Name: מדגם ניסיוני של דיאטה-Induced סינדרום מטבולי בקרב ארנב: שיקולים מתודולוגי, פיתוח והערכה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 31 s
Description: חקור פיתוח מודל תסמונת מטבולית בארנבים באמצעות דיאטה עתירת שומן וסוכר. שיטה זו מאפשרת חקר מנגנוני מחלה, זיהוי סמנים קליניים ובדיקת גישות טיפוליות חדשות במחקר ביו-רפואי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי Generalitat Valenciana (GV2015-062), València דה אוניברסיטט (UV-INV-PRECOMP14-206372) כדי MZ, Generalitat Valenciana (PROMETEOII/2014/037) וקרנות אינסטיטוטו דה סאלוד קרלוס השלישי-פדר (CIBERCV CB16/11/0486) כדי FJC.

טיפול בבעלי חיים, בפרוטוקולים ניסיוניים המשמשים במחקר זה תאמו האירופי 2010 הוראת/63 על צער בעלי חיים משמשים למטרות מדעיות, אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ועל שימוש הוועדה (2015/VSC אפונה 00049).
הערה: הפרוטוקול מורכב ממשל כרונית של דיאטה עתירת שומן, בסוכרוז 28 שבועות, את ההערכה של הרכיבים העיקריים של המטס. היינו 11 למבוגרים זכר ניו זילנד הלבן (NZW) ארנבים שקילה 4.39 ± 0.14 (ש) ק ג, אשר היו 20-22 שבועות בתחילת פרוטוקול נסיוני. הם שוכנו בחדר עם לחות (50 ± 5%), בתנאי טמפרטורה (20 ± 1.5 ° C) מבוקרת עם אור 12-h מחזור. המילים "האוכל" ואת "דיאטה" עשוי לשמש לסירוגין בשלבים פרוטוקול.
1. תזונה המינהל
<ol><li>
להשיג או להכין דיאטות
	<ol>
<li>להשיג זמינים מסחרית בשומן עם הוסיף שמן קוקוס מוקשה (10%) ואת ביקון/חלב (5%)19. דיאטה זו תספק 3.7 kcal·g-1.</li>
		<li>להכין 5-15% סוכרוז פתרונות על ידי המסת את כמויות מתאימות של סוכרוז במים סטיריליים (למשל, שימוש 300 גרם סוכרוז במלאי 2 L פתרון 15% סוכרוז). פתרון 15% תספק 0.6 kcal·mL-1.</li>
		<li>להשיג זמינים מסחרית שליטה דיאטה19, אשר מספק 2.7 kcal·g-1.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
חבל החיות 4 שבועות
	<ol>
<li>להאכיל כל חיה קבוצת הבקרה 120 גרם של שליטה דיאטה מדי יום. לספק מים ad libitum.</li>
		<li>להאכיל חיות המטס קבוצה 250 גרם צ'או מתחיל עם שליטה 50%, 50% שומן צ'או, גדל בהדרגה ל 100% שומן צ'או עד לסוף שבוע 4. הערה: המטרה תהיה להשיג: (i) ובקרה 35% 65% צ'או עתירי שומן עד לסוף שבוע 1; (ii) שליטה 25% ו 75% צ'או עתירי שומן עד לסוף שבוע 2; (iii) 15% שליטה ו- 85% שומן צ'או עד לסוף שבוע 3 (iv) צ'או עתירי שומן 100% עד לסוף שבוע 4.</li>
		<li>תן בבעלי הגרורות קבוצה מים עם 5% סוכרוז בתחילתו, להגדיל את ריכוז סוכרוז עד 15% עד סוף השבועה 4.</li>
		<li>הירשם הצריכה היומית של צ'או וסוכרוז פתרון כדי לחשב את צריכת הקלוריות לפי ערכים הניתנים 1.1.1. 1.1.2.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
זירוז הגרורות (28 שבועות)
	<ol>
<li>להאכיל כל חיה בקבוצת הבקרה 120 גרם של שליטה צ'או ולהשקות ad libitum מדי יום.</li>
		<li>להאכיל את בעלי החיים בקבוצת המטס 250 גרם של סוכרוז צ'או וכ-15% שומן במים. החלף את האוכל מדי יום ואת הפתרון סוכרוז בכל יום שלישי.</li>
		<li>שוקלים את האוכל ואת המים כל יום כדי להעריך את הצריכה היומית הנותרים.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. הערכה מורפולוגית
<ol><li>מודדים בעלי משקל גוף על בסיס שבועי.</li>
	<li>למדוד את גובה, אורך, מתאר בטן ואורך הטיביאלי, אומדן BMI לפני ניהול של הדיאטה ניסיוני, שבועות 14 ו- 28 בבעלי חיים מורדם.<ol>
<li>נקרר אוזן ימין ווריד שולית עם קטטר חד פעמי סטרילי (18-22 גרם), להזריק propofol (8 mgkg-1) ואחריו 1.5 מ של 0.9% NaCl פתרון. ב הארנב anesthetized, לבצע את המדידות המופיעים והשלבים הבאים.</li>
		<li>מדד גובה ואורך. באמצעות מדידה הקלטת, מדד שיא המרחק מן האף אל העקב במצב לרוחב חמצן (אורך). באותה תנוחה, קח את המרחק כתפיים בכתף לקצה של הכפה (גובה).</li>
		<li>חישוב מדד מסת (BMI) הגוף20 כמו bodyweight (ק ג) · [גוף אורך (ז) × גובה (ז)] -1.</li>
		<li>מכניסים את הקלטת המדידה בעדינות סביב קו המתאר בטן ולקחת מדידה עם החיה במצב פרקדן.</li>
		<li>למדוד אורך הטיביאלי מהחלק התחתון של הברך משותפת כדי ההוספה של גיד אכילס.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. צום גליקמיה ובדיקה סובלנות גלוקוז תוך ורידי (IVGTT)
הערה: מומלץ להתחיל את ההליכים באותו הזמן של היום (כלומר, 2-3 בצהריים).
<ol><li>להכין פתרון מלאי הגלוקוז (60%) עם 60 גרם גלוקוז ב- 100 מ של 0.9% NaCl פתרון.</li>
	<li>מהר החיה במשך 7 שעות (הסרת המזון ושמירה על המים), ואז למקם את הארנב בהכרה restrainer במצב שכיבה. הכנת מד הסוכר (insert רצועת קומיקס חדשה הסרט לתוך המד), ולקחת את המדגם הראשון מן הווריד שולית של אוזן שמאל באמצעות אזמל מנתחים כדי לקבל טיפת דם. ואז לגעת הטיפה את הדם עם מבחן רצועת ולמדוד רמות הגלוקוז בדם באמצעות מד הסוכר כדי לקבוע צום גליקמיה.</li>
	<li>נקרר אוזן ימין ווריד שולית עם קטטר חד פעמיות (18-22 גרם), להזריק סיילין פתרון גלוקוז 60% (0.6 g·kg-1). הערה: כדי להכין את בולוס, להוסיף 1 מ"ל/ק"ג של המניה גלוקוז.</li>
	<li>לקחת דגימות דם באמצעות אזמל המנתחים (טיפה אחת של דם)-15, 30, 60, 90, 120 ו- 180 דקות לאחר ההזרקה גלוקוז ולנתח אותם עם מד גלוקוז כמו 3.2.</li>
	<li>להסיר את הצנתר חד פעמיות וצבטתי באתר של הכנסת קטטר עם גזה. ברגע דם יש התקרש, להסיר את הגזה, לבדוק את מצב החיה.</li>
</ol>4. לחץ דם
<ol><li>הכנת מערכת הרכישה כולל מתמר לחץ, מזרק 10-mL עם 0.9% NaCl, צימוד של 3 חלקים, מגבר ו למחשב/מחשב נייד עם תוכנת רכישה (להקלטה לחץ דם).</li>
	<li>להגדיר את הציוד. ראשית, הצב את צימוד-כיוונית ואת המזרק מתמר לחץ, בין המתמר הקטטר, וחבר מתמר לחץ המגבר. לאחר מכן להתחבר למחשב/מחשב נייד המגבר</li>
	<li>לבצע את הכיול מתמר לחץ על-פי ההמלצות של היצרן.</li>
	<li>מקם את החיה בהכרה restrainer הארנב במצב שכיבה. לחמם את האוזן לפני תעלות, והחילו topically הרדמה מקומית (2.5% לידוקאין/prilocaine) באוזן סביב האתר של ההכנסה. טפח בעדינות את האזור שבו חבילת כלי הדם עובר בקלות לזהות את העורק. ואז להכניס צנתר סטרילי (18-22 גרם) העורק המרכזי של אוזן שמאל. שחרר את האזיקים ולאפשר את החיה להישאר בשקט למשך 30 דקות.</li>
	<li>להקליט את לחץ הדם באופן רציף במשך 20 דקות ישירות דרך הקטטר עורקי, הצבת מתמר לחץ ליד החיה ברמת הלב (תדר הדגימה: 1 KHz, ראה איור 5B). הערה: כדי לשמור על לחץ הדם (BP) הקלטה חינם מהפרעה קרישת דם (לחץ דם האות מאבדת משרעת או נעלם), זריקה NaCl (0.9%) צריך להיעשות. שימוש של צימוד-כיוונית, לסגור את המעגל שעובר בין המתמר על הקטטר, לפתוח את המעגל העובר מן המזרק כדי הקטטר, ולהזריק 1-2 מ. פעולה זו תגרום להסרת קרישי דם שעלול להיווצר הקטטר. לאחר מכן, לפתוח את המעגל בין המתמר הקטטר ולהמשיך את ההקלטה לאחר האות אבדו.</li>
	<li>לאחר סיום ההקלטות, להסיר את הצנתר וצבטתי עם גזה באתר של קטטר הכניסה כדי למנוע איבוד דם. ברגע שהדם הוא התקרש, להסיר את הגזה, לבדוק את מצב החיה.</li>
</ol>5. פלזמה מדידות
הערה: מומלץ להתחיל את ההליכים באותו הזמן של היום (כלומר, 2-3 בצהריים).
<ol><li>מהר החיה במשך 7 שעות (הסרת המזון ושמירה על המים), לאחר מכן הכנס החיה בהכרה restrainer במצב שכיבה, להכניס מחט סטרילית 21 G הווריד שולית של אוזן שמאל. ברגע הדם מתחיל לטפטף, למחוק הראשונה ו לאסוף דגימות דם EDTA צינורות עד רמת המצוין בצינור. לאחסן את הדגימות הקרח.</li>
	<li>צנטריפוגה דגימות דם-1,500 x g, 15 דקות, 4 מעלות צלזיוס. לאחר צנטריפוגה, שאיבה פלזמה בעזרת פיפטה ולהכין aliquots של 250 µL.</li>
	<li>לנתח את הדגימות טריים באופן מיידי. שליטה בסיסית הפרמטרים הם כדלקמן: טריגליצרידים, כולסטרול, HDL ו- LDL כולסטרול. הערה: לא טרי ניתחו דגימות יש לאחסן באופן מיידי במקפיא-80 ° C. אם אתם מעוניינים בניתוח הגלוקוז בדם מדגימות פלזמה, בדיקת הגלוקוז הדם עליך להשתמש צינורות עם פלואוריד אוקסלט במקום EDTA.</li>
</ol>

