Name: גזירת ובידול של הכלבים השחלות בתאי גזע Mesenchymal (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-12-16T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 41 s
Description: למדו שיטה לבידול והרחבה של תאי גזע מזנכימליים מרקמת שחלות כלבות. הטכניקה מאפשרת גזירת תאים פלוריפוטנטיים לחקר רפואה רגנרטיבית וטרינרית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים להכיר התוכנית עיקור כלבים UNESP-FCAV מתבקשים לספק את השחלות. עבודה זו נתמכה על ידי מענקים FAPESP (תהליך מס 2013/14293-0), שכמיות.

הניסוי בוצע עם השחלות של ארבעה כלבי תערובת הנשי, שנתרמו לאחר ניתוח אלקטיבי-תוכנית עיקור כלבים. ניסוי זה אושרה על ידי ועדת האתיקה על השימוש בבעלי חיים של UNESP-FCAV (פרוטוקול מס 026991/13).
1. הכנה ניסיוני
<ol><li>להכין או לרכוש 500 מ"ל תמיסת סטרילית של Dulbecco באגירה פוספט (DPBS) ללא סידן או מגנזיום.</li>
	<li>להכין את collagenase אני מדמין פתרון על ידי ערבוב µg 40 של האנזים ב 1 מ"ל של DPBS. סינון באמצעות מסנן מזרק 0.2 µm ואחסן aliquots 2 מ"ל ב-20 ° C.</li>
	<li>להכין את התקשורת התרבות הנשר של Dulbecco ששונה בינוני (DMEM) גלוקוז נמוך עם סרום עוברית 10%, 1% של אנטיביוטיקה.</li>
	<li>לאסוף חומרים עקר: מנות מספריים, מלקחיים, בקבוקון תרביות רקמה, צינורות, פיפטות 10 מ ל ו מ ל.</li>
	<li>השימוש בציוד מעבדה תרבות תא רגיל: בטיחות ביולוגית cabinet (BSC), חממה תרבות תא שוכן בגובה 5% CO2 ו 38 ° C וצנטריפוגה.</li>
	<li>לנקות את BSC: עם ידיים בכפפות, לעקר אותה עם 70% EtOH, באמצעות נורות UV.</li>
</ol>2. בידוד של גזע Mesenchymal מן השחלה
<ol><li>לאחר הניתוח, שמור את השחלות PBS בקרח צינור חרוטי, עד להגעתם במעבדה.</li>
	<li>ממלאים שתי צלחות פטרי 100 מ מ 10 מ"ל ל- PBS.</li>
	<li>להסיר את השחלות מהצינור ולהעביר אותם הפטרי הראשון עם PBS. לשטוף אותם עם ערבוב תנועות.</li>
	<li>בעדינות לאחזר את השחלה ולמקם אותו לתוך תבשיל אחר. עם פינצטה סטרילי, מספריים, מינצ הרקמה לחתיכות קטנות מאוד, בערך בגודל של 1 מ מ בלבד.</li>
	<li>להעביר את רקמת השחלה 35 מ מ פטרי ולהוסיף 2 מ של collagenase. מינצ הרקמה קצת יותר.</li>
	<li>מניחים על צלחת פטרי בחממה ב 38 מעלות צלזיוס במשך 3 שעות ומנערים בעדינות את צלחת פטרי עם תנועות מעגליות בכל 20 דקות.</li>
	<li>לאחר 3 שעות, הסר את הפטרי של החממה.</li>
	<li>העבר את התוכן של המנה צינור 15 מ"ל. הוסף 5 מ של התרחבות המדיה.</li>
	<li>היפוך בעדינות את הצינור לפני צנטריפוגה. Centrifuge הצינור ב g 2100 x במשך 7 דקות להסיר את תגובת שיקוע, resuspend בגדר עם 3 מ"ל של התרחבות המדיה.</li>
	<li>העברה בגדר בקבוק T25. מקם את הבקבוק בתוך החממה עם 5% CO2 ב 38 מעלות צלזיוס במשך 3 שעות. הערה: החלק החשוב ביותר של ההליך היא לשנות את המדיה לאחר 3 שעות של דגירה.</li>
	<li>הסר את הבקבוק של החממה ולהסיר את התקשורת עם הרקמה הנותרת. להוסיף 3 מ"ל של התקשורת הרחבה טריים של הבקבוק.</li>
