Name: שיתוף השתלת רקמת השחלה האנושי עם תאי אנדותל מהונדסים: שילוב אסטרטגיה מבוסס תא מואצת זלוף עם מסירה ישירה Paracrine (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-05-16T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 40 s
Description: חקור שתלת רקמת שחלה מוקפאת עם תאי אנדותל מהונדסים לשיפור הישרדות הזקיקים. השיטה משלבת אסטרטגיית תא מואצת זלוף עם מסירה פרקרינית ישירה לחקר ביולוגיה רבייה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עומר אדם אלכסנדר על האיורים. ל. מ נתמכה על ידי פרס טייס מן במישור הקליני של קורנל, מרכז מדעים Translational ו- ASRM של מלגת מחקר. המחברים רוצה להודות ג'יימס חברי המעבדה לקריאה ביקורתית של כתב היד.

<ol><li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.3322/caac.21387/full">Cancer Statistics, 2017.</a> CA Cancer J Clin. 67 (1), 7-30 (2017).</li>
<li>Magelssen, H., Melve, K. K., Skjaerven, R., Fossa, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parenthood+probability+and+pregnancy+outcome+in+patients+with+a+cancer+diagnosis+during+adolescence+and+young+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Parenthood probability and pregnancy outcome in patients with a cancer diagnosis during adolescence and young adulthood.</a> Hum Reprod. 23 (1), 178-186 (2008).</li>
<li>Donnez, J., Dolmans, M. M., Diaz, C., Pellicer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+cortex+transplantation%3A+time+to+move+on+from+experimental+studies+to+open+clinical+application%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil+Steril%22%5BJournal%5D)">Ovarian cortex transplantation: time to move on from experimental studies to open clinical application.</a> Fertil Steril. 104 (5), 1097-1098 (2015).</li>
<li>Stoop, D., Cobo, A., Silber, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fertility+preservation+for+age-related+fertility+decline%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Fertility preservation for age-related fertility decline.</a> Lancet. 384 (9950), 1311-1319 (2014).</li>
<li>Aubard, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+and+heterotopic+autografts+of+frozen-thawed+ovarian+cortex+in+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Orthotopic and heterotopic autografts of frozen-thawed ovarian cortex in sheep.</a> Hum Reprod. 14 (8), 2149-2154 (1999).</li>
<li>Newton, H., Aubard, Y., Rutherford, A., Sharma, V., Gosden, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+temperature+storage+and+grafting+of+human+ovarian+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Low temperature storage and grafting of human ovarian tissue.</a> Hum Reprod. 11 (7), 1487-1491 (1996).</li>
<li>Van Eyck, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electron+paramagnetic+resonance+as+a+tool+to+evaluate+human+ovarian+tissue+reoxygenation+after+xenografting%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil+Steril%22%5BJournal%5D)">Electron paramagnetic resonance as a tool to evaluate human ovarian tissue reoxygenation after xenografting.</a> Fertil Steril. 92 (1), 374-381 (2009).</li>
<li>Nugent, D., Newton, H., Gallivan, L., Gosden, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+vitamin+E+on+ischaemia-reperfusion+injury+in+ovarian+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Fertil%22%5BJournal%5D)">Protective effect of vitamin E on ischaemia-reperfusion injury in ovarian grafts.</a> J Reprod Fertil. 114 (2), 341-346 (1998).</li>
<li>Kim, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assessment+of+ischemic+tissue+damage+in+ovarian+cortical+tissue+with+or+without+antioxidant+%28ascorbic+acid%29+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil+Steril%22%5BJournal%5D)">Quantitative assessment of ischemic tissue damage in ovarian cortical tissue with or without antioxidant (ascorbic acid) treatment.</a> Fertil Steril. 82 (3), 679-685 (2004).</li>
<li>Abir, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+posttransplantation+survival+of+human+ovarian+tissue+by+treating+the+host+and+graft%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil+Steril%22%5BJournal%5D)">Improving posttransplantation survival of human ovarian tissue by treating the host and graft.</a> Fertil Steril. 95 (4), 1205-1210 (2011).</li>
<li>Friedman, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Possible+improvements+in+human+ovarian+grafting+by+various+host+and+graft+treatments%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Possible improvements in human ovarian grafting by various host and graft treatments.</a> Hum Reprod. 27 (2), 474-482 (2012).</li>
<li>Shikanov, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibrin+encapsulation+and+vascular+endothelial+growth+factor+delivery+promotes+ovarian+graft+survival+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+A%22%5BJournal%5D)">Fibrin encapsulation and vascular endothelial growth factor delivery promotes ovarian graft survival in mice.</a> Tissue Eng Part A. 17 (23-24), 3095-3104 (2011).</li>
<li>Soleimani, R., Heytens, E., Oktay, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancement+of+neoangiogenesis+and+follicle+survival+by+sphingosine-1-phosphate+in+human+ovarian+tissue+xenotransplants%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Enhancement of neoangiogenesis and follicle survival by sphingosine-1-phosphate in human ovarian tissue xenotransplants.</a> PLoS One. 6 (4), e19475(2011).</li>
