הדמיה באמצעות מערכת סאונד בתדירות גבוהה (30 / 45MHZ) וכלי דם עוברי העכבר

המטרה הכוללת של הניסוי הבא היא לחקור את המבנה והפרמטרים ההמודינמיים של מחזור הדם העוברי, באמצעות מערכת אולטרסאונד בתדר גבוה. שיטה זו מספקת פנוטיפ מקיף של מורפולוגיה ומדדי זרימה של הלב במהלך ההתפתחות בזמן אמת, ומאפשרת לחקור מומי לב מולדים במסגרות ניסוי. בהשוואה למערכות אולטרסאונד בתדר נמוך, טכניקה זו מספקת רגישות ורזולוציה גבוהות יותר על ידי יצירת תמונות דינמיות דו-ממדיות בקצבי פריימים בתדר גבוה.

כדי להתחיל, הפעל את מערכת הדמיית האולטרסאונד ואת יחידת הניטור הפיזיולוגי. לאחר מכן חבר את המתמר של 30-45 מגה-הרץ, והנח את ראש הסריקה המתאים על המחזיק שלו ליד פלטפורמת ההדמיה. לאחר מכן, בחר באפשרות תוכנית מדידת הלב.

הניחו את ג'ל האולטרסאונד הפוך במיכל החימום המקדים שלו, מכוון ל-37 מעלות צלזיוס. לאחר מכן אשר את מערכת הצינורות המתאימה להרדמה, וודא את רמות החמצן והאיזופלורן. חיטוי פלטפורמת ההדמיה ואזור העבודה.

לבסוף, הגדר את רמת החום של פלטפורמת ההדמיה כדי לשמור על טמפרטורת גוף קבועה של 37 מעלות צלזיוס עבור הסכר. העבירו את הסכר המרדים מתא האינדוקציה של ההרדמה לפלטפורמת ההדמיה, והניחו את החיה במצב שכיבה. ספק הרגעה במצב יציב עם איזופלורן, באמצעות מסכת פנים המחוברת למערכת צינורות ההרדמה.

מרחו ג'ל אלקטרודות על האלקטרודות האלקטרוקרדיוגרפיות המשובצות. לאחר מכן הדביקו בעדינות את הגפיים לאלקטרודות לניטור מתמיד של קצב הלב והנשימה של האם. עקוב אחר טמפרטורת הסכר וקצב הלב, המוצגים ביחידת בקר הפיזיולוגיה.

התאם את רמת האיזופלורן כדי לשמור על דופק ממוצע קרוב ל-450 פעימות לדקה. אשר את רמת ההרדמה המתאימה על ידי הערכת תנוחת העכבר, קצב הלב והתגובה לצביטות בהונות. לאחר מכן השתמש בקרם אפילציה כדי להסיר את הפרווה מגובה אמצע החזה לגפיים התחתונות, כדי למזער את הנחתת האולטרסאונד.

משש את דופן הבטן בעדינות כדי לאתר את העוברים ולפזר אותם. הימנעי מפיזור העוברים בכוח. השתמש בצוואר הרחם כציון דרך, הוסף הערות לכל עובר על בטן הסכר והגדר את כיווניו

אל תכלול את העוברים שבהם הכיוון אינו אמין. סמנו את העוברים בקרן הרחם השמאלית בקידומת L, ואת אלה שבקרני הרחם הימנית בקידומת R, כפי שמוצג כאן. מרחו ג'ל אולטרסאונד מחומם מראש על הבטן, ופזרו אותו בזהירות, כדי למנוע היווצרות בועות.

הוסף כמות נוספת של ג'ל לאזור הסריקה. הנח את בדיקת האולטרסאונד על המחזיק המכני שלה, והזיז אותה בהדרגה לכיוון הבטן כדי ליצור קשר עם שכבת הג'ל העבה, תוך חיפוש אחר הלב הפועם, באמצעות סריקה במצב B. אשר את הכיוון הימני והשמאלי של העובר הבודד בזמן אמת, על ידי הזזת פלטפורמת ההדמיה במישור האופקי.