<ol><li>Cornier, M. A., Dabelea, D., Hernandez, T. L., Lindstrom, R. C., Steig, A. J., Stob, N. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Endocr+rev%22%5BJournal%5D)">The metabolic syndrome.</a> Endocr rev. 29 (7), 777-822 (2008).</li>
<li>Alberti, K. G., Zimmet, P., Shaw, J., Grundy, S. M. IDF Consensus Worldwide Definition of the Metabolic Syndrome. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.idf.org/e-library/consensus-statements.html">https://www.idf.org/e-library/consensus-statements.html</a> (2006).</li>
<li>Alberti, K. G., Eckel, R. H., Grundy, S. M., Zimmet, P. Z., Cleeman, J. I., Donato, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Harmonizing+the+metabolic+syndrome%3A+a+joint+interim+statement+of+the+International+Diabetes+Federation+Task+Force+on+Epidemiology+and+Prevention%3B+National+Heart%2C+Lung%2C+and+Blood+Institute%3B+American+Heart+Association%3B+World+Heart+Federation%3B+International+Atherosclerosis+Society%3B+and+International+Association+for+the+Study+of+Obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Harmonizing the metabolic syndrome: a joint interim statement of the International Diabetes Federation Task Force on Epidemiology and Prevention; National Heart, Lung, and Blood Institute; American Heart Association; World Heart Federation; International Atherosclerosis Society; and International Association for the Study of Obesity.</a> Circulation. 120 (16), 1640-1645 (2009).</li>
<li>Grundy, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pre-diabetes%2C+metabolic+syndrome%2C+and+cardiovascular+risk%5BTitle%5D)+AND+%22JACC%22%5BJournal%5D)">Pre-diabetes, metabolic syndrome, and cardiovascular risk.</a> JACC. 59 (7), 635-643 (2012).</li>
<li>Verkest, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+the+metabolic+syndrome+a+useful+clinical+concept+in+dogs%3F+A+review+of+the+evidence%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+J%22%5BJournal%5D)">Is the metabolic syndrome a useful clinical concept in dogs? A review of the evidence.</a> Vet J. 199 (1), 24-30 (2014).</li>
<li>Zhang, X., Lerman, L. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigating+the+Metabolic+Syndrome%3A+Contributions+of+Swine+Models%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Pathol%22%5BJournal%5D)">Investigating the Metabolic Syndrome: Contributions of Swine Models.</a> Toxicol Pathol. 44 (3), 358-366 (2016).</li>
<li>Wong, S. K., Chin, K. Y., Suhaimi, F. H., Fairus, A., Ima-Nirwana, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+metabolic+syndrome%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Nutr+Metab+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">Animal models of metabolic syndrome: a review.</a> Nutr Metab (Lond). 13, 65(2016).</li>
<li>Carroll, J. F., Dwyer, T. M., Grady, A. W., Reinhart, G. A., Montani, J. P., Cockrell, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertension%2C+cardiac+hypertrophy%2C+and+neurohumoral+activity+in+a+new+animal+model+of+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Hypertension, cardiac hypertrophy, and neurohumoral activity in a new animal model of obesity.</a> Am J Physiol. 271 (1 Pt 2), H373-H378 (1996).</li>
<li>Grooth, G. J., Klerkx, A. H., Stroes, E. S., Stalenhoef, A. F., Kastelein, J. J., Kuivenhoven, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+CETP+and+its+relation+to+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">A review of CETP and its relation to atherosclerosis.</a> J Lipid Res. 45 (11), 1967-1974 (2004).</li>
<li>Zarzoso, M., Mironov, S., Guerrero-Serna, G., Willis, B. C., Pandit, S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ventricular+remodelling+in+rabbits+with+sustained+high-fat+diet%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiol+%28Oxf%29%22%5BJournal%5D)">Ventricular remodelling in rabbits with sustained high-fat diet.</a> Acta Physiol (Oxf). 211 (1), 36-47 (2014).</li>
<li>Filippi, S., Vignozzi, L., Morelli, A., Chavalmane, A. K., Sarchielli, E., Fibbi, B., Saad, F., Sandner, P., Ruggiano, P., Vannelli, G. B., Mannucci, E., Maggi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Testosterone+partially+ameliorates+metabolic+profile+and+erectile+responsiveness+to+PDE5+inhibitors+in+an+animal+model+of+male+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sex+Med%22%5BJournal%5D)">Testosterone partially ameliorates metabolic profile and erectile responsiveness to PDE5 inhibitors in an animal model of male metabolic syndrome.</a> J Sex Med. 6 (12), 3274-3288 (2009).</li>
<li>Waqar, A. B., Koike, T., Yu, Y., Inoue, T., Aoki, T., Liu, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-fat+diet+without+excess+calories+induces+metabolic+disorders+and+enhances+atherosclerosis+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">High-fat diet without excess calories induces metabolic disorders and enhances atherosclerosis in rabbits.</a> Atherosclerosis. 213 (1), 148-155 (2010).</li>
<li>Fan, J., Watanabe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholesterol-fed+and+transgenic+rabbit+models+for+the+study+of+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Atheroscler+Thromb%22%5BJournal%5D)">Cholesterol-fed and transgenic rabbit models for the study of atherosclerosis.</a> J Atheroscler Thromb. 7 (1), 26-32 (2000).</li>
<li>Yin, W., Yuan, Z., Wang, Z., Yang, B., Yang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+diet+high+in+saturated+fat+and+sucrose+alters+glucoregulation+and+induces+aortic+fatty+streaks+in+New+Zealand+White+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Exp+Diabetes+Res%22%5BJournal%5D)">A diet high in saturated fat and sucrose alters glucoregulation and induces aortic fatty streaks in New Zealand White rabbits.</a> Int J Exp Diabetes Res. 3 (3), 179-184 (2002).</li>
