Name: והרצתי ניתוח של ליקויים מוטוריים תלויי-גיל בעכברים עם הקשורים ניוון מוחיים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-18T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 46 s
Description: למד ניתוח הליכה קינמטי בעכברים לחקר ניוון מוחי ותפקוד מוטורי. שיטה זו מאפשרת לעקוב אחר ליקויים מוטוריים עדינים וחמורים ולהבין את התקדמות המחלה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנו מודים המטפלות בבעלי חיים-מתקן בעלי חיים של ENI לעזרה עם רבייה, ד ר Raimundo נונו להערות שימושי על כתב היד. I.M. נתמך על-ידי המענקים של הגרמני מחקר קרן (DFG) דרך מרכז מחקר משותף SFB-889 (פרוייקט A8) ו- SFB-1190 (פרוייקט P02), פרס החוקר הצעיר את אמי נתר (1702/1). C.M.R. נתמך על ידי המשפחה מבית הספר בוגר גטינגן עבור מדעי המח, ביופיסיקה מולקולרית החיים (GGNB).

כל הניסויים דיווחו כאן מתנהלים על פי הנחיות האירופי לרווחת בעלי חיים (2010/63/האיחוד האירופי) באישור und Niedersächsisches Landesamt Verbraucherschutz לדנציג, או Lebensmittelsicherheit (LAVES), רישום מספר 14 / 1701.
1. ללמוד עיצוב
<ol><li>כמו התנהגות בעלי חיים עבודה דורש תכנון קפדני, שקול את הפרמטרים הבאים בעת תכנון הניסוי.<ol>
<li>מספר בעלי החיים זקוקים לכל קבוצה.<ol>
<li>השתמש תוכנה סטטיסטית (למשל, המעבר, ה-EDA או GPower) כדי לחשב את גודל הקבוצה הנדרשת. הערה: גודל הקבוצה תלויה וריאציית בין חומרת פנוטיפ בעלי חיים. לניתוח הילוך קנטית, המספר של עכברים הוא בדרך כלל 10-20 לכל קבוצה.</li>
		</ol>
</li>
		<li>סקס חיות ניסיוני.<ol>
<li>קח בחשבון את ההשפעה של רמות האסטרוגן על הניסוי, בהתאם המתח בעלי חיים. הערה: התנהגות מחקרים רבים מתמקדים הזכרים כדי למנוע את השפעת רמות האסטרוגן על הניסוי. השפעות אלו חזקים יותר או פחות בהתאם המתח רקע בעלי חיים.</li>
			<li>אם ייעשה שימוש משני המינים, לבדוק את השפעת סקס והערכת שני המינים באופן עצמאי בעת הצורך.</li>
		</ol>
</li>
		<li>גיל חיות ניסוי.<ol>
<li>להשתמש בבעלי חיים למבוגרים (2 חודשים, ומעלה) אם רק נקודת חד פעמי יש צורך.</li>
			<li>בחר במספר נקודות זמן כאשר שינוי בהתנהגות מוטורית עם הגיל שילמדו. הנקודה האפשרי המוקדם ביותר היא 1 החודש, לאחר נגמלים עכברים מאימותיהם. לבחון את החיות במרווחי זמן קבועים, למשל כל 1, 2, או 3 חודשים.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>לבקש אישור מהרשויות לבצע בדיקת התנהגות בעלי חיים.</li>
	<li>להכין תכניות ברכישת מבעלי החיים.<ol>
<li>נכין תוכנית רבייה או פנה למפיץ של בעלי חיים מבעוד כך מספיק חיות ניסוי יהיו זמינות ביום מתי להתחיל הניסויים.</li>
		<li>אפשר, לחיות habituate לשבוע אחד אם הם שמרו על חדר/הגדרה חדשה במהלך הניסויים.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. הקלטת וידאו
הערה: כדי להמחיש את השימוש קנטית והרצתי ניתוח, הנה מערכת הדמיה זמינים מסחרית עם הדמיה הנלווה, ניתוח תוכנה (ראה את הטבלה של חומרים) משמשים.
<ol><li>הפעל את המחשב ואת התוכנה imager.</li>
	<li>לקבוע את מצב בריאות ורווחה של כל בעל חיים על-ידי התבוננות אותו בכלוב שלה הביתה ולאחר שקילה על איזון.</li>
	<li>בעת הצורך, בעדינות להחיל גואש אדום על כפות רגליים של החיה עם מברשת. לאפשר לצבע להתייבש ~ 5 דקות בתוך כלוב נקי חילוף. הערה: להימנע ציור הבטן של החיה כפי הצבע משמש כדי לשפר את הניגודיות בין כפות הרגליים לבין הגוף. . זה שימושי שיהיה גואש שחור שימושי עבור תיקונים. צעד זה נדרש עבור חיות עם פרווה חומה, או במקרה כבר לקעקע את כפות רגליו לצורך זיהוי. אם נבחר כדי לצבוע את כפות רגליו של חיה אחת, כל החיות באותה קבוצה, קבוצת הביקורת צריך להיות צבוע גם כן.</li>
	<li>להגדיר את המהירות של ההליכון בלוח השמאלי העליון של המנגנון; אם אחד או יותר מהירות הריצה יוחלו, להתחיל עם המהירות האיטית ביותר תחילה.</li>
	<li>מקם את החיה בבית הבליעה מבחן (למנוע מחבר חובק למעקה את הזנב או כפות רגליים, בעת סגירת החדר). לכסות את התא עם מטלית כהה ולאפשר כל בעל חיים להתאים למשך 1-2 דקות.</li>
	<li>להדליק את האור בחדר הבדיקה על-ידי הפעלת מתג רוטרי האור הליכון למיקום "על". תלחץ על המתג רוטרי ההליכון כדי "להעביר" נתחיל את ההליכון, ולאחר מכן לחץ על לחצן "שיא" בתוכנה imager. הערה: בעת הפעלת ההליכון, זה חשוב לבחון ביצועים חיים בזהירות ובעקביות: לעצור את ההליכון מיד אם החיה יכול להדביק המהירות על ההליכון, או מראה סימפטומים משניים שאינם קשורים גפיים (למשל, התקפים אפילפטיים). תנאי הבחינה ייתכן שתצטרך להיות והשתלב.</li>
	<li>כאשר החיה פועל stably (בריחה לא מהירה הצדדים, הקדמי או האחורי), שיא לפחות 5 s לפני העצירה ההליכון. לעצור את ההקלטה על ידי לחיצה על "stop" על התוכנה imager והפעל הבורר רוטרי הליכון בחזרה למיקום "off". הערה: כדי למנוע לא יציבה של חיות זה יכול להיות מועיל כדי לתת להם לרוץ למשך מספר שניות, או כדי לאפשר להן לפעול בכיוון ההפוך (על-ידי הפעלת המתג רוטרי הליכון "להפוך" במקום "קדימה").</li>
	<li>לחץ על לחצן "עיבוד" בתוכנה imager כדי לפתוח תפריט שבו ההתחלה ונקודת הסיום של מקטע וידאו (כדי לשמש לניתוח) ניתן להגדיר. כדי לעשות זאת, השתמש במחוון על החלק התחתון של המסך כדי לנווט הוידאו.</li>
	<li>כדי לבחור את נקודת הזמן הנוכחית התחלה או נקודת סיום, לחץ על "מתוך מסגרת #" ו- "אל", בהתאמה. ודא שהמקטע מכיל לפחות 7 שלבים/כפה (14 שלבים בסך הכל) של החיה פועל stably במהירות קבועה.</li>
	<li>הזן את זיהוי בעלי חיים, תאריך לידה, משקל, סקס. לשמור את הנתונים במיקום הרצוי במחשב או בשרת. לחץ על "מצלמה' כדי לחזור אל הממשק הקלטה.</li>
	<li>אם מספר מהירויות הריצה צריך להיות מוקלט, חזור על שלבים 2.6-2.10 עם המהירויות פועל הרצוי. לפני הקלטת הווידאו הבא, ודא כי הצבע האדום קיים עדיין הכפה, אחרת וחזור על שלב מספר 2.3.</li>
	<li>לאחר ההקלטה, לשחרר את החיה לכלוב שלה הביתה. לאחר הסרת חיה, לנקות את החגורה הליכון ביסודיות עם סבון ומים ואחריו מחטא כדי להכין אותו לבעל ניסיוני הבא.</li>
</ol>3. עיבוד וידאו
<ol><li>לחץ על "בחר ללמוד תיקיה" ומתחילים את תוכנת ניתוח כדי לבחור את התיקיה עם קטעי וידאו מוקלט.</li>
	<li>בחר וידאו אחד או כמה קטעי וידאו ניתן לעבד ברציפות, ולחץ על "לך".</li>
	<li>השתמש בפונקציה "אישורים" כדי לבחור את האזור שבו העכבר מופעל; סעיף זה צריך להכיל רק העכבר על רקע לבן.</li>
	<li>אם הפונקציה הליכון "לאחור" שימש בעבר, לבחור "לבדוק אם האף של הנבדק ימינה >>>" לשקף את הוידאו מאז התוכנה נועד רק לנתח חיות רץ שמאלה. לחץ על "מקבל" כדי להמשיך.</li>
	<li>השתמש בפונקציה "רענון" כדי לראות את המסכה ברירת המחדל, כף של הדפסה שמזהה התוכנה. הערה: הסרטון המקורי מוצגת משמאל, תמונת שחור-לבן של עקבות המוצע הוא בצד הימין.</li>
	<li>הזינו ערכים בתיבות "משך" ו- "רוחב" כדי לשנות את המסכה שתואמות את האזור אדום סביב החוטם של החיה לניתוח; כמו הצבע דומה הידיים, לא מטשטשים את האזור הזה עלול לגרום לתוכנה בטעות סיווג מאזור כמו כפה.</li>