<li>Israely, T., Dafni, H., Nevo, N., Tsafriri, A., Neeman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiogenesis+in+ectopic+ovarian+xenotransplantation%3A+multiparameter+characterization+of+the+neovasculature+by+dynamic+contrast-enhanced+MRI%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">Angiogenesis in ectopic ovarian xenotransplantation: multiparameter characterization of the neovasculature by dynamic contrast-enhanced MRI.</a> Magn Reson Med. 52 (4), 741-750 (2004).</li>
<li>Buratini, J., Price, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Follicular+somatic+cell+factors+and+follicle+development%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Follicular somatic cell factors and follicle development.</a> Reprod Fertil Dev. 23 (1), 32-39 (2011).</li>
<li>Dunlop, C. E., Anderson, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+regulation+and+assessment+of+follicular+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Scand+J+Clin+Lab+Invest+Suppl%22%5BJournal%5D)">The regulation and assessment of follicular growth.</a> Scand J Clin Lab Invest Suppl. 244, discussion 17 13-17 (2014).</li>
<li>Durlinger, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+primordial+follicle+recruitment+by+anti-M%C3%BCllerian+hormone+in+the+mouse+ovary%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Control of primordial follicle recruitment by anti-Müllerian hormone in the mouse ovary.</a> Endocrinology. 140 (12), 5789-5796 (1999).</li>
<li>Schmidt, K. L., Ernst, E., Byskov, A. G., Nyboe Andersen, A., Yding Andersen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+of+primordial+follicles+following+prolonged+transportation+of+ovarian+tissue+prior+to+cryopreservation%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Survival of primordial follicles following prolonged transportation of ovarian tissue prior to cryopreservation.</a> Hum Reprod. 18 (12), 2654-2659 (2003).</li>
<li>Jensen, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outcomes+of+transplantations+of+cryopreserved+ovarian+tissue+to+41+women+in+Denmark%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Outcomes of transplantations of cryopreserved ovarian tissue to 41 women in Denmark.</a> Hum Reprod. 30 (12), 2838-2845 (2015).</li>
<li>Oktay, K., Newton, H., Aubard, Y., Salha, O., Gosden, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryopreservation+of+immature+human+oocytes+and+ovarian+tissue%3A+an+emerging+technology%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil+Steril%22%5BJournal%5D)">Cryopreservation of immature human oocytes and ovarian tissue: an emerging technology?</a> Fertil Steril. 69 (1), 1-7 (1998).</li>
<li>Shultz, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+lymphoid+and+myeloid+cell+development+in+NOD%2FLtSz-scid+IL2R+gamma+null+mice+engrafted+with+mobilized+human+hemopoietic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Human lymphoid and myeloid cell development in NOD/LtSz-scid IL2R gamma null mice engrafted with mobilized human hemopoietic stem cells.</a> J Immunol. 174 (10), 6477-6489 (2005).</li>
<li>Ramalingam, R., Rafii, S., Worgall, S., Brough, D. E., Crystal, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((E1%28-%29E4%28%2B%29+adenoviral+gene+transfer+vectors+function+as+a+%26%2334%3Bpro-life%26%2334%3B+signal+to+promote+survival+of+primary+human+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">E1(-)E4(+) adenoviral gene transfer vectors function as a &#34;pro-life&#34; signal to promote survival of primary human endothelial cells.</a> Blood. 93 (9), 2936-2944 (1999).</li>
<li>Seandel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+a+functional+and+durable+vascular+niche+by+the+adenoviral+E4ORF1+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Generation of a functional and durable vascular niche by the adenoviral E4ORF1 gene.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 105 (49), 19288-19293 (2008).</li>
<li>Meirow, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cortical+fibrosis+and+blood-vessels+damage+in+human+ovaries+exposed+to+chemotherapy.+Potential+mechanisms+of+ovarian+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Cortical fibrosis and blood-vessels damage in human ovaries exposed to chemotherapy. Potential mechanisms of ovarian injury.</a> Hum Reprod. 22 (6), 1626-1633 (2007).</li>
<li>Assidi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+potential+markers+of+oocyte+competence+expressed+in+bovine+cumulus+cells+matured+with+follicle-stimulating+hormone+and%2For+phorbol+myristate+acetate+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Identification of potential markers of oocyte competence expressed in bovine cumulus cells matured with follicle-stimulating hormone and/or phorbol myristate acetate in vitro.</a> Biol Reprod. 79 (2), 209-222 (2008).</li>
<li>Thakur, S. C., Datta, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Higher+expression+of+hyaluronan+binding+protein+1+%28HABP1%2Fp32%2FgC1qR%2FSF2%29+during+follicular+development+and+cumulus+oocyte+complex+maturation+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Reprod+Dev%22%5BJournal%5D)">Higher expression of hyaluronan binding protein 1 (HABP1/p32/gC1qR/SF2) during follicular development and cumulus oocyte complex maturation in rat.</a> Mol Reprod Dev. 75 (3), 429-438 (2008).</li>
