Name: ננו-חלקיק Retroductal הזרקה אל בלוטת Submandibular מאתר (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-05-03T14:15:00.000+00:00
Duration: 7 min 45 s
Description: למדו הזרקת ננו-חלקיקים רטרודוקטלית לבלוטת Submandibular בעכברים. שיטה זו מאפשרת מסירה מקומית של תרופות תוך עקיפת מחזור הדם, מה שמפחית תופעות לוואי ומסייע בחקר ביולוגיית בלוטות הרוק ובפיתוח טיפולים חדשים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר דיווח בפרסום זה נתמך על ידי מחקר ואסטתיים (NIDCR) את נבחרת המכון של שיניים ו של המכון הלאומי לסרטן (NCI) של מכוני הבריאות הלאומיים תחת פרס מספר R56 DE025098, UG3 DE027695 ו F30 CA206296. התוכן הוא אך ורק באחריות המחברים, ואינם מייצגים בהכרח את הנופים הרשמי של מכוני הבריאות הלאומיים. עבודה זו נתמכה גם על ידי 1206219 DMR של ה-NSF וחדשנות IADR את פרס טיפול אוראלי (2016).
ברצוננו להודות ג'יין Gavrity על הסיוע בביצוע ניסויים IVIS. ברצוננו להודות לקרן בנטלי שלה קלט וסיוע בביצוע EM. ברצוננו להודות וונג פיי-לון שלו בסיוע IHC. ברצוננו להודות אינגלס מתיו על עזרתו איור הכנה. ברצוננו להודות ד ר איליין Smolock, אמילי וו על קריאה ביקורתית של כתב היד הזה.

