Name: שיטה הנפחי עבור כימות Vasospasm המוחית במודל מאתר של דימום תת-עכבישי (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-07-28T14:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 12 s
Description: למדו שיטת הדמיה תלת-ממדית לכימות ואסוספאזם מוחי בעכברים לאחר דימום תת-עכבישי באמצעות מיקרו-CT ויציקה אנדו-ווסקולרית. השיטה מאפשרת מדידה מדויקת של נפחי כלי דם ומורפולוגיה וסקולרית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

חלקים של מחקר זה הן חלק עבודת הדוקטורט של Pantel טי, הציג בפני הפקולטה לרפואה של יוהנס גוטנברג-אוניברסיטת מיינץ (mainz). המחקר נתמך על ידי Stiftung משחררת את Friedhelm על ידי Neurochirurgische Forschung את Stiftung (מענקים A.N.).

ניסויים בבעלי חיים היו שאושר על ידי הועדה אחראית טיפול בבעלי חיים (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz), מתבצעת על פי חוק רווחת בעלי חיים גרמנית (TierSchG). כל הישים הבינלאומי, לאומי, המוסדיים הנחיות הטיפול ואת השימוש בבעלי חיים עקבו אחריך
במחקר זה, שימשו זכר עכברים C57BL6 (גיל 10-12 שבועות). בקצרה, דימום תת-עכבישי הסחרור הושפע endovascular ניקוב פילמנט תחת הרדמה עם איזופלוריין. העורק החיצוני השמאלי הוכן בניתוח. לאחר מכן, נימה היה מוכנס לתוך העורק תרדמני חיצוני, מתקדם intracranially דרך העורק אשר היה מחורר ב בעורק T, גרימת תת עכבישי. עלייה בלחץ תוך גולגולתי נלקח כמחוון של endovascular מוצלח לחירור. פרוטוקול מפורט endovascular פילמנט ניקוב מודל של SAH בעכברים כבר פורסם על-ידי אחרים8,14.
1. זלוף, הליהוק Endovascular
<ol><li>מחקר זה בוצע זלוף 72 שעות לאחר אינדוקציה של SAH. לגרום הרדמה על ידי הזרקת intraperitoneally 5 µg/g הגוף משקל (bw) midazolam, 30 פנטניל bw ng/g ו- 0.5 medetomidin bw µg/g. להמשיך רק לאחר לרמה הרדמה מספקת הגיעה, אשר אושר על ידי העדר תגובות לגירויים כאב.</li>
	<li>פתיחת בית החזה, לנקב החדר השמאלי עם בצינורית 21G, פתח אטריום ימין ולאחר מלחציים העורקים כפי שמתואר במקום15.</li>
	<li>ביצוע של זלוף transcardiac באמצעות את הפתרונות הבאים: (i) Dulbecco של פוספט Buffered מלוחים המכילים MgCl2 CaCl2 ב- pH 7.4 עם גלוקוז 1 g/L, ו (ii) 4% paraformaldehyde פתרון.<ol>
<li>להתחיל את הטפטוף את הפתרון (i) למשך 2 דקות ולהמשיך עם פתרון (ii) במשך 4 דקות.</li>
		<li>להשרות את הפתרונות בטמפרטורה של 37 ° C ו באמצעות משאבה שבשליטת הלחץ בקצב משתנה זלוף כדי perfuse ובלחץ קבוע של 70 מ מ כספית, אשר נמצאה להיות הלחץ זלוף אופטימלית כדי לנתח vasospasm עכברים16. להימנע אובדן הלחץ בעת החלפת מהפתרון (i) פתרון (ii).</li>
	</ol>
</li>
	<li>אחרי זלוף עם פתרונות (i) ו- (ii), ממשיכים זלוף במשך 20 דקות בטמפרטורת החדר עם יציקה ריתוך (ראה טבלה של חומרים) בקצב קבוע של 0.2 ml/min.</li>
	<li>לאפשר לריפוי של החומר הליהוק ריתוך ב 4 מעלות צלזיוס למשך הלילה. ואז להסיר במוח הגולגולת כפי שתואר לעיל17, להעביר את הדגימה לפתרון PFA 4% ולאחר לאחסן את הדגימה ב 4 ° C עד סריקות CT מיקרו.</li>
</ol>2. מיקרו טומוגרפיה ממוחשבת
<ol><li>מקום המוח במרכז של צינור פלסטיק עם מלקחיים אנטומי בוטה. בחר צינור בקוטר גדול מעט יותר הדגימה כדי להבטיח כי האובייקט לא זזה במהלך ייבוא תמונות. להשתמש גזה כדי לסגור את הצינור.</li>
	<li>לצרף את צינור פלסטיק המנוע מיקרו-לדרוך על המחשב-מנווט-פקד (CNC) מערכת המיקום לבקתה רנטגן, שבו מסובבים את העצם סביב צירו האופקי.</li>
	<li>יישר המדגם בתצוגה השדה-של-תחת רדיוגרפיה רנטגן. כדי להשיג את רמת ההגדלה מקסימלי, למקם את האובייקט קרוב ככל האפשר אל מקור רנטגן ולהגדיל את המרחק הגלאי ככל האפשר.</li>
	<li>להשתמש בפרוטוקול רכישה שלב-ולצלם תמונה עם הפרמטרים הבאים הסריקה: להגדיר זמן החשיפה ל- 1 s כל השלכה למטב את יחס אות לרעש (SNR), צינור מתח 80 kV (µA 38 הנוכחי), סיבוב 360 מעלות וכתוצאה מכך השלכות 1,000.</li>
	<li>עבור שחזור של נתוני גלם להשתמש באלגוריתם הקרנה אחורי מסוננים החלת המסנן שפ-לוגן עם מטריצה של 1024 x 1024 x 1024 voxels באמצעות שחזור תוכנה (ראה טבלה של חומרים). לצורך ניתוח נוסף לייבא את הנתונים המתקבלים DICOM לתוך תוכנת ויזואליזציה תלת-ממד (ראה טבלה של חומרים).</li>
</ol>3. תלת-ממדי שחזור של העץ וסקולרית תוך-גולגולתי והנחישות של אמצעי אחסון כלי
הערה: ניתן למצוא חומר רקע על הפונקציות של התוכנה ויזואליזציה באמצעות הפונקציה לעזור.
<ol><li>לייבא נתוני Dicom לתוך תוכנת ויזואליזציה באמצעות הפונקציה ייבוא.</li>
	<li>דמיינו את ספינת עץ עם הפונקציה Volren. לבחור את הסף ויזואליזציה כך העורקים המוחיים הגדולים מתוארים בחלוקות חדה. חשוב להשתמש הסף ויזואליזציה זהה עבור כל ערכות הנתונים השייכים הסדרה ניסיוני.</li>
	<li>כמעט לנתח את העורקים המוחיים הבזליים (מעגל של ויליס) עם הפונקציה VolumeEdit על-ידי תחימת כלי עם הסמן. ואז כמעט לנתח על קטע כלי כדי להיות מנותח. לכן, לסובב את מודל תלת-ממדי של העץ כלי הדם כדי דווקא להפריד בין כל הענפים קטן של הרחוב הראשי. זה חיוני לניתוח נוסף למחוק את כל כלי פרט קטע כלי כדי להיות מנותח.</li>
	<li>להחיל את הפונקציה Autoskeleton עם סף מוגדר סף ויזואליזציה, אשר מפיק מרכז-קו -מבוסס SpatialGraph.</li>
	<li>לאחר מכן, להחיל בפונקציה SpatialGraphToLineSet כדי ליצור קו סט. לחלק את הקו המקשטים את פלחי משנה יחיד על ידי באופן ידני בחירת את פלחי משנה יחיד עם הסמן ולאחר לחיצה על "פיצול". שלב זה חיוני על מנת לחשב את נפחי פלחי משנה יחיד.</li>
	<li>השתמש בפונקציה LineSetToSpatialGraph כדי ליצור גרף המרחבי שוב.</li>
	<li>השתמש בפונקציה SpatialGraphStatistics כדי לקבוע את אורך, נפח, קוטר של כל פלח משנה. להמחשת בצבעים המייצגים את הקורס מקוטר כלי השיט, השתמש בפונקציה SpatialGraphView. הגדר מקטע צביעה כדי "עובי", אשר עולה בקנה אחד עם קוטר הכלי. חשוב לבחור את המפה צבע זהה עבור כל datasets השייכים הסדרה ניסיוני.</li>
	<li>להוסיף אורך פלחי משנה כדי לקבוע אילו פלחי משנה כדי להיכלל בניתוח נוסף. במחקר הנוכחי אנו מוערכים קטע כלי בהיקף של 1 מ מ העורק הפרוקסימלית של בעורק T ו- 2.5 מ מ של עורק המוח התיכון דיסטלי של בעורק טי לאחר מכן להוסיף את אמצעי האחסון כדי לקבוע את נפח הכלי קטע כלי מוגדרת.</li>
</ol>

