Name: דגם ארנב של ביטוי Transgene עמיד ומוחלף כדי שתלי Interposition נפוצים של העורק הראשי (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-09-10T12:30:00.000+00:00
Duration: 13 min 58 s
Description: חקור שיטה לשתלי ורידים בין-מיקומיים בארנבים לבחינת ביטוי טרנסגנים יציב ותפקידים פיזיולוגיים. טכניקה זו מאפשרת לחוקרים לבדוק טיפולי גנים למחלות שתלי ורידים ולזהות גורמי כישלון.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<ol><li>Libby, P., Bornfeldt, K. E., Tall, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atherosclerosis%3A+Successes%2C+Surprises%2C+and+Future+Challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Atherosclerosis: Successes, Surprises, and Future Challenges.</a> Circ Res. 118, 531-534 (2016).</li>
<li>Fowkes, F. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+global+estimates+of+prevalence+and+risk+factors+for+peripheral+artery+disease+in+2000+and+2010%3A+a+systematic+review+and+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Comparison of global estimates of prevalence and risk factors for peripheral artery disease in 2000 and 2010: a systematic review and analysis.</a> Lancet. 382, 1329-1340 (2013).</li>
<li>Mohr, F. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+artery+bypass+graft+surgery+versus+percutaneous+coronary+intervention+in+patients+with+three-vessel+disease+and+left+main+coronary+disease%3A+5-year+follow-up+of+the+randomised%2C+clinical+SYNTAX+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Coronary artery bypass graft surgery versus percutaneous coronary intervention in patients with three-vessel disease and left main coronary disease: 5-year follow-up of the randomised, clinical SYNTAX trial.</a> Lancet. 381, 629-638 (2013).</li>
<li>de Vries, M. R., Simons, K. H., Jukema, J. W., Braun, J., Quax, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vein+graft+failure%3A+from+pathophysiology+to+clinical+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Vein graft failure: from pathophysiology to clinical outcomes.</a> Nat Rev Cardiol. 13 (8), 451-470 (2016).</li>
<li>Harskamp, R. E., Lopes, R. D., Baisden, C. E., de Winter, R. J., Alexander, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Saphenous+vein+graft+failure+after+coronary+artery+bypass+surgery%3A+pathophysiology%2C+management%2C+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Saphenous vein graft failure after coronary artery bypass surgery: pathophysiology, management, and future directions.</a> Ann Surg. 257, 824-833 (2013).</li>
<li>Sabik, J. F. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21768550">Understanding saphenous vein graft patency.</a> Circulation. 124 (3), 273-275 (2011).</li>
<li>Owens, C. D., Ho, K. J., Conte, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lower+extremity+vein+graft+failure%3A+a+translational+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Vasc+Med%22%5BJournal%5D)">Lower extremity vein graft failure: a translational approach.</a> Vasc Med. 13, 63-74 (2008).</li>
<li>Robertson, K. E., McDonald, R. A., Oldroyd, K. G., Nicklin, S. A., Baker, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+coronary+in-stent+restenosis+and+vein+graft+failure%3A+does+vascular+gene+therapy+have+a+role%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">Prevention of coronary in-stent restenosis and vein graft failure: does vascular gene therapy have a role.</a> Pharmacol Ther. 136, 23-34 (2012).</li>
<li>Yla-Herttuala, S., Baker, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+Gene+Therapy%3A+Past%2C+Present%2C+and+Future%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular Gene Therapy: Past, Present, and Future.</a> Mol Ther. 25, 1095-1106 (2017).</li>
<li>Schwartz, L. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adenoviral-mediated+gene+transfer+of+a+constitutively+active+form+of+the+retinoblastoma+gene+product+attenuates+neointimal+thickening+in+experimental+vein+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Adenoviral-mediated gene transfer of a constitutively active form of the retinoblastoma gene product attenuates neointimal thickening in experimental vein grafts.</a> J Vasc Surg. (5), 874-881 (1999).</li>
<li>Eefting, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+lentiviral+short+hairpin+RNA+silencing+of+CCR2+inhibits+vein+graft+thickening+in+hypercholesterolemic+apolipoprotein+E3-Leiden+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Local lentiviral short hairpin RNA silencing of CCR2 inhibits vein graft thickening in hypercholesterolemic apolipoprotein E3-Leiden mice.</a> J Vasc Surg. 50, 152-160 (2009).</li>
<li>Handa, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adventitial+delivery+of+platelet-derived+endothelial+cell+growth+factor+gene+prevented+intimal+hyperplasia+of+vein+graft%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Adventitial delivery of platelet-derived endothelial cell growth factor gene prevented intimal hyperplasia of vein graft.</a> J Vasc Surg. 48 (6), 1566-1574 (2008).</li>
<li>Kloppenburg, G. T., Grauls, G. E., Bruggeman, C. A., Stassen, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adenoviral+activin+A+expression+prevents+vein+graft+intimal+hyperplasia+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Interact+Cardiov+Th%22%5BJournal%5D)">Adenoviral activin A expression prevents vein graft intimal hyperplasia in a rat model.</a> Interact Cardiov Th. 8, 31-34 (2009).</li>
