Name: הקלטה של אפנון של הפעילות פרוסות המוח מכרסמים מצמידים מערכים Microelectrode (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-05-15T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 24 s
Description: למדו שיטה להקלטת ואפנון פעילות אפילפטית בפרוסות מוח מכרסמים באמצעות מערכי מיקרואלקטרודות. השיטה מאפשרת מיפוי אלקטרודים בזמן אמת ואופטימיזציה של פרוטוקולי גירוי לטיפול באפילפסיה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ג. פ הוא עמית הספרותמוזאון מארי במימון הפרויקט האיחוד האירופי MSCA-אם-2014 Re.B.Us, n.660689 לשכניו, במסגרת התוכנית מסגרת H2020. MapMEA GUI זמין באופן חופשי על פי בקשה לעריכת ilaria.colombi@iit.it.

<ol><li>Fisher, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Operational+classification+of+seizure+types+by+the+International+League+Against+Epilepsy%3A+Position+Paper+of+the+ILAE+Commission+for+Classification+and+Terminology%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsia%22%5BJournal%5D)">Operational classification of seizure types by the International League Against Epilepsy: Position Paper of the ILAE Commission for Classification and Terminology.</a> Epilepsia. 58 (4), 522-530 (2017).</li>
<li>WHO. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Epilepsy+Facts+Sheet%22">Epilepsy Facts Sheet</a>. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs999/en/">http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs999/en/</a> (2017).</li>
<li>Fiest, K. M., Birbeck, G. L., Jacoby, A., Jette, N. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24652452">Stigma in epilepsy.</a> Curr Neurol Neurosci Rep. 14 (5), 444(2014).</li>
<li>Brodie, M. J., Barry, S. J., Bamagous, G. A., Norrie, J. D., Kwan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patterns+of+treatment+response+in+newly+diagnosed+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Patterns of treatment response in newly diagnosed epilepsy.</a> Neurology. 78 (20), 1548-1554 (2012).</li>
<li>Tanriverdi, T., Poulin, N., Olivier, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Life+12+years+after+temporal+lobe+epilepsy+surgery%3A+a+long-term%2C+prospective+clinical+study%5BTitle%5D)+AND+%22Seizure%22%5BJournal%5D)">Life 12 years after temporal lobe epilepsy surgery: a long-term, prospective clinical study.</a> Seizure. 17 (4), 339-349 (2008).</li>
<li>Dingledine, R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDingledine%2C+R+%22Brain+slices%22">Brain slices</a>. , Plenum Press. (1984).</li>
<li>Avoli, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Network+and+pharmacological+mechanisms+leading+to+epileptiform+synchronization+in+the+limbic+system+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Network and pharmacological mechanisms leading to epileptiform synchronization in the limbic system in vitro.</a> Prog Neurobiol. 68 (3), 167-207 (2002).</li>
<li>Rutecki, P. A., Lebeda, F. J., Johnston, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epileptiform+activity+induced+by+changes+in+extracellular+potassium+in+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Epileptiform activity induced by changes in extracellular potassium in hippocampus.</a> J Neurophysiol. 54 (5), 1363-1374 (1985).</li>
<li>Mody, I., Lambert, J. D., Heinemann, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+extracellular+magnesium+induces+epileptiform+activity+and+spreading+depression+in+rat+hippocampal+slices%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Low extracellular magnesium induces epileptiform activity and spreading depression in rat hippocampal slices.</a> J Neurophysiol. 57 (3), 869-888 (1987).</li>
<li>Huberfeld, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glutamatergic+pre-ictal+discharges+emerge+at+the+transition+to+seizure+in+human+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Glutamatergic pre-ictal discharges emerge at the transition to seizure in human epilepsy.</a> Nat Neurosci. 14 (5), 627-634 (2011).</li>
<li>Pitkanen, A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPitkanen%2C+A+%22Models+of+seizures+and+epilepsy%22">Models of seizures and epilepsy</a>. , (2017).</li>
<li>Rutecki, P. A., Lebeda, F. J., Johnston, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((4-Aminopyridine+produces+epileptiform+activity+in+hippocampus+and+enhances+synaptic+excitation+and+inhibition%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">4-Aminopyridine produces epileptiform activity in hippocampus and enhances synaptic excitation and inhibition.</a> J Neurophysiol. 57 (6), 1911-1924 (1987).</li>
<li>Gross, G. W., Rieske, E., Kreutzberg, G. W., Meyer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+fixed-array+multi-microelectrode+system+designed+for+long-term+monitoring+of+extracellular+single+unit+neuronal+activity+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">A new fixed-array multi-microelectrode system designed for long-term monitoring of extracellular single unit neuronal activity in vitro.</a> Neurosci Lett. 6 (2-3), 101-105 (1977).</li>
<li>Pine, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recording+action+potentials+from+cultured+neurons+with+extracellular+microcircuit+electrodes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Recording action potentials from cultured neurons with extracellular microcircuit electrodes.</a> J Neurosci Methods. 2 (1), 19-31 (1980).</li>
<li>Reinartz, S., Biro, I., Gal, A., Giugliano, M., Marom, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+dynamics+contribute+to+long-term+single+neuron+response+fluctuations%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neural+Circuits%22%5BJournal%5D)">Synaptic dynamics contribute to long-term single neuron response fluctuations.</a> Front Neural Circuits. 8, 71(2014).</li>
<li>Dossi, E., Blauwblomme, T., Nabbout, R., Huberfeld, G., Rouach, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-electrode+array+recordings+of+human+epileptic+postoperative+cortical+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Multi-electrode array recordings of human epileptic postoperative cortical tissue.</a> J Vis Exp. (92), (2014).</li>
<li>Boido, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cortico-hippocampal+hyperexcitability+in+synapsin+I%2FII%2FIII+knockout+mice%3A+age-dependency+and+response+to+the+antiepileptic+drug+levetiracetam%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Cortico-hippocampal hyperexcitability in synapsin I/II/III knockout mice: age-dependency and response to the antiepileptic drug levetiracetam.</a> Neuroscience. 171 (1), 268-283 (2010).</li>
<li>Gonzalez-Sulser, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+4-aminopyridine+in+vitro+epilepsy+model+analyzed+with+a+perforated+multi-electrode+array%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">The 4-aminopyridine in vitro epilepsy model analyzed with a perforated multi-electrode array.</a> Neuropharmacology. 60 (7-8), 1142-1153 (2011).</li>