<ol><li>Macdonald, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+neurological+deterioration+after+subarachnoid+haemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Neurology%22%5BJournal%5D)">Delayed neurological deterioration after subarachnoid haemorrhage.</a> Nature Reviews Neurology. 10 (1), 44-58 (2014).</li>
<li>Dorsch, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+clinical+review+of+cerebral+vasospasm+and+delayed+ischaemia+following+aneurysm+rupture%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurochirurgica+Supplement%22%5BJournal%5D)">A clinical review of cerebral vasospasm and delayed ischaemia following aneurysm rupture.</a> Acta Neurochirurgica Supplement. 110 (Pt 1), 5-6 (2011).</li>
<li>Vergouwen, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Definition+of+delayed+cerebral+ischemia+after+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage+as+an+outcome+event+in+clinical+trials+and+observational+studies%3A+Proposal+of+a+multidisciplinary+research+group%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Definition of delayed cerebral ischemia after aneurysmal subarachnoid hemorrhage as an outcome event in clinical trials and observational studies: Proposal of a multidisciplinary research group.</a> Stroke. 41 (10), 2391-2395 (2010).</li>
<li>Friedrich, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CO2+has+no+therapeutic+effect+on+early+microvasospasm+after+experimental+subarachnoid+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">CO2 has no therapeutic effect on early microvasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 34 (8), e1-e6 (2014).</li>
<li>Friedrich, B., Muller, F., Feiler, S., Scholler, K., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+subarachnoid+hemorrhage+causes+early+and+long-lasting+microarterial+constriction+and+microthrombosis%3A+An+in+vivo+microscopy+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Experimental subarachnoid hemorrhage causes early and long-lasting microarterial constriction and microthrombosis: An in vivo microscopy study.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 32 (3), 447-455 (2012).</li>
<li>Terpolilli, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide+inhalation+reduces+brain+damage%2C+prevents+mortality%2C+and+improves+neurological+outcome+after+subarachnoid+hemorrhage+by+resolving+early+pial+microvasospasms%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide inhalation reduces brain damage, prevents mortality, and improves neurological outcome after subarachnoid hemorrhage by resolving early pial microvasospasms.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 36 (12), 2096-2107 (2016).</li>
<li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+segmentation-based+volumetric+approach+to+localize+and+quantify+cerebral+vasospasm+based+on+tomographic+imaging+data%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A segmentation-based volumetric approach to localize and quantify cerebral vasospasm based on tomographic imaging data.</a> PLoS One. 12 (2), e0172010(2017).</li>
<li>Schuller, K., Buhler, D., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+model+of+subarachnoid+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A murine model of subarachnoid hemorrhage.</a> Journal of Visualized Experiments. (81), e50845(2013).</li>
<li>Altay, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+method+for+subarachnoid+hemorrhage+to+induce+vasospasm+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A novel method for subarachnoid hemorrhage to induce vasospasm in mice.</a> Journal of Neuroscience Methods. 183 (2), 136-140 (2009).</li>
<li>Momin, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+delivery+of+nitric+oxide+inhibits+leukocyte+migration+and+prevents+vasospasm+in+haptoglobin+2-2+mice+after+subarachnoid+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Controlled delivery of nitric oxide inhibits leukocyte migration and prevents vasospasm in haptoglobin 2-2 mice after subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgery. 65 (5), 937-945 (2009).</li>
<li>Froehler, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage+in+haptoglobin+2-2+mice+can+be+prevented+with+a+glutathione+peroxidase+mimetic%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Neurocience%22%5BJournal%5D)">Vasospasm after subarachnoid hemorrhage in haptoglobin 2-2 mice can be prevented with a glutathione peroxidase mimetic.</a> Journal of Clinical Neurocience. 17 (9), 1169-1172 (2010).</li>
<li>Lin, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+model+of+subarachnoid+hemorrhage-induced+cerebral+vasospasm%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A murine model of subarachnoid hemorrhage-induced cerebral vasospasm.</a> Journal of Neuroscience Methods. 123 (1), 89-97 (2003).</li>
<li>Marbacher, S., Fandino, J., Kitchen, N. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standard+intracranial+in+vivo+animal+models+of+delayed+cerebral+vasospasm%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Standard intracranial in vivo animal models of delayed cerebral vasospasm.</a> British Journal of Neurosurgery. 24 (4), 415-434 (2010).</li>
<li>Feiler, S., Friedrich, B., Scholler, K., Thal, S. C., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardized+induction+of+subarachnoid+hemorrhage+in+mice+by+intracranial+pressure+monitoring%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Standardized induction of subarachnoid hemorrhage in mice by intracranial pressure monitoring.</a> Journal of Neuroscience Methods. 190 (2), 164-170 (2010).</li>
<li>Ghanavati, S., Yu, L. X., Lerch, J. P., Sled, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+perfusion+procedure+for+imaging+of+the+mouse+cerebral+vasculature+by+X-ray+micro-CT%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A perfusion procedure for imaging of the mouse cerebral vasculature by X-ray micro-CT.</a> Journal of Neuroscience Methods. 221, 70-77 (2014).</li>
<li>Parra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+model+of+subarachnoid+hemorrhage+associated+cerebral+vasospasm%3A+methodological+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Neurological+research%22%5BJournal%5D)">Mouse model of subarachnoid hemorrhage associated cerebral vasospasm: methodological analysis.</a> Neurological research. 24 (5), 510-516 (2002).</li>
<li>Boulay, A. C., Saubamea, B., Decleves, X., Cohen-Salmon, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification+of+Mouse+Brain+Vessels%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Purification of Mouse Brain Vessels.</a> Journal of Visualized Experiments. 105 (e53208), (2015).</li>
<li>Marjamaa, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+with+a+deletion+in+the+first+intron+of+the+Col1a1+gene+develop+dissection+and+rupture+of+aorta+in+the+absence+of+aneurysms%3A+High-resolution+magnetic+resonance+imaging%2C+at+4.7+T%2C+of+the+aorta+and+cerebral+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Magnetic+Resonance+in+Medicine%22%5BJournal%5D)">Mice with a deletion in the first intron of the Col1a1 gene develop dissection and rupture of aorta in the absence of aneurysms: High-resolution magnetic resonance imaging, at 4.7 T, of the aorta and cerebral arteries.</a> Magnetic Resonance in Medicine. 55 (3), 592-597 (2006).</li>
<li>Schambach, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrafast+high-resolution+in+vivo+volume-CTA+of+mice+cerebral+vessels%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Ultrafast high-resolution in vivo volume-CTA of mice cerebral vessels.</a> Stroke. 40 (4), 1444-1450 (2009).</li>
<li>Figueiredo, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+digital+subtraction+angiography%2C+micro-computed+tomography+angiography+and+magnetic+resonance+angiography+in+the+assessment+of+the+cerebrovascular+system+in+live+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Neuroradiology%22%5BJournal%5D)">Comparison of digital subtraction angiography, micro-computed tomography angiography and magnetic resonance angiography in the assessment of the cerebrovascular system in live mice.</a> Clinical Neuroradiology. 22 (1), 21-28 (2012).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