כל ויוו ההליכים המתוארים להלן אושרו על ידי ועדת האוניברסיטה חיה משאבים ב אוניברסיטת רוצ'סטר, רוצ'סטר, ניו יורק.
1. הכנה
<ol><li>באמצעות צינורות קטטר תוך-גולגולתי 32G עם שיבוץ תיל, חותכים 3 ס מ של הצנרת כדי ליצור קצה משופע, כ- 45° עד לציר הארוך. לאשר החוט הוא לפחות 1 ס מ לאורך צינור יותר.</li>
	<li>לטעון µL 50 PSMA nanoparticle פתרון (איור 1), או חומר אחר זריקה, לתוך מזרק המילטון. כדי להקטין את ההסתברות של בארוטראומה במהלך ההזרקה, לצרף את הצנרור קטטר, עם stylet הסיר, כדי המזרק ובכבד נפח מת.</li>
	<li>לבדוק את הפתרון הזרקת כדי להבטיח ש-nanoparticle באופן מלא solvated כדי למנוע שיבוש ductal בעקבות המינהל.</li>
	<li>להכין פתרון אטרופין-0.1 מ"ג/מ"ל. הערה: מכיוון אטרופין הוא רגיש אור ופוגם לאורך זמן, פתרון זה צריך להיות את היום של הזרקת, מוגן מפני אור עד מנוהל.</li>
</ol>2. גישה והצגה של נקודת כניסה Ductal
<ol><li>שוקלים C57/BL6 עכברים באמצעות איזון האנליטי.</li>
	<li>באמצעות מזרק 0.5 mL עם 29G x ½" מחט, עזים ומתנגד עכברים עם פתרון סטרילי מלוחים intraperitoneally מוזרק של 100 מ"ג/ק"ג קטמין ו- 10 מ"ג/ק"ג חריגות השירותים הווטרינריים. המשך לשלב הבא כאשר העכבר אינו מגיב לגירויים, אשר בדרך כלל מתרחשת בתוך 5-10 דקות לאחר ההזרקה. הערה: הליך זה יכול גם להתבצע תחת איזופלוריין, אך ידרוש קונוס האף מותאם אישית המאפשר גישה אל חלל הפה.</li>
	<li>למניעת יובש במהלך ההליך, להחיל סיכה כדי העיניים והניחו העכבר במצב של שכיבה על שלב מותאם אישית. הערה: כדי לשמור על תנאים מתאימים לניתוח אינטרה-אוראלי, כלים צריך להיות מחוטא או לעקר לפני כל שימוש.</li>
	<li>פתח את חלל הפה נאבטח את החותכות בלסת העליונה מעל קרן מתכת, והשתמש גומייה כדי להחיל המתח כלפי מטה מאחורי החותכות mandibular (איור 2 א).</li>
	<li>יישר את העכבר מתחת למיקרוסקופ ויבתר כזה כי הבסיס של הלסת הוא מדמיין.</li>
	<li>כדי להרחיב את הפתח, השתמש מנהג, מעוקל המדחק פלדה כדי להחיל את המתח באופן דו-צדדי על רירית buccal.</li>
	<li>כדי להמחיש את submandibular ואדומות סטיגמטה והיו שלמים, והרם בעדינות את הלשון מן הרצפה של הפה באמצעות מלקחיים בוטה. הערה: ואדומות סטיגמטה והיו שלמים תופיע שתי בליטות חיוור מתחת ללשון (איור 2B).</li>
	<li>כדי להקל על ויזואליזציה של מניפולציה נוספת בתוך חלל הפה, במקום כותנה בין הלשון buccal רירית.</li>
</ol>3. ductal תעלות והמיקום קו
<ol><li>שימוש בסדר, מלקחיים מעוקל, לאחוז אבובים קטטר עם שיבוץ חוט. עבור בקרת ידניים האופטימלי במהלך תעלות, יישר את הצנרור עם העקמומיות של המלקחיים (איור 3 א).</li>
	<li>באמצעות המיקרוסקופ ויבתר, להזיז את המלקחיים חוט לתוך שדה הראייה. הערה: החוט צריך להיות מהעורקים הצנרת.</li>
	<li>לחץ על בעדינות לתוך הבסיס של אחד papilla submandibular באמצעות הכבל הזחה לייצר קטנים שטחיים, הרירית ניקוב (0.076 מ"מ קוטר) שיאפשרו כניסה מאוחרת יותר של הצנרת קטטר (0.25 מ"מ קוטר). אם הוא נתקל בהתנגדות, לחתוך טריים משופע טיפים על אבובים והן שיבוץ חוט עם מספריים ויבתר חדות.</li>
	<li>בעקבות הכניסה, למשוך את stylet ואשר, באמצעות המיקרוסקופ ויבתר, הנוכחות של רוק החדירה. להימנע התנועה כוחני או פתאומי (גמילה או ההכנסה) של stylet העלול לגרום לדימום או לסכן את שלמות ductal.</li>
	<li>. משכי את stylet בתוך הצנרת (איור 3B).</li>
	<li>כדי להבטיח כי הזרקת אבובים יתאימו לתוך צינור וורטון פתיחת, הכנס אבובים המכיל את stylet כמדריך נוקשה לתוך הניקוב שבוצעה בעבר (איור 2 C). הערה: אם לא לבצע במהירות, נפיחות מקומית עשויה למנוע הכניסה מחדש.</li>
	<li>כדי למנוע לחץ אחורי של חסימה ductal ממושך, למשוך את הצנרור. בדוק כדי לוודא כי פתיחה, גלוי תחת מיקרוסקופ, ניתן לראות את papilla נקראות. אם דימום גלוי מתרחשת, להסיר את stylet, reattempt מ שלב 3.2 על submandibular מנוגדות ואדומות סטיגמטה והיו שלמים.</li>
	<li>מבלי להזיז את העכבר, לנהל הזרקת בקרום הבטן של 1 מ"ג/ק"ג אטרופין פתרון, להקטנת ריור במהלך ההליך. המתן 5-10 דקות.</li>
	<li>לאחוז בקצה של הצנרת מזרק, והכנס לתוך כגדולים באמצעות המיקרוסקופ ויבתר (איור 3C). אם הוא נתקל בהתנגדות, חותכים קצה משופע טריים אבובים, יכפיל.</li>
	<li>לאחר הצנרת במקום בתוך papilla submandibular, באיטיות, 3-5 מ מ לתוך התעלה. שחרור הצנרת של המלקחיים.</li>
	<li>כדי לשפר את החותם בין הצנרת של papilla submandibular, יבשים הממשק ב- סופג בעדינות עם גזה עבור 1 דקות.</li>
	<li>בדוק כדי לוודא המיקום של הצנרת לא השתנה במהלך הייבוש.</li>
</ol>4. הזרקה
<ol><li>מזריקים חומר בקצב של 10 µL לדקה בדוק כדי לאשר העכבר נשאר מסומם לא מראה סימנים של מצוקה (איור דו-ממדי). הערה: זריקות של µL 15-50 נסבלות היטב. הזרקה של אחסון גדולים יותר יכולים לגרום בארוטראומה.</li>
	<li>בעקבות הזריקה, לשמור על מזרק לחץ על 5 דקות כדי לשפר את השמירה של חומר בתוך צינור וורטון SMG (איור 4). בדוק את papilla submandibular מעת לעת על מנת להבטיח כי צינורות לא תצא ductal כגדולים.</li>
	<li>בעזרת מלקחיים בסדר, לאחוז ולסגת בעדינות לאורך צינור submandibular ואדומות סטיגמטה והיו שלמים. הערה: זה נורמלי להתבונן קצת יציאה נוזלים מן ואדומות סטיגמטה והיו שלמים.</li>
	<li>הסר את המדחק וכותנה חלל הפה לפני הזזת העכבר מן הבמה. הערה: החיה לא אמורים להישאר ללא השגחה עד זה שהכרתו מספיק כדי לשמור על recumbency בחזה ובצלעות. יתר על כן, ודא כי העכבר לא שוכן עם אחרים עכברים עד החלים לחלוטין.</li>
</ol>5. אימות וניתוח
הערה: יישום ויוו מערכת הדמיה (IVIS) ניתן להשתמש כדי להעריך את השמירה של חלקיקים fluorescently שכותרתו לאחר ההזרקה (כפי שמוצג h 1 ו- 24 שעות לאחר ההזרקה באיור5).
<ol><li>כדאי להמחיש ניאון האות בתוך SMG דרך העור, הסר את הפרווה הגחון המכסים את SMGs גילוח או באמצעות דפילציה כימי. הערה: בעקבות המתת חסד, SMG רקמות ניתן גם לקצור קבוע (לילה ב- 4% paraformaldehyde), צבעונית באמצעות אימונוהיסטוכימיה לאשר ההתמדה של NP fluorescently שכותרתו יום אחד לאחר ההזרקה (איור 6).</li>
</ol>