<li>Hajos, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maintaining+network+activity+in+submerged+hippocampal+slices%3A+importance+of+oxygen+supply%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Maintaining network activity in submerged hippocampal slices: importance of oxygen supply.</a> Eur J Neurosci. 29 (2), 319-327 (2009).</li>
<li>Ivanov, A., Zilberter, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+state+of+energy+metabolism+in+brain+slices%3A+the+principal+role+of+oxygen+delivery+and+energy+substrates+in+shaping+neuronal+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neuroenergetics%22%5BJournal%5D)">Critical state of energy metabolism in brain slices: the principal role of oxygen delivery and energy substrates in shaping neuronal activity.</a> Front Neuroenergetics. 3, 9(2011).</li>
<li>MultichannelSystems. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Manual+PH01%22">Manual PH01</a>. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.multichannelsystems.com/sites/multichannelsystems.com/files/documents/manuals/PH01_Manual.pdf">https://www.multichannelsystems.com/sites/multichannelsystems.com/files/documents/manuals/PH01_Manual.pdf</a> (2018).</li>
<li>Zhang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Propagation+of+epileptiform+activity+can+be+independent+of+synaptic+transmission%2C+gap+junctions%2C+or+diffusion+and+is+consistent+with+electrical+field+transmission%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Propagation of epileptiform activity can be independent of synaptic transmission, gap junctions, or diffusion and is consistent with electrical field transmission.</a> J Neurosci. 34 (4), 1409-1419 (2014).</li>
<li>Panuccio, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+ictogenesis+and+parahippocampal+networks+in+a+rodent+model+of+temporal+lobe+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">In vitro ictogenesis and parahippocampal networks in a rodent model of temporal lobe epilepsy.</a> Neurobiol Dis. 39 (3), 372-380 (2010).</li>
<li>Barbarosie, M., Avoli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CA3-driven+hippocampal-entorhinal+loop+controls+rather+than+sustains+in+vitro+limbic+seizures%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">CA3-driven hippocampal-entorhinal loop controls rather than sustains in vitro limbic seizures.</a> J Neurosci. 17 (23), 9308-9314 (1997).</li>
<li>Panuccio, G., Guez, A., Vincent, R., Avoli, M., Pineau, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptive+control+of+epileptiform+excitability+in+an+in+vitro+model+of+limbic+seizures%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Adaptive control of epileptiform excitability in an in vitro model of limbic seizures.</a> Exp Neurol. 241, 179-183 (2013).</li>
<li>Benini, R., Avoli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+subicular+networks+gate+hippocampal+output+activity+in+an+in+vitro+model+of+limbic+seizures%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Rat subicular networks gate hippocampal output activity in an in vitro model of limbic seizures.</a> J Physiol. 566 (Pt 3), 885-900 (2005).</li>
<li>D'Arcangelo, G., Panuccio, G., Tancredi, V., Avoli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repetitive+low-frequency+stimulation+reduces+epileptiform+synchronization+in+limbic+neuronal+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">Repetitive low-frequency stimulation reduces epileptiform synchronization in limbic neuronal networks.</a> Neurobiol Dis. 19 (1-2), 119-128 (2005).</li>
<li>Steidl, E. M., Neveu, E., Bertrand, D., Buisson, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+adult+rat+hippocampal+slice+revisited+with+multi-electrode+arrays%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The adult rat hippocampal slice revisited with multi-electrode arrays.</a> Brain Res. 1096 (1), 70-84 (2006).</li>
<li>Pulizzi, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brief+wide-field+photostimuli+evoke+and+modulate+oscillatory+reverberating+activity+in+cortical+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Brief wide-field photostimuli evoke and modulate oscillatory reverberating activity in cortical networks.</a> Sci Rep. 6, 24701(2016).</li>
<li>Liu, M. G., Chen, X. F., He, T., Li, Z., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+multi-electrode+array+recordings+in+studies+of+network+synaptic+plasticity+in+both+time+and+space%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Use of multi-electrode array recordings in studies of network synaptic plasticity in both time and space.</a> Neuroscience Bulletin. 28 (4), 409-422 (2012).</li>
<li>Maier, N., Morris, G., Johenning, F. W., Schmitz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+approach+for+reliably+investigating+hippocampal+sharp+wave-ripples+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">An approach for reliably investigating hippocampal sharp wave-ripples in vitro.</a> PLoS One. 4 (9), e6925(2009).</li>
<li>Aiba, I., Noebels, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spreading+depolarization+in+the+brainstem+mediates+sudden+cardiorespiratory+arrest+in+mouse+SUDEP+models%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Spreading depolarization in the brainstem mediates sudden cardiorespiratory arrest in mouse SUDEP models.</a> Sci Transl Med. 7 (282), 282ra246(2015).</li>
<li>MA, R., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMA%2C+R+%22Jasper%27s+Basic+Mechanisms+of+the+Epilepsies+%22">Jasper's Basic Mechanisms of the Epilepsies </a>. Avoli, M., Noebels, J. L., Rogawski, M. A., et al. , 4th, National Center for Biotechnology Information (US). Bethesda (MD). (2012).</li>
<li>Motamedi, G. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Termination+of+epileptiform+activity+by+cooling+in+rat+hippocampal+slice+epilepsy+models%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsy+Res%22%5BJournal%5D)">Termination of epileptiform activity by cooling in rat hippocampal slice epilepsy models.</a> Epilepsy Res. 70 (2-3), 200-210 (2006).</li>
<li>Yang, X. F., Duffy, D. W., Morley, R. E., Rothman, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neocortical+seizure+termination+by+focal+cooling%3A+temperature+dependence+and+automated+seizure+detection%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsia%22%5BJournal%5D)">Neocortical seizure termination by focal cooling: temperature dependence and automated seizure detection.</a> Epilepsia. 43 (3), 240-245 (2002).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