<li>Dolmans, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short-term+transplantation+of+isolated+human+ovarian+follicles+and+cortical+tissue+into+nude+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Reproduction%22%5BJournal%5D)">Short-term transplantation of isolated human ovarian follicles and cortical tissue into nude mice.</a> Reproduction. 134 (2), 253-262 (2007).</li>
<li>Amorim, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+freezing+and+thawing+of+human+ovarian+tissue+on+follicular+growth+after+long-term+xenotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Assist+Reprod+Genet%22%5BJournal%5D)">Impact of freezing and thawing of human ovarian tissue on follicular growth after long-term xenotransplantation.</a> J Assist Reprod Genet. 28 (12), 1157-1165 (2011).</li>
<li>Kawamura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippo+signaling+disruption+and+Akt+stimulation+of+ovarian+follicles+for+infertility+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Hippo signaling disruption and Akt stimulation of ovarian follicles for infertility treatment.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 110 (43), 17474-17479 (2013).</li>
<li>Suzuki, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+fertility+preservation+following+ovarian+tissue+vitrification+in+patients+with+primary+ovarian+insufficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Successful fertility preservation following ovarian tissue vitrification in patients with primary ovarian insufficiency.</a> Hum Reprod. 30 (3), 608-615 (2015).</li>
<li>Campbell, B. K., Clinton, M., Webb, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+anti-M%C3%BCllerian+hormone+%28AMH%29+during+follicle+development+in+a+monovulatory+species+%28sheep%29%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">The role of anti-Müllerian hormone (AMH) during follicle development in a monovulatory species (sheep).</a> Endocrinology. 153 (9), 4533-4543 (2012).</li>
<li>Donnez, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restoration+of+ovarian+activity+and+pregnancy+after+transplantation+of+cryopreserved+ovarian+tissue%3A+a+review+of+60+cases+of+reimplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil+Steril%22%5BJournal%5D)">Restoration of ovarian activity and pregnancy after transplantation of cryopreserved ovarian tissue: a review of 60 cases of reimplantation.</a> Fertil Steril. 99 (6), 1503-1513 (2013).</li>
<li>Ferreira, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+sample+size+on+the+outcome+of+ovarian+tissue+cryopreservation%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Domest+Anim%22%5BJournal%5D)">The effects of sample size on the outcome of ovarian tissue cryopreservation.</a> Reprod Domest Anim. 45 (1), 99-102 (2010).</li>
<li>Gavish, Z., Peer, G., Roness, H., Cohen, Y., Meirow, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Follicle+activation+and+%27burn-out%27+contribute+to+post-transplantation+follicle+loss+in+ovarian+tissue+grafts%3A+the+effect+of+graft+thickness%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Follicle activation and 'burn-out' contribute to post-transplantation follicle loss in ovarian tissue grafts: the effect of graft thickness.</a> Hum Reprod. 30 (4), 1003(2015).</li>
<li>Donnez, J., Dolmans, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fertility+Preservation+in+Women%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Fertility Preservation in Women.</a> N Engl J Med. 377 (17), 1657-1665 (2017).</li>
<li>Salama, M., Woodruff, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+advances+in+ovarian+autotransplantation+to+restore+fertility+in+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Metastasis+Rev%22%5BJournal%5D)">New advances in ovarian autotransplantation to restore fertility in cancer patients.</a> Cancer Metastasis Rev. 34 (4), 807-822 (2015).</li>
<li>Donnez, J., Dolmans, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+cortex+transplantation%3A+60+reported+live+births+brings+the+success+and+worldwide+expansion+of+the+technique+towards+routine+clinical+practice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Assist+Reprod+Genet%22%5BJournal%5D)">Ovarian cortex transplantation: 60 reported live births brings the success and worldwide expansion of the technique towards routine clinical practice.</a> J Assist Reprod Genet. 32 (8), 1167-1170 (2015).</li>
<li>Meirow, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantations+of+frozen-thawed+ovarian+tissue+demonstrate+high+reproductive+performance+and+the+need+to+revise+restrictive+criteria%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil+Steril%22%5BJournal%5D)">Transplantations of frozen-thawed ovarian tissue demonstrate high reproductive performance and the need to revise restrictive criteria.</a> Fertil Steril. 106 (2), 467-474 (2016).</li>
<li>Kalich-Philosoph, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclophosphamide+triggers+follicle+activation+and+%22burnout%22%3B+AS101+prevents+follicle+loss+and+preserves+fertility%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Cyclophosphamide triggers follicle activation and "burnout"; AS101 prevents follicle loss and preserves fertility.</a> Sci Transl Med. 5 (185), 185ra162(2013).</li>
<li>Kano, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AMH%2FMIS+as+a+contraceptive+that+protects+the+ovarian+reserve+during+chemotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">AMH/MIS as a contraceptive that protects the ovarian reserve during chemotherapy.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 114 (9), E1688-E1697 (2017).</li>
</ol>