	<li>שינוי התקשורת כל 48 שעות, להתבונן בקבוק הנהרות הסלולר. הערה: השלבים העיקריים של ההליך יכול להיות שנצפו באיור1.</li>
</ol>3. הרחבה של גזע Mesenchymal מן השחלה
<ol><li>
מעבר תא
	<ol>
<li>כאשר התאים להגיע למפגש, להסיר את המדיה מהבקבוק.</li>
		<li>לשטוף את הבקבוק עם 3 מ"ל של PBS. הסר את PBS.</li>
		<li>להוסיף 1.5 מ של טריפסין ולשים הבקבוק בחממה ב 38 מעלות צלזיוס במשך 3 דקות טפח בעדינות את הבקבוק כדי לסייע התאים כדי לנתק. הערה: תאים צריך להגיע למפגש כ 5 - 7 d לאחר ציפוי הראשונית.</li>
		<li>להוסיף 3 מ"ל של הרחבת מדיה ולהעביר את התוכן צינור חרוטי.</li>
		<li>Centrifuge הצינור ב x 2100 גרם במשך 7 דקות להסיר את תגובת שיקוע והוסף 1 מ"ל של התרחבות המדיה.</li>
		<li>Homogenize בעדינות את התוכן של הצינור.</li>
		<li>קח את aliquot של µL 10 המדגם לבצע תא ספירת להחזיר את הצינור עם תאי החממה.</li>
		<li>מקום 10 µL של המיקס לתוך hemocytometer.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
ספירת התאים
	<ol>
<li>להשתמש המטרה X 10 של המיקרוסקופ ולהתמקד קווי הרשת hemocytometer.</li>
		<li>לספור את התאים ב- 5 ריבועים קטנים (איור 2).</li>
		<li>הכפילו את המספר שנספרו ב- 50,000 כדי להעריך את מספר תאים למיליליטר.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. הבידול של גזע Mesenchymal מן השחלה
הערה: מבחני בידול בוצעו על פי הנחיות נוסדה בשנת היל. et al. 9.
<ol><li>זרע 1.0 x 104 תאים לכל טוב, שהפקידים, שימוש לצלחת תרבות 4-. טוב.</li>
	<li>להוסיף 1 מ"ל של התרחבות המדיה.</li>
	<li>בעדינות להתסיס את המנה עם תנועות מעגליות.</li>
	<li>לאחר 24 שעות, להחליף את המדיה תרבות התקשורת בידול רצוי.</li>
	<li>עבור osteogenic, adipogenic, chondrogenic בידול, דגירה התאים עם התקשורת אינדוקציה עבור 30 d, עם החלפת מדיה בכל ערכות התמיינות ספציפיים ד 3 שימשו עבור כל אחד מבחני אלה.</li>
	<li>על שושלת היוחסין neurogenic בידול, דגירה את התאים עבור 10 d בתקשורת אינדוקציה, עם החלפת מדיה בכל בתלת-ממד. התקשורת המשמש כאן הכילה DMEM גלוקוז נמוך, חומצה ולפרואית 2 מ מ, הידרוקורטיזון 1 מיקרומטר, 10 מיקרומטר forskolin, 5 מ מ אשלגן כלורי, 5 אינסולין µg/mL ומיקרומטר 200 butylated hydroxyanisole.</li>
	<li>עבור מבשרי האנדודרם, תקופת דגירה של 5 d בתקשורת האנדודרם לפי הוראות היצרן מגיב.</li>
	<li>עבור תא הנבט הקדמוני שושלת היוחסין בידול, דגירה התאים בתקשורת אינדוקציה עבור 14d, עם החלפת מדיה בכל בתלת-ממד. התקשורת המשמש כאן הכילה DMEM, 10% FBS, 1 מ מ נתרן פירובט, 10 ננוגרם למ"ל LIF, חומצות אמינו שאינן חיוניות 1 מ"מ, 2 מ מגלוטמין, 5 אינסולין µg/mL, 0.1 מ מ β-mercaptoethanol, putrescine מיקרומטר 60, transferrin µg/mL 20, 10 ננוגרם למ"ל העכבר גורם הגדילה באפידרמיס, 1 ng/mL אנושי בסיסי פיברובלסט גורם גידול, האדם ng/mL 40 גליה התא neurotrophic קו-derived factor פניצילין 15 מ ג/ליטר.</li>
</ol>

