ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים תודה חוסה אוגוסטו Maulin מן המעבדה באודות מיקרוסקופ (בית הספר לרפואה של ריבייראו פרטו) על עזרתו הנדיבה עם EDS, SEM ניתוחים ואת אחי מצ'אדו טיישיירה לסיוע טכני נדיב שלו במהדורה וידאו.

מחקר זה אושרה על ידי ועדת הבדיקה המוסדית של בית הספר לרפואת שיניים של ריבייראו פרטו, המשתתף מתנדב חתמה על הסכמה בכתב (תהליך 2011.1.371.583).
1. ביופילמים בחיי עיר
<ol><li>
מבחר של המשתתפים
	<ol>
<li>בחירת מטופלים לפי קריטריוני ההכללה הבאה: אדם בריא ועם שיניים מלאה אין סימנים קליניים של למניעת מחלות.</li>
		<li>אל תכלול חולים בהתבסס על הקריטריונים הבאים החרגה: הריון, הנקה, עששת, מחלות חניכיים או טיפול אנטיביוטי ב-3 החודשים האחרונים, מעשן או כל מחלה מערכתית יכולה להשפיע על המצב חניכיים.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
הכנת התקן אוראלית
	<ol>
<li>שיא הקשת בלסת העליונה באמצעות רושם alginate.</li>
		<li>להכין סוג IV אבן על-ידי הוספת 19 מ ל מים 100 גרם של אבקת אבן. יוצקים את האבן לתבנית alginate ליצור מודל של קשת בלסת העליונה.</li>
		<li>עיצוב, הרכיבו מכשיר אוראלית אקריליק לתמוך דגימות מבחן (טיטניום, דיסקים קרמיקה).<ol>
<li>לפברק אבזמי לפרטים של NiCr חוט (0.7 ממ מ) באמצעות צבת אורתודונטי #139 ומקם אותם על המודל. כדי למקם את המלחציים בין וטוחנות העליון, כיפוף קצה אחד של חוט כל כך הם יוצרים לולאה.<ol>
<li>להתאים את הלולאה באזור papilla interdental. ב. סגרי, הכנס של עקמומיות עדין כדי לא להפריע הנקודות של מגע, עם סגר. הפוך של 90° מקפלים בסוף המלחציים עבור שימור באקריליק.</li>
				<li>כדי להתאים את המלחציים השן הטוחנת השנייה העליון, להתאים את העקמומיות של החוט השלישי צוואר הרחם (שיווי המשקל) כדי ליצור מתאר את השן (דיסטלי) של 90 מעלות מקפלים בסוף המלחציים עבור שימור באקריליק. הערה: כדי לספק שמירה נאותה/יציבות למכשיר אוראלית, האבזם לפרטים היו מוצבים בין וטוחנות העליון דיסטלי היבט השן הטוחנת השנייה משני צידי לקשת שיניים.</li>
			</ol>
</li>
			<li>לתפעל את שרף אקרילי ריפוי עצמי על פי הוראות היצרן והקש שרף אקרילי בין שתי צלחות זכוכית (עם מרווח בעובי 3 מ מ התערב) במהלך שלב פלסטיק, כדי להפוך את גיליון בעובי של 3 מ מ.</li>
			<li>להניח את גיליון אקרילי על האזור עיצור של המודל, לפי התכנון של המכשיר, לקצץ את שרף אקרילי עודפים עם קארבר, לפני הפילמור.</li>
			<li>לפברק דיסקים שעווה שימוש במטריצה מתכתי [10 מ מ בקוטר 2 מ מ עובי (שטח של 78.5 מ מ2)] על-ידי הצבת מותכת שעווה במטריצה ומחכה השעווה לגבש. באופן ידני להטביע 4 דיסקים שעווה לתוך שרף אקרילי, 2 מהם בין וטוחנות את השתיים האחרות לצד השני הטוחנות.</li>
			<li>תן את שרף אקרילי פולימריזציה בסיר לחץ מתחת לגיל 20 psi של אוויר דחוס עבור 20 דקות.</li>
			<li>לסיים את המכשיר אוראלית עם מכשיר חשמלי מעבדת שיניים ו חותך ולהבריק אותו עם גומי מחוספס.</li>
			<li>להתאים את המכשיר להתאמה נכונה בפה שימוש בציוד שתוארו לעיל.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>
הכנה מהדוגמאות טיטניום, זירקונים הערה: דגימות (n = 14) 10 מ מ קוטר ו- 2 מ מ עובי, יש שטח פנים של 78.5 מ מ2.<ol>
<li>פולנית של דגימות משטחים עם sandpapers water-cooled של להקטין דורסנות (600, 1200 ו- 2000 חצץ), למשך כ 20 דקות. הערה: ליטוש מהדוגמאות בוצעה כדי לתקנן את חספוס פני השטח ב 0.2 µm.</li>
		<li>נקי, לחטא את דגימות התקן אוראלית עם סבון נוזלי, מי ברז, ולאחר מכן להשתמש באמבט אולטרא אלכוהול איזופרופיל במשך 15 דקות לייבש אותם עם מגבוני נייר.</li>
