Name: חסימה בעורק האמצעי המאפשר פגיעה Reperfusion באמצעות תיקון עורק הראש נפוצות בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-23T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 59 s
Description: למד טכניקה כירורגית לתיקון עורק הקרוטיד הנפוץ בעכברים לשיפור זרימת הדם לאחר שבץ מוחי. שיטה זו מפחיתה שונות בתוצאות הניסוי ומגבירה את השחזוריות במודלים ניסויים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו הייתה במימון המרכז הארצי עבור החלפת, עידון הפחתה של בעלי חיים במחקר (NC3Rs; NC/M000117/1 כדי CG). המחברים תודה המטה של החטיבה של השירותים ביו, מאוניברסיטת לסטר, לטיפול שלהם של חיות ניסוי, מריה Viskaduraki לייעוץ סטטיסטי שלה. התוצאות נציג מותאמים באישור המחלה מודלים & מנגנונים11.

<ol><li>O'Collins, V. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((1%2C026+Experimental+treatments+in+acute+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Neurology%22%5BJournal%5D)">1,026 Experimental treatments in acute stroke.</a> Annals of Neurology. 59 (3), 467-477 (2006).</li>
<li>Sutherland, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotection+for+Ischaemic+Stroke%3A+Translation+from+the+Bench+to+the+Bedside%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Stroke%22%5BJournal%5D)">Neuroprotection for Ischaemic Stroke: Translation from the Bench to the Bedside.</a> International Journal of Stroke. 7 (5), 407-418 (2012).</li>
<li>Reeves, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+Stroke+Care+in+the+US%3A+Results+from+4+Pilot+Prototypes+of+the+Paul+Coverdell+National+Acute+Stroke+Registry%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Acute Stroke Care in the US: Results from 4 Pilot Prototypes of the Paul Coverdell National Acute Stroke Registry.</a> Stroke. 36 (6), 1232-1240 (2005).</li>
<li>Wardlaw, J. M., Murray, V., Berge, E., del Zoppo, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombolysis+for+acute+ischaemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Cochrane+Database+of+Systematic+Reviews%22%5BJournal%5D)">Thrombolysis for acute ischaemic stroke.</a> Cochrane Database of Systematic Reviews. (7), CD000213(2014).</li>
<li>Pangalos, M. N., Schechter, L. E., Hurko, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+development+for+CNS+disorders%3A+strategies+for+balancing+risk+and+reducing+attrition%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Drug+Discovery%22%5BJournal%5D)">Drug development for CNS disorders: strategies for balancing risk and reducing attrition.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 6 (7), 521-532 (2007).</li>
<li>Hossmann, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiological+basis+of+translational+stroke+research%5BTitle%5D)+AND+%22Folia+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">Pathophysiological basis of translational stroke research.</a> Folia Neuropathologica. 47 (3), 213-227 (2009).</li>
<li>Ringelstein, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+and+extent+of+hemispheric+brain+infarctions+and+clinical+outcome+in+early+and+delayed+middle+cerebral+artery+recanalization%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Type and extent of hemispheric brain infarctions and clinical outcome in early and delayed middle cerebral artery recanalization.</a> Neurology. 42 (2), 289-289 (1992).</li>
<li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+of+focal+stroke%3A+Size%2C+mechanism%2C+and+purpose%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroRX%22%5BJournal%5D)">Rodent models of focal stroke: Size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRX. 2 (3), 396-409 (2005).</li>
<li>Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bench+to+Bedside%3A+The+Quest+for+Quality+in+Experimental+Stroke+Research%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Bench to Bedside: The Quest for Quality in Experimental Stroke Research.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 26 (12), 1465-1478 (2006).</li>
<li>Ingberg, E., Dock, H., Theodorsson, E., Theodorsson, A., Ström, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+parameters%27+impact+on+mortality+and+variability+in+mouse+stroke+experiments%3A+a+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Method parameters' impact on mortality and variability in mouse stroke experiments: a meta-analysis.</a> Scientific Reports. 6, 21086(2016).</li>
<li>Trotman-Lucas, M., Kelly, M. E., Janus, J., Fern, R., Gibson, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+alternative+surgical+approach+reduces+variability+following+filament+induction+of+experimental+stroke+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+%26+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">An alternative surgical approach reduces variability following filament induction of experimental stroke in mice.</a> Disease Models & Mechanisms. 10 (7), 931-938 (2017).</li>
<li>Macrae, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+stroke+research+-+advantages+and+disadvantages+of+the+most+common+rodent+models+of+focal+ischaemia%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Preclinical stroke research - advantages and disadvantages of the most common rodent models of focal ischaemia.</a> British Journal of Pharmacology. 164 (4), 1062-1078 (2011).</li>
<li>McColl, B. W., Carswell, H. V., McCulloch, J., Horsburgh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extension+of+cerebral+hypoperfusion+and+ischaemic+pathology+beyond+MCA+territory+after+intraluminal+filament+occlusion+in+C57Bl%2F6J+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Extension of cerebral hypoperfusion and ischaemic pathology beyond MCA territory after intraluminal filament occlusion in C57Bl/6J mice.</a> Brain Research. 997 (1), 15-23 (2004).</li>
<li>Trueman, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Critical+Re-Examination+of+the+Intraluminal+Filament+MCAO+Model%3A+Impact+of+External+Carotid+Artery+Transection%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Stroke+Research%22%5BJournal%5D)">A Critical Re-Examination of the Intraluminal Filament MCAO Model: Impact of External Carotid Artery Transection.</a> Translational Stroke Research. 2 (4), 651-661 (2011).</li>
<li>Dittmar, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+ECA+transection+in+the+development+of+masticatory+lesions+in+the+MCAO+filament+model%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">The role of ECA transection in the development of masticatory lesions in the MCAO filament model.</a> Experimental Neurology. 195 (2), 372-378 (2005).</li>
<li>Kilkenny, C., Browne, W. J., Cuthill, I. C., Emerson, M., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+Bioscience+Research+Reporting%3A+The+ARRIVE+Guidelines+for+Reporting+Animal+Research%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+Biology%22%5BJournal%5D)">Improving Bioscience Research Reporting: The ARRIVE Guidelines for Reporting Animal Research.</a> Plos Biology. 8 (6), e1000412(2010).</li>
<li>Langford, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coding+of+facial+expressions+of+pain+in+the+laboratory+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse.</a> Nature Methods. 7 (6), 447-479 (2010).</li>
<li>Orsini, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+Mannose-Binding+Lectin+Confers+Long-Lasting+Protection+With+a+Surprisingly+Wide+Therapeutic+Window+in+Cerebral+Ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Targeting Mannose-Binding Lectin Confers Long-Lasting Protection With a Surprisingly Wide Therapeutic Window in Cerebral Ischemia.</a> Circulation. 126 (12), 1484-1494 (2012).</li>
<li>Simoni, M. G. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotection+by+Complement+%28C1%29+Inhibitor+in+Mouse+Transient+Brain+Ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Neuroprotection by Complement (C1) Inhibitor in Mouse Transient Brain Ischemia.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 23 (2), 232-239 (2003).</li>
<li>Clark, W., Gunion-Rinker, L., Lessov, N., Hazel, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Citicoline+Treatment+for+Experimental+Intracerebral+Hemorrhage+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Citicoline Treatment for Experimental Intracerebral Hemorrhage in Mice.</a> Stroke. 29 (10), 2136-2140 (1998).</li>
<li>Lin, T. N., He, Y. Y., Wu, G., Khan, M., Hsu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+Brain+Edema+on+Infarct+Volume+in+a+Focal+Cerebral-Ischemia+Model+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Effect of Brain Edema on Infarct Volume in a Focal Cerebral-Ischemia Model in Rats.</a> Stroke. 24 (1), 117-121 (1993).</li>
<li>Loihl, A. K., Asensio, V., Campbell, I. L., Murphy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+nitric+oxide+synthase+%28NOS%29-2+following+permanent+focal+ischemia+and+the+role+of+nitric+oxide+in+infarct+generation+in+male%2C+female+and+NOS-2+gene-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Expression of nitric oxide synthase (NOS)-2 following permanent focal ischemia and the role of nitric oxide in infarct generation in male, female and NOS-2 gene-deficient mice.</a> Brain Research. 830 (1), 155-164 (1999).</li>
<li>Connolly, E. S., Winfree, C. J., Stern, D. M., Solomon, R. A., Pinsky, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Procedural+and+strain-related+variables+significantly+affect+outcome+in+a+murine+model+of+focal+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Procedural and strain-related variables significantly affect outcome in a murine model of focal cerebral ischemia.</a> Neurosurgery. 38 (3), 523-531 (1996).</li>
<li>Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+Strain+Differences+in+Susceptibility+to+Cerebral+Ischemia+are+Related+to+Cerebral+Vascular+Anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Mouse Strain Differences in Susceptibility to Cerebral Ischemia are Related to Cerebral Vascular Anatomy.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 13 (4), 683-692 (1993).</li>
<li>Kitagawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+Ischemia+after+Bilateral+Carotid+Artery+Occlusion+and+Intraluminal+Suture+Occlusion+in+Mice%3A+Evaluation+of+the+Patency+of+the+Posterior+Communicating+Artery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Cerebral Ischemia after Bilateral Carotid Artery Occlusion and Intraluminal Suture Occlusion in Mice: Evaluation of the Patency of the Posterior Communicating Artery.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 18 (5), 570-579 (1998).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