<ol><li>Gazit, Z., Pelled, G., Sheyn, D., Kimelman, N., Gazit, D. Mesenchymal stem cells. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGazit%2C+Z+%22Handbook+of+Stem+Cells+%282nd+Edition%29%22">Handbook of Stem Cells (2nd Edition)</a>. Atala, A., Lanza, R. , Academic Press. 513-527 (2013).</li>
<li>Zipori, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+nature+of+stem+cells%3A+state+rather+than+entity%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Genetics%22%5BJournal%5D)">The nature of stem cells: state rather than entity.</a> Nature Reviews Genetics. 5 (11), 873-878 (2004).</li>
<li>Auersperg, N., Wong, A. S., Choi, K. C., Kang, S. K., Leung, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+surface+epithelium%3A+biology%2C+endocrinology%2C+and+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrine+Reviews%22%5BJournal%5D)">Ovarian surface epithelium: biology, endocrinology, and pathology.</a> Endocrine Reviews. 22 (2), 255-288 (2001).</li>
<li>Ahmed, N., Thompson, E. W., Quinn, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epithelial-mesenchymal+interconversions+in+normal+ovarian+surface+epithelium+and+ovarian+carcinomas%3A+an+exception+to+the+norm%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cellular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Epithelial-mesenchymal interconversions in normal ovarian surface epithelium and ovarian carcinomas: an exception to the norm.</a> Journal of Cellular Physiology. 213 (3), 581-588 (2007).</li>
<li>Bukovsky, A., Svetlikova, M., Caudle, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oogenesis+in+cultures+derived+from+adult+human+ovaries%5BTitle%5D)+AND+%22Reproductive+Biology+and+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Oogenesis in cultures derived from adult human ovaries.</a> Reproductive Biology and Endocrinology. 3 (1), 17(2005).</li>
<li>Gong, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embryonic+stem+cell-like+cells+established+by+culture+of+adult+ovarian+cells+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Embryonic stem cell-like cells established by culture of adult ovarian cells in mice.</a> Fertility and Sterility. 93 (8), 2594-2601 (2010).</li>
<li>Johnson, J., Canning, J., Kaneko, T., Pru, J. K., Tilly, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Germline+stem+cells+and+follicular+renewal+in+the+postnatal+mammalian+ovary%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Germline stem cells and follicular renewal in the postnatal mammalian ovary.</a> Nature. 428 (6979), 145(2004).</li>
<li>Deans, R. J., Moseley, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cells%3A+biology+and+potential+clinical+uses%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Hematology%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cells: biology and potential clinical uses.</a> Experimental Hematology. 28 (8), 875-884 (2000).</li>
<li>Trinda Hill, A. B. T., Therrien, J., Garcia, J. M., Smith, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal-like+stem+cells+in+canine+ovary+show+high+differentiation+potential%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Proliferation%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal-like stem cells in canine ovary show high differentiation potential.</a> Cell Proliferation. 50 (6), 12391(2017).</li>
<li>Dominici, M. L. B. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimal+criteria+for+defining+multipotent+mesenchymal+stromal+cells.+The+International+Society+for+Cellular+Therapy+position+statement%5BTitle%5D)+AND+%22Cytotherapy%22%5BJournal%5D)">Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement.</a> Cytotherapy. 8, 4315-4317 (2006).</li>
<li>Friedenstein, A. J., Piatetzky-Shapiro, I. I., Petrakova, K. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteogenesis+in+transplants+of+bone+marrow+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Osteogenesis in transplants of bone marrow cells.</a> Development. 16 (3), 381-390 (1966).</li>
<li>Kuznetsov, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-colony+derived+strains+of+human+marrow+stromal+fibroblasts+form+bone+after+transplantation+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Mineral+Research%22%5BJournal%5D)">Single-colony derived strains of human marrow stromal fibroblasts form bone after transplantation in vivo.</a> Journal of Bone and Mineral Research. 12 (9), 1335-1347 (1997).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