		<li>לתקן את דגימות במכשיר אוראלי אוראלית עם 0.1 מ"ל של דבק רעיל דבק חם (איור 1).</li>
		<li>להתקין את ההתקן המכיל את דגימות בחלל הפה. הערה: המכשיר אוראלית המכיל את דגימות לענידה על 48 שעות. המכשיר היה מוסר ומאוחסנים buffered פוספט תמיסת מלח (PBS) בעוד המטופל היה לאכול וביצוע ניקוי הפה.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. הערכת הכדאיות חיידקי
הערה: מדגם בגודל n = 10.
<ol><li>להכין פתרון צובעת על-ידי הוספת 3 µL של SYTO9 (חומצת גרעין פלורסנט צבע ירוק) ו- 3 µL של propidium יודיד (צבען אדום חומצות גרעין פלורסנט) עד 1 מ"ל של סטרילי מים מזוקקים. הערה: להכין פתרונות מוגן מפני אור.</li>
	<li>העברת דגימות צלחת 24-ובכן ולשטוף אותם ביסודיות עם PBS כדי להסיר תאים שאינם מחסידי.</li>
	<li>הוסף את אמצעי האחסון המתאים (1 מ"ל) של הפלורסנט פתרון כדי לכסות את הדגימה המכילות biofilm. הוסף לצבוע בזהירות רבה כדי לא disorganize את biofilm.</li>
	<li>דגירה הדגימה למשך 20-30 דקות בטמפרטורת החדר, מוגן מפני אור.</li>
	<li>לשטוף בעדינות את הדגימה biofilm עם מים מזוקקים סטריליים כדי להסיר כל צבע עודף.</li>
	<li>מקם את הדגימה בקערת זכוכית התחתונה ולבצע סריקת מיקרוסקופ לניתוח biofilm לייזר multiphoton. הערה: הניתוח של הכדאיות תאים חיידקיים התבצע באמצעות מערכת מיקרוסקופ multiphoton. ידי קרינה פלואורסצנטית של יודיד propidium זוהה באמצעות מסנן עם אורך גל עירור/פליטה של 546/680 nm ו 477/600 nm עבור SYTO9. הגודל של תמונות שהושג היה 5.16188 x 5.16188 מ מ, המתאים 26.64 מ מ2 של שטח כל הדגימה (78.5 מ מ2) או 33.94% מכלל השטח. התמונות שנוצרו מן החלק המרכזי ביותר של המדגם, עם רזולוציה של 1,024 x 1,024 פיקסלים. הערוץ האדום ואת התמונות ערוץ ירוק נותחו בנפרד באמצעות תוכנה פיג'י31. כל תא נבחר בעזרת אחד מכלי הבחירה, האינטנסיביות של זריחה נמדדה באמצעות צפיפות הפיקסלים, הפחתה על רקע תמונה משולבת.</li>
</ol>3. ניתוח של הרכב כימי של דגימות על ידי אנרגיה ואנליזת ספקטרוסקופיה (EDS)
הערה: מדגם בגודל n = 3.
<ol><li>בחר 3 דגימות של כל חומר נטול biofilm בחינה, ולהעריך את ההרכב הכימי 2 תחומים שונים של כל דגימה באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סריקה מצמידים ספקטרומטר ואנליזת אנרגיה, עם מתח קרן אלקטרונים של 10 kV32.</li>
</ol>4. ניתוח מורפולוגי של Biofilm חיידקי על-ידי סריקת מיקרוסקופ אלקטרונים
הערה: מדגם בגודל n = 1.
<ol><li>לתקן את biofilm במועט דגימות ב- 2.5% גלוטראלדהיד מדולל במאגר 0.1 M נתרן cacodylate, pH 7.0-7.3, במשך 24 שעות ביממה.</li>
	<li>לשטוף את הדגימה במאגר PBS (ה-pH = 7.6).</li>
	<li>Postfix את biofilm עם 1% אוסמיום ארבע-חמצני לשעה.</li>
	<li>לשטוף את הדגימה במאגר PBS (ה-pH = 7.6).</li>
	<li>מייבשים את הדגימות biofilm בקפידה, לשמור אותם שקוע הגדלת ריכוזי אתנול פתרונות (50%, 70%, 90%, 95% ו- 100%). הערה: לבצע חילופי אתנול-ריכוז 100% 3. הצעד התייבשות הכולל לוקח בערך 2 h.</li>
	<li>העברת דגימות לנקודה קריטית מייבש ולבצע מספר החלפות עם פחמן דו-חמצני (CO2) עד הדגימות יבש.</li>
	<li>להסיר דגימות מיובשים המנגנון והר אותם אל בעלי לסרוק בעזרת מיקרוסקופ אלקטרון.</li>
	<li>מעיל לרעוד. להוציא 20 ננומטר שכבת זהב על גבי המשטח של הדגימה תמורת 120 s.</li>
	<li>הכנס את הדיסקים מצופה זהב בבית הבליעה לסרוק בעזרת מיקרוסקופ אלקטרון. להשיג תמונות של 5 אזורים שונים של כל הדגימה, ב- 20-30 kV בלחץ משתנה וב -X 650 ההגדלה12.</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