מיכאל גינסבורג הוא עובד של Angiocrine החיים, inc., סן דייגו, CA, 92130, ארצות הברית, מבודד, transfected עם E4-ORF-1, שכותרתו תאי אנדותל השתמשנו.

כאן אנחנו מוכיחים את השתלת שיתוף של המנהלים מספק יתרון משמעותי רקמות השחלה הכדאיות ותפקוד בעקבות xenograft בעכברים. תקנים עבור יישומים קליניים של רקמות השחלה אוטומטית-השתלת לשימור פוריות לא היה סט של פרמטרים אופטימליים (גודל, השתלת באתר, משך הזמן של השתל, וכו '.) 32 , 33 , 34 עבור שחזור משופר של מאגר הזקיקים נשאר לא מוגדר. כאשר auto-השתלת מבוצע, avascular הארכת רקמות השחלה קורטיקלית המופשרים מתבצע בעיקר באתרים האגן כגון...

הסרטן נשאר בין הגורמים המובילים. למוות בעולם המפותח, עדיין עשורים של מחקר הניבו התקדמות משמעותית במרבית הסוגים של סרטן, ובעוד כמה שיעורי הישרדות כמעט כפולים מקרים1. למרבה הצער, סוכנים כימותרפיות הם לעתים קרובות gonadotoxic, depleting השמורה של זקיקים הקדמוני של השחלות והפחתת פוריות2. זו אוכלוסיה גדלה יכולים להפיק תועלת שיטות שונות של שימור פוריות כולל הקפאה קריוגנית oocyte ו/או העובר, עם זאת, חולים הנזקקים בקש חניכה של טיפול בסרטן ומטופלים מראש המתבגר הם מושעים. אפשרויות אלה. לחלופין, בחרו חלק מהחולים cryopreserve רקמות השחלה לפני התחייבות משטר טיפולי שלהם, וגם על שחזור, רמיסיה, אוטומטי משתילים רקמה לשחזור פוריות3. ובכל זאת, עד כה, הישרדות השתל פלט הזקיקים בעקבות אוטומטי-השתלת עדיין נמוך יחסית4, בעיקר בשל רקמת איסכמיה, היפוקסיה5,6,7. למרות המאמצים הרבים כדי לשפר את הכדאיות של שתלי קורטיקלית השחלות באמצעות8,נוגדי חמצון9, pro-אנגיוגנזה ציטוקינים10,11,12,1 איסכמיה שתל 3או מניפולציות מכני14, ב- 5 עד 7 יום חלון שלאחר ההשתלה מערער את יכולת הקיום וההישרדות של שתל7. כדי לטפל בבעיה זו, פיתחנו אסטרטגיה המבוססת על התא כדי להקל על השקה של המארח וספינות השתל ובכך לזרז פגיעה reperfusion רקמת השחלה.
בנוסף העלבון איסכמי המושתל רקמת השחלה בחלון שלאחר ההשתלה, שיבוש איתות בין הזקיקים עשוי לתרום דלדול של מאגר ה-15,16. כי תאי אנדותל אקסוגני (המנהלים) לתרום כלי יציב ופועל בפריפריה של השתל, הם מציגים הזדמנות ייחודית להעביר קלט מולקולרית מוגדר לרקמות המושתלים. מהווה הוכחה של עיקרון, המנהלים היו מתוכנן אקספרס סופר-פיזיולוגיים רמות של הורמון אנטי-mullerian מעורבת (AMH), חבר הפיכת superfamily בטא (TGFβ) גורם גידול זה הוכח להגבלת פוליקולרי17. השוואה של הזקיקים הזרעון השתלים מושתלים במשותף עם שליטה והתאים לבטא AMH מאמת את פעילות ביולוגית ואת העוצמה של המנהלים מהונדסים.
לסיכום, על ידי שיפור שתל הכדאיות ודיכוי גיוס מוקדמת של מאגר הזקיקים, גישה זו יכול להגדיל את הפרודוקטיביות של מושתלים אוטומטי רקמת השחלה בחולים שעברו שימור פוריות. יתר על כן, הפלטפורמה מבוססת ExEC מאפשרת חקירה ניסויית של ווסתי מולקולרית כי היו מעורבים בהתפתחות הזקיקים.