<ol><li>Miranda-Rius, J., Brunet-Llobet, L., Lahor-Soler, E., Farre, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salivary+Secretory+Disorders%2C+Inducing+Drugs%2C+and+Clinical+Management%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+Of+Medical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Salivary Secretory Disorders, Inducing Drugs, and Clinical Management.</a> International Journal Of Medical Sciences. 12 (10), 811-824 (2015).</li>
<li>Acauan, M. D., Figueiredo, M. A. Z., Cherubini, K., Gomes, A. P. N., Salum, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiotherapy-induced+salivary+dysfunction%3A+Structural+changes%2C+pathogenetic+mechanisms+and+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Oral+Biology%22%5BJournal%5D)">Radiotherapy-induced salivary dysfunction: Structural changes, pathogenetic mechanisms and therapies.</a> Archives of Oral Biology. 60 (12), 1802-1810 (2015).</li>
<li>Dirix, P., Nuyts, S., Vander Poorten, V., Delaere, P., Van den Bogaert, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+xerostomia+after+radiotherapy+on+quality+of+life%5BTitle%5D)+AND+%22Supportive+Care+in+Cancer%22%5BJournal%5D)">The influence of xerostomia after radiotherapy on quality of life.</a> Supportive Care in Cancer. 16 (2), 171-179 (2008).</li>
<li>Vissink, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+management+of+salivary+gland+hypofunction+and+xerostomia+in+head-and-neck+cancer+patients%3A+successes+and+barriers%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Radiation+Oncology+Biology+Physics%22%5BJournal%5D)">Clinical management of salivary gland hypofunction and xerostomia in head-and-neck cancer patients: successes and barriers.</a> International Journal of Radiation Oncology Biology Physics. 78 (4), 983-991 (2010).</li>
<li>Delporte, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+fluid+secretion+after+adenoviral-mediated+transfer+of+the+aquaporin-1+cDNA+to+irradiated+rat+salivary+glands%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Increased fluid secretion after adenoviral-mediated transfer of the aquaporin-1 cDNA to irradiated rat salivary glands.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 94 (7), 3268-3273 (1997).</li>
<li>Samuni, Y., Baum, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+delivery+in+salivary+glands%3A+from+the+bench+to+the+clinic%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimica+et+Biophysica+Acta%22%5BJournal%5D)">Gene delivery in salivary glands: from the bench to the clinic.</a> Biochimica et Biophysica Acta. 1812 (11), 1515-1521 (2011).</li>
<li>Beahm, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+approaches+to+the+submandibular+gland%3A+A+review+of+literature%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Surgical approaches to the submandibular gland: A review of literature.</a> International Journal of Surgery. 7 (6), 503-509 (2009).</li>
<li>Zheng, C., Shinomiya, T., Goldsmith, C. M., Di Pasquale, G., Baum, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Convenient+and+reproducible+in+vivo+gene+transfer+to+mouse+parotid+glands%5BTitle%5D)+AND+%22Oral+diseases%22%5BJournal%5D)">Convenient and reproducible in vivo gene transfer to mouse parotid glands.</a> Oral diseases. 17 (1), 77-82 (2011).</li>
<li>Zheng, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+Radiation-Induced+Salivary+Hypofunction+Following+hKGF+Gene+Delivery+to+Murine+Submandibular+Glands%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Prevention of Radiation-Induced Salivary Hypofunction Following hKGF Gene Delivery to Murine Submandibular Glands.</a> Clinical Cancer Research. 17 (9), 2842-2851 (2011).</li>
<li>Okazaki, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acceleration+of+rat+salivary+gland+tissue+repair+by+basic+fibroblast+growth+factor%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Oral+Biology%22%5BJournal%5D)">Acceleration of rat salivary gland tissue repair by basic fibroblast growth factor.</a> Archives of Oral Biology. 45 (10), 911-919 (2000).</li>
<li>Arany, S., Benoit, D. S., Dewhurst, S., Ovitt, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanoparticle-mediated+gene+silencing+confers+radioprotection+to+salivary+glands+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy%22%5BJournal%5D)">Nanoparticle-mediated gene silencing confers radioprotection to salivary glands in vivo.</a> Molecular Therapy. 21 (6), 1182-1194 (2013).</li>
<li>Cotrim, A. P., Sowers, A., Mitchell, J. B., Baum, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+irradiation-induced+salivary+hypofunction+by+microvessel+protection+in+mouse+salivary+glands%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy%22%5BJournal%5D)">Prevention of irradiation-induced salivary hypofunction by microvessel protection in mouse salivary glands.</a> Molecular Therapy. 15 (12), 2101-2106 (2007).</li>
<li>Redman, R. S., Ball, W. D., Mezey, E., Key, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dispersed+donor+salivary+gland+cells+are+widely+distributed+in+the+recipient+gland+when+infused+up+the+ductal+tree%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnic+%26+Histochemistry%22%5BJournal%5D)">Dispersed donor salivary gland cells are widely distributed in the recipient gland when infused up the ductal tree.</a> Biotechnic & Histochemistry. 84 (6), 253-260 (2009).</li>
<li>Grundmann, O., Fillinger, J. L., Victory, K. R., Burd, R., Limesand, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restoration+of+radiation+therapy-induced+salivary+gland+dysfunction+in+mice+by+post+therapy+IGF-1+administration%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">Restoration of radiation therapy-induced salivary gland dysfunction in mice by post therapy IGF-1 administration.</a> BMC Cancer. 10, 417-417 (2010).</li>