פרוטוקול המתוארים במחקר זה פותחה כדי להעריך את ביופילמים על חומרי טיטניום, אסתטיים abutments תותבות, כולל הניתוח של תא החיידק הכדאיות ומאפיינים מורפולוגי. כדי לבצע זאת, מודל ב באתרו של ביופילמים תוכנן, המורכב התקן אוראלית מסוגל להכיל דוגמיות של החומרים מבחן ולשמור אותם חשופים לסביבה אוראלי דינמי במשך 48 שעות. המכשיר נחשב נוח וקל להוסיף, להסיר, ולנקות על ידי המתנדב. ובכל זאת, זה הראה השפעה מועטה על פונטיקה, אסתטיקה, בעלות נמוכה כדי לבדות ולא היתה, ואפשר שחזור קל של מהדוגמאות ללא הפרעה של המבנה biofilm. יתר על כן,...

Biofilms חיידקי מורכבים, יופי של מבנית מאורגן קהילות מיקרוביאלי, המאופיינת על ידי מגוון של מינים חיידקים לסנתז1,של מטריצה חוץ-תאית, פעילים ביולוגית פולימר2. הדבקה חיידקית על משטחים ביוטיים או והאביוטיים קודם היווצרות של קרומית הנרכש, המורכב בעיקר glycoproteins הרוק-1,-3,-4. חלש physicochemical אינטראקציות בין המיקרואורגניזמים את קרומית בתחילה הוקמה, ואחריו חזק יותר אינטראקציות בין חיידקי adhesins גליקופרוטאין רצפטורים של קרומית רכשה. גיוון מיקרוביאלי עולה בהדרגה דרך coaggregation של colonizers משנית אל הקולטנים של חיידקים שכבר צורף, ויוצרים קהילה התקדמות1,3,4, 5.
הומאוסטזיס של microbiota את הפה ואת שלה יחסים סימביוטיים עם המארח חשוב לשמירה על בריאות הפה. Dysbiosis בתוך biofilms אוראלי עלול להגביר את הסיכון להתפתחות עששת, מחלות חניכיים2,5. מחקרים קליניים להדגים קשר סיבה-תוצאה בין ההצטברות של biofilm שיניים או שתלים דנטליים לבין התפתחות דלקת חניכיים או פרי-שתל mucositis6,7. ההתקדמות של תהליך דלקתי שמוביל פרי-implantitis ואובדן הסוגר של השתל8.
שתלים דנטליים ורכיבים תותבת שלהם נוטים מושבת חיידקים ו- היווצרות biofilm9. ושימוש בחומרים עם ההרכב הכימי, הטופוגרפיה משטח המספק הידבקות חיידקים נמוך עשוי להפחית את שכיחות והתקדמות של השתל פרי מחלות9,10. טיטניום הוא החומר שהשתמשו בהם לייצור abutments תותבות על שתלים; עם זאת, חומרים קרמיים הוצגו לאחרונה, צוברים פופולריות כחלופה טיטניום בגלל תכונותיהם אסתטי ואת הביו11,12. גם חשוב, חומרים קרמיים קושרו עם פוטנציאל כביכול מופחתת לדבוק מיקרואורגניזמים, בעיקר בזכות שלהם חספוס פני השטח, wettability, אנרגיה חופשית משטח10,13.
מחקרים במבחנה תרמו להתקדמות משמעותית בהבנה של הידבקות חיידקים ירכה תותבת משטחים9,14,15,16,17. עם זאת, הסביבה דינאמית של חלל הפה, מאופיינות על ידי טמפרטורה משתנים, pH וזמינות התזונתי שלה, כמו גם על ידי הנוכחות של כוחות גזירה, אינה לשחזור במבחנה בפרוטוקולים ניסיוניים18, 19. כדי להתגבר על בעיה זו, דרך חלופית היא השימוש בחיי עיר מודלים של ביופילמים, ביתרון השומרת את המבנה התלת-ממדי שמחוץ ניתוח10,20, 21 , 22 , 23 , 24.
הניתוח של מבנה מורכב biofilm נוצרו על מצעים אוראלי מחייב שימוש טכניקות במיקרוסקופ מסוגל להציג את העניין צפופה שטיחות25. סריקת מיקרוסקופ לייזר multiphoton הוא אפשרות מודרני עבור ניתוח מבנה biofilm26. הוא מאופיין על ידי שימוש אופטיקה לא לינארית עם מקור תאורה קרוב הגל האינפרא-אדום, פעמו עד femtoseconds27. שיטה זו מצוינת עבור התמונה רכישת חומרים autofluorescence או חומרים מסומן על ידי fluorophores, בנוסף תמונות שנוצרו בעזרת אותות אופטי שאינו ליניארי נגזר תופעה הידועה דור הרמונית. בין היתרונות של מיקרוסקופ multiphoton הוא עומק תמונה מצוינת שהושג עם התאים המיזערי הנזק שנגרם על ידי עוצמת האור עירור27.
עבור בדיקת הכדאיות של biofilm על משטחים והאביוטיים על ידי מיקרוסקופ multiphoton, השימוש של חומצות גרעין פלורסנט צבענים עם מאפיינים שונים ספקטרלי, יכולת חדירה של תאים חיידקיים נדרש28. Fluorophores SYTO9 (ירוק-פלורסנט) ו- propidium יודיד (אדום-פלורסנט) יכול לשמש עבור הבחנה חזותית בין חיידקים מתים וחיים28,29,30. Propidium יודיד חודר רק חיידקים עם ממברנות פגום, בעוד SYTO9 מזין תאים חיידקיים עם קרום שלמים ולא פרוץ. כאשר שני צבעי נמצאים בתוך תא, propidium יודיד יש זיקה גדולה יותר עבור חומצות גרעין ומביא SYTO9, סימונו אדום28,30.
על רקע הסביבה אוראלי המורכבות ואת אורלי biofilm הטרוגניות, מיקרוסקופיה טכניקות הדרושים המאפשרים ניתוח biofilm של המשטחים של שיניים, חומרים דנטליים. מאמר זה מתאר סדרה של פרוטוקולים ליישם לצורך השוואת ביופילמים אוראלי על טיטניום, חומרים קרמיים של התותבת abutments, כמו גם השיטות מעורב biofilms אוראלי ניתוחים ברמות הסלולר מורפולוגיים.

