ניתוח מרחבי למידה והתנהגות פרוסוציאלית בעכברים באמצעות בארנס מבוך פרדיגמות עלמה במצוקה

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום מדעי המוח ההתנהגותיים על האם מוטציה גנטית או משתנה סביבתי יכולים להשפיע על התנהגויות חברתיות או רכישה ושמירה של זיכרונות ספאתיים. היתרונות העיקריים של טכניקות אלה הם כי שני המחקרים יכולים להיבנות פשוט עם השקעה כספית מינימלית, כי אף פרוטוקול לא דורש את בעלי החיים לחוות גירויים קיצוניים או מלחיצים. שיטת Damsel in Distress יכולה לספק תובנה על התנהגויות עכבר פרו-חברתיות, אך היא יכולה לשמש גם כאמצעי אמפתיה באורגניזמים אחרים של מודל היונקים.

לפני תחילת הליך בדיקת מבוך בארנס, לנקות את כל רכיבי המבוך עם מים 70% אתנול. כאשר הרכיבים יבשים, להרכיב את המבוך באופן אקראי להקצות כל עכבר לחור היעד להשתמש לאורך כל תקופת הבדיקה. החורים יכולים להיות מסומנים אחד עד 20 על החלק התחתון של המבוך או בצד החיצוני של היקף המבוך שבו הם אינם גלויים מתוך המבוך.

כדי להתחיל במבחן אימונים, החלף את דיסק החור שהוקצה בקופסה שחורה של 23 על 11 ס"מ ולהשתמש בגומיות וווים כדי לחבר בחוזקה את התיבה למבוך. לאחר מכן, מניחים עכבר על מרכז מבוך בארנס מתחת לגביע ומאפשרים לעכבר להתאקלם במשך 30 שניות. בסוף תקופת ההתאקלמות, להתחיל את הקלטת וידאו ולהדליק את יצרנית רעש אור קולי.

הרם את ה באמצעות מנגנון מחרוזת כדי למנוע הטיה הכותרת הראשונית של החיה ולהתחיל שעון אוויר מאחורי וילון תצפית. עקוב אחר תנועות החיה על פיסת נייר עם תרשים של המבוך ולהשתמש בתרשים כדי לנתח את אסטרטגיות החיפוש של העכבר, כמו גם כדי לקבוע את מספר החורים שנחקרו ברביע מול היעד. כאשר העכבר נכנס לחור היעד, לכסות את החור עם קלסר אטום כבד ולכבות את יצרנית הרעש הקולי.

אם העכבר לא נכנס למטרה לאחר חמש דקות, לכלוא את החיה לתוך חור היעד. לאחר מכן, לאפשר לעכבר להישאר בתיבת היעד במשך דקה אחת באין מפריע, הקפד לכבות את הרעש הקולי. לאחר מכן, להחזיר את החיה לכלוב שלה.

כאשר כל העכברים נבדקו, סקור ידנית את ההקלטה שלהם כדי לעקוב אחר התנועה הכוללת של העכבר כדי לקבוע את מספר החורים השגויים שנחקרו לפני ואחרי שהמטרה נמצאה, כמו גם את מספר החורים מחור המטרה לחור הראשון שנחקר וכל התנהגות טיפוח בולטת. להתנהגות חקרנית עלמה בבדיקות מצוקה, מניחים תא לחץ סגור וריק במרכז זירת אמפתיה ומתחילים להקליט עם המצלמה התלויה. מניחים בעדינות עכבר זכר מתחת לגביע בפינה השמאלית התחתונה בזירה למשך 30 שניות.

לאחר מכן, להסיר את ה באמצעות מנגנון מחרוזת ולאפשר לעכבר לחקור במשך 10 דקות דואג להישאר מחוץ לשדה הנוף במהלך ההקלטה. בתום תקופת החיפושים, הזיזו את העכבר מהזירה לכלוב מעצר למשך חמש דקות ועצרו והחזיקו את ההקלטה. לקבלת היענות חברתית עלמה בבדיקות מצוקה, בעדינות לרסן את העכבר הנשי ולהוריד את העכבר לתוך תא איפוק.