	<li>להתאים את המחוונים "מסנן רעש" ואת "לסנן פרווה ותיקוני כהה" כדי למטב את טביעת כף היד בשחור-לבן. הגדר את המחוון "לסנן את הרעש" ~ 800-950 לבעלי שחור וכדי ~ 700-800 לבעלי חום או לבן, בהתאם לצבע הפרווה המדויק של החיה. בחר "אישור" כאשר ההגדרות אינן משביעות רצון. הערה: המחוון "לסנן פרווה ותיקוני כהה" תלוי על איך "אדום" הכפה הוא. עבור כפות רגליים מצוירים, הערך הוא בדרך כלל בסביבות 100-120, ועל כפות שאינו צבוע התמורה הטובה ביותר היא בסביבות 50-100. הגדרות אלה תלויים מיריעות צבע פרווה, כפות רגליים, ויש צורך להיות ממוטבים עבור כל בעל חיים. הדפסה בשחור-לבן הכפה צריך להיות ברור ייצוגים של הכפות עם כמו רעש רקע קטן ככל האפשר.</li>
	<li>בחר אחד או כמה סרטונים שעברו ההתאמה הראשונה (המסומנת "@ @" לפני שם וידאו) ובחר בפונקציה "ללכת" כדי להפעיל הניתוח של סרטי הווידאו האלה. הערה: הניתוח לוקח 2-5 דקות לכל הסרטונים. זה אפשרי להפעיל הניתוח של כמה קטעי וידאו בן לילה מאז שלב זה דורש קלט מהמשתמש הנסיין.</li>
	<li>בחר סרט שנותחה (המסומנת "@ @ @") ולחץ על "לך". שימו לב כי כעת ניתן לראות כפת באזור (ס מ2) בקשר עם החגורה לאורך זמן (הילוך dynamics) עבור כל כפת נפרדים. כדי להשוות את הווידיאו המקורי, להדפיס אזור נבחר הכפה מחושב, השתמש בפונקציה "משחק וידאו".</li>
	<li>השתמש בכלים הבאים (3) לתיקון שגיאות קטנות שנעשו על ידי התוכנה.<ol>
<li>השתמש באפשרות "הנכונה" למחוק אות רע, למשל, כאשר התוכנה רשומות אות למרות הכפה המקביל אינו במגע עם החגורה. לחץ פעם אחת כדי להתמקד באזור הרלוונטי, ולסמן הגבול הימני של האובייקט כדי להסיר עם והלחיצה השניה ואת הגבול הימני עם לחץ השלישי.</li>
		<li>השתמש באפשרות "התחבר" כדי לשלב את שני אותות, למשל, כאשר אין אות נרשם עבור מסגרות מספר למרות הכפה נמצא בקשר עם החגורה. לחץ פעם אחת כדי להתקרב לאזור הרלוונטיים ולחץ פעמיים באמצע שני העצמים לשלב.</li>
		<li>השתמש באפשרות "מחק" כדי להסיר נקודות זמן הניתוח לחלוטין. השתמש באפשרות זו רק אם שאי אפשר לתקן את הטעות עם "נכונה" או "התחבר" פונקציה, למשל, כאשר אות מ הכפה forelimb השמאלי נרשם בטעות עבור הכפה הגפיים האחוריות השמאלי. לחץ פעם אחת כדי להתמקד באזור הרלוונטי, ולסמן על הגבול השמאלי של אזור כדי להסיר עם והלחיצה השניה ואת הגבול הימני עם לחץ השלישי. הערה: הכלים ניתן להשתמש רק לתקן טעות קטנה; כשלים שיטתיים (למשל, אם האות מ כפת אחד היה מאוד חלש) אפשר לתקנו: הוידאו לא להיות כלולים ניתוח וחזר ההקלטה של החיה בהתאמה, כאשר הדבר אפשרי. שים לב כי האפשרות "משחק וידאו" הוא כבר לא זמין לאחר "הנכון", "חבר", או באפשרות "מחק" שימש ולאחר לחיצה על כפתור "בטל" יאפס את כל 3 כלי עריכה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>בחר "האיבר הבא" כדי להמשיך דרך 4 הגפיים; בעת לחיצה על "האיבר הבא" לאחר שעבר הכפה, התוכנה משלימה את הניתוח, מציגה את התוצאות עבור החיה הזאת על מסכי 4.</li>
</ol>4. והרצתי ניתוח
<ol><li>כאשר מאבחנים כל קטעי וידאו מניסוי אחד, בחר כל קטעי הווידאו ולחצו "לארגן מחדש תוצאות" לייצא את התוצאות (רשימה של פרמטרים בגליונות אלקטרוניים).</li>
	<li>פתח את הקובץ עם סיום "reorganized_stride_info" ולהוסיף מידע שלא נכלל בגיליון הזה: לקבץ מידע (למשל, גנוטיפ, טיפול), ויש את המידות של בעלי חיים אורך ורוחב הנשמרים באחרת קובץ הגיליון האלקטרוני עם סיום "SFI_TFI_PFI_reorganized_stride_info."</li>
	<li>לנרמל את הפרמטרים הילוך בעלי רוחב או אורך במידת הצורך, למשל, SL אורך חיים, SW לרוחב בעלי חיים.</li>
	<li>מיון תוצאות לפי קבוצת גיל, מהירות הריצה: לנתח בכל התנאים הללו באופן עצמאי. הערה: בגילאים שונים או מהירויות הפעלה אין אפשרות לשלב בתוך אותה קבוצה.</li>
	<li>לחשב את הממוצע (ממוצע), סטיית תקן, וערכים שגיאת התקן של הממוצע עבור כל פרמטר עבור כל תנאי הניסוי.</li>
	<li>לבצע ניתוח סטטיסטי לפי הדגם ניסיוני, למשל, להשתמש 2-זנבי t-test כדי להשוות חשבונאי/מטופלים בעלי חיים פראי-סוג (WT) / פקד או ANOVA כדי להשוות בין מספר קבוצות עצמאית.</li>
	<li>תראה בכלל למדוד פרמטרים: זה עוזר להתוות כל פרמטר כדאי להמחיש את התוצאות. אם יש הבדלים סטטיסטיים בפרמטר נתון, בדוק אם שאר הפרמטרים התלויים לשנות בהתאמה. הערה: לדוגמה, אם SL הוא ירד באופן משמעותי ב קבוצת בדיקה מסוימת, זה גם יגרום פסיעה תדר גבוה יותר (שכן מהירות הריצה זהה) עלולה לגרום SW מוגברת (כדי לשמור על יציבות יציבה).</li>
	<li>בחר הפרמטרים הרלוונטיים ביותר עבור מודל, ו/או דומות תצפיות של המחלה האנושית. עבור מצגת, ליצור סרטי וידאו נציג עבור כל קבוצה ולהשלים אותם באמצעות גרפים המראים את המדידה עבור הפרמטרים הרלוונטיים, מאז שינויים הילוך עדין הם לעתים קרובות לא ברור מן קטעי וידאו.</li>
</ol>5. פתרון בעיות
הערה: בעלי חיים, במיוחד העכבר דגמים עם פנוטיפ חרדה, ייתכן קושי לבצע אפילו משימה פשוטה כמו ריצה על הליכון. להלן הצעדים שניתן לנקוט כדי רמות חרדה נמוכות יותר ולעודד ריצה.
<ol><li>Habituation ואכיפה חיובי.<ol>
<li>ב 2-3 ימים לפני המבחן הראשון, מקם את העכבר בבית הבליעה מבחן, לכסות את זה עם מטלית כהה, להשאיר את האור כבוי. תן את העכבר להסתגל לסביבה חדשה עבור ~ 5 דק צ'או הוספה או שוקולד/אגוז חמאה (למשל, נוטלה) לתא הניסוי כך עלול להיווצר קשר חיובי.</li>
	</ol>
</li>
	<li>אכיפה שליליות על ידי אוויר פחזניות/אחורי גבול.<ol>
<li>עכברים לא אוהב פחזניות אוויר או תנועה מאחוריהם, יפעל הרחק ההפרעה. להמריץ ריצה, השתמש פחזניות אוויר מתון, או הריתמיות של פס גמיש המהווה את הגבול האחורי של תא הבדיקה, כדי לעודד את העכבר לרוץ לכיוון החלק הקדמי של החדר הבדיקה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>ההתחלה איטית.<ol>
<li>בעת בדיקת מהירויות הפעלה, הליכון בקצב נמוך ומתחילים ואז לאט לאט להגדיל את מהירות הליכון לקראת בדיקת התנאי הרצוי.</li>
	</ol>
</li>
	<li>מזער את התנועה החופשית.<ol>
<li>אורך קאמרית מבחן הוא מוגבל על ידי שני ברים מתכווננת מלפנים ומאחור. אם חיים מבחן דוגל מהירות הריצה, אך לא פועלת בהתמדה, להגביל את אורך החדר לגרום להם לרוץ יותר יציב.</li>
	</ol>
</li>
	<li>אם המדידות הנ ל אינן מצליחות, להקליט פועל ביום הבא. אם החיה עדיין מסרב לפעול לאחר בדיקה על שלושה ימים, להקליט את זה כמו מציאת, אל תכלול את החיה לבדיקות נוספות. הערה: התוצאות של ניתוח הילוך תלויים הקלטת וידאו באיכות טובה. אין שום סיבה לשלול סרטונים במהלך הניתוח אם קטעי וידאו תועדו היטב. אם איכות הווידאו אינה מספיקה, זה יהפוך ברור במהלך שלב 3.6 כאשר הפרמטרים עבור היצירה של הדפס דיגיטלי כפת מוגדרות. אם כל חלק גוף אחר מלבד כפות הרגליים ואת האף מופיע אדום (למשל, בגלל הפרווה החסר סביב איברי המין או אצבע צבע שמקושט פה ושם במעט על הבטן), האיכות יורדת באופן משמעותי. ההתאמות בשלב 3.6 לאפשר תיקון בעיות קטנות בלבד, אם זה לא יכול להביא. את הוידאו יחס אות/רעש מקובל, הוידאו צריך ייכללו מניתוח, והוא הקלטה צריך להיות חוזרות ונשנות. לפיכך, מומלץ לנתח קטעי וידאו אחרי הקלטות מבוצעות.</li>
</ol>