<li>Eefting, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+urokinase+receptor-targeted+inhibitor+for+plasmin+and+matrix+metalloproteinases+suppresses+vein+graft+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">A novel urokinase receptor-targeted inhibitor for plasmin and matrix metalloproteinases suppresses vein graft disease.</a> Cardiovasc Res. 88, 367-375 (2010).</li>
<li>Eichstaedt, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+transfer+of+COX-1+improves+lumen+size+and+blood+flow+in+carotid+bypass+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Gene transfer of COX-1 improves lumen size and blood flow in carotid bypass grafts.</a> J Surg Res. 161, 162-167 (2010).</li>
<li>Kritz, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+modulation+of+Nogo-B+attenuates+neointima+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">In vivo modulation of Nogo-B attenuates neointima formation.</a> Mol Ther. 16 (11), 1798-1804 (2008).</li>
<li>Peroulis, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+ex-vivo+gene+therapy+of+vein+grafts+with+Egr-1+decoy+in+the+suppression+of+intimal+hyperplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Vasc+Endovasc%22%5BJournal%5D)">The role of ex-vivo gene therapy of vein grafts with Egr-1 decoy in the suppression of intimal hyperplasia.</a> Eur J Vasc Endovasc. 40, 216-223 (2010).</li>
<li>Kochanek, S., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC39129/">A new adenoviral vector: Replacement of all viral coding sequences with 28 kb of DNA independently expressing both full-length dystrophin and b-galactosidase.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 93, 5731-5736 (1996).</li>
<li>Parks, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+helper-dependent+adenovirus+vector+system%3A+Removal+of+helper+virus+by+Cre-mediated+excision+of+the+viral+packaging+signal%5BTitle%5D)+AND+%22P+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">A helper-dependent adenovirus vector system: Removal of helper virus by Cre-mediated excision of the viral packaging signal.</a> P Natl Acad Sci USA. 93, 13565-13570 (1996).</li>
<li>Chen, H. -H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistence+in+muscle+of+an+adenoviral+vector+that+lacks+all+viral+genes%5BTitle%5D)+AND+%22P+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Persistence in muscle of an adenoviral vector that lacks all viral genes.</a> P Natl Acad Sci USA. 94, 1645-1650 (1997).</li>
<li>Wen, S., Graf, S., Massey, P. G., Dichek, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+vascular+gene+transfer+with+a+helper-dependent+adenoviral+vector%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Improved vascular gene transfer with a helper-dependent adenoviral vector.</a> Circulation. 110, 1484-1491 (2004).</li>
<li>Du, L., Zhang, J., Clowes, A. W., Dichek, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+gene+transfer+and+durable+transgene+expression+in+grafted+rabbit+veins%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Efficient gene transfer and durable transgene expression in grafted rabbit veins.</a> Hum Gene Ther. 26, 47-58 (2015).</li>
<li>Channon, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+adenoviral+gene+transfer+to+early+venous+bypass+grafts%3A+comparison+with+native+vessels%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Efficient adenoviral gene transfer to early venous bypass grafts: comparison with native vessels.</a> Cardiovasc Res. 35, 505-513 (1997).</li>
<li>Flynn, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+apolipoprotein+A-I+in+rabbit+carotid+endothelium+protects+against+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Expression of apolipoprotein A-I in rabbit carotid endothelium protects against atherosclerosis.</a> Mol Ther. 19, 1833-1841 (2011).</li>
<li>George, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sustained+Reduction+of+Vein+Graft+Neointima+Formation+by+Ex+Vivo+TIMP-3+Gene+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Sustained Reduction of Vein Graft Neointima Formation by Ex Vivo TIMP-3 Gene Therapy.</a> Circulation. 124, 11 Suppl 135-142 (2011).</li>
<li>Chiu-Pinheiro, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+transfer+to+coronary+artery+bypass+conduits%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Thorac+Surg%22%5BJournal%5D)">Gene transfer to coronary artery bypass conduits.</a> Ann Thorac Surg. 74, 1161-1166 (2002).</li>
<li>Byrom, M. J., Bannon, P. G., White, G. H., Ng, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+the+assessment+of+novel+vascular+conduits%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Animal models for the assessment of novel vascular conduits.</a> J Vasc Surg. 52, 176-195 (2010).</li>
<li>Ribichini, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+oral+prednisone+after+stenting+in+a+rabbit+model+of+established+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Effects of oral prednisone after stenting in a rabbit model of established atherosclerosis.</a> J Am Coll Cardiol. 50, 176-185 (2007).</li>
