והרצתי ניתוח של ליקויים מוטוריים תלויי-גיל בעכברים עם הקשורים ניוון מוחיים

במחקר זה, נדגים את השימוש קנטית והרצתי ניתוח המבוסס על הגחון המטוס הדמיה לעקוב אחר שינויים עדינים קואורדינציה, כמו גם את ההתקדמות של הקשורים ניוון מוחיים עם הגיל במודלים של העכבר (למשל, endophilin מוטציה קווים העכבר).

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח במחקר ההזדקנות והניוון העצבי כגון הופעה והתקדמות של הליכה והפרעות מוטוריות עם הגיל ובמיוחד במודלים של עכברים של מחלות נוירודגנרטיביות. התוצאה של סטטוס כזה יכולה להיות מתורגמת להבנה טובה בהרבה של ליקויים מוטוריים בחולים עם מחלות ניווניות של מערכת העצבים, למשל, מחלת פרקינסון או אטקסיות. היתרון העיקרי בשימוש בניתוח הליכה מבוסס וידאו הוא בכך שהוא מאפשר לחקור ליקויים מוטוריים עדינים וחמורים כאחד במודלים של עכברים של ניוון עצבי.

התחילו בקביעת המצב הבריאותי של כל בעל חיים על ידי בחינתו מקרוב ושקלול האיזון. מרחו בעדינות צבע אצבע אדום על כפות החיה בעזרת מברשת. הניחו את החיה בכלוב רזרבי ונקי בזמן שהצבע מתייבש.

לאחר מכן, הגדר את מהירות ההליכון בלוח הימני העליון של המכשיר. לאחר מכן, הניחו את החיה בתא הבדיקה וכסו אותה במטלית כהה כדי לאפשר לכל חיה להסתגל למשך דקה עד שתיים. הפעל את האור בתא הבדיקה על ידי סיבוב המתג הסיבובי של אור ההליכון למצב מופעל.

פתח מעט את המכסה כדי שתוכל להתבונן בבעל החיים במהלך המשימה. הפעל את ההליכון למשך כחצי שנייה כדי להזהיר את החיה שהמשימה עומדת להתחיל. סובב את המתג הסיבובי של ההליכון קדימה כדי להפעיל את ההליכון.

לאחר מכן, לחץ על הקלט כפתור בתוכנת ההדמיה. ברגע שהחיה פועלת בצורה יציבה, הקליטו לפחות חמש שניות לפני עצירת ההליכון. עצור את ההקלטה על ידי לחיצה על עצור בתוכנת ההדמיה וסובב את המתג הסיבובי של ההליכון בחזרה למצב כבוי.

לאחר מכן, לחץ על לערוך כפתור בתוכנת ההדמיה כדי לפתוח תפריט בו ניתן להגדיר את נקודת ההתחלה והסיום של קטע הווידאו. נווטו בסרטון באמצעות המחוון בתחתית המסך. לבחירת נקודת הזמן הנוכחית כנקודת ההתחלה או הסיום, לחץ על 'ממספר מסגרת' ו'אל', בהתאמה.

ודא שהקטע מכיל לפחות שבעה צעדים לכל כפה או ארבעה עשר צעדים בסך הכל של החיה רצה ביציבות במהירות קבועה. לבסוף, הזן את זיהוי החיה, תאריך הלידה, המשקל והמין. שמור את הנתונים במיקום הרצוי במחשב או בשרת.

העיקרון של ניתוח הליכה מבוסס וידאו הוא למדוד את שטח הכפות במגע עם פני השטח לאורך זמן עבור כל כפה בודדת. ניתן לחלץ דינמיקת הליכה ופרמטרים רבים של יציבה מהסרטונים המוקלטים, למשל, זמן הנדנדה, זמן ורוחב העמידה, אורך הצעד והתדירות. לאחר מכן ניתן לחשב תכונות הליכה אחרות כגון מקדם אטקסיה או שונות זווית צעד מהמדידות הראשוניות.

התחל את ניתוח הווידאו על ידי הפעלת תוכנת הניתוח ולחיצה על בחר תיקיית לימוד כדי לבחור את התיקיה עם הסרטונים המוקלטים. בחר סרטון אחד ולחץ על בצע.השתמש בפונקציית הציור מחדש כדי לבחור את האזור שבו העכבר פועל. שימו לב, חלק זה צריך להכיל רק את העכבר והרקע הלבן.