אפילפסיה הוא סכנת חיים הפרעה פרוגרסיבית גרימת פעילות בלתי מבוקרת של המוח1; הוא נושא בין הנטל הגבוה ביותר של המחלה ו-2,סטיגמה חברתית משמעותית3. TLE היא התסמונת בתדירות הגבוהה ביותר (40%) ואת ביותר לעתים קרובות (~ 30%) עמידים בפני תרופות אנטי-אפילפטי4. בזמן ניתוח אבלציה של הרקמה epileptogenic ייתכן להפחיתם מצבו של החולה, הוא הוא לא ריאלי של כל החולים, אינו מבטיח לחיים לחלוטין ללא פרכוס5. אפנון של אפילפסיה הלימבי רשתות על ידי DBS חשמל היא גישה מבטיחה טיפול תרופתי או כירורגי אינם מתאימים.
פרוסות המוח מכרסמים הם כלי חשוב ללמוד איך רשתות תפקוד מחלה ובריאות6 על-ידי במבחנה טכניקות אלקטרופיזיולוגיה, כפי שהם לשמר, לפחות חלק, באדריכלות המקורי ואת קישוריות של המוח region(s) עניין (ROI). בפרט, ההיפוקמפוס משולב אופקי-entorhinal קליפת המוח (היפוקמפוס-EC) פרוסות מהווים את רשתות עצביים חיוני מעורב TLE, לכן מועסקות באופן שגרתי במבחנה TLE מחקר7.
הפציינט יכול להיות בחריפות המושרה פרוסות המוח על-ידי שינוי ההרכב יוניים של הנוזל מוחי שדרתי מלאכותי (כלנית חדד), כגון הפחתת מגנזיום תוך הגדלת אשלגן8,9,10, או באמצעות מניפולציות תרופתי, כגון חסימת מעכבות פעילות GABAergic (ראה11 עבור סקירה מקיפה). עם זאת, מודלים אלה מבוססים על משינוי לא מאוזן של עירור וניגוד; לפיכך, הם אינם מאפשרים ללמוד את האינטראקציה ואת התרומה מתואמת של רשתות סינאפסות כדי ictogenesis. זלוף רציפה של פרוסות המוח עם 4AP סמים convulsant משפר עצבית סינאפסות והן מעכבות, ובכך מאפשר ללמוד ictogenesis חריפה תוך שמירה בפעילות הסינפטית אוברול שלם12.
אותי לאפשר רישום הפעילות החשמלית שנוצרו על-ידי רשתות עצביים של מספר רב יותר של נקודות תצפית לעומת הקלטה פוטנציאליים שדות קונבנציונלי חוץ-תאית, איפה הגבלות המרחבי להגביל את מספר אלקטרודות זה יכול להיות לאכלס על פני השטח פרוסה של המוח. יתר על כן, MEA שבבי מציעים יתרון נוסף של המרחק בין אלקטרודה ידוע, אשר הוא מאוד שימושי כדי לאתר הפצת, להעריך את מהירות הנסיעה של אותות המוקלט. אמנם בתחילה נוצר עבור הקלטה של נוירונים בתרבית13,14, אותי עכשיו משמשים גם כדי לאפיין את התכונות אלקטרופיזיולוגיות של פרוסות המוח חריפה המתקבל מכרסמים15 ועוד בני16. לכן, בהקשר של מחקר אפילפסיה, אותי מייצגים כלי רב ערך לאתר האינטראקציות של רשתות עצביים הליבה של17,ictogenesis16,18.
עם זאת, MEA הקלטה מטבעו נושא האתגרים הטכניים קבלת או שמירה על דפוס אפילפטית יציבה לאורך כל הפרוטוקולים ניסיוני ארוך (מספר שעות). ראשית, חמצון הרקמות עשוי לא להיות נאותה בתוך הגדול, עגול שקוע-type הקלטה קאמרית19,20 אופייני לי זמינים מסחרית, ואילו יחס אות לרעש המסכן וחוסר יציבות טמפרטורה עלול להשפיע איכות ההקלטה כאשר קצב זלוף גבוהה (6-10 mL/min) משמש כדי לשפר את אספקת החמצן כדי הפרוסה המוח (ראה לדוגמה את הערות טכניות על ציוד חימום זלוף21). שנית, חוזרים ונשנים הפרשות הכוללים רכיבים בתדירות גבוהה, כגון הפרשות אפילפטית, בקושי שנצפו בעת שימוש שקוע-type הקלטה צ'יימברס19; זה המקרה בעיקר כאשר התבנית אפילפטית חריפה הנגרמת כימית והיא כוללת מנגנונים ephaptic, כמו המקרה מודל 4AP22 (ראה11 עבור סקירה מקיפה). כדי להתגבר על מגבלות אלה, מספר אסטרטגיות הוצעו על ידי חוקרים. למשל, להגדיל את קצב זלוף19,20 תוך הפחתת עובי הפרוסה המוח (≤300 מיקרומטר) ואזור17,18 הם גורמים חיוניים להשגת אספקת חמצן מספקת לרקמות. בנוסף, המוח משופרת פרוסה הכדאיות יכול להתבצע גם באמצעות מחורר לי (pMEAs), אשר מאפשרים פרפוזיה על רקמת המוח של שני הצדדים18.
ואילו הגישות שתואר השתפרו באופן משמעותי את הכדאיות של מאה הקלטה של פרוסות המוח, הם לא נבדקו נגד ממושך (מספר שעות) הפעלות גירוי הקלטה וחשמליים, האחרון ייצוג משמעותי לחץ על רקמת המוח. מאולפן ההקלטות ממושך ועשוי להידרש ללמוד את ההתפתחות בזמן של תכונות ספציפיות של דפוסי אפילפטית לא יהיה ניתן לחשוף ע י מדידות לטווח קצר. בהקשר של מחקר DBS, פרוטוקולים ניסיוני הממושך עשוי להידרש כדי להעריך ולהשוות את ההשפעות של מספר גירויים פרדיגמות בתוך הפרוסה המוח באותו.
כאשר רק ספונטנית פעילות חשמלית צריך להיות מוקלטת, מיפוי של האלקטרודות ביחס רועי נעשית בדרך-כלל posteriori, קרי, במהלך ניתוח נתונים; במקום זאת, המחקר עורר תגובות או של פרדיגמות neuromodulation חשמל מחייב כי גירוי ניתן להעביר ROI(s) ספציפיים, מכתיב את הצורך של מיפוי מהיר וקל אלקטרודה בשידור חי במהלך הניסוי.
כאן, אנו ממחישים פרוטוקול ניסוי פשוט המאפשר אינדוקציה ותחזוקה של דפוס יציב אפילפטית 4AP-induced פרוסות המוח מכרסמים למבוגרים. הפעילות שנצפה מוליד בנאמנות את התכונות אלקטרופיזיולוגיות של מודל זה כמו מאופיין בשיטות קונבנציונליות אלקטרופיזיולוגיה חוץ-תאית. זה נמשך כמה שעות, outlasts גירוי חשמלי מתמשכת במשך תקופות ממושכות חוזרות ונשנות. התאים נהגו לשמור על דגירה את פרוסות המוח יכול להיות בקלות מורכבים בעזרת ציוד מעבדה סטנדרטיים (איור 1 א'), ואילו חדר הקלטה מותאם אישית המאפשר פתרון אופטימלי החליפין, זרימה שכבתית (איור 1B) יכול ניתן לקבל ממקורות מסחריים או באמצעות טכנולוגיית הדפסת תלת-ממד במחיר סביר. מיפוי מהיר ROI(s) עבור ניטור בזמן אמת, את הבחירה של אלקטרודות מגרה התאפשר על ידי GUI ידידותי למשתמש המותאם אישית בשם mapMEA, באופן חופשי זמין על פי בקשה.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57548/57548fig1.jpg"> איור 1: ציוד מותאם אישית עבור פרוטוקול זה. (א) החזקת צ'יימברס השחזור, מראש ההתחממות של דגירה מראש ב- 4AP הם מורכבים באמצעות גביע צלחת פטרי. הפטרי אמור להיות קטן בקוטר יותר החשמל, מתקיים במקום בעזרת פומפה מזרק. בתחתית הפטרי מוחלף על ידי רשת ניילון (מתוך גרבי רך) מודבקים עם דבק מגע על שפת הפטרי. החמצן המסופקת באמצעות כפופות מחט השדרה (22 גרם), מוכנס בין קירות הפטרי את הספל. בועות צריך העולה מן הצד של הספל, אף פעם לא להגיע רשת ניילון כדי למנוע תזוזה פרוסה המוח. החלק העליון של צלחת פטרי יכול לשמש מכסה כדי למנוע אידוי חנה המבר ולשמור רווית חמצן. חדר הקלטה מותאמת אישית (B). ב: כניסת המאגר כדי להכיל את הצינורית חימום, האלקטרודה הפניה. .: עודפים המאגר כדי להכיל את המחט היניקה. rec: הקלטת קאמרית. פיפטה (C) זכוכית פסטר, מכורבלת על ידי שיוף אש, המשמש כדי להתמודד עם הרקמה ולהתאים את מיקומו בתוך תא הקלטה. מותאם אישית (D) פרוסה hold-down עוגן. (E) ההרכבה הסופית של התא הקלטה רכוב על גבי השבב MEA. פרוסה המוח נשענת על גבי התחתון שנערך במקום על ידי העוגן. החץ האדום מציין את הצנרור PTFE המכסים את הצינורית חימום, ואילו העיגול האדום מציין האלקטרודה הפניה, גלולה אשלגן כלורי רווי שקוע מאת כלנית חדד במאגר כניסת המים. החץ הכחול מציין את המחט היניקה במאגר המים לשקע. <a href="/files/ftp_upload/57548/57548fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>

