הרומן שיטות לניהול תוך-אפי בהרדמה אינהלציה כדי להעריך את האף-אל-מוח תרופות

כאן, אנו מתארים שתי שיטות רומן מינהל תוך-אפי יציב בהרדמה אינהלציה עם לחץ פיזי חיות ניסוי. גם נתאר שיטת הערכה כמותית של סמים רמות הפצה במוח באמצעות מסלול האף-אל-מוח באמצעות radiolabeled¹⁴ג]-אינולין כמו מצע מודל של מקרומולקולות מסיסים במים.

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום מדעי התרופות על ניהול תוך-רנסאלי ופרמקוקינטיקה ופרמקולוגיה של תרופות מעניינות. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שניתן להשתמש בה להערכה כמותית של מועמדים לתרופה ללידה מאף למוח והרדמת שאיפה עם לחץ מינימלי לבעלי החיים. ההשלכות של טכניקה זו משתרעת לכיוון הטיפול במחלות של מערכת העצבים המרכזית כפי שהוא תורם לפיתוח טכנולוגיות אספקת תרופות דרך המסלול האף למוח.

הדגמת ההליך תהיה מיצויושי פוקודה, דוקטורנט מהמעבדה שלי. למשלוח תוך-רנסאלי באמצעות מיקרופיגט במתקן איזוטופ רדיו מבודד. קלטת ועכבר הרדמה ללוח פקק במצב supine, ולנהל 25 microliters של פחמן-14 אינולין פתרון אחד עד שני מינונים microliter, לחילופין, לתוך הנחיריים הימני והשמאלי של החיה.

עבור משלוח cannulation הפוך מצד דרכי הנשימה דרך הוושט, מניחים את העכבר הרדמה תחת מיקרוסקופ ניתוח, ולעשות חתך בעור 1.5 ס"מ על הגרון. השתמש במדחפים כדי להרחיב את החתך עד קנה הנשימה נחשף, ולעשות חתך מילימטר אחד קנה הנשימה חשוף. הכנס cannula 1.2 ס"מ למיקום המסומן מראש לתוך החתך, ולצרף את הקצה הנגדי של cannula לתוך מסכת שאיפה.

לאחר מכן, השתמש במטסים כדי לחשוף את הוושט מתחת קנה הנשימה. השתמש במספריים כדי להפוך חתך מילימטר אחד בוושט ולהכניס קנולה שנייה 1.4 ס"מ למיקום המסומן מראש לכיוון הקצה האחורי של חלל האף. חשוב להכניס את ה cannula לאורך מתאים על פי המשקל של החיה הניסיונית ולהתאים את אורך cannula אלה אחרים.

Ligate את ה cannula הוושט ולצרף מחט 27-מד מזרק מיליליטר אחד מלא פתרון ניהול מחובר משאבת microsyringe ניתנת לתיכנת. לאחר מכן לספק 25 microliters של פחמן-14 אינולין בקצב קבוע חמישה microliter לדקה עד נפח הפתרון כולו כבר מנוהל. קצב דיפוזיה איטי אך מתמיד חשוב לשמירה על פתרון תרופתי רב ככל האפשר בתוך חלל האף.

כדי לכמת את כמות אינולין פחמן-14 שחצה את מחסום הדם - מוח 30 דקות לאחר הממשל אינולין, להשתמש במספריים כדי לפתוח בזהירות את הגולגולת של כל חיה שטופלו בניסויים מהצד medulla oblongata, ולהשתמש microspatula כדי לגרוף בזהירות את המוח. מניחים כל מוח על פיסת נייר מסנן מלוחים בצלחת פטרי על קרח כפי שהוא שנקטף. ולהשתמש ספוג כותנה ספוגה מלוחים כדי לנקות כל דם מפני השטח של כל מוח.

לאחר מכן, במהירות אך בזהירות, לנתח את המוח לתוך נורת חוש הריח, cerebrum, ו medulla oblongata, בתוספת סעיפי פונס. ומ מניחים את דגימות המוח במתבודד רקמות במשך שעה אחת ב 50 מעלות צלזיוס, ואחריו תוספת של 10 microliters של קוקטייל חריץ נוזלי. כדי לקבוע את הרדיואקטיביות של הפתרון המיושם, להעביר aliquot 25 microliter של פתרון הממשל, מומס בקוקטייל scintillation, לבקבוקון scintillation, ולמדוד את ההתפוררויות לדקה של רדיואקטיביות פחמן-14 בתוך דגימת המוח ואת הפתרון להחיל בנטרל scintillation נוזלי.

תחת הרדמה בשאיפה, לא נצפתה וריאציה בין-אינדיבידואלית ניסיונית בקרב בעלי חיים המועברים באמצעות סמים תוך-nasally. כאשר נעשה שימוש בשיטת ניהול חלל האף ההפוכה הוושטית, רמות גבוהות משמעותית של אינולין פחמן-14 נצפו בנורה חוש הריח, המוח הגדול, ו medulla oblongata, מאשר באמצעות משלוח מיקרופיגט. יתר על כן, אינולין פחמן-14 גבוה יותר מזוהה בנורה חוש הריח ואת medulla oblongata, שניהם מפותחים באופן בולט במסלול האף למוח, מאשר במוח הרחם.

לאחר התפתחותה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום מסירת האף למוח כדי לחקור את הביואקטיביות של סוכנים טיפוליים מולקולה גדולה במערכת העצבים המרכזית.