Name: מודל תפליט פלאורלי בחולדות על ידי החדרה Intratracheal של Polyacrylate/Nanosilica (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 32 s
Description: חקור מודל תפליט פלאורלי בחולדות באמצעות החדרה Intratracheal של Polyacrylate/Nanosilica. שיטה זו מאפשרת חקר רעילות ננו-חומרים ותפקוד ריאתי בביולוגיה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחקר הנוכחי וייצור למאמר זה במימון של הלאומי מדעי הטבע קרן של סין (גרנט 81773373, 81172614 ו- 81441089 גרנט). אנו מודים ד ר יאן ג'ין ואת ד ר פאן Yujie, מחלקת חירום, בייג'ינג צ'אויאנג בית החולים, ד ר פנג Qu של מחלקת אולטראסאונד לרפואה, ביה ח בייג'ינג צ'אויאנג שעזרת עם הפקת הסרטון.

המחקר עקב אחר ההנחיות של האוניברסיטה לרפואה הון (בייג'ינג, סין p. R) עבור טיפול והשתמש של חיות ניסוי. כל ההליכים אושרו על-ידי חיה אתי הוועדה של הבירה רפואי האוניברסיטה בסין.
1. ההכנות ניסיוני
הערה: להתאקלם הנשי ספציפי פתוגן ללא Wistar העכברושים (משקל: 200 ± 10 גרם) את סביבות ניסיוני במשך שבוע לפני המינהל (תנאים סביבתיים: אור / כהה: 12h / 12h, הטמפרטורה 22 ± 2 ° C, לחות 50 ± 10%).
<ol><li>השתמש טריים 10 מ"ל של המתלים הרשות/NPSi (nanosilica Ø:20 ± 5 ננומטר על ידי אמולסיה באתרו הפילמור) מעורבבת עם תמיסת מלח בריכוזים של 3.125, 6.25 12.5 מ"ג/מ"ל, בהתאמה10. בעבר מינהל, sonicate את המתלים למשך 20-30 דקות, מערבולת 10 דקות כדי למנוע צבירת חלקיקים.</li>
	<li>במידה שווה לחלק את סכום כולל של 20 חולדות ארבע קבוצות: קבוצה אחת עבור כל ריכוז של הרשות/NPSi (0, 3.125, 6.25 ו 12.5 מ"ג/מ"ל).</li>
	<li>כדי עזים ומתנגד אותם, להציב את החולדות במיכל סגור עם 1.5 מ של האתר (99.5%) או כל IACUC אושרו פרוטוקולים אחרים. לאחר 60-90 s של הרדמה, בדוק חוסר תגובה לדווש רפלקס. ודא כי החולדות נושמים.</li>
	<li>העכברוש anesthetized ותצברו ולתקן את השיניים הקדמיות שלה עם חוטי ניילון על הלוח סטיריליים מדי.</li>
	<li>פותח את פיו ולחשוף שלה פיסורה של glottis בעזרת מלקחיים כירורגיים ולעדשה חזיתית.</li>
	<li>להקנות העכברושים 0.5 מ של הרשות/NPSi השעיה לריאה של חולדה כל עבור סכום כולל של 1 מ"ל באמצעות צינור בסדר עם מחט בוטה סטיריליים לתוך סמפון הדו-צדדיים.</li>
	<li>מניחים את החולדות על לוח פלסטיק מיקום פרקדן ולתת שהחולדות לשחזר לאט בעוד 5-10 דקות.</li>
