Name: פיתוח ושימוש Angiographic של המודל VX2 הארנב של סרטן הכבד (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 3 s
Description: למדו את מודל ה-VX2 לארנב לחקר סרטן הכבד באמצעות השתלת אלוגרפט אורתוטופית. שיטה זו מאפשרת חקר טיפולים אזוריים מקומיים ברדיולוגיה פולשנית ואונקולוגיה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ברצוננו להודות צוות וטרינרי באוניברסיטת אילינוי - מעבדה המשאבים הביולוגיים של שיקגו.

להלן כללי התנהגות עוקב אחר כל דרישות והנחיות המנדט על ידי אוניברסיטת אילינוי - שיקגו. היא נבדקה, אושרה תושבים המקומיים אכפת לי חיה המוסדית והוועדה לשימוש לפני ביצוע.
1. VX2 התפתחות גידולים של הגפיים האחוריות
<ol><li>להשיג את שורת התאים של גידול VX2 הלאומית המכון חלוקה של סרטן טיפול אבחון סרטן, טיפול הגידול תא קו במאגר. הערה: בשלב זה, הקטלוג סדר ניתן למצוא בקישור הבא: https://dtp.cancer.gov/repositories/.</li>
	<li>כדי להתכונן התליה תא הזרקה, הנח קפוא VX2 methylcellulose ולדגום המדיום במים פושרים עד שהם יש הקרת.<ol>
<li>האחות 0.5\u20121 מ"ל של התליה תא המופשרים ואמצעי אחסון שווה methylcellulose המופשרים בינוני לתוך מזרק 5-mL. הערה: היא עשויה לסייע השימוש מחט G 21 או 22 מחוק לגמרי התליה תא ו מחט מד גדול יותר מחוק לגמרי המדיום methylcellulose. במקום תארגן את הדברים על קרח.</li>
	</ol>
</li>
	<li>להכין התורם הגידול של הגפיים האחוריות ארנב חיסון של השעיה תא, החל הרגעה באמצעות איזופרומאזין 1 מ"ג/ק"ג ו- 0.02 נקודות מ"ג/ק"ג. הבופרנורפין בהתחשב intramuscularly. לגלח את האתר חיסון (הינד האיבר). עם מספריים, נקיים מגולח עם סוכן או יוד-בסיס אלכוהול. הערה: Meloxicam יכול להינתן במינון של 0.2 מ"ג/ק"ג subcutaneously על שיכוך כאבים. ארנב פרווה קשה להתגלח. מומלץ כי החוקר לבצע מעברים מרובים, תחילה התמקדות ניקוי בכמויות גדולות של הפרווה ואז לחיצה והסכין על העור, הולך נגד התבואה.</li>
	<li>מחט 16 גרם לצרף המזרק 5-mL המכיל התליה תא ולהזריק 1 מ"ל של ההשעיה לתוך הבטן של השריר הגפיים האחוריות של הארנב התורם, בערך 1 ס מ עמוקה. הקפד לשמור בעצב פועל במסגרת groove מוחשי לאורך עצם הירך. הערה: VX2 טריים inoculates 88% מהנושאים בהצלחה בזמן VX2 מוקפאים ומופשרים הוא רק מוצלח 33% של הזמן19. התראה: הגידול VX2 יגדל במהירות. תופעות הלוואי עשוי לציין התקדמות הגידול הם: גדל קצב נשימה, עייפות, ירידה בערנות, ו/או שינויים התנהגותיים (למשל, תוקפנות יוצאת דופן). כתוצאה מכך, ההמלצות הן כדי לפקח על החיות מקרוב וכדי לתכנן לקציר הגידול בתוך שבועיים לאחר חיסון.</li>
</ol>2. VX2 הגפיים האחוריות הגידול והקציר
הערה: בהנחה חיסון מוצלח, צריך להיות מוחשי גולה הגידול (3\u20124 ס מ) במקום ההזרקה בתוך 2 שבועות. בדרך כלל, גולה זו יהיה מוחשי בסביבות 1 בשבוע; עם זאת, עדיף לתת את הגידול לגדול כדי לאפשר לאיסוף רקמות מספיקות. בדרך כלל, גולה זה יהיה המשרד המתועב, מוגבה מעל הרמה של השריר. אם
<ol><li>ימשש את האזור חוסנו ב 2 שבועות של חיסון. אם הגידול לא מזוהה ב 2 שבועות, בצע שוב את שלב 1. ראה איור 1. הערה: הנוכחות של הגידול יכול גם להיות מוערך באמצעות אולטרסאונד. ואילו היו אין מחקרים כדי להעריך את ההבדל בין מדדי צמיחה הגידול כאשר הופץ במלאי קפוא לעומת מניות טריים, זה היה הניסיון שלנו שגדלה הגידול במלאי קפוא מעט לאט יותר, יהיה לזיהוי אחרי המניות טריים נגד חלק. בכל מקרה, אחת מהשיטות אמור להניב גידול harvestable על ידי 2 שבועות.</li>
	<li>הכינו את התורם הגידול של הגפיים האחוריות לקציר הגידול. עזים ומתנגד הארנבת עם 45 מ"ג/ק"ג קטמין ו- 5 מ"ג/ק"ג חריגות השירותים הווטרינריים. המתת חסד עם מנה (IV) תוך ורידי של סודיום פנטוברביטל העולה על 390 מ"ג/ק"ג.</li>
	<li>לאחר יש כבר מורדמים הארנב, להתחיל לקצור את הגידול על-ידי הסרת הרקמה עורית ו התת-עורית המכסים גולה הגידול באמצעות אזמל עם להב משנה גודל החוקר שיראה לנכון. ראה איור 2.</li>
