Name: הערכת מבוססי פעילות אנורקסיה בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-05-14T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 26 s
Description: חקור את הנוירוביולוגיה של אנורקסיה נרבוזה באמצעות מודל אנורקסיה מבוססת פעילות בעכברים. שיטה זו מאפשרת לבחון מעגלים עצביים ושינויים התנהגותיים הקשורים להפרעות אכילה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו מומן על ידי פרס חוקר עצמאי NARSAD וגם IMHRO עולה כוכב הדיכאון מחקר בפרס בזיכרון של ג'ורג Largay ל רואים את זה.

כל השיטות המתוארות כאן אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ועל שימוש הוועדה (IACUC) של אוניברסיטת קליפורניה, סן דייגו.
1. עכברים
<ol><li>לבחור המתח העכבר המתאים לצורך המחקר.</li>
	<li>לרכוש עכברים מן הספק או להגביר את קו כדי לקבל מספרים ניסיוני המתאים.</li>
	<li>קבוצה-בית לרכישה עכברים במתקן בעל חיים לפחות שבוע אחד לפני תחילת המחקר כדי לאפשר לתקופה להתאקלמות בשפע.</li>
	<li>להתחיל את שלב להתאקלמות ניסיוני מראש כאשר עכברים הם בן 8 שבועות.</li>
</ol>2. דיור
<ol><li>לבחור הכלובים כי הם גדולים מספיק כדי להכיל על גלגל ריצה משולחים שאינם חסמים קיבול אוכל, בקבוק מים.</li>
	<li>לווסת את טמפרטורת החדר והלחות כדי להשלים את ההשערה נבדק. הערה: טמפרטורות גבוהות יותר תקטין את התפתחות ABA28.</li>
</ol>3. הפעלת גלגלים
<ol><li>לבחור גלגלים עם תקשורת אלחוטית למנוע הסחות דעת פוטנציאליים תסבוכות בתוך הכלוב, ראה טבלה של חומרים לדוגמה.</li>
</ol>4. בקבוקי מים
<ol><li>בחר בקבוק מים זה לא יתחרו על שטח עם גלגל ריצה או מזון קיבול בכלוב בבית.</li>
	<li>אם מתן הטיפול במי השתייה, נייר דבק הבקבוק כדי ליצור סביבה רגישים לאור.</li>
</ol>5. מזון
<ol><li>בחר של צ'או שומן מתאים ההשערה הנבדקת (למשל, של Envigo מכרסם דיאטה 8604). הערה: דיאטות גבוה ב סוכר ושומן יכול לצמצם את התפתחות ABA29.</li>
	<li>השתמש צנצנת זכוכית קטנה כדי לספק צ'או, כ 65 ס מ קוטר x 50 ס מ גובה. הערה: מזין אוטומטי ניתן להשתמש במקום צנצנת זכוכית, אשר עשוי להפחית את הלחץ על-ידי הגבלת חוקר הפרעות. זה עשוי להיות הכדאית ביותר אם ביצוע מחקרים ABA עם סמים מניפולציות.</li>
</ol>6. מראש ניסיוני להתאקלמות שלב
<ol><li>להגדיר את האזור ניסיוני על-ידי בחירת ארון הכלוב קרוב הרכזות נייד וגם גלגל. זה יגביל בעיות שידור נתונים.</li>
	<li>הפעל את המחשב הנייד ואת רכזות אלחוטיות.</li>
	<li>פתח את תוכנת ניהול גלגל במחשב הנישא.<ol>
<li>תראו התוכנה כדי להבטיח שבשני מוקדים פעילים.</li>
		<li>פתח "כלים" ובחר באפשרות "מחק גלגלים." חזור על שלב זה 5 פעמים.</li>
		<li>לסגור את התוכנה, ולאחר מכן פתח אותה מחדש.</li>
	</ol>
</li>
	<li>מקום 3 סוללות AAA לתוך מארז הסוללה של בסיס גלגל.<ol>
<li>חבר את החוטים pack הסוללה החומרה של בסיס גלגל. זו תהיה מנותקת לפני השימוש. סגור את מארז הסוללה לתוך הבסיס גלגל.</li>
	</ol>
</li>
	<li>בדוק התוכנה כדי להבטיח את הבסיס גלגל רשום עם מזהה "1" תחת ה-hub אלחוטי המתאים. אם הבסיס אינו רשום בתור מזהה "1", שחרר מארז הסוללה, ולהתחיל מחדש בשלב 6.2.</li>
	<li>לשנות את מזהה גלגל מ- "1" כדי המזהה העכבר תחת העמודה שם.</li>
	<li>דבקים הבסיס של ההגה המצטבר בתחתית הכלוב עם נייר דבק כדי להבטיח יציבות. אל תאפשר הקלטת תישאר, כמו עכברים אלעס את הקלטת חשוף.</li>
	<li>בחר דיסק גלגל ריצה בלי חתיכה מגנטי מאוכלת.</li>
	<li>למקם את הגלגל על הבסיס ולסובב את ההגה כדי לוודא אישור מן הכלוב קירות הסורג.</li>
	<li>לסובב את הדיסק במספר מסוים של סיבובים כדי להבטיח הגלגל פועלת תוכנת כראוי סופר סבבים.</li>
	<li>למנוע חתיכות של צ'או לאיבוד בין מצעים או להירטב על ידי צינור-מקליטה בחלקו התחתון של הצנצנת אוכל על הרצפה הכלוב, גלגל ריצה ובקבוק המים. הערה: צ'או רטוב מגדילה את צריכת המזון לעומת יבש צ'או30.</li>
	<li>מקום 5 חתיכות של צ'או לתוך הצנצנת. הערה: האוכל במהלך שלב טרום ניסיוני הוא זמין ad libitum והוא אינו חייב להיות שנשקל. חשיפה להפעלת גלגלי במהלך תקופת להתאקלמות עשוי להעצים ABA21,31.</li>
	<li>במקום בקבוק מים מלא בכלוב ומספקים מים ad libitum.</li>
	<li>חזור עד כל הכלובים יש על גלגל ריצה מחובר באופן אלחוטי, מזון ומים.</li>
	<li>בנפרד למקם עכברים הכלובים המתאים.</li>
	<li>במערכת ניהול תוכנה, ללכת "קובץ" ולחץ על "התחל רכישה".</li>
	<li>צפה עדכון התוכנה כדי להבטיח גלגל סבבים נספרים ואת המערכת פועל היטב.</li>
	<li>חבל עכברים לתנאי דיור ניסיוני 2 ימים הכולל.</li>
	<li>להעריך עכברים במהלך שלב זה כדי להבטיח שהן בריא מספיק כדי להתמודד עם הניסוי ABA.</li>
	<li>בדוק כלובי כל הצפה של בקבוקי מים כל יום. אם הבקבוקים הציפו, להחליף את הכלוב הישן עם כלוב חדש וחזור על הצעדים הדרושים כדי לדבוק גלגלים ומזון לכלוב ללא הפרעה.</li>
	<li>יום 2, בדוק כלובי מזון רמות. אם מזון נמוכה, למלא עם חתיכות 2 של צ'או. לעשות זאת מבלי להפריע העכברים. הערה: אם במהלך השלב להתאקלמות מראש ניסיוני העכבר כל מציג hypophagia או רזה מדי, הסר את העכבר מן המחקר.</li>
</ol>7. שלב ניסיוני בסיסית - יום 1
<ol><li>בחר "סיום" ולאחר מכן "התחל רכישה" בתוכנת ניהול גלגל.</li>
	<li>למדוד את צ'או 9 גרם ב חבית פלסטיק קטנה בקנה מידה עם רגישות 0.00 g. להקליט את המשקל המדויק.</li>