<table><tbody><tr><td>Hydrogum 5</td><td>Zhermack Dental</td><td>C302070</td><td></td></tr><tr><td>Durone IV</td><td>Dentsply</td><td>17130500002</td><td></td></tr><tr><td>חוט NiCr&nbsp;</td><td>Morelli</td><td>55.01.070</td><td></td></tr><tr><td>JET אוטומטי פולימריזציה אקרילית</td><td>Cl&aacute; ssico</td><td></td><td></td></tr><tr><td>שעווה דנטלית&nbsp;</td><td>Cl&aacute; ssico</td><td></td><td></td></tr><tr><td>סיר לחץ&nbsp;</td><td>ניירות זכוכית דנטליים Essence600</td><td></td><td></td></tr><tr><td>חצץ</td><td>NORTON</td><td>T216</td><td></td></tr><tr><td>ניירות זכוכית 1200 חצץ</td><td>NORTON</td><td>T401</td><td></td></tr><tr><td>ניירות זכוכית 2000 חצץ</td><td>NORTON</td><td>T402</td><td></td></tr><tr><td>מכונת ליטוש מטאלוגרפית</td><td>ארוטק</td><td></td><td></td></tr><tr><td>איזופרופיל אלכוהול</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>W292907</td><td></td></tr><tr><td>דבק חם נמס</td><td>TECSIL</td><td>PAH M20017</td><td></td></tr><tr><td>Filmtracer LIVE/DEAD ערכת כדאיות ביופילם</td><td>Invitrogen</td><td>L10316</td><td></td></tr><tr><td>קצות פיפטה, 10 ומיקרו; L</td><td>KASVI</td><td>K8-10&nbsp; &nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>קצות פיפטות, 1,000 ומיקרו; L</td><td>KASVI</td><td>K8-1000B&nbsp; &nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>צלחת 24 בארות&nbsp;</td><td>KASVI</td><td>K12-024</td><td></td></tr><tr><td>צלחת תחתונה מזכוכית</td><td>Thermo Scientific</td><td>150680</td><td></td></tr><tr><td>AxioObserver מיקרוסקופ הפוך&nbsp;</td><td>ZEISS</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Chameleon vision ii לייזר</td><td>קוהרנטי</td><td></td><td></td></tr><tr><td>אובייקטיבי EC Plan-Neofluar 40x/1.30 Oil DIC</td><td>ZEISS</td><td>440452-9903-000</td><td></td></tr><tr><td>חיישני SDD - X-Max 20 מ"מ&amp2;</td>תמיסת גלוטרלדהיד של <td>אוקספורד אינסטרומנטס</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>G5882</td><td></td></tr><tr><td>מאגר נתרן קקודילאט&nbsp;</td><td>סיגמה-אולדריץ'</td><td>97068&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>אוסמיום טטרוקסיד</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>201030</td><td></td></tr><tr><td>Na2HPO4</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>S9638</td><td>משמש להכנת תמיסת מלח חוצצת פוספט</td></tr><tr><td>KH2PO4</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>P9791&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>MERK</td><td>1.06404</td><td></td></tr><tr><td>Kcl</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>P9333&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>אתנול מוחלט לניתוח EMSURE</td><td>MERK</td><td>1.00983</td><td></td></tr><tr><td>CPD 030 מייבש נקודה קריטית</td><td>סדרת BAL-TEC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>JSM-6610 סריקת מיקרוסקופ אלקטרונים</td><td>JEOL</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SCD 050 ציפוי מקרטע</td><td>BAL-TEC</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