<li>Langheinrich, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+in-stent+restenosis+parameters+in+rabbits+by+Micro-CT%5BTitle%5D)+AND+%22Rofo%22%5BJournal%5D)">Quantification of in-stent restenosis parameters in rabbits by Micro-CT.</a> Rofo. 177 (4), 501-506 (2005).</li>
<li>Wacker, B. K., Dronadula, N., Zhang, J., Dichek, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+Vascular+Gene+Therapy+With+Apolipoprotein+A-I+to+Promote+Regression+of+Atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb%22%5BJournal%5D)">Local Vascular Gene Therapy With Apolipoprotein A-I to Promote Regression of Atherosclerosis.</a> Arterioscler Thromb. 37, 316-327 (2017).</li>
<li>Zwolak, R. M., Kirkman, T. R., Clowes, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atherosclerosis+in+rabbit+vein+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%22%5BJournal%5D)">Atherosclerosis in rabbit vein grafts.</a> Arteriosclerosis. 9, 374-379 (1989).</li>
<li>Qiang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Statin+therapy+prevents+expansive+remodeling+in+venous+bypass+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Statin therapy prevents expansive remodeling in venous bypass grafts.</a> Atherosclerosis. 223, 106-113 (2012).</li>
<li>Casa, L. D. C., Ku, D. N. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28441034">Thrombus Formation at High Shear Rates.</a> Annu Rev Biomed Eng. 19, 415-433 (2017).</li>
<li>Chen, C., Coyle, K. A., Hughes, J. D., Lumsden, A. B., Ku, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+blood+flow+accelerates+intimal+hyperplasia+in+endarterectomized+canine+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Reduced blood flow accelerates intimal hyperplasia in endarterectomized canine arteries.</a> Cardiovasc Surg. 5 (2), 161-168 (1997).</li>
<li>Binns, R. L., Ku, D. N., Stewart, M. T., Ansley, J. P., Coyle, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimal+graft+diameter%3A+effect+of+wall+shear+stress+on+vascular+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Optimal graft diameter: effect of wall shear stress on vascular healing.</a> J Vasc Surg. 10, 326-337 (1989).</li>
<li>Oka, K., Mullins, C. E., Kushwaha, R. S., Leen, A. M., Chan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+therapy+for+rhesus+monkeys+heterozygous+for+LDL+receptor+deficiency+by+balloon+catheter+hepatic+delivery+of+helper-dependent+adenoviral+vector%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Gene therapy for rhesus monkeys heterozygous for LDL receptor deficiency by balloon catheter hepatic delivery of helper-dependent adenoviral vector.</a> Gene Ther. 22, 87-95 (2015).</li>
<li>Miyake, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+neointimal+formation+after+angioplasty+using+nuclear+factor-kappaB+decoy+oligodeoxynucleotide-coated+balloon+catheter+in+rabbit+model%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Cardiovasc+Interv%22%5BJournal%5D)">Prevention of neointimal formation after angioplasty using nuclear factor-kappaB decoy oligodeoxynucleotide-coated balloon catheter in rabbit model.</a> Circ Cardiovasc Interv. 7, 787-796 (2014).</li>
<li>Chorny, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Site-specific+gene+delivery+to+stented+arteries+using+magnetically+guided+zinc+oleate-based+nanoparticles+loaded+with+adenoviral+vectors%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Site-specific gene delivery to stented arteries using magnetically guided zinc oleate-based nanoparticles loaded with adenoviral vectors.</a> FASEB J. 27, 2198-2206 (2013).</li>
<li>Hoshino, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three+catheter-based+strategies+for+cardiac+delivery+of+therapeutic+gelatin+microspheres%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Three catheter-based strategies for cardiac delivery of therapeutic gelatin microspheres.</a> Gene Ther. 13, 1320-1327 (2006).</li>
<li>Nouri, F., Sadeghpour, H., Heidari, R., Dehshahri, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation%2C+characterization%2C+and+transfection+efficiency+of+low+molecular+weight+polyethylenimine-based+nanoparticles+for+delivery+of+the+plasmid+encoding+CD200+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Nanomed%22%5BJournal%5D)">Preparation, characterization, and transfection efficiency of low molecular weight polyethylenimine-based nanoparticles for delivery of the plasmid encoding CD200 gene.</a> Int J Nanomed. , 5557-5569 (2017).</li>
<li>Jia, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eradication+of+osteosarcoma+lung+metastases+following+intranasal+interleukin-12+gene+therapy+using+a+nonviral+polyethylenimine+vector%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Eradication of osteosarcoma lung metastases following intranasal interleukin-12 gene therapy using a nonviral polyethylenimine vector.</a> Cancer Gene Ther. , 260-266 (2002).</li>
<li>Morishita, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intimal+hyperplasia+after+vascular+injury+is+inhibited+by+antisense+cdk+2+kinase+oligonucleotides%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Intimal hyperplasia after vascular injury is inhibited by antisense cdk 2 kinase oligonucleotides.</a> J Clin Invest. 93, 1458-1464 (1994).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