</ol>2. אולטרסאונד הבדיקה עבור תפליט פלאורלי
<ol><li>השתמש מערכת סאונד עם מתמר מערך ליניארי (תדר: 8 מגה-הרץ) לבחון חולדות בימים 1, 3, 7 ו- 1410.</li>
	<li>לתת הרדמה (10% קלוראל-הידרייט, 0.35 גרם/100 גרם, i.p.) לעכברושים ולבדוק העדר רפלקסים פדלים.</li>
	<li>להסיר את השיער החזה הבטן של חולדות העליונה באמצעות מכונת גילוח חשמלית. ואז מניחים את החולדה על צלחת הרכבה במצב פרקדן.</li>
	<li>לכסות את העור עם הג'ל מצופה ולאחר מכן הצב את המתמר לחלל הבין-צלעי ואזור subcostal כדי לזהות נוזל פלאורלי. הערה: על מנת לזהות שהאולטרסאונד במדויק, השמאל ואת העמדות הימנית נבחרו כדי לבצע בדיקת אולטרסאונד.</li>
	<li>לשים את החולדה על לוח פלסטיק במצב פרקדן לאחר בדיקת אולטרסאונד ולתת שהחולדות להתאושש באיטיות תוך עשר דקות.</li>
</ol>3. החזה סריקת CT של תפליט פלאורלי
<ol><li>על ניהול שלאחר ימים 7 ו-14, עזים ומתנגד החולדות עם 10% כלורין (מקומות). שקול זה מספיק עומק ההרדמה כאשר העכברוש אינו מגיב לדווש רפלקסים. הערה: המינהל שלאחר יום 7 הוא הזמן המתאים ביותר להתבונן תפליט פלאורלי על-ידי סריקת CT.</li>
	<li>במקום העכבר על משטח מפלסטיק במצב של שכיבה ולאחר מכן סרוק את החזה שלה כדי לחקור תפליט פלאורלי באמצעות שימוש טי 64 ערוצים בהגדרות הבאות: תצורת גלאי 64 מ"מ x 0.625 מ"מ, 120 kV (פיק), ו- 350 mAs.</li>
</ol>4. אוסף של תפליט פלאורלי ובידוד של חלקיקים ב תפליט פלאורלי
<ol><li>אחרי החזה CT סריקה של חולדות, תחת הרדמה של קלוראל-הידרייט, לבדוק את רפלקס פדלים של החולדות, לגלח את שיער מהבטן לחזה ו מכן לחטא את העור על-ידי יוד.</li>
	<li>להביא את החולדות האזור הכירורגי.</li>
	<li>תחת הרדמה, נחתך במהירות 1-1.5 ס מ של העור ואת שרירי הבטן מצאתי לאורך הקו האמצעי עם הסרעפת ללא פגע.</li>
	<li>בזהירות פתח את התיבה ולבדוק הדו-צדדיים פלאורלי חללים בעזרת פינצטה, במיוחד דו צדדיים costal הסרעפת הזוויות. לאסוף מ ל 1-2 של תפליט פלאורלי אור צהוב עם מזרק סטרילי 2 מ"ל.</li>
	<li>פעם עשיתי, להקריב את העכברים עם פרוטוקול IACUC אושרה.</li>
	<li>Centrifuge של תפליט פלאורלי צינור 2 מ"ל למשך 15 דקות ב x 300 גר' על מנת לבודד את חלקיקי.</li>
	<li>השתמש טיפה של השכבה העליונה אשר הוא נוזל בהיר, להתבונן תחת microscope(TEM,) אלקטרון תמסורת במתח מאיץ של 60-80 kV.</li>
</ol>

