הערכה חוזרת של תרכובות המשפיעות על הפגיעות להישנות.
- ביולוגיה של הגילוי: תומך בבדיקת השערות על מעגלים עצביים הקושרים רמזים סביבתיים להתנהגות של חיפוש סמים.
- סינון: מספק מדדים כמותיים, המאומתים באמצעות הכחדה, להערכת השפעות של תרכובות על עוצמת ההחזרה.
- אנליטיקה: מספק משתנים תלויים מבוססי זמן המאפשרים השוואה סטטיסטית בין החזרה המושרה על ידי סמים לבין זו המושרה על ידי סטרס.
- מחקר תרגומי: מקשר בין תוצאות של מניפולציה סביבתית לבין התקפות פרה-קליניות של מודלים של נביקה.
- שימוש חוזר ארגוני: משמש כפלטפורמה לשימוש חוזר להערכת מטרות טיפוליות מרובות על פני אינדיקציות שונות של התמכרות.
השפעה תפעולית וארגונית
- ערך מדעי: מפחית עמימות מכניסטית על ידי בידוד תרומות ספציפיות לרמזים וללחץ בהתנהגות דמוית רליפס.
- ערך תפעולי: מספק מדדים התנהגותיים סטנדרטיים בעלות נמוכה, בעלי רגישות גבוהה למניפולציות פרמקולוגיות וסביבתיות.
- ערך אסטרטגי: משפר את איכות קבלת ההחלטות לגבי המשך או הפסקת פיתוח (go/no-go) באמצעות חיזוי סיכון לרליפס קליני במודלים של אתגר סביבתי.
- השפעה על הפורטפוליו: מאפשר תיעדוף מותאם סיכון של תרכובות המראות הנחתה של התחדשות (reinstatement) בפרדיגמות רליפס מתוקפות.
שיקולים ליישום
- דורש מומחיות במדעי המוח ההתנהגותיים וטיפול במכרסמים לצורך ביצוע עקבי של בדיקות הכחדה (extinction) והחזרה (reinstatement).
- תלוי במכשור סביבתי מבוקר כדי למזער משתנים מתערבים כגון אור, רעש ורמזים חברתיים.
- מחייב סטנדרטיזציה בין-צוותית של קריטריוני הכחדה וטריגרים להחזרה בין מעבדות שונות.
- כולל שיקולי התאמה בעת תרגום פרוטוקולים בין מינים שונים או פרדיגמות של סטרס.
- מוגבל להערכת הפגיעות לנסיגה; אינו מודד חיזוק ראשוני או חיפוש כפיי של סמים ללא מודלים משלימים.