ביופילמים אוראלי על חומרים שונים עבור שתלים דנטליים

Oral Biofilm Formation on Different Materials for Dental Implants

שתלים דנטליים ורכיבים תותבת שלהם נוטים מושבת חיידקים, ביופילמים. ושימוש בחומרים המספק הידבקות חיידקים נמוך עשוי להפחית את השכיחות של ההתקדמות של מחלות פרי-השתל. על רקע הסביבה אוראלי המורכבות ואת אורלי biofilm הטרוגניות, מיקרוסקופיה טכניקות הדרושים המאפשרים ניתוח biofilm של המשטחים של שיניים, חומרים דנטליים. מאמר זה מתאר סדרה של פרוטוקולים ליישם לצורך השוואת ביופילמים אוראלי על טיטניום, חומרים קרמיים של התותבת abutments, כמו גם השיטות מעורב biofilms אוראלי ניתוחים ברמות הסלולר מורפולוגיים. המודל בחיי עיר להעריך ביופילמים אוראלי על חומרי טיטניום, אסתטיים תותבת שיניים abutments כפי שמתואר במחקר זה מספק של שימור biofilm 48 שעות, ובכך להפגין הלימות מתודולוגי משביע רצון. מיקרוסקופ multiphoton מאפשרת הניתוח של נציג שטח של biofilm נוצרו על החומרים הבדיקה. בנוסף, השימוש fluorophores, העיבוד של תמונות באמצעות מיקרוסקופ multiphoton מאפשרת הניתוח של הכדאיות חיידקי אוכלוסיה הטרוגנית מאוד של מיקרואורגניזמים. ההכנה של דגימות ביולוגיות מיקרוסקופ אלקטרונים מקדמת שימור מבני biofilm תמונות ברזולוציה טובה, אין ממצאים.

צפיפות קולוניזציה biofilm לאחר 48 שעות של צמיחה בחיי עיר במחקר זה ייצגו את הפרופורציה של האזור להפקר על הדיסקים טיטניום, אסתטיים ביחס לשטח סרוקים הכולל של הדגימה באמצעות מיקרוסקופ multiphoton ( 26.64 מ מ2). איור 2 מייצג את צפיפות מושבת חיידקים על פני השטח של החומרים שנבדקו 3. צפיפות גבוהה יותר של biofilm נצפתה על המשטחים של השחקנים ועל הדיסקים טיטניום במכונה (0.0292 מיקרומטר2 ו מיקרומטר 0.02132, בהתאמה) מאשר בהדיסקים ...

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להעריך ביופילמים אוראלי על חומרי טיטניום, אסתטיים תותבת שיניים abutments, כולל הניתוח של תאים חיידקיים הכדאיות ומאפיינים מורפולוגי. בחיי עיר מודל המשויך טכניקות במיקרוסקופ עוצמה משמשת לניתוח biofilm אוראלי.

Dental implants and their prosthetic components are prone to bacterial colonization and biofilm formation. The use of materials that provides low ...

