Name: פקקת ורידים עמוקה שנגזרות Stasis בעכברים המנוטרת על-ידי בדיקת אולטרה סאונד בתדירות גבוהה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-13T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 44 s
Description: למדו לגרום לפקקת ורידים עמוקה בעכברים באמצעות מודל הסטאזיס בעורק הווריד התחתון, ולנטר את היווצרות הקריש באולטרה סאונד בתדירות גבוהה. שיטה זו מאפשרת מעקב לא פולשני אחר דינמיקת הקריש.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי מענק של הלב ועל קו הבסיס של קנדה על ידי מוריס וקרן משפחת בלה Fainman. המחברים רוצה להודות ורוניק מישו עזרה טכנית עם מערכת הדמיה של סאונד VEVO770.

<ol><li>Fowkes, F. J., Price, J. F., Fowkes, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+of+diagnosed+deep+vein+thrombosis+in+the+general+population%3A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Vasc+Endovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Incidence of diagnosed deep vein thrombosis in the general population: systematic review.</a> Eur J Vasc Endovasc Surg. 25 (1), 1-5 (2003).</li>
<li>McGuinness, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recruitment+of+labelled+monocytes+by+experimental+venous+thrombi%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Recruitment of labelled monocytes by experimental venous thrombi.</a> Thromb Haemost. 85 (6), 1018-1024 (2001).</li>
<li>Singh, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Failure+of+thrombus+to+resolve+in+urokinase-type+plasminogen+activator+gene-knockout+mice%3A+rescue+by+normal+bone+marrow-derived+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Failure of thrombus to resolve in urokinase-type plasminogen activator gene-knockout mice: rescue by normal bone marrow-derived cells.</a> Circulation. 107 (6), 869-875 (2003).</li>
<li>Itoh, K., Ieko, M., Hiraguchi, E., Kitayama, H., Tsukamoto, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+kinetics+of+99mTc+labeled+recombinant+tissue+plasminogen+activator+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">In vivo kinetics of 99mTc labeled recombinant tissue plasminogen activator in rabbits.</a> Ann Nucl Med. 8 (3), 193-199 (1994).</li>
<li>Kang, C., Bonneau, M., Brouland, J. P., Bal dit Sollier, C., Drouet, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+pig+models+of+venous+thrombosis+mimicking+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">In vivo pig models of venous thrombosis mimicking human disease.</a> Thromb Haemost. 89 (2), 256-263 (2003).</li>
<li>Knight, L. C., Baidoo, K. E., Romano, J. E., Gabriel, J. L., Maurer, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+pulmonary+emboli+and+deep+venous+thrombi+with+99mTc-bitistatin%2C+a+platelet-binding+polypeptide+from+viper+venom%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">Imaging pulmonary emboli and deep venous thrombi with 99mTc-bitistatin, a platelet-binding polypeptide from viper venom.</a> J Nucl Med. 41 (6), 1056-1064 (2000).</li>
<li>Wakefield, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Venous+thrombosis+prophylaxis+by+inflammatory+inhibition+without+anticoagulation+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Venous thrombosis prophylaxis by inflammatory inhibition without anticoagulation therapy.</a> J Vasc Surg. 31 (2), 309-324 (2000).</li>
<li>Robins, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+Gas6+contributes+to+thrombogenesis+and+promotes+tissue+factor+up-regulation+after+vessel+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Vascular Gas6 contributes to thrombogenesis and promotes tissue factor up-regulation after vessel injury in mice.</a> Blood. 121 (4), 692-699 (2013).</li>
<li>Aghourian, M. N., Lemarie, C. A., Bertin, F. R., Blostein, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prostaglandin+E+synthase+is+upregulated+by+Gas6+during+cancer-induced+venous+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Prostaglandin E synthase is upregulated by Gas6 during cancer-induced venous thrombosis.</a> Blood. 127 (6), 769-777 (2016).</li>
<li>Laurance, S., et al. <a target="_blank" href="http://atvb.ahajournals.org/content/early/2017/04/27/ATVBAHA.116.308925">Gas6 (Growth Arrest-Specific 6) Promotes Inflammatory (CCR2hiCX3CR1lo) Monocyte Recruitment in Venous Thrombosis.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. , (2017).</li>
<li>Diaz, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+review+of+mouse+models+of+venous+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Critical review of mouse models of venous thrombosis.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 32 (3), 556-562 (2012).</li>
<li>Aghourian, M. N., Lemarie, C. A., Blostein, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+monitoring+of+venous+thrombosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">In vivo monitoring of venous thrombosis in mice.</a> J Thromb Haemost. 10 (3), 447-452 (2012).</li>
<li>Brandt, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deep+vein+thrombus+formation+induced+by+flow+reduction+in+mice+is+determined+by+venous+side+branches%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Hemorheol+Microcirc%22%5BJournal%5D)">Deep vein thrombus formation induced by flow reduction in mice is determined by venous side branches.</a> Clin Hemorheol Microcirc. 56 (2), 145-152 (2014).</li>
<li>Diaz, J. A., Farris, D. M., Wrobleski, S. K., Myers, D. D., Wakefield, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inferior+vena+cava+branch+variations+in+C57BL%2F6+mice+have+an+impact+on+thrombus+size+in+an+IVC+ligation+%28stasis%29+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Inferior vena cava branch variations in C57BL/6 mice have an impact on thrombus size in an IVC ligation (stasis) model.</a> J Thromb Haemost. 13 (4), 660-664 (2015).</li>
<li>Luther, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innate+Effector-Memory+T+Cell+Activation+Regulates+Post-Thrombotic+Vein+Wall+Inflammation+and+Thrombus+Resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Innate Effector-Memory T Cell Activation Regulates Post-Thrombotic Vein Wall Inflammation and Thrombus Resolution.</a> Circ Res. , (2016).</li>
<li>Subramaniam, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+contributions+of+complement+factors+to+platelet+activation+and+fibrin+formation+in+venous+thrombus+development%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Distinct contributions of complement factors to platelet activation and fibrin formation in venous thrombus development.</a> Blood. 129 (16), 2291-2302 (2017).</li>
<li>Diaz, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombogenesis+with+continuous+blood+flow+in+the+inferior+vena+cava.+A+novel+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Thrombogenesis with continuous blood flow in the inferior vena cava. A novel mouse model.</a> Thromb Haemost. 104 (2), 366-375 (2010).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