<li>Zhao, S., Chu, Y., Zhang, C., Lin, Y., Xu, K., Yang, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diet-induced+central+obesity+and+insulin+resistance+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anim+Physiol+Anim+Nutr+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Diet-induced central obesity and insulin resistance in rabbits.</a> J Anim Physiol Anim Nutr (Berl). 92 (1), 105-111 (2008).</li>
<li>Helfenstein, T., Fonseca, F. A., Ihara, S. S., Bottos, J. M., Moreira, F. T., Pott, H. Jr, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+glucose+tolerance+plus+hyperlipidaemia+induced+by+diet+promotes+retina+microaneurysms+in+New+Zealand+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Exp+Pathol%22%5BJournal%5D)">Impaired glucose tolerance plus hyperlipidaemia induced by diet promotes retina microaneurysms in New Zealand rabbits.</a> Int J Exp Pathol. 92 (1), 40-49 (2011).</li>
<li>Ning, B., Wang, X., Yu, Y., Waqar, A. B., Yu, Q., Koike, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-fructose+and+high-fat+diet-induced+insulin+resistance+enhances+atherosclerosis+in+Watanabe+heritable+hyperlipidemic+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Nutr+Metab+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">High-fructose and high-fat diet-induced insulin resistance enhances atherosclerosis in Watanabe heritable hyperlipidemic rabbits.</a> Nutr Metab (Lond). 12, 30(2015).</li>
<li>Liu, Y., Li, B., Li, M., Yu, Y., Wang, Z., Chen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improvement+of+cardiac+dysfunction+by+bilateral+surgical+renal+denervation+in+animals+with+diabetes+induced+by+high+fructose+and+high+fat+diet%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Res+Clin+Pract%22%5BJournal%5D)">Improvement of cardiac dysfunction by bilateral surgical renal denervation in animals with diabetes induced by high fructose and high fat diet.</a> Diabetes Res Clin Pract. 115, 140-149 (2016).</li>
<li>Arias-Mutis, O. J., Marrachelli, V. G., Ruiz-Saurí, A., Alberola, A., Morales, J. M., Such-Miquel, L., Monleon, D., Chorro, F. J., Such, L., Zarzoso, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+characterization+of+an+experimental+model+of+diet-induced+metabolic+syndrome+in+rabbit%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Development and characterization of an experimental model of diet-induced metabolic syndrome in rabbit.</a> PLoS One. 12 (5), e0178315(2017).</li>
<li>Nelson, R. W., Himsel, C. A., Feldman, E. C., Bottoms, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose+tolerance+and+insulin+response+in+normal-weight+and+obese+cats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Vet+Res%22%5BJournal%5D)">Glucose tolerance and insulin response in normal-weight and obese cats.</a> Am J Vet Res. 51 (9), 1357-1362 (1990).</li>
<li>Staup, M., Aoyagi, G., Bayless, T., Wang, Y., Chng, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+Metabolic+Status+in+Nonhuman+Primates+with+the+Intravenous+Glucose+Tolerance+Test%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Characterization of Metabolic Status in Nonhuman Primates with the Intravenous Glucose Tolerance Test.</a> J Vis Exp. (117), e52895(2016).</li>
<li>Hall, J. E., do Carmo, J. M., da Silva, A. A., Wang, Z., Hall, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obesity-induced+hypertension%3A+interaction+of+neurohumoral+and+renal+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Obesity-induced hypertension: interaction of neurohumoral and renal mechanisms.</a> Circ Res. 116 (6), 991-1006 (2015).</li>
<li>Linz, D., Hohl, M., Mahfoud, F., Reil, J. C., Linz, W., Hübschle, T., Juretschke, H. P., Neumann-Häflin, C., Rütten, H., Böhm, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+remodeling+and+myocardial+dysfunction+in+obese+spontaneously+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Cardiac remodeling and myocardial dysfunction in obese spontaneously hypertensive rats.</a> J Transl Med. 10 (10), 187(2012).</li>
<li>Sasser, T. A., Chapman, S. E., Li, S., Hudson, C., Orton, S. P., Diener, J. M., Gammon, S. T., Correcher, C., Leevy, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segmentation+and+measurement+of+fat+volumes+in+murine+obesity+models+using+X-ray+computed+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Segmentation and measurement of fat volumes in murine obesity models using X-ray computed tomography.</a> J Vis Exp. (62), e3680(2012).</li>
<li>Kawai, T., Ito, T., Ohwada, K., Mera, Y., Matsushita, M., Tomoike, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hereditary+postprandial+hypertriglyceridemic+rabbit+exhibits+insulin+resistance+and+central+obesity%3A+a+novel+model+of+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Hereditary postprandial hypertriglyceridemic rabbit exhibits insulin resistance and central obesity: a novel model of metabolic syndrome.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 26 (12), 2752-2757 (2006).</li>
<li>Shiomi, M., Kobayashi, T., Kuniyoshi, N., Yamada, S., Ito, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarction-prone+Watanabe+heritable+hyperlipidemic+rabbits+with+mesenteric+fat+accumulation+are+a+novel+animal+model+for+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Pathobiology%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarction-prone Watanabe heritable hyperlipidemic rabbits with mesenteric fat accumulation are a novel animal model for metabolic syndrome.</a> Pathobiology. 79 (6), 329-338 (2012).</li>
<li>Hildrum, B., Mykletun, A., Hole, T., Midthjell, K., Dahl, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-specific+prevalence+of+the+metabolic+syndrome+defined+by+the+International+Diabetes+Federation+and+the+National+Cholesterol+Education+Program%3A+The+Norwegian+HUNT+2+study%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Age-specific prevalence of the metabolic syndrome defined by the International Diabetes Federation and the National Cholesterol Education Program: The Norwegian HUNT 2 study.</a> BMC Public Health. 7, 220(2007).</li>
</ol>