פילמנט אינדוקציה של MCAO ארעי בחולדות הוא הנפוצות ביותר בשימוש דגם ניסיוני שבץ, שכן היא מאפשרת פגיעה reperfusion לאזור הנגוע, מחקה ההתרחשות של אירועים בעקבות שבץ איסכמי קליניים7. דווח כאן היא גישה כירורגית חלופי השיטה המסורתית של הלהט-induced MCAO ארעי בעכברים. הגישה החלופית, מעורבים וטיפול נגד כאבים, הימנעות מצדו ECA, תיקון החתך המרכז לאמנות עכשווית, תוצאות השתנות LV מופחתת כאשר העריך באמצעות שיטות מכתימים היסטולוגית11ו- MRI.
הגישות המסורתיות לזירוז MCAO בעיקר להסתמך על חיתוך, או לפחות מצדו, של ECA, אשר הוכח, בחולדות, להשפיע על התנהגות שתיה, עלייה במשקל הגוף בעקבות MCAO14. פרוטוקול יוגדרו כאן, בעכברים, עם ההתרחקות ECA מצדו והוספת שיכוך כאבים, הציע לירידה במשקל הגוף בעקבות את MCAO עם השפעה באמצעי האחסון הנגע. השימוש של שיכוך כאבים למנוע, או לפחות לא דיווחו, ברוב המכריע של מחקרים קו נסיוני, עקב תופעות אפשריות מבלבלים על תוצאות הניסוי. עם זאת, הימנעות שיכוך כאבים לחלוטין לא תמיד מוצדק, יש צורך לאזן בין צרכי רווחת החיות עם ההישג של מטרות מדעיות.
הבדלי גודל בעלי חיים, זן ו אנטומיה כשאבדן, בנוסף פילמנט גודל וסוג וריאציות מוצעים כל כדי להשפיע על קו תוצאות23,24. הגישה החלופית המתוארים כאן מונע ההסתמכות על הפרה במהלך פגיעה reperfusion, ובכך להקטין, לפחות בחלקו, ההשתנות ראיתי בין חיות נפח הנגע. אנטומיה פרה זה משתנה מאוד בעכברים, בפרט ב C57BL /6 זן, אשר משמש לעתים קרובות בלימודי קו נסיוני. 90% של עכברים C57BL/6 יש של פרה לא הושלמה עקב מגוון האחורי המקיימים תקשורת עורק (PcomA) patency, אשר עלולה להיות השפעה באמצעי האחסון של נזק איסכמי בשל זלוף לא מספיקות של מבנים מחוץ לשטח MCA13, 25. תיקון של המרכז לאמנות עכשווית בעכברים, כפי שמוצג להלן, יוצרת הקמתה מחדש של דם לזרום דרך המרכז לאמנות עכשווית לאזור איסכמי, שתואר קודם לכן כמו חולדות15. נציג הנתונים מראים כי תיקון המרכז לאמנות עכשווית מגביר פגיעה reperfusion, למרות זרימת הדם ב המרכז לאמנות עכשווית לא נמדדה ישירות. עם זאת, זה אפשרי עבור המנתח להמחיש את reperfuse המרכז לאמנות עכשווית עם דם לאחר תיקון כלי, כמו היא מחזירה למצב הפועמת ומלא כל הזמן תא המטען, לקרע, למיקום התיקון. אישור חזותי זה, יחד עם לייזר קריאות flowmetry דופלר של האזור איסכמי, יכול לשמש כדי לאשר את התיקון מוצלח של כלי השיט. הזמן בין היישום משטח רקמת הסרת הסרטון הקיבול של המרכז לאמנות עכשווית יכול להשפיע על patency וכתוצאה מכך של המרכז לאמנות עכשווית, כמו צמצום הזמן בין היישום pad רקמות, הסרת הסרטון ימנע משטח רקמת הקפדה על o pposite צד המרכז לאמנות עכשווית. למרות טכנית מאתגר, ההליך MCAO חלופי שמוסבר כאן אינו דורש שום כישורים נוספים מאשר אלו הנדרשים לביצוע של אינדוקציה כירורגי של MCAO בעכברים.
באופן מסורתי המשויך השתנות גבוהה במדדי תוצאה, קו נסיוני מחקרים ייתכן נטייה להיות חלשה. דרישות אתיות והרווחה בשילוב עם חששות כלכליים ופרקטיים עשוי לתרום מחקרים להיות חלשה. על-ידי הפחתת מידת ההשתנות התוצאה, לכן, הפקת תוצאות הנגע עקבית יותר על פני קבוצת הניסוי, ניתן לבצע חישוב כוח יעיל יותר עם המטרה של מחקרים להיות מופעל כראוי.
לסיכום, אלטרנטיבית המרכז לאמנות עכשווית תיקון נוהל זה, בעכברים, התוצאה פחות השתנות נפח הנגע בעקבות שבץ ניסיוני ואת מאפשר קטן ניסיוני לקבוצות להידרש לבדיקת אפקט הטיפול בעת הצורך כוח חישובי משמשים.