	<li>בעדינות להסיר ולשקול את העכבר בתוך פלסטיק גדולים בקנה מידה עם רגישות 0.0 g. משקל שיא. הערה: חשוב להגביל את הלחץ של עכברים תוך כדי טיפול, ולכן להתמודד איתם בסבלנות.</li>
	<li>השלך כל האוכל והפיזיולוגי.</li>
	<li>חיפוש מצעים עבור כל שיירי המאכל הוסר מן הצנצנת השלך את זה גם כן.</li>
	<li>. תשאיר את הבקבוק מים במקום, אך להבטיח שזה מלא במידה מספקת.</li>
	<li>נקי לכלך פועל גלגלים עם מגבות-70% אלכוהול איזופרופיל ונייר.</li>
	<li>אם ניקוי היה נחוץ, לאחר אלכוהול איזופרופיל מתייבש, להחזיר את העכבר לכלוב שלה והחלף את הכלוב על המדף.</li>
	<li>חזור על שלבים אלה עד כל עכבר מתנהל 9 גרם מזון הוא נמדד והניח בכלובים.</li>
</ol>8. ניסיוני בסיסית שלב - 2-7 ימים
<ol><li>לחזור אל המתקן בעלי חיים במקביל, כל יום. להשתנות לא לקחת מדידות על ידי מעל או מתחת לגיל 10 דקות.</li>
	<li>למדוד את צ'או 9 גרם ב חבית פלסטיק קטנה בקנה מידה עם רגישות 0.00 g. להקליט את המשקל המדויק.</li>
	<li>בעדינות להסיר ולשקול את העכבר בתוך פלסטיק גדולים בקנה מידה עם רגישות 0.0 g. משקל שיא.</li>
	<li>משוך את הצנצנת מזון הכלוב, זורק את כל האוכל לתוך חבית קטנה בסולם 0.00 g.<ol>
<li>אם הצואה ומצעים בצנצנת מזון עם האוכל, לבחור כל מצעים ו צואה. השתמש מסננת קטנה כדי לשפשף מזון אבקת כשהספל במשקל. הסר כל צואה לפני עושה את זה עם פינצטה (במקרה הצורך). הערה: מצעים לא ייפרדו לחתיכות קטנות יותר לעבור דרך מסננת</li>
		<li>לחיפוש כל שאריות מזון בכלוב ולהוסיף להם. הספל לאזן בין. להקליט את כמות המזון הנותר. הערה: אם צריכים בדיקה של מצעים ו קייג ', עדיף לעשות זאת כאשר העכבר נמצא שוקלים גביע או העברת לכלוב כדי להפחית את הלחץ.</li>
		<li>השלך כל האוכל.</li>
	</ol>
</li>
	<li>תנקה את הצנצנת ולהניח בחזרה לתוך הכלוב. החלף את הקלטת במידת הצורך.</li>
	<li>מקם את 9 גרם בעבר מדודה של מזון חדש לתוך הצנצנת.</li>
	<li>ואז נקיים לכלך פועל גלגלים עם אלכוהול איזופרופיל 70%, יבש הגלגלים. זה כלוב אחד בכל פעם, לא בטעות מחלף גלגלים.</li>
	<li>קץ והפעל מחדש את רכישת בגלגל הפעלת תוכנית בכל יום אחר.</li>
	<li>חזור על שלבים אלה עד תחילת השלב ההגבלה.</li>
</ol>9. ניסיוני הגבלת שלב - יום 1
<ol><li>לסיים ולהתחיל רכישה בתוכנת ניהול גלגל.</li>
	<li>שוקלים עכברים, ישנים וחדשים מזון לכל פרוטוקול בסיסית.</li>
	<li>
אסור לנקות גלגלים עכשיו. זה עשוי להפריע עכברים במהלך תקופת האכלה שלהם מוגבל.</li>
	<li>אפשר גישה אל אוכל חדש, 9 גרם של צ'או, במשך 6 שעות. שיא זמן האוכל מוצע. הערה: הזמן במהלך מחזור אור, מזון זמין ישפיע על התפתחות ABA. מאז עכברים לישון בדרך כלל במהלך מחזור אור, מתן גישה לאוכל במהלך הזמן הזה מחריף הפיתוח של אבא, מאז עכברים לא בדרך כלל צורכים את רוב האוכל היומית שלהם בשלב זה. לעומת זאת, עכברים להעניק גישה מזון במהלך מחזור כהה יכול לפתח ABA לאט יותר32. התאמת משך גישה המזון וכתוצאה מכך יותר או קצר יותר הישרדות פעמים (איור 2). פעילות לסולמות המזון (FAA) הוא היפראקטיביות, אשר מתרחשת מיד לפני האוכל מוצע32,33,34. רשות התעופה הפדרלית יכול להשפיע על ההתפתחות של ABA, כאשר הוכח כי ההכחשה גלגל הפעלת גישה במהלך התעופה הפדרלית המשפרת ABA התנהגות32.<ol>
<li>להסיר את האוכל בדיוק 6 h מאוחר יותר עבור כל עכבר ומדידת כמות הנותרים. הרשומה האוכל זמן יוסר.</li>
	</ol>
</li>
	<li>נקי גלגלים עכשיו, במידת הצורך, מנסה לעשות זאת מבלי על משיכת המזון מן הכלובים עוקבות.</li>
	<li>שוקל מזון ולחשב את ההבדל בין מזון כדי לקבוע את כמות המזון נאכל לכל העכבר.</li>
	<li>לחשב את המשקל הנשירה עבור כל עכבר. הערה: משקל הנשירה היא כאשר עכבר יש להסיר מן הניסוי כאשר זה מגיע ל- 75% של מדידת הסופי שלה במשקל הגוף הבסיסית. לדוגמה, אם עכבר שוקל 20 גרם בתחילת שלב ההגבלה, כשזה מגיע 15 גרם יש להסירו מהניסוי.</li>
	<li>לשמור עותק של הנשירה משקולות על היד במתקן של בעלי חיים. הערה: ניסויים הערכת התאוששות ABA עשוי להיות ניסיון; האוכל מסופק גם ad libitum, או גלגלים ננעלים כדי ללמוד את התהליך שבאמצעותו עכברים לשוב משקל גוף בריא34.</li>
</ol>10. ניסיוני הגבלת שלב - 2-14 ימים
<ol><li>חזור על שלבים כל מדידה בפרוטוקול ההגבלה היום 1. אל תפעיל מחדש את גלגל רכישה.</li>
	<li>אם העכבר מגיע המשקולת (75% ממשקל גופה בסיסית), להסיר את הצנצנת גלגל ומזון מן הכלוב, לספק מזון בשפע בתחתית הכלוב, ואז להמשיך עם העכברים האחרים. ברגע חלק כל הכלובים, כדי, המתת חסד עכברים כל הגיעו ירידה במשקל.</li>
	<li>משאיר את הגלגל על העכבר כל משך זמן הניסוי.</li>
	<li>בדוק כל עכבר מדי יום עבור פציעות. במידת הצורך, קליפ ציפורני פגום, לטפל פצעים, אנשי טיפול בבעלי חיים שאל וכו לייעוץ אם לא בטוחה כיצד להמשיך עם פציעה.</li>
</ol>11. סיום המחקר
<ol><li>אם המחקר נמשך 14 יום, שוקלים כל העכברים ביום 15. הגבלת משקל יום 1 נחשב משקל בסיסית. הערה: האורך של המחקר יכול להיות שונה כדי לטפל ההשערה נבדק. פרקי זמן ממושכים גישה מזון משך עשוי לשמש כדי להאריך את אורך המחקר.</li>
	<li>המתת חסד עכברים לפי הצורך.</li>
	<li>לקחת את הציוד מלוכלכים לחדרים המתאימים.</li>
	<li>לסיים גלגל ספירת רכישה על היום 15 לספק 10 ימים מלאים של נתונים.</li>
	<li>בטל את מרכז הגלגל אלחוטית.</li>
	<li>חלץ נתונים.</li>
	<li>ניתוח נתונים.</li>
</ol>