<li>Limesand, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin-Like+Growth+Factor-1+Preserves+Salivary+Gland+Function+After+Fractionated+Radiation%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Radiation+Oncology+Biology+Physics%22%5BJournal%5D)">Insulin-Like Growth Factor-1 Preserves Salivary Gland Function After Fractionated Radiation.</a> International Journal of Radiation Oncology Biology Physics. 78 (2), 579-586 (2010).</li>
<li>Marmary, Y., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26759233">Radiation-induced loss of salivary gland function is driven by cellular senescence and prevented by IL-6 modulation.</a> Cancer Research. , (2016).</li>
<li>Baum, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+responses+to+adenoviral-mediated+transfer+of+the+aquaporin-1+cDNA+for+radiation-induced+salivary+hypofunction%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Early responses to adenoviral-mediated transfer of the aquaporin-1 cDNA for radiation-induced salivary hypofunction.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109 (47), 19403-19407 (2012).</li>
<li>Arany, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pro-apoptotic+gene+knockdown+mediated+by+nanocomplexed+siRNA+reduces+radiation+damage+in+primary+salivary+gland+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cellular+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Pro-apoptotic gene knockdown mediated by nanocomplexed siRNA reduces radiation damage in primary salivary gland cultures.</a> Journal of Cellular Biochemistry. 113 (6), 1955-1965 (2012).</li>
<li>Benoit, D. S. W., Henry, S. M., Shubin, A. D., Hoffman, A. S., Stayton, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((pH-responsive+polymeric+siRNA+carriers+sensitize+multidrug+resistant+ovarian+cancer+cells+to+doxorubicin+via+knockdown+of+polo-like+kinase+1%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">pH-responsive polymeric siRNA carriers sensitize multidrug resistant ovarian cancer cells to doxorubicin via knockdown of polo-like kinase 1.</a> Molecular pharmaceutics. 7 (2), 442-455 (2010).</li>
<li>Malcolm, D. W., Varghese, J. J., Sorrells, J. E., Ovitt, C. E., Benoit, D. S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Effects+of+Biological+Fluids+on+Colloidal+Stability+and+siRNA+Delivery+of+a+pH-Responsive+Micellar+Nanoparticle+Delivery+System%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">The Effects of Biological Fluids on Colloidal Stability and siRNA Delivery of a pH-Responsive Micellar Nanoparticle Delivery System.</a> ACS Nano. , (2017).</li>
<li>Baranello, M. P., Bauer, L., Benoit, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Poly%28styrene-alt-maleic+anhydride%29-based+diblock+copolymer+micelles+exhibit+versatile+hydrophobic+drug+loading%2C+drug-dependent+release%2C+and+internalization+by+multidrug+resistant+ovarian+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biomacromolecules%22%5BJournal%5D)">Poly(styrene-alt-maleic anhydride)-based diblock copolymer micelles exhibit versatile hydrophobic drug loading, drug-dependent release, and internalization by multidrug resistant ovarian cancer cells.</a> Biomacromolecules. 15 (7), 2629-2641 (2014).</li>
<li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fracture-Targeted+Delivery+of+%CE%B2-Catenin+Agonists+via+Peptide-Functionalized+Nanoparticles+Augments+Fracture+Healing%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Fracture-Targeted Delivery of β-Catenin Agonists via Peptide-Functionalized Nanoparticles Augments Fracture Healing.</a> ACS Nano. 11 (9), 9445-9458 (2017).</li>
<li>Baranello, M. P., Bauer, L., Jordan, C. T., Benoit, D. S. W. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s12195-015-0391-x">Micelle Delivery of Parthenolide to Acute Myeloid Leukemia Cells.</a> Cellular and Molecular Bioengineering. 8 (3), 455-470 (2015).</li>
<li>Kuriki, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cannulation+of+the+Mouse+Submandibular+Salivary+Gland+via+the+Wharton%27s+Duct%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Cannulation of the Mouse Submandibular Salivary Gland via the Wharton's Duct.</a> Journal of Visualized Experiments. (51), e3074(2011).</li>
<li>Nair, R. P., Zheng, C., Sunavala-Dossabhoy, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retroductal+Submandibular+Gland+Instillation+and+Localized+Fractionated+Irradiation+in+a+Rat+Model+of+Salivary+Hypofunction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Retroductal Submandibular Gland Instillation and Localized Fractionated Irradiation in a Rat Model of Salivary Hypofunction.</a> Journal of Visualized Experiments. (110), (2016).</li>
<li>Wang, Y., Malcolm, D. W., Benoit, D. S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+and+sustained+delivery+of+siRNA%2FNPs+from+hydrogels+expedites+bone+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Controlled and sustained delivery of siRNA/NPs from hydrogels expedites bone fracture healing.</a> Biomaterials. 139 (Supplement C), 127-138 (2017).</li>
<li>Hoffman, M. D., Van Hove, A. H., Benoit, D. S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Degradable+hydrogels+for+spatiotemporal+control+of+mesenchymal+stem+cells+localized+at+decellularized+bone+allografts%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterialia%22%5BJournal%5D)">Degradable hydrogels for spatiotemporal control of mesenchymal stem cells localized at decellularized bone allografts.</a> Acta Biomaterialia. 10 (8), 3431-3441 (2014).</li>
<li>Nguyen, C. Q., Yin, H., Lee, B. H., Chiorini, J. A., Peck, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL17%3A+potential+therapeutic+target+in+Sjogren%27s+syndrome+using+adenovirus-mediated+gene+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Investigation%22%5BJournal%5D)">IL17: potential therapeutic target in Sjogren's syndrome using adenovirus-mediated gene transfer.</a> Laboratory Investigation. 91 (1), 54-62 (2011).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