מאתר SAH הן כלי חשוב למחקר SAH בסיסי. מוחי vasospasm משמש לעתים קרובות נקודת קצה במחקרים ניסיוני לחקור את המנגנונים המוביל DCI אחרי SAH9,11. עם זאת, כימות של מוחי vasospasm בעכברים או דגמים אחרים בעלי חיים קטנים של SAH הוא מאתגר. בדרך כלל, לכמת vasospasm שמחוץ נחישות של כלי השיט קטרים בנקודות אנטומי מוגדרים לאחר endovascular זלוף, הליהוק7,9,12 או על ידי קביעת היקף כלי מוגדרת על היסטולוגית סעיפים10,11. עם זאת, שיטות אלה יש כמה חסרונות: Vasospasm מוערך רק בנקודות מוגדרות אנטומי; vasospasm המדינות השכנות מקטעי כלי עשוי לברוח הערכה. חפצים היסטולוגית להציג מקור נוסף של שגיאות. יתר על כן, האבחון יכול להיות סובייקטיבי למדי, בגלל המיקום המדויק שבו נמדד קוטר הכלי נקבעת על-ידי החוקר.
המטרה היה לכן להקים שיטה מכמתת vasospasm מוחית על ידי חישוב נפח כלי קיבול מוחי כל מקטעי חתך הרוחב נתונים הדמיה7. היתרון החשוב ביותר של השיטה הנפחי המובאת כאן היא כלי הדם. הזה כולו מקטעים תוכל להיבדק. זה מונע את הצורך של הגדרה של נקודה שבה נמדד קוטר הכלי. יתרון נוסף של הערכת כלי כל מקטעי היא כי זה ככל הנראה מציג פרמטר אובייקטיבי יותר לכמת vasospasm מאשר קביעת כלי קטרים בנקודות מוגדרות איפה vasospasm של כלי השיט צינתור או דיסטלי יותר לברוח הערכה. ייצוג דיגיטלי של קטרים הכלי בעזרת קוד צבע מאפשר הערכת מידת vasospasm אינטואיטיבי. יתר על כן, הערכת נפחי מוביל הבדלי כלי vasospastic לעומת הערכה של קטרים כלי כמוצג בתיבה על התוצאות נציג. שחזור וירטואלי מושגת עם השיטה המובאת כאן משקף את כלי הדם האנטומיה במדויק. זה מוצג על ידי הערכת הסדרה נציג, אילו כלי קטרים נמדדת ברמה המיקרוסקופית, מן המרתף דיגיטלי היו דומים, מתרבה התצפיות של המחקר הקודם7. עם זאת, למרות היתרונות שלה, עוד יותר נדרשים מחקרים כדי להעריך אם השיטה המובאת כאן עדיפה בשיטות המקובלות של vasospasm ניתוח או לא.
מגבלה של השיטה המובאת כאן היא כי היא מעניקה זמן רב יותר לעומת ניתוח מיקרוסקופי casted מוחי לדוגמאות או ניתוח היסטולוגית (מיקרו CT סריקה זמן 90 דקות לכל דגימה מהמוח, עיבוד נתונים 45 דקות לכל דגימה מהמוח). יתר על כן, הזמינות של סורקי CT מיקרו עשויה להגביל את היישום שלה. מספר החיות לבחון כאן היה די כדי להוכיח את הכדאיות של הפרוטוקול המתואר בכתב היד. עם זאת, אם הפרוטוקול אמור לשמש בלימודי טיפול, חיה המספרים צריך להיות מחושב בהתבסס על ההשפעות הצפויות באמצעי אחסון כלי הקיבול של קטרים. הגבלה נוספת של זה ומחקרים נוספים באמצעות מודלים SAH מאתר הוא ש-vasospasm הזה הוא נחוש ex-vivo. זה עושה את האורך מחקרים בלתי אפשרי לחקור ערכים של תוכנית בסיסית לפני SAH אינדוקציה ו- vasospasm בנקודות זמן שונות. למרות מחקרים הוכיחו שזה אפשרי לתאר את האנטומיה של כלי תוך-גולגולתי גדול של עכברים ויוו באמצעות טומוגרפיה תהודה מגנטית18, טומוגרפיה מסתמים19או חיסור דיגיטלי עדיין לא שימשו מסתמים20, שיטות אלה, לידע שלנו, ולנתח מוחית vasospasm ב- SAH מאתר מודלים vivo בתוך. ראוי לציין, מחדש דיגיטלי של להערכת מוחי עם הערכת נפחי עוקבות vasospasm מוחי המובאת כאן אינה מוגבלת לשימוש ב- ex-vivo מיקרו CT נתונים. אם הדמיה ברזולוציה גבוהה בכלי הדם במוח סקציות קרוס בעכברים צריך להיות זמין בעתיד, זה יכול לשמש כדי לבצע ניתוח volumetric של vasospasm ויוו.