היווצרות ביופילם אוראלי על חומרים שונים להשתלות שיניים. ביופילמים חיידקיים הם קהילות מיקרוביאליות מורכבות, מאורגנות מבחינה תפקודית ומבנית, המאופיינות במגוון של מינים מיקרוביאליים המסנתזים מטריצת פולימר חוץ-תאית ופעילה ביולוגית. שתלים דנטליים ומרכיביהם התותבים מועדים להתיישבות חיידקים ולהיווצרות ביופילם.השימוש בחומרים בעלי הרכב כימי וטופוגרפיה של פני השטח המספקים הידבקות מיקרוביאלית נמוכה עשוי להפחית את השכיחות וההתקדמות של מחלות סביב השתל. לאור המורכבות הכוללת של הסביבה וההטרוגניות של ביופילם דרך הפה, יש צורך בטכניקות מיקרוסקופיות שיכולות לאפשר ניתוח מבני של ביופילם משיניים ומשטחי חומר דנטלי. מאמר זה מתאר סדרה של פרוטוקולים המיושמים להשוואת היווצרות ביופילם אוראלי על חומרים שונים עבור שתלים דנטליים.השלבים הכרוכים בשימוש בהיווצרות ביופילם במחקר זה היו כדלקמן: רשום את הקשת המקסילרית באמצעות טביעת אלגינט. יוצקים את טביעת האלגינט באבן מסוג IV כדי לייצר דגם של קשת מקסילרית. בנה קליפים שומרים של חוט מיקרו כרום ואתר אותם על הדגם.תפעל את השרף האקרילי המרפא את עצמו בהתאם להוראות היצרן ולחץ את השרף האקרילי בין שתי לוחות זכוכית בשלב הפלסטיק כדי ליצור יריעה בעובי של שלושה מילימטרים. הנח את יריעת האקריליק על אזור החך של הדגם, בהתאם לעיצוב המכשיר, וחתוך את עודפי השרף האקרילי לפני הפילמור. לייצר דיסקי שעווה באמצעות מטריצה בקוטר 10 מילימטרים ועובי שני מילימטרים.הטמיעו ארבעה דיסקי שעווה בשרף האקרילי, שניים מהם בין הקדם טוחנות והשניים האחרים ליד הטוחנות השנייה. תן לשרף האקרילי להתפלמר בסיר לחץ מתחת ל-20 פאונד אוויר דחוס למשך 20 דקות. סיים את המכשיר התוך-אוראלי באמצעות ידית חשמלית ונקודות כרסום וליטוש.יש ללטש את משטחי הדגימה בניירות זכוכית מקוררים במים בעלי שחיקה פוחתת. נקו את הדגימות עם חומר ניקוי נוזלי ומי ברז ואמבט קולי איזופרופיל אלכוהול למשך 15 דקות. לאחר מכן, יבש עם מגבות נייר סופגות.תקן את הדגימות במכשיר התוך-אוראלי עם דבק חם נמס לא רעיל. התקן את המכשיר המכיל את הדגימות בחלל הפה. יש ללבוש את המכשיר התוך-אוראלי המכיל את הדגימות למשך 48 שעות.הכן תמיסה גוססת על ידי הוספת שלושה מיקרוליטר של SYTO 9 ושלושה מיקרוליטר של יודיד פרופידיום למיליליטר אחד של מים מזוקקים סטריליים. העבירו את הדגימות לצלחת של 24 בארות ושטפו היטב עם PBS כדי להסיר תאים שאינם נדבקים. הוסף את הנפח המתאים של תמיסת צבע פלואורסצנטי כדי לכסות את הדגימה המכילה ביופילם.מוסיפים את הצבע בזהירות רבה כדי לא לבלבל את הביופילם. דגרו את הדגימה למשך 20 עד 30 דקות בטמפרטורת החדר מוגנת מפני אור. שטפו בעדינות את דגימת הביופילם במים מזוקקים סטריליים כדי להסיר עודפי צבע.מניחים את הדגימה בכלי עם תחתית זכוכית לניתוח ביופילם, באמצעות מיקרוסקופ סריקת לייזר מרובה פוטונים. גודל התמונות שהתקבלו היה 5.16 x 5.16 מ"מ המקביל ל-26.64 מילימטרים רבועים מהשטח הכולל של כל דגימה או 33.94% מהשטח הכולל. התמונות נותחו באמצעות תוכנת פיג'י.