לאחר מכן, הזינו ערכים בתיבות 'אורך' ו'רוחב' כדי לשנות את המסיכה שאינה כוללת את האזור האדום סביב חוטם החיה לצורך ניתוח. כוונן את רעשי המסנן של המחוונים ומסנן פרווה וכתמים כהים כדי לייעל את הדפסת הכפות בשחור-לבן. קבעו את מחוון רעש המסנן ל- 800 עד 950 לבעלי חיים שחורים ול- 700 עד 800 לבעלי חיים חומים או לבנים, בהתאם לצבע הפרווה המדויק של החיה, ובחרו באפשרות Okay.

לאחר מכן בחר סרטון שעבר את ההתאמה הראשונה ובחר את Go פונקציה כדי להתחיל בניתוח הסרטון. לאחר מכן, בחר סרטון מנותח ולחץ על Go.שים לב שכעת ניתן לראות את אזור הדפסת הכפות במגע עם החגורה לאורך זמן עבור כל כפה נפרדת. כדי להשוות את הווידאו המקורי ואת טביעת הכפות המחושבת עבור האזור שנבחר, בחר בפונקציה הפעל וידאו.

כדי לתקן טעויות קטנות, השתמש באפשרות תקן, התחבר או מחק. השתמש באפשרות הנכונה כדי למחוק אות שגוי. לחץ פעם אחת כדי להגדיל את האזור הרלוונטי ולסמן את הגבול השמאלי של האובייקט להסרה בלחיצה שנייה ואת הגבול הימני בלחיצה השלישית.

השתמש באפשרות התחבר כדי לשלב שני אותות. לחץ פעם אחת כדי להגדיל את האזור הרלוונטי ולחץ פעמיים באמצע שני האובייקטים לשילוב. השתמש באפשרות מחק כדי להסיר נקודות זמן מהניתוח לחלוטין.

לחץ פעם אחת כדי להגדיל את האזור הרלוונטי ולסמן את הגבול השמאלי של האזור להסרה בלחיצה השנייה ואת הגבול הימני בלחיצה השלישית. לאחר מכן בחר האיבר הבא כדי להמשיך דרך ארבעת הגפיים. שימו לב, לאחר לחיצה על Next Limb לאחר הכפה האחרונה, התוכנה משלימה את הניתוח ומציגה את התוצאות עבור החיה בארבעה מסכים.

לבסוף, לאחר ניתוח כל הסרטונים מניסוי אחד, בחר את כל הסרטונים ולחץ על ארגן מחדש את התוצאות כדי לייצא את התוצאות. כ-50 פרמטרי הליכה מחושבים ומפורטים בקובץ המיוצא. מיין את התוצאה לפי קבוצה, גיל ומהירות ריצה, ונתח את כל התנאים הללו בנפרד.

בניתוח ההליכה בעכברים מסוג בר עם גיל מתקדם, התוצאות הצביעו על כך שהעמדה עם רוחב בעל חיים מנורמל אינה משתנה עם הגיל המתקדם. עם זאת, התמיכה הכפולה של הגפיים האחוריות והעמסת הגפיים אכן גדלות עם הגיל בחיות בר מסוג בר. יתר על כן, בעוד שכל החיות שנבדקו יכולות לרוץ במהירות של 30 מטר לשנייה בחודש אחד, המוטציות האנדופילין מפתחות ליקויי ריצה ככל שהם מתבגרים.

בנוסף, קצב ההליכה נפגע במוטציות אנדופילין. לדוגמה, זמן ההנעה פוחת במוטציות האנדופילין ככל שהעכברים מזדקנים. כאשר מנסים את ההליך, חשוב לזכור שהשלב הקריטי ביותר הוא הקלטת הסרטון המקורי.

כל הניתוח הנוסף תלוי בסרטונים באיכות טובה. ניתוח הליכה הוא שיטה שימושית לסיווג הליכה והתנהגות מוטורית במודלים של עכברים של ניוון עצבי. עם זאת, היבטים מסוימים של התנהגות מוטורית, למשל, כוח שרירים, אינם מוערכים כראוי בשיטה זו.

אבל לכן פקודה משלימה ניתוח הליכה מבוסס וידאו עם סוללה של מבחני התנהגות מוטורית אחרים, כמו חוזק אחיזה והליכה על קרן. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לבצע ניתוח הליכה בדגמי עכברים המפתחים ליקוי מוטורי עם ההזדקנות.