הגורם העיקרי שבץ מוחי הוא מוקד איסכמיה בשטחה של עורק המוח התיכון. רקמת plasminogen activator (tPA) הוא הטיפול תרופתי בלבד זמין עם יעילות מוכחת, למרות ניסויים קליניים סמים רבים ממוקד שבץ איסכמי1,2. עם זאת, בשל חששות בטיחות חלון טיפולי צר (< 4.5 h), רק ~ 15% מהחולים שבץ כל זכאי לקבל tPA הינם המחירים recanalization יכול להיות < 50%3,4.
הרלוונטית קלינית הדירים חייתיים של שבץ נחשבים חיוניים כדי ליידע את התפתחות חדשה וקו פוטנציאל טיפולי. עם זאת, בשל חששות לגבי עקביות ולהבדלים ב התוצאות במודלים בבעלי חיים, זה נשאר חשוב לחדד ויוו המודלים הקיימים כדי לשפר את התרגום ממחקרים פרה למרפאה. העדר תרגום פרה ניסויי היעילות של טיפולים פוטנציאליים לשימוש קליני הוא עניין מרכזי מחקר קו5. הסיבות לכישלון של תרגום צפויים להיות מרובים עשויה להיות קשורה, לדוגמה, עיצוב למשפט, טיפול עיכובים, הטרוגניות קלינית שבץ, ואת המגבלות של הדגמים בעלי חיים המשמש6. אתגר המפתח עבור קו מחקר נשאר ההתפתחות של טיפולים יעילה ובטוחה.
חסימה בעורק האמצעי (MCAO) על ידי intraluminal פילמנט ההכנסה הוא בשימוש תכוף ביותר ויוו מכרסמים הדגם של שבץ ניסיוני. דגם זה מאפשר השחזור של זרימת הדם לאחר אינדוקציה איסכמיה, מחקה את האירועים המתרחשים ב אנושי קו7. עם זאת, בפרט בעכברים, כרכים הנגע הטרוגנית עם סטיות תקן מגוונת להתרחש אף-על-פי המוגדר פרוטוקולים כירורגי הם יישומי8,9,10. . זה אופייני לראות התפלגות דו-אופנית striatal קטנים, גדולים הנגע striato-קורטיקלית אמצעי אחסון11 לזירוז איסכמיה, הלהט בדרך כלל מוחדר דרך חתך של המרכז לאמנות עכשווית או ECA ואז להישאר מחוברים באופן קבוע12. מצדו הקבע של המרכז לאמנות עכשווית מונע את הקמתה מחדש של זרימת הדם לתוך העורק (ICA), לאחר מכן, הטריטוריה MCA. פעולה זו גורמת פגיעה reperfusion להיות מסתמך על אספקת משני בתוך מעגל ויליס (פרה). המבנה פרה יש השתנות אנטומי בין חיות בודדות, בפרט C57BL/6 עכברים-זן המשמש בדרך כלל אין ויוו שבץ מחקר13. שיטה חלופית, ההכנסה פילמנט דרך ECA, לאפשר המשך זלוף דרך של המרכז לאמנות עכשווית, אך הפשרות בשיטה זו אספקת עורקי אל השטח ECA, אשר הוכח, בחולדות, השפעה מזיקה על החיה רווחה14.
ההסתמכות על הפרה עבור אספקת משני, פגיעה reperfusion במודל MCAO הוקמה מאי, בין השאר, חשבון ההשתנות נפח הנגע בעקבות סגר. אנו מתארים מאתר כירורגי הליך חלופי שבו ECA מצדו הוא נמנע, תיקון החתך המרכז לאמנות עכשווית, וכך מאפשר פגיעה reperfusion דרך המרכז לאמנות עכשווית, עצמאית של הפרה. התיקון של החתך המרכז לאמנות עכשווית בעבר הוכח בחולדות את התוצאה פגיעה reperfusion מוצלח דרך ה15-המרכז לאמנות עכשווית. החלת גישה זו בהצלחה על עכברים11 ואנו להתייצב כאן פרוטוקול אשר התוצאות השתנות מופחתת בנפח הנגע, המדד התוצאה העיקרית בשימוש במחקרים קו נסיוני.
ב פרוטוקול זה, נדגים כיצד מתחייב MCAO דרך המרכז לאמנות עכשווית כלי פילמנט ההכנסה ואחריו תיקון כלי המרכז לאמנות עכשווית, שכרוך רקמות pad איטום יישום כדי להתיר פגיעה reperfusion.