<ol><li>Clarke, K. A., Still, lJ. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gait+analysis+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Gait analysis in the mouse.</a> Physiology and Behavior. 66, 723-729 (1999).</li>
<li>Kale, A., Amende, I., Meyer, G. P., Crabbe, J. C., Hampton, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethanol%27s+effects+on+gait+dynamics+in+mice+investigated+by+ventral+plane+videography%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol+Clin+Exp+Res%22%5BJournal%5D)">Ethanol's effects on gait dynamics in mice investigated by ventral plane videography.</a> Alcohol Clin Exp Res. 28 (2), 1839-1848 (2004).</li>
<li>Amende, I., Kale, A., McCue, S., Glazier, S., Morgan, J. P., Hampton, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gait+dynamics+in+mouse+models+of+Parkinson%27s+disease+and+Huntington%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroeng+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Gait dynamics in mouse models of Parkinson's disease and Huntington's disease.</a> J Neuroeng Rehabil. 25, 2-20 (2005).</li>
<li>Herbin, M., Hackert, R., Gasc, J. P., Renous, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gait+parameters+of+treadmill+versus+overground+locomotion+in+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Gait parameters of treadmill versus overground locomotion in mouse.</a> Behavioural Brain Res. 181 (2), 173-179 (2007).</li>
<li>Powell, E., Anch, A. M., Dyche, J., Bloom, C., Richtert, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+splay+angle%3A+A+new+measure+for+assessing+neuromuscular+dysfunction+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">The splay angle: A new measure for assessing neuromuscular dysfunction in rats.</a> Physiol Behav. 67 (5), 819-821 (1999).</li>
<li>Blin, O., Ferrandez, A. M., Serratrice, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+analysis+of+gait+in+Parkinson+patients%3A+increased+variability+of+stride+length%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Sci%22%5BJournal%5D)">Quantitative analysis of gait in Parkinson patients: increased variability of stride length.</a> J Neurol Sci. 98 (1), 91-97 (1990).</li>
<li>Švehlík, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gait+Analysis+in+Patients+With+Parkinson%27s+Disease+Off+Dopaminergic+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Phys+Med+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Gait Analysis in Patients With Parkinson's Disease Off Dopaminergic Therapy.</a> Arch Phys Med Rehabil. 90 (11), 1880-1886 (2009).</li>
<li>Roome, R. B., Vanderluit, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paw-dragging%3A+a+novel%2C+sensitive+analysis+of+the+mouse+cylinder+test%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Paw-dragging: a novel, sensitive analysis of the mouse cylinder test.</a> J Vis Exp. (98), e52701(2015).</li>
<li>Roiz Rde, M., Cacho, E. W., Pazinatto, M. M., Reis, J. G., Cliquet, A. Jr, Barasnevicius-Quagliato, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gait+analysis+comparing+Parkinson%27s+disease+with+healthy+elderly+subjects%5BTitle%5D)+AND+%22Arg+Neuropsiquiatr%22%5BJournal%5D)">Gait analysis comparing Parkinson's disease with healthy elderly subjects.</a> Arg Neuropsiquiatr. 68 (1), 81-86 (2010).</li>
<li>Wang, X. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assessment+of+gait+and+neurochemical+correlation+in+a+classical+murine+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Quantitative assessment of gait and neurochemical correlation in a classical murine model of Parkinson's disease.</a> BMC Neurosci. 13, 142(2012).</li>
<li>Lao, C. L., Kuo, Y. H., Hsieh, Y. T., Chen, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+and+subcutaneous+administration+of+dopamine+D3+receptor+agonists+functionally+restores+nigrostriatal+dopamine+in+MPTP-treated+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotox+Res%22%5BJournal%5D)">Intranasal and subcutaneous administration of dopamine D3 receptor agonists functionally restores nigrostriatal dopamine in MPTP-treated mice.</a> Neurotox Res. 24 (4), 523-531 (2013).</li>
<li>Zhao, Q., Cai, D., Bai, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selegiline+rescues+gait+deficits+and+the+loss+of+dopaminergic+neurons+in+a+subacute+MPTP+mouse+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Selegiline rescues gait deficits and the loss of dopaminergic neurons in a subacute MPTP mouse model of Parkinson's disease.</a> Int J Mol Med. 32 (4), 883-891 (2013).</li>
<li>Murdoch, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endophilin-A+deficiency+induces+the+FoxO3a-Fbxo32+network+in+the+brain+and+causes+dysregulation+of+autophagy+and+the+ubiquitin-proteasome+system%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Endophilin-A deficiency induces the FoxO3a-Fbxo32 network in the brain and causes dysregulation of autophagy and the ubiquitin-proteasome system.</a> Cell Rep. 17 (4), 1071-1086 (2016).</li>
<li>Dai, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progression+of+Behavioral+and+CNS+Deficits+in+a+Viable+Murine+Model+of+Chronic+Neuronopathic+Gaucher+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Progression of Behavioral and CNS Deficits in a Viable Murine Model of Chronic Neuronopathic Gaucher Disease.</a> PLoS One. 11 (9), e0162367(2016).</li>
<li>Szalardy, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lack+of+age-related+clinical+progression+in+PGC-1%CE%B1-deficient+mice+-+implications+for+mitochondrial+encephalopathies%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Lack of age-related clinical progression in PGC-1α-deficient mice - implications for mitochondrial encephalopathies.</a> Behav Brain Res. , 272-281 (2016).</li>
<li>Rustay, N. R., Wahlsten, D., Crabbe, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+task+parameters+on+rotarod+performance+and+sensitivity+to+ethanol+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Influence of task parameters on rotarod performance and sensitivity to ethanol in mice.</a> Behavioural Brain Research. 141 (2), 237-249 (2003).</li>
<li>Majdak, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+mouse+model+of+ADHD+for+medication+development%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A new mouse model of ADHD for medication development.</a> Sci Rep. 6, 39472(2016).</li>
<li>Ishige, A., Sasaki, H., Tabira, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+stress+impairs+rotarod+performance+in+rats%3A+implications+for+depressive+state%5BTitle%5D)+AND+%22Behavior%22%5BJournal%5D)">Chronic stress impairs rotarod performance in rats: implications for depressive state.</a> Behavior. (1-2), 79-84 (2002).</li>
<li>Fukui, D., Kawakami, M., Matsumoto, T., Naiki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+enhances+gait+disturbance+induced+by+lumbar+disc+degeneration+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22European+Spine+Journal%22%5BJournal%5D)">Stress enhances gait disturbance induced by lumbar disc degeneration in rat.</a> European Spine Journal. 27 (1), 205-213 (2017).</li>
<li>Stuart, S., Galna, B., Delicato, L. S., Lord, S., Rochester, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+and+indirect+effects+of+attention+and+visual+function+on+gait+impairment+in+Parkinson%27s+disease%3A+influence+of+task+and+turning%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Direct and indirect effects of attention and visual function on gait impairment in Parkinson's disease: influence of task and turning.</a> Eur J Neuroscience. 46 (1), 1703-1716 (2017).</li>
<li>Milosevic, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recruitment+of+endophilin+to+clathrin+coated+pit+necks+is+required+for+efficient+vesicle+uncoating+after+fission%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Recruitment of endophilin to clathrin coated pit necks is required for efficient vesicle uncoating after fission.</a> Neuron. 72 (4), 587-601 (2011).</li>
<li>Shi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+glutathione+S-transferase+pi+as+a+protein+involved+in+Parkinson+disease+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Identification of glutathione S-transferase pi as a protein involved in Parkinson disease progression.</a> Am. J. Pathol. 175 (1), 54-65 (2009).</li>
