ננו-חלקיק Retroductal הזרקה אל בלוטת Submandibular מאתר

משלוח סמים מקומי נקראות בלוטות הוא עניין בביולוגיה בלוטת הרוק ההבנה ועל ההתפתחות של הריפוי. אנו מציגים פרוטוקול הזרקת retroductal מעודכן ומפורט, שנועדו לשפר את המסירה ודיוק הפארמצבטית ניסיוני. היישום שהוצגו במסמך זה הוא המסירה של חלקיקים פולימרים.

המטרה הכוללת של הליך זה היא לתת ננו-חומרים ישירות לבלוטת התת-לסת של העכבר. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא בכך שהיא משיגה אספקה ישירה של תרכובות לבלוטה התת-לסתית, תוך עקיפת זרימת הדם המערכתית. ההשלכות של טכניקה זו משתרעות על טיפול בתפקוד לקוי של בלוטות הרוק לאחר טיפול בקרינה לממאירות ראש וצוואר.

בדרך כלל, אנשים חדשים בשיטה זו עשויים להיות מאותגרים על ידי איתור וקנולציה של הצינור התת-לסת בזמן שהחיה מורדמת. כדי להתחיל בהליך זה, חתוך שלושה סנטימטרים של צינור קטטר תוך גולגולתי בגודל 32 עם שיבוץ חוט ליצירת קצה משופע כ-45 מעלות לציר הארוך. ודא שהחוט ארוך לפחות בסנטימטר אחד מהצינור.

יצירת קצה משופע לצינור תקל על צינור. אם הצינור מתכופף במהלך ההליך, יש לחתוך קצה משופע טרי. לאחר מכן, טען 50 מיקרוליטר של תמיסת ננו-חלקיקי PSMA או חומר הזרקה אחר למזרק המילטון.

כדי להפחית את ההסתברות לטראומה במחילה במהלך ההזרקה, חבר את צינור הקטטר למזרק והוציא נפח מת. בדוק את תמיסת ההזרקה כדי לוודא שהננו-חלקיק מומס במלואו כדי למנוע חסימה צינורית. לאחר מכן הכינו תמיסת אטרופין ב 0.1 מיליגרם למיליליטר.

כדי לדמיין את נקודת הכניסה הצינורית, הנח עכבר מורדם במצב שכיבה על במה מותאמת אישית. לאחר מכן יש למרוח משחה על העיניים כדי למנוע יובש במהלך ההליך. לאחר מכן, אבטח את החותכות המקסילריות מעל קורת מתכת והשתמש ברצועה אלסטית כדי להפעיל מתח כלפי מטה מאחורי חותכות הלסת

יישר את העכבר מתחת למיקרוסקופ הניתוח כדי לדמיין את בסיס הלסת. כדי להרחיב את הפה, השתמש במחזיר פלדה מעוקל בהתאמה אישית כדי להפעיל מתח על רירית הבוקאלי באופן דו צדדי. כדי לדמיין את הפפילה התת-לסתית, אחזו והרימו בעדינות את הלשון מרצפת הפה באמצעות מלקחיים קהים.

הניחו חתיכת כותנה בין הלשון לרירית הבוקאלית כדי לאפשר מניפולציה נוספת בתוך חלל הפה. כדי לבצע צינורית צינורית ומיקום קו, אחוז בצינור הקטטר עם שיבוץ חוט. לשליטה ידנית אופטימלית במהלך הקנולציה, יישר את הצינור עם עקמומיות המלקחיים.

בעזרת מיקרוסקופ הניתוח, הזיזו את המלקחיים והחוט לשדה הראייה. בעזרת כניסת החוט, הפעל בעדינות לחץ על בסיס פפילה תת-לסתית אחת כדי לייצר ניקור רירי שטחי קטן שיקל על כניסה מאוחרת יותר של צינור הצנתר. אם נתקלים בהתנגדות, חתכו קצות משופעים טריים הן על הצינור והן על החוט המוטבע בעזרת מספריים חדים.

לאחר הכניסה, משוך את הסטילט, ולאחר מכן, באמצעות מיקרוסקופ הניתוח, אשר את נוכחות הרוק באתר הניקוב. לאחר מכן, משוך את הסגנון עוד יותר בתוך הצינור. יש להימנע מתנועה חזקה או פתאומית של הסטילט שעלולה לגרום לדימום או לפגוע בשלמות הצינור.