<table><tbody><tr><td>בדיקה גמישה של סיבים אופטיים בודדים 0.7 מ"מ</td><td>Moor Instruments, בריטניה</td><td>P10d</td><td>השתמש עם קוד בדיקה ראשי:</td></tr><tr><td>VP10M200ST 7-0 מונופילמנט מצופה סיליקון</td><td>Doccol, USA</td><td>701956PKRe</td><td>פריט תלוי בגודל ובמשקל של בעלי חיים - השתמש בהנחיות יצרן. קוד המוצר כאן שימש לתוצאות מייצגות המוצגות במאמר.</td></tr><tr><td>מערכת MRI פרה-קלינית 9.4T</td><td>Agilent Technologies, סנטה קלרה, קליפורניה, ארה"ב</td><td>MY11520101</td><td>מצוידת בסלילי שיפוע ו-RF המתאימים להדמיית מוח של עכבר</td></tr><tr><td>ציוד ניטור בעלי חיים ושער</td><td>SA Instruments, סטוני ברוק, ניו יורק, ארה"ב</td><td>22124005</td><td>ניטור טמפרטורה ונשימה תואם MRI</td></tr><tr><td>השירותים הווטרינריים הלאומיים של Bupivacaine, סטוק און טרנט, בריטניה</td><td>512345</td><td></td><td>מרקאין</td></tr><tr><td>C57BL/6 עכברים</td><td>צ'ארלס ריבר, אוקספורד, בריטניה</td><td>B6JSIMA49D</td><td></td></tr><tr><td>קרפרופן</td><td>מעבדות נורברוק</td><td>143658</td><td>Carprieve 5% w/v תמיסה לבעלי חיים קטנים להזרקה</td></tr><tr><td>תמיסת ניקוי ידיים כלורהקסידין 4%</td><td>VWR International Ltd, Lutterworth, בריטניה</td><td>MOLN10008780</td><td>HibiScrub תכשיר ניקוי ידיים אנטי מיקרוביאלי,</td>ניצני</tr> <tr><td></td><td>כותנה Molnlycke Health Careהשירותים הווטרינריים הלאומיים, סטוק און טרנט, בריטניה</td><td>213512</td><td>כל גוף פלסטיק, קצה ניצן כותנה מתאים לאחר הפיכתו לסטרילי על ידי חיטוי.</td></tr><tr><td>ניתוח סטריאוסקופ</td><td>Carl Zeiss</td><td>OPMI99</td><td>ציוד תושב. כל סטריאוסקופ ניתוח משקפת המסוגל להגדיל x1-x5 יתאים.</td></tr><tr><td>תפרים נמסים 6-0</td><td>השירותים הווטרינריים הלאומיים, סטוק און טרנט, בריטניה</td><td>9544</td><td>תפרים נספגים Ethicon מצופה ויקריל 6/0 (קוד אתיקון: W9981)</td></tr> <tr><td>מחזיק בדיקת סופגניות</td><td>Moor Instruments, בריטניה</td><td>מחזיק בדיקה PHDO</td><td>לעכבר, נדרש לשימוש עם בדיקה סיב אופטי יחיד בשימוש עם מכונת זרימה דופלר לייזר.</td></tr><tr><td>dumont #5 מלקחיים</td><td>World Precision Instruments, הרטפורדשייר, בריטניה</td><td>500342</td><td></td></tr><tr><td>איטום פיברינוגן וטרומבין</td><td>בקסטר, ברקשייר, בריטניה</td><td>1502243</td><td>TISSEEL פתרונות מוכנים לשימוש עבור איטום 2 מ"ל</td></tr><tr><td>ג'ל מזון</td><td>תמרים וקבוצה, מנצ'סטר, בריטניה</td><td>72065022</td><td>דיאט ג'ל התאוששות</td></tr><tr><td>תמונה חבילת תוכנת מדידה</td><td>3D Slicer</td><td>https://www.slicer.org/</td><td>גירסה 4.0</td></tr><tr><td>חבילת תוכנה לתצוגת תמונה ומדידה</td><td>NIH, מרילנד, ארה"ב</td><td>https://imagej.nih.gov/ij/index.html</td><td>NIH / ImageJ</td></tr><tr><td>צג LDF</td><td>Moor Instruments, בריטניה</td><td>moorVMS-LDF</td><td></td></tr><tr><td>מספריים מיקרו ואנאס</td><td>InterFocus Ltd, Linton, UK</td><td>15000-08</td><td>מספריים קפיציים אחרים של מיקרוואנה יכולים לשמש כחלופה, אם כי נדרשים טיפים עדינים.</td></tr><tr><td>קליפ מיקרו-וסקולרי</td><td>World Precision Instruments, הרטפורדשייר, בריטניה</td><td>15911</td><td>10 G מחזיקי</td></tr><tr><td>קליפס מיקרו-וסקולרי</td> קליפ כלי דם <td>World Precision Instruments, הרטפורדשייר, בריטניה</td><td>14189</td><td></td></tr><tr><td>תוכנת רכישה וניתוח MRI</td><td>Agilent Technologies, סנטה קלרה, קליפורניה, ארה"ב</td><td>VnmrJ גרסה 4.2</td><td>גרסה מס</td></tr>' <tr><td>15 אזמל</td><td>ציוד מעבדה מדעית, נוטינגהאם, בריטניה</td><td>INS4678</td><td>אזמל סטרילי מס' 15 - מספר יצרן P305. ספקים אחרים זמינים.</td></tr><tr><td>תפר 6-0 שאינו ניתן להפרדה</td><td>השירותים הווטרינריים הלאומיים, סטוק און טרנט, בריטניה</td><td>W529</td><td>Ethicon Mersilk תפרים</td></tr> חומר <tr><td>סיכה לעיניים</td><td>השירותים הווטרינריים הלאומיים, סטוק און טרנט, בריטניה</td><td>847288</td><td>Lacrilube (5100G13)</td></tr> <tr><td>ג'ל תואם אופטי</td><td>Moor Instruments, UK</td><td>PMG</td><td></td></tr><tr><td>Pulse Oximetry Reader</td><td>Starr Life Sciences Corp., אוקמונט, פנסילבניה, ארה"ב</td><td>MouseOx</td><td>MouseOx - חולדה & אוקסימטר דופק עכבר & מוניטור פיזיולוגי השתמש עם חיישן ירך עכבר.</td></tr><tr><td>ג'ל לחות</td><td>Datesand group, מנצ'סטר, בריטניה</td><td>70015022</td><td>HydroGel</td></tr><tr><td>קוצץ שיער קטן</td><td>vetproductsuk.com</td><td>HS61</td><td>Contura גוזם/קוצץ אלחוטי</td></tr><tr><td>סטרילי 0.9% NaCl Solution</td><td>VWR International Ltd, Lutterworth, UK</td><td>LOCA3528286</td><td>נתרן כלורי 0.9% עירוי תוך ורידי BP 500 מ"ל ב-ECOFLAC&frac12; צלחת</td></tr><tr><td>פטרי סטרילית</td> PLUS <td>VWR International Ltd, Lutterworth, בריטניה</td><td>5168021</td><td>צלחת פטרי סטרילית 50 מ"מ. כל מותג מתאים. נדרש קוטר מינימלי של 50 מ"מ.</td></tr><tr><td>דבק רקמות מקומי</td><td>World Precision Instruments, הרטפורדשייר, בריטניה</td><td>503763</td><td>GLUture דבק רקמות מקומי</td></tr><tr><td>דבק-על דבק סופר-דבק</td><td></td><td>Loctite Loctite Superglue Precision Max</td><td>זמין ברוב חנויות החומרה.</td></tr><tr><td>שבב נייר לבן</td><td>קבוצת Datesand, מנצ'סטר, בריטניה</td><td>CS1BPB</td><td>Pure-O'Cel</td></tr></tbody></table>

חסימה בעורק האמצעי המאפשר פגיעה reperfusion באמצעות תיקון עורק הראש נפוצות בעכברים

Middle Cerebral Artery Occlusion Allowing Reperfusion via Common Carotid Artery Repair in Mice