<li>Arranz, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LRRK2+functions+in+synaptic+vesicle+endocytosis+through+a+kinase-dependent+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">LRRK2 functions in synaptic vesicle endocytosis through a kinase-dependent mechanism.</a> J. Cell Sci. 128, 541-552 (2015).</li>
<li>Quadri, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutation+in+the+SYNJ1+gene+associated+with+autosomal+recessive%2C+early-onset+Parkinsonism%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Mutat%22%5BJournal%5D)">Mutation in the SYNJ1 gene associated with autosomal recessive, early-onset Parkinsonism.</a> Hum. Mutat. 34 (9), 1208-1215 (2013).</li>
<li>Krebs, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Sac1+domain+of+SYNJ1+identified+mutated+in+a+family+with+early-onset+progressive+Parkinsonism+with+generalized+seizures%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Mutat%22%5BJournal%5D)">The Sac1 domain of SYNJ1 identified mutated in a family with early-onset progressive Parkinsonism with generalized seizures.</a> Hum. Mutat. 34 (9), 1200-1207 (2013).</li>
<li>Edvardson, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+deleterious+mutation+in+DNAJC6+encoding+the+neuronal-specific+clathrin-uncoating+co-chaperone+auxilin%2C+is+associated+with+juvenile+parkinsonism%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">A deleterious mutation in DNAJC6 encoding the neuronal-specific clathrin-uncoating co-chaperone auxilin, is associated with juvenile parkinsonism.</a> PLoS ONE. 7 (5), e36458(2012).</li>
<li>Cao, M., Milosevic, I., Giovedi, S., De Camilli, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Upregulation+of+parkin+in+endophilin+mutant+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+neurosci%22%5BJournal%5D)">Upregulation of parkin in endophilin mutant mice.</a> J neurosci. 34 (49), 16544-16549 (2014).</li>
<li>Cao, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parkinson+sac+domain+mutation+in+synaptojanin+1+impairs+clathrin+uncoating+at+synapses+and+triggers+dystrophic+changes+in+dopaminergic+axons%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Parkinson sac domain mutation in synaptojanin 1 impairs clathrin uncoating at synapses and triggers dystrophic changes in dopaminergic axons.</a> Neuron. 93 (4), 882-896 (2017).</li>
<li>Farsad, K., Ringstad, N., Takei, K., Floyd, S. R., Rose, K., De Camilli, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+high+curvature+membranes+mediated+by+direct+endophilin+bilayer+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Generation of high curvature membranes mediated by direct endophilin bilayer interactions.</a> J. Cell Biol. 155, 193-200 (2001).</li>
<li>Ringstad, N., Nemoto, Y., De Camilli, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+SH3p4%2FSh3p8%2FSH3p13+protein+family%3A+binding+partners+for+synaptojanin+and+dynamin+via+a+Grb2-like+Src+homology+3+domain%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">The SH3p4/Sh3p8/SH3p13 protein family: binding partners for synaptojanin and dynamin via a Grb2-like Src homology 3 domain.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 94 (16), 8569-8574 (1997).</li>
<li>Ringstad, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endophilin%2FSH3p4+is+required+for+the+transition+from+early+to+late+stages+in+clathrin-mediated+synaptic+vesicle+endocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Endophilin/SH3p4 is required for the transition from early to late stages in clathrin-mediated synaptic vesicle endocytosis.</a> Neuron. 24 (1), 143-154 (1999).</li>
<li>Ringstad, N., Nemoto, Y., De Camilli, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+expression+of+endophilin+1+and+2+dimers+at+central+nervous+system+synapses%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Differential expression of endophilin 1 and 2 dimers at central nervous system synapses.</a> Biol. Chem. 276 (44), 40424-40430 (2001).</li>
<li>Verstreken, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endophilin+mutations+block+clathrin-mediated+endocytosis+but+not+neurotransmitter+release%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Endophilin mutations block clathrin-mediated endocytosis but not neurotransmitter release.</a> Cell. 109 (1), 101-112 (2002).</li>
<li>Boucrot, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endophilin+marks+and+controls+a+clathrin-independent+endocytic+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Endophilin marks and controls a clathrin-independent endocytic pathway.</a> Nature. 517, 460-465 (2015).</li>
<li>Takezawa, N., Mizuno, T., Seo, K., Kondo, M., Nakagawa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gait+disturbances+related+to+dysfunction+of+the+cerebral+cortex+and+basal+ganglia%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Nerve%22%5BJournal%5D)">Gait disturbances related to dysfunction of the cerebral cortex and basal ganglia.</a> Brain Nerve. 62 (11), Article in Japanese 1193-1202 (2010).</li>
<li>Wahlsten, D. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWahlsten%2C+D+%22Mouse+Behavioral+Testing%3A+How+to+Use+Mice+in+Behavioral+Neuroscience%22">Mouse Behavioral Testing: How to Use Mice in Behavioral Neuroscience</a>. , Academic Press. (2010).</li>
<li>Guillot, T. S., Asress, S. A., Richardson, J. R., Glass, J. D., Miller, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treadmill+Gait+Analysis+Does+Not+Detect+Motor+Deficits+in+Animal+Models+of+Parkinson%27s+Disease+or+Amyotrophic+Lateral+Sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mot+Behav%22%5BJournal%5D)">Treadmill Gait Analysis Does Not Detect Motor Deficits in Animal Models of Parkinson's Disease or Amyotrophic Lateral Sclerosis.</a> J Mot Behav. 40 (6), 568-577 (2008).</li>
<li>Hampton, T. G., Amende, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treadmill+gait+analysis+characterizes+gait+alterations+in+Parkinson%27s+disease+and+amyotrophic+lateral+sclerosis+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mot+Behav%22%5BJournal%5D)">Treadmill gait analysis characterizes gait alterations in Parkinson's disease and amyotrophic lateral sclerosis mouse models.</a> J Mot Behav. 42 (1), 1-4 (2010).</li>
<li>Glajch, K. E., Fleming, S. M., Surmeier, D. J., Osten, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensorimotor+assessment+of+the+unilateral+6-hydroxydopamine+mouse+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Sensorimotor assessment of the unilateral 6-hydroxydopamine mouse model of Parkinson's disease.</a> Behav Brain Res. 230 (2), 309-316 (2012).</li>
<li>Takayanagi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pelvic+axis-based+gait+analysis+for+ataxic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Pelvic axis-based gait analysis for ataxic mice.</a> J Neurosci Methods. 219 (1), 162-168 (2013).</li>
<li>Zhou, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gait+analysis+in+three+different+6-hydroxydopamine+rat+models+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Gait analysis in three different 6-hydroxydopamine rat models of Parkinson's disease.</a> Neurosci Lett. 584, 184-189 (2015).</li>
<li>Geldenhuys, W. J., Guseman, T. L., Pienaar, I. S., Dluzen, D. E., Young, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+biomechanical+analysis+of+gait+changes+in+the+MPTP+mouse+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22PeerJ%22%5BJournal%5D)">A novel biomechanical analysis of gait changes in the MPTP mouse model of Parkinson's disease.</a> PeerJ. 3, e1175(2015).</li>
<li>Baldwin, H. A., Koivula, P. P., Necarsulmer, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Step+Sequence+is+a+Critical+Gait+Parameter+of+Unilateral+6-OHDA+Parkinson%27s+Rat+Models%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Step Sequence is a Critical Gait Parameter of Unilateral 6-OHDA Parkinson's Rat Models.</a> Cell Transplant. 26 (4), 659-667 (2017).</li>
<li>Carter, R. J., Morton, J., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+coordination+and+balance+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Motor coordination and balance in rodents.</a> Curr Protoc Neurosci. , Chapter 8: Unit 8.12 (2001).</li>
<li>Milosevic, I. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5807904/">Revisiting the Role of Clathrin-Mediated Endocytosis in Synaptic Vesicle Recycling.</a> Front Cell Neurosci. , (2018).</li>
</ol>