<ol><li>Hall, J. F., Hanford, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity+as+a+function+of+a+restricted+feeding+schedule%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Physiol+Psychol%22%5BJournal%5D)">Activity as a function of a restricted feeding schedule.</a> J Comp Physiol Psychol. 47 (5), 362-363 (1954).</li>
<li>Hall, J. F., Smith, K., Schnitzer, S. B., Hanford, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elevation+of+activity+level+in+the+rat+following+transition+from+ad+libitum+to+restricted+feeding%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Physiol+Psychol%22%5BJournal%5D)">Elevation of activity level in the rat following transition from ad libitum to restricted feeding.</a> J Comp Physiol Psychol. 46 (6), 429-433 (1953).</li>
<li>Routtenberg, A., Kuznesof, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-starvation+of+rats+living+in+activity+wheels+on+a+restricted+feeding+schedule%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Physiol+Psychol%22%5BJournal%5D)">Self-starvation of rats living in activity wheels on a restricted feeding schedule.</a> J Comp Physiol Psychol. 64 (3), 414-421 (1967).</li>
<li>Taksande, B. G., Chopde, C. T., Umekar, M. J., Kotagale, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Agmatine+attenuates+hyperactivity+and+weight+loss+associated+with+activity-based+anorexia+in+female+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">Agmatine attenuates hyperactivity and weight loss associated with activity-based anorexia in female rats.</a> Pharmacol Biochem Behav. 132, 136-141 (2015).</li>
<li>Boulton, A. A., Baker, G. B., Iverson, M. T. -M. Activity anorexia. <a target="_blank" href="https://www.amazon.com/Animal-Models-Psychiatry-Neuromethods-v/dp/0896031985">Neuromethods, 18, Animal Models in Psychiatry</a>. 1, Humana Press. Totowa, NJ. 267-311 (1991).</li>
<li>Klenotich, S. J., Dulawa, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+activity-based+anorexia+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">The activity-based anorexia mouse model.</a> Methods Mol Biol. 829, 377-393 (2012).</li>
<li>Kron, L., Katz, J. L., Goryzynski, G., Weiner, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperactivity+in+anorexia+nervosa%3A+a+fundamental+clinical+feature%5BTitle%5D)+AND+%22Compr+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Hyperactivity in anorexia nervosa: a fundamental clinical feature.</a> Compr Psychiatry. 19 (5), 433-440 (1978).</li>
<li>Hebebrand, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperactivity+in+patients+with+anorexia+nervosa+and+in+semistarved+rats%3A+evidence+for+a+pivotal+role+of+hypoleptinemia%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Hyperactivity in patients with anorexia nervosa and in semistarved rats: evidence for a pivotal role of hypoleptinemia.</a> Physiol Behav. 79 (1), 25-37 (2003).</li>
<li>Birmingham, C. L., Su, J., Hlynsky, J. A., Goldner, E. M., Gao, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mortality+rate+from+anorexia+nervosa%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Eat+Disord%22%5BJournal%5D)">The mortality rate from anorexia nervosa.</a> Int J Eat Disord. 38 (2), 143-146 (2005).</li>
<li>Walsh, B. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluoxetine+after+weight+restoration+in+anorexia+nervosa%3A+a+randomized+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Fluoxetine after weight restoration in anorexia nervosa: a randomized controlled trial.</a> JAMA. 295 (22), 2605-2612 (2006).</li>
<li>Kaye, W. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Double-blind+placebo-controlled+administration+of+fluoxetine+in+restricting-+and+restricting-purging-type+anorexia+nervosa%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Double-blind placebo-controlled administration of fluoxetine in restricting- and restricting-purging-type anorexia nervosa.</a> Biol Psychiatry. 49 (7), 644-652 (2001).</li>
<li>Jagielska, G., Kacperska, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outcome%2C+comorbidity+and+prognosis+of+anorexia+nervosa%5BTitle%5D)+AND+%22Psychiatr+Pol%22%5BJournal%5D)">Outcome, comorbidity and prognosis of anorexia nervosa.</a> Psychiatr Pol. 51 (2), 205-218 (2017).</li>
<li>Murray, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+eating%2C+exercise%2C+shape%2C+and+weight+related+symptomatology+in+males+with+muscle+dysmorphia+and+anorexia+nervosa%5BTitle%5D)+AND+%22Body+Image%22%5BJournal%5D)">A comparison of eating, exercise, shape, and weight related symptomatology in males with muscle dysmorphia and anorexia nervosa.</a> Body Image. 9 (2), 193-200 (2012).</li>
<li>Nieuwoudt, J. E., Zhou, S., Coutts, R. A., Booker, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Symptoms+of+muscle+dysmorphia%2C+body+dysmorphic+disorder%2C+and+eating+disorders+in+a+nonclinical+population+of+adult+male+weightlifters+in+Australia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Strength+Cond+Res%22%5BJournal%5D)">Symptoms of muscle dysmorphia, body dysmorphic disorder, and eating disorders in a nonclinical population of adult male weightlifters in Australia.</a> J Strength Cond Res. 29 (5), 1406-1414 (2015).</li>
<li>Griffiths, S., Mond, J. M., Murray, S. B., Touyz, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Positive+beliefs+about+anorexia+nervosa+and+muscle+dysmorphia+are+associated+with+eating+disorder+symptomatology%5BTitle%5D)+AND+%22Aust+N+Z+J+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Positive beliefs about anorexia nervosa and muscle dysmorphia are associated with eating disorder symptomatology.</a> Aust N Z J Psychiatry. 49 (9), 812-820 (2015).</li>
<li>Achamrah, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+differences+in+response+to+activity-based+anorexia+model+in+C57Bl%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Sex differences in response to activity-based anorexia model in C57Bl/6 mice.</a> Physiol Behav. 170, 1-5 (2017).</li>
<li>Perez-Leighton, C. E., Grace, M., Billington, C. J., Kotz, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+spontaneous+physical+activity+in+prediction+of+susceptibility+to+activity+based+anorexia+in+male+and+female+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Role of spontaneous physical activity in prediction of susceptibility to activity based anorexia in male and female rats.</a> Physiol Behav. 135, 104-111 (2014).</li>