שבץ איסכמי הוא הגורם העיקרי לנכות לטווח ארוך למבוגרים ומוות ברחבי העולם. טיפולים שוטפים זמינים מוגבלים, עם רק רקמות plasminogen activator (tPA) כטיפול סמים שאושרו למטרה שבץ איסכמי. המחקר הנוכחי בשדה של שבץ איסכמי מתמקד יותר בהבנת הפתופיזיולוגיה של שבץ מוחי, לפתח ולחקור מטרות התרופות הרומן. מודלים אמינים קו נסיוני מכריעים על ההתקדמות של טיפולים פוטנציאליים. המודל סגר (MCAO) בעורק האמצעי הרלוונטית קלינית, לעתים קרובות ביותר המשמשים מודל כירורגי של שבץ איסכמי מכרסמים. עם זאת, התוצאות של מודל זה, כגון נפח הנגע, קשורים עם רמות גבוהות של השתנות, בעיקר בעכברים. המודל MCAO חלופי המתוארים כאן מאפשר את פגיעה reperfusion של עורק תרדמני (המרכז לאמנות עכשווית) זלוף מוגברת של השטח עורק המוח התיכון (MCA), באמצעות כרית רקמות עם איטום פיברינוגן לתקן את הכלי, ולא המשופר רווחת העכברים על ידי הימנעות מצדו החיצוני העורק הראשי (ECA). זה מפחית את ההסתמכות על מעגל ויליס, אשר ידוע להיות מאוד מבחינה אנטומית משתנה בעכברים. נציג נתונים מראים כי שימוש בגישה כירורגית חלופית זו מקטינה ההשתנות הנגע כרכים בין הגישה המסורתית MCAO הגישה החלופית המתוארים כאן.