	<li>לאחר הגידול גולה זוהתה בתוך השריר הגפיים האחוריות, להסיר את הגידול en bloc באמצעות לאכסדרות רחב שוליים. בשביל זה, לחתוך את הנקודות המצורף tendinous בקצות לקרע, של השריר ולאחר מכן מעקב הלהב האזמל לאורך העצם שמתחת. קטיעות הדגימה explanted לחשוף את הגידול הקפסולה ואת ליבה נמק. ראו איור 3. הערה: הגידול VX2 יש גרעין מאוד נמק. הקפד להשתמש עיניים נאות הגנה אחרים ציוד מגן אישי בעת הקטיף הגידול, מאז כל נזק הקפסולה הגידול יכול לגרום הוצאה בלחץ גבוה של פסולת נמק.</li>
	<li>לגרד בעדינות את ליבת נמק עם חפץ קהה (למשל מלקחיים, ועוצרי דימום) כדי לנקות את הגידול. זה אמור לאפשר כאחראית של הקפסולה הגידול, נקודת המעבר בין כמוסה שריר שמסביב. ראה איור 4.</li>
	<li>מאת הדוגמא, הקציר כמה חתיכות של גידול בערך 1\u20122 מ מ3 מיד לאחסן אותם בתוך כוס המכילה מלח סטרילית בטמפרטורת החדר. הערה: דגימות הגידול אלה ישמש להשתלה intrahepatic עוקבות.</li>
	<li>מקום הגידול שנותרו בצלחת פטרי סטריליות, רוחצים את זה עם בינוני (DMEM ששינה הנשר Dulbecco). אם שכזו נשמרת קר על קרח, זה יכול להישמר לטיפול עד 2\u20123 h מאוחר יותר.</li>
</ol>3. גידול בכבד ההשתלה באמצעות פתיחת בטן
<ol><li>להכין את הארנב הנמען פתיחת בטן. עזים ומתנגד הארנב נמען באמצעות 45 מ"ג/ק"ג קטמין ו- 5 מ"ג/ק"ג חריגות השירותים הווטרינריים עבור אינדוקציה ואחריו צנרור ותחזוקה עם 1% - 3% איזופלוריין כפי הצורך. כאשר הארנב הוא מורדם, לגלח את האתר כירורגית בעזרת קוצץ שיער. לנקות את אזור החתך באמצעות שטיפת triplicate עם betadine לשפשף, 70% אתנול פתרון, והפתרון betadine, לעטוף את הבטן בצורה סטרילית כירורגי.</li>
	<li>באמצעות #15-להב, ליזום את פתיחת בטן על ידי ביצוע חתך קטן קו האמצע האנכי דרך עורו של הארנב החל הסרעפת. זה צריך להיות palpated בקלות, נוטה להיות בערך בגודל של פני אמריקאי. ראה איור 5.</li>
	<li>לשקף את העור ולזהות לינאה אלבה. זה צריך להיות להקה לבנה רעיוני של רקמות שנסע נלסון האמצע. השתמש עמום כדי לחצות לינאה אלבה ולחשוף את הצפק. ראה איור 6. הערה: הצפק מזוהה בקלות מאז זה להיות ישירות המכסים המעי הגס, אשר ניתן לראות לנוע עם נשימה. התראה: הצפק נוטה להיות חסיד אל המעי כבסיס עקב מתח. באמצעות פגיעת לנתח לינאה אלבה מסייעת להפיג את הסיכון של ניקוב המעי הגס המשמש כבסיס.</li>
	<li>ברגע הצפק חשוף, לנתח בזהירות דרך כניסה חלל הצפק. עכשיו ניתן לזהות את הכבד. כדי לנווט טוב יותר את חלל הבטן, להרחיב את קו האמצע החתך 1\u20122 ס מ נלסון דרך העור, השרירים, הצפק. הערה: הרחבת קו האמצע החתך יכול בקלות ובבטחה להיעשות על-ידי הוספת בקפידה עוצר דימום מעוקל לחלל הצפק עם קצה מעוגל הפונה באופן שטחי לכיוון הצפק. לאחר מכן לפתוח את עוצר דימום מעט, להשתמש בלהב חמודות הרקמה בין שתי הזרועות עוצר דימום.</li>
	<li>לזהות האונה השמאלית של הכבד על מנת לבחור אתר להשתלה הגידול. האונה השמאלית היא infero-לרוחב כדי האונה המדיאלי אשר יושב האמצע.</li>
	<li>לפני מנסים לצייר את הכבד את כל המקום הצפק, למקם פיסת יבשה גאזה ההיבט נחות של החתך. הערה: הגזה תספק של משטח חסיד להניח את הכבד על בניסיון למנוע את היציבה בחזרה לתוך הבטן.</li>
	<li>באמצעות מלקחיים atraumatic או פיסת גזה רטוב על האצבעות, בזהירות לצייר האונה השמאלית של הכבד מתוך הבטן דרך החתך, תניח על הגזה יבש להציב קודם לכן. ראה איור 7. התראה: הקפסולה הכבד הוא רגיש והוא יכול בקלות קרע. זה חיוני כדי להיות עדין בעת טיפול איבר זה כדי למנוע דימום דרכים, שטפי דם בכבד, ו/או hemoperitoneum בסופו של דבר. הערה: בדרך כלל, הכבד יצהיר עצמה מבחינה ויזואלית עם כניסתו של חלל הצפק; עם זאת, אם בטן הארנב נפוחה, הכבד יכול להיות דחף cranially למראית עין. אם זה המקרה, הרם בעדינות לקיר הבטן באמצעות בדיקה בוטה. בתרחיש זה, הכבד נוטה לדבוק ההיבט הגחון של הסרעפת עקב מתח נפרד בקפידה רבה את הכבד באמצעות בדיקה בוטה, זה צריך לנתק. Atraumatic מלקחיים להשתמש כדי למשוך את הכבד.</li>
	<li>בשלב זה, להכין את רקמת הגידול השרשה ומניחים פיסת גזה רטוב על הכבד כדי להגן עליו.</li>