<table><tbody><tr><td>פולי-די-ליזין&nbsp;</td><td>Sigma-Adrich</td><td>P7886</td><td>דרוש לציפוי MEA</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Sigma-Adrich</td><td>S9888</td><td>Chemical</td></tr><tr><td>KCl</td><td>Sigma-Adrich</td><td>P9541</td><td>Chemical</td></tr><tr><td>KH2PO4</td><td>Sigma-Adrich</td><td>795488</td><td>Chemical</td></tr><tr><td>CaCl2*2 H2O</td><td>Sigma-Adrich</td><td>C3306</td><td></td></tr><tr><td>כימי D-גלוקוז</td><td>סיגמא-אדריך</td><td>RDD016</td><td>כימי</td></tr><tr><td>NaHCO<תת>3</תת>סיגמא-אדריץ</td><td></td>' <td>S5761</td><td>כימי</td></tr><tr><td>MgCl<תת>2*6 H2O</td><td>Sigma-Adrich</td><td>M2670</td><td>כימי</td></tr><tr><td>MgSO4*6 H2O</td><td>Sigma-Adrich</td><td>M5921</td><td>כימי</td></tr><tr><td>סוכרוז</td><td>סיגמא-אדריך</td><td>RDD023</td><td></td></tr><tr><td>חומצה פירובית כימית, 98%&nbsp;</td><td>Sigma-Adrich</td><td>107360</td><td>כימי</td></tr><tr><td>4-aminopyridine</td><td>Sigma-Adrich</td><td>A78403</td><td>תרופה עוותית</td></tr><tr><td>STG-2004</td><td>מערכת רב ערוצית</td><td>STG4004-1.6mA</td><td>מחולל גירויים 4 ערוצים עם מתח (&plusmn; 8 V) ופלט נוכחי (&plusmn; 1.6 mA)</td></tr><tr><td>MEA1060</td><td>מערכת רב-ערוצית</td><td>N/A</td><td>MEA AMPLIIFIER</td></tr><tr>MEA <td>מערכת רב-ערוצית</td><td>MEA מישורית</td><td>60MEA500/30iR-Ti ללא טבעת</td><td>חייב להיות ללא טבעת כדי לאפשר שימוש בתא ההקלטה המותאם אישית</td></tr><tr><td>McRack</td> תוכנת <td>הקלטת</td>מערכת <td></td><td>רב-ערוצית</td></tr><tr><td>McStimulus II</td> מערכת <td></td><td>רב-ערוצית</td><td>STG4004 תוכנת בקרת</td></tr><tr><td>TC02</td><td>מערכת רב ערוצית</td><td>TC02</td><td>תרמוסטט דו-ערוצי</td></tr><tr><td>PH01</td><td>מערכת רב ערוצית</td><td>PH01</td><td>צינורית זלוף חימום</td></tr><tr><td>MPH&nbsp;</td><td>מערכת רב ערוצית</td><td>MPH&nbsp;</td><td>מחזיק מגנטי ל-PH01 ומחט יניקה</td></tr><tr><td>Elastostil E43</td><td>Wacker</td><td>E43</td><td>איטום אלסטומרי המשמש להרכבת תא ההקלטה המותאם אישית על מכשיר הקריסל</td></tr><tr><td>המותאם אישית של MEA MEA תא</td><td></td><td>הקלטה מותאם אישית תא הקלטה</td><td></td></tr><tr><td>Ag/AgCl אלקטרודה, גלולה, 1.0 מ"מ&nbsp;</td><td>Crisel Instrument</td><td>64-1309</td><td>אלקטרודת ייחוס לתא ההקלטה המותאם אישית</td></tr><tr><td>Tergazyme</td><td>Sigma-Adrich</td><td>Z273287-1EA</td><td>מנקה אנזימטי</td></tr><tr><td>MATLAB</td><td>סביבת התכנות של Mathworks</td><td></td><td>למיפוי אלקטרו-VT1000S</td></tr><tr><td></td><td>Leica Biosystems</td><td>VT1000S</td><td>Vibratome</td></tr><tr><td></td><td>Warner Instruments</td><td>64-1309</td><td>גלולת אלקטרודה Ag-AgCl 1.0 מ"מ (E205). אלקטרודת התייחסות.</td></tr></tbody></table>