ישנם מספר צעדים קריטיים על היווצרות כגון ורידים מוצלח באמצעות מודל ההקפאה. אינדוקציה של פקקת ורידים הוא יותר מאתגרת בעכברים ישנים בשל הצטברות שומן סביב הכלילי התחתון של אבי העורקים. באופן אידיאלי, עכברים לעבור הליך זה צריך להיות 8 - בן-10 שבועות. נהדר להקפיד שלא לגרום נזק אנדותל IVC במהלך עמום, קשירה. בנוסף, זה הכרחי כדי לשמור את החיה בתוך חממה 34 מעלות צלזיוס במשך לפחות 30 דקות לאחר הניתוח וכדי להחזיר אותה החברה של חיה אחרת רק לאחר החלמה מלאה. כאשר הניתוח נעשה כראוי, בעלי החיים מתנהגים יפה להפליא במהלך הטיפול לאחר הניתו...

ורידי פקיקי (VTE), אשר מורכב של פקקת ורידים עמוקה (DVT), תסחיף ריאתי, הוא הגורם המוביל השלישי המוות לב וכלי דם לאחר אוטם שריר הלב ושבץ. . זה מצב שכיח המשפיעים על 1-2% של האוכלוסייה, עם שכיחות שנתי של 1 ב 5001... VTE יכול להוביל: 1) מוות תסחיף ריאתי; 2) תסמונת פוסט-קדחת, המאופיינת על ידי כאב כרוני, נפיחות, כיבי; או 3) לחץ דם ריאתי כרוני וכתוצאה מכך משמעותי כרונית פשרה בדרכי הנשימה. VTE היא מחלה רב העצרת, העלולות לנבוע ההקפאה של זרימת הדם, נזק כלי הדם ו/או hypercoagulable הברית עקב הפרעה של איזון בין את הקרישה ומערכות fibrinolytic, כפי שתיארנו זה לפני מאה שנה מאת וירכו וידוע בשם וירשאו.
כי ברוב המקרים זה אפשרי להשיג דגימות DVT אנושי, חוקרים פיתחו מודלים חייתיים ניסיוני של DVT. מספר בעלי חיים כולל עכברוש2, עכבר3, ארנב4, חזיר5, הכלב6ואנושיות הפרימטים7 שימשו. עכברים יכול להיות שונה גנטית, החיה שנמצאות בשימוש תכוף ביותר ללמוד DVT. עם זאת, כמו כל בעלי החיים, DVT ספונטנית הוא לא ציין בעכברים. לפיכך, שינויים פיזי או כימי החומה וריד משמשות ליצירת פקקת בעכברים. בעבר השתמשנו המודל הברזל ותחמוצת כלוריד לזירוז פקקת ב הכלילי התחתון (IVC) של עכברים8,9,10. מודל זה יש את היתרון של אמין בהפקת thrombi ריטלין תוך דקות והוא יכול לשמש כדי לחקור את התפקיד של אנטי מקריש ותרופות נגד טסיות בתקופת DVT חריפה. עם זאת, זה הליך מסוף. לפיכך, במחקר DVT אקוטי וכרוני, המודל stasis הוא מתאים יותר. במודל זה, כגון היווצרות הנגרמת על ידי ההפרעה מלאה של זרימת הדם ב- IVC, אחד הגורמים בטריאד וירשאו להתפתחות DVT. מודל זה ניתן ללמוד היווצרות DVT ו ברזולוציה, וזה יתרון לעומת ה3 דגם של FeCl11.
פיתחנו שיטה לא פולשנית לעקוב אחר כגון היווצרות והרזולוציה לאורך זמן באמצעות מערכת מיקרו-הדמיה סאונד בתדירות גבוהה12. בעבר הראו כי מדידה של פקקת ורידים על ידי אולטרסאונד להרכב בחיוב thrombi מתקבל באופן פתולוגי. יש לנו אישר ב שני מחקרים מאוחרים יותר כי מדידות שהושג עם אולטרסאונד לתאם עם כגון משקל, כגון אזור לכמת על ידי9,להסטולוגיה10. יותר חשוב, יש הראנו שסאונד בתדירות גבוהה הזה יכול לשמש כדי לפקח על היווצרות של פקקת ורידים עמוקה עכברים12. זה עשוי לשמש גם לכמת כגון רזולוציה בצורה לא פולשנית.