	<li>בחר קטע3 מ"מ 1\u20122 של רקמת הגידול שנוצר במהלך שלב 2.6 להשתלה לתוך הכבד. ראה איור 8.</li>
	<li>באמצעות #11-להב, לנקב רקמת הכבד בזווית של 45 מעלות ביצוע כיס עמוק 0.5 ס מ, מטפל לא לחדור את ההיבט הגבי של הקפסולה בכבד. להשאיר את הלהב במקום לאחר ביצוע הניקוב. ראה איור 9.</li>
	<li>הרם בעדינות את הלהב כיוון הגחון כדי ליצור כיס קטן במיטה בכבד. תירה את הגידול באמצעות מלקחיים, למקם את החתיכה הגידול בכיס, ואז מוציא את הסכין. הערה: ניתן להסיר את הלהב לפני הוספת היצירה הגידול, אולם, הכבד ידמם, זה ניתן להסתיר את החדירה ולכן קשה לזהות. התראה: הקפד למזער מגע של הגידול עם כל מבנה אחר כדי למנוע גידול לא מכוונת זריעה. זה יכול להמנע גם על-ידי הגדרת הצידה כל הכלים המשמשים כדי לסייע עם ההשתלה לאחר מכן.</li>
	<li>בשלב זה, מניחים חתיכת סוכן hemostatic, כגון ג'ל קצף מעל הכיס הגידול כדי לקדם את hemostasis וכדי למנוע הוצאה של היצירה הגידול.</li>
	<li>להחזיר הכבד אל הבטן, וברגע hemostasis הוא אישר.</li>
	<li>קרוב לקיר הבטן עם 3-0 polydioxanone תפר על מחט להתחדד באמצעות פשוטה רציפה לתפור ולסגור את העור עם התפרים 910 polyglactin 4-0 על מחט חיתוך באמצעות תפר רציף subcuticular. התראה: בעת סגירת לקיר הבטן, תדאג שלא יגרמו נזק את omentum או מבנים אחרים המעי זריקה תפר. הערה: בזמן הגידול הזה ייקח לפחות 2 שבועות להיות באופן מוחלט radiographically המאפשר זיהוי, זה מגיע בגודל של 1.5\u20122 ס מ קוטר אחת ב 3 שבועות של צמיחה. יש להיזהר לא לאפשר את הגידול הכבד לגדול מעבר 3.5\u20124 שבועות מאז הגידול יהוו exophytic של המוני ובתקיפות התפשטות מקומית.</li>
</ol>4. VX2 הגידול ההשעיה הכנה
<ol><li>מניחים מסננת מיקרומטר 40 לתוך הפה של שפופרת 50-mL פרופילן חרוט. באמצעות הגידול מהשלב 2.7, השתמש #15-להב לגרד את פני השטח של הגידול כדי לאסוף את הגידול קיימא ומניחים את שערות אלו לתוך מסננת.</li>
	<li>לשטוף את הגידול קיימא מהציפורניים שלו כדי למצוא דרך מסננת באמצעות DMEM, ואז centrifuge את הצינור פרופילן ב 1600 סיבובים במשך 8 דקות.</li>
	<li>בתום לצנטריפוגה, להסיר את תגובת שיקוע וזורקים אותו. לאחר מכן להוסיף methylcellulose לבלוק התאים הנותרים ביחס נפח של 1:1.</li>
	<li>להזריק ההשעייה לתוך ארנב תורם האיבר הינד בעקבות צעדים 1.3\u20121.4. למקם את המתלים הנותרים 1 מ"ל aliquots צינורות קריוגני ולהקפיא אותן בחנקן נוזלי לשימוש מאוחר יותר.</li>
</ol>5. angiographic ניצול VX2 גידול בכבד
<ol><li>הכינו את הארנב כפי שמתואר בשלב 3.1.</li>
	<li>ימשש את הקצב הירך במפשעה. כאשר החריץ זוהתה, עושים 2\u20123 ס מ ליניארי חתך לאורך החריץ. ראה איור 10.</li>
	<li>באמצעות עמום, אתר ולחץ לבודד את הצרור הירך המכיל את עורק הירך עורק, עצב. ראה איור 11.</li>
	<li>שוב, השתמש עמום כדי להפריד בין עורק הירך לבין שאר מבני הצרור ולבודד את העורק על גבי ידית ומהדקים. ראה איור 12.</li>
	<li>בעזרת ערכת introducer 3-צרפתית, לנצל את הטכניקה Seldinger כדי לקבל גישה עם מחט. הוספת guidewire ולהסיר את המחט כדי להתקדם מהנרתיק 3-צרפתית לתוך הכלי. ראה איור 13. זהירות: הימנעו משימוש בכוח מופרז בקידום נדן 3-צרפתית, התוצאה יכולה להיות חיתוך של עורק הירך.</li>
	<li>תחת fluoroscopic והכוונה באמצעות קטטר, guidewire, iohexol חדות הסוכן, בחר עבור המטען צליאק – בדרך כלל ממוקם ברמת טי12 — ואז לקדם הקטטר לתוך עורק הכבד השמאלי דרך המשותף הכבד ונכון הכבד.</li>
	<li>בשלב זה, לנהל את הסוכן של בחירה דרך הקטטר. פעם הסוכן מנוהלת, להסיר את הצנתר.</li>
	<li>באמצעות תפרים משי 3-0, מאתרים ומפסיקים את עורק הירך הציר הקרוב, יש את נקודת הכניסה של נדן. יש להקפיד להדק את הקשר proximal כדי נדן כפי זה נסוגה כדי למנוע דימום.</li>
	<li>סגירת החתך במפשעה עם התפרים 910 polyglactin 4-0 על מחט חיתוך באמצעות תפר subcuticular.</li>
	<li>לשמור על תקן שלאחר הניתוח צג והטיפול בבעלי חיים שחזור. קס, necropsy לפי הצורך באמצעות טכניקות סטנדרטי.</li>
</ol>