סגור את הקצה הפתוח של התא שמאחורי העכבר ואשר שהעכבר אינו מסוגל להסתובב. התחילו להקליט עם המצלמה התלויה והצבו את תא הריסון בפנים במרכז הזירה. אפשרו לחיה להתאקלם במשך 10 דקות ולדאוג להישאר מחוץ לתחום הנוף.

לאחר מכן, להעביר את העכבר הגברי מאזור ההחזקה בחזרה לזירת האמפתיה במשך 10 שניות ולאפשר לעכבר הגברי חמש דקות נוספות לחקור את הזירה דואג להישאר מחוץ לשדה המבט. בתום תקופת המחקר, עצרו והחסכו את קובץ הווידאו והחזירו את שני העכברים לכלובים שלהם. לאחר מכן, החלף את מצעי התירס וחטא הן את הזירה והן את תא הלחץ עם 70% אתנול.

כדי לנתח את הנתונים, פתח את קובץ הווידאו בתוכנת המעקב המתאימה והצב גיליון שקוף על המסך. מתארים את ריבוע הזירה עם סמן ומחלקים את ריבוע הזירה לתשעה תאים שווים. סקור את נתוני הוידאו במשך חמש הדקות הראשונות של מדד החקר הראשוני המתעד את מספר התאים שנחצו, את הזמן שבילה בכיכר המרכזית של הזירה, את מספר פרקי החפירה והטיפוח, ואת מספר הפעמים שהעכבר נגע בתא הריסון המרכזי הריק.

לאחר מכן, סקור את נתוני הווידאו במשך חמש דקות של מדד ההיענות החברתית מיד לאחר שהזכר הוחזר לזירה כאשר הנקבה הלכודה מתעדת את אותם נתונים כמו למדד הבדיקה הראשוני, אך מוסיפה מעקב אחר מספר הפעמים שהעכבר הזכר נגע באף עם העכבר הנשי הלכוד. כאשר בארנס מבוך מאומן neonates מנוהלים כמבוגרים במשפט אחד לטווח ארוך, העכברים מוזרק אתנול מתקשים לזכור איפה חור היעד היה ממוקם מאשר חיות בקרה מוזרק מלוחים. עכברים שטופלו באתנול גם חוקרים באופן משמעותי יותר חורים ברביע הנגדי מהמטרה, מה שמצביע על כישלון לזכור את המיקום הכללי הנכון ולהשתמש בחור רציף כדי לחור חיפוש בצורה בצורת טבעת עד החור נמצא.

במודל עלמה במצוקה, עכברים מבוגרים חוצים יותר ריבועים מעכברים צעירים יותר. בנוכחות נקבה לכודה עם זאת, עכברים זכרים משני הגילאים מבלים פחות זמן לחקור את הזירה. זכרים צעירים מבלים יותר זמן בחפירה במהלך שהותם בזירה בנוכחות עכבר נקבה לכודה מאשר כאשר הם לבדם מרמזים על חרדה או התנהגות פרו-חברתית כלפי הנקבה הלכודה.

לעומת זאת, עכברים זכרים נוגעים בצינור המכיל את הנקבה הלכודה ויוזם מגע נשי לכוד בתדירות גבוהה יותר באופן משמעותי כמבוגרים מאשר כקטינים. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור לשמור על התנאים קבועים בין הניסויים ובתוך הניסויים כדי להבטיח כי המשתנים הסביבתיים לא לבלבל את תוצאות המחקר. לאחר השימוש הראשוני בבדיקה התנהגותית זו, ניתן יהיה לבצע בדיקה חוזרת של אותם בעלי חיים בנקודות זמן שונות במהלך הפיתוח כדי לענות על שאלות על זיכרון לטווח ארוך ושינויים אפשריים בהתנהגויות חברתיות.