הזרקת Retroductal חיוני למסירה תרופות המותאמות לשפות אחרות בלוטת הרוק. טכניקה זו יש יישומים בהקרנת סוכני טיפולית עבור תנאים כולל תסמונת דאון Sjogren ו ריה9,10,28. משלוח סמים ישירות לתוך SMG באמצעות הזרקת retroductal מספק יתרון מפתח על הממשל מערכתית הפוטנציאל להפחתת חופש-יעד אפקטים, כולל הפעלת המערכת החיסונית11. היכולת להגדיל את משלוח סמים מקומי, ללא הצטברות של הרקמות הסובבות ניתן גם להפעיל בדיקה טיפולית ב...

תפקוד לקוי של בלוטת הרוק יש חבלות מסיבות רבות, כולל תסמונת סיוגרן, אובדן מתווכת אימונית של רקמה תפקודית הפרשה, קרינה הנגרמת hyposalivation (ריה), sequella משותפת של ראש וצוואר לסרטן הקרנות1. אובדן התפקוד הרוק עקב תנאי או predisposes יחידים זיהום אוראלי ומערכתית, עששת, בעיות בתפקוד במערכת העיכול ולשלם, ליקויי דיבור ודיכאון1,2,3. כתוצאה מכך, איכות החיים באופן משמעותי סובל, עם התערבויות מוגבל ל- palliation של תסמינים יותר מאשר תרופה4. כדי לבדוק טיפולים ויוו, זה עניין כדי לנהל תרכובות ביו ישירות את בלוטת הרוק.
הזרקת Retroductal היא שיטה יקר להעביר תרכובות ביו ישירות אל בלוטות הרוק ולבדוק את היעילות, מחלה, פציעה, או תחת הרקמות הומאוסטזיס. בלוטות הרוק הגדולות שלוש הן את parotid (עמוד), submandibular (SMG) ו את sublingual (. סיג), כל אילו ריקה לתוך חלל הפה דרך צינוריות excretory. האנטומיה של מאתר SMG מאפשרת גישה ישירה דרך תעלות של צינור של וורטון, ממוקם בקומה של הפה מתחת הלשון5. בעקבות את תעלות, תרופות solvated יכול להינתן ישירות אל SMG. לאחר הלידה, retroductal, דיפוזיה במיוחד הבלוטות הוא מוגבל על ידי הקפסולה הרקמה שמסביב המסדירה את חילופי חומר עם סביב מבנים6. את SMG וסרט הדבקה שלו בנויות באופן דומה בבני אדם, מתבצעת באופן שגרתי במהלך SMG ניתוח ו sialoendoscopy7. בבני אדם ועכברים, עמוד נגיש גם דרך צינור של Stensen buccal רירית8.
דגמים מאתר של ריה, SMG retroductal הזרקת שימש כדי לספק הרפוי לרבות גורמי גדילה, ראשי תאים, וקטורים adenoviral, ציטוקינים נוגדי חמצון תרכובות לווסת את התגובה התאית לפגיעה, ולהפחית את התוצאה רקמת נזק5,9,10,11,12,13,14,15,16. ההצלחה קליניים הבולטים של הזרקת retroductal הוא המנהל של וקטור adenoviral להפנות את הביטוי של תעלת מים (Aquaporin 1; AQP1) בקרב מטופלים לאחר הקרינה עבור סרטן הראש והצוואר17.
בעבר, יש שפותחה ואנו הראו את היעילות של מערכת ננו-חלקיק פולימריים-siRNA retroductally מוזרק להגן על תפקוד בלוטת הרוק ריה11,18,19,20. כהרחבה של העבודה האחרונה שלנו, כאן, נדגים את הפרוטוקול שלנו להזרקה SMG retroductal באמצעות שכותרתו fluorescently ננו-חלקיק (NP) מסוגל לטעון ואספקה אחרת מסיסות סמים21,22, 23.
יש לנו לסנתז את NP מ קופולימר diblock המורכב פוליפוני (styrene-alt-maleic anhydride)-b-poly(styrene) (PSMA) באמצעות תוספת הפיך שרשרת פיצול (רפסודה) פלמור, כפי שתואר לעיל21. באמצעות החלפת הממס, פולימרים אלה באופן ספונטני בעצמם למבנים NP מיצלה עם הידרופובי פנים ו הידרופילית החיצוני21. NPs מסומנות עם טקסס-אדום fluorophore להתיר את האימות של NP משלוח לתוך הבלוטות מבלי להתפשר על החיה. חיים הדמיה בעלי חיים, SMG אימונוהיסטוכימיה מוצג ב 1 h ו 1 יום בעקבות הזריקה.
This עודכן, תעלות לשחזור פרוטוקול צריך לאפשר לאחרים להשיג זריקה retroductal. אנו מצפים כי טכניקה זו מעודן יהיה קריטי עבור מחקרים ויוו ופיתוח טיפולית24,25.

<table><tbody><tr><td>Pilocarpine hydrochloride</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P6503</td><td>Pilocarpine</td></tr><tr><td>Student Vannas מספריים אביב</td><td>כלים מדעיים עדינים</td><td>91500-9</td><td>מספריים אביביים לטרכאוסטומיה</td></tr><tr><td>תמיסת מלח סטרילית</td><td>Medline</td><td>RDI30296H</td><td>מלח</td></tr><tr><td>Dumont #7 מלקחיים</td><td>כלים מדעיים עדינים</td><td>11274-20</td><td>מלקחיים מעוקלים</td></tr><tr><td>Dumont #5 מלקחיים</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-10</td><td>מלקחיים ישרים</td></tr><tr><td>דפוס סטנדרטי מלקחיים</td><td>Fine Science Tools</td><td>11000-12</td><td>מלקחיים קהים</td></tr><tr><td>מספריים עדינים- טונגסטן קרביד</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>14568-09</td><td>מספריים לדיסקציה</td></tr><tr><td>Microhematocrit צינורות נימיים Heparinized</td><td>Fisher Scientific</td><td>22362566</td><td>צינורות נימיים</td></tr> חומר <tr><td>סיכה משחת עיניים</td><td>רענון</td><td>N/A</td><td>רענון Lacri-Lube</td></tr><tr><td>עז פוליקלונלי אנטי-Nkcc1</td><td>סנטה קרוז ביוטק</td><td>SC-21545</td><td>Nkcc1 נוגדן</td></tr><tr><td>DAPI (4',6-דיאמידינו-2-פנילינדול, דיהידרוכלוריד)</td> <td>תרמו פישר מדעי</td><td>D1306</td><td>DAPI</td></tr><tr><td>GraphPad פריזמה</td><td>GraphPad</td><td>ver6.0</td><td>תוכנה סטטיסטית</td></tr><tr><td>מוליך כותנה עם קצה</td><td>Medline</td><td>MDS202000</td><td>מוליך למשחת עיניים</td></tr><tr><td>מזרק אינסולין 0.5 סמ"ק, מזרק 29G x 1/2 אינץ'</td> <td>BD</td><td>7629</td><td>להזרקה תוך צפקית</td></tr></tbody></table>