<table><tbody><tr><td>לייבוביץ' s L-15 בינוני</td><td>Gibco</td><td>11415064</td><td></td></tr><tr><td>אנטיביוטיקה-אנטי-פטריית</td><td>Gibco</td><td>15240062</td><td>אנטי-אנטי X100</td></tr><tr><td>סוכרוז</td><td>Sigma</td><td>S 1888</td><td></td></tr><tr><td>פיברינוגן</td><td>Sigma</td><td>F 8630</td><td>מפלזמה בקר</td></tr><tr><td>תרומבין</td><td>סיגמא</td><td>T 1063</td><td>מפלזמה אנושית</td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Sigma</td><td>D 2650</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Gibco</td><td>12491015</td><td></td></tr><tr><td>ניתוק תאי אנזים בינוני</td><td>Invitrogen</td><td>00-4555-56</td><td>סרט</td></tr><tr><td>פרפין מפלסטיק</td><td>Accutase Bemis NA</td><td></td><td>Parafilm M</td></tr><tr><td>סרט נייר כירורגי 2.5 ס"מ</td><td>3M</td><td>1530-1</td><td></td></tr><tr><td>סרט נייר כירורגי מיקרופור 1.25 ס"מ</td><td>3M</td><td>1530-0</td><td>מיקרופור</td></tr><tr><td>סרט כירורגי פלסטי מחורר 1.25 ס"מ</td><td>3M</td><td>1527-0</td><td>Transpore</td></tr><tr><td>מונופילמנט תפר נספג</td><td>Covidien</td><td>UM-203</td><td>Biosyn</td></tr><tr><td>תפר נספג קלוע</td><td>Covidien</td><td>GL-889</td><td>פוליסורב</td></tr><tr><td>תמיסת פובידון-יוד USP 10%</td> <td>Purdue Products</td><td>67618-153-01</td><td>Betadine Solution Swab Stick</td></tr><tr><td>Cryoviales</td><td>Nunc</td><td>377267</td><td>CryoTube</td></tr><tr><td>סטרילי עיניים חומר סיכה</td><td>Dechra</td><td>17033-211-38</td><td>Puralube</td></tr><tr><td>1.7 מ"ל צינור מיקרו-צנטריפוגה</td><td>דנוויל</td><td>C-2172</td> מערכת הרדמה <td>של אפנדורף</td></tr><tr><td></td><td>מערכת שולחן VetEquip</td><td>V-1 עם ניקוי</td><td></td></tr><tr><td>תאי אנדותל</td><td>Angiocrine Biosciences, Inc., סן דייגו, קליפורניה, ארה"ב</td><td></td><td>מבודד, מועבר עם E4-ORF-1 ותאי אנדותל מסומנים</td></tr><tr><td>כתם טריכרום</td><td>Sigma</td><td>HT15-1kt</td><td>Trichrome Stain Kit (Masson)</td></tr><tr><td>איזולקטין</td><td>Invitrogen</td><td>I32450</td><td>isolectin GS-IB4 מבית Griffonia simplicifolia, Alexa Fluor&trade; 647 מצומד</td></tr></tbody></table>

שיתוף השתלת רקמת השחלה האנושי עם תאי אנדותל מהונדסים: שילוב אסטרטגיה מבוסס תא מואצת זלוף עם מסירה ישירה paracrine

Co-transplantation of Human Ovarian Tissue with Engineered Endothelial Cells: A Cell-based Strategy Combining Accelerated Perfusion with Direct Paracrine Delivery

פוריות היא תופעת לוואי תכופים של כימותרפיה ו/או הקרנות, עבור חלק מהחולים, הקפאה קריוגנית של oocytes או עוברי הוא לא אופציה. כחלופה, מספר גדל והולך של חולים אלו בוחרים cryopreserve רקמות השחלה עבור בשתל בעקבות התאוששות, הפוגה. למרות שיפורים בתוצאות בקרב חולים שעברו אוטומטי-השתלת רקמת השחלה cryopreserved, revascularization יעיל של רקמות המושתל נשאר ולקידמה. כדי להמתיק איסכמיה ובכך לשפר את התוצאות בחולים העוברים השתלת אוטומטי, פיתחנו כלי הדם מבוססת תא אסטרטגיה האצת זלוף רקמת השחלה. נתאר שיטת שיתוף השתלת תאי אנדותל אקסוגני (המנהלים) עם cryopreserved רקמות השחלה במודל xenograft של עכברים. אנחנו מרחיבים גישה זו להעסיק. את המנהלים כי יש מהונדס לבטא צורונים הורמון אנטי-mullerian מעורבת (AMH), ובכך מאפשר paracrine מתמשכת איתות של הקלט שתלי השחלות. השתלת שיתוף עם המנהלים גדל נפח הזקיקים ופיתוח זקיק antral משופר, המנהלים לבטא AMH קידום השמירה של זקיקי הקדמוני השבתה הדרגתית. אסטרטגיה משולבת זו עשויה להיות כלי שימושי מקלים איסכמיה להתכוונן הפעלה הזקיקים בהקשר של שימור פוריות ו/או עקרות בכללותו.

כדי לקבוע אם השתלת שיתוף של המנהלים מספק לתועלת רקמות המטופלים, המופשרים רצועות קורטיקלית השחלות היו מחולקים לחתיכות בגודל שווה, engrafted דו צדדיים לתוך פגועה, הנהון scid גמא (NSG), עכברים. בצד השני מוטבע clot פיברין לבד (לא ECs), את המנהלים המכיל אחרים (איור 1 א'), כל עכבר שימש את שליטתה. המנהלים התקבלו באמצעות בידוד של אנדותל העיקרי של חוטי חבל הטבור אנושי וטיפול הבאים עם ג'ין Adenoviral פרגמנט E4-ORF1, כפי שתואר לעיל22,<...

