הערכה שיטתית של רווחה בעכברים להליכי באמצעות הרדמה כללית

המטרה הכוללת של פרוטוקול זה היא להעריך את רווחתם של עכברים לאחר שעברו הליכים הכוללים הרדמה כללית ולספק נתונים מבוססים מדעית כדי לתמוך בסיווג החומרה על פי הנחיית האיחוד האירופי 2010/63. פרוטוקול זה יכול לעזור לענות על שאלות מפתח על רווחת בעלי חיים בתחום מדעי חיות המעבדה כגון מידת המצוקה הנגרמת על ידי הליכים הכוללים הרדמה כללית. היתרון העיקרי של פרוטוקול זה הוא שהרווחה מוערכת של כל עכבר באופן מדעי מבוסס בעלי חיים וניתן להתאים פרוטוקול זה בקלות ולשלב אותו במחקרים מתוכננים אחרים.

הרעיון לפרוטוקול זה עלה לנו לראשונה כאשר שיערנו שאם הרדמה חוזרת גורמת ללחץ רב יותר בעכברי מעבדה מאשר חשיפה בודדת, נתונים מבוססי מדעית יהיו חסרים. בשלב זה, הכינו קופסת זכוכית בשטח רצפה של כ -220 מילימטרים על 290 מילימטרים וגובה של 390 מילימטרים. מכסים את הרצפה בכ- 0.5 סנטימטרים של חומר מצעים.

לאחר מכן פזרו חופן חומר מצעים משומש מהכלוב הביתי על גבי חומר המצעים החדש כדי להפחית את המצוקה הנגרמת מהסביבה החדשה. לספק מזון ומים. העבירו בעדינות את העכבר לכלוב התצפית ואפשרו לעכבר להתרגל לסביבה החדשה למשך 30 דקות לפחות.

עבור סולם העכבר, השתמש במצלמה בחדות גבוהה לצילום. צלם ברציפות כ-30 עד 40 תמונות לכל נקודת זמן תוך דקה עד שתיים. לבדיקת התנהגות מחילות על פי דיקון וג'ירקוף, הכינו מחילות על ידי הנחת 140 גרם כדורי מזון בבקבוק מים אטום מפלסטיק סטנדרטי.

לאחר מכן, הניחו את בקבוק המים מפלסטיק מלא בכדורי מזון במקביל לקיר האחורי של כלוב התצפית. לאחר שעתיים, שקלו את כדורי המזון שנותרו במחילה. בצע את הבדיקה פעמיים יומיים לפני ההליך כנקודת ההתחלה.

בשלב זה, הכינו כלוב עם חומר מצע חדש לתקופת התצפית של 24 שעות בה שוכנים עכברים בנפרד. תקופת התצפית של 24 שעות מתחילה לאחר קשקשי עכברים והתנהגות מחילה. משך הדיור היחיד נשמר למינימום.

בינתיים, נמדדות פעילות כלוב ביתי, צריכת מזון, התנהגות בניית קן ורמות מטבוליטים של קורטיקוסטרון צואתית. לאחר מכן, פזרו חופן חומר מצעים משומש ללא צואה מהכלוב הביתי על גבי החומר החדש על מנת להפחית את המצוקה. ספק סטלט כותנה מרובע סטנדרטי במשקל מוגדר כהעשרה סביבתית בלבד.

לאחר מכן, התקן את חיישן האינפרא אדום על גבי הכלוב למדידת פעילות כלוב ביתי. ספק כדורי מזון סטנדרטיים ומים אד ליביטום והנח את העכבר בכלוב. למחרת בבוקר, ציין את הקן לפי סולם חמש הנקודות על ידי דיקון כשעתיים לאחר שהאור נדלק.

בנוסף, שקלו כל פיסת קינון לא קרועה המהווה לפחות 5% ממשקל הקן הראשוני. לאחר מכן, הניחו חלק עליון של כלוב מרושת בכלוב בזווית של 45 מעלות לצד הארוך יותר של הכלוב. הפעל את הטיימר והצג או הקלט וידאו את העכברים למשך 10 דקות ממרחק של כ -1.5 מטר.

שימו לב לכל הפעמים שבהן העכבר מטפס על ראש הכלוב עם כל ארבע הכפות בחלק העליון של הכלוב או עוזב את החלק העליון של הכלוב עם כפה אחת או יותר על רצפת הכלוב ואחריה ניתוח. התנסות בודדת בהרדמה כמו גם הרדמה חוזרת ונשנית הגדילו את ציוני ההבדל בסולם העכבר בהשוואה לביקורת 30 דקות לאחר החשיפה. לאחר 150 דקות לאחר ההרדמה האחרונה, ציוני ההבדל בסולם העכברים של כל העכברים חזרו לרמות הבקרה.

עבור התנהגות מחילה, רק הרדמה חוזרת הפחיתה משמעותית את אחוז המשקל של כדורי המזון שהעכברים הוציאו מהמחילה לעומת הביקורת. עבור התנהגות בניית קן, לא היו הבדלים משמעותיים בציוני הקן בין חוויה בודדת של הרדמה, הרדמה חוזרת וביקורת. בפרדיגמת הגישוש החופשי, הרדמה חוזרת הפחיתה משמעותית את מספר החקירות בהשוואה לביקורת ואת משך החקירה הכולל לעומת הרדמה בודדת יום לאחר ההרדמה האחרונה.

שמונה ימים לאחר ההרדמה האחרונה, לא היו עוד הבדלים בין קבוצות המחקר. בעת ניסיון פרוטוקול זה, חשוב לזכור לטפל בעכברים בשיטות מנהרה ו/או כוסות רוח. איסוף עכברים בזנב יכול לגרום למתח וחרדה, אשר בתורם משפיעים על הרווחה ויכולים גם להשפיע על תוצאות הפרוטוקול.

ניתן להתאים פרוטוקול זה בקלות ולשלב אותו במחקרים מתוכננים כדי להעריך את ההשפעה של הליך על רווחתם של עכברים. בהתאם לנוהל ולתכנון המחקר, יש לבחור את המבחן המתאים ביותר לפרוטוקול זה. לאחר צפייה בסרטון זה, תהיה לך הבנה טובה כיצד להעריך את רווחתם של עכברים שעברו הליך של הרדמה כללית.

הפרוטוקול עוזר לסווג את חומרת ההליך בצורה מדעית מבוססת בעלי חיים.