2 ביולי 2018
אוטם אקוטי בעכברים גורם לשינויים חריפה אבל שהיישום מאופיין הפונקציה left (LV) חדרית. צנתור LV בעכברים שעברו עורקים סגר משמשת שיטה עבור הערכה בזמן אמת של LV פונקציה.
שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום המחקר הקרדיווסקולרי כגון זיהוי מנגנוני הגנה מוקדמים בהפרעה חריפה של שריר הלב. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שניתן לבצע אפיון המודינמי מתקדם בזמן אמת בעכברים העוברים אוטם שריר הלב ואחריו רפרפוזיה. אינטובציה אנדוטרכיאלית וניתוחי רפרפוזיה איסכמיה יבוצעו על ידי פיה סטוק, ביולוגית מהמעבדה שלנו.
לאחר הרדמת החיה, הסר את שיער הצוואר והחזה באמצעות קוצץ חשמלי. לאחר מכן, נקו את העור עם שלושה קרצוף לסירוגין של בטדין ו-70% אלכוהול. כעת, בעזרת מספריים כירורגיים קטנים, בצע חתך חציוני אורכי של 10 מילימטר חמישה מילימטרים מתחת לשפה התחתונה ולכיוון עצם החזה.
לאחר מכן, נתח בצורה בוטה את החלק השמאלי והימני של הבלוטה התת-לסתית באמצעות מלקחיים. לאחר מכן, הפרד את רקמת השריר והשומן באזור קנה הנשימה הימני כדי לגשת לעורק המושחת הימני. בעזרת מלקחיים מעוקלים, נתחו בזהירות את הכלי כדי לגייס ולהפריד חמישה עד 10 מילימטרים ממנו.
הימנע תמיד מהזזת עצב הנרתיק בגוף המושחת, מכיוון שהדבר עלול להוביל ליתר לחץ דם חמור וברדיקרדיה. לאחר גיוס הכלי, העבירו את שני תפרי המשי המוכנים 5/0 מתחת לכלי. לאחר מכן קשרו את הכלי הדיסטלי באמצעות קשר הדוק, והניחו קשר רופף על התפר הפרוקסימלי שאליו יגיע הקטטר.
לאחר מכן, הנח מהדק כלי דם המוסטט בקצה הפרוקסימלי של הכלי החשוף, פרוקסימלי לתפר. זה ישמש לחסימת זרימת הדם באופן הפיך. כעת, בעזרת מספריים, פתח את הכלי עם החתך בצורת טריז מילימטר אחד קרוב לקשר הגולגולת.
יש לראות טיפת דם קטנה. לאחר מכן, מתחו את החתך והכניסו את הקטטר 10 מילימטרים לתוך הכלי. כעת, התחל לרשום את הנתונים שנאספו על ידי בדיקת הצנתר.
לאחר מכן, חלץ את מהדק כלי הדם, ולאחר מכן הוסף טיפה אחת או שתיים של מי מלח לתוך החתך כדי לעזור להחליק את הקטטר עוד 10 מילימטרים במורד הכלי. לאחר מכן, הדק את הקשר כדי למנוע ריפלוקס דם לצד הצנתר מבלי לנעול את הקטטר במקומו. כעת, המשך בעדינות לקדם את הצנתר עד שניתוח הלחץ יראה פרופיל לחץ דם עורקי כאשר הצנתר הגיע לאבי העורקים.
בשסתום אבי העורקים יש להרגיש גם התנגדות אור ותנועה מסונכרנת במשיכה. כאשר מנסים לקדם את הקטטר דרך המסתם האאורטלי, זה יכול לעזור למשוך אותו לאחור חמישה מילימטרים ולהתקדם שוב. צנתור תקין של החדר השמאלי יצוין על ידי שינוי בלחץ הדיאסטולי.
כל שינוי בנפח הוא גם אינדיקטור לקידום החיישן לחדר השמאלי. ברגע שאתה בטוח שהקטטר נמצא בחדר השמאלי, הדק את הקשר הפרוקסימלי חזק יותר כדי למנוע ממנו לזוז. לאחר הצנתור, הכינו את האיסכמיה של 45 דקות.
ראשית, חתכו את העור מעצם החזה הזנבית לבית השחי השמאלי. לאחר מכן המשך בהכנה הבוטה של שתי שכבות השרירים כדי לחשוף את הצלעות. לאחר מכן, פתח את בית החזה עם חתך בין הצלע השמאלית השלישית לרביעית.
השתמש בווים כירורגיים כדי לגשת לקרום הלב, ולאחר מכן כרת את קרום הלב המכסה את הלב. לפני שתמשיך עם קשירת העורקים הכליליים הראשיים השמאליים, המתן 30 שניות מבלי לגעת בבעל החיים כדי לתעד נתוני לחץ ונפח לניתוח תקף. כעת, זהה את העורק הכלילי הראשי השמאלי.