<ol><li>Rous, P., Beard, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Progression+To+Carcinoma+of+Virus-Induced+Rabbit+Papillomas+%28Shope%29%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">The Progression To Carcinoma of Virus-Induced Rabbit Papillomas (Shope).</a> The Journal of Experimental Medicine. 62 (4), 523-548 (1935).</li>
<li>Kidd, J. G., Rous, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+transplantable+rabbit+carcinoma+originating+in+a+virus-induced+papilloma+and+containing+the+virus+in+masked+or+altered+form%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">A transplantable rabbit carcinoma originating in a virus-induced papilloma and containing the virus in masked or altered form.</a> The Journal of Experimental Medicine. 71 (6), 813-838 (1940).</li>
<li>Galasko, C. S. B., Muckle, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrasarcolemmal+proliferation+of+the+vx2+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Cancer%22%5BJournal%5D)">Intrasarcolemmal proliferation of the vx2 carcinoma.</a> British Journal of Cancer. 29 (1), 59-65 (1974).</li>
<li>Maruyama, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sonographic+shift+of+hypervascular+liver+tumor+on+blood+pool+harmonic+images+with+definity%3A+Time-related+changes+of+contrast-enhanced+appearance+in+rabbit+VX2+tumor+under+extra-low+acoustic+power%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Radiology%22%5BJournal%5D)">Sonographic shift of hypervascular liver tumor on blood pool harmonic images with definity: Time-related changes of contrast-enhanced appearance in rabbit VX2 tumor under extra-low acoustic power.</a> European Journal of Radiology. 56 (1), 60-65 (2005).</li>
<li>Horkan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiofrequency+Ablation%3A+Effect+of+Pharmacologic+Modulation+of+Hepatic+and+Renal+Blood+Flow+on+Coagulation+Diameter+in+a+VX2+Tumor+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+and+Interventional+Radiology%22%5BJournal%5D)">Radiofrequency Ablation: Effect of Pharmacologic Modulation of Hepatic and Renal Blood Flow on Coagulation Diameter in a VX2 Tumor Model.</a> Journal of Vascular and Interventional Radiology. 15 (3), 269-274 (2004).</li>
<li>Bimonte, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+VX2+para-renal+carcinoma+in+rabbits%3A+generation+of+animal+model+for+loco-regional+treatments+of+solid+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Infectious+Agents+and+Cancer%22%5BJournal%5D)">Induction of VX2 para-renal carcinoma in rabbits: generation of animal model for loco-regional treatments of solid tumors.</a> Infectious Agents and Cancer. 11 (1), 1-8 (2016).</li>
<li>Goldberg, S. N., Gazelle, G. S., Compton, C. C., Mueller, P. R., McLoud, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radio-frequency+tissue+ablation+of+VX2+tumor+nodules+in+the+rabbit+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Academic+Radiology%22%5BJournal%5D)">Radio-frequency tissue ablation of VX2 tumor nodules in the rabbit lung.</a> Academic Radiology. 3 (11), 929-935 (1996).</li>
<li>Rhee, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rabbit+VX2+Tumors+as+an+Animal+Model+of+Uterine+Fibroids+and+for+Uterine+Artery+Embolization%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+and+Interventional+Radiology%22%5BJournal%5D)">Rabbit VX2 Tumors as an Animal Model of Uterine Fibroids and for Uterine Artery Embolization.</a> Journal of Vascular and Interventional Radiology. 18 (3), 411-418 (2007).</li>
<li>Parvinian, A., Casadaban, L. C., Gaba, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development%2C+growth%2C+propagation%2C+and+angiographic+utilization+of+the+rabbit+VX2+model+of+liver+cancer%3A+A+pictorial+primer+and+%26%2334%3Bhow+to%26%2334%3B+guide%5BTitle%5D)+AND+%22Diagnostic+and+Interventional+Radiology%22%5BJournal%5D)">Development, growth, propagation, and angiographic utilization of the rabbit VX2 model of liver cancer: A pictorial primer and &#34;how to&#34; guide.</a> Diagnostic and Interventional Radiology. 20 (4), 335-340 (2014).</li>
<li>Xia, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intra-arterial+interleukin-12+gene+delivery+combined+with+chemoembolization%3A+Anti-tumor+effect+in+a+rabbit+hepatocellular+carcinoma+%28HCC%29+model%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Radiologica%22%5BJournal%5D)">Intra-arterial interleukin-12 gene delivery combined with chemoembolization: Anti-tumor effect in a rabbit hepatocellular carcinoma (HCC) model.</a> Acta Radiologica. 54 (6), 684-689 (2013).</li>
<li>Gaba, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethiodized+oil+uptake+does+not+predict+doxorubicin+drug+delivery+after+chemoembolization+in+VX2+liver+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+and+Interventional+Radiology%22%5BJournal%5D)">Ethiodized oil uptake does not predict doxorubicin drug delivery after chemoembolization in VX2 liver tumors.</a> Journal of Vascular and Interventional Radiology. 23 (2), 265-273 (2012).</li>
<li>Choi, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+Intraarterial+Therapy+for+Liver+Cancer+Using+Ethylbromopyruvate+Dissolved+in+an+Iodized+Oil%5BTitle%5D)+AND+%22Academic+Radiology%22%5BJournal%5D)">Novel Intraarterial Therapy for Liver Cancer Using Ethylbromopyruvate Dissolved in an Iodized Oil.</a> Academic Radiology. 18 (4), 471-478 (2011).</li>
<li>Ma, H. L., Xu, Y. F., Qi, X. R., Maitani, Y., Nagai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Superparamagnetic+iron+oxide+nanoparticles+stabilized+by+alginate%3A+Pharmacokinetics%2C+tissue+distribution%2C+and+applications+in+detecting+liver+cancers%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Superparamagnetic iron oxide nanoparticles stabilized by alginate: Pharmacokinetics, tissue distribution, and applications in detecting liver cancers.</a> International Journal of Pharmaceutics. 354 (1-2), 217-226 (2008).</li>
<li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+tumors%3A+Monitoring+embolization+in+rabbits+with+VX2+tumors+-Transcatheter+intraarterial+first-pass+perfusion+MR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Liver tumors: Monitoring embolization in rabbits with VX2 tumors -Transcatheter intraarterial first-pass perfusion MR imaging.</a> Radiology. 245 (1), 130-139 (2007).</li>
<li>Bimonte, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radio-frequency+ablation-based+studies+on+VX2rabbit+models+for+HCC+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Infectious+Agents+and+Cancer%22%5BJournal%5D)">Radio-frequency ablation-based studies on VX2rabbit models for HCC treatment.</a> Infectious Agents and Cancer. 11 (1), (2016).</li>
<li>Gaba, R., Obeid, M., Khabbaz, R., Garcia, K., Schachtschneider, K. <a target="_blank" href="https://americanjir.com/published-articles/2/2/AJIR-11-2017.pdf">Translational Animal Models for Liver Cancer.</a> American Journal of Interventional Radiology. 2 (2), 1-8 (2018).</li>
<li>Kuszyk, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+tumor+recurrence+following+hepatic+cryoablation%3A+radiologic-histopathologic+correlation+in+a+rabbit+model%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Local tumor recurrence following hepatic cryoablation: radiologic-histopathologic correlation in a rabbit model.</a> Radiology. 217 (2), 477-486 (2000).</li>
<li>Geschwind, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemoembolization+of+Liver+Tumor+in+a+Rabbit+Model+Assessment+of+Tumor+Cell+Death+with+Diffusion-Weighted+MR+Imaging+and+Histologic+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+and+Interventional+Radiology%22%5BJournal%5D)">Chemoembolization of Liver Tumor in a Rabbit Model Assessment of Tumor Cell Death with Diffusion-Weighted MR Imaging and Histologic Analysis.</a> Journal of Vascular and Interventional Radiology. 11 (10), 1245-1255 (2000).</li>
<li>Virmani, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+Two+Different+Methods+for+Inoculating+VX2+Tumors+in+Rabbit+Livers+and+Hind+Limbs%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+and+Interventional+Radiology%22%5BJournal%5D)">Comparison of Two Different Methods for Inoculating VX2 Tumors in Rabbit Livers and Hind Limbs.</a> Journal of Vascular and Interventional Radiology. 19 (6), 931-936 (2008).</li>
<li>Seldinger, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Catheter+replacement+of+the+needle+in+percutaneous+arteriography%3A+A+new+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Radiologica%22%5BJournal%5D)">Catheter replacement of the needle in percutaneous arteriography: A new technique.</a> Acta Radiologica. 49 (SUPPL 434), 47-52 (2008).</li>
<li>Schook, L. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+genetic+porcine+model+of+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A genetic porcine model of cancer.</a> PLoS One. 10 (7), e0128864(2015).</li>
</ol>