דימום תת-עכבישי aneurysmatic (SAH), תת סוג של שבץ מדמם, היא מחלה נפוצה ביחידות טיפול neurointensive. מלבד מוקדם פגיעה מוחית (עבי), אשר כוללת נזק מוחי שנגרם על ידי האירוע המדמם עצמו, עוד גורם חשוב בקביעת התוצאה החולה הוא מתעכב קליפתית (DCI), שהוגדרו על-ידי קלינית הידרדרות דרך לקוי במוח זלוף או אוטם מוחי לא משויך הליכים התערבותית או כירורגי1,2,3. חשוב המנגנונים תורם DCI הם זאת אולי התחלת כלי גדול-מוחין מצד אחד; מצד שני, תפקוד microcirculatory עם vasospasm של microvessels microthrombosis, ואת איסכמיה הקשורות דיכאון מתפשטת קורטיקלית לשחק תפקיד (נבדקה ב Madonald 20141). לכן, אבחון של vasospasm של כלי מוחי גדול חיוני הקלינית, מציג נקודת קצה חשוב במחקרים קליניים וניסויים רבים.
למרות העובדה כי התכונות של vasospasm במודלים SAH מאתר אינן ישירות להעברה לחולה, מאתר אנושית כל דגמי SAH vasospasm קשורים כבר גוברת החשיבות בשנים האחרונות. דגמים אלה SAH הנגרמת על ידי endovascular פילמנט ניקוב4,5,6,7,8, חיתוך של ספינות cisternal9, או הזרקה של דם לתוך CSF10 11, ,12. בניגוד גדול מודלים של בעלי חיים SAH אשר תוכננו באופן מסורתי ללמוד vasospasm13, הדגמים מאתר יש היתרון הגדול כי זנים העכברים הטרנסגניים רבים זמינים. זה הופך אותם כלי מצוין ללימוד המנגנונים המולקולריים המוביל vasospasm הבלש הראשי. עם זאת, קביעה של מוחי vasospasm בעכברים הוא מאתגר. זה כי בניגוד מודלים בעלי חיים גדול שבו vasospasm אפשר לבחון תוך שימוש בטכניקות הדמיה קליני, ויוו הדמיה ולנתח מוחית vasospasm בעכברים אינה זמינה עדיין. לכן, vasospasm נקבעת בדרך כלל באמצעות10,או מקטעים היסטולוגית11 או השלכת מאכל אחרי כלי מוחי-7,-9,-12. לעומת זאת, שיטות אלה יש החיסרון כלי הדם הזה קטרים נבדקים בנקודות מוגדרות בלבד.
בהתבסס על המחקר הקודם7, כתב יד זה מציג שיטה אובייקטיבית, ניתוח לשחזור של vasospasm במודל SAH מאתר. השיטה היא בהתאם זלוף, הליהוק של כלי מוחי, לשעבר vivo סריקה מיקרו-CT, שחזור דיגיטלי של כלי עץ, ובעקבות ההערכה של אמצעי אחסון של כל כלי מוחי.