בסך הכל 24 בוגרים זכר C57BL/6 עכברים, במשקל בין 24-31 g בזמן הניתוח, שימשו במחקר. חיה אחת מתה לאחר חסימה בעורק האמצעי (MCAO), אחד היה נשלל עקב סיבוכים כירורגיים. הנתונים המובאים כאן לקוחים מתוך עבודה שפורסמו על-ידי המחברים. אלה שימשו כדי להדגים את השפעת כלי תיקון על תוצאות MCAO11. כל הנתונים מבוטא חמישי הממוצע ± סטיית התקן. הנתונים היו העריכו סטטיסטית לנורמליות באמצעות מבחן נורמליות אומניבוס D'Agostino-פירסון. נתונים פרמטרית הושוו באמצעות הסטודנט t-test (עבור שני אמצעים), חד-כיווני אנובה עם הבדיקה Sidak (פירושו מרובים). נתונים-פרמטרית הושוו באמצעות מבחן מאן-ויטני U. ההשתנות של הנתונים פרמטרית הוערכה באמצעות F-לבדוק, ואת השתנות הנתונים שאינם פרמטרי הוערכה באמצעות הבדיקה של Levene.
בדרך כלל, בפרוצדורות MCAO, חוט הלהט occluding מוכנס לתוך המרכז לאמנות עכשווית, ECA זה מאתרים כדי למנוע את הלהט הזה עובר לתוך של ECA ולא של יק א. של ההתרחקות ECA מצדו, על התוספת של שיכוך כאבים הראה את מגמה של ירידה במשקל מופחת ב 48 שעות פוסט-MCAO, בהשוואה לנתונים ממחקרים קודמים, שנערך על ידי המנתח זהה באותו זמן MCAO באמצעות ECA מצדו אין כאבים, ואילו בעירוי הופיע מעושה, ראה איור 1.
עכברים עברה של 60 דקות MCAO-induced איסכמיה ואחריו פגיעה reperfusion עם המרכז לאמנות עכשווית כלי תיקון או את מצדו טיפוסי של הגישה המרכז לאמנות עכשווית. תיאור סכמטי של מחוברים, unligated לתיקון המרכז לאמנות עכשווית מוצגת באיור2.
Flowmetry דופלר בלייזר נעשה שימוש כדי לאשר את הדם זרימה זלוף בשטח של MCA ב MCAO, לפני ואחרי תיקון כלי המרכז לאמנות עכשווית. איור 3 מדגים את 5 דקות לאחר הסרת נימה, זרימת הדם האזורית מוחי (rCBF) גדל באופן משמעותי על אזור במוח MCA. זלוף נשמר עד תיקון כלי, עם עלייה זלוף אל השטח MCA שמוצג בעקבות התיקון כלי המרכז לאמנות עכשווית, רומז כי התיקון המרכז לאמנות עכשווית מותרות של זלוף דם מוגברת אל השטח איסכמי לעומת הסתמכות על המעגל של וויליס לבד.
MRI משוקלל T2 שימשו לקביעת בעירוי הכולל, ושימשו DTI סריקות כדי לקבוע את הליבה LV, 48 שעות לאחר MCAO. איור 4A מראה הבדל משמעותי בעירוי הסיכום או הליבה בין קבוצות הליך מחוברים ותיקון. עם זאת, ההשתנות נתונים עבור שני סה כ המרכזיים LV, כפי העריך באמצעות הבדיקה של Lavene עבור של לא פרמטרי או את F-בדיקה עבור נתונים פרמטרית, צומצם באופן משמעותי בתוך הקבוצה תיקון המרכז לאמנות עכשווית. סה כ בעירוי שנשברה למטה לתוך LV קורטיקליים ו subcortical, כפי שמוצג באיור 4B. החלק בקליפת המוח היה משתנה באופן משמעותי פחות בקבוצה תיקון המרכז לאמנות עכשווית, ואילו החלק תת קורטיקלית של הנגע לא הושפע בין שתי הקבוצות פרוצדורלי.
ניתוח כוח ציינו כי פחות בעלי חיים לכל טיפול קבוצת יהיה נדרש להדגים ירידה של 30% בעירוי בעקבות MCAO באמצעות המרכז לאמנות עכשווית תיקון לעומת ההליך טיפוסי המרכז לאמנות עכשווית-ובין אם לא, ראה טבלה 1. ההנחה של צריכת החשמל 1-β = 0.8, ברמת מובהקות α = 0.05, חיזוי של 30% הפחתה בעירוי בין מבחן שליטה היפותטי קבוצות שימשו לניתוח כוח. יתר על כן, הנחנו על סטיה שווה בין הקבוצות. טבלה 1 מציגה את מספר החיות הדרושה לבדיקות ומשמש קבוצות שליטה כאשר משתמשים גם טיפוסי מאתרים-המרכז לאמנות עכשווית או בשיטה לתיקון מעודכן של המרכז לאמנות עכשווית, כפי שמתואר כאן. שימו לב: קבוצת הניסוי מתייחס קבוצה שטופלו היפותטי של בעלי חיים, קבוצת הביקורת מתייחס לקבוצת הבקרה היפותטי; שתי הקבוצות ירצו לעבור MCAO.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58191/58191fig1v2.jpg"> איור 1: בשילוב טיפול נגד כאבים, העדרו של ECA מצדו על תוצאות בעקבות MCAO. (א) משקל הגוף, מוצג כאחוז של טרום-MCAO משקל, ירידה d 2 הראשון בעקבות את MCAO לשתי הקבוצות. קבוצת ECA-unligated (שיכוך כאבים-שטופלו אין מצדו ECA ב MCAO) הראו מגמה של ירידה במשקל מופחת ביום השני בעקבות את MCAO. (B) לוח זה מראה את נפח הנגע (3מ"מ) נמדדת כלוריד triphenyltetrazolium רגיל (TTC) צביעת 48 שעות לאחר MCAO. הנתונים המוצגים הם הממוצע ± סטיית התקן. ECA מאתרים: n = 17, ECA unligated: n = 10. איור זה שונה מ- Trotman-לוקאס. et al. 11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58191/58191fig1v2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58191/58191fig2.jpg"> איור 2: מפרטים טכניים מציג את השיטה הרגילה של המרכז לאמנות עכשווית, את המרכז לאמנות עכשווית חלופית לתקן את השיטה בעקבות MCAO. (א) הסכמות מתארת מחוברים באופן קבוע המרכז לאמנות עכשווית בעזרת תפרים שאינם נמסים חלה על צדי החתך המרכז לאמנות עכשווית, וכתוצאה מכך מצדו הקבע של המרכז לאמנות עכשווית נכון. (B) הסכמות מתארת בשיטת התיקון חלופית של המרכז לאמנות עכשווית. משטח רקמת קטן מצופה פיברינוגן, איטום תרומבין המשמש כדי לכסות את החתך המרכז לאמנות עכשווית, איטום זה כדי לאפשר את זלוף המלא של הזכות, המרכז לאמנות עכשווית. איור זה שונה מ- Trotman-לוקאס. et al. 11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58191/58191fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58191/58191fig3.jpg"> איור 3: דם מוחי אזוריים מפרמטרי הזרם (rCBF) בעקבות MCAO. RCBF לשנות 5 דקות לאחר הסרת נימה MCAO עבור שני ובין אם-לא המרכז לאמנות עכשווית ותיקן המרכז לאמנות עכשווית הקבוצות (post-MCAO), ביחס rCBF שנמדד במהלך MCAO. לוח זה מציג את הנתונים rCBF מיד לפני התיקון כלי המרכז לאמנות עכשווית (לפני התיקון) ו- 5 דקות לאחר התיקון המרכז לאמנות עכשווית (לאחר תיקון). עליות משמעותיות rCBF מוצגים 5 דקות לאחר הסרת נימה (post-MCAO) בשתי הקבוצות. עלייה נוספת rCBF מוצג בעקבות התיקון המרכז לאמנות עכשווית (לאחר תיקון) בקבוצה תיקון המרכז לאמנות עכשווית. אין הבדל rCBF מוצג בין 5 דקות פוסט-MCAO ותיקון מראש. הנתונים המוצגים הינם מרוכז מן הזמן מנות הנתונים דיווח נקודות הזמן מפתח, כאן כמו הממוצע ± סטיית התקן. המרכז לאמנות עכשווית מאתרים: n = 10, המרכז לאמנות עכשווית תוקן: n = 10; P &lt; 0.01, * * *P &lt; 0.001, ns: בלתי-משמעותיים. איור זה שונה מ- Trotman-לוקאס. et al. 11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58191/58191fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58191/58191fig4.jpg"> איור 4: ניתוח של אמצעי האחסון הנגע מתקבל על ידי טכניקות MRI. (א) לוח זה מראה את עוצמת הקול הנגע (LV; מ מ3) ב- 48 שעות לאחר MCAO בעירוי הכולל שנלקחו MRI משוקלל T2 תמונות (LV סה כ), בעירוי הליבה שנלקחו DTI סריקות וניתוח (LV הליבה). להחליפן בתמונות יציג את נפח הנגע הכולל מתמונת פרוסה סריקה T2 עם DTI הליבה הנגע נפח המסכה מוחל. ההשתנות בתוך הקבוצות צומצם באופן משמעותי עבור שניהם LV הכולל (P = 0.015, המרכז לאמנות עכשווית תיקון: n = 10, המרכז לאמנות עכשווית מאתרים: n = 10, F-מבחן) והליבה LV (P = 0.043, המרכז לאמנות עכשווית תיקון: n = 9, המרכז לאמנות עכשווית מאתרים: n = 6, הבדיקה של Lavene), העריך באמצעות F-מבחן עבור נתונים פרמטרית או הבדיקה של Levene עבור נתונים שאינם פרמטרי. (B) לוח זה מראה את LV ב 48 שעות בעקבות MCAO, שנלקחו MRI משוקלל T2 תמונות ו מחולק אזורים קורטיקליים ו subcortical הנגע. התיקון המרכז לאמנות עכשווית הקטינה באופן משמעותי את השתנות הנתונים (P = 0.03, F-מבחן) בחלק קורטיקלית של הנגע, אך אין השפעה על הנתונים הראו השתנות בחלק subcortical של הנגע. המרכז לאמנות עכשווית תיקון: n = 10, המרכז לאמנות עכשווית מאתרים: n = 10. הנתונים המוצגים הם הממוצע ± סטיית התקן. # P &lt; 0.05 (F-מבחן), xP &lt; 0.05 (מבחן של Lavene). איור זה שונה מ- Trotman-לוקאס. et al. 11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58191/58191fig4large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>הגישה</td>
			<td>נפח הנגע (LV; מ מ3; זאת אומרת ± ש)</td>
			<td>כוח</td>
			<td>רמת המובהקות</td>
			<td>ההבדל Anticiapted</td>
			<td>גודל הקבוצה נדרש</td>
		</tr>
<tr>
<td>המרכז לאמנות עכשווית ובין אם לא (הגישה המסורתית)</td>
			<td>94.08 ± 53.79</td>
			<td>0.8</td>
			<td>0.05</td>
			<td>30%</td>
			<td>
n = 58</td>
		</tr>
<tr>
<td>המרכז לאמנות עכשווית תוקן (גישה חדשה)</td>
			<td>51.73 ± 22.78</td>
			<td>0.8</td>
			<td>0.05</td>
			<td>30%</td>
			<td>
n = 35</td>
		</tr>
</tbody></table>טבלה 1: נציג כוח ניתוח השוואת מסורתי מצדו המרכז לאמנות עכשווית עם החלופה, המרכז לאמנות עכשווית לתקן את השיטה המוסברת. טבלה זו מציגה הניתוח של כוח שנערך כדי לחשב את גודל הקבוצה הצפוי הנדרש כדי לזהות הבדל משמעותי בעירוי בין קבוצת ביקורת, הגישה (החדשה) מסורתי או חלופיים קבוצת בדיקה (חזה). הטבלה מציגה קבוצת גדלים ככל הנדרש אם ההנחה היא כוח של 0.8, רמת מובהקות של 0.05 מוחל, אם קבוצת הניסוי החזוי מראה הבדל 30% בעירוי לעומת קבוצת הביקורת. הטבלה מציגה את תוצאות שתי הגישות MCAO (של המרכז לאמנות עכשווית-ובין אם לא ותיקן את המרכז לאמנות עכשווית-) כדי לקבוע אם יש הבדל במספר חיות לזכות הבדל 30% LV. עבור שתי שיטות, ההנחה של סטיה שווה בין הבדיקה לבין קבוצת הביקורת. איור זה שונה מ- Trotman-לוקאס. et al. 11.