ננו-חלקיק retroductal הזרקה אל בלוטת submandibular מאתר

Retroductal Nanoparticle Injection to the Murine Submandibular Gland

שתי מטרות משותפות של בלוטת הרוק הרפוי הם מניעה וריפוי של תפקוד לקוי של רקמות בעקבות או אוטואימוניות או פציעה של קרינה. מאת מקומי אספקת תרכובות ביו בלוטות הרוק, ריכוזים רקמות גדול יותר ניתן להשיג בבטחה לעומת ניהול מערכתי. יתר על כן, את רקמת המטרה תופעות של הבלוטות במיוחד הצטברות של חומר יכול להיות מופחת באופן דרמטי. בהקשר זה, הזרקת retroductal היא שיטה בשימוש נרחב עבור חוקרים בביולוגיה בלוטת הרוק וגם פתופסיולוגיה. Retroductal ניהול של גורמי גדילה, ראשי תאים, וקטורים adenoviral ותרופות מולקולה קטנה הוכח כדי לתמוך בלוטת פונקציה בסביבה של פציעה. אנחנו בעבר הראו את היעילות של אסטרטגיה ננו-חלקיק-siRNA retroductally מוזרק כדי לשמור על תפקוד בלוטת בעקבות הקרנה. כאן, שיטה יעילה מאוד לשחזור כדי לנהל ננו את בלוטת submandibular מאתר דרך צינור וורטון. זה מפורט (איור 1). אנו מתארים גישה לחלל הפה, המתאר את השלבים הנחוצים להפיכת צינור cannulate וורטון, עם תצפיות נוספות הגשה בדיקות איכות לאורך כל ההליך.

הזרקת Retroductal ניתן לנהל NPs SMG מאתר (איור 1). כאן, אנו מספקים 50 µg PSMA של NPs המסומנת אדום טקסס fluorophore.
השמה נכונה של העכבר מאפשר גישה נתיישב והדמיה של רצפת הפה (איור 2 א-ב). ואדומות סטיגמטה והיו שלמים submandibular מזוהים כפי בליטות הבשרי שני מתחת ללשון. בעקבות תעלות (איור 2C) הזרקת אטרופין, אבובים מזרק ניתן לה...

משלוח סמים מקומי נקראות בלוטות הוא עניין בביולוגיה בלוטת הרוק ההבנה ועל ההתפתחות של הריפוי. אנו מציגים פרוטוקול הזרקת retroductal מעודכן ומפורט, שנועדו לשפר את המסירה ודיוק הפארמצבטית ניסיוני. היישום שהוצגו במסמך זה הוא המסירה של חלקיקים פולימרים.