העבודה המתוארים בדו ח זה נתמך על ידי מענק מחקר של Guerbet LLC.

השלב הקריטי הראשון המתודולוגיה הגידול VX2 היא הפצת מוצלחת של הגידול בתוך האיבר האחוריות של ארנבת התורם. עיין בפסקה הראשונה בסעיף "נציג תוצאות" לקבלת מידע נוסף על שלב זה.
השלב הקריטי הבא זה להבטיח כי הקפסולה הגידול קיימא מזוהים כהלכה. לא רק זה יהיה צורך להכנה ההשעיה הגידול, אלא חשוב גם לבחירה ולהעברה של יצירת גידול חתיכות להשתלה הכבד. להבחנה בין הגידול קיימא שנשאר מסומן באיור4. אם דגימת הרקמות שגוי הוא שרט במהלך השעיה הכנה, הפצת הגפיים האחוריות עוקבות ייכשל. אם הדב...

הדגם גידול ארנב VX2 שיחק תפקיד באונקולוגיה ניסיוני מאז הפיתוח ב- 19351,2. הגידול הזה הוא וירוס-induced אנפלסטית קרצינומה של תאים קשקשיים המאופיינת hypervascularity, צמיחה מהירה, קלה הפצת שרירי השלד3,4. ואילו הדגם גידול ארנב VX2 שימש לחקור מספר רב של סוגי סרטן5,6,7,8; המוקד של מאמר זה היא סרטן הכבד9.
מטרת השיטה המתוארת היא להציג מודל עבור סרטן כבד ראשוני, או קרצינומה hepatocellular (HCC), זה יכול להיות בשימוש על ידי רדיולוגים התערבותית המחקר translational. זה יכול לשמש עבור מחקרים פרמוקוקינטיים, חקירות טיפולית, ושיטת פולשני בדיקות10,11,12,13,14,15.
השיטה מפורט בזאת מניבה מספר יתרונות על פני דגמים אחרים בתוך מעגל אותו כגון מודלים מכרסמים כמו חולדות, עכברים, סנאים, או דגמים גדולים כמו יונקים16. אחד היתרונות העיקריים הוא צמיחת הגידול מהירה ואמינה אשר מאפשר לחוקרים לקבוע קו פעיל הגידול תוך חודש של הגפיים האחוריות הראשון הפצת17. בנוסף, הגידול הזה יש ראות sonographic פשוטה של הפריפריה hypervascular אשר מאפשר טיפולים locoregional transarterial וגם טיפולים פולשני. לבסוף, והכי חשוב, בגודל של להערכת הארנב מאפשרת ניצול ריאלי וקל טכנית של כלי דם ומכשור18.