כאן נתאר את פרוטוקול המאפשר כגון היווצרות באמצעות המודל העכבר stasis-induced פקקת, כיצד כגון היווצרות ניתן לנטר בצורה לא-פולשנית לאורך זמן באמצעות אולטרסאונד בתדירות גבוהה.

<table><tbody><tr><td>6-0 תפר משי ביד פרמה</td><td>Ethicon</td><td>706G</td><td></td></tr><tr><td>מספריים כירורגיים</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>20830-00</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים לקשירת תפרים</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>20830-00</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים קהים (ישרים ומעוקלים)</td> <td>כלי מדע עדינים</td><td>20830-00</td><td></td></tr><tr><td>נהג מחט</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>13002-10</td><td></td></tr><tr><td>Moria Spring Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>15396-00</td><td></td></tr><tr><td>מזרקים 1 מ"ל</td><td>BD Biosciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>26G מחטים</td><td>Becton Dickinson & Co.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>VEVO 770 מערכת הדמיה ברזולוציה גבוהה</td><td>Visualsonics</td><td>כבר לא נמכרת</td><td></td></tr><tr><td>SR בופרנורפין</td><td>ZooPharm</td><td></td><td>ניתן ל-LDI על ידי כירורגיה וטרינרית</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ</td><td>Leica</td><td>Leica M651</td><td></td></tr><tr><td>Systan eye oinment</td><td>Alcon</td><td>288/28062-0</td><td></td></tr><tr><td>2x2 סטרילי גזה</td><td>CDMV</td><td>#104148</td><td></td></tr><tr><td>קצה כותנה אפליקטורים</td><td></td><td></td><td>מסרט</td></tr><tr><td>כירורגי היפואלרגני JGH Transpore</td><td>CDMV</td><td>#7411</td><td></td></tr><tr><td>ג'ל אולטרסאונד (Aquasonic-100)</td><td>Dufort & Lavigne</td><td>#AKEN4061</td><td></td></tr><tr><td>חממה</td><td></td><td></td><td>מ- JGH</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Dispomed</td><td></td><td></td></tr><tr><td>תא הרדמה, צינורות וציוד אדמיניסטרציה</td><td>Dispomed</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hair Remover</td><td>Nair</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Water מחומם כרית קשיחה</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>#HHP-2</td><td></td></tr><tr><td>משאבת מים לחימום Gaymar TP500</td><td>MATVET Inc.</td><td>#R-500305</td><td></td></tr><tr><td>מנורת חימום אינפרא אדום</td><td>אלקטרימט בע"מ</td><td>#1R175R-PAR</td><td></td></tr><tr><td>פרופ טמפרטורת פי הטבעת של העכבר</td><td>emkaTECHNOLOGIES</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מים</td><td></td><td></td> סטריליים <td>מבית JGH</td></tr></tbody></table>