<ol><li>Stathopoulos, G. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclear+factor-kappaB+affects+tumor+progression+in+a+mouse+model+of+malignant+pleural+effusion%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Nuclear factor-kappaB affects tumor progression in a mouse model of malignant pleural effusion.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 34 (2), 142-150 (2006).</li>
<li>Shen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dosage-toxicity-efficacy+relationship+of+kansui+and+licorice+in+malignant+pleural+effusion+rats+based+on+factor+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">The dosage-toxicity-efficacy relationship of kansui and licorice in malignant pleural effusion rats based on factor analysis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 186, 251-256 (2016).</li>
<li>Nel, A., Xia, T., Mädler, L., Li, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxic+potential+of+materials+at+the+nanolevel%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Toxic potential of materials at the nanolevel.</a> Science. 311 (5761), 622-627 (2006).</li>
<li>Maynard, A. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safe+handling+of+nanotechnology%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Safe handling of nanotechnology.</a> Nature. 444 (7117), 267-269 (2006).</li>
<li>Duan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxic+effects+of+silica+nanoparticles+on+zebrafish+embryos+and+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Toxic effects of silica nanoparticles on zebrafish embryos and larvae.</a> PLoS One. 8 (9), 74606(2013).</li>
<li>Skuland, T., Ovrevik, J., Låg, M., Schwarze, P., Refsnes, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silica+nanoparticles+induce+cytokine+responses+in+lung+epithelial+cells+through+activation+of+a+p38%2FTACE%2FTGF-%CE%B1%2FEGFR-pathway+and+NF-%CE%BA%CE%92+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+and+Applied+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Silica nanoparticles induce cytokine responses in lung epithelial cells through activation of a p38/TACE/TGF-α/EGFR-pathway and NF-κΒ signaling.</a> Toxicology and Applied Pharmacology. 279 (1), 76-86 (2014).</li>
<li>Oberdörster, G., Oberdörster, E., Oberdörster, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanotoxicology%3A+an+emerging+discipline+evolving+from+studies+of+ultrafine+particles%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Health+Perspectives%22%5BJournal%5D)">Nanotoxicology: an emerging discipline evolving from studies of ultrafine particles.</a> Environmental Health Perspectives. 113 (7), 823-839 (2005).</li>
<li>Song, Y., Li, X., Du, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+to+nanoparticles+is+related+to+pleural+effusion%2C+pulmonary+fibrosis+and+granuloma%5BTitle%5D)+AND+%22European+Respiratory+Journal%22%5BJournal%5D)">Exposure to nanoparticles is related to pleural effusion, pulmonary fibrosis and granuloma.</a> European Respiratory Journal. 34 (3), 559-567 (2009).</li>
<li>Song, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanomaterials+in+humans%3A+identification%2C+characteristics%2C+and+potential+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicologic+Pathology%22%5BJournal%5D)">Nanomaterials in humans: identification, characteristics, and potential damage.</a> Toxicologic Pathology. 39 (5), 841-849 (2011).</li>
<li>Zhu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polyacrylate%2Fnanosilica+causes+pleural+and+pericardial+effusion%2C+and+pulmonary+fibrosis+and+granuloma+in+rats+similar+to+those+observed+in+exposed+workers%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">Polyacrylate/nanosilica causes pleural and pericardial effusion, and pulmonary fibrosis and granuloma in rats similar to those observed in exposed workers.</a> International Journal of Nanomedicine. 11, 1593-1605 (2016).</li>
<li>Havelock, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pleural+procedures+and+thoracic+ultrasound%3A+British+Thoracic+Society+Pleural+Disease+Guideline+2010%5BTitle%5D)+AND+%22Thorax%22%5BJournal%5D)">Pleural procedures and thoracic ultrasound: British Thoracic Society Pleural Disease Guideline 2010.</a> Thorax. 65, Suppl 2 61-76 (2010).</li>
<li>Jha, A., Ullah, E., Gupta, P., Gupta, G., Saud, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sonography+of+multifocal+hydatidosis+involving+lung+and+liver+in+a+female+child%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Medical+Ultrasound%22%5BJournal%5D)">Sonography of multifocal hydatidosis involving lung and liver in a female child.</a> Journal of Medical Ultrasound. 40 (4), 471-474 (2013).</li>
<li>Hikaru, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+analysis+of+70-nm+silica+particles-induced+chronic+toxicity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutics+and+Biopharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Histological analysis of 70-nm silica particles-induced chronic toxicity in rats.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 72, 626-629 (2009).</li>
<li>Sun, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytotoxicity+and+mitochondrial+damage+caused+by+silica+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+in+Vitro%22%5BJournal%5D)">Cytotoxicity and mitochondrial damage caused by silica nanoparticles.</a> Toxicology in Vitro. 25, 1619-1629 (2011).</li>
<li>Hikaru, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silica+nanoparticles+as+hepatotoxicants%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutics+and+Biopharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Silica nanoparticles as hepatotoxicants.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 72, 496-501 (2009).</li>
<li>Liu, T. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+and+repeated+dose+toxicity+of+mesoporous+hollow+silica+nanoparticles+in+intravenously+exposed+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Single and repeated dose toxicity of mesoporous hollow silica nanoparticles in intravenously exposed mice.</a> Biomaterials. 32, 1657-1668 (2011).</li>
<li>Ding, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diseases+caused+by+silica%3A+Mechanisms+of+injury+and+disease+development%5BTitle%5D)+AND+%22International+Immunopharmacology%22%5BJournal%5D)">Diseases caused by silica: Mechanisms of injury and disease development.</a> International Immunopharmacology. 2, 173-182 (2002).</li>
<li>Shen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dosage-toxicity-efficacy+relationship+of+kansui+and+licorice+in+malignant+pleural+effusion+rats+based+on+factor+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">The dosage-toxicity-efficacy relationship of kansui and licorice in malignant pleural effusion rats based on factor analysis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 186, 251-256 (2016).</li>
<li>Ji, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Twenty-eight-day+inhalation+toxicity+study+of+silver+nanoparticles+in+Sprague-Dawley+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Inhalation+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Twenty-eight-day inhalation toxicity study of silver nanoparticles in Sprague-Dawley rats.</a> Inhalation Toxicology. 19 (10), 857-871 (2007).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

