PCR כמותי של T7 Bacteriophage מ- Biopanning

שיטה זו יכולה לעזור לענות על בעיות מפתח בתחומי הווירולוגיה והמיקרוביולוגיה הקשורים לרישום בקטריופאג'ים מדגימות מורכבות ואבחון וטיפולים מבוססי בקטריופאג'. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא מאפשרת כימות יעיל ומדויק של זמן של מספר רב של דגימות מניסויי ביופאנינג של תצוגת פאג', שלא ניתנים לתיקון מסורתי. להדגים את ההליך יהיו רשמי מוהנטי ויסמים ליאל, סטודנטים לתואר שני מהמעבדה שלי.

לאחר תכנון פריימרים ויצירת ריכוז מלאי, לקבל התייחסות T7 פאג DNA בריכוז של 0.1 מיקרוגרם למיקרוליטר. באמצעות מים אולטרה-חמים, מדללים באופן סדרתי את הדנ"א הזה פי עשרה, ממיליון פמטוגרמות למיקרוליטר למיקרו-ליטר אחד בצינורות PCR של 0.2 מיליליטר. הכינו 20 מיקרוליטרים של כל ריכוז, הקפדו להחליף טיפים של פיפטה ומערבולת את הצינורות בין כל שלב בדילול.