<table><tbody><tr><td>מדטומידין&nbsp;</td><td>פייזר, קרלסרוהה, גרמניה</td><td>n.a.Midazolam</td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Ratiopharm, אולם, גרמניה</td><td>n.a.Fentanyl</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Curamed, קרלסרוהה, גרמניה</td><td>n.a.Venofix</td><td></td></tr> <tr><td>21G</td><td>B Braun Melsungen AG, Melsungen, גרמניה</td><td>n.a.21G</td> <td>צינורית&nbsp;</td></tr><tr><td>דולבקו s תמיסת מלח חוצצת פוספט המכילה MgCl2 ו-CaCl2, pH 7.4&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich, המבורג, גרמניה</td><td>D8662&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>4% תמיסת פרפורמלדהיד&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich , המבורג, גרמניה</td><td>100496</td><td></td></tr><tr><td>Microfil MV-122&nbsp;</td><td>Flowtech Inc., Carver, MA, ארה"ב</td><td>n.a.Radiopaque</td><td></td></tr> <tr><td>Micro-CT system Y.Fox Yxlon</td><td>, Garbsen, גרמניה</td><td>n.a.Reconstruction</td><td></td></tr> <tr><td>Studio תוכנת גרסה 1.2.8.1</td><td>TeraRecon, פרנקפורט אם מיין, גרמניה</td><td>n.a.Reconstruction</td> <td>תוכנה</td></tr><tr><td>Amira גרסת תוכנה 5.4.2&nbsp;</td><td>FEI Visualization Sciences Group, הילסבורו, אורגון, ארה"ב</td><td>n.a.תוכנת</td> <td>הדמיה</td></tr><tr><td>PHD אולטרה מזרק</td><td>מכשיר הרווארד</td><td>70-3</td><td>משאבה מבוקרת לחץ</td></tr><tr><td>מלקחיים אנטומיים (בוטה)</td> <td>B Braun Melsungen AG, Melsungen, גרמניה</td><td>160323_v&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Infinity X-21</td><td>Deltapix, Maalov, דנמרק</td><td>n.a.מצלמה</td> <td>ברזולוציה גבוהה</td></tr><tr><td>DeltaPix Insight תוכנה גרסה 2.0.1</td><td>Deltapix, Maalov, דנמרק</td><td>n.a.C57BL6</td><td></td></tr> <tr><td>עכברי</td><td>נהר צ'ארלס, קלן, גרמניה</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

שיטה הנפחי עבור כימות vasospasm המוחית במודל מאתר של דימום תת-עכבישי

A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

דימום תת-עכבישי (SAH) הוא תת סוג של שבץ מדמם. Vasospasm המוחית המתרחשת בעקבות הדימום גורם חשוב בקביעת התוצאה החולה, ולכן נלקח לעתים קרובות בתור נקודת קצה של המחקר. עם זאת, במחקרים בעלי חיים קטנים-SAH, כימות vasospasm מוחית היא אתגר גדול. . הנה, שיטה שמחוץ מוצג המאפשר כימות של אמצעי אחסון של כלי השיט כולו מקטעים, אשר יכול לשמש מדד אובייקטיבי לכמת vasospasm מוחי. בשלב הראשון, הליהוק endovascular מוחי להערכת מתבצעת באמצעות סוכן הליהוק ריתוך. לאחר מכן, חתך הרוחב נתונים הדמיה נרכשים על ידי טומוגרפיה מיקרו. השלב הסופי כולל שחזור תלת-ממדי של העץ וסקולרית וירטואלי, ואחריו אלגוריתם לחישוב קווי מרכז ואמצעי אחסון המקטעים הכלי הנבחר. השיטה הביאה הדמייה מאוד מדויקת של העץ כשאבדן מוצגים על-ידי השוואה המבוסס על קוטר של דגימות אנטומי עם שחזורים וירטואליים שלהם. לעומת כלי קטרים לבד, אמצעי האחסון כלי להדגיש את ההבדלים בין vasospastic, הלא vasospastic כלי שמוצג בסדרה של SAH ועכברים המופעלים באמצעות העמדת פנים.