השלבים הקריטיים של פרוטוקול זה כוללים את הניהול של הרדמה, נוגד קרישה, ניתוח מניפולציה של הווריד של עורק/הושתל, בגרימת מדידות של הווריד של המושתל. ניהול נכון של הרדמה היא קריטית במודל זה מרובים הישרדות ניתוח הכולל שתי פעולות ארוכות יחסית (בדרך כלל 3-3.5 h על הווריד הדו-צדדיים הרכבה ו- 1.5-2.5 h עבור שתל הדו-צדדיים התמרה חושית). יש מנוהל הרדמה ויה nosecone והן על ידי צנרור אנדוטרכאליות ואנו נמצא כי צנרור שיפור ההישרדות לאחר הניתוח התמרה חושית שתל, ואולי כי ללחוץ אוורור מונע את תמט הריאות, הקשורים . כשל נשימתי ארנבים הם מאת...

טרשת העורקים היא מחלה דלקתית כרונית שבה הצטברות שומנים בדם ודלקת בדופן כלי הדם להוביל היצרות של כלי השיט לומן, התקפי לב, שבץ, אובדן גפיים1,2. התערבויות מלעורית (למשל., אנגיופלסטיקה ולא סטנט) וטיפול רפואי (למשל., סטטינים antiplatelet סוכנים) טיפולים שימושי עבור טרשת עורקים; עם זאת, לעתים קרובות הם יעילים בטיפול חמור מחלה חסימתית שני ב circulations כלילית ואת היקפי. מעקף השתלת עור, באמצעות מקטעים וריד autogenous, נשאר הליך נפוץ לטיפול בחולים עם חמור, מפוזר כלילית והיקפי מחלת כלי דם3,4. עם זאת, הווריד שתלי להציב שני עוצר ויש circulations היקפי המסכן המחירים patency לטווח ארוך. במחזור כלילית, כ- 10-20% של וריד שתלי הם occluded-1 שנה ו- 50% הם occluded 10 שנים5,6. במחזור היקפיים, וריד שתל כשל תעריפי 30-50%-5 שנים7.
ריפוי גנטי היא גישה אטרקטיבית למניעת כשל שתל הווריד. כי זה יכול לספק מוצר גנים טיפוליים בדיוק באתר של המחלה. בהתאם לכך, מחקרים פרה רבים בדקו וריד שתל ג'ין טיפול8,9. עם זאת, בעיקרו של דבר כל מחקרים אלו בחנו את היעילות בגיל מוקדם זמן נקודות (2-12 שבועות)10,11,12,13,14,15, 16 , 17. אנו מודעים אין ראיות כי התערבויות ריפוי גנטי יכול לספק עמיד (שנים) הגנה מפני המנוח כשל שתל הווריד הנובעת בדרך כלל היפרפלזיה של טרשת עורקים neointimal4. פיתחנו שיטה מאפשרת ביטוי transgene עמיד בורידים המושתל, ובכך מאפשר בדיקה של ריפוי גנטי התערבויות בנקודות זמן מאוחר, כמו גם מוקדם. כדי להשיג את הביטוי transgene עמיד, השיטה משלבת HDAd וקטורים אסטרטגיה התמרה חושית מושהית. וקטורים HDAd לספק ביטוי transgene ממושך בשל העדר גנים ויראלי, מניעת זיהוי (ולא דחייה) של תאים transduced על ידי המערכת החיסונית18,19,20, 21. מושהית התמרה חושית (שבוצעו 28 ימים לאחר הצבת שתל) מונע איבוד תאים transduced במהלך תהליך arterialization המתרחש מוקדם לאחר grafting22.
שיטות אחרות להשיג transgene טיפולית ביטוי בקיר שתל הווריד להסתמך על התמרה חושית של השתל וריד בזמנו של שתל השמה10,11,12,15,16 ,17. כאשר נמדד באופן סדרתי, transgene הביטוי תוך שימוש בגישה זו יורדים במהירות לאחר התמרה חושית22,23. בהתאם לכך, מחקרים באמצעות גישה זו לא בחנו את היעילות מעבר 12 שבועות לאחר וריד משתילים, עם ביותר לא הערכת יעילותם מעבר 4 שבועות. לעומת זאת, השיטה שלנו משיגה שתל הווריד ביטוי transgene stably נמשך לפחות 24 שבועות מבוסס על מחקרים דומים שבוצעו בסביר-העורקים ממשיך22,יותר24. אנחנו מודעים ללא אחרים וריד שתל ג'ין טיפול התערבות שמקבל ביטוי transgene יציבה משך זמן זה.
השתמשנו דגם ארנב לפתח את השיטה שלנו. אחרים השתמשו מכרסמים, ארנבות, או חיות גדולות כדי לבדוק את הווריד להשתיל ג'ין טיפול10,11,12,15,16,17,25, 26. לעומת מודלים מכרסמים, ארנבונים יקרים יותר, והם כפופים דרישות רגולטוריות מחמירים יותר. עם זאת, בהשוואה חיות גדולות (למשל., חזירים, כלבים), ארנבים הם הרבה פחות יקרים לרכוש בית הרבה יותר קל להתמודד. יתר על כן, הארנב כלי דומה כלי האנושי מבחינה פיזיולוגית27, הם מספיק גדולים כי הם יכולים לשמש לבדיקת התערבויות מלעורית28,29, הם מספקים מספיק רקמה את זה נקודות קצה מרובות (למשל., היסטולוגיה, חלבון, RNA) יכולים להיבדק באמצעות כלי דם בודדת הדגימה22,30. בנוסף, כאשר הארנבים עם שתלי העורק ניזונים מדיאטה עתירת שומן, הם מפתחים וריד שתל טרשת עורקים31,32, אשר היא גורם שכיח של עורקים מעקף לווריד שתל כשל4,5 . אלה שתלי העורק ארנב טרשת עורקים יכול לשמש מצע לבדיקת טיפול גנטי התערבויות נמסרות בשיטה זו. פרוטוקול שסופקו יכול לעזור חוקרים לשלוט טכנית הכישורים הדרושים כדי להשיג transgene עמיד ביטוי שתלי העורק ארנב.