עבור חלק מהחולים, האפשרות היחידה לשימור פוריות היא הקפאה קריוגנית רקמת השחלה. למרבה הצער, שאיחרו revascularization מערערת הכדאיות הזקיקים. כאן, אנו מציגים פרוטוקול שיתוף להשתיל רקמה אנושית השחלות עם תאי אנדותל עבור זלוף ניצול כאסטרטגיה מבוססת תא שילוב מואצת עם משלוח ישיר paracrine של מולקולות ביו...

שיתוף השתלת רקמת השחלה האנושי עם תאי אנדותל מהונדסים: שילוב אסטרטגיה מבוסס תא מואצת זלוף עם מסירה ישירה Paracrine

Infertility is a frequent side effect of chemotherapy and/or radiotherapy and for some patients, cryopreservation of oocytes or embryos is not an option. ...

המטרה הכוללת של פרוטוקול זה היא לשמר רקמת שחלה אנושית בהקפאה בשילוב עם תאי אנדותל מהונדסים המאיצים זלוף מחדש ומספקים גירוי פרקריני המווסת את הפעלת הזקיקים בתוך השתל. שיטה זו מספקת אמצעי מבוסס תאים לשיפור הכדאיות לאחר ההשתלה של רקמת שחלה שמורה בהקפאה ובאופן רחב יותר, מבססת מערכת מודל חזקה לחקירת ויסות מולקולרי של זקיקים אנושיים. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא משתמשת בכלי יחיד של תאי אנדותל כדי להפחית איסכמיה ולספק מקור מתמשך של גורמים מופרשים להשתלת הרקמה.אז שיטה זו מספקת תועלת גלובלית לכדאיות הרקמות. זה יכול גם לספק תובנה לגבי מווסתים מולקולריים שהיו מעורבים בהתפתחות זקיקים. כדי ליצור קריש פיברין, עבדו במהירות והוסיפו 360 מיקרוליטר של מאגר HEPES ל-200 מיקרוליטר של תמיסת מלאי הפיברינוגן.פיפטה בעדינות כדי לערבב ולהשאיר את הצינור על קרח. בצינור המיקרופוגה השני, הכינו תמיסת עבודה של תרומבין על ידי הוספת 148.7 מיקרוליטר DMEM ל-50 מיקרוליטר של תמיסת מלאי תרומבין. פיפטה בעדינות לערבב.לאחר מכן הוסף 1.3 מיקרוליטר של שומה אחת לליטר סידן כלורי. פיפטה בעדינות כדי לערבב ולשמור את הדגימה על קרח. באמצעות מדיום ניתוק תאי האנזים Accutase, נתק תאי אנדותל מהונדסים שהוכנו בעבר מהצלחת והעביר אותם לצינור מיקרופוגה שלישי.לאחר מכן, סובב את התאים. לאחר מכן, בעזרת המוציטומטר וזכוכית מכוסה, ספרו את התאים. כדי לחשב את מספר התאים הדרושים לחריטה, המר שטח של פי 20,000 של רקמת השחלה למילימטר בריבוע באמצעות סרגל למדידת המידות.הכפל את השטח ב-20,000 כדי לקבוע את מספר התאים הדרושים לחריטה. סובב את התאים הנדרשים. והשתמש ב-DMEM כדי להשעות מחדש את הגלולה לנפח כולל של 16.8 מיקרוליטר.שמור את מתלה התא על קרח. לאחר מכן, הניחו חתיכת רקמת שחלה על ספוג גזה סטרילי למשך מספר שניות כדי לייבש אותה. לאחר מכן העבירו את הרקמה לסרט פרפין מפלסטיק שהוכן בעבר בצלחת פטרי בגודל 50 מילימטר.הוסף 39.2 מיקרוליטר מתמיסת הפיברינוגן לתרחיף התאים המוכן. מערבבים על ידי פיפטינג עדין, ושומרים את המתלה על קרח. לאחר מכן עובדים במהירות, מוסיפים 14 מיקרוליטר מתמיסת התרומבין לצינור ופיפטה בעדינות פעם אחת לערבוב.פיפטה את התערובת על גבי רקמת השחלה בצורת טיפה מוארכת. דגרו את צלחת הפטרי עם הקריש בחום של 37 מעלות צלזיוס. עבוד במהירות לאחר שהוספת את תמיסת התרומבין לתרחיף תאי הפיברינוגן.