ננו-חלקיק Retroductal הזרקה אל בלוטת Submandibular מאתר

Two common goals of salivary gland therapeutics are prevention and cure of tissue dysfunction following either autoimmune or radiation injury. By locally ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא לתת ננו-חומרים ישירות לבלוטת התת-לסת של העכבר. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא בכך שהיא משיגה אספקה ישירה של תרכובות לבלוטה התת-לסתית, תוך עקיפת זרימת הדם המערכתית. ההשלכות של טכניקה זו משתרעות על טיפול בתפקוד לקוי של בלוטות הרוק לאחר טיפול בקרינה לממאירות ראש וצוואר.בדרך כלל, אנשים חדשים בשיטה זו עשויים להיות מאותגרים על ידי איתור וקנולציה של הצינור התת-לסת בזמן שהחיה מורדמת. כדי להתחיל בהליך זה, חתוך שלושה סנטימטרים של צינור קטטר תוך גולגולתי בגודל 32 עם שיבוץ חוט ליצירת קצה משופע כ-45 מעלות לציר הארוך. ודא שהחוט ארוך לפחות בסנטימטר אחד מהצינור.יצירת קצה משופע לצינור תקל על צינור. אם הצינור מתכופף במהלך ההליך, יש לחתוך קצה משופע טרי. לאחר מכן, טען 50 מיקרוליטר של תמיסת ננו-חלקיקי PSMA או חומר הזרקה אחר למזרק המילטון.כדי להפחית את ההסתברות לטראומה במחילה במהלך ההזרקה, חבר את צינור הקטטר למזרק והוציא נפח מת. בדוק את תמיסת ההזרקה כדי לוודא שהננו-חלקיק מומס במלואו כדי למנוע חסימה צינורית. לאחר מכן הכינו תמיסת אטרופין ב 0.1 מיליגרם למיליליטר.כדי לדמיין את נקודת הכניסה הצינורית, הנח עכבר מורדם במצב שכיבה על במה מותאמת אישית. לאחר מכן יש למרוח משחה על העיניים כדי למנוע יובש במהלך ההליך. לאחר מכן, אבטח את החותכות המקסילריות מעל קורת מתכת והשתמש ברצועה אלסטית כדי להפעיל מתח כלפי מטה מאחורי חותכות הלסת התחתונה.יישר את העכבר מתחת למיקרוסקופ הניתוח כדי לדמיין את בסיס הלסת. כדי להרחיב את הפה, השתמש במחזיר פלדה מעוקל בהתאמה אישית כדי להפעיל מתח על רירית הבוקאלי באופן דו צדדי. כדי לדמיין את הפפילה התת-לסתית, אחזו והרימו בעדינות את הלשון מרצפת הפה באמצעות מלקחיים קהים.הניחו חתיכת כותנה בין הלשון לרירית הבוקאלית כדי לאפשר מניפולציה נוספת בתוך חלל הפה. כדי לבצע צינורית צינורית ומיקום קו, אחוז בצינור הקטטר עם שיבוץ חוט. לשליטה ידנית אופטימלית במהלך הקנולציה, יישר את הצינור עם עקמומיות המלקחיים.בעזרת מיקרוסקופ הניתוח, הזיזו את המלקחיים והחוט לשדה הראייה. בעזרת כניסת החוט, הפעל בעדינות לחץ על בסיס פפילה תת-לסתית אחת כדי לייצר ניקור רירי שטחי קטן שיקל על כניסה מאוחרת יותר של צינור הצנתר. אם נתקלים בהתנגדות, חתכו קצות משופעים טריים הן על הצינור והן על החוט המוטבע בעזרת מספריים חדים.לאחר הכניסה, משוך את הסטילט, ולאחר מכן, באמצעות מיקרוסקופ הניתוח, אשר את נוכחות הרוק באתר הניקוב. לאחר מכן, משוך את הסגנון עוד יותר בתוך הצינור. יש להימנע מתנועה חזקה או פתאומית של הסטילט שעלולה לגרום לדימום או לפגוע בשלמות הצינור.כדי להבטיח שצינורות ההזרקה יתאימו לפתח הצינור של וורטון, הכנס צינורות המכילים את הסטילט כמוביל קשיח לתוך הפנצ'ר שנעשה קודם לכן. כדי למנוע לחץ אחורי ממושך לחסימת צינורות, משוך את הצינור. מתחת למיקרוסקופ, ודא שניתן לראות פתח בפפילה התת-לסתית.אם מתרחש דימום גלוי, הסר את הסטילט ונסה שוב לבצע את ההליכים בפפילה התת-לסתית הנגדית. לאחר מכן, מבלי להזיז את העכבר, יש לתת מיליגרם אחד לק"ג תמיסת אטרופין תוך צפקית כדי להפחית את הגובה במהלך ההליך. לאחר מכן, המתן חמש עד 10 דקות.מתחת למיקרוסקופ הניתוח, הכנס את צינור המזרק לפתח. אם נתקלים בהתנגדות, חתוך קצה משופע טרי על הצינור ונסה אותו שוב. לאחר שהצינור נמצא במקומו בתוך הפפילה התת-לסתית, התקדמו לאט שלושה עד חמישה מילימטרים לתוך הצינור.לאחר מכן, שחרר את הצינור מהמלקחיים. כדי לשפר את האיטום בין הצינור לפפילה התת-לסתית, יבש את הממשק על ידי ספיגה עדינה בגזה למשך דקה אחת. בדוק כדי לוודא שמיקום הצינור לא השתנה במהלך הייבוש.בהליך זה יש להזריק את החומר בקצב של 10 מיקרוליטר לדקה. ודא שהעכבר נשאר מורדם ואינו מראה סימני מצוקה. לאחר ההזרקה, שמור על לחץ המזרק למשך חמש דקות כדי לשפר את החזקת החומר בתוך צינור וורטון והבלוטה התת-לסתית.בדוק את הפפילה התת-לסתית מעת לעת כדי לוודא שהצינורות אינם יוצאים מפתח הצינור. שמירה על לחץ ההזרקה תשפר את האפקטיביות של אספקה רטרודוקטלית. בעזרת מלקחיים עדינים, אחזו בעדינות ומשכו את הצינור מהפפילה התת-לסתית.הסר את המחזיר והכותנה מחלל הפה לפני הרחקת העכבר מהבמה. כדי לאמת מסירת ננו-חלקיקים, מערכת הדמיה in vivo מציגה את הרוחב של אות פלואורסצנטי אדום לצד המטופל של העכבר שעה לאחר ההזרקה. ותמונה זו מראה כי אות הננו-חלקיקים ירד משמעותית 24 שעות לאחר ההזרקה.כדי לאשר התמדה של ננו-חלקיקים בבלוטות התת-לסתיות 24 שעות לאחר ההזרקה, הם נחתכו ונצפו על ידי הדמיה פלואורסצנטית. מוצגות כאן בלוטות הבקרה התת-לסתות שלא הוזרקו צבועות באקוופורין 5 וקריטין 5 המסמנות את תאי האצ'יני והצינור המפרישים בהתאמה. בבלוטות תת-לסתות המוזרקות לננו-חלקיקים רטרודוקטיים, כתמי אקוופורין 5 וקריטין 5 מראים מורפולוגיה תקינה של הבלוטה וננו-חלקיקים שנקלטו הן באציני והן בצינורות.לאחר שליטה, ניתן לבצע טכניקה זו תוך 20 דקות אם היא מבוצעת כראוי. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור להימנע מכל תנועה זרה שעלולה לעקור את הצינורית או לשבש את האיטום שנוצר בין הצינור לפפילה התת-לסתית. לאחר ההליך, ניתן לבצע שיטות אחרות כמו צביעה חיסונית, מיצוי RNA או זרימה ציטומטרית על מנת להעריך ביטוי גנים או לוקליזציה של ננו-חומרים בבלוטה התת-לסתית.לאחר פיתוחה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרי בלוטות הרוק לסנן ולבדוק תרכובות למניעת קסרוסטומיה. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לתת ננו-חומרים ישירות לבלוטת התת-לסת של העכבר באמצעות קנולציה של צינור וורטון.

retroductal-nanoparticle-injection-to-the-murine-submandibular-gland

Research

JoVE Journal

Bioengineering

הנדסה ביולוגית

פרוטוקול עבור cannulation של בלוטת הרוק עכבר submandibular דרך צינור של וורטון מתואר. לצורך ניסוי זה, הפתרון כחול trypan משמש הצבעים כדי להדגים כיצד טכניקה זו יעילה מספק חליטות לתוך בלוטת ממוקד, ולהציע את האמינות של הגישה החדשה הזו כמו טיפול פוטנציאלי סמים / תא קליניות לגבי רגנרצית של בלוטות הרוק.