<table><tbody><tr><td>מזרק <חזק>חד פעמי</חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>3 מ"ל עם מחט 24 גרם</td><td>בקטון דיקינסון</td><td>309571</td><td>2x לניתוח השתלת ורידים; 2x לניתוח העברת גנים &nbsp;</td></tr><tr><td>מזרק 1 מ"ל עם מחט 27G</td><td>בקטון דיקינסון</td><td>309623</td><td>2x לניתוח השתלת ורידים, 5x לניתוח העברת גנים</td></tr><tr><td>מחט 19G</td><td>בקטון דיקינסון</td><td>305187</td><td>גן ניתוח</td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr> העברה <tr><td>מזרק 20 מ"ל, מנעול לואר</td><td>Nipro Medical Corp</td><td>JD+20L</td><td></td></tr><tr><td>קטטרים, 24Ga x 3/4 אינץ'</td><td>Terumo Medical Products</td><td>SROX2419V</td><td></td></tr><tr><td>מחט 21G</td><td>בקטון דיקינסון</td><td>305165</td><td>ניתוח העברת גנים ומזרק 20 מ"ל של</td></tr><tr><td>גזה מי מלח 4 אינץ' x 4 אינץ'</td><td>Dynarex</td><td>3242</td> <td>~ 10-15 לניתוח</td></tr><tr><td>3-0 תפר משי</td><td>Covidien Ltd.</td><td>S-244</td><td></td></tr><tr><td>5-0 תפר משי</td><td>Covidien Ltd.</td><td>S-182</td><td></td></tr><tr><td>7-0 תפר פוליפרופילן</td><td>CP רפואי</td><td>8703P</td><td>ניתוח השתלת ורידים</td></tr><tr><td>7-0 תפר פוליפרופילן</td><td>CP רפואי</td><td>8648P</td><td>ניתוח העברת גנים</td></tr><tr><td>5-0 תפר חומצה פוליגליקולית</td><td>CP רפואי</td><td>421A</td><td></td></tr><tr><td>3-0 תפר חומצה פוליגליקולית</td><td>CP רפואי</td><td>398A</td><td></td></tr><tr><td>ספוגיות אלכוהול</td><td>Covidien Ltd.</td><td>6818</td><td>למיקום</td></tr><tr><td>תקע קטטר</td> קו IV <td>Vetoquinol</td><td>411498</td><td></td></tr><tr><td>Ketamine HCl, 100 מ"ג/מ"ל</td><td>Vedco Inc.</td><td></td><td></td>5098916106</tr><tr><td>קסילזין, 100 מ"ג/מ"ל</td><td>Akorn Inc.</td><td>4821</td><td></td></tr><tr><td>לידוקאין, 20 מ"ג/מ"ל</td><td>פייזר</td><td>409427702</td><td></td></tr><tr><td>מרקאין 0.5%</td> <td>פייזר</td><td>409161050</td><td></td></tr><tr><td>Beuthanasia D-Special</td><td>Intervet Inc.</td><td>NDC 00061047305</td><td>ניתוח קציר בלבד</td></tr><tr><td>בופרנורפין הידרוכלוריד, 0.3 מ"ג/מ"ל</td><td>פטרסון וטרינרי</td><td>12496075705</td><td></td></tr><tr><td>שקית מלח IV, 0.9% נתרן כלורי</td><td>בקסטר</td><td>2B1309</td><td></td></tr><tr><td>הפרין&nbsp; (5,000 יח'/מ"ל)</td><td>APP Pharmaceuticals</td><td>NDC 63323-047-10</td><td></td></tr><tr><td>פפאברין (3.5 מ"ג/מ"ל)</td><td>אמריקן ריאגנט בע"מ</td><td>NDC 0517-4002-25</td><td>מדולל ממלאי 30 מ"ג/מ"ל; השתמש במדבקת פנטניל מקסימלית של 1 מ"ל</td></tr>, <tr><td>25 מק"ג לשעה</td><td>של Apotex Corp.</td><td>NDC 60505-7006-2</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>מספר קטלוגי של ספקים</td><td>אינם זמינים</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp; וקטור ויראלי</td><td>ניתוח העברת גנים בלבד</td><חזק>מכשירים כירורגיים</חזק>מחזיק מחט מצנבאום 7 אינץ' ישר Roboz RS-7900 מספריים הפעלה 6.5 אינץ' ישר קהה/קהה Roboz RS-6828 מחזיק מחט /w מספריים תפרים Miltex 8-14-IMC <td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo מספריים</td><td>Roboz</td><td>RS-5658</td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מחט Castroviejo, 5.75 אינץ' ישר עם מנעול</td><td>Roboz</td><td>RS-6412</td><td></td></tr><tr><td>מספריים סטיבנס 4.25 אינץ' מעוקל קהה/בוטה</td><td>Roboz</td><td>RS-5943</td><td></td></tr><tr><td>מפסק אלם 4 אינץ' 4X4 5 מ"מ שיניים קהות</td><td>Roboz</td><td>RS-6514</td><td>2x</td></tr><tr><td>מהדק מגבת Backhaus 3.5 אינץ'</td> <td>Roboz</td><td></td><td>4x</td></tr><tr><td>מלקחיים להגדרת מיקרו קליפ 4.75 אינץ'</td> <td>Roboz</td><td>RS-6496</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו כלי דם, 11 מ"מ</td><td>Roboz</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Surg-I-Loop</td><td>Scanlan International</td><td>1001-81M</td><td>5 ס"מ</td></tr><tr><td>אורך מלקחיים בונקולטו, 4 אינץ' (10 ס"מ) שיניים אורכיים ארוכים, קצה משונן צולב, רוחב קצה 1.2 מ"מ</td><td>Roboz</td><td>RS-5210</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #3 מלקחיים קצה אינוקס גודל 0.17 ופעמים; 0.10 מ"מ</td><td>Roboz</td><td>RS-5042</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים Graefe, 4 אינץ' (10 ס"מ) ישר משונן ארוך, קצה 0.8 מ"מ</td><td>Roboz</td><td>RS-5280</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים ליתושים הלסטד, &nbsp; 5 אינץ' ישר, 1.3 מ"מ טיפים</td><td>Roboz</td><td>RS-7110</td><td>2x</td></tr><tr><td>מלקחיים ליתושים הלסטד, &nbsp; 5 אינץ' מעוקל, 1.3 מ"מ טיפים</td><td>Roboz</td><td>RS-7111</td><td></td></tr><tr><td>Jacobson מלקחיים יתושים 5 אינץ' מעוקל עדין במיוחד, 0.9 מ"מ טיפים</td><td>Roboz</td><td>RS-7117</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים Kantrowitz, 7.25 אינץ' עדין 90 מעלות, קצות 1.7 מ"מ</td><td>Roboz</td><td>RS-7305</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים לרקמות 5 אינץ', 1X2 שיניים, 2 מ"מ רוחב קצה</td><td>Roboz</td><td>RS-8162</td><td></td></tr><tr><td>Allis-Baby מלקחיים, 12 ס"מ, 4x5 שיניים, 3 מ"מ רוחב קצה</td><td>Fine Science</td><td>Tools 11092-12</td><td>2x</td></tr><tr><td>מלקחיים של Adson, 12 ס"מ, משוננים, ישרים</td><td>Fine Science Tools</td><td>11006-12</td><td></td></tr><tr><td>ידית אלקטרוכירורגיה ואלקטרודה וטרינרית</td><td>ייצור MACAN</td><td>HPAC-1; R-F11</td><td></td></tr> <tr><td><חזק>ציוד סוויטה כירורגית</חזקה></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>שמיכת מים חמים ומשאבה במחזור</td><td>מספר ספקים מספר</td><td>קטלוגי לא זמין</td><td></td></tr><tr><td>יחידת חימום מחבק Bair</td><td>3M</td><td>דגם 505</td><td></td></tr><tr><td>IV משאבת עירוי</td><td>Heska</td><td>Vet IV 2.2</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane ומטמון נבלות</td><td>מספר ספקים</td><td>מספר קטלוגי אינו זמין</td><td></td></tr><tr><td>מוניטור וטרינרי רב פרמטרי</td><td>Surgivet Surgivet</td><td>Advisor</td><td></td></tr><tr><td>יחידת אלקטרוכירורגיה וטרינרית</td><td>MACAN Manufacturing</td><td>MV-9</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ כירורגי</td><td>D.F. Vasconcellos</td><td>M900</td><td>הגדלה פי 25 לניתוח השתלת ורידים; הגדלה פי 16 לניתוח העברת גנים</td></tr></tbody></table>