כל תא נבחר באמצעות כלי הבחירה ועוצמת הקרינה נמדדה באמצעות הצפיפות המשולבת של פיקסלים, תוך הפחתת רקע התמונה. בחר שלוש דגימות מכל חומר בדיקה והעריך את ההרכב הכימי בשני אזורים שונים של כל דגימה, באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק המחובר לספקטרומטר אנרגיה מפזר. תקן את הביופילם על ידי טבילת הדגימות ב-2.5% של גלוטרלדהיד מדולל במאגר נתרן קקודילאט 0.1 M למשך 24 שעות.שטפו במאגר PBS. לאחר קיבוע עם 1% אוסמיום טטרוקסיד למשך שעה. שטפו במאגר PBS.יבש את דגימות הביופילם בזהירות, והשאיר אותן שקועות בריכוזים הולכים וגדלים של תמיסות אתנול. העבירו את הדגימות למייבש הנקודה הקריטית ובצעו מספר החלפות בפחמן דו חמצני עד לייבוש הדגימות. הסר את הדגימות המיובשות מהמנגנון והרכיב אותן על מחזיקי מיקרוסקופ האלקטרונים הסורק.פזרו ציפוי של 20 ננומטר של שכבת זהב על משטחי הדגימה למשך 120 שניות. צפיפות הקולוניזציה של הביופילם לאחר 48 שעות של צמיחה באתרה יוצגה במחקר זה על ידי היחס של השטח המושב לדיסקות הטיטניום והזירקוניה ביחס לשטח הסרוק הכולל של הדגימה באמצעות מיקרוסקופיה מרובת פוטונים. האיור מראה חיידקים שנדבקו למשטחי חומרי הבדיקה.צפיפות גבוהה יותר של ביופילם נצפתה על פני השטח של דיסקיות טיטניום יצוקות ומעובדות מאשר בדיסקי זירקוניה. איור זה מראה חיידקים חיים ומתים שנדבקו לפני השטח של הדגימות. בפרוטוקול זה, הפרופידיום יודיד הצבוע בחומצות גרעין חודר רק לחיידקים עם קרום פגום ולכן פולט אות פלואורסצנטי אדום הקשור לתאים מתים.SYTO 9 חודר לתאי החיידקים עם קרום שלם או פגום ופולט אות פלואורסצנטי ירוק ממיקרואורגניזמים חיים. כדאיות החיידקים התאיים הייתה דומה בין חומרי הבדיקה עם דומיננטיות של מיקרואורגניזמים חיים בכל הקבוצות. סדקים, חריצים או פגמי שחיקה שנוצרו בתהליך הליטוש ו/או העיבוד נמצאו על פני החומרים השונים שנותחו.בדיסקי הזירקוניה נצפו אזורים גדולים עם היעדר מיקרואורגניזמים ונוכחות של אגרגטים מיקרוביאליים פולימורפיים קטנים המורכבים בעיקר מקוקי ובצילי וחיידקים חוטיים. נוכחותם של קוקי ובצילי הייתה מפוזרת על פני השטח של דיסקיות טיטניום מעובדות. דגימות טיטניום יצוקות הציגו מושבות של מיקרואורגניזמים המעורבים במטריצה עם מראה דמוי ביופילם על פני השטח.פחות חומר מטריצה נצפה על פני דיסקי הזירקוניה, בהשוואה לדיסקי הטיטניום והטיטניום היצוק. ניתוח ה-EDS התגלה בדיסקיות הזירקוניה 70.83% של זירקוניה. בדיסקי הטיטניום היצוק, 95.16 של טיטניום ובדיסקיות הטיטניום המעובדות, 89.86% של טיטניום.הפרוטוקול המתואר במחקר זה סיפק שימור משביע רצון של הביופילם של 48 שעות, ולכן הוכיח התאמה מתודולוגית. השימוש במקור פלואורו ועיבוד התמונות באמצעות מיקרוסקופיה מרובת פוטונים אפשרו ניתוח שלמות החיידקים באוכלוסייה הטרוגנית מאוד של מיקרואורגניזמים מאזור מייצג של דגימה זו עם נזק תאי מינימלי. הכנת דגימות ביולוגיות למיקרוסקופ אלקטרונים קידמה את השימור המבני של הביופילם, מה שהביא לתמונה ברזולוציה טובה וללא חפצים.זה איפשר הדמיה ואפיון מורפולוגי של מיקרואורגניזמים דבוקים.