שחזורים וירטואליים של העץ תלת-ממדי וסקולרית תוך-גולגולתי
העצים וסקולרית תוך-גולגולתי 3-ממדית המשוחזרת סיפק כלי הדם ומדויקים של האנטומיה (איור 1). כדי להעריך את רמת הדיוק, ביצענו מבוסס-קוטר השוואה בין כלי השיט קטרים נקבע ברמה המיקרוסקופית, מן המרתף וירטואלי תלת-ממדי בנקודות מוגדרות מבחינה אנטומית 2 (1: שמאל בעורק האמצעי (MCA) 1 מ"מ דיסטלי של עורק הצוואר T; 2: נכון MCA דיסטלי של בעורק T 1 מ"מ). לקביעת מיקרוסקופיים כלי קטרים, נעשה שימוש ברזולוציה גבוהה המצלמה (אינפיניטי X-21, Deltapix) עם תובנה DeltaPix תוכנה גירסה 2.0.1 המכויל לפי מידה מיקרומטר. עבור הערכה זו, נותחו 10 דגימות המוח (5 SAH, 5 דמה). אלה היו מתוך סדרה של עכברים 12, 7 מהם SAH היה המושרה, בעוד 5 עברה ניתוח דמה (2 חיות של קבוצת SAH מת בימים שלאחר הניתוח 1 ו- 2, בהתאמה). היו אין הבדלים משמעותיים בין הקוטר נקבע ברמה המיקרוסקופית, כמעט, המציין של שחזורים וירטואליים מדויק של האנטומיה וסקולרית תוך-גולגולתי (נחישות מיקרוסקופיים לעומת שחזורים וירטואליים, אומר שגיאה סטנדרטית ±: עזב MCA 150 ± 9 מיקרומטר לעומת שמאל MCA 150 ± 8 מיקרומטר; נכון MCA 153 ± 8 מיקרומטר לעומת154 ± 9 מיקרומטר, ראה איור 2). 
כימות vasospasm מוחי אצל עכברים עם SAH
כדי לכמת vasospasm מוחי, היו (i) את עוצמת הקול של קטע כלי מוגדרת מראש נציג 3.5 מ מ, בהיקף של 1 מ מ העורק הפנימי ביותר (ICA) ו- 2.5 מ מ MCA מימין, וכן (ii) את כלי הקיבול קטרים בנקודות מוגדרות מבחינה אנטומית 2 (שמאל וימין MCA) נקבע דגימות המוח SAH וחיות המופעלים דמה (n = 5). האחסון הקיבול היה נמוך באופן משמעותי ב- SAH בהשוואה דמה (36 ± 4 nL לעומת 71 ± 9 nL, p &lt; 0.05). כלי קטרים היו נמוכות ב- SAH בהשוואה דמה (עזב MCA: 140 מיקרומטר ± 11 לעומת 160 ± 10 מיקרומטר, p = 0.11; נכון MCA: 130 מיקרומטר ± 16 לעומת 158 ± 13 מיקרומטר, p &lt; 0.05; ראו איור 3), ואילו המשמעות של רמת הושגה רק עבור analys יש MCA הנכון.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57997/57997fig1.jpg"> איור 1. שחזורים וירטואליים של העץ וסקולרית תוך-גולגולתי. (א) מציג מדגם נציג המוח; (B) מראה המתאים כמעט שיחזר עץ כלי הדם. (ג) מקודדים ויזואליזציה של הקוטר של השמאל MCA. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/57997/57997fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57997/57997fig2.jpg"> איור 2 . הדיוק של השחזור הדיגיטלי של להערכת. קטרים מתכוון למדוד מדגימות המוח המשוחזרת 3D לעומת אלו נקבעים ברמה המיקרוסקופית. הנתונים מוצגים זאת אומרת ± שגיאת התקן של הממוצע. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/57997/57997fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57997/57997fig3.jpg"> איור 3 . קיבול ונפח קוטר הכלי לאחר SAH. (א) השוואה של MCA קטרים נמדד מאמצע להערכת המשוחזרת תלת-ממד ב- SAH, שאם עכברים. (B) הקיבול של עוצמת SAH, שאם עכברים. הנתונים מוצגים זאת אומרת ± שגיאת התקן של הממוצע. p &lt; 0.05. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/57997/57997fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>

מטרת מאמר זה היא להציג שיטה המאפשרת שחזור תלת-ממדי של העץ כשאבדן בעכברים לאחר מיקרו שחושב טומוגרפיה והנחישות של אמצעי אחסון של מקטעי כל כלי יכול לשמש כדי לכמת vasospasm מוחין ב מודלים מאתר של דימום תת-עכבישי.