<li>Pirke, K. M., Broocks, A., Wilckens, T., Schweiger, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Starvation-induced+hyperactivity+in+the+rat%3A+the+role+of+endocrine+and+neurotransmitter+changes%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">Starvation-induced hyperactivity in the rat: the role of endocrine and neurotransmitter changes.</a> Neurosci Biobehav Rev. 17 (3), 287-294 (1993).</li>
<li>Doerries, L. E. Gender differences in activity anorexia: predictable, paradoxical, or enigmatic. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDoerries%2C+LE+%22Activity+anorexia%3A+Theory%2C+research%2C+and+treatment%22">Activity anorexia: Theory, research, and treatment</a>. Epling, W. F., Pierce, W. D. , Erlbaum. Mahwah, NJ. 69-77 (1996).</li>
<li>Woods, D. J., Routtenberg, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%22Self-starvation%22+in+activity+wheels%3A+developmental+and+chlorpromazine+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Physiol+Psychol%22%5BJournal%5D)">"Self-starvation" in activity wheels: developmental and chlorpromazine interactions.</a> J Comp Physiol Psychol. 76 (1), 84-93 (1971).</li>
<li>Pare, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+food+consumption+and+running+activity+on+the+activity-stress+ulcer+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Dig+Dis%22%5BJournal%5D)">The influence of food consumption and running activity on the activity-stress ulcer in the rat.</a> Am J Dig Dis. 20 (3), 262-273 (1975).</li>
<li>Boakes, R. A., Mills, K. J., Single, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+differences+in+the+relationship+between+activity+and+weight+loss+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Sex differences in the relationship between activity and weight loss in the rat.</a> Behav Neurosci. 113 (5), 1080-1089 (1999).</li>
<li>Pjetri, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identifying+predictors+of+activity+based+anorexia+susceptibility+in+diverse+genetic+rodent+populations%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Identifying predictors of activity based anorexia susceptibility in diverse genetic rodent populations.</a> PLoS One. 7 (11), (2012).</li>
<li>Gelegen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Difference+in+susceptibility+to+activity-based+anorexia+in+two+inbred+strains+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Neuropsychopharmacol%22%5BJournal%5D)">Difference in susceptibility to activity-based anorexia in two inbred strains of mice.</a> Eur Neuropsychopharmacol. 17 (3), 199-205 (2007).</li>
<li>Shimizu, N., Oomura, Y., Kai, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress-induced+anorexia+in+rats+mediated+by+serotonergic+mechanisms+in+the+hypothalamus%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Stress-induced anorexia in rats mediated by serotonergic mechanisms in the hypothalamus.</a> Physiol Behav. 46 (5), 835-841 (1989).</li>
<li>Siegfried, Z., Berry, E. M., Hao, S., Avraham, Y. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12818708">Animal models in the investigation of anorexia nervosa.</a> Physiol Behav. 79 (1), 39-45 (2003).</li>
<li>Kim, S. F. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22465439">Animal models of eating disorders.</a> Neuroscience. 211, 2-12 (2012).</li>
<li>Gutierrez, E., Cerrato, M., Carrera, O., Vazquez, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heat+reversal+of+activity-based+anorexia%3A+implications+for+the+treatment+of+anorexia+nervosa%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Eat+Disord%22%5BJournal%5D)">Heat reversal of activity-based anorexia: implications for the treatment of anorexia nervosa.</a> Int J Eat Disord. 41 (7), 594-601 (2008).</li>
<li>Brown, A. J., Avena, N. M., Hoebel, B. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-fat+diet+prevents+and+reverses+the+development+of+activity-based+anorexia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Eat+Disord%22%5BJournal%5D)">A high-fat diet prevents and reverses the development of activity-based anorexia in rats.</a> Int J Eat Disord. 41 (5), 383-389 (2008).</li>
<li>Boakes, R. A., Juraskova, I. The role of drinking in the suppression of food intake by rodent activity. Behav Neurosci. 115 (3), 718-730 (2001).</li>
<li>Boakes, R. A., Dwyer, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Weight+loss+in+rats+produced+by+running%3A+effects+of+prior+experience+and+individual+housing%5BTitle%5D)+AND+%22Q+J+Exp+Psychol%22%5BJournal%5D)">Weight loss in rats produced by running: effects of prior experience and individual housing.</a> Q J Exp Psychol. 50 (2), 129-148 (1997).</li>
<li>Dwyer, D. M., Boakes, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity-based+anorexia+in+rats+as+failure+to+adapt+to+a+feeding+schedule%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Activity-based anorexia in rats as failure to adapt to a feeding schedule.</a> Behav Neurosci. 111 (1), 195-205 (1997).</li>
<li>Beneke, W. M., Schulte, S. E., Vander Tuig, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+analysis+of+excessive+running+in+the+development+of+activity+anorexia%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">An analysis of excessive running in the development of activity anorexia.</a> Physiol Behav. 58 (3), 451-457 (1995).</li>
<li>Dixon, D. P., Ackert, A. M., Eckel, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of%2C+and+recovery+from%2C+activity-based+anorexia+in+female+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Development of, and recovery from, activity-based anorexia in female rats.</a> Physiol Behav. 80 (2-3), 273-279 (2003).</li>
<li>Klenotich, S. J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22395732">Olanzapine, but not fluoxetine, treatment increases survival in activity-based anorexia in mice.</a> Neuropsychopharmacology. 37 (7), 1620-1631 (2012).</li>
<li>Ho, E. V., Klenotich, S. J., McMurray, M. S., Dulawa, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity-Based+Anorexia+Alters+the+Expression+of+BDNF+Transcripts+in+the+Mesocorticolimbic+Reward+Circuit%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Activity-Based Anorexia Alters the Expression of BDNF Transcripts in the Mesocorticolimbic Reward Circuit.</a> PLoS ONE. 11 (11), 0166756(2016).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