oral-biofilm-formation-on-different-materials-for-dental-implants

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

Biofilms נוצר על משטחי השן הם מורכבים מאוד חשוף מתמיד אתגרים סביבתיים מולד אקסוגניים, אשר לווסת את הארכיטקטורה שלהם, פיזיולוגיה transcriptome. פיתחנו ארגז הכלים לבחון את הרכב, ארגון מבניים ביטוי גנים של biofilms דרך הפה, אשר ניתן להתאים בתחומים אחרים של מחקר biofilm.

כלי אנליטי תיבת להערכת ביוכימיים, מבנית Transcriptome מקיף של Biofilms אוראלי בתיווך Mutans streptococci

אנו מציגים פרוטוקול לניתוח מבניים ההלחנה של biofilm אוראלי טבעי עם מכשירים...

Biofilm ניתוח שבעל פה של Palatal expanders על ידי הכלאה ב-situ פלואורסצנטי מיקרוסקופיה Confocal סריקת לייזר

מקור: Schlafer, S, ו-Frost Kristensen, M. ניטור pH חוץ-תאי בביופילמים חוצי-ממלכה באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית. J. Vis. Exp. (2020)סרטון זה מדגים את גידול הביופילמים החוצי-ממלכותיים של Streptococcus mutans ו-Candida albicans בתנאים דמויי פה כדי למודל אינטראקציות חיידקיות–פטריות, ומאפשר חקר סינרגיה מיקרוביאלית, הידבקות מתווכת גלוקן ואלימות חומצית בפתוגנזה הפה.

הקמת ביופילמים חיידקיים-פטרייתיים חוצי ממלכה לחקר פתוגנזה אורלית

מוצג פרוטוקול לכימות והשוואה בו-זמנית של שלושה רכיבים תאיים וחוץ-תאיים בתוך ביופילמים. המתודולוגיה כוללת שימוש במיקרוסקופ סריקת לייזר קונפוקלי, תוכנת ניתוח והדמיה מבנית של ביופילם ותוכנת ניתוח סטטיסטי.

כימות בו-זמני של רכיבים תאיים וחוץ-תאיים של ביופילמים

מטרת נייר שיטות זה היא לתאר את השימוש במערכת microfluidic לפיתוח biofilms רב-מינים המכילים מינים מזוהים בדרך כלל ברובד השיניים supragingival אנושי. שיטות לתיאור ארכיטקטורת biofilm, כדאיות biofilm, וגישה לbiofilm קציר לניתוחים תלוית תרבות או תרבות העצמאית מודגשות.

שימוש בתפוקה גבוהה<em&gt; במבחנה</em&gt; מערכת Microfluidic לפתח Biofilms Multi-מינים שבעל פה

שינויים microbiome דרך הפה לאורך כל הילדות הם עניין גובר. השוואה של מחקרים שונים microbiome מגלה חוסר דגימה מתוקננת פרוטוקולים. שטח מוגבל גורם הדגימה את sulcus subgingival צליל של ילדים מאתגרים. נייר נקודת דגימה מוצג כאן בפירוט שיטת הבחירה עבור אזור זה.

אוראלי Biofilm דגימה לניתוח Microbiome ב ילדים בריאים

מוצרים טבעיים מייצגים נקודות התחלה מבטיחות לפיתוח תרופות חדשות וסוכנים טיפוליים. עם זאת, בשל המגוון הכימי הגבוה, מציאת תרכובות טיפוליות חדשות מצמחים היא משימה מאתגרת וגוזלת זמן. אנו מתארים גישה פשוטה לזיהוי מולקולות מיקרוביאלית ואנטיביופילם מתמציות צמחים ושברים.

גישה שיטתית לזיהוי מולקולות אנטי-מיקרוביאליות ואנטיביופילם חדשניות מתמציות ושברים של צמחים למניעת עששת שיניים

הפרוטוקול הנוכחי מתאר מודל ניסיוני המבוסס על צביעת דיו שניתן להשתמש בו למחקר טיהור פני השטח של שתלים במבחנה וחספוס כדי לתרום לקבלת החלטות קליניות.

השפעות של שיטות מכניות המשמשות בטיפול פרי-אימפלנטיטיס על טיהור פני השתל וחספוס

מחקר הפיילוט הנוכחי במבחנה נועד להעריך את יעילות הניקוי של שלושה כלים שונים לניקוי זיהום ושינויים אפשריים במשטח לאחר הטיפול, תוך שימוש בדיו אדום קבוע לחיקוי נוכחות ביופילם אוראלי.

מחקר פיילוט במבחנה כדי להעריך את יכולת הניקוי וההשפעות של שיטות ניקוי שונות על משטחי השתלה

השיטה מתוארת בידוד ואפיון של תאי גזע אנושיים שיניים זולות (hDPSCs) באמצעות...

בידוד, אפיון והשוואתי התמיינות של תאי גזע אנושיים שיניים זולות נגזרה שיניים קבועות על ידי שימוש בשתי שיטות שונות

חקור היווצרות ביופילמים אוראליים על טיטניום וזירקוניה לשתלים דנטליים. שיטה זו משתמשת במיקרוסקופיה מתקדמת לניתוח תפקודיות חיידקים ומורפולוגיה, ומסייעת לבחירת חומרים מתאימים להפחתת דבקות מיקרוביאלית ומחלות פרי-אימפלנט.

ביופילמים אוראלי על חומרים שונים עבור שתלים דנטליים

גלה סרטונים נוספים