המחברים מצהירים אין אינטרסים כלכליים מתחרים.

לומד את קואורדינציה היא גישה שימושית באפיון מודלים של מחלות ניווניות, במיוחד עבור מחלות כמו משטרת שבו קואורדינציה מושפע קשות. בעזרת assay פונקציונלי ניתוח הילוך קנטית, אנו מסוגלים לזהות שינויים עדינים דהירה של בעלי חיים על תחילתה של בעיות גפיים, או בכל הדגמים עם חלש הקשורים ניוון מוחיים, פנוטיפ ומכאן יחסית צנועים. לאור המגוון הרחב של פנוטיפים במודלים שונים של מחלות ניווניות שמקיף הילוך קטן חריגות ותנועות חמורה, שיטה זו היא מתאימה להערכת פרמטרים הילוך, בהתבסס על גיל של החיה, היכולת לנוע. ניתן להקליט חיות נפגעת קשות הליכה ...

מחלות ניווניות להטיל נטל משמעותי על חולים, משפחות, ועל החברה, יהפוך לדאגה גדולה אף יותר כמו תוחלת החיים עולה, אוכלוסיית העולם ימשיך להזדקן. אחד התסמינים הנפוצים ביותר של מחלות ניווניות הן בעיות שיווי משקל וניידות. לפיכך, אפיון של התנהגות מוטורית הזדקנות יונקים (למשל, מכרסם) מודלים, ו/או מודלים מציג פנוטיפים ניווניות, הוא כלי חשוב להפגין ויוו הרלוונטיות של model(s) בעלי חיים מסוים, או טיפולית טיפולים שמטרתם לשפר את תסמיני המחלה. כמעט כל גישה לטיפול במחלות ניווניות בסופו של דבר דורשת בדיקות במודל חיה לפני תחילתן של ניסוי קליני בבני אדם. לכן, חשוב שיהיה אמין, לשחזור ההתנהגות בדיקות שניתן לכמת באופן עקבי פנוטיפים מחלות רלוונטיות לאורך התקדמות הגיל, על מנת להבטיח כי תרופה מועמד, אשר הראה פוטנציאל במודל במבחנה , יכול ביעילות להפחיתם על פנוטיפ של חיים.
היבט אחד של הערכת התנהגות מוטורית בחולדות הוא ניתוח הילוך קנטית, אשר יכול להתבצע על ידי VPI (גם צילום וידאו בשם המטוס הגחון)1,2. שיטה זו הוקמה יהפוך לרישית על הקלטה רציפה של החלק התחתון של המכרסמים הליכה על הליכון שקוף, ממונע חגורה1,2,3,4. ניתוח שידור הוידיאו הנתונים יוצר "דיגיטלי עקבות" של כל ארבעת הגפיים זה באופן דינמי ובאמינות לסכם תבנית ההליכה של מכרסם, כפי שמתואר במקור על ידי קאלה. et al. 2 ו. Amende et al. 3.
עקרון מבוססת הדמיה והרצתי ניתוח היא למדוד את השטח כפת בקשר עם החגורה הליכון לאורך זמן, על כל כף הרגל בודדים. כל תנוחת מיוצג על ידי גידול באזור כף היד (בשלב הבלימה), ירידה באזור כף היד (שלב ההינע). זה מלווה השלב המכריע שבו מזוהה אין קליטה. הנדנדה העמידה יחד יוצרים צעד. בנוסף הילוך dynamics פרמטרים, יציבה פרמטרים יכול גם להיות מופק קטעי וידאו מוקלט. הפרמטרים למופת ואת ההגדרות שלהם מפורטים בטבלה 1 , כוללים עמידה רוחב (SW; המרחק משולב כפות רגליו האחוריות או פור הציר החוטם-פלי), סטרייד פיאנו אורך (SL; המרחק הממוצע בין שני הצעדים של הכפה אותו) או כף השמה זווית (הזווית של הכפה לציר החוטם זנב). הנתונים dynamics ביציבה, בהליכה לאפשר והפקת לקחים על איזון בעלי חיים (על-ידי פרמטרים יציבה ולשינויים שלהם על פני מספר שלבים) ותיאום (על-ידי הילוך dynamics פרמטרים). פרמטרים נוספים, כגון אטקסיה מקדם (SL ההשתנות מחושב על ידי [(מקסימום. SL−min. SL) / מתכוון SL]), הגפיים האחוריות משותפים עמדה זמן (זמן זה שני הגפיים האחוריות נמצאים בקשר עם החגורה), או גרור כפת (בשטח כולל של הכפה על החגורה מתנוחת מלא כדי כף ההמראה) ניתן גם לחלץ, ואת דווחו להיות שונה ב- di ניווניות שונות sease מודלים5,-6,-7,-8 (ראה טבלה 1).
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>פרמטר</td>
			<td>יחידה</td>
			<td>הגדרה</td>
		</tr>
<tr>
<td>הנדנדה זמן</td>
			<td>ms</td>
			<td>משך זמן שהכפה אינו במגע עם החגורה</td>
		</tr>
<tr>
<td>בזמן עמידה</td>
			<td>ms</td>
			<td>משך זמן שהכפה נמצא בקשר עם החגורה</td>
		</tr>
<tr>
<td>בלם %</td>
			<td>% מהזמן עמידה</td>
			<td>אחוז הזמן עמידה שציפורניים הן בשלב בלם</td>
		</tr>
<tr>
<td>% להניע</td>
			<td>% מהזמן עמידה</td>
			<td>אחוז הזמן עמידה שציפורניים הן בשלב הנעה</td>
		</tr>
<tr>
<td>עמידת רוחב</td>
			<td>ס מ</td>
			<td>מרחק משולב קידמה או הינד הכפות לציר החוטם-פלי</td>
		</tr>
<tr>
<td>אורך צעד</td>
			<td>ס מ</td>
			<td>המרחק הממוצע בין שני הצעדים של הכפה אותו</td>
		</tr>
<tr>
<td>סטרייד פיאנו תדר</td>
			<td>צעדים/s</td>
			<td>מספר צעדים מלאה לשניה</td>
		</tr>
<tr>
<td>כפת השמה זווית</td>
			<td>מעלות</td>
			<td>זווית הכפה ביחס הציר החוטם-הזנב של החיה</td>
		</tr>
<tr>
<td>אטקסיה מקדם</td>
			<td>א"א</td>
			<td>השתנות SL מחושב על ידי ממוצע/[(max SL-min SL) SL]</td>
		</tr>
<tr>
<td>עמידה משותפת %</td>
			<td>אחוז עמידה</td>
			<td>זמן תנוחת הגפיים האחוריות משותפים; פעם שני הגפיים האחוריות נמצאים בקשר עם החגורה באותו הזמן</td>
		</tr>
<tr>