המחברים מצהירים כי יש להם אינטרסים כלכליים אין מתחרים.

הקמת מדגם ניסיוני המתאים יכול לספק שיטה עקבית ומהימנה יותר ללמוד על התפתחות הגרורות, יש גם צורך להבין את המנגנונים הבסיסיים העומדים בבסיס האיברים ומערכות שיפוץ. כאן, אנו מתארים את שיטות השתמשו כדי לפתח מודל ניסיוני הרלוונטיים של המטס דיאטה-induced וכיצד להעריך את המרכיבים העיקריים של מקבץ של ליקויים מטבולית, לב וכלי דם המאפיינות את המודל הזה: השמנה מרכזית, יתר לחץ דם, גלוקוז סובלנות dyslipidemia עם HDL נמוך, LDL גבוה, גידול של רמות TG.
כוח גדול של המודל היא היכולת ללמוד המצב שלפני הביטוי הקלינ...

השמנת יתר, תסמונת מטבולית (גרורות) הפכו להיות בעיה גוברת על בריאות הציבור ועל הקלינית, בהתחשב שלהם שכיחות מוגברת עקב העלייה בישיבה אורחות חיים, הרגלי אכילה לא בריאים1. קיימות מספר הגדרות של גרורות, אך רובם מתארים מקבץ של שינויים מטבוליים וכלי דם כגון השמנה של הבטן, HDL מופחתת של כולסטרול LDL גבוהות, רמות טריגליצרידים גבוהות, גלוקוז בחוסר סובלנות יתר לחץ דם2 3, ,4. האבחנה דורשת כי שלושה מתוך חמישה קריטריונים אלה נוכחים.
בשל חייתיים, מחקר בסיסי כבר מסוגל לחקור את המנגנונים שבבסיס תהליכים פתולוגיים כגון גרורות. השתמשו במספר דגמים בעלי חיים, אבל זה חשיבות מכרעת כי המודל של הבחירה מתרבה המאפיינים הקליניים העיקריים של פתולוגיה אנושית (איור 1). במטרה זו, מודלים בעלי חיים נחשבים דומים לבני אדם, בעיקר כלב, חזיר, פותחו (ראה Verkest5 ואבשלום &amp; לרמן6 לבדיקה). עם זאת, מודלים הכלבים אינם מראים כל הרכיבים של המטס, בהתחשב בכך התפתחות טרשת עורקים או היפרגליקמיה בכלבים באמצעות הדיאטה היא בספק5. מודלים החזירים להציג את הדמיון ביותר אנטומית, פיזיולוגית עם בני אדם, ולכן מציעים כוח הניבוי משמעותי עבור שחקרתי המנגנונים מטס, אבל התחזוקה שלהם ואת המורכבות של ההליכים ניסיוני לעשות שימוש זה מודל העבודה מאוד אינטנסיבית ויקרות6.
מצד שני, מודלים מכרסמים (עכבר, חולדה), תזונה-induced ספונטנית, מהונדס, בהרחבה שימשו בספרות המחקר השמנה, יתר לחץ דם, מטס, ואת השלכותיה פתולוגיים איברים שונים ומערכות (ראה וונג et al. 7 לסקירה). למרות השימוש של מודלים אלה הוא במחיר נוח יותר מאשר כלב או חזיר, יש להם חסרונות חשוב. אכן, בהתאם המתח, חיות לפתח רכיבים מסוימים של המטס, בעוד אחרים כגון יתר לחץ דם, היפרגליקמיה, היפראינסולינמיה נעדר7. יתר על כן, אחד המרכיבים העיקריים של המטס, השמנת יתר, כמה זנים מהונדסים, תלויה רק גורמים יחד עם הדיאטה, אלא הוכח כי בעלי חיים הופכים כרסתן עם צריכת מזון רגיל או אפילו מופחת8. לבסוף, עכברים וחולדות להראות חוסר טבעי cholesteryl אסתר העברה חלבון (CETP) ועושים שימוש HDL אמצעי עיקרי של תעבורה כולסטרול, מה שהופך אותם יחסית עמידים בפני ההתפתחות של טרשת עורקים. זה הבדל חשוב בנוזל מטבולי עם בני אדם, מי אקספרס CETP ולהעביר את הכולסטרול שלהם בעיקר ב- LDL9.
לעומת זאת, הארנב מעבדה מייצג שלב ביניים בין חיים גדול יותר ניסיוניות מכרסמים. לפיכך, הארנב ניתן להגיש בקלות לסוגים שונים של פרוטוקולים עם דרישות מינימליות של כוח אדם, תחזוקה, מטופל בקלות רבה יותר מאשר דגמים בעלי חיים גדולים בהליכים ניסיוני. יתר על כן, דווח כי ארנבים האכיל עם דיאטה עתירת שומן יש שינויים דומים והמודינמיקה neurohumoral כמו בני אדם שמנים8,10,11. ראוי לציין, לגבי מטבולי, הארנב CETP שופע בפלסמה ונמצא פרופיל ליפופרוטאין LDL-עשיר12, אשר דומה גם לבני אדם. בנוסף, ארנבים לפתח היפרליפידמיה מתפתח מהר מאוד בהתחשב בעובדה, כמו אוכלי עשב, הם רגישים מאוד שמן תזונתיים13.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57117/57117fig1.jpg"> איור 1: השוואה של המטס חייתיים. לראות Verkest5, ג'אנג ולרמן6ווונג. et al. 7 לסקירה. "<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg">" מצביע על יתרון, "<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg">" מציינת חיסרון. *במחלוקת, תלוי המחקר, *כמו ציין בחוץ על ידי קרול. et al. 8, כמה זנים מהונדסים להשמין ללא תלות צריכת המזון. חוץ מזה: cholesteryl אסתר העברה חלבון. GTT: בדיקת הגלוקוז סובלנות. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/57117/57117fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
כדי להבהיר את המנגנונים הבסיסיים שיפוץ פתולוגיים המיוצר על ידי הגרורות איברים שונים, מערכות, וכדי להשיג הבנה של הפתולוגיה המורכבת הזאת, הבחירה של מדגם ניסיוני מתרבה המרכיבים העיקריים של המטס אנושי חיוני. הארנב יכול לספק יתרונות רבים נותן לדמיונו פיזיולוגיה אנושית ומחיר השימוש בפרוטוקולי כרונית ו מדידות. בשורה זו, היו כמה מודלים ארנב הנוצרות על-ידי תזונה באמצעות תזונה עתירת שומן בסוכרוז בשימוש14,15,16,17,18,19 (טבלה 1), ו- a אפיון של הרכיבים השונים של המטס הוא בעל חשיבות רבה כאשר מתייחסים הפנוטיפ עם איברים שיפוץ. לכן, המטרה העיקרית של מאמר זה היא לתאר את השיטות כדי לפתח מודל של גרורות דיאטה-induced ארנבים המאפשר לימוד פתופיזיולוגיה שלה ואת ההשפעה ב עוגב שיפוץ.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td rowspan="2">המחקר</td>
			<td rowspan="2">דיאטה</td>
			<td rowspan="2">משך</td>
			<td rowspan="2">גזע</td>
			<td colspan="4">רכיבים מטס</td>
		</tr>
<tr>
<td>Ob</td>
			<td>HT</td>
			<td>HG</td>
			<td>Dl</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="2">היין et al. (2002)14</td>
			<td>·    10% שומן</td>
			<td rowspan="2">24 שבועות</td>
			<td>·      NZW זכר</td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg"></td>
			<td rowspan="2">-</td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
		</tr>
<tr>
<td>·    37% סוכרוז</td>
			<td>·      2 ק ג</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="2">ז'או et al. (2007)15</td>
			<td>·    10% שומן</td>
			<td rowspan="2">36 שבועות</td>
			<td>·      JW זכר</td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg"></td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg"></td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg"></td>
		</tr>
<tr>
<td>·    30% סוכרוז</td>
			<td>·      16 שבועות</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">Helfestein et al. (2011)16</td>
			<td>·    10% שומן</td>
			<td rowspan="3">24 שבועות</td>
			<td>·      NZW זכר</td>
			<td rowspan="3"><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg"></td>
			<td rowspan="3">-</td>
			<td rowspan="3"><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
			<td rowspan="3"><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
		</tr>
<tr>
<td>·    40% סוכרוז</td>
			<td>·      12 שבועות</td>
		</tr>
<tr>
<td>·    0.5-0.1 כולסטרול</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="2">נינג et al. (2015)17</td>
			<td>·    10% שומן</td>
			<td rowspan="2">8-16 שבועות</td>
			<td>·      WHHL זכר</td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg"></td>
			<td rowspan="2">-</td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg"></td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
		</tr>
<tr>
<td>·    30% פרוקטוז *</td>
			<td>·      12 שבועות</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="2">ליו et al. (2016)18</td>
			<td>·    10% שומן</td>
			<td rowspan="2">48 שבועות</td>
			<td>·      NZW זכר</td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg"></td>
			<td rowspan="2">-</td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
		</tr>
<tr>
<td>·    30% סוכרוז</td>
			<td>·      12 שבועות</td>
		</tr>
<tr>
<td>אריות-Mutis et al. (2017)19</td>
			<td>·    15% שומן</td>
			<td>28 שבועות</td>
			<td>·      NZW זכר</td>
			<td><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
			<td><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
			<td><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
			<td><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
		</tr>
</tbody></table>טבלה 1: מטס דיאטה-induced ארנב מודלים באמצעות תזונה עתירת שומן, בסוכרוז. הסמל "<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg">"מצביע על היעדרות,"<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg">" נוכחות, ו "-" לא מוערכים. * מוגבל. WHHL, וואטאנאבה heritable hiperlipidemic ארנבים. . ג'. וו, יפני וארנבים לבנים. אבוב, השמנת יתר. HT, יתר לחץ דם. כספית, היפרגליקמיה. Dl, dyslipidemia.