סנכרון ההכנה העתידית בניתוח הוא אתגר וייתכן שיהיה זה נבון לבצע ריצת תרגול לפני הוצאת רקמה אנושית יקרה. לאחר הרדמת נקבת עכבר ה-NSG בת 10 עד 14 שבועות, והכנתה לניתוח על פי פרוטוקול הטקסט, יש לחמם את החיה ולפקח על טמפרטורת הגוף לאורך כל ההליך. בעזרת מקל ספוגית יוד פובידון, נקו את האזור הקצוץ ולאחר מכן השתמשו באלכוהול סטרילי כדי לנגב אותו.לאחר מכן, הניחו טיפה של משחה וטרינרית סטרילית לעיניים על כל אחת מעיני העכבר כדי להגן עליהן מפני התייבשות ונזק לקרנית. לאחר ביצוע כריתת שחלות דו-צדדית על פי פרוטוקול הטקסט, יש להזריק בופרנורפין תת עורי. לאחר מכן בצע חתך אופקי בפאשיה מעל הגלוטאוס מקסימוס באורך המתאים למידות הקריש.צור כיס בתוך המרחב הווירטואלי הזה על ידי פתיחת המספריים מתחת לפאשיה. הרם חתיכה אחת של רקמת קליפת המוח שהוכנה בעבר והניח אותה בכיס. לאחר מכן השתמש בשישה תפרים נספגים קלועים O כדי לתפור את הפאשיה לפני שתחזור על ההשתלה המשותפת בצד הנגדי לרוחב.סגור את דופן הגב עם ארבעה תפרים נספגים מונופילמנט O בתפרים קטועים פשוטים. יש להזריק לידוקאין תת עורי במקום החתך. לאחר מכן השתמש בתכשיר אלכוהול סטרילי כדי לנקות את העור ולבצע טיפול לאחר הניתוח בהתאם לפרוטוקול הטקסט.כפי שניתן לראות כאן, שבועיים לאחר ההשתלה הדו-צדדית של E4-ORF1 טיפל בתאי אנדותל וריד טבורי אנושי לעכברים נקבות NSG, כלי דם מועברים תפקודית שנוצרו מ-GFP שסומנו ECs אקסוגניים או ExECs בממשק של רקמת המארח והשתל. ExECs יצרו כלי דם פונקציונליים כאשר הם מושתלים יחד עם רקמת שחלה בחתיכות קליפת המוח שהושתלו במשותף עם העכבר או ExECs אנושיים, מגדילים את מספר הזקיקים השורדים ביחס לשתלי הביקורת. עלייה זו בהתפתחות הזקיקים הייתה קשורה לירידה באזור הפיברוטי בשתלים בסיוע ExEC.ערכי השטח הפיברוטיים הסופיים חושבו עבור כל שתל כממוצע של שלושה חלקים שנותחו. חשוב לציין, שתלים שהושתלו במשותף עם פיברובלסטים של עורלה אנושית הראו כדאיות רקמה ירודה ומעט זקיקים יחסית. 14 שבועות לאחר ההשתלה, עכברים היו מגורים עם מנוטרופינים.והתקדמות צמיחת הזקיקים נוטרה באמצעות MRI. זקיקים מתפתחים נרשמו הן בשתלים בסיוע בקרה והן בשתלים בסיוע ExEC. עם זאת, זקיקים גדולים יותר ויותר הבחינו בשתלים בסיוע ExEC.בהשוואה לזקיקים אנטרליים שמקורם ברקמה של אותה מטופלת, שכבת תאי הגרנולוזה בזקיק המתקדם יותר הראתה ביטוי מוגבר של סמני הביוץ CD44 ו-HABP1, כמו גם מוות מוגבר של תאים והפחתת התפשטות. לאחר צפייה בסרטון זה, תבינו כיצד לבצע השתלה משותפת של רקמת שחלה שמורה בהקפאה עם תאי אנדותל בקריש פיברין. וברגע שתשלטו בפרוטוקול, אתם אמורים להיות מסוגלים להשלים את הפרוטוקול הזה בפחות משעה.בהתבסס על גישה זו, ניתן להנדס תאי אנדותל כך שיבטאו כל שילוב של גורמים מופרשים, ובכך לאפשר חקירה של מסלולי איתות שעשויים להיות רלוונטיים לשימור פוריות, זקיקים ו/או השתלת רקמות.