בזאת אנו מספקים ראיות כי MSCs ניתן לבודד מרקמות השחלה הכלביים, אשר נחשב פסולת ביולוגית לאחר ovariectomy. בשל העובדה כי ניתן למצוא סוגי תאים רבים בשחלה, הצענו פרוטוקול לבחירת MSCs בהתבסס על שדבקו מהירה פלסטיק, אשר בהצלחה נבחרים תאים שגדל טפט עם מורפולוגיה פיברובלסט דמוי.
הדוח הראשון של ההטיה של MSCs ממח העצם היה מבוסס על הקיבולת אדהזיה פלסטיק של MSCs במהלך ה 48 הראשון של תרבות11; עם זאת, דווח כי שיטה זו יש הפוטנציאל לבודד אוכלוסיה הטרוגנית, phenotypically והן מבחינה תפקו...

מספר מחקרים שפורסמו להתמקד בתאי גזע גדל באופן משמעותי בעשר השנים האחרונות, מאמץ המחקר כי הושגה על ידי המטרה הקולקטיבית של גילוי טיפולי רפואה רגנרטיבית עוצמה. תאי גזע יש שני סמנים המעצב הראשי: העצמי - שיפוץ ובידול. גזע mesenchymal אחראי על תחלופת רקמת רגיל, יש קיבולת מוגבלת יותר של בידול בהשוואה בתאי גזע עובריים1. לאחרונה, מחקרים רבים הראו מגוון רחב של הבידול של MSCs, נושא בדיון אם קיימים הבדלים בין תאי גזע עובריים והוא בוגר כל2.
Ovarium פני האפיתל היא uncommitted שכבה של תאים, יחסית פחות הבדיל, אשר מבטאת שני סמנים אפיתל, mesenchymal3, שמירה על היכולת להבדיל בין סוגים שונים של תאים בתגובה אותות סביבתיים4. המיקום המדויק של תאי גזע בשחלה אינה ידועה; עם זאת, שהוא הוצע כי אבות bipotential, albuginea tunica להצמיח בתאי הנבט5. מחקרים אימונולוגי יש שיערו כי תאים אלה יש מקור סטרומה6 או ממוקם או מקורב ביותר השחלה משטח7. מאז בתאי גזע mesenchymal אקספרס קולטנים רבים יש תפקיד חשוב ב תא אדהזיה8, תוכנן ניסוי כדי לבדוק את ההשערה כי בחירת אוכלוסיה של תאים עם הדבקה מהירה לבודד אוכלוסיה של תאים בבירור characterizable כמו mesenchymal בטבע. לאחרונה, הקבוצה שלנו דיווחו על ההטיה של MSCs מרקמות השחלה בהתבסס על הקיבולת של הדבקה על משטח הפלסטיק של המנה תרבות ב ה 3 הראשון של תרבות, על מנת לקבל אוכלוסייה מטוהרים של תאים מפגין הדבקה מהירה9. כאן נתאר שיטת שפותחו עבור בידוד תאי גזע mesenchymal של רקמת השחלה.

<table><tbody><tr><td>DPBS&nbsp;</td><td>תרמו פישר</td><td>14190144</td><td></td></tr><tr><td>קולגנאז I</td><td>תרמו פישר</td><td>17100017</td><td></td></tr><tr><td>בקבוק רקמות</td><td>קורנינג</td><td>CLS3056</td><td></td></tr><tr><td>DMEM גלוקוז נמוך</td><td>תרמו פישר</td><td>11054020</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>תרמו פישר</td><td>12484-010</td><td></td></tr><tr><td>TrypLE אקספרס</td><td>תרמו פישר</td><td>12604021</td><td></td></tr><tr><td>StemPro ערכת בידול Adipogenesis</td><td>Thermo Fisher</td><td>A1007001</td><td></td></tr><tr><td>StemPro Chondrogenesis ערכת בידול</td><td>Thermo Fisher</td><td>A1007101</td><td></td></tr><tr><td>StemPro Osteogenesis ערכת בידול Thermo</td><td>Fisher</td><td>A1007201</td><td></td></tr><tr><td>STEMdiff ערכת אנדודרם סופית</td><td>StemCell</td><td>5110</td><td></td></tr><tr><td>פניצילין-סטרפטומיצין</td><td>תרמו פישר</td><td>15070063</td><td></td></tr><tr><td>CD45</td><td>AbD Serotec</td><td>MCA 2035S</td><td></td></tr><tr><td>CD34</td><td>AbD Serotec</td><td>MCA 2411GA</td><td></td></tr><tr><td>CD90</td><td>AbD Serotec</td><td>MCA 1036G</td><td></td></tr><tr><td>CD44</td><td>AbD Serotec</td><td>MCA 1041</td><td></td></tr><tr><td>Nestin</td><td>Milipore</td><td>MAB353</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-טובולין&nbsp;</td><td>Milipore</td><td>MAB1637</td><td></td></tr><tr><td>DDX4</td><td>Invitrogen</td><td>PA5 -23378</td><td></td></tr><tr><td>IgG- FITC</td><td>AbD Serotec</td><td>STAR80F</td><td></td></tr><tr><td>IgG- FITC</td><td>AbD Serotec</td><td>STAR120F</td><td></td></tr></tbody></table>

