שמר האפייה מטבולית תיוג עם 4-thiouracil, כימות של לאחרונה מסונתז mRNA כמדד לפעילות RNA פולימראז II

8.7K צפיות

צוטט 14 פעמים

09:21 דק׳

22 באוקטובר 2018

10.3791/57982-v

22 באוקטובר 2018

8.7K צפיות

הפרוטוקול המתואר כאן מבוסס על כימות ברמת הגנום של mRNA החדש מסונתז מטוהרים מתאי שמרים עם 4-thiouracil תוויות. שיטה זו מאפשרת למדוד את סינתזת mRNA חשיפות מהשחתה mRNA ומספק, לפיכך, מדידה מדויקת של RNA פולימראז II שעתוק.

גלה סרטונים נוספים

סינתזה של mRNA

Chapters in this video

0:04

כותרת

0:41

תרבית תאים

1:37

סימון ב-4tU עם S. pombe כחומר פנימי (Spike-in)

3:20

מיצוי RNA וטיפול ב-DNase

4:30

ביוטיניציה ספציפית לתיאול של RNA שסונתז לאחרונה

6:05

טיהור של הפרקציה שסונתזה לאחרונה מתוך RNA כולל ובלתי מסומן באמצעות חרוזיים מגנטיים מצופים בסטרפטאבידין

7:18

תוצאות: כימות של mRNA שסונתז לאחרונה כמדד לפעילות RNA פולימראז II

8:52

סיכום

Related Videos