Sonography הוא הכלי הנוח ביותר לקביעת מחלות ריאות, עקב רגישות מצוינת שלה נוזל חופשי חלל הצדר11. זה בגלל sonography יכולים לזהות מיד את הניגוד ב עכבה אקוסטית של נוזלים בחלל הריאות12והאוויר. חוץ מזה, sonography היא גמישה יותר במודל של חיה קטנה מטי ובכל זאת, את האוויר בריאה משתקפת גל הקול ואת המניע מהתבוננות השינויים intrapulmonary לאחר החדרה חלקיקים. לכן, אנו משלבים בדיקת ct חזה, ריאות sonography לחקור את השינויים intrapulmonary, נוזל פלאורלי.
לאחר...

תפליט פלאורלי הוא ביטוי קליני נפוצה מאוד של מחלות ריאות עם מגוון של סיבות. יש מודל שימושי תפליט פלאורלי בעלי חיים חשוב מאוד ללמוד אלה מחלות ריאות, התפקידים של שתי השכבות ממברנה פלאורלי במנגנונים של תפליט פלאורלי, הטיפול בה. עם זאת, חלק דיווח תפליט פלאורלי מודלים מתמקדים בעיקר על תפליט פלאורלי ממאיר או הגורמים הביולוגיים במקום על חלקיקים הסביבה1,2. כאן, אנחנו מציגים מודל חדש של תפליט פלאורלי, זה פשוט, בטוח ויעיל.
עם ההתפתחות של ננו-טכנולוגיה, שימוש נרחב nanoproducts, יש דאגה לגבי הסיכונים הפוטנציאליים של ננו כדי על הסביבה ועל בריאות האדם3,4. ננו להציג את גורמי הסיכון, שעשויה להוביל מפגעים הרומן בתוך מקום העבודה או דרך זיהום סביבתי. מחקרים במבחנה, ויוו מראים כי ננו יכול לגרום נזק רב איבר ל הריאות, הלב, הכבד, הכליות, מערכת העצבים, וכן את הרבייה ומערכת החיסוןs5,6. בנוסף, מחקרים דיווחו כי רעילות ספציפיים של ננו-חומרים עקב שלהם מאפיינים ייחודיים physicochemical3,4,7.
אנחנו דיווחו כי קבוצה של עובדים עם חשיפה תעסוקתית ננו הציג קלינית עם תפליט פלאורלי, סביב הלב, פיברוזיס של הריאה, גרנולומה8,9. חלקיקי סיליקה היו מבודדים אותם חולים תפליט פלאורלי9. על מנת לשחזר ולאמת את תפליט פלאורלי המושרה על ידי חלקיקים בשאיפה של האדם, אנחנו ערכו את הניסוי על-ידי החדרת polyacrylate/nanosilica (הרשות/NPSi) דרך מערכת הנשימה אצל חולדות, אשר חיקה נשימה אנושיים אמיתיים הסביבה, מצא את intratracheal החדרה של הרשות/NPSi יכול לגרום תפליט פלאורלי בחולדות. כאן, אנו מציגים כיצד להפוך תפליט פלאורלי בחולדות מאת intratracheal החדרה של הרשות/NPSi, ואיך לבודד חלקיקים ב תפליט פלאורלי. מודל זה עשוי להיות שימושי עבור מחקר נוסף של ננו טוקסיקולוגיה ומחלות תפליט פלאורלי.