הוא יוצא מתחת לאורקל השמאלי ויורד בצד שמאל של הלב לכיוון הקודקוד. לאחר מכן, לולאה תפר פוליפרופילן 6/0 סביב העורק שני מילימטרים מתחת לאורקל השמאלי. לאחר מכן, הניחו צינור סיליקון קטן מתחת ללולאה ואבטחו אותו בעזרת קשר.
אם שריר הלב הדיסטלי מתחיל להאפיר, אז העורק הכלילי הראשי השמאלי נסגר. כדי להמשיך, חתוך את התפר באורך מילימטר אחד, ולאחר מכן שחרר את הווים הכירורגיים וסגור ידנית את שכבות השריר מעל החתך. לאחר מכן המתן 45 דקות תוך רישום רציף של נתוני לחץ ונפח.
לאחר 45 דקות, פתח מחדש את החתך והסר את צינור הסיליקון כדי לגרום לזלוף מחדש. לאחר מכן הקלט נתונים למשך 20 דקות נוספות. כאשר הלב חוזר להיות אדום, הרפרפוזיה מצליחה.
לאחר תקופת הרפרפוזיה, שחרר את הקשר והוציא את הקטטר תוך הידוק מהיר של הקשר שוב כדי למנוע אובדן דם אם יש צורך בדם למחקרים נוספים. לאחר השלמת שלבי הכיול, המפורטים בפרוטוקול הטקסט, בצע ניתוח נתונים מונחה תוכנה. עבור נתוני הבסיס, הדגש לפחות 10 מחזורים שצולמו לפני מעבר הקטטר למסתם אבי העורקים.
לפי הצורך, אל תכלול מחזורים עם סטיות עקב אוורור או מניפולציה. לאחר מכן, נתח 10 בלוקים של מחזור במרווחים של חמש דקות דרך האיסכמיה והרפרפוזיה. הפרמטרים השונים המחושבים בניתוח זה מספיקים לאפיון תפקוד החדר השמאלי.
בסיום הניסוי, לאחר שהקטטר נסוג מהחדר השמאלי, בצע ניתוח סופי של נתוני הלחץ. בעקבות הפרוטוקול, לאחר צנתור החדר השמאלי, בוצעה קשירת עורק כלילי ראשי שמאלי הפיכה למשך 45 דקות ואחריה 20 דקות של רפרפוזיה. מיקום נכון של צנתר הנפח והלחץ אושר על ידי קבלת גרף הלחץ-נפח האופייני לחדר השמאלי.
חסימה מוצלחת של העורק הכלילי הראשי השמאלי אושרה ויזואלית על ידי הלבנה של שריר הלב של החדר השמאלי הדיסטלי. לאחר חסימת העורק הכלילי הראשי השמאלי, נותחו נתוני לחץ ונפח במרווחים של חמש דקות. נתוני הלחץ לא הראו שינויים בלחץ הסיסטולי המקסימלי של החדר השמאלי, מה שמעיד על זלוף היקפי משומר והרדמה יציבה.
ניתוח נפח החדר השמאלי גילה כי בשלב המוקדם של האיסכמיה, חלה ירידה משמעותית במקטע הפליטה ובנפח השבץ המוחלט. השינוי המקסימלי בלחץ, פרמטר של התכווצות החדר השמאלי, הראה ירידה של 30% בעכברים שעברו איסכמיה של שריר הלב. השינוי המינימלי בלחץ ירד משמעותית גם כן, מה שמצביע על פגיעה בהיענות החדר השמאלי.
לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לאפיין את התפקוד הסיסטולי והדיאסטולי של החדר השמאלי בעכברים העוברים אוטם שריר הלב החריף באמצעות טכניקת קטטר נפחי לחץ.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
מאמר זה דן בשיטה חדשנית להערכה בזמן אמת של תפקוד החדר השמאלי בעכברים העוברים אוטם שריר לב חריף. הטכניקה מאפשרת אפיון המודינמי מתקדם במהלך איסכמיה וreperfusion.
ניתוח לחץ-נפח בזמן אמת מאפשר הערכה המודינמית ישירה במודלים עכבריים של אוטם שריר הלב חריף, ובכך נותן מענה לפער קריטי במחקר קרדיווסקולרי פרה-קליני. גישה זו תומכת בהפחתת סיכונים מכניסטית של אסטרטגיות להגנה על הלב, על ידי אספקת נתונים כמותיים בזמן אמת על תפקוד סיסטולי ודיאסטולי במהלך איסכמיה וריפרופוזיה. השיטה מגבירה את הביטחון הניבוי בשלבי הגילוי המוקדמים, על ידי קישור בין תוצאות תפקודיות לבין התערבויות טיפוליות במערכת הרלוונטית למחלה.
השיטה משתלבת ברצף הגילוי, החל מאישוש מטרות מוקדם ועד לבדיקות יעילות פרה-קליניות, ומספקת גשר כמותי בין המנגנון המולקולרי לבין התפקוד ברמת האיבר במודלים של מחלה איסכמית של הלב.