<table><tbody><tr><td>MethoCult (Methycellulose)</td><td>Stemcell Technologies</td><td>M3134</td><td></td></tr><tr><td>VX2 קו תאים</td><td>NCI</td><td>VX-2</td><td></td></tr><tr><td>5 מ"ל מזרק</td><td>BD</td><td>309646</td><td></td></tr><tr><td>16 גרם מחט</td><td>BD</td><td>305197</td><td></td></tr><tr><td>22 גרם מחט</td><td>BD</td><td>305155</td><td></td></tr><tr><td>קוצץ שיער</td><td>Wahl</td><td>41870-0438</td><td></td></tr><tr><td>קצף קופסה מבודדת</td><td>Mr. Box Online</td><td>10 x 10 x 4</td><td></td></tr><tr><td>אצפרומזין</td><td>הנרי שיין</td><td>003845</td><td></td></tr><tr><td>בופרנורפין</td><td>פאר</td><td>42023-179-05</td><td></td></tr><tr><td>מלוקסיקם</td><td>הנרי שיין</td><td>049755</td><td></td></tr><tr><td>רפידות אלכוהול</td><td>Covidien</td><td>5033</td><td></td></tr><tr><td>קטמין</td><td>הנרי שיין</td><td>056344</td><td></td></tr><tr><td>קסילזין</td><td>Akorn</td><td>59399-110-20</td><td></td></tr><tr><td>פנטוברביטל (קטלני-פלוס)</td><td>Vortech</td><td>9373</td><td></td></tr><tr><td>צלחת פטרי סטרילית</td><td>תרמו פישר</td><td>172931</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Gibco</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>מלח</td><td>בקסטר</td><td>2F7124</td><td></td></tr><tr><td>סטריס 15 להבים</td><td></td><td>02-050-015</td><td></td></tr><tr><td>ידית אזמל x 2</td><td>סטריס</td><td>22-2381</td><td></td></tr><tr><td>המוסטט מעוקל</td><td>WPI</td><td>501288</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים אטראומטיים</td><td>סקלאר</td><td>52-5077</td><td></td></tr><tr><td>גזה</td><td>מדליין</td><td>NON21430LF</td><td></td></tr><tr><td>סטריס 11 להבים</td><td></td><td>02-050-011</td><td></td></tr><tr><td>Surgicel</td><td>Ethicon</td><td>1951</td><td></td></tr><tr><td>3-0 PDS / Taper</td><td>Ethicon</td><td>Z305H</td><td></td></tr><tr><td>4 - 0 ויקריל / חיתוך</td><td>אתיקון</td><td>J392H</td><td></td></tr><tr><td>40 &mu; m מסננת</td><td>BD</td><td>352340</td><td></td></tr><tr><td>50 מ"ל צינור חרוטי</td><td>תרמו פישר</td><td>339652</td><td></td></tr><tr><td>פיפטה מפלסטיק</td><td>תומאס סיינטיפיק</td><td>HS206371B</td><td></td></tr><tr><td>צנטריפוגה</td><td>סורוול</td><td>75004240</td><td></td></tr><tr><td>1.40 מ"ל צינורות (חוט פנימי)</td> <td>Micronic</td><td>MP32131-Z20</td><td></td></tr><tr><td>3-F VSI מיקרו-HV מבוא ערכת</td> פתרונות <td>כלי</td> <td>דםהזמנה מותאמת אישית (P15180391)</td><td></td></tr><tr><td>.018 45&deg; חוט גלישה זווית</td><td>Terumo</td><td>RG*GA1818SA</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו-צנתר בצורת ברן דירקסיון</td><td>בוסטון סיינטיפיק</td><td>M001195230</td><td></td></tr><tr><td>Omnipaque</td><td>GE</td><td>Y510</td><td></td></tr></tbody></table>

פיתוח ושימוש angiographic של המודל vx2 הארנב של סרטן הכבד

Development and Angiographic Use of the Rabbit VX2 Model for Liver Cancer

הגידול VX2 הארנב הוא במודל חיה בדרך כלל מנוצל עבור המחקר translational לגבי קרצינומה hepatocellular (HCC) בשטח לרדיולוגיה התערבותית. מודל זה מעסיקה של אנפלסטית קרצינומה של תאים קשקשיים זה בקלות ובאמינות הופץ בשריר השלד ארנבים תורם בסופו של דבר הקציר, להשתלת השרשת לתוך הכבד תמים נמענים. שתל זה הגידול גדל במהירות בתוך הכבד של ארנבים הנמען לתוך גידול angiographically לזיהוי מאופיין על ידי גרעין נמק מוקף קפסולה hypervascular קיימא. הגודל הפיזי של האנטומיה ארנב מספיקה להקל על כלי הדם מכשור המאפשר היישום ובדיקה של טכניקות שונות התערבותית. למרות יתרונות אלו, קיימת במחסור של משאבים טכניים לפעול כהפניה בטון לחוקרים לעבוד עם המודל. במסמך זה, אנו מציגים קו מיתאר חזותי מקיף על ההיבטים הטכניים של התפתחות, צמיחה, הפצת ניצול angiographic של המודל גידול ארנב VX2 לשימוש על ידי טירון וחוקרים מנוסים כאחד.

כאשר מסתכלים על איור 1, ברור כי quadricep של הארנב הוא מוגדל. בנוסף, מספר גושים דיסקרטית קטן, בדרך כלל מתאם עם הגידול דרך fascia, גלויים. בעת מישוש, האיבר מוזרק אמור להופיע יותר האיבר שאינם המוזרק. אם חוקר דורשת אבטחת מוחלטים יותר נוכחות הגידול, אולטראסאונד הדמיה ניתן לזהות את הגידול בתוך השריר. אם הגידול לא מזוהה, האיבר הינד צריך להיות מחדש הזריק עם השעיה תאים סרטניים.
על מנת לאשר גישה שהצליחו כלי ...