גזירת ובידול של הכלבים השחלות בתאי גזע mesenchymal

Derivation and Differentiation of Canine Ovarian Mesenchymal Stem Cells

עניין גזע mesenchymal (MSCs) גדל בעשור האחרון בשל הקלות שלהם של בידוד, הרחבת והתרבות. לאחרונה, מחקרים הוכיחו יכולת התמיינות רחב שקיימים תאים אלה. השחלה מייצג מועמד מבטיח טיפולים מבוססי תאים בשל העובדה כי הוא עשיר ב MSCs וכי לעתים קרובות נמחקים לאחר ניתוחים ovariectomy כפסולת ביולוגית. מאמר זה מתאר נהלי הבידוד, הרחבה, ואת הבידול של MSCs נגזר מן השחלה הכלביים, ללא הצורך של מיון תא טכניקות. פרוטוקול זה מייצג כלי חשוב עבור רפואה רגנרטיבית בשל תחולתה רחבה של תאים אלה מאוד דיפרנציאבילית בניסויים קליניים, משתמש טיפולית.

בידוד תאי גזע mesenchymal מן השחלה הכלבים:
ההליך בידוד MSC השחלות מסוכם באיור1. לאחר הניתוח, רקמות הא, collagenase עיכול, שינוי מדיה 3 שעות לאחר תחילת התרבות, אוכלוסיה MSC בשם עם מאפיינים פלסטיק-דבק מהיר הופרדה בהצלחה מרקמות השחלה הכלביים. התאים שנקטפו במהירות דבקה משטח הפלסטיק של המנה תרבות וגדל בתרבות מורפולוגית הומוגנית חד שכבתי עם MSC דמוי טיפוסי מורפולוגיה (<st...

במסמך זה, אנו מתארים שיטה עבור בידוד, הרחבה, הבידול של גזע mesenchymal מרקמות השחלה הכלביים.

גזירת ובידול של הכלבים השחלות בתאי גזע Mesenchymal

Interest in mesenchymal stem cells (MSCs) has increased over the past decade due to their ease of isolation, expansion, and culture. Recently, studies ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא לבודד, להרחיב ולהבדיל גבעולים mesenchymal מוכר נגזר רקמת השחלות כלבים. ניסוי זה בוצע עם השחלות של ארבעה כלבים נקבה בן כלאיים שנתרמו לאחר ניתוח אלקטיבי בתוכנית עיקור כלבים. ניסוי זה אושר על ידי ועדת האתיקה על השימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת סאו פאולו, FVAC.תוצאות מייצגות. דיון.מסקנה.

derivation-differentiation-canine-ovarian-mesenchymal-stem

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

ביולוגיה התפתחותית

אנו מתארים בסיס מולקולות קטנות פרוטוקול התמיינות תאים העכבר גזע עובריים לתאי מבשר oligodendrocyte (OPCs). פרוטוקול זה יוצר Olig2 NG2 + + OPCs עם יעילות גבוהה של 30 ימים של בידול. כמו כן, אנו מתארים שיטה להפקת "מתחזקים" בצורה OPCs שיכולים אש הפוטנציאלים לפעולה.

התמיינות של תאים עובריים לתוך מבשרי Oligodendrocyte

בסרטון הזה, אנחנו מדגימים את בידודה של blastocysts העכבר ואת הגזירה של בתאי גזע trophoblast מ blastocysts. אנחנו גם לתאר את תנאי תחזוקה של הנכס בתאי גזע, כמו גם גיוס של בידול בתרבות.