דגם ארנב של ביטוי transgene עמיד ומוחלף כדי שתלי interposition נפוצים של העורק הראשי

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

ניתוח מעקפים שתל הווריד הוא טיפול נפוץ מחלת עורקים ריטלין; עם זאת, הצלחה לטווח ארוך הוא מוגבל על ידי שתל כשל פקקת, היפרפלזיה intimal וכתוצאה טרשת עורקים. מטרת מאמר זה היא להדגים שיטה עבור הצבת interposition ורידים דו-צדדית שתלי ארנב, ואז transducing את השתלים עם וקטור העברת גנים שמקבל ביטוי transgene עמיד. השיטה מאפשרת החקירה של התפקיד הביולוגי של הגנים שלהם מוצרי חלבון הומאוסטזיס שתל הווריד נורמלי. זה גם מאפשר בדיקה של transgenes על הפעילות שעלולים למנוע כשל שתל הווריד, למשל., אם הביטוי של transgene ומונע גידול neointimal, מפחית דלקת כלי הדם או מפחית טרשת עורקים בארנבים האכיל עם דיאטה עתירת שומן. במהלך ניתוח הישרדות הראשונית, פילוחי ימינה ושמאלה חיצוני ומוחלף טוחנות, להציב מבקיעים כמו הפוכה הקצה לצד נפוצות העורק interposition שתלים. במהלך ניתוח הישרדות נוסף, ביצע 28 ימים לאחר מכן, כל אחד השתלים הוא מבודד זרימת הדם עם תפסים, לומן (דרך arteriotomy) מלאים פתרון שמכיל וקטור (HDAd) adenoviral תלויי-עוזר. לאחר דגירה 20-מין, הפתרון וקטור הוא aspirated arteriotomy יתוקן, זרימה משוחזר. הורידים נקצרים בנקודות זמן מוכתב על ידי בודדים בפרוטוקולים ניסיוניים. העיכוב 28 יום בין הצבת שתל את התמרה חושית יש צורך להבטיח את העיבוד של השתל וריד אל הדם העורקי. הסתגלות זו מונע אובדן מהיר של הביטוי transgene המתרחשת אצל שתלי העורק transduced לפני או מיד לאחר הרכבה. השיטה היא ייחודית ביכולתה כדי להשיג את הביטוי transgene עמיד, יציב בורידים המושתל. לעומת דגמים אחרים של שתל הווריד חיה גדולה, ארנבים יש יתרונות הטיפול זולה וקלה. לעומת מודלים שתל הווריד מכרסמים, ארנבונים יש כלי דם גדולים יותר, קל יותר לתמרן, המספקים שפע רקמות לצורך ניתוח.