פקקת ורידים עמוקה שנגזרות stasis בעכברים המנוטרת על-ידי בדיקת אולטרה סאונד בתדירות גבוהה

Deep Vein Thrombosis Induced by Stasis in Mice Monitored by High Frequency Ultrasonography

פקקת ורידים היא מצב נפוץ המשפיעים על 1-2% של האוכלוסייה, עם שכיחות שנתי של 1 ב 500. פקקת ורידים יכולה להוביל למוות באמצעות תסחיף ריאתי או תוצאות התסמונת הפוסט-קדחת, המאופיינת על ידי כאב כרוני, נפיחות, כיבת, או כרונית יתר לחץ דם ריאתי וכתוצאה מכך משמעותיות כרוניות בדרכי הנשימה פשרה. זו היא המחלה הנפוצה ביותר לב וכלי דם לאחר אוטם שריר הלב, שבץ איסכמי והיא אתגר קליני עבור כל התחומים הרפואיים, כמו זה יכול לסבך את הקורס של הפרעות אחרות כגון סרטן, מחלות מערכתיות, ניתוח נזק גדול.
גרסאות ניסיוניות נחוצים לחקור מנגנונים אלה. המודל ההקפאה גורם עקבי כגון גודל וכמות לכימות של כגון. עם זאת, יש צורך בשיטתיות מאתרים ומפסיקים בצד סניפים של הכלילי התחתון כדי למנוע השתנות במידות כגון כל פרשנות הנתונים שגויים. פיתחנו שיטה לא פולשנית כדי למדוד את גודל כגון באמצעות בדיקת אולטרה סאונד. בעזרת טכניקה זו, שנוכל להעריך כגון פיתוח והרזולוציה לאורך זמן של אותה חיה. גישה זו מגבילה את מספר עכברים הנדרש על כימות של פקקת ורידים בקנה אחד עם עקרון ההחלפה, הפחתת ו עידון של בעלי חיים במחקר. הראו כי משקל כגון וניתוח היסטולוגית של כגון גודל לתאם עם מדידה שהושג עם בדיקת אולטרה סאונד. לפיכך, המחקר הנוכחי מתאר כיצד לגרום פקקת ורידים עמוקה בעכברים באמצעות מודל stasis הכלילי וכיצד לפקח עליו באמצעות אולטרסאונד בתדירות גבוהה.

Stasis פקקת ורידים מודל
במודל stasis, עכברים הם מרדימים, חתך לחשוף הכלילי התחתון (IVC). החתך נעשה בצד השמאלי או הימני של העכבר במקום פתיחה של קו האמצע הבטן באופן לא אפריע החללית אולטרסאונד. את שרירי הבטן ואת העור הם מקפלים לאחור כדי לחשוף את IVC (איור 1). ראשית, בצד סניפים מאתרים 6-0 בתפר משי (איור 2). לאחר מכן, IVC מופרדת מן העורקים באמצעות עמום, המשי ...

בפרוטוקול הנוכחי מתאר את השלבים להשגת פקקת ורידים באמצעות מודל של ההקפאה. בנוסף, אנו משתמשים בשיטה לא פולשנית למדוד כגון היווצרות והרזולוציה לאורך זמן.