Cannulation של בלוטת הרוק באמצעות עכבר Submandibular Duct של וורטון

סרטון זה מתאר טכניקת הזרקה אינטרדוקטלית שבה אנו מעבירים תערובת הזרקה לתוך צינורות בלוטות החלב של עכברים.

הזרקה intraductal: אספקת תערובת הזרקה לתוך צינורות של בלוטת החלב העכבר

הסרטון מדגים טכניקת הזרקה מונחית אולטרסאונד למתן תרופות טיפוליות לבלוטות הרוק של מטופל אנושי.

הזרקה מונחית אולטרסאונד של תרופות טיפוליות לבלוטות רוק אנושיות

פרוטוקול למשלוח intraductal לא פולשנית של חומרים כימיים מימיים לבלוטת החלב בעכבר מתואר. השיטה מנצלת הזרקה מקומית לפטמות של בלוטות החלב מיקוד צינוריות החלב באופן ספציפי. טכניקה זו ניתנת להתאמה למגוון רחב של תרכובות כולל siRNA, תרופות כימותרפיות ומולקולות קטנות.

הזרקת intraductal עבור משלוח סמים מקומיים לעכבר החלב בלוטת

בלוטות הלימפה הן הרקמות החיסוניות המתזמרות את התגובה החיסונית והן יעד קריטי לחיסונים. Biomaterials הועסקו כדי למקד טוב יותר בלוטות הלימפה כדי לשלוט על משלוח של אנטיגנים או אדג'ובנטים. מאמר זה מתאר טכניקה המשלבת רעיונות אלה כדי להזריק חלקיקי פולימר תואמים ביולוגית לתוך בלוטות הלימפה.

הזרקת בלוטות תוך-לימפתיות של חלקיקי פולימר מתכלים

תת תפקוד בלוטות הרוק, תופעת לוואי משמעותית של רדיותרפיה בראש ובצוואר מפחיתה את איכות החיים של המטופל. הוכחת היעילות של טיפולים חדשים במודלים של בעלי חיים היא תנאי מוקדם לפני המעבר הקליני. פרוטוקול זה מתאר מתן רטרודוקטי והקרנה מקומית של בלוטות תת-לסתות של חולדות.

Retroductal submandibular בלוטת החדרה ונקודות מופרדות הקרנה במודל עכברים של הרוק hypofunction

אנו מתארים פרוטוקול בניתוח לחשוף ולייצב את בלוטת הרוק submandibular מאתר עבור הדמיה intravital באמצעות מיקרוסקופ intravital זקוף. פרוטוקול זה ניתנת להתאמה בקלות אחרים בלוטות אקסוקרינית של הראש, באזור הצוואר של עכברים ומכרסמים קטנים אחרים.

הכנה של בלוטת הרוק Submandibular מאתר מיקרוסקופ Intravital זקופה

בלוטות הרוק הוצעו כאתר יעד לרקמות לטיפול גנטי, במיוחד בתחום החיסון על ידי העברת גנים. אנו מדגימים אספקת גנים במודל פרימטים לא אנושיים המשתמש בעירוי פרוטידים מדרדר.

עירוי בלוטת פרוטידים מדרדר דרך צינור סטנסן בפרימט לא אנושי לאספקת גנים וקטורית

בפרוטוקול הנוכחי, פונקציית מחסום האנדותל של הבלוטה התת-מנדיבולרית (SMG) הוערכה על ידי הזרקת עוקבים פלואורסצנטיים משוקללים מולקולריים שונים לוורידים הזוויתיים של מודלים של חיות ניסוי in vivo תחת מיקרוסקופ סריקת לייזר של שני פוטונים.

אין ויוו זיהוי חדירות כלי דם בבלוטה תת-מנדיבולרית של עכבר

הדמיה אימונופלואורסצנטית מוגבלת על ידי היכולת לצפות בתהליכים ביולוגיים מורכבים ותלויי זמן בתמונת מצב אחת בלבד בזמן. מחקר זה מתאר גישת הדמיה חיה שנערכה על פרוסות בלוטות תת-לסתיות של עכברים שנחתכו בחיתוך מדויק. גישה זו מאפשרת תצפית בזמן אמת על אינטראקציות תא-תא במהלך הומאוסטזיס ותהליכי התחדשות ותיקון.

חקירת אינטראקציות תאים-תאים בבלוטת הרוק באמצעות Ex Vivo Live Cell Imaging

כאן, אנו מתארים את הפרוטוקול לאספקה in vivo של ננו-חלקיקי תחמוצת ברזל מגנטיים הנושאים אוליגומרים של RNA לסרטן שד גרורתי במודלים של בעלי חיים, ומספקים גישה בת קיימא מבחינה קלינית להשתקה טיפולית של חומצות גרעין אונקוגניות.

ניטור הצטברות ננו-תרופות בגרורות סרטן השד בעכברים

למדו הזרקת ננו-חלקיקים רטרודוקטלית לבלוטת Submandibular בעכברים. שיטה זו מאפשרת מסירה מקומית של תרופות תוך עקיפת מחזור הדם, מה שמפחית תופעות לוואי ומסייע בחקר ביולוגיית בלוטות הרוק ובפיתוח טיפולים חדשים.

ננו-חלקיק Retroductal הזרקה אל בלוטת Submandibular מאתר

גלה סרטונים נוספים