<td>כף של גרירה</td>
			<td>מ מ2
</td>
			<td>השטח הכולל של הכפה על החגורה מתנוחת מלא כדי כף ההמראה</td>
		</tr>
<tr>
<td>האיבר טעינה</td>
			<td>ס מ2
</td>
			<td>מקס dA/dT; מקסימלי קצב השינוי של אזור כף הרגל בשלב שובר</td>
		</tr>
<tr>
<td>שלב זווית השתנות</td>
			<td>מעלות</td>
			<td>סטיית התקן של הזווית בין האחוריות הכפות כפונקציה של SL ו- SW</td>
		</tr>
</tbody></table>טבלה 1. הגדרת הפרמטרים הילוך מפתח יכול להיבדק על-ידי הדמיה המטוס הגחון.
הערכת ההתנהגות המוטורית של מכרסמים מודלים עבור מחלות ניווניות עשויה להיות מאתגרת בהתאם לחומרת פנוטיפ של דגם ספציפי בגיל נתון. מספר מחלות, בולטת PD, הצג התנהגות מנוע חזק (ומכניקה) גירעונות, הן בחולים והן במודלים של בעלי חיים. אחד 4 תסמיני המפתח ב- PD הוא bradykinesia, אשר מתקדמת עם ההזדקנות, בא לידי בליקויים חמורים הילוך כבר בשלבים המוקדמים של משטרת9. מחקרים של המודל PD חריפה, מכרסמים שטופלו 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridin (MPTP), כבר השתמשו VPI והרצתי ניתוח10,11,12. עם זאת, בהתחשב באופי חריפה של מודל זה, מחקרים אלה אינם הכתובת ההתקדמות הקשורות לגיל של גירעונות מוטוריים. מחקרים שנעשו לאחרונה מספר ניהלו והרצתי ניתוח בעכברים בגילאי בשינויים ניווניות, לדוגמה13,14,15, תוך הדגשת הרלוונטיות של הבנת את התקדמות המחלה עם הגיל .
בנוסף גירעונות מוטוריים, מודלים חייתיים של מחלות ניווניות לעיתים קרובות יש קשיים התמקדות המשימות בדיקה, להראות ליקויים קוגניטיביים בולטים, במיוחד עם ההתקדמות בגיל. פנוטיפ כזה יכול להשפיע על התוצאה של בדיקות התנהגות מוטורית. כלומר, אחד המבחנים הנפוצה ביותר לבחון את הגירעונות מוטוריים, מבחן ' rotarod '16, מסתמך על קוגניציה, תשומת לב, מתח17,18. ואילו הנכונות כדי ללכת על הליכון ממונע תלויה גם בגורמים אלה, read-out המוקלט פועל, וזו תכונה סטנדרטית יותר, הרבה פחות מושפע קוגניציה שינו. ההשפעות של הלחץ ואת תשומת הלב עשוי להיות גלוי פרמטרים ספציפיים, כמו נדנדה/עמידה זמן דחק (סטרס) SL תשומת לב19,20, אך לא יכולת ריצה הכולל.
הגישה ניתוח הילוך קנטית נוספת מציעה את היתרון של בעל אפשרויות כדי להתאים את האתגר לדגמי מכרסמים. ההליכון עם זווית מתכווננת ומהירות מאפשר הליכה מהירויות 0.1 - 99.9 ס"מ/s, כך מכרסמים עם מגבלות הליכה קשות עדיין עשויים להיות מסוגלים לרוץ במהירות איטית (~ 10 ס"מ/s). כבדי שאינם בעלי חיים ניתן למדוד בורח מהר יותר מהירויות (30 - 40 ס"מ/s). התבוננות או לא החיות שנבדקו הם מסוגלים לרוץ במהירות מסוימת מספק תוצאה בפני עצמו. יתרה מזאת, למכרסמים ניתן לערער בנוסף לרוץ למעלה ובצדפים, או למטה ירידה, הטיית ההליכון כדי בזווית הרצויה בעזרת מד זווית, או על ידי הצמדת מזחלת משוקלל הגפיים האחוריות עכבר או חולדה.
מחקרים רבים של חלבונים יחיד הם מוטציה בחולים, יש מודעות גוברת האחרונות בקישורים בין אנדוציטוזה פגומה תהליך, הקשורים ניוון מוחיים13,21,22, 23,24,25,26,27,28. עכבר דגמים עם רמות מופחתת של endophilin-A (מעתה ואילך endophilin), שחקן מפתח שני אנדוציטוזה בתיווך clathrin13,21,29,30,31 , 32 , 33 , 45 ו clathrin תלויית אנדוציטוזה34, נמצאו להראות הקשורים ניוון מוחיים ואת ליקויי תלויי-גיל13,פעילות גינקולוגיות21. בשלושה גנים לקודד את המשפחה של חלבונים endophilin: endophilin 1, endophilin 2, ו- endophilin 3. ראוי לציין, פנוטיפ הנובע דלדול של חלבונים endophilin משתנה מאוד בהתאם למספר של חסר endophilin הגנים13,21. בעוד טריפל הנוק-אאוט (KO) של כל הגנים endophilin הוא קטלני רק כמה שעות לאחר הלידה, ועכברים ללא שני endophilin 1 ו-2 להיכשל לשגשג ולמות בתוך 3 שבועות לאחר הלידה, קו יחיד עבור כל אחד endophilins 3 מראה אין פנוטיפ ברור עבור נבדק התנאים21. אחרים למוטציות אחרות endophilin להראות תוחלת החיים מופחתת ולפתח ליקויים מוטוריים עם העליה בגיל13. לקבלת דוגמה, endophilin 1KO-2HT-3KO עכברים התצוגה הליכה שינויים ובעיות קואורדינציה (כפי שנבדקו על-ידי קנטית והרצתי ניתוח ו- rotarod) כבר בגיל 3 חודשים של גיל, בעוד הארנבונים מאותה שלהם, endophilin 1KO-2WT-3KO חיות, התצוגה משמעותי צמצום קואורדינציה רק בגיל 15 חודשים של גיל13. בשל המגוון העצום של פנוטיפים במודלים אלה, יש צורך לזהות וליישם מבחן זה ניתן לשלב מגוון של אתגרים המתאימים המנוע של החיה, קוגניציה יכולות, כמו גם העידן. כאן, אנו מפרטים את הנוהלים ניסיוני באותיות גדולות על ניתוח הילוך קנטית כדי להעריך את התפתחות והתקדמות של ליקויים מוטוריים במודל של עכברים המציג שינויים ניווניות (קרי, מוטציות endophilin). זה כולל מדידת פרמטרים הילוך בכל הגילאים השונות severities שונות של ליקויי ומכניקה.