הניסוי ABA ניתן לשנות על ידי ניסויים לבחון זנים שונים, הגילאים, סמים, ומשתנים שונים אחרים של AN. הנושאת ב השתנות גנטי המוח, התאמות גלגל ריצה או מזון גישה תקופה להגדיל או להקטין את חומרת הסימפטומים, שיעור הנשירה. זה יכול לשמש כדי להגדיל או להקטין את אורך הניסוי, בהתאם לשאלה ניסיוני עניין.
מדידה מדויקת של צריכת מזון היא חלק קריטי של הפרדיגמה ABA, אך לעתים קרובות יכול להתבצע בעייתי. מצעים, צואה, שתן בצנצנת מזון, יחד עם המזון מועברות לחלל כלוב מספק הקושי במדויק במשקל של האוכל. עכברים יוצאים גם קטן...

מאז 1953, מכרסמים דווחו להראות היפראקטיביות פרדוקסלי על הפעלת גלגלים ניתנת להם גישה חופשית לגלגלים כשהוא עובר hypophagia מרצון כאשר זמינות מזון הוא מוגבל1. לעומת זאת, מכרסמים לא במהירות ירידה במשקל הגוף כאשר הציע מזון לפי לוח זמנים מבלי להפעיל גלגלים או כאשר שוכנו עם הפעלת גלגלים והציע מזון ad libitum1,2,3. המודל ABA התוצאה אמינה ירידות דרמטיות משקל הגוף, hypophagia, היפותרמיה, אובדן של ייחום, גירוי מוגבר של ציר HPA4. בסופו של דבר, ABA תוצאות במוות, אלא אם כן הנושא הוסר את הפרדיגמה5. הפרדיגמה ABA מספק חוקרים במודל חיה של אן, הפרעת אכילה מורכבות אשר כולל dysregulation חמורה של תיאבון-התנהגות, להשפיע על 1 ב 100 נקבות עם אחוז קטן של גברים6. חולים הסובלים AN לעתים קרובות להציג היפר אקטיביות, המורכב כמויות אדירות של התרגיל, ו/או חוסר מנוחה כללי7,8. שיעורי התמותה כ- 10%, AN יש שיעור התמותה הגבוה ביותר בין הפרעות פסיכיאטריות כל9. הטיפול הנוכחי AN מוגבל לטיפולים קוגניטיביים, שכן ישנם טיפולים לא תרופתי מאושרים עבור הסובלים10,11.
AN בדרך כלל כבר נחשב כהפרעה משפיע בעיקר נקבות. בתור אבחנה זה פי 10 יותר מאשר אצל נקבות זכרים, נקבה נושאים דומים באופן מסורתי המוקד12. עם זאת, שיקולים מיוחדים יילמד למעט זכרים ממחקרים. בזמן האבחנה נותר נמוך יותר אצל הזכרים, שרירים dysmorphia (MD) היא מצב זה יש קווי דמיון רבים כדי AN, דימוי גוף מעוות כולל דיאטה היא לעיתים קרובות סמוקים. קיימת תמיכה עבור הרעיון MD ו- AN והתוצרים דומה באופן13,14,15. זה יכול להציע כי בחלק מהמקרים MD מייצגים את "הגירסה הגברית" של AN. בהקשר של מודלים בעלי חיים, כמה דיווחים הראו כי גברים רגישים יותר מאשר נקבות הפרדיגמה ABA. כך למשל, מחקר שנערך לאחרונה הראה שיעור תמותה גבוה יותר וירידה צריכת המזון לעומת נקבות עכברים C57Bl/616. אחד כמנבא של רגישות ABA היא פעילות גופנית ספונטנית (SPA). חולדות עם ספא גבוהה או נמוכה יותר נוטים יותר לרזות התבנית ABA, חולדות זכרים מציג בעלת השפעה חזקה יותר מאשר נקבות17. לעומת זאת, מכרסמים הנשי נצפו לממש יותר מאשר זכרים במהלך השלב ההגבלה של ABA18. בנוסף, מחקרים עם Balb/cJ עכברים הראו השפעה הפוכה של עכברים C57Bl/6, שבו עכברים נקבה יש שיעור תמותה גבוה יותר וירידה צריכת המזון לעומת גברים (איור 1)6. משתנה תוצאות בין המינים ב- ABA הפרדיגמה, להגברת המודעות של זכרים עם סמוקים דפוסי אכילה, גם זכר וגם נקבה נושאים צריך להיבדק.
מלבד סקס הבדלים הפרדיגמה ABA, גיל ו זן יש לקחת בחשבון בעת בחירת נושאים. עכברים בגיל ההתבגרות עשויים בצורה מדויקת יותר דגם AN, מאז AN מתגלה בדרך כלל בגיל ההתבגרות, כפי שנצפה עם חולדות, עכברים19,20,21,22. זנים שאינם פעילים יותר מאחרים ברמה בסיסית יש שיעור גבוה יותר של הרגישות והחומרה של ABA23. זנים ידועים בעלי רמות גבוהות יותר של חרדה, כגון DBA/2, הגדילו גלגל ריצה פעילות, מה שמצביע על שיעור הנשירה מהירה יותר של הפרדיגמה ABA24. בהתאם לעיצוב הניסיונית, המתח של בחירה התפורות להגדיל את משך הזמן של ABA.
הפרדוקס ABA אינה ייחודית עכברים. יונקים אחרים, כולל עכברושים, אוגרים גרבילים, חזירים, סנאים, שרקנים הוכיחו את התופעה6. שימור התופעה ABA מעבר יונקים מרמז כי הפרדיגמה ABA יכול לספק כלי translational לחקור את המנגנונים שבבסיס התנהגות אנורקסיה אצל בני אדם. עכברים בפרט הם מותאם היטב עבור חקר המנגנונים שבבסיס ABA. יכול להיות שוכנו בצפיפות עכברים, זמן דור קצר יחסית. עכברים יש גנום מלא ברצף, זנים המפגרים, outbred ומיוחדים רבים, כגון congenics, הינם זמינים. נוצרו מספר רב של קווים גנטי, הפיכתם אידיאלי ללימודי הערכת גנטי המשפיע על הפרעות כגון AN. Depending על השאלה שלפנינו, חוקרים עשויים להשפיע ביטוי המעגלים ו/או ג'ין עצבי מורכב כדי להעריך את התנהגות בבית הדפוס ABA, פוטנציאל לענות על שאלות על השפעה גנטית זה אינן אפשריות לומדים בני אדם.
מספר מוגבל של מודלים חייתיים של AN קיימת כעת. מתח מודלים לגרום hypophagia של מכרסמים באמצעות הזנב צובט, חידוש-induced hypophagia, שחייה קר, גירוי מוחי. על ידי גרימת לחץ, שינויים הציר HPA ירידה התיאבון וכתוצאה מכך הגוף מופחתת משקל25. עם זאת, הציר HPA הוא גם מנע בעוצמה מגורה על ידי ABA, אשר משלבת גם תכונות נוספות של AN כגון היפראקטיביות. מודל נוסף שיש לקחת בחשבון כאשר AN לומד הוא הדגם הגבלת מזון כרונית. על-ידי הגבלת מזון לטווח של 40 60% של ad libitum, אחד יכול לחקות את התגובה הפיזיולוגית מתת-תזונה26. על פי שיטה זו יעילה עבור הלומדים את ההשפעות של האכלה לקוי, זה לא להתרבות. נושא הליבה של אן, זו הגבלה מרצון מזון. הפרדיגמה ABA, חיות הם משוללי מזון גישה עבור חלק מהיום, אך גם מרצון להפחית את צריכת המזון אם גלגל גם קיים. דגמים גנטיים השתמשו גם לבחון את האטיולוגיה של AN. חוקרים מצאו גורמים גנטיים עצבית בהפרות AN, כגון גן BDNF ו עצביים דופמין וסרוטונין27. השימוש של דגמים גנטיים חיוני להבין את המנגנונים העצביים העומדים מאחורי AN. עם זאת, הגנום האגודה רחב ללימודי AN יש לא הניב להיטים משמעותי, אין גרסאות נדיר AN זוהו. מחקרים עתידיים צריך לשלב בגישה גנטי עם המודל ABA להגדיל את ההבנה של פנוטיפים הקשורות AN.
פיתוח מודלים בבעלי חיים עבור הפרעות פסיכיאטריות כולו הוא כמעט בלתי אפשרי בשל המורכבות והטרוגניות של הפרעות האדם. עם זאת, על-ידי דוגמנות רכיבים ספציפיים, מוגדר היטב של הפרעה פסיכיאטרית, תובנות ייחודיות לתוך הבסיס הנוירו-ביולוגיה או פתופסיולוגיה ניתן לקבל. כאלה תובנות הביולוגי עשוי לשמש לאחר מכן כדי לזהות טיפולים חדשניים. הפרדיגמה ABA מכרסמים ולכן מספק כלי פרה ללמוד את המנגנונים שבבסיס התנהגות AN. ניתן לחקור בצורה מוסרית בבני אדם, כגון ההשפעות של שינויים גנטיים, לפליטת את המעגלים העצביים, ו ההשלכות של גורמים סביבתיים מסוימים.