הקלטה של אפנון של הפעילות פרוסות המוח מכרסמים מצמידים מערכים microelectrode

Recording and Modulation of Epileptiform Activity in Rodent Brain Slices Coupled to Microelectrode Arrays

אפילפסיה של האונה הרקתית (TLE) היא הנפוצה ביותר חלקית תסמונת אפילפטית מורכבים של תרופות קשוב לפחות. גירוי מוחי עמוק (DBS) היא גישה מבטיחה כאשר נכשלת טיפול תרופתי או כירורגי אינו מומלץ. פרוסות המוח חריפה מצמידים מערכים microelectrode (אותי) מייצגים כלי חשוב ללמוד הרשת העצבית אינטראקציות ו אפנון שלהם על ידי גירוי חשמלי. לעומת טכניקות הקלטה חוץ-תאית קונבנציונאלי, הם מספקים את היתרונות הוספה של מספר רב יותר של נקודות תצפית, מרחק בין אלקטרודה ידוע, אשר מאפשרים ללמוד את הפצת הנתיב ואת המהירות של אלקטרופיזיולוגיות אותות. עם זאת, רקמות חמצון עלול להיות לקוי במידה רבה במהלך MEA הקלטה, הדורש קצב גבוה זלוף, אשר מגיע על חשבון ירידה יחס אות לרעש, גבוה יותר תנודות הטמפרטורה ניסיוני. גירוי חשמלי נוסף מדגיש את רקמת המוח, ולכן קשה להתמיד שהשרתים הקלטה/גירוי ממושך. יתר על כן, חשמל מודולציה של פעילות מוחית פרוסה צריך למקד מבנים/מסלולים ספציפיים בתוך הפרוסה המוח, הדורש כי מיפוי אלקטרודה בקלות ובמהירות להתבצע חי במהלך הניסוי. כאן, אנחנו מדגימים כיצד לבצע את אפנון הקלטה וחשמליים של פמפרידין (4AP)-induced לפעילות אפילפטית פרוסות המוח מכרסמים באמצעות אותי מישוריים. אנו מראים כי רקמת המוח המתקבל עכברים outperforms חולדה רקמת המוח, ובכך מתאים יותר לניסויים MEA. פרוטוקול זה מבטיח הדור ואת התחזוקה של דפוס יציב אפילפטית בנאמנות מתרבה התכונות אלקטרופיזיולוגיות נצפתה עם הקלטה פוטנציאליים שדות קונבנציונלי, נמשכת כמה שעות, ולא outlasts מתמשכת גירוי חשמלי במשך תקופות ממושכות. רקמות הכדאיות לאורך כל הניסוי מושגת בזכות השימוש של חדר הקלטה מותאמת אישית בנפח מצומצם ומאפשר זרימה שכבתית וחילופי פתרון מהיר אפילו ב נמוך (1 mL/min) המחירים זלוף. מיפוי מהיר MEA עבור ניטור בזמן אמת ומבחר של אלקטרודות מגרה מתבצע על ידי ממשק מותאם אישית משתמש גרפי (GUI).