יש לאמת את מיומנות טכנית של מפעיל חדש לפני האופרטור באפשרותך להשתמש בשיטה זו כדי ליצור נתוני הניסוי. אבן הדרך הראשונה זה מפעיל חדש חייב להשיג הוא patency שתל הווריד עקבי אחרי הניתוח הראשוני הרכבה וריד והן את הניתוח מושהית-התמרה חושית עוקבות. Patency מעל 90% לאחר כל אחד הניתוחים רצויות ואפשריות. Patency יכול להיות מוערך לא-פולשנית באמצעות אולטרסאונד transcutaneous, אשר אנו בדרך כלל מופיעים עם 5-7 יום לאחר הניתוח. ב הארנבים עם ורידים פטנטים, הבחינה אולטרסאונד יחשפו לכלי דם גדולים עם זרימת ה...

שיטה זו מתארת את המיקום של שתלי העורק interposition בארנבים, את התמרה חושית של השתלים, ההישג של הביטוי transgene עמיד. דבר זה מאפשר החקירה של תפקידים פיזיולוגיים ופתולוגיים של transgenes ומוצרים שלהם חלבון בורידים המושתל, ובדיקות של ג'ין טיפולים למחלות שתל הווריד.

דגם ארנב של ביטוי Transgene עמיד ומוחלף כדי שתלי Interposition נפוצים של העורק הראשי

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...

שיטה זו יכולה לענות על שאלות מפתח לגבי הפתוגנזה של כשל בהשתלת ורידים. לדוגמה, הוא יכול לזהות מתווכים של כישלון השתל ואסטרטגיות בדיקה שמטרתן למנוע כישלון השתל. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא יכולתה להשיג ביטוי טרנסגן עמיד ויציב באנדותל השתלת הוורידים.לאחר הרדמת ארנב על פי פרוטוקול הטקסט, יש לגלח את החיה מחריץ החזה ועד לקצה הלסת התחתונה. עם השלמת המערך הכירורגי השתמש בצריבה חשמלית כדי לחתוך את העור לאורך קו האמצע בין חריץ החזה ללסת התחתונה, באורך של כשבעה עד תשעה סנטימטרים. לאחר מכן חבר מגבת clamps כדי להחזיק את החתך פתוח.לנתח בצורה בוטה מתחת לפאשיה לאורך כל קו האמצע. לאחר מכן השתמש בצריבה חשמלית כדי לחתוך את שכבת הפאשיה המנותחת לאורך קו האמצע. לאחר מכן, החל מהצד הימני, נתח בין שריר ההיואיד החזה המכסה את קנה הנשימה לבין השריר הסטרנואפלי כדי לחשוף את עורק הצוואר המשותף.לאחר מכן נתח בזהירות קטע של ארבעה עד חמישה סנטימטרים מעורק הצוואר המשותף וענפיו הגדולים יותר נקיים מהרקמות שמסביב. השתמש בתפרי משי 5-0 כדי לקשור את הענפים הגדולים יותר של עורק הצוואר המשותף לפני חיתוך כל ענף דיסטלי לתפר. לאחר חזרה על הדיסקציה על הצוואר הנפוץ השמאלי, השתמש במלקחיים המחזיקים רקמות כדי לסגור זמנית את שכבת הרקמה התת עורית.לאחר מכן נתח את הפאשיה השטחית מהעור בצד ימין עד לחשיפת וריד הצוואר החיצוני. נתח קטע של

a-rabbit-model-durable-transgene-expression-jugular-vein-to-common

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

היפרפלזיה Neointimal היא הגורם העיקרי להיצרות בעורקי arterialized. אנו מציעים פרוטוקול חדש שבו עורק הצוואר החיצוני הנכון מושתל באמצעות טכניקת השרוול בעורק הראשי המשותף של חולדות ספרג Dawley. שיעור ההישרדות היה 100% בנקודת הזמן של קרבה.