<table><tbody><tr><td>מערכת אולטרסאונד דופלר צבעונית Acuson S2000</td><td>סימנס פתרונות רפואיים, Mountain View, CA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>&nbsp; פוליאקרילט / ננו-סיליקה</td><td>אוניברסיטת פודן, שנחאי, סין</td><td></td><td>תוצרת הזמנה עם ננו-סיליקה (20 &plusmn; 5) ננומטר</td></tr><tr><td>10% כלורל הידרט</td><td>בייג'ינג עבודות כימיות</td><td>302-17-0</td><td></td></tr><tr><td>מהירות אור 16 טומוגרפיה ממוחשבת ספירלית</td><td>GE Healthcare, ארה"ב</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ספציפי ללא פתוגן Wistar</td><td>מרכז בעלי חיים של Lianhelihua (בייג'ינג, סין)</td><td></td><td>חולדות Wistar</td></tr></tbody></table>

מודל תפליט פלאורלי בחולדות על ידי החדרה intratracheal של polyacrylate/nanosilica

A Pleural Effusion Model in Rats by Intratracheal Instillation of Polyacrylate/Nanosilica

תפליט פלאורלי הוא ממצא קליני שכיחה של מחלות רבות. יש מודל שימושי תפליט פלאורלי בעלי חיים חשוב מאוד ללמוד אלה מחלות ריאות. דגמים קודמים של תפליט פלאורלי יותר לשים לב הגורמים הביולוגיים, ולא חלקיקים בסביבה כאן, אנחנו מציגים מודל תפליט פלאורלי בחולדות על ידי החדרה intratracheal של polyacrylate/nanosilica, ואם שיטה של ננו-חלקיק בידוד ב תפליט פלאורלי. על ידי intratracheal החדרה של polyacrylate/nanosilica עם ריכוזים של 3.125, 6.25 ו- 12.5 מ ג/kg∙mL, תפליט פלאורלי בחולדות הציג ביום 3, הגיעה לשיאה ב- 7-10 ימים 6.25 ו- 12.5 מ ג/kg∙mL קבוצות, ואז לאט לאט ירד ונעלם ביום 14 כאשר הריכוז של polyacrylate/nanosilica גדל, תפליט פלאורלי הוא מיוצר יותר ויותר מהר. נוזל פלאורלי זה זוהה על-ידי בדיקת אולטראסאונד או CT חזה סריקה של אושר על ידי ניתוח של חולדות. חלקיקי סיליקה נצפו ב תפליט פלאורלי של החולדות באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים הילוכים. התוצאות הראו כי החשיפה polyacrylate/nanosilica מוביל אינדוקציה של תפליט פלאורלי, אשר היה עקבי עם הדו ח. הקודמים שלנו בבני אדם. בנוסף, המודל הזה הוא מועיל עבור מחקר נוסף של ננו טוקסיקולוגיה והמחלות תפליט פלאורלי.

באמצעות אולטרסאונד של בית החזה, מצאנו אין מקרום ביום 1 בכל קבוצות. עם זאת, ביום 3, תפליט פלאורלי הופיעו הקבוצות 6.25 ו- 12.5 מ ג/kg∙mL. שהאולטרסאונד היה בעיקר הזווית הסרעפת costal נכון, תוך שהאולטרסאונד סביב הלב הציג רק בקבוצה 12.5 מ"ג/kg∙mL. יתר על כן, ביום 7, תפליט פלאורלי (Video 1) והן סביב הלב אפוזיה (סרטון 2) התגלו בקבוצה mg/kg∙mL 6.25 (איור 1). תפליט פלאורלי גדל לאט במידה הרבה ביותר ב- 7-10 ימים, לאחר מכן ירד בהדרגה. בי...

כאן, אנו מציגים פרוטוקול כדי לבנות מודל תפליט פלאורלי בחולדות על ידי החדרה intratracheal של polyacrylate/nanosilica.

מודל תפליט פלאורלי בחולדות על ידי החדרה Intratracheal של Polyacrylate/Nanosilica

Pleural effusion is a prevalent clinical finding of many pulmonary diseases. Having a useful animal pleural effusion model is very important to study ...