<table><tbody><tr><td>סולם וטרינרי</td><td>SOEHNLE</td><td>7858</td><td>קנה מידה https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale</td></tr><tr><td>את חפירה להזנת אלומיניום</td><td>COPELE</td><td>10308</td><td>את חפירה להזנת אלומיניום http://copele.com/es/herramientas/48-pala-para-pienso-de-aluminio.html</td></tr><tr><td>איזון</td><td>PCE Ib&eacute; rica</td><td>PCE-TB 15</td><td>Balance http://www.pce-iberica.es/medidor-detalles-tecnicos/balanzas/balanza-compacta-pce-bdm.htm</td></tr><tr><td>מסננת (קוטר 20 ס"מ)</td><td>ZWILLING</td><td>39643-020-0</td><td>מסננת https://es.zwilling-shop.com/Menaje-del-hogar/Menaje-de-cocina/Menaje-especial/Accesorios/Colador-20-cm-ZWILLING-39643-020-0.html</td></tr><tr><td>קערה</td><td>ZWILLING</td><td>40850-751-0</td><td>Scale https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale</td></tr><tr><td>משפך</td><td>BT Ingenieros</td><td>אינו זמין</td><td>משפך http://www.bt-ingenieros.com/fluidos-y-combustibles/961-juego-de-4-embudos-de-plastico.html?gclid=EAIaIQobChMIuInui_y-1QIVASjTCh28Zwf-EAQYBSABEgK7xPD_BwE</td></tr><tr><td>אינטרוקן צ'רטו 22 גרם כחול</td><td>B בראון</td><td>4251318</td><td>קטטר תוך ורידי היקפי http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-פרופופול</td></tr> <tr><td>ליפורו בקבוקון 10 מ"ג/מ"ל 20 מ"ל</td><td>B בראון</td><td>3544761VET</td><td>תמיסת סרום הרדמה כללית תוך ורידית<br/</td></tr><tr><td>> http://www.bbraun-vetcare.es/producto/propofol-lipuro-1-FisioVet 500 מ"ל</td><td>B Braun</td><td></td><td>472779 Scale https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale</td></tr><tr><td>Askina Film Vet 1,25 ס"מ x 5 מ'</td><td>B בראון</td><td>OCT13501</td><td>פלסטר פלסטיק http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet</td></tr><tr><td>Askina Film Vet 2,50 ס"מ x 5 מ'</td><td>B בראון</td><td>OCT13502</td><td>פלסטיק פלסטי http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet</td></tr><tr><td>מזרק אינג'קט 10 מ"ל לואר</td><td>B בראון</td><td>4606108V</td><td>מזרק הזרקה-שאיבה של שני גופים חד פעמיים http://www.bbraun-vetcare.es/producto/injekt-Seca</td></tr> <tr><td>201</td><td>seca</td><td>seca 201</td><td>סרט ארגונומי למדידת היקפים https://www.seca.com/es_es/productos/todos-los-productos/detalles-del-producto/seca201.html#referred</td></tr><tr><td>Sterican 21Gx1 אינץ' - 0,8x25 מ"מ ורדה</td><td>B בראון</td><td>4657543</td><td>מחט היפודרמית לשימוש חד פעמי http://www.bbraun-vetcare.es/producto/agujas-hipodermicas-sterican-CONTOURNEXT-Meter</td></tr> <tr><td></td><td>BAYER</td><td>84413470</td><td>מערכת ניתוח גלוקוז בדם http://www.contournextstore.com/en/contour-next-meter-2</td></tr><tr><td>רצועות בדיקה CONTOUR NEXT</td><td>BAYER</td><td>83624788</td><td>רצועות בדיקת גלוקוז בדם http://www.contournextstore.com/en/contour-next-test-strips-100-ct-package</td></tr><tr><td>מכשיר ריסוק MICROLET NEXT מכשיר ריסוק</td><td>BAYER</td><td>6702</td><td> http://www.contournextstore.com/en/new-microlet-next-lancing-device</td></tr><tr><td>MICROLET 2 Lancets צבעוניים</td><td>BAYER</td><td>81264857</td><td>לנצט סטרילי דק במיוחד לניקוב נימי http://www.contournextstore.com/en/microlet2-colored-lancets-100s</td></tr><tr><td>Injekt 20 מ"ל לואר</td><td>סירינג B בראון</td><td>4606205V</td><td>בקנה מידה https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale</td></tr><tr><td>Askina Mullkompressen 7,5x7,5 ס"מ - סטרילי</td><td>B בראון</td><td>9031219N</td><td>חבילות גזה סטריליות במעטפות http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-mullkompressen-esteril</td></tr><tr><td>Emla לידוקאין/פרילוקאין</td><td>AstraZeneca</td><td>אינו זמין</td><td>בהרדמה מקומית https://www.astrazeneca.es/areas-terapeuticas/neurociencias.html</td></tr><tr><td>Introcan Certo 18G קצר</td><td>B בראון</td><td>4251342</td><td>קטטר תוך-ורידי היקפי </td></tr><tr><td>http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-Introcan Certo 20G</td><td>B Braun</td><td>4251326</td><td>קטטר תוך ורידי היקפי http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-מתמרי</td></tr> <tr><td>לחץ דם-MA1 72-4497</td><td>מתמר 724497 מכשיר הרווארד</td><td></td><td>לניטור לחץ דם http://www.harvardapparatus.com/physiology/physiological-measurements/transducers/pressure-transducers/research-grade-pressure-transducers.html</td></tr><tr><td>PowerLab 2/26</td><td>AD Instruments</td><td>ML826</td><td>מגבר https://www.adinstruments.com/products/powerlab</td></tr><tr><td>LabChart ver. 6</td><td>AD Instruments</td><td>לא זמין</td><td>תוכנת רכישה https://www.adinstruments.com/products/labchart</td></tr><tr><td>Animal Bio Amp</td><td>AD Instruments</td><td>FE136</td><td>מגבר https://www.adinstruments.com/products/bio-amps#product-FE136</td></tr><tr><td>K2EDTA 7.2 מ"ג</td><td>BD</td><td>367861</td><td>צינורות איסוף דם http://catalog.bd.com/nexus-ecat/getProductDetail?productId=367861</td></tr><tr><td>צנטריפוגה</td><td>SciQuip</td><td>2-16KL</td><td>צנטריפוגה http://www.sigma-centrifuges.co.uk/store/products/refrigerated-sigma-2-16k-centrifuge/</td></tr> <tr><td>Eppendorf Reference 2, 100 &ndash; 1000 &mu; L</td><td>Eppendorf</td><td>4920000083</td><td>Pipette https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Pipeteo-44563/Pipetas-44564/Eppendorf-Reference2-PF-42806.html</td></tr><tr><td>צינורות נעילה בטוחה של Eppendorf, 0.5 מ"ל</td> צינורות <td>30121023 Eppendorf</td><td></td><td> https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Puntas-tubos-y-placas-44512/Tubos-44515/Eppendorf-Safe-Lock-Tubes-PF-8863.html</td></tr><tr><td>NZW ארנבים (בני 16-18 שבועות)</td><td>Granja סן ברנרדו</td><td>אינו זמין</td><td>בניו זילנד ארנבים לבנים http://www.granjasanbernardo.com/en/welcome/</td></tr> <tr><td>סוכרוז&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>S0389-5KG</td><td>סוכרוז לתמיסת שתייה http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/s0389?lang=es&region=ES</td></tr><tr><td>דיאטת בקרת תחזוקת ארנב</td><td>Ssniff</td><td>V2333-000</td><td>בקרת דיאטה http://www.ssniff.com/</td></tr> <tr><td>ארנב דיאטה עתירת שומן</td><td>Ssniff</td><td>S9052-E020</td><td>דיאטה עתירת שומן http://www.ssniff.com/</td></tr> <tr><td>מתלה ארנב ושותה</td><td>Sodispan</td><td>לא זמין</td><td>מתלה לארנבות https://www.sodispan.com/jaulas-y-racks/racks-conejo-y-cobaya/</td></tr> <tr><td>Rabbit restrainer</td><td>Zoonlab</td><td>3045601</td><td>http://www.zoonlab.de/en/index.html</td></tr></tbody></table>