אנו מדגימים כיצד לבצע הקלטה וחשמליים מודולציה של פעילות אפילפטית 4-aminopyridine-induced פרוסות המוח מכרסמים באמצעות מערכי microelectrode. חדר הקלטה מותאמת אישית שומר על רקמות הכדאיות ברחבי מישיבות ניסיוני. חיים מיפוי אלקטרודה, מבחר זוגות מגרה מבוצעות על ידי ממשק משתמש גרפי מותאם אישית.

הקלטה של אפנון של הפעילות פרוסות המוח מכרסמים מצמידים מערכים Microelectrode

Temporal lobe epilepsy (TLE) is the most common partial complex epileptic syndrome and the least responsive to medications. Deep brain stimulation (DBS) ...

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום הנוירומודולציה לטיפול באפילפסיה, כגון איזה אזור במוח ופרוטוקול גירוי מתאימים ביותר. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שפרוסות מוח של מכרסמים מייצגות מודל פשוט ומציאותי של מעגלי מוח בעוד שמערכי מיקרו-אלקטרודות מאפשרים נקודות תצפית מרובות במרחק ידוע בין אלקטרודות. להכנת ה-MEA, מורחים באופן שווה את חומר האיטום האלסטומרי על המשטח התחתון של תא ההקלטה, ומוודאים שאין בועות.לאחר מכן, הרכיב את תא ההקלטה על ה-MEA בעזרת פינצטה, והפעל לחץ עדין. מורחים שכבת איטום סביב הגבול החיצוני של תא ההקלטה. לאחר מכן, הנח את מכלול ה-MEA/תא בסביבה סגורה ולחה, ותן לו להתרפא בטמפרטורת החדר למשך הלילה.להכנת ספסל ההקלטה, הגדר את האמבטיה החמה ל-32 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, שפכו את ה- ACSF המחזיק לתאי האחיזה והחימום מראש. מבעבעים את התמיסות בתערובת של 95% חמצן ו-5% פחמן דו חמצני, ומסירים את כל הבועות הכלואות באמצעות פיפטה פסטר הפוכה.שמור את תא האחיזה בטמפרטורת החדר, והנח את תא החימום המקדים באמבטיה החמה. הכינו פרוסות מוח אופקיות של ההיפוקמפוס-קליפת המוח על פי נהלים סטנדרטיים, ותנו להן להתאושש בתא ההחזקה בטמפרטורת החדר למשך 60 דקות לפחות. יוצקים 4AP ACSF לתא דגירה.לאחר מכן, מבעבעים אותו בתערובת של 95% חמצן ו-5% פחמן דו חמצני, ומסירים את כל הבועות הכלואות באמצעות פיפטה פסטר הפוכה. לאחר מכן, מכסים את החדר ומעבירים אותו לאמבטיה החמה. ודא שטמפרטורות ה-ACSF וה-4AP ACSF המתחממות מראש הן 30 עד 32 מעלות צלזיוס.השתמש בפיפטה פסטר מזכוכית הפוכה כדי להעביר פרוסת מוח אחת לתוך תא החימום המקדים, ותן לרקמה לנוח במשך 25 עד 30 דקות. לאחר מכן, העבירו את פרוסת המוח לתא הדגירה 4AP ACSF, ותנו לה לנוח במשך 60 דקות. תן ל-4AP ACSF לזרום דרך צינור הזלוף לתוך עד שאין אוויר בפנים.לאחר מכן, הפסק את זרימת הפתרון. הנח את שבב ה-MEA היבש בתוך ה-MEA ampחיים יותר, ואבטח את ראש המגבר. לאחר מכן, השתמש בפיפטה פסטר מפלסטיק כדי להעביר 4AP ACSF למאגר הכניסה והיציאה של תא ההקלטה.אבטח את צינורית החימום למחזיק מגנטי, והנח את קצהו בתוך יציאת כניסת תא ההקלטה. לאחר מכן, חבר את המחזיק המגנטי לרצועה מגנטית על ראש המגבר MEA. חבר את צינור הזלוף לצינורית ואת הצינורית לתרמוסטט.לאחר מכן, הנח את מחט היניקה במאגר היציאה. ודא שיש לחץ שלילי על ידי טבילת מחט היניקה לתוך ה-ACSF, ובדוק אם יש רעש יניקה קבוע בתדר נמוך. לאחר מכן, הגדר את ווסת הזרימה כך שיאפשר קצב זרימה של מיליליטר אחד לדקה, והתחל לפענח.ברגע שה-4AP ACSF זורם דרך הצינורית, הפעל את התרמוסטט. הגדר את צינורית החימום ל-37 מעלות צלזיוס ואת בסיס ה-MEA ל-32 מעלות צלזיוס כדי להשיג טמפרטורה של 32 עד 34 מעלות צלזיוס בתוך תא ההקלטה. לאחר מכן, הנח את אלקטרודת הייחוס החיצונית במאגר כניסת תא ההקלטה.לאחר שרמת 4AP ACSF וטמפרטורת ההקלטה מתייצבים כרצונך, סובב את הזלוף ואת פקקי היניקה למצב כבוי כדי לעצור אותם באופן זמני. העבר במהירות פרוסת מוח אחת לתא ההקלטה של MEA באמצעות פיפטת פסטר מזכוכית הפוכה. התאם את מיקומו באזור ההקלטה של המזרח התיכון ואפריקה לפי הצורך באמצעות פיפטת פסטר מלוטשת ומסולסלת או מברשת רכה, קומפקטית וקטנה.הנח את עוגן ההחזקה על פרוסת המוח. הפעל מחדש את הזלוף והיניקה על ידי סיבוב פקקי העצירה שלהם בחזרה למצב מופעל. צלמו תמונה של פרוסת המוח באמצעות מצלמה המותקנת על במת מיקרוסקופ הפוכה.