מטרת מאמר זה היא לספק פריימר עבור פיתוח והשתמש בדגם ארנב קרצינומה VX2 של סרטן הכבד.

פיתוח ושימוש Angiographic של המודל VX2 הארנב של סרטן הכבד

The rabbit VX2 tumor is an animal model commonly utilized for translational research regarding hepatocellular carcinoma (HCC) in the field of ...

מודל גידול כבד פרה-קליני זה יכול לעזור לענות על שאלות מפתח על טיפול אזורי מקומי בתחומי רדיולוגיה התערבותית ואונקולוגיה התערבותית. היתרון העיקרי של טכניקה זו, הוא שזה גורם אינדוקציה גידול אמין על ידי השתלת allograft אורתוטופית. ליישום הגידול, ראשית לאשר חוסר תגובה רפלקס הדוושה.לאחר אישור, נושא החיה ממוקם תחת הרדמה. רמה מתאימה של הרדמה מאושרת, והבטן מוכנה ועטופה בסטריליות. לאחר הרדמה, השתמש בלהב מספר 15 כדי ליצור חתך עור אנכי של 3 עד 4 ס"מ החל מתהליך xiphoid.לסגת את העור כדי לזהות את לינאה אלבה, רצועה לבנה רפלקטיבית של רקמה שנוסעת בצורה נחותה לאורך קו האמצע. ולהשתמש הן ניתוח בוטה וחד לחצות את לינאה אלבה, חשיפת peritoneum, דואג לא לניקוב רקמת המעי הבסיסית. בזהירות לנתח דרך רקמת חלל הבטן, כדי לאתר את הכבד, באמצעות haemostat כדי להאריך את החתך קו האמצע אחד עד שני ס"מ נחות דרך העור, השריר ואת peritoneum לפי הצורך.זהה את האונה השמאלית, שהיא תותבת לאונה המדיאלית היושבת בקו האמצע. ומ מניחים חתיכה יבשה של גזה בהיבט הנחות של החתך כדי למנוע מהכבד לסגת בחזרה לתוך הבטן. מניחים חתיכה חדשה של גזה רטובה על הכבד המופק.בחר חתיכת רקמת גידול של מילימטר מעוקב אחד עד שניים, עם מדפים. ולהשתמש בלהב מספר 11 כדי לנקב את רקמת הכבד בזווית של 45 מעלות לכיס עמוק של 0.5 ס"מ, תוך כדי דאגה לא לחדור את ההיבט הגבי של קפסולת הכבד. הרם בעדינות את הלהב במאוורר כדי ליצור כיס קטן במיטת הכבד, והכנס את הגידול לכיס.מניחים חתיכת סוכן haemostatic על כיס הגידול כדי לקדם את haemostasis, ולמנוע פליטה של חתיכת הגידול. וגם, לאחר אישור haemostasis, להחזיר את הכבד לחלל הבטן. לאחר מכן השתמש בתפר פולידיוקסנון של שלושה אפסים על מחט מתחדדת, בתפר מתמשך פשוט כדי לסגור את דופן הבטן.וארבעה אפס תפרים פוליגלקטין 910 על מחט חיתוך בתפר רציף, תת-cuticular כדי לסגור את העור. כדי לאשר מיקום גידול מוצלח, יש למשש את חריץ הירך במפשעה, ולעשות חתך ליניארי של שניים עד שלושה סנטימטרים לאורך החריץ. באמצעות ניתוח קהה, לאתר ולבודד את צרור הירך המכיל את וריד הירך, העורק והעצב, ולהשתמש ניתוח קהה להפריד את עורק הירך משאר המבנים בחבילה.לבודד את העורק על גבי ידית אזמל, ולהשתמש בטכניקת סלדינגר, ערכת מבוא שלוש צרפתית כדי להכניס מחט לתוך הכלי. הכנס חוט מדריך לתוך העורק. ולהסיר את המחט, כדי לקדם בזהירות את שלושת נדן צרפתי לתוך הכלי.הסר את המייצב ואת חוט המדריך מן הנדן כדי להשלים את הגישה כלי הדם. תחת הדרכה פלואורוסקופית, הכנס את הקטטר לתא המטען של הצליאק ברמת T 12, וקדם את הקטטר לתוך עורק הלחץ השמאלי, דרך הלחץ המשותף, ועורקי הלחץ הנכונים. כאשר הקטטר מגיע לעורק כבד השמאלי, להזריק סוכן ניגודיות כדי לאשר את נוכחותו של גידול hypervascular, אשר לאחר מכן ניתן לטפל עם טיפול תוך עורקי של בחירה.ולהסיר את הקטטר. באמצעות שלושה תפר משי אפס, לקשור את עורק הירך proximally ו distally לנקודת הכניסה של הנין, דואג להדק את הקשר proximal לנדן, כפי שהוא נסוג כדי למנוע דימום. לאחר מכן השתמש בארבעה תפרים פוליגלקטין 910 אפס, על מחט חיתוך בתפר תת עורי כדי לסגור את החתך במפשעה.שלושה עד ארבעה שבועות לאחר ההשתלה, ניתן לדמיין את הגידול באופן מקרוסקופי בשריר הארבע ראשי השמאלי של הארנב. השימוש באנגיוגרפיה והזרקה של סוכן ניגוד כפי שהוכח, ניתן להשתמש כדי לאשר התפשטות גידול מוצלחת לאחר המיקום. על necropsy, גידול מושתל בהצלחה צריך להיות גלוי בקלות.מאז התפתחותה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחומי רדיולוגיה התערבותית ואונקולוגיה התערבותית לחקור טיפול אזורי מקומי בגידול בכבד במודל קטן של בעלי חיים.

development-angiographic-use-rabbit-vx2-model-for-liver

Research

JoVE Journal

Cancer Research

מחקר סרטן

סרטון זה מדגים את הדור של מודל ארנב של סרטן רירית הרחם על ידי הזרקת תרחיף תאי VX2 גרורתי מאוד לתוך קרני הרחם התפורים של הארנב. זה מוביל לדור של סרטן רירית הרחם הראשוני עם גרורות בלוטות הלימפה retroperitoneal.

