טיהור, בנייתו מחדש של TRPV1 לניתוח Spectroscopic

7.7K צפיות

צוטט 1 פעמים

11:53 דק׳

3 ביולי 2018

10.3791/57796-v

3 ביולי 2018

7.7K צפיות

Francisco J. Sierra-Valdez¹ , Richard A. Stein² , Phanindra Velissety¹^,³ , Valeria Vasquez¹ , Julio F. Cordero-Morales¹

¹Department of Physiology, University of Tennessee Health Science Center, ²Department of Molecular Physiology and Biophysics, Vanderbilt University Medical Center, ³CuriRX, Inc.

מאמר זה מתאר שיטות ספציפיות כדי לקבל כמויות הביוכימי של solubilized-חומרי ניקוי TRPV1 לניתוח spectroscopic. הפרוטוקולים המשולב לספק כלים הביוכימי biophysical זה ניתן להתאים להקל פונקציונלי מבניים ללימודי תעלות היונים בתרבית של סביבה מבוקרת ממברנה.

גלה סרטונים נוספים

ניקוי TRPV1

תהודה פאראמגנטית של אלקטרונים

תהודה כפולה של אלקטרונים-אלקטרונים

המסה באמצעות דטרגנטים

הרכבה מחדש של חלבונים

מוטגנזה מכוונת לאתר

ביטוי באמצעות בקולו-וירוס

כרומטוגרפיית הפרדה לפי גודל

יצירת פרוטאו-ליפוזומים

Chapters in this video

0:04

כותרת

0:54

מוטגנזה של TRPV1

2:19

הפקת הבאקמיד (Bacmid) והבאקולו-וירוס הרקומביננטיים לביטוי חלבון

5:14

ניקוי eTRPV1 ומוטנטים בעלי ציסטאין בודד

7:18

סימון ספין מכוון לאתר במוטנטים של eTRPV1 בעלי ציסטאין בודד

8:12

שחזור של מוטנטים של eTRPV1 בעלי ציסטאין בודד המסומנים בספין

9:30

תוצאות: אפיון של מבנה ה-TRPV1 המינימלי נטול הציסטאין ושל המוטנטים בעלי הציסטאין הבודד המשמשים לניתוח ספקטרוסקופי

11:08

סיכום

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.