לאחר מכן, הפעל את הסקריפט mapMEA בתוכנת המחשב כדי להפעיל את ממשק המשתמש הגרפי כדי למפות את האלקטרודות. לחצו על כפתור העיון כדי לטעון את התמונה של פרוסת המוח. ודא שאלקטרודת הייחוס מופיעה בעמודה העליונה של חצי הצד השמאלי של ה-MEA.לאחר מכן, לחץ על הלחצן Activate Pointer. בחר את האלקטרודות העליונות והתחתונות בעמודה השמאלית ביותר של המערך כדי לסמן את קואורדינטות ה-XY ליישור תמונה ומיפוי אלקטרודות. מהתפריט הנפתח סוג פרוסה, בחר אופקי.סמן את תיבת הסימון מבני ברירת מחדל. באמצעות הכפתורים הממוספרים מתחת לתמונת פרוסת המוח, בחרו את האלקטרודות שמתאימות להחזר ההשקעה, ולחצו על הכפתורים המתאימים בלוח המבנה כדי להקצות אותן. חזור על שלב זה עבור כל החזר על ההשקעה.לאחר מכן, לחץ על כפתור שמור. התוכנה תיצור תיקיית תוצאות המכילה טבלה המדווחת על האלקטרודות והחזר ה-ROI שנבחרו. למחקר אלקטרופיזיולוגיה, הפעל את יחידת הגירוי לפחות 10 דקות לפני פרוטוקול הגירוי כדי לאפשר כיול וייצוב עצמי.לאחר מכן, הפעל את תוכנת בקרת הגירוי, וודא שהסטימולטור ומגבר MEA מחוברים כהלכה, כפי שמצוין על ידי נורית ירוקה בפאנל הראשי של תוכנת בקרת הגירוי. הגדר את הגירוי בתצורה דו קוטבית. חבר את יחידת הגירוי לקרקע.לאחר מכן, חבר את זוגות האלקטרודות במגע עם שכבת התאים הפירמידלית של ה-CA1/subiculum הפרוקסימלי בין אלה הממופים עם ה-script mapMEA. כדי להשיג נתונים, לחץ על כפתור ההפעלה בלוח הראשי של תוכנת ההקלטה. רשום לפחות ארבע הפרשות איקטליות.לאחר מכן, הפעל בדיקת קלט/פלט מהירה כדי לזהות את עוצמת הגירוי הטובה ביותר. לשם כך, השתמש בפאנל הראשי כדי לתכנן דופק זרם חיובי-שלילי דו-פאזי מרובע עם משך של 100 מיקרו-שניות לשלב. בלשונית משרעת הדופק, הזן משרעת דופק ראשונית של 100 מיקרו-אמפר לשלב.הגדר את דופק הגירוי ל-0.2 הרץ או נמוך יותר על ידי הוספת מרווח בין פולסים של חמש שניות או יותר. הגדל את משרעת הגירוי ב-50 עד 100 צעדים של מיקרו-אמפר בכל ניסוי עד שהגירוי יכול לעורר באופן אמין אירועים דמויי אינטריקטל בקליפת המוח הפרה-היפוקמפוסית. לאפנון חשמלי של איקטוגנזה לימבית, תכנת את יחידת הגירוי לספק את פרוטוקול הגירוי המעניין, והשתמש במשרעת הגירוי שזוהתה במהלך בדיקת הקלט/פלט.לאחר הפסקת הגירוי, ודא את התאוששות הרשת למצב שלפני הגירוי על ידי רישום לפחות ארבע פריקות איקטליות. איור זה מציג את ההקלטות של פעילות ictal הנגרמת על ידי 4AP בקליפת המוח האנטורינלית ובקליפת המוח הפרירינלית במהלך מצב הבקרה, קצב תקופתי בהרץ אחד, ובמהלך ההתאוששות עם נסיגת הגירוי. גרף זה מציג את כימות ההשפעה של קצב תקופתי בהרץ אחד, מה שמצביע על הפחתה משמעותית של זמן ההצמדה הכולל במהלך הגירוי.לאחר שליטה, ניתן לבצע טכניקה זו תוך שלוש עד ארבע שעות אם היא מבוצעת כראוי. בזמן ניסיון הליך זה, חשוב לזכור למקם במהירות ובצורה נכונה את פרוסת המוח על ה-MEA. בעקבות הליך זה, ניתן לבצע שיטות אחרות כמו מניפולציה פרמקולוגית על מנת לענות על שאלות נוספות לגבי תרומתם של נוירוטרנסמיטורים או תעלת יונים לפעילות אפילפטית ולהשפעה של נוירומודולציה.לאחר פיתוחה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום מדעי המוח לחקור אינטראקציה של רשתות עצביות בבריאות וחולי בנוירון מתורבת כמו גם בפרוסות מוח. לאחר צפייה בסרטון זה, אתם אמורים להבין היטב כיצד לתעד ולווסת חשמלית את הפעילות האפילפטית הנגרמת על ידי ארבעה אמינופירידינים בפרוסות מוח של מכרסמים בשילוב עם MEAs.

recording-modulation-epileptiform-activity-rodent-brain-slices

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

סרטון זה מתאר את הטכניקה לרישום הפעילות האפילפטיפורמית של פרוסות אורגנוטיפיות של קליפת המוח הרינלית-היפוקמפוס ex vivo באמצעות אלקטרופיזיולוגיה או הגדרת EEG. זה עוזר ללמוד את הדינמיקה וההתקדמות של אפילפטוגנזה ולסנן מטרות טיפוליות פוטנציאליות לטיפול באפילפסיה.