Intraluminal סגר נימה של עורק המוח התיכון הוא הדגם הנפוצות ביותר בשימוש ב- vivo של שבץ ניסויים בחולדות. גישה כירורגית חלופיים כדי לאפשר תיקון עורק הראש נפוצות מתבצע כאן, מה שמאפשר את פגיעה reperfusion של עורק תרדמני, של פגיעה reperfusion מלא אל השטח עורק המוח התיכון.

חסימה בעורק האמצעי המאפשר פגיעה Reperfusion באמצעות תיקון עורק הראש נפוצות בעכברים

The ischemic stroke is a major cause of adult long-term disability and death worldwide. The current treatments available are limited, with only tissue ...

שיטה זו יכולה לסייע לענות על שאלות מפתח בשדה השבץ הניסיוני, כגון כיצד להפחית את ההפחתה המשויכת למודלים אלה וכיצד לשפר את יכולת הרבייה. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא מאפשרת זלוק מחדש באמצעות העורק הראשי המשותף, ולכן אינה מסתמכת על המעגל של ויליס, אשר יכול להשתנות אנטומית בין בעלי חיים, ולכן עשוי לתרום השונות לראות באמצעי תוצאה ניסיוניים. הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית, כמו CCA כלי תיקון צעדים קשה ללמוד בשל הקושי הטכני מעורב בעת שימוש איטום כדי להבטיח כי CCA הוא פטנט מלא, לאחר התיקון.כדי להתחיל, להכין ולהרים את העכבר על פי פרוטוקול הבדיקה. לאחר מכן השתמש בלהב אזמל מספר 15 כדי לבצע חתך קו אמצע 1.5 ס"מ על צוואר הגחון החשוף. באמצעות טכניקות ניתוח קהה, בעדינות לסגת בלוטות הרוק לצד, כדי לחשוף את קנה הנשימה.ואז לנתח את העורק הראשי המשותף, או CCA, חופשי מן הרקמה שמסביב עצב vagal. לאחר מכן, להעביר שני חלקים קטנים של תפר 6-0 מתמוסס מתחת CCA, הגב לCCA, וגחון לעצב vagal. צייר עניבת משי אחת קרוב יותר למנתח, וקשר אותה באופן רופף סביב CCA.ואז באופן רופף לקשור עניבת משי שנייה לכיוון bifurcation של העורקים הראשיים הפנימיים וחיצוניים. לאחר מכן, להחיל קליפ microvascular ממש מעל העניבה דיסטלית, להבטיח bifurcation לא נחסם. השתמש מספריים venous מיקרו לעשות חור קטן CCA.הכנס 7-0 סיליקון מצופה סיסם מיקרו לתוך CCA, ולקדם אותו לכיוון קליפ microvascular. ואז להדק את העניבה דיסטלי כדי להדק את התסיסה במקום. ולהשתמש במחזיקי קליפים כדי להסיר את קליפ המיקרו-וסקולרי.לאחר מכן, לקדם את התסיסה לתוך העורק הראשי הפנימי, או ICA. ברגע שראש התסיסה עובר את העניבה הדיסטלית, משוך את העניבה חזק יותר, כדי למנוע איבוד דם. באמצעות עניבת משי דיסטלית, להרים ולמשוך את CCA לצד החיצוני של הגוף של העכבר, ולנווט את חוט לעיקול, מעבר לפתיחת העורק pterygopalatine, או PPA.לאחר חוט הוא במקום, לאבטח אותו על ידי הידוק עניבת משי דיסטלי עוד יותר. בסוף תקופת MCAO, לסגת את התסיסה עד ראש תריס לבן גלוי בבירור. ואז לשחרר את העניבה CCA דיסטלי רק מספיק כדי להסיר את ראש תריס רוב הדרך, מתוך הכלי.לאחר מכן, הסר באופן מלא את ראש התסיסה מהחללית. לאחר מכן, מניחים קליפ מיקרו-וסקולרי במיקום האופקי, לכיוון הביפורציה של CCA, ולצדו של העניבה הדיסטלית. ואז למקם קליפ נוסף מתחת לקשור CCA proximal, לכיוון המנתח.בזהירות להשתמש Dumont 5 מלקעות כדי להסיר את שני עניבות המשי. ולייבש את האזור באמצעות ניצני כותנה סטריליים. לאחר מכן הוסיפו פתרונות איטום פיברינוגן ותרומבין 1 ו-2, לצלחת פטרי סטרילית.באמצעות מספריים מיקרו ורידי וטכניקת ניתוח קהה, להשיג פרוסה גחונית דקה של שריר sternocleidomastoid. לאחר מכן, באמצעות מטחנים Dumont 5, לקחת את כרית הרקמות ולערבב אותו באופן שווה על פני פתרונות איטום פיברינוגן Thrombin. כאן חשוב להבטיח כרית הרקמות הוא גדול מספיק כדי לכסות את החתך CCA.וברגע שהוא מעורבב על פני שני הפתרונות, זה חייב להיות ממוקם מיד על החתך, כדי למנוע קרישת יתר הידבקות לקויה. לאחר מעורבב בין שני הפתרונות, להסיר את כרית הרקמה חתך CCA. מניחים את כרית הרקמה שטוחה על החתך בלחץ בינוני, ומדפים פתוחים.הסר במהירות את קליפ המיקרו-וסקולרי הדיסטלי, תוך החזקת כרית הרקמה במקומו. לאחר מכן, לאט להקל על הלחץ משטח הרקמות, המאפשר לדם לזרום מתחת לאזור החתך. עכשיו, לאט ובעדינות לשחרר את הלחץ מן קליפ microvascular proximal, ולאחר מכן להסיר לחלוטין.הסרת הקליפ העליון מאפשרת כמות קטנה של דם כדי להפעיל את איטום. שחרור קבוע של הסרטון הדיסטלי מאפשר עלייה הדרגתית בלחץ באתר החתך, הפעלה נוספת ועזרה במניעת תיקון כושל. לבסוף, ברגע שהחללית אטומה, תפרו את הפצע בתפרים מתמוססים של 6-0.בפרוטוקול זה, העורק המוחי האמצעי, או MCAO, בוצע על 24 עכברים זכרים בוגרים. הימנעות של רצועות ECA ותוספת של משככי כאבים הראו מגמה לקראת ירידה במשקל מופחתת ב 48 שעות לאחר MCAO. חמש דקות לאחר הסרת התסיסה, זרימת הדם המוחית האזורית גדלה באופן משמעותי באזור המוח של MCA.התדלוק נשמר עד לתיקון כלי השיט, עם עלייה חליטה לטריטוריה MCA, לאחר תיקון כלי CCA. זה מרמז כי תיקון CCA אפשר עירוי דם מוגבר לטריטוריה איסכמי, לעומת הסתמכות על המעגל של ויליס לבד. T2 משוקלל MRI שימש כדי לקבוע סריקות LV ו- DTI הכולל שימשו כדי לקבוע ליבה LV ב 48 שעות לאחר מקאו.לא היה הבדל משמעותי בין שתי הקבוצות הללו. מעניין, כי שונות עבור LV הכולל הליבה הופחתה באופן משמעותי בקבוצת התיקון CCA. הניתוח שלנו הצביע על כך שפחות בעלי חיים לכל קבוצת טיפול יידרשו להדגים הפחתה של 30% ב- LV, בעקבות MCAO, באמצעות תיקון CCA, לעומת הליך CCA טיפוסי.בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור כדי להבטיח את חבילת הרקמות הוא בגודל מספיק כדי לכסות את החתך CCA. כמו כן, המהירות חשובה, כדי למנוע את איטום יתר קרישה, לפני הצבת כרית על CCA.