שיטה זו יכולה לספק תובנה על הרעילות של ננו ו ניתן ליישם לחקר רעילות ריאתי. טכניקה זו נגזרה כדי ללמוד את ההשפעות של תשישות pleural הנגרמת על ידי פוליאקרילאט/ ננוסיליקה. לפני תחילת ההטבה, sonicate טרי, 10 מיליליטר, פוליאקרילאט / nanosilica השעיה מלוחים רגילים במשך 20 עד 30 דקות, ואחריו 10 דקות של מערבולת, לפני דילול ההשעיה ל 3.125, 6.25, ו 12.5 מיליגרם לריכוזים מיליליטר.לאחר מכן, לאשר חוסר תגובה קמצוץ בוהן בחולדה הרדמה, ולתקן את השיניים הקדמיות של החיה ללוח עם חתיכת חוט ניילון. באמצעות מטלפים ומאפשר חזיתי, בעדינות לפתוח את הפה כדי לדמיין את הסקור של glottis, ולהכניס צינור דק לתוך הסופת הדו-צדדית. לאחר מכן, להחדיר 0.5 מיליליטר של חלקיקי polyacrylate / nanosilica דרך הצינור לתוך הריאות, ולמקם את החולדה במצב supine עם ניטור עד החלמה מלאה.בימים 1, 3, 7 ו-14 לאחר החדלה, השתמשו במכונת גילוח חשמלית כדי להסיר את השיער מהחזה והבטן העליונה של כל חולדה הרדמה, וה מניחים את החולדה על צלחת ההרכבה של מערכת אולטרסאונד עם מתמר מערך ליניארי בתמר השופעת. יש למרוח ג'ל אולטרסאונד על העור החשוף, ולהחיל את מתמר על החלל הבין-צלעי ועל אזור תת-התת-צלעי כדי לזהות את הנוזל הפלורלי. על מנת לזהות את התפלה במדויק, בחר את העמדות בצד שמאל וימין לבצע בדיקת אולטרסאונד.ביום השביעי, הן התפכח pleural ו effusion pericardial מזוהים ב 6.25 מיליגרם לקילוגרם לכל מיליליטר החדיר קבוצה. ביום השביעי וה-14, סריקות חזה CT של 12.5 מיליגרם לקילוגרם לכל מיליליטר שהוחדרו על ידי בעלי חיים אינם תקינים בזווית הקוסטופרנית האחורית הבוטה, מרמזים על כמות קטנה של תדלוק pleural. מיקרוסקופ אלקטרונים שידור של דגימות תבונה pleural מגלה חלקיקי ננוסיליקה בנפרד באשכולות עם מורפולוגיה עולה בקנה אחד עם זה שנצפה חלקיקים בתוך ההשעיה מוכנה.הדבר החשוב ביותר הוא לזכור לדמיין את הסקור של glottis ולהכניס צינור דק לתוך הסופת הדו-צדדית. חלקיקים יכול גם להיות החדיר על ידי שאיפה או הזרקה תוך וריד, כמו שתי השיטות בוצעו במחקרים קודמים. טכניקה זו שימושית לחקר התפתחות התפכוח pleural.

a-pleural-effusion-model-rats-intratracheal-instillation

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

Instillations Intratracheal לספק מומסים ישירות לריאות. הליך זה מטרות אספקת instillate לתוך אזורים דיסטלי של הריאה, ולכן שולבו לעתים קרובות במחקרים שמטרתם ללמוד alveoli. אנו מספקים הישרדות פרוטוקול מפורט לביצוע instillations intratracheal בעכברים.

החדרה ישירה של קנה הנשימה אל הריאות מומסים עכבר

סרטון זה מדגים את ביסוס זיהום הריאות במודל מכרסם חיסוני באמצעות אינטובציה והתקנת תרחיפים חיידקיים באונות הריאה. מודל זה מאפשר מחקרי יעילות אנטיבקטריאליים בבעלי חיים בעלי יכולת חיסון.