סרוק את העובר מכף רגל ועד ראש כדי להוסיף הערות לחוטם, לגפיים ולעמוד השדרה, כציוני דרך. דמיין את הלב הפועם והוסף הערות לחדר השמאלי ולחדר הימני. עבור למצב דופלר צבעוני כדי לייעל את הדמיית הלב.

לחץ על כפתור B-Mode כדי לקבל תצוגה לגישה קצרה פריסטרנלית. ודא שהחדר השמאלי והימני מוצגים בקוטר המרבי שלהם במרכז מסגרת רכישת הנתונים, והתחל בהדמיה חיה. שנה את מישורי הסריקה כדי לקבל תצוגה אורכית של ארבעה חדרים.

ראשית זהה את המבנים הנותרים של הלב, כגון הפרוזדורים, המחיצה הבין חדרית ודרכי היציאה השמאלית והימנית. לאחר מכן יש להציג את חדרי החדרים והפרוזדורים באורכם המרבי. התחל ברכישת תמונות על ידי לחיצה על כפתור Cine, כדי לקבל לולאות קולנוע הקלטה רציפות למשך 10 שניות לפחות.

לאחר מכן לחץ על כפתור M-Mode הסריקה כדי לקבל תמונות לב מארבעה מישורי תא כדי להעריך את קצב הלב של העובר ותפקוד החדר. אל תכלול תמונות שאינן מיטביות. לאחר מכן לחץ על כפתור ניתוח כדי למדוד את עובי דופן החדר והקוטר הפנימי בדיאסטולי וסיסטולי.

ראשית התאם את המגזר לזווית רכישה של פחות מ-60 מעלות, כדי לדמיין את התפצלות עורק הריאה ולזהות את דרכי היציאה הנכונות. לאחר מכן לחץ על כפתור דופלר גל פועם כדי לקבל את דפוס הזרימה דרך שסתומי הריאה ואבי העורקים. לאחר מכן, מקם את נפח דגימת הדופלר של גל הדופק כדי לתעד דפוסי דופלר של זרימה מיטרלית של אבי העורקים, ולמדוד מהירות דיאסטולית מוקדמת ומהירות התכווצות הפרוזדורים.

השתמש בסריקת דופלר צבעונית כדי להמחיש את עורק הרחם ועץ כלי הדם של השליה העוברית, באמצעות מתמר 45 מגה-הרץ. הנח את נפח דגימת דופלר הגל הפועם כדי לקבל את דפוס זרימת עורק הטבור. השתמש ברשומת סריקת דופלר הגל הפועם כדי למדוד פרמטרים של זרימת שיא בכלי הדם, כולל זמן תאוצה, זמן פליטה ומהירות זרימה שיא בסיסטולי הקצה.

כבה את מיכל האיזופלורן, לאחר השלמת תהליך ההדמיה. המשך לעקוב אחר טמפרטורת הגוף, קצב הנשימה וקצב הלב במהלך שלב ההתאוששות. תעד את הזמן עד לחידוש מלא של הפעילות הרגילה.

הנתונים בטבלה זו מדגימים את ההיתכנות של שימוש באולטרסאונד בתדר גבוה, כמתואר בפרוטוקול זה, לביצוע פנוטיפ מקיף של מורפולוגיה ותפקוד לב העובר, ופרמטרים של מחזור הדם של השליה העוברית, והשינויים שלהם בעכברים עובריים שנחשפו להיפוקסיה כרונית ברחם. בעקבות הליך זה, ניתן להשתמש בשיטות אחרות כמו מעקב אחר כתמים וניתוח כתמים על מנת לענות על שאלות נוספות, כמו מדידת תפקוד שריר הלב האזורי של שריר הלב המתפתח במחקרים עתידיים. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד להפעיל אולטרסאונד בתדר גבוה ביעילות ולהעריך את המורפולוגיה של לב העובר ופרמטרים במחזור הדם באופן שיטתי בזמן אמת.