יצירת מודל של סרטן שד גרורתי Orthotopic מאתר וביצוע מאתר כריתה רדיקלית

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום סרטן השד על איך לחקות את התקדמות סרטן השד האנושי וטיפול במודל העכבר. היתרון העיקרי של מודל זה של סרטן השד העכבר הוא שיש לו שיעור גידול גבוה לאחר השתלה אורתוטופית שיעור הישנות מקומי נמוך לאחר כריתת שד. התחל על ידי אישור חוסר תגובה לצביטת בוהן בעכבר נקבה הרדמה והדבקת איברי החיה ללוח כירורגי.

שימוש במטליות כותנה סטריליות מעקרות את האזור הכירורגי עם כלורהקסידין, יוד ו-75% אתנול. ולעשות חתך בעור חמישה מילימטר באמצע קיר החזה האחורי. לאחר מכן להרים את הצד הימני של העור הסמוך החתך ולהשתמש מספריים מיקרודיסקציה סטרילית כדי לנתק את העור מקיר החזה.

להפוך את העור כדי לחשוף את כרית שומן חלבי מספר 2 הנכון ולהשתמש מזרק אינסולין מיליליטר אחד מצויד מחט 28.5-מד להזריק בזהירות 20 microliters של השעיה תא סרטן דרך הפצע לתוך כרית השומן. החזק את המחט בתוך כרית השומן במשך חמש שניות כדי לאפשר את תערובת חלבון התא הסרטני gelatinous להתחזק לפני הסרת המחט, וסגירת החתך עם תפרים סטריליים 5-0 nonabsorbable. לאחר מכן מניחים את החיה בכלוב נקי עם ניטור עד חקירה מלאה.

כדי לבצע את כריתת השד שמונה ימים לאחר חיסון סרטן להכין את העכבר לניתוח כפי שהוכח רק, ולעשות חתך בעור חמישה מילימטר שני מילימטרים משמאל הצלקת הכירורגית מחיסון התא הסרטני. הרחב את החתך לכיוון השורש של ההמשך כדי להסיר את הגידול, ואת העור, כולל הצלקת הכירורגית, ואת הנגע במגע עם הגידול, ואת אגן בלוטות הלימפה בבית הזרע שבו בדרך כלל אין בלוטות הלימפה גלויים נמצאים בזמן כריתת השד. ואז לסגור את פגמי העור עם תפרים סטריליים 5-0 nonabsorbable בצורה של Y.And להחזיר את החיה לכלוב שלה עם ניטור עד כה מלאה.

לכמית גרורות ריאות 21 ימים לאחר החיסון להזריק 150 מיליגרם לקילוגרם של D-לוציפרין IP 15 דקות לפני המתת חסד. ולהשתמש מספריים מאיו מעוקל כדי לפתוח את העור ואת צדת באמצע הבטן. לחץ על הכבד עד הסרעפת ניתן לדמיין, לחתוך את הסרעפת ואת הצלעות הדו צדדיות מן caudad כדי צפלד.

הפוך את קיר בית החזה הקדמי כדי לחשוף את הריאות ולהרים את הריאות כדי לזהות את הוושט החזי, שנראה כמו כבל המחבר את הריאות לעמוד השדרה. חותכים את הוושט עם מספריים microdissection ולהשתמש מדפים כדי למשוך את הריאות הדו-צדדיות ואת הלב לכיוון caudad. לאחר מכן חותכים את קנה הנשימה ואת כלי הדם העיקריים לשיא הריאה ב cephalad וממקמים את הריאות לתוך צלחת פטרי 10 ס"מ עבור הדמיה bioluminescent.

השתמש במספריים כדי להסיר את הלב מרמת הריאה. החל משמונה ימים לאחר כרית שומן חלב סרטן חיסון התא הביולומינציה בריאות הוא עמוק יותר וקטן יותר מאשר ההיתוך העיקרי המשקף את נטל הגידול העיקרי בעכברים חיים. מדידת גודל הגידול עם calipers מאפשר הערכה של נפח הגידול במקום.

מודל זה של כריתת שד מאפשר גם ניטור נטל גידול גרורתי סדרתי מבלי להמתת חום לבעלי החיים. את נטל הגידול של גרורות הריאה ניתן לכמת גם על ידי הדמיה לשעבר vivo, אבל המגבלה היא כי העכברים חייבים להיות המתת דם. הישרדות עכבר לאחר טיפול כירורגי יכול גם להיות במעקב כנקודת קצה קלינית לתרגום.

לאחר התפתחותה טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום סרטן השד לחקור לא רק פיתוח תרופות חדשות, אלא גם מחקר סרטן השד בכלל.