<table><tbody><tr><td>DigiGait</td><td>Mouse Specifics, Inc., Framingham, Massachusetts, USA</td><td></td><td>תוכנת ההדמיה והניתוח של DigiGait כלולה בחומרה</td></tr><tr><td>שמיכה לא שקופה או בד</td><td></td><td></td> כהה <td>מכסים את תא הבדיקה כדי להפחית את תחושת החשיפה/איזון המתח של בעל החיים</td></tr><tr><td></td><td>, למשל איזון Satorius</td><td></td><td>עם דיוק של 0.1 גרם ועומס מרבי של לפחות 100 גרם</td></tr><tr><td>אדום צבע אצבעות</td><td>למשל Kreul או Staedtler</td><td></td><td>להגברת הניגודיות בין כפות הרגליים ובעלי החיים' </td></tr><tr><td>מברשת צבע קטנה מברשת</td><td></td><td></td><td>רכה למריחת צבע אצבע על כפות בעלי החיים</td></tr><tr><td>חומר ניקוי</td><td></td><td></td><td>מדולל לניקוי</td></tr><tr><td>חומר חיטוי, למשל מליספטול או 70% אתנול</td><td>למשל B.Braun</td><td></td><td>לחיטוי</td></tr></tbody></table>

והרצתי ניתוח של ליקויים מוטוריים תלויי-גיל בעכברים עם הקשורים ניוון מוחיים

Gait Analysis of Age-dependent Motor Impairments in Mice with Neurodegeneration

התנהגות מוטורית בדיקות משמשות לקביעת הרלוונטיות פונקציונלי של מודל מכרסמים ופיתח לבחון לאחרונה טיפולים בבעלי חיים אלה. באופן ספציפי, והרצתי ניתוח מאפשרת המחלה מחדש פנוטיפים רלוונטי כי הם נצפו בחולים אנושיים, במיוחד במחלות ניווניות המשפיעות על יכולות מוטוריות כגון מחלת פרקינסון (PD), מחלת אלצהיימר (AD), מחלת ניוון שרירים טרשת נפוצה לרוחב (ALS), ואחרים. במחקרים מוקדם לאורך הקו הזה, מדידת פרמטרים הילוך היה מפרך, תלויים גורמים שהיו קשה לשלוט בה (למשל, לרוץ במהירות, ריצה רציפה). פיתוח מערכות הדמיה המטוס הגחון (VPI) עשה את זה ריאלי לביצוע ניתוח הילוך בקנה מידה גדול, הופך את שיטה זו כלי שימושי עבור ההערכה של התנהגות מוטורית בחולדות. כאן, אנו מציגים את פרוטוקול מעמיק של אופן השימוש קנטית והרצתי ניתוח כדי לבחון את התקדמות תלויי-גיל לגירעונות מנוע העכבר דגמי הקשורים ניוון מוחיים; קווים העכבר עם רמות ירידה של endophilin, שבו ניווניות נזק בהדרגה עולה עם הגיל, משמשים כדוגמה.

כדי להדגים את השימוש קנטית והרצתי ניתוח, ערכנו והרצתי ניתוח ב WT C57BL/6J עכברים עם התקדמות הגיל, כמו גם מספר קווי מוטציה של endophilin, באמצעות מכשור זמינים מסחרית ותוכנות (עיין הטבלה של חומרים). בהגדרת הזה, מצלמה מהירה תחת הליכון שקוף רשומות בריצה של עכבר (איור 1 א'). התוכנה מזהה ואז את הניגוד בין הכפות בצבע אדום את הפרווה לבן או שחור. ומכיוון חיות ניסוי שלנו היה צבע פרווה חומה כהה, יש צבענו את כפות רגליו של כל הנושאים עם גואש אדום. בדקנו ח...

במחקר זה, נדגים את השימוש קנטית והרצתי ניתוח המבוסס על הגחון המטוס הדמיה לעקוב אחר שינויים עדינים קואורדינציה, כמו גם את ההתקדמות של הקשורים ניוון מוחיים עם הגיל במודלים של העכבר (למשל, endophilin מוטציה קווים העכבר).

Motor behavior tests are commonly used to determine the functional relevance of a rodent model and to test newly developed treatments in these animals. ...

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח במחקר ההזדקנות והניוון העצבי כגון הופעה והתקדמות של הליכה והפרעות מוטוריות עם הגיל ובמיוחד במודלים של עכברים של מחלות נוירודגנרטיביות. התוצאה של סטטוס כזה יכולה להיות מתורגמת להבנה טובה בהרבה של ליקויים מוטוריים בחולים עם מחלות ניווניות של מערכת העצבים, למשל, מחלת פרקינסון או אטקסיות. היתרון העיקרי בשימוש בניתוח הליכה מבוסס וידאו הוא בכך שהוא מאפשר לחקור ליקויים מוטוריים עדינים וחמורים כאחד במודלים של עכברים של ניוון עצבי.התחילו בקביעת המצב הבריאותי של כל בעל חיים על ידי בחינתו מקרוב ושקלול האיזון. מרחו בעדינות צבע אצבע אדום על כפות החיה בעזרת מברשת. הניחו את החיה בכלוב רזרבי ונקי בזמן שהצבע מתייבש.לאחר מכן, הגדר את מהירות ההליכון בלוח הימני העליון של המכשיר. לאחר מכן, הניחו את החיה בתא הבדיקה וכסו אותה במטלית כהה כדי לאפשר לכל חיה להסתגל למשך דקה עד שתיים. הפעל את האור בתא הבדיקה על ידי סיבוב המתג הסיבובי של אור ההליכון למצב מופעל.פתח מעט את המכסה כדי שתוכל להתבונן בבעל החיים במהלך המשימה. הפעל את ההליכון למשך כחצי שנייה כדי להזהיר את החיה שהמשימה עומדת להתחיל. סובב את המתג הסיבובי של ההליכון קדימה כדי להפעיל את ההליכון.לאחר מכן, לחץ על הקלט כפתור בתוכנת ההדמיה. ברגע שהחיה פועלת בצורה יציבה, הקליטו לפחות חמש שניות לפני עצירת ההליכון. עצור את ההקלטה על ידי לחיצה על עצור בתוכנת ההדמיה וסובב את המתג הסיבובי של ההליכון בחזרה למצב כבוי.לאחר מכן, לחץ על לערוך כפתור בתוכנת ההדמיה כדי לפתוח תפריט בו ניתן להגדיר את נקודת ההתחלה והסיום של קטע הווידאו. נווטו בסרטון באמצעות המחוון בתחתית המסך. לבחירת נקודת הזמן הנוכחית כנקודת ההתחלה או הסיום, לחץ על 'ממספר מסגרת' ו'אל', בהתאמה.ודא שהקטע מכיל לפחות שבעה צעדים לכל כפה או ארבעה עשר צעדים בסך הכל של החיה רצה ביציבות במהירות קבועה. לבסוף, הזן את זיהוי החיה, תאריך הלידה, המשקל והמין. שמור את הנתונים במיקום הרצוי במחשב או בשרת.העיקרון של ניתוח הליכה מבוסס וידאו הוא למדוד את שטח הכפות במגע עם פני השטח לאורך זמן עבור כל כפה בודדת. ניתן לחלץ דינמיקת הליכה ופרמטרים רבים של יציבה מהסרטונים המוקלטים, למשל, זמן הנדנדה, זמן ורוחב העמידה, אורך הצעד והתדירות. לאחר מכן ניתן לחשב תכונות הליכה אחרות כגון מקדם אטקסיה או שונות זווית צעד מהמדידות הראשוניות.התחל את ניתוח הווידאו על ידי הפעלת תוכנת הניתוח ולחיצה על בחר תיקיית לימוד כדי לבחור את התיקיה עם הסרטונים המוקלטים. בחר סרטון אחד ולחץ על בצע.השתמש בפונקציית הציור מחדש כדי לבחור את האזור שבו העכבר פועל. שימו לב, חלק זה צריך להכיל רק את העכבר והרקע הלבן.לאחר מכן, הזינו ערכים בתיבות 'אורך' ו'רוחב' כדי לשנות את המסיכה שאינה כוללת את האזור האדום סביב חוטם החיה לצורך ניתוח. כוונן את רעשי המסנן של המחוונים ומסנן פרווה וכתמים כהים כדי לייעל את הדפסת הכפות בשחור-לבן. קבעו את מחוון רעש המסנן ל- 800 עד 950 לבעלי חיים שחורים ול- 700 עד 800 לבעלי חיים חומים או לבנים, בהתאם לצבע הפרווה המדויק של החיה, ובחרו באפשרות Okay.לאחר מכן בחר סרטון שעבר את ההתאמה הראשונה ובחר את Go פונקציה כדי להתחיל בניתוח הסרטון. לאחר מכן, בחר סרטון מנותח ולחץ על Go.שים לב שכעת ניתן לראות את אזור הדפסת הכפות במגע עם החגורה לאורך זמן עבור כל כפה נפרדת. כדי להשוות את הווידאו המקורי ואת טביעת הכפות המחושבת עבור האזור שנבחר, בחר בפונקציה הפעל וידאו.כדי לתקן טעויות קטנות, השתמש באפשרות תקן, התחבר או מחק. השתמש באפשרות הנכונה כדי למחוק אות שגוי. לחץ פעם אחת כדי להגדיל את האזור הרלוונטי ולסמן את הגבול השמאלי של האובייקט להסרה בלחיצה שנייה ואת הגבול הימני בלחיצה השלישית.השתמש באפשרות התחבר כדי לשלב שני אותות. לחץ פעם אחת כדי להגדיל את האזור הרלוונטי ולחץ פעמיים באמצע שני האובייקטים לשילוב. השתמש באפשרות מחק כדי להסיר נקודות זמן מהניתוח לחלוטין.לחץ פעם אחת כדי להגדיל את האזור הרלוונטי ולסמן את הגבול השמאלי של האזור להסרה בלחיצה השנייה ואת הגבול הימני בלחיצה השלישית. לאחר מכן בחר האיבר הבא כדי להמשיך דרך ארבעת הגפיים. שימו לב, לאחר לחיצה על Next Limb לאחר הכפה האחרונה, התוכנה משלימה את הניתוח ומציגה את התוצאות עבור החיה בארבעה מסכים.לבסוף, לאחר ניתוח כל הסרטונים מניסוי אחד, בחר את כל הסרטונים ולחץ על ארגן מחדש את התוצאות כדי לייצא את התוצאות. כ-50 פרמטרי הליכה מחושבים ומפורטים בקובץ המיוצא. מיין את התוצאה לפי קבוצה, גיל ומהירות ריצה, ונתח את כל התנאים הללו בנפרד.בניתוח ההליכה בעכברים מסוג בר עם גיל מתקדם, התוצאות הצביעו על כך שהעמדה עם רוחב בעל חיים מנורמל אינה משתנה עם הגיל המתקדם. עם זאת, התמיכה הכפולה של הגפיים האחוריות והעמסת הגפיים אכן גדלות עם הגיל בחיות בר מסוג בר. יתר על כן, בעוד שכל החיות שנבדקו יכולות לרוץ במהירות של 30 מטר לשנייה בחודש אחד, המוטציות האנדופילין מפתחות ליקויי ריצה ככל שהם מתבגרים.בנוסף, קצב ההליכה נפגע במוטציות אנדופילין. לדוגמה, זמן ההנעה פוחת במוטציות האנדופילין ככל שהעכברים מזדקנים. כאשר מנסים את ההליך, חשוב לזכור שהשלב הקריטי ביותר הוא הקלטת הסרטון המקורי.כל הניתוח הנוסף תלוי בסרטונים באיכות טובה. ניתוח הליכה הוא שיטה שימושית לסיווג הליכה והתנהגות מוטורית במודלים של עכברים של ניוון עצבי. עם זאת, היבטים מסוימים של התנהגות מוטורית, למשל, כוח שרירים, אינם מוערכים כראוי בשיטה זו.אבל לכן פקודה משלימה ניתוח הליכה מבוסס וידאו עם סוללה של מבחני התנהגות מוטורית אחרים, כמו חוזק אחיזה והליכה על קרן. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לבצע ניתוח הליכה בדגמי עכברים המפתחים ליקוי מוטורי עם ההזדקנות.