טכניקת הקלטה מבוססת אלקטרואנצפלוגרפיה לתיעוד הפעילות האפילפטיפורמית

פרוטוקול זה כולל שימוש במערך מיקרואלקטרודות (MEA) כדי לרשום פעילות חשמלית בפרוסת מוח שנחשפה לתרופה הגורמת להתקפים. ההליך כולל מיקום פרוסת המוח בתא הקלטה MEA, הפעלת גירוי חשמלי כדי לגרום להתקפים מלאכותיים, וניתוח האותות המתקבלים.

ניטור פעילות חשמלית עצבית הנגרמת על ידי פרכוסים בפרוסות מוח באמצעות מערכי מיקרואלקטרודות

סרטון זה מדגים שיטה להקלטת EEG ברזולוציה גבוהה במודל חולדה של אפילפסיה מוקדית. הוא מתאר את השלבים הכרוכים בהכנת החולדה, חיבור מיני-כובע EEG רב-ערוצי לקרקפת של החולדה, ורישום ה-EEG כדי לזהות אירועים הקשורים להתקפים האופייניים למודל האפילפסיה.

רישום אלקטרואנצפלוגרפיה במודל חולדה של אפילפסיה מוקדית

סרטון זה מדגים רישום אלקטרואנצפלוגרפי (EEG) של התקפים אפילפטיים בחולדות המושרות על ידי אפילפסיה. חולדה עם אלקטרודות שהושתלו בהיפוקמפוס הגחוני מחוברת למערכת רישום EEG וממוקמת בתא פרספקס. החולדה מורשית לנוע בחופשיות בזמן שפעילות המוח נרשמת כדי לעקוב אחר התרחשות ההתקפים.

רישום אלקטרואנצפלוגרפי של התקפים אפילפטיים בחולדות המושרות על ידי אפילפסיה

סרטון זה מדגים את השראת אירועי ictal בפרוסות קליפת המוח העטרה מעכבר טרנסגני המבטא תעלות קטיון המופעלות על ידי אור בנוירונים פירמידליים מעוררים בקליפת המוח. הפרוסה מונחת בתא הקלטה, ואלקטרודת הקלטה מוכנסת לשכבת קליפת המוח השטחית. עם זלוף עם תרופה הגורמת להתקפים החוסמת תעלות אשלגן, הנוירונים הופכים למעוררי יתר ומייצרים אירועים איקטליים ספונטניים. כדי ליצור אירועים איקטליים לפי דרישה, נעשה שימוש בפולס אור קצר להפעלת תעלות הקטיונים בנוירונים פירמידליים, מה שמפעיל שחרור של נוירוטרנסמיטורים מעוררים,...

יצירת אירועי ictal ספונטניים ולפי דרישה בפרוסות קליפת המוח של עכבר

אנחנו כאן מתארים כיצד לבצע הקלטות מערך רב-אלקטרודה של רקמת קליפת המוח אפילפסיה אנושית. כריתת אפילפסיה רקמה, הכנת פרוסה ומערך רב-אלקטרודה הקלטות של אירועי interictal וictal הם הפגינו בפירוט.

הקלטות מערך רב-אלקטרודה של רקמה האנושית אפילפטיים לאחר הניתוח בקליפת המוח

מחקרים הראו שגירוי זרם ישר טרנס-גולגולתי קתודלי יכול לייצר השפעות מדכאות על התקפים עמידים לתרופות. במחקר זה, תוכנן מערך ניסוי במבחנה שבו הוערכו גירוי הזרם הישר ורישום מערך מרובה אלקטרודות של פעילות דמוית התקף בהכנת פרוסות מוח של עכברים. פרמטרי הגירוי בזרם ישר הוערכו.

גירוי ישיר שוטף הקלטת מערך רבה-אלקטרודה של פעילות כמו-תפיסת עכברי הכנת פרוסת המוח

הפרוטוקול מתאר את המתודולוגיה של רישום חוץ-תאי בקליפת המוח המוטורית (MC) כדי לחשוף תכונות אלקטרופיזיולוגיות חוץ-תאיות בעכברים מודעים הנעים בחופשיות, כמו גם ניתוח נתונים של פוטנציאלי שדה מקומיים (LFPs) וקוצים, אשר שימושי להערכת הפעילות העצבית ברשת העומדת בבסיס התנהגויות מעניינות.

הקלטה חוץ-תאית רב-ערוצית בעכברים הנעים בחופשיות

כאן, אנו מתארים פרוטוקול לשימוש במערכות משלימות של מערך מיקרואלקטרודות בצפיפות גבוהה של תחמוצת מתכת מוליכים למחצה (CMOS-HD-MEAs) כדי לתעד פעילות דמוית התקף מפרוסות מוח ex vivo .

פעילות דמוית פרכוסית באיכות גבוהה מפרוסות מוח חריפות באמצעות מערכת משלימה של מערך מיקרואלקטרודות בצפיפות גבוהה של מתכת-תחמוצת-מוליכים למחצה

פרוטוקול זה נועד להרכיב ביציבות מכלולים מאוחים גביים-גחונים על מערכים מרובי אלקטרודות לצורך מידול אפילפסיה במבחנה.

פלטפורמה מרובת אלקטרודות למידול אפילפסיה באמצעות מכלולי מוח פלוריפוטנטיים אנושיים שמקורם בתאי גזע

פרוטוקול זה פותח כדי ליצור מערכת אמינה ונגישה לרישום EEG של מכרסמים הנעים בחופשיות.

פרוטוקול חסכוני וזעיר פולשני לרישום אלקטרואנצפלוגרפיה כרונית מרובת אתרים בעכברים הנעים בחופשיות

למדו שיטה להקלטת ואפנון פעילות אפילפטית בפרוסות מוח מכרסמים באמצעות מערכי מיקרואלקטרודות. השיטה מאפשרת מיפוי אלקטרודים בזמן אמת ואופטימיזציה של פרוטוקולי גירוי לטיפול באפילפסיה.

הקלטה של אפנון של הפעילות פרוסות המוח מכרסמים מצמידים מערכים Microelectrode

גלה סרטונים נוספים