פקקת ורידים עמוקה שנגזרות Stasis בעכברים המנוטרת על-ידי בדיקת אולטרה סאונד בתדירות גבוהה

Venous thrombosis is a common condition affecting 1 - 2% of the population, with an annual incidence of 1 in 500. Venous thrombosis can lead to death ...

המטרות הכלליות של הליך זה הן לגרום לפקקת ורידים עמוקים בעכברים באמצעות מודל הקיפאון של הווריד הנבוב התחתון, ולנטר את הפקקת באמצעות אולטרסאונד בתדר גבוה. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום הפקקת הוורידית לגבי האופן שבו חומר פרמקולוגי, גן או סוג תא יכול להשפיע על היווצרות פקקת או רזולוציה. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שניתן לכמת הן את היווצרות הפקקת והן את הרזולוציה באופן לא פולשני בעכברים.הרעיון של שיטה זו עלה לנו לראשונה כאשר חקרנו כיצד לבצע דה-נמיקה ולנטר באופן לא פולשני היווצרות פקקת בווריד הנבוב התחתון של עכברים. כדי להתחיל, השתמש במלקחיים כדי להרים את עור הבטן התחתונה של עכבר C57 שחור בן שמונה עד 10 שבועות. והשתמש במספריים כירורגיים כדי לבצע חתך אנכי במקביל לשני צידי הלינאה אלבה מקו האמצע.בצע חתך אופקי בחלק העליון של הבטן. לאחר מכן חתכים חוזרים דרך שכבת שרירי הבטן. קפלו את העור והשריר הרחק מהחתך כדי לחשוף את חלל הבטן.והניחו גזה לחה על שני צידי הפצע. הפעל לחץ עדין על שני צידי הבטן כדי להחצין את המעיים על הגזה. והניחו שכבה שנייה של גזה לחה על הרקמה המוחצנת.תחת מיקרוסקופ מנתח, הזיזו הצידה כל שומן צפקי כדי לחשוף את הווריד הנבוב הפנימי, או IVC, בין וריד הכליה לווריד הכסל. ואתר את הענפים הצדדיים של IVC. בעזרת מלקחיים, נתח בעדינות סביב כל ענף צדדי כדי לפרוץ את הפאשיה מבלי לפגוע בכלי הדם שמסביב.לאחר מכן, אחוז בזהירות בשומן סביב ענף אחד כדי להרים את הווריד. והעבירו חתיכה של שישה תפר משי אפס מקף מתחת לכלי. לאחר מכן השתמש במלקחיים תפרים ובטכניקת קשירת קשר כירורגית סטנדרטית כדי לבצע קשירה כירורגית עם לפחות שלוש זריקות סביב הענף הצדדי כדי לחסום לחלוטין את הכלי.לחלופין, השתמש בהמוקליפס. כדי להפריד את אבי העורקים מה-IVC, ניתוח קהה סביב ובין שני כלי הדם מיד רחוק מווריד הכליה השמאלי מבלי לפגוע באף אחד מכלי הדם. כאשר נוצר חלון ברור בין הכלים, העבירו קטע של שישה תפרי משי אפס מתחת ל-IVC ואבי העורקים הבטני.והשתמש במלקחיים כדי למשוך את התפר דרך החלון. בעזרת מלקחיים תפרים, קשרו את ה-IVC בשלוש זריקות מיד דיסטליות לווריד הכליה השמאלי לחסימה מלאה של כלי הדם. ודא שאבי העורקים הבטני נותר ללא הפרעה.ושכל הענפים הצדדיים נקשרו. ה-IVC ייראה מורחב דיסטלי מאתר הקשירה. ושום זרימת דם לא תהיה גלויה.החזר את השומן הצפק והמעיים לחלל הבטן. והשתמש במלקחיים תפרים ושישה תפרי משי אפס כדי לסגור בנפרד את שכבות השריר והעור עם תפרים רצים. לאחר מכן הניחו את החיה באינקובטור של 34 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות לפחות עם ניטור עד להחלמה מלאה.הנח את בקבוק הג'ל האולטרסאונד דרך הסלילים של מערכת חימום מים כדי לחמם את הג'ל ל -37 מעלות צלזיוס. 24 שעות לאחר הקשירה, הנח את החיה על פלטפורמת הניתוח. ומרחו ג'ל אלקטרודות על ארבע האלקטרודות של הפלטפורמה.כשהחיה במצב שכיבה, קבעו את הכפות לאלקטרודות. והכנס מדחום משומן לפי הטבעת. הניחו גזה לצד החיה כדי לתפוס עודף ג'ל אולטרסאונד.לאחר מכן מרחו את הג'ל על העור החשוף. וצלם את ה- IVC על פי פרוטוקולי הדמיית האולטרסאונד הסטנדרטיים. באמצעות מערכת מיקרו-הדמיה בתדר גבוה, ניתן לזהות את ה-IVC במבט אורכי לפני הקשירה.וניתן לקבוע את מהירות הזרימה על ידי הדמיית דופלר גל פועם. מיד לאחר הקשירה ניכרת ירידה בזרימת הדם. 24 שעות לאחר הקשירה, ניתן לדמיין פקקת צפופה בתוך IVC על ידי אולטרסאונד.אולטרסאונד מאפשר גם לכמת את מהירות זרימת הדם בכלי הדם. שימוש בדופלר צבעוני לפני, מיד אחרי ו-24 שעות לאחר הקשירה. לאחר השליטה, ניתן לגרום לפקקת תוך 30 עד 45 דקות בהתאם לנוכחות ומספר הענפים הצדדיים אם הטכניקה מבוצעת כראוי.בזמן ניסיון הליך זה, חשוב לזכור לקחת את הזמן ולהיות מדויק אך עדין בתנועות שלך מכיוון שקל יחסית לקרוע את הכלים. בעקבות הליך זה, ניתן לבצע שיטות אחרות כמו ניתוח אימונופלואורסצנטי, היסטולוגי או זרימה ציטומטרית כדי לענות על שאלות נוספות לגבי התוכן התאי של פקקת או לכמת חלבונים ספציפיים מעניינים.