co-transplantation-human-ovarian-tissue-with-engineered-endothelial

Research

JoVE Journal

Bioengineering

הנדסה ביולוגית

שיטה טיטניום זריעת דם biomaterials ליצור קשר עם תאים עצמיים ו biocompatibility בדיקות מתואר. שיטה זו משתמשת ובתאים אנדותל צינורות טיטניום, זורעים בתוך דקות של ניתוח ההשתלה לתוך חזירי venae cavae. טכניקה זו ניתנת להתאמה מכשירים רבים אחרים ביו מושתלת.

עצמיים אבי האנדותל Cell-מתזמן טכנולוגיה בדיקה biocompatibility עבור התקנים לב וכלי דם במודל חיה גדולה

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לייצר שתלי כלי רקמה מהונדסת, כי הם פונקציונליים להשתלה לעכברים על ידי זריעה כפולה תאי גזע pluripotent מושרה באופן חלקי (PiPSC) - נגזר תאי שריר חלק וPiPSC - תאי האנדותל נגזרו על bioreactor פיגום כלי decellularized.

דור והארכת כלי רקמות מהונדסות במודל עכבר

פרוטוקול זה מאפשר יצירה ואפיון אמינים של תאי אנדותל צמיחת דם (BOECs) מנפח קטן של דם היקפי בוגר. BOECs יכולים לשמש כתחליף לתאי אנדותל מחולים עם הפרעות בכלי הדם וכמצע ליצירת תאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים.

דור והתרבות של דם תולדה תאי אנדותל מאדם דם היקפי

אנו מתארים assay השתלת כרית תחביב השחלות מתאים מחקרים של אפיתלים נורמלי טרנספורמציה של מערכת הרבייה הנשית. כרית שומן העכבר מאפשרת השתלה של שברי רקמות גדולים, נגיש בקלות לניתוח והדמיה, ומספקת את הסביבה הטבעית הטובה ביותר עבור רקמות ממוצא Müllerian.

השתלת לתוך כרית עכבר השחלות שומן

שיטה זו מתארת את התרבות של תאים מבוססי iPSC-נגזרות כמו 40 מיקרוכלי תלת-ממד של מיקרו בפלטפורמת microfluאידיג מתוקננת. פלטפורמה זו מאפשרת לימוד של לבלוב אנגיוגנטית מונחה הדרגתי ב-3D, כולל השקה וייצוב של נבטי האנגיוגנטי באופן מדרגי ותפוקה גבוהה.

שיטת הלימוד הסטנדרטית והמדמדית למחקר בלבלוב אנגיוגנטית בתלת-ממד של התאים הנגזרים מתוך מבחנה

תאי גזע של סרטן השחלות (OCSC) אחראים על התחלת סרטן, הישנות, עמידות טיפולית וגרורות. נישת כלי הדם OCSC נחשבת לקידום התחדשות עצמית של OCSCs, מה שמוביל לכימורסטיות. פרוטוקול זה מספק את הבסיס להקמת מודל נישה כלי דם OCSC הניתן לשחזור במבחנה.

הערכת התכונות האנגיוגנטיות של תאים דמויי גזע של סרטן השחלות באמצעות מערכת תרבית קו-תרבית תלת-ממדית, NICO-1

אנו מציגים פרוטוקול לשימוש במערכת זלוף סנגווינית נורמותרמית ex vivo להעברת טיפולים לאלוגרפט לב שלם במודל השתלת לב הטרוטופית חזירית.

פרוטוקול השתלת לב הטרוטופית חזירית להעברת טיפולים לאלוגרפט לבבי

במאמר זה, אנו מתארים פרוטוקול לפיתוח מודל קסנוגרפטינג של קרום כוריואלנטואי אפרוח (CAM) עבור רקמת שחלה אנושית ומדגימים את יעילות הטכניקה, מסגרת הזמן של רה-וסקולריזציה של השתל ויכולת הקיום של הרקמה על פני תקופת השתלה של 6 ימים.

מודל הממברנה הכוריאואלנטואית של אפרוח (CAM) ככלי לחקר השתלת רקמת שחלה

פרוטוקול זה מתאר הקמת אורגנואידים תלת-ממדיים (תלת-ממדיים) של רקמה מתאי אפיתל ראשוניים של פני השחלות האנושיות (hOSE). הפרוטוקול כולל בידוד של hOSE מהשחלות הטריות שנאספו, הרחבה תאית של hOSE, הליכי הפשרה בהקפאה וגזירת אורגנואידים. Immunofluorescence, ניתוח כמותי, והצגת השירות כפלטפורמת סינון כלולים.

אורגנואידים אפיתל פני השטח של השחלות האנושיות כפלטפורמה לחקר התחדשות רקמות

מאמר זה מתאר כיצד ליצור ריאות עכבר מהונדסות ביולוגית באמצעות שיטות דה-סלולריזציה ורה-סלולריזציה. הוא גם מפרט השתלת ריאות אורתוטופית לאחר מכן.

השתלת ריאות מהונדסות ביולוגית באמצעות ריאות עכבר נטולות תאים ותאי אנדותל אנושיים ראשוניים

כאן, מוצג פרוטוקול להשתלת שתל כלי דם מהונדס רקמות בעורק הצוואר של העכבר בטכניקת השרוול, המספק מודל בעל חיים מתאים לחקירת מנגנוני התחדשות רקמות כלי הדם.

השתלת שתל כלי דם מהונדס רקמות בעורק הצוואר של העכבר בטכניקת שרוול

חקור שתלת רקמת שחלה מוקפאת עם תאי אנדותל מהונדסים לשיפור הישרדות הזקיקים. השיטה משלבת אסטרטגיית תא מואצת זלוף עם מסירה פרקרינית ישירה לחקר ביולוגיה רבייה.

שיתוף השתלת רקמת השחלה האנושי עם תאי אנדותל מהונדסים: שילוב אסטרטגיה מבוסס תא מואצת זלוף עם מסירה ישירה Paracrine

גלה סרטונים נוספים