שיטה הנפחי עבור כימות Vasospasm המוחית במודל מאתר של דימום תת-עכבישי

Subarachnoid hemorrhage (SAH) is a subtype of hemorrhagic stroke. Cerebral vasospasm that occurs in the aftermath of the bleeding is an important factor ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא לכמת עווית כלי דם מוחית בעכברים, לאחר השראת דימום תת-עכבישי. זה מושג על ידי הכפפת החיה לזלוף טרנס-לבבי ויציקה אנדווסקולרית, באמצעות חומר יציקה רדיו-פק. השלב הבא הוא השגת נתוני תמונת חתך, על ידי הכפפת המוח לטומוגרפיה של מיקרו-מחשב.לאחר מכן מעובדים תמונה ונתונים. תוכנת מירו משמשת לשחזור וירטואלי של עץ כלי הדם התוך-גולגולתי ולחישוב נפחים של מקטעי כלי דם מוגדרים, המייצגים מדד אובייקטיבי לכימות התכווצות כלי הדם. דימום תת-עכבישי נגרם בעכברים על ידי ניקוב נימה אנדווסקולרית בהרדמה עם איזופלורן.עורק הצוואר החיצוני השמאלי מוכן בניתוח. לאחר מכן מוחדר נימה לעורק הצוואר החיצוני ומתקדם תוך גולגולת דרך עורק הצוואר הפנימי, המחורר בעורק הצוואר t, וגורם לדימום תת-עכבישי. עלייה בלחץ התוך גולגולתי נלקחת כאינדיקטור לניקוב אנדווסקולרי מוצלח.כדי לנתח עווית כלי דם, יש לגרום להרדמה. המשך רק לאחר הגעה לרמת הרדמה מספקת, אשר מאושרת על ידי היעדר תגובות לגירוי כאב. בצע זלוף טרנס-לבבי באמצעות הפתרונות הבאים.תמיסת מלח פיזיולוגית המכילה את הריכוזים הפיזיולוגיים של נתרן, אשלגן, סידן ומגנזיום ב-pH של שבע נקודות ארבע. ולאחר מכן, פתרון של 4% PFA. התחל את השפע עם תמיסה מספר אחת למשך שתי דקות והמשך עם תמיסה מספר שתיים למשך ארבע דקות.להחדיר את התמיסות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס ולהשתמש במשאבה מבוקרת לחץ עם קצב זלוף משתנה כדי לחלחל בלחץ קבוע של 70 מילימטר כספית. הימנע מאובדן לחץ בעת מעבר מפתרון 1 לפתרון 2. לאחר הזלוף עם שתי התמיסות, המשך בזלוף במשך 20 דקות בטמפרטורת החדר עם חומר יציקה רדיואק בקצב קבוע של נקודה שני מיליליטר לדקה.החזק את הדגימה לריפוי חומר היציקה הרדיואקית בארבע מעלות צלזיוס למשך הלילה. ולהסיר את המוח ולאחסן את הדגימה בארבע מעלות צלזיוס בתמיסה של 4% PFA עד למיקרו-סטזיניה. הניחו את המוח באמצע צינור פלסטיק עם מלקחיים אנטומיים קהים.בחר צינור בקוטר מעט גדול יותר מהדגימה, כדי להבטיח שהאובייקט לא יזוז במהלך רכישת התמונה. השתמש בגזה כדי לסגור את הצינור. חבר את צינור הפלסטיק דרך מנוע מיקרו צעד של מערכת מיקום הבקרה המנווטת במחשב בתא הרנטגן, בו האובייקט מסתובב סביב הציר האופקי שלו.יישר את הדגימה בשדה הראייה תחת רדיוגרפיה של רנטגן. כדי להשיג את ההגדלה המקסימלית, מקם את האובייקט קרוב ככל האפשר למקור הרנטגן ומקסם את המרחק לגלאי ככל האפשר. השתמש בפרוטוקול רכישת תמונות שלב וצלם עם פרמטרי הסריקה הבאים.הגדר את זמן החשיפה לשנייה אחת עבור כל הקרנה והשתמש במתח צינור של 80 קילו-וולט כדי לייעל את יחס האות לרעש. הגדר את מספר ההקרנות ל-1,000 עבור סיבוב אחד. לשחזור נתונים גולמיים, השתמש באלגוריתם ההקרנה האחורית המסונן, המרמז על מסנן שפ-לוגן עם מטריצה של 1,024 ווקסלים מעוקבים.ייבא נתוני dicom לתוכנת Miro באמצעות הפונקציה import. דמיין את עץ כלי השיט עם הפונקציה vol-run. בחר את סף ההדמיה כך שעורקי המוח הגדולים מתוארים בקווי מתאר חדים.חשוב להשתמש באותו סף ויזואליזציה עבור כל מערכי הנתונים השייכים לסדרת הניסוי. לנתח באופן וירטואלי את עורקי המוח הבסיסיים של מעגל וויליס, עם נפח פונקציה נוסף על ידי הקפת כלי הדם בקור-זון. לאחר מכן נתח באופן וירטואלי את קטע הכלי שיש לנתח.לכן, סובב את המודל התלת מימדי של עץ כלי הדם על מנת להפריד במדויק את כל הענפים הקטנים מהעורק הראשי. חיוני לניתוח נוסף למחוק את כל כלי השיט למעט קטע הכלי שיש לנתח. החל את השלד האוטומטי של הפונקציה עם סף המוגדר לסף הדמיה, שיוצר גרף מרחבי מבוסס קו מרכזי.לאחר מכן החל את הגרף המרחבי של הפונקציה על ערכת הקווים, כדי ליצור ערכת קווים. חלקו את ערכת הקו למקטעי המשנה הבודדים שלה על ידי בחירה ידנית של מקטעי המשנה הבודדים עם הסמן ולחיצה על פיצול. שלב זה חיוני על מנת לחשב את נפחי מקטעי המשנה הבודדים.השתמש בקו הפונקציה המוגדר לגרף מרחבי כדי ליצור שוב גרף מרחבי. השתמש בסטטיסטיקת הגרף המרחבי של הפונקציה כדי לקבוע אורך, נפח וקוטר של כל תת-מקטע. להדמיה מקודדת צבע, המייצגת את מהלך קוטר הכלי השתמש בפונקציות תצוגת גרף מרחבית.הגדר את צביעת הקטע לעובי, התואם לקוטר הכלי. חשוב לבחור את אותה מפת צבעים עבור כל מערכי הנתונים השייכים לסדרת הניסוי. הוסף את אורכי מקטעי המשנה כדי לקבוע אילו מקטעי משנה ייכללו בניתוח הנוסף.במחקר הנוכחי הערכנו מקטע כלי דם המורכב ממילימטר אחד של עורק הצוואר הפנימי, הפרוקסימלי של הצוואר t, ושני נקודות חמישה מילימטר של עורק המוח הדיסטלי של הצוואר t. לאחר מכן הוסף את הנפחים כדי לקבוע את נפח הכלי של קטע הכלי המוגדר. כדי להעריך את הדיוק של השחזור הווירטואלי של עץ כלי הדם, ביצענו השוואה מבוססת קוטר בין קוטר כלי הדם שנקבע במיקרוסקופ ומהשחזורים הווירטואליים התלת-ממדיים בשתי נקודות מוגדרות אנטומית בעשר דגימות מוח.לקביעה מיקרוסקופית של קוטר כלי הדם מצלמה ברזולוציה גבוהה, כלי כיול תוכנה, סולמות מיקרומטר בשימוש, לא היו הבדלים משמעותיים בין הקטרים שנקבעו באופן מיקרוסקופי ווירטואלי. מצביע על שחזור וירטואלי מדויק של האנטומיה של כלי הדם התוך גולגולתיים. כדי לכמת את העווית הבזאלית המוחית, קבענו את הנפח של מקטע כלי דם מייצג מוגדר מראש של שלוש נקודות חמישה מילימטרים, המורכב ממילימטר אחד IC8 ושני נקודות חמישה מילימטר MCA משמאל.בדגימות מוח מ-SAH ובעלי חיים שנותחו בדמה. נפח הכלי היה נמוך משמעותית ב-SAH בהשוואה לזיוף, מה שמעיד על עווית כלי דם מוחית. קוטר כלי השיט היה גם נמוך משמעותית ב-SAH בהשוואה לזיוף.השחזור הווירטואלי שהושג בשיטה המוצגת כאן משקף במדויק את האנטומיה של כלי הדם. ניתן לבחון מקטעי כלי דם שלמים, ויש להניח שהם מציגים פרמטר אובייקטיבי יותר לכימות כלי דם מאשר קביעת קוטר כלי הדם בנקודה אחת. הערכה נפחית מובילה להבדלים גדולים יותר בין כלי דם ולא וספספטיים בהשוואה להערכת קוטר כלי הדם בלבד.

a-volumetric-method-for-quantification-cerebral-vasospasm-murine

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

דימום תת עכבישי Aneurysmal (sah) הוא דימום שמתרחש בחלל תת העכבישים כאשר נקרע מפרצה. בעוד התחלואה והתמותה מהאירוע הזה כבר על ירידה עקב גישות טיפול משופרים, הסיכון של vasospasm לאחר דימום subarachnoid ממשיך להיות כפי שהיה לפני מספר שנים. החשיבות של הקמת מודל חיה מקיפה ולשעתק לזהות אירועי ייזום של vasospasm מוחות כבר למוקד של מחקר מאז השימוש הראשון של חולדות במודל vasospasm ניסיוני בשנת 1979 על ידי...