deep-vein-thrombosis-induced-stasis-mice-monitored-high-frequency

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

אינדוקציה אלקטרוליטי של הפעלת האנדותל אל פני השטח הפנימי של תוצאות הנבוב נחותים קאווה להיווצרות סוג ורידי פקיק עקב הפעלת האנדותל בדם קיפאון חלקי, שני מרכיבים של השלישיה של וירצ'וב.

אלקטרוליטי נחותים הווריד הנבוב Model (EIM) של פקקת ורידים

המודל להשלים עכבר קיפאון של פקקת נחות הווריד הנבוב התשואות כמויות מדידים של רקמת עורק בקיר פקיק. זה הוכיח שימושי להערכת אינטראקציות בין הקיר וריד ואת פקיק occlusive והן להערכת התקדמות של דלקת כרונית חריפה.

עכבר דגם השלם הקיפאון של פקקת נחותים הווריד הנבוב

סרטון זה מדגים את טכניקת המיקרוסקופ הפלואורסצנטי התוך-חיוני לחקר היווצרות פקקת במודל עכבר. העכבר מוזרק עם פוליסכריד עם תווית פלואורופור כדי לפקח על זרימת הדם. עם הארה עם אור בעוצמה גבוהה, אינדוקציה פוטוטוקסית של פציעה בכלי הדם של האוזן מובילה להיווצרות פקקת, אשר אושרה על ידי הדמיה של החסימה בזרימת הדם.

מיקרוסקופ פלואורסצנטי תוך חיוני לחקר היווצרות פקקת מיקרו-וסקולרית

מקור: Kim, D., et. al. הדמיה פלואורסצנטית קרובה לאינפרא אדום וטומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת להדמיה ישירה של טרומבואמבולי מוחי. J. Vis. Exp. (2016)סרטון זה מדגים הדמיה של פקקת מוחית בעכברים באמצעות הדמיית טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת (מיקרו-CT). מודל של עכבר פקקת מוח מוזרק עם ננו-חלקיקי זהב ממוקדי פיברין הפועלים כחומר מנוגד. העכבר מונח על מצע של מכונת מיקרו-CT, והתמונות מתקבלות מזוויות מרובות. באמצעות תוכנה מתאימה, התמונות משוחזרות ומעובדות.