כדי להבטיח שצינורות ההזרקה יתאימו לפתח הצינור של וורטון, הכנס צינורות המכילים את הסטילט כמוביל קשיח לתוך הפנצ'ר שנעשה קודם לכן. כדי למנוע לחץ אחורי ממושך לחסימת צינורות, משוך את הצינור. מתחת למיקרוסקופ, ודא שניתן לראות פתח בפפילה התת-לסתית.

אם מתרחש דימום גלוי, הסר את הסטילט ונסה שוב לבצע את ההליכים בפפילה התת-לסתית הנגדית. לאחר מכן, מבלי להזיז את העכבר, יש לתת מיליגרם אחד לק"ג תמיסת אטרופין תוך צפקית כדי להפחית את הגובה במהלך ההליך. לאחר מכן, המתן חמש עד 10 דקות.

מתחת למיקרוסקופ הניתוח, הכנס את צינור המזרק לפתח. אם נתקלים בהתנגדות, חתוך קצה משופע טרי על הצינור ונסה אותו שוב. לאחר שהצינור נמצא במקומו בתוך הפפילה התת-לסתית, התקדמו לאט שלושה עד חמישה מילימטרים לתוך הצינור.

לאחר מכן, שחרר את הצינור מהמלקחיים. כדי לשפר את האיטום בין הצינור לפפילה התת-לסתית, יבש את הממשק על ידי ספיגה עדינה בגזה למשך דקה אחת. בדוק כדי לוודא שמיקום הצינור לא השתנה במהלך הייבוש.

בהליך זה יש להזריק את החומר בקצב של 10 מיקרוליטר לדקה. ודא שהעכבר נשאר מורדם ואינו מראה סימני מצוקה. לאחר ההזרקה, שמור על לחץ המזרק למשך חמש דקות כדי לשפר את החזקת החומר בתוך צינור וורטון והבלוטה התת-לסתית.

בדוק את הפפילה התת-לסתית מעת לעת כדי לוודא שהצינורות אינם יוצאים מפתח הצינור. שמירה על לחץ ההזרקה תשפר את האפקטיביות של אספקה רטרודוקטלית. בעזרת מלקחיים עדינים, אחזו בעדינות ומשכו את הצינור מהפפילה התת-לסתית.

הסר את המחזיר והכותנה מחלל הפה לפני הרחקת העכבר מהבמה. כדי לאמת מסירת ננו-חלקיקים, מערכת הדמיה in vivo מציגה את הרוחב של אות פלואורסצנטי אדום לצד המטופל של העכבר שעה לאחר ההזרקה. ותמונה זו מראה כי אות הננו-חלקיקים ירד משמעותית 24 שעות לאחר ההזרקה.

כדי לאשר התמדה של ננו-חלקיקים בבלוטות התת-לסתיות 24 שעות לאחר ההזרקה, הם נחתכו ונצפו על ידי הדמיה פלואורסצנטית. מוצגות כאן בלוטות הבקרה התת-לסתות שלא הוזרקו צבועות באקוופורין 5 וקריטין 5 המסמנות את תאי האצ'יני והצינור המפרישים בהתאמה. בבלוטות תת-לסתות המוזרקות לננו-חלקיקים רטרודוקטיים, כתמי אקוופורין 5 וקריטין 5 מראים מורפולוגיה תקינה של הבלוטה וננו-חלקיקים שנקלטו הן באציני והן בצינורות.

לאחר שליטה, ניתן לבצע טכניקה זו תוך 20 דקות אם היא מבוצעת כראוי. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור להימנע מכל תנועה זרה שעלולה לעקור את הצינורית או לשבש את האיטום שנוצר בין הצינור לפפילה התת-לסתית. לאחר ההליך, ניתן לבצע שיטות אחרות כמו צביעה חיסונית, מיצוי RNA או זרימה ציטומטרית על מנת להעריך ביטוי גנים או לוקליזציה של ננו-חומרים בבלוטה התת-לסתית.

לאחר פיתוחה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרי בלוטות הרוק לסנן ולבדוק תרכובות למניעת קסרוסטומיה. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לתת ננו-חומרים ישירות לבלוטת התת-לסת של העכבר באמצעות קנולציה של צינור וורטון.