מדגם ניסיוני של דיאטה-induced סינדרום מטבולי בקרב ארנב: שיקולים מתודולוגי, פיתוח והערכה

An Experimental Model of Diet-Induced Metabolic Syndrome in Rabbit: Methodological Considerations, Development, and Assessment

בשנים האחרונות, השמנת יתר, תסמונת מטבולית (גרורות) הפכו בעיה גוברת על בריאות הציבור ועל הקלינית, בהתחשב שלהם שכיחות מוגברת עקב העלייה בישיבה אורחות חיים, הרגלי אכילה לא בריאים. בזכות דגמים בעלי חיים, מחקר בסיסי יכול לחקור את המנגנונים תהליכים פתולוגיים כגון גרורות. כאן, אנו מתארים את שיטות השתמשו כדי לפתח מודל ניסיוני הארנב של המטס דיאטה-induced והערכה שלה. לאחר תקופת והפיזיולוגי, בעלי חיים ניזונים עתירי שומן (שמן קוקוס מוקשה 10% ו- 5% שומן), בסוכרוז (15% סוכרוז מומס במים) דיאטה במשך 28 שבועות. במהלך תקופה זו בוצעו מספר הליכים ניסיוני כדי להעריך את הרכיבים השונים של המטס: מורפולוגי, מדידות לחץ דם, גלוקוז סובלנות נחישות ועמידה הניתוח של מספר סמנים פלזמה. בקצה של תקופה ניסיונית, חיות שפותחה במרכז השמנת יתר, לחץ דם מתון, קדם סכרת, dyslipidemia עם HDL נמוך, LDL גבוה, גידול של רמות טריגליצרידים (TG), וכך מתרבה המרכיבים העיקריים של המטס אנושי. דגם כרוני זה מאפשר במרכיבי הבנת המנגנונים שבבסיס ב התקדמות המחלה, זיהוי סמנים קליניות המאפשרים את הזיהוי של חולים בסיכון, או אפילו בדיקה של חדש טיפולית גישות לטיפול של הפתולוגיה המורכבת הזאת.

המטס מייצג מקבץ של ליקויים מטבולית, לב וכלי דם, שמחקרו ניתן להקל על ידי שימוש ניסיוניות. אכן, להבהיר את המנגנונים שבבסיס שיפוץ פתולוגיים המיוצר על ידי הגרורות, הבחירה של מדגם ניסיוני כראוי דומה המצב האנושי, מתאימה למחקר היא בעלת חשיבות מכרעת. כאן, אנו מציגים את השיטות לזירוז המטס ב הארנב באמצעות תזונה עתיר שומן רווי סוכרוז, אפיון מפורט עבור ההערכה שלו. השימוש של דיאטה במקום מודל בעלי חיים מהונדסים הוא חשיבות רבה מאז תזונה משפיעה על כלל הגוף מטבוליזם19, ובכך הדומה מ...

אנו מתארים שיטות לפיתוח מודל ניסיוני של דיאטה-induced תסמונת מטבולית (גרורות) בארנבים באמצעות דיאטה עתירת שומן, בסוכרוז. בעלי החיים התפתחו השמנה מרכזית, יתר לחץ דם מתון, קדם סכרת ו dyslipidemia, וכך מתרבה המרכיבים העיקריים של המטס אנושי. מודל כרוני זה יאפשר רכישת הידע הבסיסי מנגנונים של התקדמות המחלה.