דוגמנות מודל סרטן רירית הרחם גרורתי: טכניקה ליצירת סרטן רירית הרחם עם גרורות בלוטות הלימפה במודלים ארנב

בסרטון זה, אנו מדגימים השתלה כירורגית של רקמת גידול בכבד ארנב כדי לגרום לקרצינומה הפטוצלולרית. ההליך מסייע לבסס מודל אמין של בעלי חיים לחקר התנהגות הגידול ופיתוח טיפולים לוקואזוריים המכוונים לסרטן הכבד.

יצירת מודל קרצינומה של כבד ארנבת: הליך כירורגי להשתלת רקמת גידול באונה השמאלית של הכבד להשראת קרצינומה הפטוצלולרית

בסרטון זה, אנו מדגימים הליך שלב אחר שלב לביצוע אנגיוגרפיה בכבד באמצעות פלואורוסקופ המאפשר הדמיה בזמן אמת של כלי דם הקשורים לגידול בכבד במודל ארנב.

אנגיוגרפיה בכבד: הליך לדמיין כלי גידול בכבד במודל ארנב

סרטון זה מתאר את הטכניקה לביצוע אנגיוגרפיה על ידי הזרקת חומר ניגוד לאבי העורקים היורד כדי לדמיין זילוח כלי דם במודל ארנב. טכניקה זו מסייעת להבין את הזלוף בכלי הדם עם חסימות ולאחר הטיפול במהלך ההתאוששות.

הערכת זילוח כלי דם באמצעות אנגיוגרפיה: טכניקה להחדרת סוכן ניגוד באבי העורקים היורד כדי לדמיין זילוח כלי דם במודל ארנב

וירותרפיה אונקוליטית נמצאת בפיתוח כתרופות חדשניות לטיפול בקרצינומה של הכבד (HCC).  כאן אנו מתארים שיטה לטיפול מקומי ב-HCC באמצעות מתן עורקי כבד של נגיף אונקוליטי.

Transarterial מינהל oncolytic וירוסים לטיפול Locoregional של Orthotopic HCC אצל חולדות

פרוטוקול זה מציג שיטה סטנדרטית לגדל תאים VX2 בתרבות וכלה ליצור מודל אורתוטופית VX2 של סרטן רירית הרחם עם הלימפה הצפק הצומת גרורות בארנבים. אורתובנושא מודלים סרטן רירית הרחם חשובים למחקר טרום קליני של הדמיה הרומן שיטות לאבחון של הלימפה הצומת גרורות.

מודל הסרטן רירית הרחם אורתוטופית עם לימפדנופתיה הצפק מתוצרת ב Vivo מופץ ומתורבת VX2 תאים

אנו מציגים פרוטוקול כדי להעריך ביעילות את הפרזיה ומפרצת של כלי הקיבול של מפרצת sidewall בחולדות וארנבים, באמצעות fluorescein מבוססי וידאו אנגיוגרפיה וידיאו (FVA). עם ערך ניבוי חיובי של 92.6%, היא שיטה פשוטה אך יעילה מאוד וחסכונית ללא ציוד מיוחד נדרש.

אנגיוגרפיה פלואורסצנטית עבור הערכה של מפרצת Perfusion ועורק ההורה בתוך החולדה מפרצת הארנב במודלים

הזרקת וריד פורטל של אורגנואידים מסרטן המעי הגס (CRC) יוצרת גרורות כבד עשירות בסטרומה. מודל עכבר זה של גרורות כבד CRC מייצג כלי שימושי לחקר אינטראקציות בין גידול לסטרומה ולפיתוח טיפולים חדשניים המכוונים לסטרומה כגון טיפולים גנטיים בתיווך וירוסים הקשורים לאדנו.

הזרקת וריד פורטל של אורגנואידים לסרטן המעי הגס לחקר סטרומה גרורות בכבד

בפרוטוקול זה נדון ביישום מודל של השתלת כבד אורתוטופית מוצלחת (OLT) בעכברים. בנוסף, נדונים גם אדג'ובנטים לניתוח נוסף של פטנטיות אלוגרפט לאחר OLT מוצלח בעכבר, במיוחד באמצעות סריקות טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת (microCT).

השתלת כבד אורתוטופית מוצלחת בעכברים באמצעות טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת אנגיוגרפיה

פרוטוקול זה מציג הליך לעירוי מונחה תמונה למערכת עץ הצינור של בלוטת החלב של הארנב. אנו מדגימים עירוי מבוקר של תמיסה אבלטיבית מבוססת אתנול המכילה חומר ניגוד רנטגן לכל פתחי הפטמה על ידי הדמיה בזמן אמת של פלואורוסקופיה.

הדמיית רנטגן של עירוי אבלטיבי מבוסס אתנול תוך-צינורי למניעת סרטן השד במודלים של ארנבים

למדו את מודל ה-VX2 לארנב לחקר סרטן הכבד באמצעות השתלת אלוגרפט אורתוטופית. שיטה זו מאפשרת חקר טיפולים אזוריים מקומיים ברדיולוגיה פולשנית ואונקולוגיה.

פיתוח ושימוש Angiographic של המודל VX2 הארנב של סרטן הכבד

גלה סרטונים נוספים