מודל חולדת תמותה נמוך להערכת Vasospasm מוחות המושהה לאחר דימום subarachnoid ניסויי

סרטון זה מדגים את הנוהל להקמת מודל חולדה לדימום תת-עכבישי. חולדה מורדמת מושתלת בבדיקות למדידת לחץ תוך גולגולתי וזרימת דם מוחית. אתר המטרה מזוהה, והמחט מוחדרת במצב טרום-כיאזמטי. לאחר מכן מוזרק דם אוטולוגי לחלל התת-עכבישי, מגביר את הלחץ התוך גולגולתי ומפחית את זרימת הדם המוחית, ומבסס את המודל.

הקמת מודל חולדה דימום תת-עכבישי המושרה על ידי הזרקת דם אוטולוגית

מודל עכבר סטנדרטי של דימום תת עכבישי על ידי מעגל intraluminal של הניקוב וויליס מתואר. ניקוב כלי ודימום תת עכבישי מנוטרים על ידי ניטור לחץ תוך גולגולתי. בנוסף פרמטרים חיוניים שונים נרשמים ומבוקר כדי לשמור על תנאים פיסיולוגיים.

מודל Murine של תת עכבישי דימום

פרוטוקול זה מתאר התניה מוקדמת היפוקסית חוזרת ונשנית, או חשיפות קצרות להיפוקסיה מערכתית המפחיתות את נפחי האוטם והפרעה במחסום הדם-מוח בעקבות חסימה חולפת של עורק המוח האמצעי בעכברים. הוא גם מפרט כימות כפול של נפח האוטם והפרעה במחסום הדם-מוח לאחר שבץ מוחי כדי להעריך את היעילות של הגנה נוירו-וסקולרית.

כימות של הגנת עצבים וכלי דם בעקבות חסימת עורק חוזר חוסר חמצן אכשור קד וחלוף התיכון מוחין של עכברים

תיארנו בפרוטוקול זה מודל עכבר מתוקננת של דימום תת-עכבישי (SAH) על ידי הזרקה כפולה של דם מלא אוטולוגי לתוך הבור מגנה. רמת הסטנדרטיזציה הגבוהה של הליך ההזרקה הכפולה מייצגת מודל בינוני עד אקוטי של SAH עם בטיחות יחסית לגבי תמותה.

הזרקת דם ישירה כפולה לתוך מגנה צ'יסטרנה כודל של דימום Subarachnoid

מטרת כתב היד היא להציג שיטה מבוססת סונוגרפיה המאפשרת הדמיה של זרימת הדם בעורקים מוחיים בעכברים. אנו מדגימים את היישום שלה כדי לקבוע שינויים במהירות זרימת הדם הקשורים vasospasm במודלים מורין של דימום subarachnoid (SAH).

ניתוח של Vasospasm מוחי במודל מורין של דימום subarachnoid עם אולטרסאונד דופלקס Transcranial בתדר גבוה

דימום תת-קרקעי ממשיך לשאת נטל גבוה של תמותה ותחלואה באדם. כדי לאפשר מחקר נוסף על המצב והפתופיזיולוגיה שלו, מוצג מודל פרה-כיאזמטי, הזרקה יחידה.

טרום כיאזמטי, הזרקה יחידה של דם אוטולוגי כדי לגרום לדימום ניסיוני subarachnoid במודל חולדה

כאן אנו מציגים מודל עכבר SAH סטנדרטי, המושרה על ידי ניקוב נימה אנדווסקולרית, בשילוב עם הדמיית תהודה מגנטית (MRI) 24 שעות לאחר הניתוח כדי להבטיח את אתר הדימום הנכון ולא לכלול פתולוגיות תוך גולגולתיות רלוונטיות אחרות.

מודל ניקוב אנדווסקולרי לדימום תת-עכבישי בשילוב עם דימום תהודה מגנטית (MRI)

הדם עצמיים הזרקה מודל של דימום intracerebral בעכברים המתואר פרוטוקול זה משתמש בטכניקת הזרקה כפולה כדי למזער את הסיכון של ריפלוקס הדם במעלה השביל מחט, אין תרופות נגד קרישת דם במערכת שאיבה, ומונע כל שטח מת צינורות להרחבה במערכת.

הזרקת דם עצמיים על דגם דימום intracerebral ספונטנית עכברים

ההכנה של פרוסות חריפות מוח מhippocampi המבודד, כמו גם את ההקלטות אלקטרו סימולטני של האסטרוציטים ונוירונים...

קלטות אלקטרו כפולות של תגובות Astroglial ועצביות עוררו-synaptically בפרוסות ביפוקמפוס חריפות

למדו שיטת הדמיה תלת-ממדית לכימות ואסוספאזם מוחי בעכברים לאחר דימום תת-עכבישי באמצעות מיקרו-CT ויציקה אנדו-ווסקולרית. השיטה מאפשרת מדידה מדויקת של נפחי כלי דם ומורפולוגיה וסקולרית.

שיטה הנפחי עבור כימות Vasospasm המוחית במודל מאתר של דימום תת-עכבישי

גלה סרטונים נוספים