מדגם ניסיוני של דיאטה-Induced סינדרום מטבולי בקרב ארנב: שיקולים מתודולוגי, פיתוח והערכה

In recent years, obesity and metabolic syndrome (MetS) have become a growing problem for public health and clinical practice, given their increased ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא לפתח ולאפיין מודל תסמונת מטבולית בארנבים באמצעות תזונה עתירת שומן וסוכרוז, שיש לה חשיבות רבה בעת שיוך פנוטיפ לשיפוץ איברים. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום הפתופיזיולוגיה, כגון הבנת שיפוץ איברים והתקדמות המחלה, איתור סמנים פרה-קליניים וקליניים לזיהוי חולים בסיכון, או בדיקת גישות טיפוליות חדשות. הארנב יכול לספק יתרונות רבים על פני מודלים אחרים של בעלי חיים, כולל מורין, כלב, או חזיר, בהתחשב בדמיון שלו לפיזיולוגיה האנושית, ובמחיר סביר של שימוש בפרוטוקולים ומדידות כרוניות.מדגים את ההליך הזה אוסקר אריאס, דוקטורנט מהמעבדה שלנו. כדי להרגיל את בעלי החיים לתזונה שלהם, האכילו כל בעל חיים בקבוצת הביקורת ב-120 גרם של דיאטת ביקורת מדי יום במשך ארבעה שבועות, וספקו מים אד ליביטום. האכילו את בעלי החיים בקבוצת MetS ב-250 גרם צ'או החל מ-50% ביקורת ו-50% צ'או עתיר שומן.לאחר מכן, הגדילו בהדרגה את הדיאטה ל-100% צ'או עתיר שומן עד סוף השבוע הרביעי. בנוסף, תנו לבעלי החיים בקבוצת MetS מים עם 5% סוכרוז בהתחלה, והגדילו את ריכוז הסוכרוז ל-15% עד סוף השבוע הרביעי. רשום את הצריכה היומית של תמיסת צ'או וסוכרוז כדי לחשב את צריכת הקלוריות.לאחר שבעלי החיים הסתגלו לתזונה שלהם, האכילו כל בעל חיים בקבוצת הביקורת ב-120 גרם של צ'או ביקורת, והשקה מדי יום. האכילו את בעלי החיים בקבוצת MetS ב-250 גרם צ'או עתיר שומן, ו-15% סוכרוז במים. החליפו את הצ'או מדי יום, ואת תמיסת הסוכרוז כל שלושה ימים.שקלו את יתרת הצ'או והמים מדי יום כדי להעריך את הצריכה היומית. כדי לבצע הערכה מורפולוגית, שקלו כל בעל חיים על בסיס שבועי. לפני מתן הדיאטה הניסיונית ובשבועות 14 ו-28, יש להרדים את בעל החיים באמצעות קטטר חד פעמי סטרילי כדי להטמיע את הווריד השולי באוזן ימין.לאחר מכן, יש להזריק שמונה מיליגרם לק"ג פרופופול, ואחריו 1.5 מ"ל של תמיסת נתרן כלורי 0.9%. לאחר אישור ההרדמה, הנח את החיה בתנוחת דקוביטוס לרוחב והשתמש בסרט מדידה כדי למדוד את המרחק מהאף לעקב. רשום מדידה זו כאורך.כשהחיה באותה תנוחה, מדוד את המרחק מהאקרומיון בכתף לקצה הכפה ורשום זאת כגובה. כעת, כשהחיה במצב שכיבה, הניחו בעדינות את סרט המדידה סביב קווי המתאר של הבטן ובצעו מדידה. לאחר מכן מדוד את אורך השוק מהחלק התחתון של מפרק הברך ועד להחדרת גיד אכילס.הכינו תמיסת מלאי גלוקוז של 60% עם 60 גרם גלוקוז ב 100 מיליליטר של 0.9% נתרן כלורי. אפשרו לבעלי החיים לצום עם מים בלבד במשך שבע שעות. לאחר מכן, כדי לקבוע גליקמיה בצום, הניחו ארנב בהכרה במסננת במצב השכיבה.הכנס רצועה חדשה למד סוכר, לאחר מכן, השתמש ב-lancet על וריד האוזן השמאלי השולי כדי לקבל טיפת דם וגע בטיפה ברצועת הבדיקה. השתמש במד הסוכר כדי למדוד את רמת הגלוקוז בדם. בעזרת קטטר חד פעמי, יש להחדיר את הווריד השולי של האוזן הימנית ולהזריק בולוס של תמיסת גלוקוז של 60%.השתמש ב-lancet כמו קודם כדי לקחת דגימות דם ב-15, 30, 60, 90, 120 ו-180 דקות לאחר הזרקת הגלוקוז והשתמש במד הסוכר כדי לנתח אותן. הסר את הצנתר החד פעמי, והשתמש בגזה כדי לצבוט את מקום החדרת הצנתר. לאחר קרישת הדם, הסר את הגזה ובדוק את מצב החיה.לרישום לחץ דם יש להכין את מערכת הרכישה הכוללת מתמר לחץ, מזרק 10 מיליליטר עם 0.9% נתרן כלורי, תא עצירה תלת כיווני, מגבר ומחשב נייד למחשב עם תוכנת הרכישה. כדי להגדיר את הציוד, הנח את תא העצירה התלת-כיווני ואת המזרק במתמר הלחץ בין המתמר בצנתר, וחבר את מתמר הלחץ למגבר. לאחר מכן, חבר את המגבר למחשב הנייד.הנח את החיה המודעת שארנב מרסן במצב שכיבה. יש לחמם את האוזן לפני הקנולציה, ולאחר מכן למרוח באופן מקומי חומר הרדמה מקומי באוזן סביב מקום ההחדרה. הקש בעדינות על האזור שבו עוברת חבילת כלי הדם כדי לזהות בקלות את העורק.לאחר מכן הכנס קטטר סטרילי לעורק המרכזי של האוזן השמאלית. כעת, שחררו את המעצורים, ואפשרו לבעל החיים להישאר בשקט למשך 30 דקות. מקם את מתמר הלחץ ליד בעל החיים בגובה הלב, ורשום את לחץ הדם ברציפות במשך 20 דקות, ישירות מהצנתר העורקי.לאחר סיום ההקלטה, הסר את הקטטר והשתמש בגזה כדי לצבוט את מקום החדרת הצנתר כדי לעצור את אובדן הדם. לאחר קרישת הדם, הסר את הגזה ובדוק את מצב החיה. כדי לבצע מדידות פלזמה, אפשרו לבעלי החיים לצום עם מים רק במשך שבע שעות.לאחר מכן הנח בעל חיים בהכרה במסננת במצב שכיבה, והכניס מחט סטרילית בגודל 21 לווריד השולי של האוזן השמאלית. ברגע שהדם מתחיל לטפטף, השליכו את הטיפה הראשונה ואספו את דגימות הדם בצינורות EDTA עד לרמה המצוינת בשפופרת. לאחר מכן אחסן את הדגימות על קרח.צנטריפוגה את דגימות הדם ב-1500 גרם וארבע מעלות צלזיוס למשך 15 דקות. לאחר צנטריפוגה, השתמש בפיפטה כדי לאסוף את הפלזמה ולהכין 250 מיקרוליטר אליקוטים. נתח מיד את הדגימות הטריות עבור כולסטרול כולל, HDL, LDL וטריגליצרידים.כפי שמוצג בטבלה זו, משקל הארנבים בקבוצת MetS עלה בהדרגה בדיאטה עתירת שומן עד לסוף פרוטוקול הניסוי. התנהגות צריכת האנרגיה והתנודות שלה מודגמת בגרף זה, שנע בין 250 ל-815 קילו-קלוריות בקבוצת MetS. בגרף זה מתוארת התרומה היחסית של מקורות האנרגיה השונים.ישנן תקופות קריטיות בשבועות 14 ו-28, מכיוון שבהתחשב בלחץ שנוצר על ידי הליכי הניסוי, ארנבים עשויים להפחית את צריכת הצ'או והמים. היפרגליקמיה קלה נצפית בשבוע 14, שמגיע למישור, ושומר על ערכים דומים בשבוע 28. השטח שמתחת לעקומה גדל גם בקבוצת MedS.יתר לחץ דם קשור קשר הדוק וישיר לחומרת ההשמנה. ארנבים שהוזנו בתזונה עתירת שומן וסוכרוז במשך 28 שבועות הראו עלייה בלחץ הדם הסיסטולי, הדיאסטולי והממוצע כבר בשבוע 14, ועלייה זו בלחץ הדם נשמרת בשבוע 28. לבסוף, במודל כרוני זה, נצפה שינוי בפרופיל השומנים כבר בשבוע 14, ושינוי זה נשאר יציב עד שבוע 28.זה כלל עלייה בטריגליצרידים וב-LDL, ירידה ב-HDL, וללא שינויים בכולסטרול הכולל בבעלי חיים MedS לעומת קבוצת הביקורת בשתי נקודות הזמן. באמצעות מודל כרוני זה, ניתן לבצע מחקרים אחרים כדי לענות על שאלות נוספות כמו כיצד הפתולוגיה משתנה באופן דומה בתסמונת המטבולית האנושית, מה שמאפשר נקודות מבט חדשות על המנגנונים הפתופיזיולוגיים המעורבים בהתקדמות המחלה. מודל ניסיוני זה סלל את הדרך לחוקרים בתחום הפיזיולוגיה והפתופיזיולוגיה האינטראקטיבית לחקור את המנגנונים העומדים בבסיס שיפוץ איברים.איתור סמנים ביולוגיים לזיהוי חולים בסיכון, או בדיקת גישות טיפוליות חדשות לטיפול בתסמונת מטבולית.