גזירת Trophoblast עכבר בתאי גזע Blastocysts

בשנים האחרונות להיווצרות של תאי הנבט המשתמשים בשיטות תרבות במבחנה הודגמה תוך שימוש בסוגים שונים של תאי גזע סומטיים. מאמר זה יציג חזותי התמיינות של תאי גזע שמקורם יילוד עכבר לתאים דמויי ביצית מוקדמות.

התמיינות של תאי העור של עכבר יילוד נגזר גזע לתאים דמוי נבט<em&gt; במבחנה</em

בפרוטוקול זה, יודגם גזירה של תאי אב לבביים מתאי גזע עובריים של עכבר ושל בני אדם. אסטרטגיה עיקרית בפרוטוקול זה היא להעשיר תאי אב לבביים בזרימה ציטומטרית באמצעות מדווחים פלואורסצנטיים שהונדסו לתוך קווי תאי הגזע העובריים.

גזירה של תאי לב ותאים מתאי גזע עובריים

מבחני מבחנה משמשים בדרך כלל לזיהוי תאי גזע סרטניים. כאן אנו משווים מבחני כדורים בודדים עם רב-תאים מבוססי תאים. הבדיקות המבוססות על תאים בודדים או תוספי מתיל צלולוז נותנים תוצאות מדויקות יותר בעוד שבדיקות מבוססות תאים מרובות תאים המבוצעות במדיום נוזלי יכולות להיות מושפעות מאוד מצפיפות התאים.

הערכה של מאפייני תא גזע בקרצינומה של תאי השחלות אדם באמצעות Multi ומבחני Spheres מבוסס תא בודדים

תאי גזע מזנכימליים מתקבלים בדרך כלל ממח עצם ודורשים תרבית הרחבה. כאשר דגימות נקרשות לפני העיבוד, ניתן ליישם פרוטוקול המשתמש בתרופה הטרומבוליטית (האנזימטית) אורוקינאז כדי לפרק את הקריש. לפיכך, תאים משתחררים וזמינים לתרבית הרחבה. פרוטוקול זה מספק אלטרנטיבה מהירה וזולה לדגימה מחדש.

שיטה אנזימתי להציל תאי גזע mesenchymal מדוגמאות קרשו מח העצם

פרוטוקול זה מתאר מתודולוגיה לבידוד וזיהוי תאי גזע מזנכימליים (MSC) שמקורם ברקמת שומן מחולדות Sprague Dawley.

בידוד וזיהוי תאי גזע מזנכימליים שמקורם ברקמת שומן של חולדות Sprague Dawley

רקמת השומן היא מקור מצוין לתאי גזע מזנכימליים. כאן, אנו מביאים את המיצוי, הטיפוח והאפיון שלב אחר שלב של תאי גזע שמקורם ברקמת שומן (ADSCs) מרקמת שומן אפידידימלית של עכברים שוויצרים.

בידוד, הרחבה חוץ גופית ואפיון תאי גזע מזנכימליים מרקמת שומן אפידידימלית של עכבר

פרוטוקול זה מתאר ומשווה שתי שיטות מייצגות להבחנה של hiPSCs לתאי סטרומה מזנכימליים (MSCs). השיטה החד-שכבתית מאופיינת בעלות נמוכה יותר, תפעול פשוט יותר ובידול אוסטאוגני קל יותר. שיטת הגופים העובריים (EBs) מאופיינת בצריכת זמן נמוכה יותר.

השוואה בין שתי שיטות מייצגות להתמיינות של תאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם לתאי סטרומה מזנכימליים

פרוטוקול זה מציג את ההתמיינות של אוסטאוקלסטים אנושיים מתאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים (iPSCs) ומתאר שיטות לאפיון אוסטאוקלסטים ומבשרי אוסטאוקלסט.

התמיינות ואפיון אוסטאוקלסטים מתאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם

למדו שיטה לבידול והרחבה של תאי גזע מזנכימליים מרקמת שחלות כלבות. הטכניקה מאפשרת גזירת תאים פלוריפוטנטיים לחקר רפואה רגנרטיבית וטרינרית.

גזירת ובידול של הכלבים השחלות בתאי גזע Mesenchymal

גלה סרטונים נוספים