הכנת כלורופלסט תאי המשנה של תודרנית לניתוח של חלבון לוקליזציה Immunoblotting או פרוטאומיקס

21.8K צפיות

צוטט 9 פעמים

10:28 דק׳

19 באוקטובר 2018

10.3791/58581-v

19 באוקטובר 2018

21.8K צפיות

כאן, אנו מתארים שיטה לטהר מהכלורופלסט ללא פגע מן העלים תודרנית שלהם שלוש הראשי תת התאים (מעטפה, משתית, thylakoids), באמצעות שילוב של centrifugations דיפרנציאלית, מעברי צבע, Percoll רציף, מעברי צבע סוכרוז מקוטע. השיטה היא יקר עבור subplastidial ולוקליזציה subcellular של חלבונים על-ידי immunoblotting פרוטאומיקס.

גלה סרטונים נוספים

Percoll

Chapters in this video

0:04

Title

1:01

Harvesting of Arabidopsis Leaves

2:26

Purification of Crude Chloroplasts Using Differential Centrifugation

3:30

Purification of Intact Chloroplasts on Continuous Percoll Gradient

4:51

Lysis of Intact Chloroplasts Using a Hypotonic Buffer and Purification of Chloroplast Sub-Compartments on Discontinuous Sucrose Gradients

6:05

Washing and Concentration of Thylakoid and Envelope Membrane Systems

7:09

Results: Analysis of Protein Localization by Immunoblotting or Proteomics

8:44

Conclusion

Related Videos