<table><tbody><tr><td>גלגלי ריצה אלחוטיים בפרופיל נמוך, רכזות, תוכנה</td><td>Med Associates</td><td>ENV-047</td><td></td></tr><tr><td>סטנדרט Teklad מכרסם צ'או</td><td>Envigo</td><td>8604</td><td></td></tr> 8 <tr><td>שבועות עכברים בני 8 שבועות</td><td>מעבדות ג'קסון</td><td>Balb/cJ</td><td>זן המשמש במחקר שלנו - יכול להשתמש בזנים אחרים כדי להעריך ABA</td></tr><tr><td>Scout Pro Scale 200 גרם</td><td>Ohaus</td><td>SPE202</td><td>משמש לשקילת עכברים</td></tr><tr><td>Scout Pro Scale 400 גרם</td><td>Ohaus</td><td>SPE402</td><td>רגיל למשקל מזון</td></tr></tbody></table>

הערכת מבוססי פעילות אנורקסיה בעכברים

Assessing Activity-based Anorexia in Mice

מכרסמים לפתח אנורקסיה מבוססי פעילות (ABA) כאשר נחשפים זמנים האכלה מוגבלת, כניסה חינם על גלגל ריצה. תנאים אלה להוביל לירידה סכנת חיים משקל הגוף. עם זאת, מכרסמים נחשפים רק אחד מהתנאים הללו להתאים בסופו של דבר להקים מחדש את משקל גוף נורמלי. למרות מוגבר פועל בשילוב עם הפחתת צריכת המזון מרצון נראים פרדוקסלי בתנאים ABA, ABA התנהגות נצפית מעבר יונקים רבים.
הפרדיגמה ABA מספק במודל חיה של אנורקסיה נרבוזה (AN), הפרעת אכילה עם חמור dysregulation של תיאבון-התנהגות. נושאים שוכנות ביחידים עם גישה חופשית גלגל ריצה. בכל יום, הנושא מוגש מזון עבור כמות מוגבלת של זמן. במהלך הניסוי, הקטנת משקל הגוף של נושא פעילות גבוהה, צריכת הקלוריות נמוכה. משך המחקר משתנה בהתאם כמה זמן אוכל מוגש מדי יום, את סוג המזון המוצעים, את המתח של העכבר, אם התרופות נבדקות, וגורמים סביבתיים.
חוסר טיפולי תרופתי יעיל של המטופלים, איכות חייהם נמוך, העלות הגבוהה של הטיפול של שיעור תמותה גבוהה שלהם מצביעים על הדחיפות עוד מחקר AN. אנו מספקים מתווה בסיסי לביצוע ניסויים ABA עם עכברים, המציע שיטה לחקור התנהגות AN. כדי לפתח טיפולים חדשניים. פרוטוקול זה ממוטב לשימוש בעכברים Balb/cJ, אך ניתן לטפל בקלות עבור זנים אחרים, מתן גמישות רבה בעבודה עם שאלות שונות, במיוחד הקשורים גורמים גנטיים של ABA.

Neurotrophic המוח-derived פקטור (BDNF), חלבון זה תורם ברגולציה של האכלה כמו גם משקל תחזוקה, מופחת הסרום של חולים עם35. ניסוי זה העריך את ההשפעות של האכלה מתוזמנת, גישה גלגל ריצה או שניהם על ביטוי BDNF בתוך ההיפוקמפוס (HPC), אזור הטגמנטום הגחוני (מע' ' מ), גרעין האקומבנס (NAc), ואת הפריפרונטלי צעדים ראשונים ביזמות בהייטק (mPFC). ביטוי של מולקולה אדהזיה דופאמינרגיים 1 (NCAM1) נאמד גם לחקור את ייחודה של השפעות על BDNF בתוך מסלול mesocorticolimbic.
<p class="jove_c...

עכברים שוכנים בנפרד עם גלגל ריצה בזמן נתון גישה מוגבלת לאוכל לפתח הפחתות צריכת מזון ולהגדיל את פעילות על גלגל ריצה. התופעה הניסיונית נקרא אנורקסיה מבוססי פעילות. פרדיגמה זו מספקת כלי ניסיוני לומד נוירוביולוגיה והתנהגויות שבבסיס היבטים של אנורקסיה נרבוזה.

Rodents develop activity-based anorexia (ABA) when exposed to a restricted feeding schedule and allowed free access to a running wheel. These conditions ...