אימון טכניקה מתוחכמת מייקרו: התערבותם של שתלי וריד צוואר חיצוניים בעורק התרדמה המשותף בחולדות

בסרטון זה, אנו מדגימים הליך לקצירת קטע כירורגי של וריד הצוואר ממודל ארנב. המקטע שנכרת יכול לשמש כשתל ורידים אוטולוגי לחקר היפרפלזיה אינטימית המתפתחת עקב לחץ דם עורקי.

קציר השתלת וריד הצוואר ממודל ארנב: הליך כירורגי לכריתת קטע של וריד הצוואר של ארנב למחקרי ex vivo

סרטון זה מדגים את האינטרפוזיציה של עורק התרדמה של הארנב עם וריד הצוואר כדי לגרום להגדלה אינטימית ורידית על ידי חשיפת הוורידים ללחץ עורקי. מודל זה יסייע לחקור התערבויות מולקולריות וגנטיות כדי להחליש את ההתקדמות של היפרפלזיה אינטימית לאחר ניתוחי רה-וסקולריזציה.

עורק התרדמה והווריד הצווארי: טכניקה לגרימת היפרפלזיה אינטימית ורידית במודל ארנב

שיטה זו היא להציג את transgene לתוך אנדותל עורקי התרדמה ארנב. הקדמה של transgene מאפשר את ההערכה של תפקיד ביולוגי של המוצר transgene העורקים נורמלי או מחלת מודלים. השיטה שימושית גם למדידת פעילות של רצפי DNA תקינה.

אין ויוו העברה גנטית כדי אנדותל העורק נפוצות הארנב

הפרוטוקול הנוכחי שואפת ניסויים ליצור היפרפלזיה של הוורידים ורידים על ידי הקרבת ורידים ללחץ דם עורקי לפיתוח אסטרטגיות להחליש את היפרפלזיה בתוך ורידים בעקבות ניתוח revascularization באמצעות שתלי וריד.

ורידי ארנב מודל האינטרפוזיציה מחקה ניתוח מחדש באמצעות שתלי וריד כדי להעריך את היפרפלזיה באמצעות לחץ דם עורקי

פיתוח ובדיקה של מכשירים אנדווסקולריים לטיפול במפרצת תוך גולגולתית הם עדיין בעלי חשיבות רבה. רוב דגמי המפרצת המשמשים כיום מפספסים את המאפיינים החשובים של דופן מנוונת עורקית או את ההמודינמיקה של ביפורקציה אמיתית. לכן, שמנו לנו למטרה לעצב מודל חדש של ביפורקציה של נרתיק עורקי בארנבים.

נרתיק עורקי מיקרו-כירורגי מודל מפרצת ביבכור בארנב

כאן, מוצג פרוטוקול להשתלת שתל כלי דם מהונדס רקמות בעורק הצוואר של העכבר בטכניקת השרוול, המספק מודל בעל חיים מתאים לחקירת מנגנוני התחדשות רקמות כלי הדם.

השתלת שתל כלי דם מהונדס רקמות בעורק הצוואר של העכבר בטכניקת שרוול

יש מצטבר ראיות, שנפשי מראש איסכמי (PC) - אתגר איסכמי שאינו מזיק למוח - מעניק הגנה זמנית לעלבון איסכמי מזיק שלאחר מכן. הקמנו הבילטרלי חסימת עורק תרדמה משותפת (BCCAO) כגירוי נפשית מראש כדי לגרום לסובלנות איסכמי מוקדם (IT) לאיסכמיה מוחית מוקדי חולפים (הנגרם על ידי חסימה של עורק מוח אמצעי, MCAO) בC57BL6 / י עכברים.

ספיגה דו צדדי משותף עורק תרדמה כגירוי נפשית מראש מספיק כדי לגרום סובלנות איסכמי מוקדמת לאיסכמיה מוחית מיקוד

מודל של השתלת תומכן בעורק התרדמה עכבר מתואר. בהשוואה לשיטות אחרות דומות, הליך זה הוא מהיר מאוד, פשוט ונגיש, ומציע את האפשרות ללמוד בדרך נוחה תגובת קיר כלי דם לסטנטים משחררי תרופות שונים והמנגנונים המולקולריים של restenosis.

דגם Murine של השתלת תומכן בעורק הראשי לחקר restenosis

אנו מתארים שיטה ליצירת מודל אמין של יתר לחץ דם ורידים במוח בעכבר הבוגר. מודל זה תואר בהרחבה ונבדק בחולדה. עמית החדש בעכברים פותח את האפשרות של שימוש בבעלי חיים מהונדסים גנטיים ובכך מרחיב את היישומים של המודל.

למבוגרים עכבר ורידי יתר לחץ דם דגם: עורק תרדמה משותף לחיצוני הצוואר וריד השקה.

חקור שיטה לשתלי ורידים בין-מיקומיים בארנבים לבחינת ביטוי טרנסגנים יציב ותפקידים פיזיולוגיים. טכניקה זו מאפשרת לחוקרים לבדוק טיפולי גנים למחלות שתלי ורידים ולזהות גורמי כישלון.

דגם ארנב של ביטוי Transgene עמיד ומוחלף כדי שתלי Interposition נפוצים של העורק הראשי

גלה סרטונים נוספים