middle-cerebral-artery-occlusion-allowing-reperfusion-via-common

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

פילמנטיות חסימה של עורק המוח התיכון הוא מודל משותף לחקר שבץ איסכמי בעכברים.

דוגמנות שבץ בעכברים - העורקים התיכון ספיגה מוחין עם דגם נימה

עורק המוח האמצעי intraluminal חסימה (MCAO) מודל הוא מודל בשימוש השכיח ביותר בקרב מודלים ניסיוניים שבץ איסכמי. להלן נדגים את המודל כולו בפירוט עם מדריך של flowmetry לייזר דופלר, והתוצאות מי מטעמה.

Intraluminal העורקים התיכון מוחין ספיגה (MCAO) מודל שבץ איסכמי עם הדרכה דופלר Flowmetry לייזר עכברים

מודל intraluminal המוח האמצעי, החסימה בעכברים מוצג במסמך זה. ההיקף אוטם מוחית מחושב על ידי ציון נוירולוגים וכתמים סגולים cresyl, מכתים חלופה לTTC, להציע את היתרון הגדול לבדיקה בסמני ריבית רבים במקביל.

מודל עכבר של MCAO intraluminal: הערכת אוטם מוחית על ידי כתמים סגולים Cresyl

סרטון זה מדגים את ההליך של ביצוע חסימה קבועה של עורק המוח האמצעי הדיסטלי, או MCAO, עם עורק הצוואר המשותף, או קשירת CCA, בחולדות מבוגרות כדי להדגים שבץ איסכמי. זה חוסם את זרימת הדם למוח, מה שמוביל למוות עצבי ויוצר מודל לחקר מנגנוני שבץ וטיפולים פוטנציאליים.

גרימת איסכמיה באמצעות חסימת עורק המוח האמצעי והצוואר המשותף במודל חולדה

על מנת להבין את פתופיזיולוגיה של שבץ, חשוב להשתמש במודלים אמינים. מאמר זה יתאר את אחד דגמי שבץ הנפוצים ביותר בשימוש בעכברים, כינה את חסימת עורק המוח האמצעי (MCAo) המודל (המכונה גם נימת intraluminal או מודל תפר) עם reperfusion.

גישה ניתוחית עבור העורקים התיכון ספיגה מוחין ושבץ reperfusion מושרה של עכברים

אנו מתארים מודל עכבר של שבץ מוחי הנגרם על ידי חסימה של עורק המוח האמצעי באמצעות תפר מצופה סיליקון. ניתן ליישם את הפרוטוקול כדי לגרום לחסימה קבועה או איסכמיה זמנית, ואחריה רפרפוזיה.

אינדוקציה של שבץ איסכמי ו איסכמיה reperfusion בעכברים באמצעות הטכניקה ויזואליזציה ספיגות עורקים התיכונים של אזור האוטם

דגם העכבר של איסכמיה מוחית-פגיעה reperfusion הוקמה כדי לחקור הפתופיזיולוגיה של שבץ. אנו יש מאתרים ומפסיקים את עורק המוח התיכון נכון ולא נכון עורק תרדמני, להחזיר את זרימת הדם לאחר 10 או 40 דקות של איסכמיה.

שתיים, כלי סגר דגם העכבר של איסכמיה מוחית-פגיעה reperfusion

הפרוטוקול נועד לספק שיטות לאנצפלומיוסיננגיוזיס - השתלה של דש שריר טמפורליס וסקולרי על פני השטח של רקמת מוח איסכמית - לטיפול בשבץ איסכמי שאינו מויאמויה. יעילות הגישה בהגברת אנגיוגנזה מוערכת באמצעות מודל חסימה חולף של עורק מוחי אמצעי בעכברים.

מודל לטיפול באנצפלומיוסיננגיוזיס לאחר שבץ מוחי הנגרם על ידי חסימת עורקים מוחיים באמצע בעכברים

פרוטוקול זה מתאר את המודל של איסכמיה מוחית מוקדית חולפת בעכברים באמצעות חסימה תוך לומינלית של עורק המוח האמצעי. בנוסף, דוגמאות להערכת תוצאות מוצגות באמצעות הדמיית תהודה מגנטית ומבחני התנהגות.

מודל חולף של חסימת עורק מוחי אמצעי חולף

פרוטוקול זה מציג מדריך שלב אחר שלב לחוקרים לביצוע הליך חסימת עורק המוח האמצעי בעכברים באמצעות שיטת עורק התרדמה החיצוני Longa שונה. השינויים המוצגים במאמר זה נועדו להגביר את הדיוק של חסימת עורק המוח התיכון ולהבטיח זילוח מלא.

אופטימיזציה של שיטת חסימת עורק המוח התיכון לונגה עבור זילוח מלא

פרוטוקול זה מתאר את תהליך ההכנה לרפרפוזיה של חסימת עורק המוח התיכון דרך עורק התרדמה המשותף.

הכנת מודל שונה עבור זילוח חסימת עורק מוחי אמצעי

למד טכניקה כירורגית לתיקון עורק הקרוטיד הנפוץ בעכברים לשיפור זרימת הדם לאחר שבץ מוחי. שיטה זו מפחיתה שונות בתוצאות הניסוי ומגבירה את השחזוריות במודלים ניסויים.

חסימה בעורק האמצעי המאפשר פגיעה Reperfusion באמצעות תיקון עורק הראש נפוצות בעכברים

גלה סרטונים נוספים