המטרה הכוללת של ניסוי זה היא לבחון את הנוירוביולוגיה וההתנהגות העומדת בבסיס אנורקסיה נרבוזה. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום הפסיכיאטריה הקשורות להפרעות אכילה, כגון מהם היסודות העצביים של אנורקסיה נרבוזה, ואילו מעגלי מוח מעורבים. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שניתן להשתמש בה כדי לחקור כמה מנגנונים בסיסיים של אנורקסיה, שלא ניתן להעריך בבני אדם.הגדר אזור ניסוי על ידי בחירת מתלה כלוב קרוב למחשב הנייד ולרכזות הגלגלים. זה יגביל בעיות בהעברת נתונים. כעת הפעל את החיבור בין רכזות הגלגלים לתוכנה.ראשית, פתח את תוכנת ניהול הגלגלים כדי לוודא ששתי הרכזות האלחוטיות פעילות. מהתוכנה אפס את חיבורי הגלגלים המוגדרים כברירת מחדל. פתח כלים ובחר מחק גלגלים.חזור על שלב זה חמש פעמים ולאחר מכן סגור את התוכנה ופתח אותה מחדש. לאחר מכן, ספק כוח לגלגלים. חבר את חוטי ערכת הסוללות לחומרת הגלגל והכנס את הסוללות לבסיס הגלגלים.לאחר מכן תסתכל על התוכנה. בסיס הגלגלים צריך להיות רשום עם המזהה של אחד מתחת לרכזת האלחוטית המתאימה. אם לא, נתק את ערכת הסוללות, מחק את הגלגל בתוכנה ונסה שוב.אם הגלגל מזוהה, החלף את המזהה בתעודת הזהות המתאימה של בעל החיים.לאחר מכן, הדביקו את בסיס גלגל הריצה לתחתית הכלוב בעזרת סרט דביק כדי להבטיח יציבות. אל תאפשר לסרט לבלוט החוצה מכיוון שעכברים ילעסו סרט חשוף. לאחר מכן, הנח דיסק גלגל ריצה ללא מגנטי פגום על הבסיס וסובב את הגלגל כדי לוודא מרווח מקירות הכלוב והסורג.סובב את הדיסק ובדוק שכל סיבוב נרשם כראוי עם התוכנה. לאחר מכן, השתמש בנייר דבק כדי להדק את צנצנת המזון לכלוב. מקם אותו הרחק מגלגל הריצה ובקבוק המים.לאחר מכן מניחים שתי חתיכות צ'או בצנצנת, מחברים בקבוק מים מלא לכלוב ומוסיפים מצעים לתחתית הכלוב. לאחר שכל הכלובים הוכנו בצורה זו, הכניסו עכברים בנפרד לכלובים המתאימים להם. לאחר שכל העכברים נמצאים בכלובים שלהם, עבור לתוכנה ולחץ על הקובץ, ולאחר מכן התחל ברכישה.במהלך הניסוי התחל רכישות חדשות כדי לפרק את שלבי הניסוי. עכשיו תנו לעכברים להתאקלם בתנאי הדיור במשך יומיים שלמים. במהלך שלב זה, החליטו אם כל עכבר בריא מספיק כדי להתמודד עם ניסוי ABA.ביום השלישי של הניסוי, מדדו כתשעה גרם צ'או ורשמו את המשקל ל-1/1000 גרם. לאחר מכן, הוציאו בזהירות את העכבר מהכלוב ושקלו אותו בכוס פלסטיק גדולה עד לעשירית הגרם הקרובה ביותר. עשה זאת במינימום לחץ על העכבר.כשהעכבר מחוץ לכלוב, חפש והסר את כל המזון בכלוב. מלבד הוצאת האוכל בצנצנת, חפשו במצעים מזון מפוזר. לאחר מכן, במידת הצורך, נקו את גלגל הריצה עם 70% איזופרופנול ומגבות נייר.לפני החזרת העכבר לכלוב שלו, ודא שהאיזופרופנול התייבש. לאחר מכן טען את העכבר ואת תשעת גרם הצ'או לתוך הכלוב. למחרת חזרו למתקן בעלי החיים תוך 10 דקות מהביקור האחרון.שוב טען תשעה גרם צ'או בכוס פלסטיק קטנה ורשום את המשקל המדויק. שוב הסר בעדינות את העכבר ושקול אותו במינימום לחץ על העכבר. כעת הוציאו את צנצנת האוכל מהכלוב וחקרו אותה.הסר את כל הצואה בעזרת פינצטה והשתמש במסננת מעל הכוס כדי להסיר מצעים. מפוררים את חתיכות המזון הגדולות יותר כך שיעברו דרך המסנן ומשאירים רק מצעים במסננת. לאחר מכן חפש במצעי הכלוב שאריות מזון והוסף אותם לכוס.לאחר מכן רשום את מסת המזון שנותר בכלוב. לאחר מכן, נגב את הצנצנת והחזיר אותה לכלוב ריק. מרחו סרט חדש במידת הצורך.לאחר מכן העמיסו את הצנצנת במנת המזון המוכנה של תשעה גרם. כמו קודם, נקו את כל גלגלי הריצה המלוכלכים והחזירו אותם לכלובים. אפס את כל הכלובים בצורה זו כל יום.בימים החמישי, השביעי והתשיעי, הפעל מחדש את איסוף נתוני המחשב בתוכנית ריצת גלגלים. לאחר איסוף הנתונים הבסיסיים, ביום ה-11 הפעל מחדש את איסוף הנתונים והתחל את שלב ההגבלה. בעיקרון, עקבו אחר פרוטוקול הבסיס עם כמה שינויים.ראשית, אל תנקה את גלגלי הריצה בעת החלפת המזון. שנית, להגביל את הגישה של בעלי החיים למנת המזון שלהם של תשעה גרם לשש שעות בלבד. תקופת ההאכלה יכולה להיות יומית או לילית.לשתי הבחירות יש יתרונות. לאחר שש שעות שוקלים את המזון שנותר בצנצנת ובכלוב. בשלב זה, במידת הצורך, נקו את הגלגל, אך עשו זאת במהירות כדי שניתן יהיה לטפל בכלוב הבא במהירות.בכל יום ויום בשלב ההגבלה, חזור על הליך זה. כעת חשוב מאוד לעקוב אחר הירידה במשקל של בעלי החיים. אם עכבר יורד ל-75% ממשקל הגוף הבסיסי שלו, הסר אותו מהניסוי.ספקו לעכברים אלה מזון בלתי מוגבל מרצפת הכלוב וללא גישה לגלגל ריצה. לאחר הערכת כל הכלובים, המתת חסד של העכברים שנשמטו אלא אם כן יש לחקור את התאוששותם. באמצעות הניסוי המתואר, קבוצה של עכברי אנורקסיה מבוססי פעילות הוערכה יחד עם שלוש קבוצות ביקורת.בעקבות הנוהל המתואר, המזון הוגבל לשש שעות יומיות. כאשר עכבר הוצא מהמחקר עקב ירידה מוגזמת במשקל, עכבר ביקורת שנבחר באופן אקראי היה גם כן. משקל הגוף הופחת בימים הראשון עד החמישי בשתי הקבוצות שנחשפו להאכלה מתוכננת, וזה היה בקורלציה הגיונית עם צריכת מזון מופחתת.באופן מוזר, לירידה במשקל לא הייתה השפעה על פעילות ריצת הגלגלים. לאחר מחקר ההתנהגות, המוחות נאספו והוקפאו לניתוח ביוכימי. ניתוח אחד של רקמה מהאזור הטגמנטלי הגחוני הראה כי הגלגל הפועל הגדיל משמעותית את ביטוי ה-BDNF בעוד שהגבלת מזון הגדילה את ביטוי ה-MRNA של NCAM1 אך לא שינתה את ביטוי ה-MRNA של BDNF.בזמן ניסיון הליך זה, חשוב לזכור להגביל את הלחץ על העכברים, להיות עקבי בתזמון המדידות שלך, להיות סבלני כדי שתרכוש קריאות מדויקות ולבדוק באופן עקבי בתוכנת הפעלת הגלגלים עבור בעיות טכניות. בעקבות הליך זה, ניתן לבצע שיטות אחרות כמו אימונוהיסטוכימיה וקשירת רדיוליגנד על מוחות עכברים על מנת לענות על שאלות נוספות הנוגעות לתפקוד הנגיף בפרדיגמת האנורקסיה.