an-experimental-model-diet-induced-metabolic-syndrome-rabbit

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

סרטון זה מדגים את הדור של מודל ארנב של סרטן רירית הרחם על ידי הזרקת תרחיף תאי VX2 גרורתי מאוד לתוך קרני הרחם התפורים של הארנב. זה מוביל לדור של סרטן רירית הרחם הראשוני עם גרורות בלוטות הלימפה retroperitoneal.

דוגמנות מודל סרטן רירית הרחם גרורתי: טכניקה ליצירת סרטן רירית הרחם עם גרורות בלוטות הלימפה במודלים ארנב

מודלים חייתיים של טרשת עורקים חיוניים כדי להבין את המנגנון וכדי לחקור גישות חדשות כדי למנוע התפתחות פלאק או קרע, סיבת המוות המובילה בעולם המתועש. פרוטוקול זה משתמשת בשילוב של בלון פציעות ותזונה עשירה כולסטרול לזירוז טרשת עורקים הפלאק בעורק iliac ארנב.

הדגם הארנב של טרשת עורקים מואצת: מבט מתודולוגי הפגיעה בעורק Iliac בלון

אנו מתארים הליך כירורגי המשמש כדי לגרום איסכמיה היקפית בארנבים עם היפרליפידמיה וסוכרת. ניתוח זה משמש כמודל טרום קליני לתנאים המנוסים במחלות עורק היקפי בחולים. אנגיוגרפיה מתואר גם אמצעי כדי למדוד את היקף הוכנסו איסכמיה והתאוששות של perfusion.

המודל הקליני של איסכמיה הגפיים האחוריות בארנבים סוכרתית

כאן אנו מתארים, צעד אחר צעד, פרוטוקול מפורט לביצוע האקו במודל הארנב. אנו מראים כיצד להשיג בצורה נכונה את התצוגות ומטוסי ההדמיה השונים, כמו גם מצבי דימות שונים הזמינים במערכת אקו קלינית המשמשת באופן שגרתי בחולים אנושיים וטרינריים.

בחינת החזה הקרדיוגרפית במודל הארנב

פרוטוקול זה מתאר את השימוש בתזונה מערבית בסגנון מערבי בקפיטריה למודל אכילת יתר והשמנה במכרסמים. כאן, אנו מספקים מיתאר מפורט של מבחר מזון, הכנה ומדידה, ולהסביר גורמים מתודולוגיים המסייעות ביצירת פנוטיפים חזקים ומניבים.

טעים המערבי בסגנון הקפיטריה דיאט כשיטה אמינה עבור מידול דיאטה הנגרמת השמנה אצל מכרסמים

רישום לחץ דם עורקי רציף מאפשר לחקור השפעות של פרמטרים המודינמיים שונים. דו"ח זה מדגים את היישום של ניטור לחץ דם עורקי רציף במודל בעלי חיים גדולים של שבץ איסכמי לקביעת פתופיזיולוגיה של שבץ, השפעה של גורמים המודינמיים שונים והערכת גישות טיפול חדשניות.

ניטור ומודולציה בזמן אמת של לחץ דם במודל ארנב של שבץ איסכמי

המחקר הנוכחי מדגים מודל בעל חיים בעל יכולת שחזור גבוהה של איסכמיה אזורית חריפה של שריר הלב ופגיעה ברפרפוזיה בארנבים באמצעות מיני בית חזה שמאלי למקרי הישרדות או עצם סטרנטומיה בקו האמצע למקרים שאינם הישרדותיים.

מודל של איסכמיה ופגיעה רפרפוזיה בארנבים

מחקר זה מפרט נהלים לביסוס פגיעה כרונית בשרוול מסובב ארנב (RC). באופן ספציפי, הפציעה נוצרת ביחידה תת-סקפולארית (SSC) של גיד-שריר/מיוטנדי כדי לחקות אנטומיה ופתופיזיולוגיה של RC אנושי, כולל ניוון שומן שרירי חמור (FD). פרוטוקול זה יכול להיות מיושם כדי לחקור פציעות RC ולהעריך טיפולים רגנרטיביים.

פיתוח מודל פגיעה בשרוול מסובב דמוי ארנב כרוני לחקר פיברוזיס וניוון שומן שרירי

פרוטוקול זה מתאר שיטה להשראת קרדיומיופתיה סוכרתית באמצעות שילוב של האכלה בתזונה עתירת שומן והזרקת סטרפטוזוטוצין. גישה זו שואפת לספק מסגרת אמינה לחקירה מדעית של קרדיומיופתיה סוכרתית ולחקור דרכים פוטנציאליות ליישומי טיפול קליני.

מידול והערכה של מודל קרדיומיופתיה סוכרתית בעכברים

מחקר זה מציע שיטה ניתנת לשחזור וסטנדרטית על מנת לבסס מודלים של חולדות שמנות המציגים השמנת יתר פשוטה, המאופיינת בדרך כלל בלבלב שומני. הוא כולל גם פרוטוקולים מפורטים לדגימת רקמת הלבלב ואימונוהיסטוכימיה.

פיתוח ותיקוף מתודולוגיה להקמת מודלים של חולדות שמנות עם לבלב שומני טיפוסי

חקור פיתוח מודל תסמונת מטבולית בארנבים באמצעות דיאטה עתירת שומן וסוכר. שיטה זו מאפשרת חקר מנגנוני מחלה, זיהוי סמנים קליניים ובדיקת גישות טיפוליות חדשות במחקר ביו-רפואי.

מדגם ניסיוני של דיאטה-Induced סינדרום מטבולי בקרב ארנב: שיקולים מתודולוגי, פיתוח והערכה

גלה סרטונים נוספים