gait-analysis-age-dependent-motor-impairments-mice-with

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

ביולוגיה התפתחותית

ליקויים בתיאום מוטוריקה עדינה ניתן להעריך במבחן קרן האיזון. ביצועים על הקורה הוא לכימות על ידי המהירות שבה הוא חוצה את אלומת האור ואת מספר הפעמים העכבר מחליק על הקורה.

הערכת מאזן מוטורי ותיאום עכברים באמצעות קרן איזון

בסרטון זה, אנו מתארים את הליך בדיקת טביעת הרגל וניתוח קשור כדי להעריך הליכה וקואורדינציה מוטורית בעכברים.

הערכת הליכה לפי ניתוח טביעת רגל: שיטה לבדיקת קואורדינציה מוטורית בעכברים

קנטית והרצתי ניתוח הליכה במישור sagittal התשואות מידע מאוד מדויק על איך מתבצעת התנועה. אנו מתארים את היישום של טכניקות אלה כדי לזהות הילוך חסרונות עבור עכברים נתון demyelination אוטואימונית בתיווך. שיטות אלה עשוי לשמש גם לאפיין הילוך גירעונות למודלים אחרים העכבר שמציעות ומכניקה לקוי.

המטוס Sagittal קנטית והרצתי ניתוח בעכברים C57BL/6 נתון MOG35-55 המושרה חיסון ניסיוני של דלקת המוח וחוט השדרה

ההערכה המדויקת של תגובת כאב במודל בעלי חיים נוירופתי חיוני לחקור הפתופיזיולוגיה של כאב מחלות ולפתח משככי כאבים חדשים. אנו מציגים שיטה אובייקטיבית רגיש כדי לקבוע את תפקוד חושי למכרסמים הינד כף של מערכת ניתוח הילוך אוטומטי.

אוטומטיות והרצתי ניתוח אצל עכברים עם פציעה כרונית הכיווץ

ניתוח טביעת רגל הוא חלופה בעלות נמוכה לניתוח הילוך ההילוך הדיגיטלי עבור החוקרים הפרעות בתנועה של עכברים. בשל המהירות שלה, פשטות, ופוטנציאל האורך, הוא אידיאלי עבור פנוטיפים התנהגותיים של מודלים של העכבר.

בעלות נמוכה ניתוח הילוך עבור פנוטיפים התנהגותיים של מודלים של עכבר של מחלות נוירוסקולריות

ניתוח הליכה אוטומטי הוא כלי אפשרי להערכת התאוששות תפקודית במודלים של מכרסמים של פגיעה בעצב היקפי ופגיעה בחוט השדרה. אמנם זה דורש רק התקנה אחת כדי להעריך את תפקוד הקטר במודלים ניסיוניים שונים, התאמה קפדנית קשה ורכה והכשרה של בעלי החיים הוא חשוב מאוד.

ניתוח הליכה אוטומטי כדי להעריך התאוששות תפקודית מכרסמים עם פגיעה בעצב היקפי או חבלה בחוט השדרה

כאן אנו מתארים את מערכת RatWalker, שנבנתה על ידי תכנון מחדש של מנגנון MouseWalker כדי להתאים לגודל ולמשקל המוגדלים של חולדות. מערכת זו משתמשת בהשתקפות פנימית כוללת מתוסכלת (FTIR), לכידת וידאו במהירות גבוהה ותוכנת ניתוח בגישה פתוחה כדי לעקוב אחר פרמטרים של הליכה ולכמת אותם.

יישום מערכת RatWalker לניתוח הליכה במודל חולדה גנטי של מחלת פרקינסון

כתב יד זה מציג סדרה של מבחנים התנהגותיים הניתנים לשחזור כדי לאמת מודל עכבר של תסמונת אנג'למן.

אפיון התנהגותי של מודל עכבר תסמונת אנג'למן

צינור ניסיוני לתיאור כמותי של דפוס הלוקומוטור של עכברים ההולכים בחופשיות באמצעות ארגז הכלים MouseWalker (MW) מסופק, החל מהקלטות וידאו ראשוניות ומעקב ועד ניתוח לאחר כימות. מודל פגיעה בחוט השדרה בעכברים משמש כדי להדגים את התועלת של מערכת MW.

שימוש בהליכון עכבר לכימות תפקוד לקוי של מנוע עכבר במודל עכבר של פגיעה בחוט השדרה

המחקר הנוכחי מתאר מבחן התנהגות מוטורית עדינה לבחינת ליקויים מוטוריים במודלים של מכרסמים, כולל חולדת TgF344-AD, באמצעות למידת מכונה.

מטלה מוטורית עדינה לחקר קינמטיקה של מפרקים במודל פרה-קליני של מחלות נוירודגנרטיביות

למד ניתוח הליכה קינמטי בעכברים לחקר ניוון מוחי ותפקוד מוטורי. שיטה זו מאפשרת לעקוב אחר ליקויים מוטוריים עדינים וחמורים ולהבין את התקדמות המחלה.

והרצתי ניתוח של ליקויים מוטוריים תלויי-גיל בעכברים עם הקשורים ניוון מוחיים

גלה סרטונים נוספים