assessing-activity-based-anorexia-in-mice

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

מתחפרת, קינון אגירה הם מינים טיפוסי פעילויות עכברים בקלות לבצע במעבדה. מאמר זה מתאר כיצד הם יכולים להעריך בקלות ובזול. פרוטוקולים אלה רגישים במיוחד זן העכבר, נגעים במוח ומחלות. יתר על כן הם מהווים "העשרה סביבתית" לעכברים, ואת לגלם את "חידוד" היבט של "3 Rs" 18.

הערכת מתחפרת, בניית קן, ו אגירה של עכברים

הפעילות של תנועה (אה"ע) היא מדידה פשוטה ומתבצע בקלות בהתנהגות בעכברים. צימוד של תוכנת מעקב וידאו (VTS) ואה"ע מאפשר השיפור של ייחוד ורגישות, במיוחד בהשוואה לשימוש, שיטת חציית קו אה"ע הניתוח. בנוסף VTS מאפשר מעקב ארוך טווח של העכבר אה"ע.

לטווח ארוך והקצרה של תנועה פעילות עכבר נותחה על ידי תוכנה למעקב וידאו

רמות פעילות השדה פתוחות נמצאות בשימוש על מנת להעריך את רמות פעילות קטר והתנהגותיים. פרוטוקול זה מספק פרוטוקול מעוצב היטב, סטנדרטי לשימוש בניסויים בבעלי הפרעות תוקפת.

מדידות התנהגות ושל תנועה באמצעות מערכת ניטור פעילות שדה פתוחה למחלות שריר שלד

כאן אנו מציגים פרוטוקול להשראת אנורקסיה מבוססת פעילות (ABA) בעכברים מתבגרים. ABA הוא מצב של היפראקטיביות המתעורר על ידי הטלת הגבלת מזון על מכרסמים עם גישה לגלגל ריצה. תופעה זו משמשת כמודל לחקר הנוירוביולוגיה הבסיסית של אנורקסיה נרבוזה.

באמצעות מודל אנורקסיה מכרסמים מבוסס פעילות לחקר הבסיס הנוירוביולוגי של אנורקסיה נרבוזה

פיתחנו פרוטוקול כדי להעריך רווחה בעכברים במהלך הליכי באמצעות הרדמה כללית. סדרה של פרמטרים התנהגותית המציינת רמות של רווחה וכן glucocorticoid מטבוליטים נותחו. הפרוטוקול יכול לשמש כסיוע כללי כדי להעריך את מידת חומרת בצורה מדעית, מהחי.

הערכה שיטתית של רווחה בעכברים להליכי באמצעות הרדמה כללית

פרוטוקול זה מתאר את השימוש מנתח בהרכב הגוף ומערכת חילוף החומרים בעלי חיים ניטור לאפיין הרכב הגוף ופרמטרים מטבולית בעכברים. מודל השמנת יתר הנגרמת על ידי האכלה עתירי שומן משמש כדוגמה עבור היישום של טכניקות אלה.

הרכב הגוף וניתוח מטבולית שכולאת בעכברים פד שומן גבוה

כתב יד זה מתאר פרוטוקול למדידת קצב חילוף החומרים של הבזל ואת היכולת החמצונית של אדיפוזיטים תרמוגניים בעכברים שמנים.

קביעת ההוצאה על אנרגיה בזלית והקיבולת של אדיפוציטים תרמוגניים להוצאות אנרגיה בעכברים שמנים

מודלים של מכרסמים הם כלים רבי ערך לחקר התנהגויות ליבה הקשורות להפרעת הספקטרום האוטיסטי (ASD). במאמר זה, אנו מסבירים על שני מבחנים התנהגותיים למידול מאפייני הליבה של ASD בעכברים: טיפוח עצמי, המעריך התנהגות חוזרת, ומבחן אינטראקציה חברתית בן שלושה חדרים, המתעד ליקויים חברתיים.

אסטרטגיות להערכת התנהגויות דמויות אוטיסטיות בעכברים

על ידי שילוב ארבעה גורמי לחץ חברתיים יומיומיים, המחקר הנוכחי מתאר מודל לחץ חברתי משולב מרובה (MISS) להפרעות פסיכיאטריות בעכברי C57BL/6J נקבות. לאחר עשרה ימים של חשיפה חוזרת ונשנית ל-MISS, העכברים פיתחו פנוטיפים דמויי דיכאון וחרדה, ובכך סיפקו מודל טבעי מבוסס אטיולוגיה לחקר הפרעות פסיכיאטריות אצל נבדקים.

מודל מתח חברתי משולב מרובה להפרעות פסיכיאטריות בעכברי C57BL/6J נקבות

מודל אכילה מופרזת הוקם בעכברים באמצעות גישה לסירוגין ל-M&amp;M's (מזון טעים מאוד העשוי משומן וסוכר). עכברים עם גישה לסירוגין למזון עתיר שומן וסוכר זה הראו התנהגויות דמויות לחץ, צריכת קלוריות מוגברת והעדפה למזון זה על פני צ'או רגיל בהשוואה לעכברים עם גישה רציפה או ללא גישה למזון.

מודל צריכת בולמוס לסירוגין בעכברים

חקור את הנוירוביולוגיה של אנורקסיה נרבוזה באמצעות מודל אנורקסיה מבוססת פעילות בעכברים. שיטה זו מאפשרת לבחון מעגלים עצביים ושינויים התנהגותיים הקשורים להפרעות אכילה.

הערכת מבוססי פעילות אנורקסיה בעכברים

גלה סרטונים נוספים