הדמיה של פקקת מוחית בעכבר באמצעות הדמיית טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת

נתאר כאן היצרות ב הכלילי התחתון כמודל מאתר של פקקת ורידים עמוקה. מודל זה recapitulates הגבלת זרימת דם, אחד הגורמים המפעילים העיקריים של פקקת ורידים בבני אדם.

היצרות של הכלילי התחתון: מודל מאתר של פקקת ורידים עמוקה

Aortocaval פיסטולה נוצר על ידי לפרוץ את העורקים מורנה אינפרא כליות באמצעות שני הקירות לתוך הורקאווה הנחותים ולאחר מכן הבריאה של היצרות בתוך הזרימה שלה באמצעות הארכה חלקית של האובורד הנחותים. מודל זה ניתן לשימוש כדי ללמוד היצרות הורידים המרכזי.

מודל מורנה של היצרות הורידים המרכזית באמצעות Aortocaval פיסטולה עם היצרות זרימה יוצאת

מטרת כתב היד היא להציג שיטה מבוססת סונוגרפיה המאפשרת הדמיה של זרימת הדם בעורקים מוחיים בעכברים. אנו מדגימים את היישום שלה כדי לקבוע שינויים במהירות זרימת הדם הקשורים vasospasm במודלים מורין של דימום subarachnoid (SAH).

ניתוח של Vasospasm מוחי במודל מורין של דימום subarachnoid עם אולטרסאונד דופלקס Transcranial בתדר גבוה

הפרוטוקול הנוכחי מתאר מודל ייחודי ורלוונטי מבחינה קלינית של מחלת עורקים היקפית המשלב עורק הירך ואלקטרו-קרישת ורידים עם ניהול מעכב סינתאז תחמוצת החנקן כדי לגרום לנמק אחורי בעכברים FVB. זלוף תוך-לבבי DiI משמש לאחר מכן להדמיה תלת-ממדית ברזולוציה גבוהה של כלי הדם של משטח כף הרגל.

הדמיה תלת מימדית ברזולוציה גבוהה של כלי הדם של משטח כף הרגל במודל נמק הינדלימב מורין

פרוטוקול זה מתאר שיטה למעקב אחר התקדמות שינויים מורפולוגיים לאורך זמן ברחם במודל עכברי מושרה של סרטן רירית הרחם באמצעות הדמיית אולטרסאונד עם קורלציה לשינויים גסים והיסטולוגיים.

הערכת אולטרסאונד לא פולשנית של התקדמות סרטן רירית הרחם במחיקה מכוונת Pax8 של מדכאי הגידול Arid1a ו - Pten בעכברים

מאמר זה נועד להציג שיטה אופטימלית להערכת פקקת ורידים במודל סרטן עכברים, באמצעות קליפסים וסקולריים להשגת קשירה ורידית. אופטימיזציה ממזערת את השונות במדידות הקשורות לפקקת ומשפרת את הרלוונטיות לפקקת ורידים הקשורה לסרטן אנושי.

בדיקת פקקת ורידית במודל עכבר של סרטן

שינויים בזרימת הדם בשחלות בתקופה שלפני הביוץ חיוניים לביוץ. אולטרסאונד דופלר שימש בבני אדם ובבעלי חיים גדולים כדי להעריך המודינמיקה של השחלות וזלוף. מוצג פרוטוקול ליישום אולטרסאונד דופלר להערכת המודינמיקה של השחלות במהלך השלבים הקדם-ביוציים והפרי-ביוץ בעכברים.

אולטרסאונד דופלר להדמיה חיה וכימות של תפקוד כלי הדם בשחלות בעכברים

למדו לגרום לפקקת ורידים עמוקה בעכברים באמצעות מודל הסטאזיס בעורק הווריד התחתון, ולנטר את היווצרות הקריש באולטרה סאונד בתדירות גבוהה. שיטה זו מאפשרת מעקב לא פולשני אחר דינמיקת הקריש.

פקקת ורידים עמוקה שנגזרות Stasis בעכברים המנוטרת על-ידי בדיקת אולטרה סאונד בתדירות גבוהה

גלה סרטונים נוספים