החדרה תוך סימפונית של דלקת ריאות סטרפטוקוקוס במודלים של מכרסמים חיסוניים

הטיות סלקטיבית של חומצת הסימפונות לריאה השמאלית בעכברים גורמת לפגיעה בריאה חד צדדית ועצמית מוגבלת, אשר מודלים תסמונת מצוקה נשימתית חריפה של האדם (ברווזים) הנגרמת על ידי שאיפה חומצת קיבה.

מודל של פגיעה עצמית מוגבלת בריאה חריפה על ידי ברונכיט חד צדדית של חומצה בסימפונות

המתוארת היא תרבות התא ושיטת החשיפה של מודל הסימפונות במבחנה לחשיפה מציאותית וחוזרת ונשנית לשאיפת חלקיקים לבדיקות רעילות.

מודל אפיתל ממשק נוזלי אוויר לחשיפה מציאותית וחוזרת ונשנית לחלקיקים מוטסים לבדיקות רעילות

טכניקה זו של החדרת תרופות ישירות לקנה הנשימה של מכרסמים יילודים חשובה לחקר ההשפעה של תרופות או ביולוגים מקומיים על מחלות ריאה בילודים. בנוסף, שיטה זו יכולה לשמש גם לגרימת פגיעה בריאה במודלים של בעלי חיים.

שיטה זעיר פולשנית להחדרת תרופות תוך-רחמיות במכרסמים יילודים לטיפול במחלות ריאה

מודלים שונים של בעלי חיים של פיברוזיס ריאתי הוקמו באמצעות בלומיצין כדי להבהיר את הפתוגנזה של פיברוזיס ריאתי ולמצוא מטרות תרופות חדשות. עם זאת, רוב המודלים פיברוזיס ריאתי המכוונים לרקמת הריאה יש מתן תרופות לא אחיד. כאן, אנו מציעים מודל של פיברוזיס ריאתי אחיד המושרה על ידי nebulization בלומיצין האף.

מודל עכבר של פיברוזיס ריאתי המושרה על ידי נבוליזציה של בלומיצין באף

מחקר זה מתאר טכניקה לביסוס מודל חולדות סיליקוזיס עם שאיפת סיליקה דרך כל הגוף בתא שאיפה. החולדות עם סיליקוזיס יכולות לחקות מקרוב את התהליך הפתולוגי של סיליקוזיס אנושי בצורה קלה, חסכונית עם חזרתיות טובה.

ביסוס מודל חולדת סיליקוזיס באמצעות חשיפה של כל הגוף לסיליקה ניתנת לנשימה

פרוטוקול זה מתאר שיטה לביסוס מודל עכברי של סיליקוזיס באמצעות חשיפה חוזרת ונשנית לתרחיפים של סיליקה באמצעות טפטוף אף. מודל זה יכול לחקות ביעילות, בנוחות ובגמישות את התהליך הפתולוגי של סיליקוזיס אנושי עם חזרתיות וחיסכון גבוהים.

מודל עכבר סיליקוזיס שנקבע על ידי שאיפה חוזרת ונשנית של אבק סיליקה גבישי

פרוטוקול זה מדגים את טכניקת השאיפה האורופרינגיאלית לשימוש במודל עכברי הבלאומיצין של פיברוזיס ריאתי.

מתן אורו-לוע של בלאומיצין במודל העכברי של פיברוזיס ריאתי

כאן אנו מציגים פרוטוקול למידול פיברוזיס ריאתי בעכברים באמצעות בלומיצין אירוסולי המועבר דרך קנה הנשימה. שיטה אופטימלית זו מאפשרת מסירה אחידה, כמותית ומדויקת ללא חתך כירורגי, ומשפרת את השחזור והאמינות של פיברוזיס הנגרמת על ידי בלומיצין.

שיטה משופרת מבוססת אירוסולים להעברת בלומיצין תוך-קנה הנשימה למודלים של עכברים ניתנים לשחזור ומינימום פולשני של פיברוזיס ריאתי

חקור מודל תפליט פלאורלי בחולדות באמצעות החדרה Intratracheal של Polyacrylate/Nanosilica. שיטה זו מאפשרת חקר רעילות ננו-חומרים ותפקוד ריאתי בביולוגיה.

מודל תפליט פלאורלי בחולדות על ידי החדרה Intratracheal של Polyacrylate/Nanosilica

גלה סרטונים נוספים